[go: up one dir, main page]

RU2747737C1 - Method for morphological diagnosis of gestational myocardial maturity in premature infants born at 22-27 weeks gestation - Google Patents

Method for morphological diagnosis of gestational myocardial maturity in premature infants born at 22-27 weeks gestation Download PDF

Info

Publication number
RU2747737C1
RU2747737C1 RU2020122933A RU2020122933A RU2747737C1 RU 2747737 C1 RU2747737 C1 RU 2747737C1 RU 2020122933 A RU2020122933 A RU 2020122933A RU 2020122933 A RU2020122933 A RU 2020122933A RU 2747737 C1 RU2747737 C1 RU 2747737C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
myocardium
weeks
gestation
gestational
maturity
Prior art date
Application number
RU2020122933A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Мария Вячеславовна Малышева
Людмила Викторовна Кулида
Любовь Петровна Перетятко
Ольга Павловна Сарыева
Сергей Борисович Назаров
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Priority to RU2020122933A priority Critical patent/RU2747737C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2747737C1 publication Critical patent/RU2747737C1/en

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/483Physical analysis of biological material
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: invention relates to medicine and namely to pathological anatomy. Disclosed is a method for morphological diagnosis of gestational maturity of the myocardium of premature infants born at a gestational age of 22-27 weeks. The essence of the method lies in the fact that the expression index of cardiac troponin T is determined in the myocardium of the left ventricle of premature newborns, and when its value is in the range from 0.93 to 1.62 conventional units, the structure of the myocardium corresponds to 22-24 weeks of gestation, and when the value is within from 1.63 to 1.71 conventional units, the structure of the myocardium corresponds to 25-27 weeks of gestation.
EFFECT: disclosed is an objective, highly informative and reliable method of morphological diagnosis, which improves quality of the histological conclusion in the morphological examination of the heart and can be used to diagnose the gestational maturity of the myocardium in premature infants born at 22-27 weeks of gestation.
1 cl, 3 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии, и может быть использовано для диагностики гестационной зрелости миокарда недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель.The invention relates to medicine, namely to pathological anatomy, and can be used to diagnose the gestational maturity of the myocardium in premature infants born at a gestational age of 22-27 weeks.

Гестационная зрелость миокарда у недоношенных новорожденных играет важную роль в постнатальной адаптации, а также составляет структурную основу развития сердечно-сосудистых заболеваний в неонатальном периоде. Так, тканевая незрелость миокарда является одним из основных звеньев патогенеза морфогенетических кардиомиопатий, развитие которых связано с внутриутробными и постнатальными нарушениями кардиогенеза. Функциональная и структурная незрелость сердца приводит к различным нарушениям гемодинамики, сердечного ритма, сохраняющимися у детей на протяжении раннего возраста [Состояние сердца у новорожденных детей с постгипоксической ишемией миокарда на фоне кардиотропной терапии / А.А. Тарасова, Ю.Н. Белова, И.Ф. Острейков, В.Н. Подкопаев // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2013. - Т. 58, №2. - С. 24-29].Gestational maturity of the myocardium in premature infants plays an important role in postnatal adaptation, and also forms the structural basis for the development of cardiovascular diseases in the neonatal period. Thus, tissue immaturity of the myocardium is one of the main links in the pathogenesis of morphogenetic cardiomyopathies, the development of which is associated with intrauterine and postnatal disorders of cardiogenesis. Functional and structural immaturity of the heart leads to various disorders of hemodynamics, heart rhythm, persisting in children during an early age [Heart condition in newborns with posthypoxic myocardial ischemia against the background of cardiotropic therapy / А.А. Tarasova, Yu.N. Belova, I.F. Ostreikov, V.N. Podkopaev // Russian Bulletin of Perinatology and Pediatrics. - 2013. - T. 58, No. 2. - S. 24-29].

