RU2615908C1 - Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс - Google Patents
Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс Download PDFInfo
- Publication number
- RU2615908C1 RU2615908C1 RU2015152954A RU2015152954A RU2615908C1 RU 2615908 C1 RU2615908 C1 RU 2615908C1 RU 2015152954 A RU2015152954 A RU 2015152954A RU 2015152954 A RU2015152954 A RU 2015152954A RU 2615908 C1 RU2615908 C1 RU 2615908C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- melanoma
- hematogenous
- lymphatic
- murine
- tumor
- Prior art date
Links
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 title claims abstract description 41
- 241000700159 Rattus Species 0.000 title claims abstract description 24
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 241001529936 Murinae Species 0.000 title claims abstract description 15
- 208000013210 hematogenous Diseases 0.000 title claims abstract description 15
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 title abstract 3
- 238000004088 simulation Methods 0.000 title abstract 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims abstract description 5
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 claims abstract description 3
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000029142 excretion Effects 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 26
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 8
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 8
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 8
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 5
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 208000002847 Surgical Wound Diseases 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000002327 eosinophilic effect Effects 0.000 description 2
- 201000010877 epithelioid cell melanoma Diseases 0.000 description 2
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000215 hyperchromic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 206010057687 Bloody discharge Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010048612 Hydrothorax Diseases 0.000 description 1
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- QTCANKDTWWSCMR-UHFFFAOYSA-N costic aldehyde Natural products C1CCC(=C)C2CC(C(=C)C=O)CCC21C QTCANKDTWWSCMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 208000000718 duodenal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- ISTFUJWTQAMRGA-UHFFFAOYSA-N iso-beta-costal Natural products C1C(C(=C)C=O)CCC2(C)CCCC(C)=C21 ISTFUJWTQAMRGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 210000000713 mesentery Anatomy 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 1
- 210000003281 pleural cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011012 sanitization Methods 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G09—EDUCATION; CRYPTOGRAPHY; DISPLAY; ADVERTISING; SEALS
- G09B—EDUCATIONAL OR DEMONSTRATION APPLIANCES; APPLIANCES FOR TEACHING, OR COMMUNICATING WITH, THE BLIND, DEAF OR MUTE; MODELS; PLANETARIA; GLOBES; MAPS; DIAGRAMS
- G09B23/00—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes
- G09B23/28—Models for scientific, medical, or mathematical purposes, e.g. full-sized devices for demonstration purposes for medicine
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальным исследованиям в онкологии, и может быть использовано для моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования меланомы B16. Для этого используют белых нелинейных крыс. Через 2 недели после выведения у животного селезенки под кожу передней брюшной стенки в нее имплантируют суспензию опухолевых клеток мышиной меланомы В16 в физиологическом растворе в объеме 0,1 мл и в разведении 1:10. Через полгода от момента перевивки регистрируют лимфогенный и гематогенный путь распространения меланомы с морфологически подтвержденным метастатическим поражением внутренних органов. Способ обеспечивает достоверность моделирования, при этом экономичен и прост в исполнении. 6 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и может быть использовано при воспроизведении мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс и в дальнейшем для разработки новых способов ее экспериментальной терапии.
Известно, что меланома - одна из трудно поддающихся лечению онкологических нозологий, заболеваемость которой в России, как и во всем мире, постоянно растет (см. Злокачественные новообразования в России в 2012 году (заболеваемость и смертность). Под ред. Каприна А.Д., Старинского В.В., Петровой Г.В., Москва, 2014, с. 250). Среди всех типов злокачественных опухолей кожи 65% летальных исходов обусловлены меланомой, поскольку даже полное локальное удаление опухоли не исключает развитие отдаленных метастазов (см. Лопатин В.Ф., Мардынский Ю.С., Горбушин Н.Г. Интегративная оценка сопротивляемости организма при термолучевой терапии онкологических больных / Росс. онколог. журнал. - 2007. - №4. - С. 26-32).
