RU2757964C1 - Method for predicting effective mobilisation of hematopoietic stem cells in patients with multiple myeloma - Google Patents
Method for predicting effective mobilisation of hematopoietic stem cells in patients with multiple myeloma Download PDFInfo
- Publication number
- RU2757964C1 RU2757964C1 RU2020133823A RU2020133823A RU2757964C1 RU 2757964 C1 RU2757964 C1 RU 2757964C1 RU 2020133823 A RU2020133823 A RU 2020133823A RU 2020133823 A RU2020133823 A RU 2020133823A RU 2757964 C1 RU2757964 C1 RU 2757964C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- patients
- multiple myeloma
- peripheral blood
- hscs
- mobilisation
- Prior art date
Links
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 21
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 19
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 4
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 claims abstract 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims abstract 2
- 210000003995 blood forming stem cell Anatomy 0.000 claims description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 10
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 10
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 7
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 102000009270 Tumour necrosis factor alpha Human genes 0.000 abstract 2
- 108050000101 Tumour necrosis factor alpha Proteins 0.000 abstract 2
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 4
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 4
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 4
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 4
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 4
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 4
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 4
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 4
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940047120 colony stimulating factors Drugs 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000009093 first-line therapy Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 230000019734 interleukin-12 production Effects 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Способ прогнозирования эффективной мобилизации гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) у пациентов с множественной миеломой, отличающийся тем, что устанавливается прогностически значимая концентрация цитокинов, секретируемых культурой мезенхимальных клеток стромы костного мозга, коррелирующая с выходом ГСК в периферическую кровь. Изобретение относится к области медицины и касается прогнозирования эффективной мобилизации ГСК.A method for predicting effective mobilization of hematopoietic stem cells (HSC) in patients with multiple myeloma, characterized in that a prognostically significant concentration of cytokines secreted by the culture of mesenchymal cells of the bone marrow stroma, which correlates with the release of HSC into the peripheral blood, is established. The invention relates to medicine and relates to predicting the effective mobilization of HSC.
Костный мозг - орган, в котором сосуществуют и функционально взаимодействуют друг с другом два различных типа клеток - гемопоэтические и мезенхимальные стромальные клетки. ГСК являются предшественниками всех форменных элементов периферической крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов и пр.). При этом в костном мозге гемопоэтические клетки-предшественники находятся в кроветворных нишах, сформированных из мезенхимальных стромальных клеток (МСК), поддерживающих функционирование ГСК. Костномозговая строма регулирует кроветворение как локально (в кроветворных нишах), так и дистанционно, продуцируя цитокины и ростовые факторы (интерлейкины 1, 4, 6, трансформирующий фактор роста β и т.д.).Bone marrow is an organ in which two different types of cells coexist and functionally interact with each other - hematopoietic and mesenchymal stromal cells. HSCs are the precursors of all formed elements of peripheral blood (erythrocytes, leukocytes, platelets, etc.). In this case, in the bone marrow, hematopoietic progenitor cells are located in hematopoietic niches formed from mesenchymal stromal cells (MSCs) that support the functioning of HSCs. The bone marrow stroma regulates hematopoiesis both locally (in the hematopoietic niches) and remotely, producing cytokines and growth factors (interleukins 1, 4, 6, transforming growth factor β, etc.).
Высокодозная химиотерапия с трансплантацией ГСК с успехом используется в лечении пациентов с заболеваниями системы крови. Для этих целей ГСК могут быть выделены из двух источников - костного мозга или периферической крови Выделение ГСК из периферической крови требует предварительной их мобилизации (стимуляции выхода из костномозговых ниш в кровеносное русло). В настоящее время остается ряд нерешенных вопросов, в частности, невозможность заготовки достаточного количества ГСК, отсутствие единого мнения об оптимальном способе мобилизации стволовых клеток перед проведением трансплантации у пациентов с онкогематологическими заболеваниями.High-dose chemotherapy with HSC transplantation is successfully used in the treatment of patients with diseases of the blood system. For these purposes, HSCs can be isolated from two sources - bone marrow or peripheral blood. Isolation of HSCs from peripheral blood requires their preliminary mobilization (stimulation of exit from the bone marrow niches into the bloodstream). Currently, a number of unresolved issues remain, in particular, the inability to procure a sufficient amount of HSCs, the lack of a consensus on the optimal way to mobilize stem cells before transplantation in patients with oncohematological diseases.