В доступной литературе в минимальном объеме освещены вопросы структурной перестройки миокарда у доношенных и недоношенных новорожденных. В единичных отечественных и иностранных источниках представлены данные о структурных особенностях миокарда у новорожденных с экстремально низкой массой тела (ЭНМТ) при рождении. Так, в работах Виноградовой И.В. и соавторов (2010) показано, что миокард у данной категории детей имеет губчатое строение с преимущественным расположением миофибрилл на периферии кардиомиоцитов [Виноградова И.В., Краснов М.В. Постнатальная адаптация сердечно-сосудистой системы у новорожденных с экстремально низкой массой тела // Вестник Чувашского университета. - 2010. - №3. - С. 63-69]. Объемное соотношение кардиомиоцитов и соединительнотканного компонента в миокарде колеблется от 75% и 25% до 80% и 20% [Непомнящих Л.М., Колесникова Л.В. Количественное взаимоотношение паренхимы и стромы миокарда кроликов при атеросклеротическом кардиосклерозе // Бюллетень экспериментальной биологии. - 1977. - №8. - С. 247-250; Морфометрия сердца в норме / Г.С. Кирьякулов, Н.И. Яблучанский, В.Е. Шляховер и др. - Киев: Вища школа, 1990. - 152 с.; Morphometry of human myocardium in senile individuals / J.A. Cardoso, A.E. Toscano, T. Tashiro et al. // Arq Bras Cardiol. - 2006. - Vol. 86, №5. - P. 374-377]. Соединительнотканный межклеточный матрикс у глубоконедоношенных новорожденных содержит сеть макромолекулярных волокон, поддерживающих кардиомиоциты. Он имеет сложную пространственную организацию, которая в значительной степени определяет структурную и функциональную целостность сердечной мышцы [Горбунов А.А. Соединительнотканный компонент миокарда: новый этап изучения давней проблемы // Морфологiя. - 2007. - №4(1). - С. 6-12]. Соединительнотканная строма, жировая ткань у плодов и новорожденных 22-27 недельного гестационного возраста развиты очень слабо [Волкова О.В., Пекарский М.И. Эмбриогенез и возрастная гистология внутренних органов человека. - М.: Медицина, 1976. - 462 с.; Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А. Гистология, эмбриология, цитология: учебник. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. - 800 с.; Виноградова И.В., Краснов М.В. Постнатальная адаптация сердечно-сосудистой системы у новорожденных с экстремально низкой массой тела // Вестник Чувашского университета. - 2010. - №3. - С. 63-69.] Изложенные выше структурные особенности миокарда носят описательный характер, не содержат количественных и качественных характеристик, позволяющих оценить гестационную зрелость миокарда у недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель.In the available literature, the issues of structural restructuring of the myocardium in full-term and premature infants are covered in a minimal volume. A few domestic and foreign sources provide data on the structural features of the myocardium in newborns with extremely low body weight (ELBW) at birth. So, in the works of Vinogradova I.V. et al (2010) showed that the myocardium in this category of children has a spongy structure with a predominant location of myofibrils on the periphery of cardiomyocytes [IV Vinogradova, MV Krasnov. Postnatal adaptation of the cardiovascular system in newborns with extremely low body weight // Bulletin of the Chuvash University. - 2010. - No. 3. - S. 63-69]. The volume ratio of cardiomyocytes and the connective tissue component in the myocardium ranges from 75% and 25% to 80% and 20% [Nepomnyashchikh L.M., Kolesnikova L.V. The quantitative relationship of the parenchyma and stroma of the myocardium in rabbits in atherosclerotic cardiosclerosis // Bulletin of Experimental Biology. - 1977. - No. 8. - S. 247-250; Heart morphometry is normal / G.S. Kiryakulov, N.I. Yabluchansky, V.E. Shlyakhover and others - Kiev: Vishcha school, 1990. - 152 p .; Morphometry of human myocardium in senile individuals / J.A. Cardoso, A.E. Toscano, T. Tashiro et al. // Arq Bras Cardiol. - 2006. - Vol. 86, no. 5. - P. 374-377]. The connective tissue intercellular matrix in deeply premature infants contains a network of macromolecular fibers that support cardiomyocytes. It has a complex spatial organization, which largely determines the structural and functional integrity of the heart muscle [A.A. Gorbunov. The connective tissue component of the myocardium: a new stage in the study of an old problem // Morphology. - 2007. - No. 4 (1). - S. 6-12]. The connective tissue stroma, adipose tissue in fetuses and newborns of 22-27 weeks gestational age are very poorly developed [Volkova OV, Pekarsky MI. Embryogenesis and age-related histology of human internal organs. - M .: Medicine, 1976. - 462 p .; Afanasyev Yu.I., Yurina N.A. Histology, embryology, cytology: textbook. - M .: GEOTAR-Media, 2012. - 800 p .; Vinogradova I.V., Krasnov M.V. Postnatal adaptation of the cardiovascular system in newborns with extremely low body weight // Bulletin of the Chuvash University. - 2010. - No. 3. - S. 63-69.] The above structural features of the myocardium are descriptive, do not contain quantitative and qualitative characteristics that allow assessing the gestational maturity of the myocardium in premature infants born at 22-27 weeks gestation.

Техническим решением заявляемого способа является морфологическая диагностика гестационной зрелости миокарда у недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель.The technical solution to the proposed method is the morphological diagnosis of gestational maturity of the myocardium in premature infants born at a gestational age of 22-27 weeks.

Технический результат достигается путем определения индекса экспрессии сердечного тропонина Т в миокарде левого желудочка недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель, и при его значении в пределах от 0,93 до 1,62 условных единиц структура миокарда соответствует 22-24 неделям гестации, а при значении в пределах от 1,63 до 1,71 условных единиц - 25-27 неделям гестации.The technical result is achieved by determining the expression index of cardiac troponin T in the myocardium of the left ventricle of premature infants born at a gestational age of 22-27 weeks, and with its value in the range from 0.93 to 1.62 conventional units, the structure of the myocardium corresponds to 22-24 weeks of gestation , and with a value ranging from 1.63 to 1.71 conventional units - 25-27 weeks of gestation.

Проведено морфологическое исследование 30 сердец недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель. Физическое развитие новорожденных соответствовало сроку гестации, у всех новорожденных определялся нормотрофический тип соматического развития. Все новорожденные умерли в раннем неонатальном периоде. В качестве основной причины смерти у них диагностирована асфиксия новорожденного, обусловленная острым нарушением маточно-плацентарного кровообращения. В единичных случаях причиной смерти были внутрижелудочковые кровоизлияния II степени и врожденная пневмония. Из обследования исключались дети с врожденными пороками сердца и сосудов, миокардитом, хронической внутриутробной гипоксией. В результате проведенного иммуногистохимического исследования с количественной оценкой экспрессии сердечного тропонина Т определены нормативные значения индекса экспрессии сердечного тропонина Т: от 0,93 до 1,62 условных единиц у новорожденных со сроком гестации 22-24 недели, и от 1,63 до 1,71 условных единиц у новорожденных со сроком гестации 25-27 недель.A morphological study of 30 hearts of premature infants born at 22-27 weeks gestation was carried out. The physical development of the newborns corresponded to the gestational age; the normotrophic type of somatic development was determined in all newborns. All newborns died in the early neonatal period. As the main cause of death, they were diagnosed with asphyxia of the newborn, caused by an acute violation of the uteroplacental circulation. In isolated cases, the cause of death was grade II intraventricular hemorrhage and congenital pneumonia. Children with congenital heart and vascular defects, myocarditis, and chronic intrauterine hypoxia were excluded from the examination. As a result of an immunohistochemical study with a quantitative assessment of the expression of cardiac troponin T, the normative values of the expression index of cardiac troponin T were determined: from 0.93 to 1.62 conventional units in newborns with a gestational age of 22-24 weeks, and from 1.63 to 1.71 conventional units in newborns with a gestation period of 25-27 weeks.

Способ осуществляется следующим образом: после макроскопического исследования сердца, из средней трети передней стенки левого желудочка иссекается фрагмент миокарда размерами 10,0×6,0×3,0 мм. Материал забирают не позднее 30 минут от момента констатации биологической смерти и фиксируют в 10% забуференном формалине в течение 12-24 часов [Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. - Казань: Титул, 2004. - 456 с.]. Иммуногистохимическое исследование проводят на парафиновых срезах, толщиной 4-5 микрон. После депарафинации микропрепаратов осуществляют демаскировку антигена путем двукратного кипячения в цитратном буфере по 5 минут в СВЧ-печи при мощности 650 вт. Эндогенную пероксидазу блокируют 1% раствором перекиси водорода с последовательной инкубацией во влажной камере с первичными и биотинилированными вторичными антителами. В промежутках между инкубацией срезы промывают в трех сменах фосфатного буфера, в качестве первичных антител используют кроличьи моноклональные антитела к сердечному тропонину Т фирмы «Biorbyt» в рабочем разведении 1:800.The method is carried out as follows: after a macroscopic examination of the heart, a fragment of the myocardium with dimensions of 10.0 × 6.0 × 3.0 mm is excised from the middle third of the anterior wall of the left ventricle. The material is taken no later than 30 minutes from the moment of ascertaining biological death and fixed in 10% buffered formalin for 12-24 hours [SV Petrov, NT Raikhlin. Guidelines for the immunohistochemical diagnosis of human tumors. - Kazan: Title, 2004. - 456 p.]. Immunohistochemical study is carried out on paraffin sections, 4-5 microns thick. After dewaxing of the micropreparations, the antigen is unmasked by boiling twice in citrate buffer for 5 minutes in a microwave oven at a power of 650 watts. Endogenous peroxidase is blocked with 1% hydrogen peroxide solution with sequential incubation in a humid chamber with primary and biotinylated secondary antibodies. In the intervals between incubations, the sections are washed in three changes of phosphate buffer, rabbit monoclonal antibodies to cardiac troponin T from Biorbyt in a working dilution of 1: 800 are used as primary antibodies.