Известны два основных подхода к мобилизации стволовых клеток: введение пациенту гранулоцитарных колониестимулирующих факторов (Г-КСФ) в монорежиме, а также Г-КСФ в сочетании с химиотерапией. Препараты Г-КСФ с целью мобилизации ГСК используют, как правило, в дозах 10 мкг/кг веса пациента, подкожно, ежедневно, в течение 5 дней. Проведение аферезов ГСК начинают при числе CD34+ клеток более 0,01×106 в 1 мл периферической крови [1].There are two main approaches to stem cell mobilization: administration of granulocyte colony-stimulating factors (G-CSF) to the patient in mono-mode, and G-CSF in combination with chemotherapy. G-CSF preparations for the purpose of HSC mobilization are used, as a rule, in doses of 10 μg / kg of the patient's weight, subcutaneously, daily, for 5 days. HSC apheresis is started when the number of CD34 + cells is more than 0.01 × 10 6 in 1 ml of peripheral blood [1].
В качестве прототипов использованы работы О.В. Федык [1] и А.Ю. Попова [2], в которых в качестве прогностических факторов, ассоциированных с количеством заготовленных гемопоэтических предшественников, рассмотрены возраст пациентов - доноров аутологичных ГСК, вариант основного заболевания, количество предшествующих циклов химио- и лучевой терапии. Существенным недостатком прототипов является то, что не рассмотрены критерии, позволяющие еще до начала мобилизации ГСК прогнозировать их конечное содержание в периферической крови и трансплантационном материале.The works of O.V. Fedyk [1] and A.Yu. Popov [2], in which the age of patients - donors of autologous HSCs, the variant of the underlying disease, the number of previous cycles of chemotherapy and radiation therapy were considered as prognostic factors associated with the number of harvested hematopoietic precursors. A significant disadvantage of the prototypes is that the criteria that allow predicting their final content in peripheral blood and transplant material even before the start of HSC mobilization are not considered.
Изобретение направлено на решение проблемы прогнозирования количества мобилизованных в периферическую кровь ГСК в зависимости от функционального состояния стромы костного мозга доноров.The invention is aimed at solving the problem of predicting the number of HSCs mobilized into the peripheral blood depending on the functional state of the donor bone marrow stroma.
Изобретение обеспечивает повышение эффективности процесса заготовки ГСК за счет использования экспериментально установленных контрольных количественных параметров - содержания ряда цитокинов, продуцируемых МСК костного мозга. Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторной технологии, и может быть использовано в процессе получения ГСК.The invention provides an increase in the efficiency of the HSC procurement process through the use of experimentally established control quantitative parameters - the content of a number of cytokines produced by bone marrow MSCs. The invention relates to medicine, in particular to laboratory technology, and can be used in the process of obtaining GSK.