Визуализация комплексов антиген-антитело осуществляется при помощи системы детекции Ultra Vision Quanto Detection System HRP («Thermo scientific», USA). Далее срезы окрашивают DAB-хромогеном, докрашивают гематоксилином Майера. С целью исключения вероятности получения ложноотрицательных и ложноположительных результатов каждое иммуногистохимическое исследование проводят с постановкой положительного и отрицательного контроля. Отрицательный контроль исключал специфическое окрашивание препаратов. Положительный контроль подтверждал специфичность поставленной иммуногистохимической реакции с данными антителами.The antigen-antibody complexes are visualized using the Ultra Vision Quanto Detection System HRP (Thermo scientific, USA). Then the sections are stained with DAB-chromogen, counterstained with Mayer's hematoxylin. In order to eliminate the likelihood of obtaining false-negative and false-positive results, each immunohistochemical study is carried out with the setting of a positive and negative control. Negative control excluded specific staining of the preparations. The positive control confirmed the specificity of the set immunohistochemical reaction with these antibodies.

Результаты иммуногистохимической реакции оценивают в 10 полях зрения микроскопа, в 100 клетках препарата при увеличении ×400. Для количественной оценки экспрессии сердечного тропонина Т определялся индекс экспрессии данного белка по формулеThe results of the immunohistochemical reaction are assessed in 10 fields of view of the microscope, in 100 cells of the preparation at a magnification of × 400. To quantify the expression of cardiac troponin T, the expression index of this protein was determined using the formula

Индекс экспрессии = ∑P(i)⋅i/100 условные единицы,Expression index = ∑P (i) ⋅i / 100 conventional units,

где i - интенсивность окрашивания в баллах от 0 до 3;where i is the intensity of staining in points from 0 to 3;

P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью.P (i) is the percentage of cells stained with different intensities.

[Pathology of the Breast / F.A. Tavassoli et al. - Stamford: Appleton-Lange, 1999].[Pathology of the Breast / F.A. Tavassoli et al. - Stamford: Appleton-Lange, 1999].

Результат рассчитывают в условных единицах.The result is calculated in arbitrary units.

Новизна изобретения заключается в том, что впервые предлагается диагностика гестационной зрелости миокарда у недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недели, по определению содержания в миокарде сердечного тропонина Т. Сердечный тропонин Т входит в состав тропонинового комплекса, являющегося одним из ключевых белков-регуляторов сердечных сокращений. В сердечной мышце взрослого человека тропонин Т представлен уникальными изоформами, которые не экспрессируются в других тканях. Доказано, что в кардиомиоцитах экспрессируется исключительно сердечная форма тропонина Т. [Troponin Т isoform expression in humans. A comparison among normal and failing adult heart, fetal heart, and adult and fetal skeletal muscle / P.A. Anderson, N.N. Malouf, A.E. Oakeley et al. // Circ Res. - 1991. - Vol. 69, №5. - P. 1226-1233]. Экспрессия эмбриональной изоформы тропонина Т усиливает максимальную силу сокращений миофибрилл и чувствительность миоцитов к ионам кальцияа [Cardiac troponin Т isoforms affect the Ca(2+) sensitivity of force development in the presence of slow skeletal troponin I: insights into the role of troponin T isoforms in the fetal heart / A.V. Gomes, G. Venkatraman, J.P. Davis et al. // J. Biol. Chem. - 2004. - Vol. 279, №48. - P. 49579-49587].The novelty of the invention lies in the fact that for the first time it is proposed to diagnose the gestational maturity of the myocardium in premature infants born at 22-27 weeks of gestation, by determining the content of cardiac troponin T in the myocardium. Cardiac troponin T is part of the troponin complex, which is one of the key proteins. heart rate regulators. In the heart muscle of an adult, troponin T is represented by unique isoforms that are not expressed in other tissues. It has been proven that cardiomyocytes express exclusively the cardiac form of troponin T. [Troponin T isoform expression in humans. A comparison among normal and failing adult heart, fetal heart, and adult and fetal skeletal muscle / P.A. Anderson, N.N. Malouf, A.E. Oakeley et al. // Circ Res. - 1991. - Vol. 69, no. 5. - P. 1226-1233]. Expression of the embryonic troponin T isoform enhances the maximum force of myofibril contractions and the sensitivity of myocytes to calcium ions [Cardiac troponin T isoforms affect the Ca (2+) sensitivity of force development in the presence of slow skeletal troponin I: insights into the role of troponin T isoforms in the fetal heart / AV Gomes, G. Venkatraman, J.P. Davis et al. // J. Biol. Chem. - 2004. - Vol. 279, no. 48. - P. 49579-49587].

По результатам ранее проведенных исследований доказано, что сердечный тропонин Т является специфичным и чувствительным маркером ишемического повреждения клеток миокарда как у взрослых, так и у детей [Revision of the troponin T release mechanism from damaged human myocardium / K. Starnberg, A. Jeppsson, B. Lindahl, O. Hammarsten // Clin Chem. - 2014. - Vol. 60, №8. - P. 1098-1104; Cardiac troponin in ischemic cardiomyocytes: intracellular decrease before onset of cell death / A.S. Streng, L.H. Jacobs, R.W. Schwenk et al. // Exp. Mol. Pathol. - 2014. - Vol. 96, №3. - P. 339-345]. Так, изоформы сердечного тропонина Т используют для диагностики патологии сердца, связанной с некрозом кардиомиоцитов. При инфаркте миокарда, внезапной сердечной смерти и травматических повреждениях миокарда диагностируется увеличение данного белка в крови [Картуха И.А. Тропониновый комплекс сердца человека. Структура и функции // Успехи биологической химии. - 2013. - Т. 53. - С. 149-194].Previous studies have shown that cardiac troponin T is a specific and sensitive marker of ischemic damage to myocardial cells in both adults and children [Revision of the troponin T release mechanism from damaged human myocardium / K. Starnberg, A. Jeppsson, B Lindahl, O. Hammarsten // Clin Chem. - 2014. - Vol. 60, no. 8. - P. 1098-1104; Cardiac troponin in ischemic cardiomyocytes: intracellular decrease before onset of cell death / A.S. Streng, L.H. Jacobs, R.W. Schwenk et al. // Exp. Mol. Pathol. - 2014. - Vol. 96, no. 3. - P. 339-345]. Thus, isoforms of cardiac troponin T are used to diagnose cardiac pathology associated with necrosis of cardiomyocytes. With myocardial infarction, sudden cardiac death and traumatic myocardial injury, an increase in this protein in the blood is diagnosed [Kartukha I.A. Troponin complex of the human heart. Structure and functions // Advances in biological chemistry. - 2013. - T. 53. - S. 149-194].

В доступной литературе отсутствуют данные о гестационной динамике изменения содержания сердечного тропонина Т и об использовании данного белка в качестве диагностического маркера гестационной зрелости миокарда у новорожденных, в том числе у недоношенных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель.In the available literature, there are no data on the gestational dynamics of changes in the content of cardiac troponin T and on the use of this protein as a diagnostic marker of gestational myocardial maturity in newborns, including premature infants born at 22-27 weeks of gestation.

Отличительные признаки способа.Distinctive features of the method.

У недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель, определяют индекс экспрессии сердечного тропонина Т в биоматериале, представляющем собой миокард левого желудочка, по формуле:In premature infants born at a gestational age of 22-27 weeks, the expression index of cardiac troponin T in the biomaterial, which is the left ventricular myocardium, is determined by the formula:

Индекс экспрессии = ΣP(i)•i/100 условные единицы,Expression index = ΣP (i) • i / 100 conventional units,

где i - интенсивность окрашивания иммуногистохимической реакции срезов миокарда из средней трети передней стенки левого желудочка, оцененной в 10 полях зрения микроскопа в 100 клетках препарата при увеличении 400, выражена в баллах от 0 до 3; where i is the intensity of staining of the immunohistochemical reaction of myocardial slices from the middle third of the anterior wall of the left ventricle, estimated in 10 fields of view of the microscope in 100 cells of the preparation at a magnification of 400, expressed in points from 0 to 3;

P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью, P (i) - percentage of cells stained with different intensities,

и при значении индекса экспрессии сердечного тропонина Т в миокарде левого желудочка в пределах от 0,93 до 1,62 условных единиц структура миокарда соответствует 22-24 неделям гестации, а при значении в пределах от 1,63 до 1,71 условных единиц - 25-27 неделям гестации, причем биоматериал забирают не позднее 30 минут от момента констатации биологической смертиand with a value of the expression index of cardiac troponin T in the left ventricular myocardium in the range from 0.93 to 1.62 conventional units, the structure of the myocardium corresponds to 22-24 weeks of gestation, and with a value in the range from 1.63 to 1.71 conventional units - 25 -27 weeks of gestation, and the biomaterial is taken no later than 30 minutes from the moment of detection of biological death

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.The essence of the proposed method is illustrated by the following examples.

Пример 1.Example 1.