ПРИМЕР ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СПОСОБАEXAMPLE OF USING THE METHOD
Способ осуществляют следующим образом. Объектом исследования являются МСК костного мозга пациентов с множественной миеломой (n=15). Медиана возраста больных составила 61 год (42-65 лет). Пациенты получили однотипную индукционную терапию до начала мобилизации ГСК (4-6 курсов VCD). Миелоэксфузию выполняли до начала мобилизации ГСК. Выделение ядерных клеток костного мозга производили путем фракционирования на градиенте плотности «Lympholyte» (ρ=1,077 при температуре 22°C, «Cedarlane Laboratories Ltd», США). МСК культивировали в полной питательной среде, содержащей следующие компоненты: среду αМЕМ («StemCells», Канада), богатую тромбоцитами плазму (4%), гепарин 2 Ед/мл («Sigma», США), L-глутамин 2 мМ («StemCells», Канада). Плотность первичного посева составляла 5-10×104 миелокариоцитов на см2. МСК культивировали в СОг-инкубаторе Sanyo-5AC («Sanyo», Япония) в атмосфере 5% углекислого газа при температуре 37°C. Полную замену питательной среды производили каждые 4-5 сут. Культивирование осуществляли до достижения культурой МСК степени покрытия площади флакона 90-95%, после чего в супернатантах первичных культур МСК определяли уровень интерлейкинов (ИЛ) 1β, 2, 6, 12, фактора некроза опухоли α (ФНОα), трансформирующего фактора роста β (TGFβ) методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов АО «Вектор-Бест», Россия (ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-6, ФНОα) и Invitrogen («Thermo Fisher Scientific», США; ИЛ-12 и TGF β).The method is carried out as follows. The object of the study is bone marrow MSCs from patients with multiple myeloma (n = 15). The median age of the patients was 61 years (42-65 years). The patients received the same type of induction therapy before the start of HSC mobilization (4-6 courses of VCD). Myeloexfusion was performed prior to HSC mobilization. Isolation of bone marrow nuclear cells was performed by fractionation on a density gradient "Lympholyte" (ρ = 1.077 at a temperature of 22 ° C, "Cedarlane Laboratories Ltd", USA). MSCs were cultured in a complete nutrient medium containing the following components: αMEM medium (StemCells, Canada), platelet-rich plasma (4%), heparin 2 U / ml (Sigma, USA), L-glutamine 2 mM (StemCells ", Canada). The density of the primary seeding was 5-10 × 10 4 myelokaryocytes per cm 2 . MSCs were cultivated in a Sanyo-5AC CO2 incubator (Sanyo, Japan) in an atmosphere of 5% carbon dioxide at a temperature of 37 ° C. A complete replacement of the nutrient medium was performed every 4-5 days. The cultivation was carried out until the MSC culture reached a coverage of the flask area of 90-95%, after which the level of interleukins (IL) 1β, 2, 6, 12, tumor necrosis factor α (TNFα), transforming growth factor β (TGFβ ) by enzyme-linked immunosorbent assay using reagent kits from Vector-Best, Russia (IL-1β, IL-2, IL-6, TNFα) and Invitrogen (Thermo Fisher Scientific, USA; IL-12 and TGF β) ...
Мобилизацию ГСК в периферическую кровь пациентов с множественной миеломой осуществляли путем проведения курса винорельбина в дозе 35 мг/м2 площади поверхности тела однократно с последующим назначением препарата гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (10 мкг/кг подкожно, ежедневно, в течение 5 дней). Мониторинг уровня ГСК в периферической крови осуществляли ежедневно после введения Г-КСФ. Количество ГСК определяли по экспрессии на их поверхности маркера CD34 согласно протоколу ISHAGE, методом проточной цитометрии с использованием лазерного проточного цитофлуориметра «FACS Canto II» («Becton Dickinson», США).Mobilization of HSCs to the peripheral blood of patients with multiple myeloma was performed by the course vinorelbine at a dose of 35 mg / m 2 body surface area once followed purpose granulocyte colony stimulating factor preparation (10 ug / kg subcutaneously daily for 5 days). Monitoring of the level of HSC in the peripheral blood was carried out daily after the administration of G-CSF. The number of HSCs was determined by the expression on their surface of the CD34 marker according to the ISHAGE protocol, by flow cytometry using a FACS Canto II laser flow cytometer (Becton Dickinson, USA).
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯEXPERIMENTAL STUDIES
Экспериментальные исследования выполнены на базе лабораторий ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России (клеточных технологий, клеточной и молекулярной иммунологии). Результаты анализа уровня продукции цитокинов мезенхимальными клетками и количества ГСК в периферической крови пациентов представлены в таблице 1.Experimental studies were carried out on the basis of the laboratories of the FGBUN KNIIGiPK FMBA of Russia (cell technologies, cellular and molecular immunology). The results of the analysis of the level of cytokine production by mesenchymal cells and the amount of HSCs in the peripheral blood of patients are presented in Table 1.