Новорожденный мальчик от III беременности, III оперативных родов в сроке 24 недели. Беременность осложнилась преждевременной отслойкой нормально расположенной плаценты. Новорожденный по антропометрическим параметрам (масса - 655 г, теменно-пяточная длина - 34 см, теменно-копчиковая длина - 22,3 см и длина стопы - 4,7 см) соответствовал 24 неделям гестации. Через 18 часов после рождения ребенок умер. Основной причиной смерти явилась тяжелая асфиксия, которая развилась в результате острого нарушения маточно-плацентарного кровообращения. Согласно предложенному способу, после смерти новорожденного на гистологических срезах миокарда при иммуногистохимическом исследовании определен индекс экспрессии сердечного тропонина Т, который составил 1,38 условных единиц, что по заявленному способу соответствует 22-24 недели гестации.A newborn boy from the III pregnancy, III operative delivery in the period of 24 weeks. Pregnancy was complicated by premature detachment of the normally located placenta. Anthropometric parameters of the newborn (weight - 655 g, parietal-calcaneal length - 34 cm, parietococcygeal length - 22.3 cm and foot length - 4.7 cm) corresponded to 24 weeks of gestation. The child died 18 hours after birth. The main cause of death was severe asphyxia, which developed as a result of acute disturbance of the uteroplacental circulation. According to the proposed method, after the death of a newborn on histological sections of the myocardium during immunohistochemical study, the expression index of cardiac troponin T was determined, which was 1.38 conventional units, which according to the claimed method corresponds to 22-24 weeks of gestation.

Заключение: соответствие структуры миокарда гестационному возрасту.Conclusion: correspondence of the structure of the myocardium to gestational age.

Пример 2.Example 2.

Новорожденная девочка от II беременности I преждевременных родов в сроке 27 недель по антропометрическим параметрам (масса - 980,0 г, теменно-пяточная длина - 35 см и длина стопы - 5,7 см) соответствовала 27 неделям гестации. Ребенок умер на 3 сутки жизни. Основной причиной смерти явилась двусторонняя интерстициальная пневмония смешанной вирусно-бактериальной этиологии. Согласно предложенному способу был определен индекс экспрессии сердечного тропонина Т, который составил 1,57 условных единиц, что по заявленному способу соответствует 22-24 неделям гестации.A newborn girl from pregnancy II, I premature birth at 27 weeks of age in terms of anthropometric parameters (weight - 980.0 g, parietal-calcaneal length - 35 cm and foot length - 5.7 cm) corresponded to 27 weeks of gestation. The child died on the 3rd day of life. The main cause of death was bilateral interstitial pneumonia of mixed viral and bacterial etiology. According to the proposed method, the expression index of cardiac troponin T was determined, which was 1.57 conventional units, which according to the claimed method corresponds to 22-24 weeks of gestation.

Заключение: задержка тканевой дифференцировки миокарда.Conclusion: delayed tissue differentiation of the myocardium.

Пример 3.Example 3.

Новорожденный мальчик от I беременности, I преждевременных родов в сроке 25 недель. Беременность осложнилась дородовым излитием околоплодных вод. Новорожденный по весовым параметрам (масса - 597,3 г) соответствовал 23 неделям гестации, а по линейным показателям (теменно-пяточная длина - 34,9 см, теменно-копчиковый размер - 23,2 см и длина стопы - 5,6 см) - 26 неделям гестации. Смерть ребенка наступила на 5 сутки жизни. Основной причиной смерти явилось двухстороннее внутрижелудочковое кровоизлияние II степени.Newborn boy from I pregnancy, I premature birth at 25 weeks. Pregnancy was complicated by prenatal rupture of amniotic fluid. The newborn in terms of weight parameters (weight - 597.3 g) corresponded to 23 weeks of gestation, and according to linear indicators (parieto-calcaneal length - 34.9 cm, parietococcygeal size - 23.2 cm and foot length - 5.6 cm) - 26 weeks of gestation. The death of the child occurred on the 5th day of life. The main cause of death was grade II bilateral intraventricular hemorrhage.

Согласно предложенному способу был определен индекс экспрессии сердечного тропонина Т, составивший 1,64 условных единиц, что соответствует 25-27 неделям гестации.According to the proposed method, the expression index of cardiac troponin T was determined, which was 1.64 conventional units, which corresponds to 25-27 weeks of gestation.

Заключение: соответствие структуры миокарда гестационному возрасту.Conclusion: correspondence of the structure of the myocardium to gestational age.

Преимущества предлагаемого способа.The advantages of the proposed method.