Количество CD34+ клеток в периферической крови больных ММ варьировало в пределах 5-75 клеток/мкл (медиана - 22). Продукция цитокинов мезенхимальными клетками колебалась в диапазоне: ИЛ-1β - 0,632 - 0,653 (медиана - 0,642), ИЛ-2 - 0,366-0,490 (медиана - 0,389), ИЛ-6 - 71,52 - 132,72 (медиана - 95,12), ИЛ-12 - 0.06 - 0.416 (медиана - 0,136), ФНОα - 0,095 - 0,765 (медиана - 0,165), TGF β - 1,28 - 16,97 (медиана - 1,89) пг/мл/сут.The number of CD34 + cells in the peripheral blood of patients with MM ranged from 5 to 75 cells / μL (median - 22). The production of cytokines by mesenchymal cells varied in the range: IL-1β - 0.632 - 0.653 (median - 0.642), IL-2 - 0.366-0.490 (median - 0.389), IL-6 - 71.52 - 132.72 (median - 95, 12), IL-12 - 0.06 - 0.416 (median - 0.136), TNFα - 0.095 - 0.765 (median - 0.165), TGF β - 1.28 - 16.97 (median - 1.89) pg / ml / day.
Для определения корреляции между количеством CD34+ клеток в 1 мкл периферической крови пациентов и концентрацией цитокинов в супернатанте культуры МСК костного мозга рассчитывали коэффициент корреляции Пирсона (r): для ИЛ-1β r составил минус 0,17, ИЛ-2 - 0,22, ИЛ-6 - 0,02, ИЛ-12 - 0,78, ФНОα - 0,84, TGFβ - минус 0,21. Обнаружена прямая корреляционная зависимость между уровнями ИЛ-12 и ФНОα и числом мобилизированных ГСК. Кроме того, проведен анализ мобилизации ГСК у пациентов с ММ в зависимости от уровня продукции ИЛ-12 и ФНОα МСК костного мозга (таблица 2).To determine the correlation between the number of CD34 + cells in 1 μL of peripheral blood of patients and the concentration of cytokines in the supernatant of the bone marrow MSC culture, the Pearson correlation coefficient (r) was calculated: for IL-1β r was minus 0.17, for IL-2 - 0.22, IL -6 - 0.02, IL-12 - 0.78, TNFα - 0.84, TGFβ - minus 0.21. A direct correlation was found between the levels of IL-12 and TNF-α and the number of mobilized HSCs. In addition, the analysis of HSC mobilization in patients with MM was carried out depending on the level of IL-12 and TNFα production of bone marrow MSCs (Table 2).
При продукции мезенхимальными клетками ИЛ-12 более 0,136 пг/мл/сут, а ФНОα более 0,165 пг/мл/сут наблюдали достоверно большее количество ГСК, мобилизованных в периферическую кровь (критерий Манна-Уитни, р=0,02). Таким образом, концентрации ИЛ-12 и ФНОα в супернатантах культур МСК можно считать факторами прогноза эффективной мобилизации ГСК в периферическую кровь у пациентов с множественной миеломой.With the production of IL-12 by mesenchymal cells more than 0.136 pg / ml / day, and TNFα more than 0.165 pg / ml / day, a significantly greater number of HSCs mobilized into the peripheral blood was observed (Mann-Whitney test, p = 0.02). Thus, the concentrations of IL-12 and TNFα in the supernatants of MSC cultures can be considered as predictors of effective mobilization of HSCs into the peripheral blood in patients with multiple myeloma.
Новизна данного технического решения заключается в использовании количественных величин цитокинсекретирующей способности мезенхимальных клеток костного мозга пациентов с множественной миеломой, которые позволяют прогнозировать уровень ГСК, мобилизованных в периферическую кровь.The novelty of this technical solution lies in the use of quantitative values of the cytokine-secreting ability of mesenchymal cells in the bone marrow of patients with multiple myeloma, which allow predicting the level of HSCs mobilized into the peripheral blood.