1. Является объективным, высокоинформативным и достоверным методом морфологической диагностики, позволяющим оценить на молекулярном уровне гестационную зрелость миокарда у новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель.1. It is an objective, highly informative and reliable method of morphological diagnostics, which makes it possible to assess at the molecular level the gestational maturity of the myocardium in newborns born at a gestational age of 22-27 weeks.

2. Способ повышает качество гистологического заключения при морфологическом исследовании сердца.2. The method improves the quality of the histological conclusion in the morphological examination of the heart.

3. Способ прост в оценке результатов, для его осуществления не требуется дорогостоящего оборудования.3. The method is simple in evaluating the results; for its implementation, expensive equipment is not required.

Claims (5)

Способ морфологической диагностики гестационной зрелости миокарда недоношенных новорожденных, родившихся в сроке гестации 22-27 недель, путем определения индекса экспрессии сердечного тропонина Т в биоматериале, представляющем собой миокард левого желудочка, по формуле:A method for morphological diagnosis of gestational maturity of the myocardium of premature infants born at a gestational age of 22-27 weeks by determining the expression index of cardiac troponin T in a biomaterial, which is a left ventricular myocardium, according to the formula:
Figure 00000001
Figure 00000001
где i - интенсивность окрашивания иммуногистохимической реакции срезов миокарда из средней трети передней стенки левого желудочка, оцененной в 10 полях зрения микроскопа в 100 клетках препарата при увеличении 400, выражена в баллах от 0 до 3;where i is the intensity of staining of the immunohistochemical reaction of myocardial slices from the middle third of the anterior wall of the left ventricle, estimated in 10 fields of view of the microscope in 100 cells of the preparation at a magnification of 400, expressed in points from 0 to 3; P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью, P (i) - percentage of cells stained with different intensities, и при значении индекса экспрессии сердечного тропонина Т в миокарде левого желудочка в пределах от 0,93 до 1,62 условных единиц структура миокарда соответствует 22-24 неделям гестации, а при значении в пределах от 1,63 до 1,71 условных единиц - 25-27 неделям гестации, причем биоматериал забирают не позднее 30 минут от момента констатации биологической смерти.and with a value of the expression index of cardiac troponin T in the left ventricular myocardium in the range from 0.93 to 1.62 conventional units, the structure of the myocardium corresponds to 22-24 weeks of gestation, and with a value in the range from 1.63 to 1.71 conventional units - 25 -27 weeks of gestation, and the biomaterial is taken no later than 30 minutes from the moment of biological death.
RU2020122933A 2020-07-06 2020-07-06 Method for morphological diagnosis of gestational myocardial maturity in premature infants born at 22-27 weeks gestation RU2747737C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020122933A RU2747737C1 (en) 2020-07-06 2020-07-06 Method for morphological diagnosis of gestational myocardial maturity in premature infants born at 22-27 weeks gestation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020122933A RU2747737C1 (en) 2020-07-06 2020-07-06 Method for morphological diagnosis of gestational myocardial maturity in premature infants born at 22-27 weeks gestation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2747737C1 true RU2747737C1 (en) 2021-05-13

Family

ID=75919723

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020122933A RU2747737C1 (en) 2020-07-06 2020-07-06 Method for morphological diagnosis of gestational myocardial maturity in premature infants born at 22-27 weeks gestation

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2747737C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2790923C1 (en) * 2022-07-15 2023-02-28 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации METHOD FOR MORPHOLOGICAL DIAGNOSIS OF A FUNCTIONING DUCTUS ARTERIOSUS IN PREMATURE NEWBORNS WITH BIRTH WEIGHT BELOW 1500 g

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2013115182A (en) * 2013-04-04 2014-10-10 государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России) METHOD FOR PREDICING RISK OF DEVELOPMENT OF SEVERE POST-HYPOXIC MYOCARDIAL DAMAGE IN NEWBORNS WITH DIFFERENT PURPOSES OF GESTATION IN THE NEONATAL PERIOD
RU2545432C1 (en) * 2014-02-20 2015-03-27 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии" Министерства здравоохранения Московской области Method for determining foetal maturity
RU2620005C1 (en) * 2016-02-24 2017-05-22 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Читинская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации Method of diagnosing critical fetus condition

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2013115182A (en) * 2013-04-04 2014-10-10 государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России) METHOD FOR PREDICING RISK OF DEVELOPMENT OF SEVERE POST-HYPOXIC MYOCARDIAL DAMAGE IN NEWBORNS WITH DIFFERENT PURPOSES OF GESTATION IN THE NEONATAL PERIOD
RU2545432C1 (en) * 2014-02-20 2015-03-27 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии" Министерства здравоохранения Московской области Method for determining foetal maturity
RU2620005C1 (en) * 2016-02-24 2017-05-22 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Читинская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения Российской Федерации Method of diagnosing critical fetus condition

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANDERSON, P. A., et.al. Troponin T isoform expression in humans. A comparison among normal and failing adult heart, fetal heart, and adult and fetal skeletal muscle. Circulation Research, 1991, 69(5), 1226-1233. doi:10.1161/01.res.69.5.1226. *
МАЛЫШЕВА М.В. Патоморфология гипоксических повреждений миокарда у новорожденных с экстремально низкой массой тела. Материалы XIII Всероссийской с международным участием научной конференции студентов и молодых ученых-медиков "Молодежь - практическому здравоохранению", 13 ноября 2019, Иваново, с.322-327. *
МАЛЫШЕВА М.В. Патоморфология гипоксических повреждений миокарда у новорожденных с экстремально низкой массой тела. Материалы XIII Всероссийской с международным участием научной конференции студентов и молодых ученых-медиков "Молодежь - практическому здравоохранению", 13 ноября 2019, Иваново, с.322-327. ANDERSON, P. A., et.al. Troponin T isoform expression in humans. A comparison among normal and failing adult heart, fetal heart, and adult and fetal skeletal muscle. Circulation Research, 1991, 69(5), 1226-1233. doi:10.1161/01.res.69.5.1226. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2790923C1 (en) * 2022-07-15 2023-02-28 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации METHOD FOR MORPHOLOGICAL DIAGNOSIS OF A FUNCTIONING DUCTUS ARTERIOSUS IN PREMATURE NEWBORNS WITH BIRTH WEIGHT BELOW 1500 g

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Buhimschi et al. Characterization of RAGE, HMGB1, and S100β in inflammation-induced preterm birth and fetal tissue injury
Voicu et al. Evaluation of placental vascularization in thrombophilia and intrauterine growth restriction (IUGR)
Morimune et al. The association between chronic deciduitis and preeclampsia
Almasry et al. Ultrastructure alteration of decidual natural killer cells in women with unexplained recurrent miscarriage: a possible association with impaired decidual vascular remodelling
Leach et al. Diminished survival of human cytotrophoblast cells exposed to hypoxia/reoxygenation injury and associated reduction of heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor
Andrews Amniotic fluid studies to determine maturity
RU2747737C1 (en) Method for morphological diagnosis of gestational myocardial maturity in premature infants born at 22-27 weeks gestation
Gurel et al. Expression of IGR-IR and VEGF and trophoblastic proliferative activity in placentas from pregnancies complicated by IUGR
Li et al. Reduced expression of survivin, the inhibitor of apoptosis protein correlates with severity of preeclampsia
RU2295132C1 (en) Method for earlier predicting the syndrome of delayed fetal development
Sipowicz et al. Effects of cadmium on myometrial activity of the nonpregnant human. Interactions with calcium and oxytocin
Sisti et al. Insulin-like growth factor binding protein-1 predicts preterm premature rupture of membranes in twin pregnancies
Goldenberg et al. Plasma alkaline phosphatase and pregnancy outcome
Karaca et al. The effect of vascular complications of diabetes mellitus on human umbilical cord tissue and the number of Wharton Jelly’s mesenchymal stem cells
RU2741730C1 (en) Method for prediction of the risk of developing severe complications of preeclampsia
RU2699657C1 (en) Method for prediction of early anemia of premature newborns
Bogavac et al. The role of insulin-like growth factor in prediction and prevention of preterm delivery
RU2422086C1 (en) Method of morphological diagnostics of ventriculomegalia in fetuses and newborn babies
RU2233121C1 (en) Method for predicting pregnancy flow and detecting risk degree in failed development of fetus/embryo and child's birth at different defects
Biouss et al. Unveiling fetal brain changes in congenital diaphragmatic hernia: hypoxic injury with loss of progenitor cells, neurons, and oligodendrocytes
Qian-hua et al. Reduced expression of netrin-1 is associated with fetal growth restriction
RU2738674C1 (en) Method for fetal growth restriction prediction
Bajoria et al. Leptin and bone turnover in monochorionic twins complicated by twin–twin transfusion syndrome
Ola et al. Increased 8-OHdG in umbilical cord blood represents the risk of preeclampsia with Intra-Uterine Growth Restriction (IUGR)
Arnouts et al. The added value of the sFlt-1/PlGF ratio in pregnant women with intrauterine growth restriction (IUGR) with or without preeclampsia on adverse pregnancy outcomes and neonatal morbidities: a retrospective study