ЛитератураLiterature
1. Высокодозная химиотерапия и аутологичная трансплантация у пациентов с лимфомами и множественной миеломой: всем ли удается получить достаточное количество периферических стволовых кроветворных клеток? / Федык О.В., Саржевский В.О., Мельниченко В.Я., Дубинина Ю.Н. [и др.] // Вестник Национального медико-хирургического Центра им. Н И. Пирогова. - 2018. - Т. 13, №3. - С 67-71.1. High-dose chemotherapy and autologous transplantation in patients with lymphomas and multiple myeloma: is everyone getting enough peripheral hematopoietic stem cells? / Fedyk O.V., Sarzhevsky V.O., Melnichenko V.Ya., Dubinina Yu.N. [et al.] // Bulletin of the National Medical and Surgical Center. N. I. Pirogov. - 2018. - T. 13, No. 3. - From 67-71.
2. Факторы прогноза эффективности получения аутологичных клеток-предшественников гемопоэза для последующей трансплантации после высокодозной химиотерапии Обзор литературы и собственные данные / А.Ю. Попов, Н.В. Жуков, С.В. Миненко, Л.Ю Андреева, В.В. Птушкин // Онкогематология. - 2008. - №3. - С. 34-44.2. Factors for predicting the effectiveness of obtaining autologous precursor cells of hematopoiesis for subsequent transplantation after high-dose chemotherapy Literature review and own data / A.Yu. Popov, N.V. Zhukov, S.V. Minenko, L.Yu. Andreeva, V.V. Ptushkin // Oncohematology. - 2008. - No. 3. - S. 34-44.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020133823A RU2757964C1 (en) | 2020-10-13 | 2020-10-13 | Method for predicting effective mobilisation of hematopoietic stem cells in patients with multiple myeloma |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020133823A RU2757964C1 (en) | 2020-10-13 | 2020-10-13 | Method for predicting effective mobilisation of hematopoietic stem cells in patients with multiple myeloma |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2757964C1 true RU2757964C1 (en) | 2021-10-25 |
Family
ID=78289707
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020133823A RU2757964C1 (en) | 2020-10-13 | 2020-10-13 | Method for predicting effective mobilisation of hematopoietic stem cells in patients with multiple myeloma |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2757964C1 (en) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7815921B2 (en) * | 2002-03-22 | 2010-10-19 | Ludwid Maximilians Universitat | Cytocapacity test for the prediction of the hematopoietic recovery, neutropenic fever, and antimicrobial treatment following high-dose cytotoxic chemotherapy |
-
2020
- 2020-10-13 RU RU2020133823A patent/RU2757964C1/en active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7815921B2 (en) * | 2002-03-22 | 2010-10-19 | Ludwid Maximilians Universitat | Cytocapacity test for the prediction of the hematopoietic recovery, neutropenic fever, and antimicrobial treatment following high-dose cytotoxic chemotherapy |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| АЛЕКСЕЕВ С.М. Оценка факторов, влияющих на эффективность мобилизации гемопоэтических стволовых клеток при трансплантации. Автореф. дисс. канд. мед. наук. Санкт-Петербург, 2009, 109 c. [Найдено 04.02.2021] [онлайн], Медицинские Диссертации. Найдено в Интернете: URL: http://medical-diss.com/medicina/otsenka-faktorov-vliyayuschih-na-effektivnost-mobilizatsii-gemopoeticheskih-stvolovyh-kletok-perifericheskoy-krovi-pri-tr#ixzz6lW35F9VB. * |
| ПОПОВ А.Ю. и др. Факторы прогноза эффективности получения аутологичных клеток-предшественников гемопоэза для последующей трансплантации после высокодозной химиотерапии. Обзор литературы и собственные данные. Онкогематология. 2008; 3: 34-44. * |
| ФЕДЫК О.В. и др. Высокодозная химиотерапия и аутологичная трансплантация у пациентов с лимфомами и множественной миеломой: всем ли удается получить достаточное количество периферических стволовых кроветворных клеток? Вестник Национального медико-хирургического Центра им. Н. И. Пирогова. 2018; 13(3): 67-71. * |
| ФЕДЫК О.В. и др. Высокодозная химиотерапия и аутологичная трансплантация у пациентов с лимфомами и множественной миеломой: всем ли удается получить достаточное количество периферических стволовых кроветворных клеток? Вестник Национального медико-хирургического Центра им. Н. И. Пирогова. 2018; 13(3): 67-71. ПОПОВ А.Ю. и др. Факторы прогноза эффективности получения аутологичных клеток-предшественников гемопоэза для последующей трансплантации после высокодозной химиотерапии. Обзор литературы и собственные данные. Онкогематология. 2008; 3: 34-44. АЛЕКСЕЕВ С.М. Оценка факторов, влияющих на эффективность мобилизации гемопоэтических стволовых клеток при трансплантации. Автореф. дисс. канд. мед. наук. Санкт-Петербург, 2009, 109 c. [Найдено 04.02.2021] [онлайн], Медицинские Диссертации. Найдено в Интернете: URL: http://medical-diss.com/medicina/otsenka-faktorov-vliyayuschih-na-effektivnost-mobilizatsii-gemopoeticheskih-stvolovyh-kletok-perifericheskoy-krovi-pri-tr#ixzz6lW35F9VB. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bari et al. | Expansion and homing of umbilical cord blood hematopoietic stem and progenitor cells for clinical transplantation | |
| KR100676792B1 (en) | Dendritic cell stimulating factor | |
| RU2348418C2 (en) | Introduction of dendritic cells exposed to partial aging in vitro, for tumour treatment | |
| EP0862443A1 (en) | Method of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation without graft failure or graft vs. host disease | |
| US20030124091A1 (en) | Endothelial cell derived hematopoietic growth factor | |
| KR20170000798A (en) | Method and Composition for Proliferating of Natural Killer Cell | |
| KR20200132722A (en) | Effective NK cell culture methods with NK Cell Culture Media Kit | |
| JP7502813B2 (en) | Efficient in vitro expansion method for multiple reinfusion of heterologous DNA cells in a general clinical setting | |
| CN113785048B (en) | Methods for expansion and differentiation of T lymphocytes and NK cells in adoptive transfer therapy | |
| US20250361484A1 (en) | Use of memory lymphocyte population in liver cancer treatment | |
| BR112021008461A2 (en) | methods for isolating and expanding cells | |
| JP4953403B2 (en) | Method for producing cells for cancer immunotherapy | |
| CN116333986A (en) | Culture method for exosome activated NK cells | |
| CN115558641A (en) | High-purity effector immune cell population, and culture method, reagent composition and application thereof | |
| CN117025530B (en) | Method for amplifying Tumor Infiltrating Lymphocytes (TILs) with tumor necrosis factor receptor superfamily agonists | |
| CN105524883A (en) | Capri cell and preparation method thereof | |
| CN1122716C (en) | Extracorporeal ceel culture and transplantation kits | |
| RU2757964C1 (en) | Method for predicting effective mobilisation of hematopoietic stem cells in patients with multiple myeloma | |
| CN107864627A (en) | Include the method and composition of adhering substrate cell | |
| CN103937742B (en) | One activates CD4 simultaneously+& CD8+the cultural method of the immunocyte of T cell | |
| AU782937B2 (en) | Cell composition containing macrophages, presenting anti-infectious and hematopoietic properties, and a process for preparing the same | |
| Chabannon et al. | Production of ex vivo expanded hematopoietic cells and progenitors in a closed bioreactor, starting with a small volume marrow collection: A feasibility study in patients with poor-risk breast cancer and receiving high-doses of cyclophosphamide. | |
| Ren et al. | Umbilical cord blood hematopoietic stem cell expansion ex vivo | |
| CN110684731A (en) | In-vitro amplification culture method of NK cells | |
| KR102566680B1 (en) | Effective novel dual-culture methods for the proliferation of immune cell as well as natural killer cell and use thereof |