Для изучения патогенеза меланомы и для разработки способов ее профилактики и терапии используют различные экспериментальные модели: 1) перевиваемые опухоли животных; 2) гетеротрансплантаты опухолей человека; 3) культуры тканей или клеток опухоли; 4) органные культуры.
Использование перевиваемых опухолей делает возможным постановку эксперимента с большим числом сравниваемых групп животных. Среди перевиваемых меланом наиболее часто применяют меланомы мышей: Хардинга-Пасси, В-16 и S-91 Клаудмана. Меланома В16 возникла спонтанно в коже мыши линии C57BL/6 у основания уха в 1954 году. Штамм поддерживается на мышах линии C57BL/6 перевивкой опухолевой взвеси на 12-16 сутки роста.
В зависимости от способа перевивки у мышей меланома B16 «ведет» себя по-разному. Так, при подкожной перевивке (0,5 мл взвеси опухолевой ткани в растворе Хенкса или среде 199 (1:10), перевиваемость опухоли составляет 100%) - меланома метастазирует преимущественно гематогенно в легкие (60-90%), реже - в печень и селезенку (см. Софьина З.П. и др. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США. - М.: Медицина, 1980. - 296 с.; Dingemane K.Р. et al. В-16 Melanoma Metastasis in Mouse Liver and Lung // Inv. Metast. - 1985. - №5. - P. 50-60).
При введении опухолевых клеток в хвостовую вену развиваются метастазы в легких.
При внутрибрюшной имплантации меланома В16 растет в виде множественных мелких узелков, выстилающих брюшную полость. Клеточная популяция опухоли гетерогенна и включает как сильно пигментированные участки, так и фрагменты с незначительным содержанием или полным отсутствием меланина. Модальный класс опухоли насчитывает 40 хромосом. Пролиферативный пул в момент перевивки опухоли составляет 71,6% (см. Фадеева Е.В. Экспериментальная модель меланомы В16 и методы иммунотерапии / Межд. журн. экспер. образ. - 2010. - №8. - С. 49-50).
Известно, что меланома у людей метастазирует не только гематогенным, но и лимфогенным путем, поражая кроме легких и печени лимфатические образования, например лимфатические узлы. Поэтому меланому B16, перевиваемую стандартно подкожно мышам, нельзя считать «идеальной» моделью меланомы людей.
В настоящее время белые лабораторные крысы не используются для изучения меланомы, поскольку, как и у любых альбиносов, спонтанные меланомы у них не возникают, а меланомы животных других видов, например мышиные, при стандартных способах перевивки не воспроизводятся. В то же время, в некоторых случаях, крысы могут иметь преимущества перед мышами. Прежде всего, это большие размеры животного и, следовательно, больший объем материала для исследований и меньшее количество умерщвленных животных для решения тех или иных научных задач. Во-вторых, это более продолжительное по времени развитие опухоли, что позволит более детально изучить патогенез заболевания, а значит и точки воздействия на него.
Известно, что один и тот же штамм опухоли при разных способах его перевивки может не метастазировать совсем или метастазировать по-разному. Так, подкожное введение крысам клеток гепатокарциномы не дает метастазов, внутривенное введение приводит к образованию метастазов в легком и печени, а введение опухолевого материала под капсулу почки вызывает метастазирование опухоли в грудные паратимические лимфатические узлы (см. Trencsenyi G., Marian Т., Bako F., Emri M., Nagy G., Kertai P., Banfalvi G. Metastatic hepatocarcinoma he/de tumor model in rat. J Cancer. 2014 Jun 21; 5(7): 548-58).
Для того чтобы воспроизвести активное лимфогенное метастазирование для штамма опухоли, слабо метастазирующей таким образом при стандартной перевивке, надо каким-то образом попытаться ослабить иммунную систему животного. Одним из таких приемов является введение опухолевых клеток в селезенку крыс.
Известен способ перевивки карциномы Герена в селезенку крыс. Карцинома Герена при подкожной перевивке иногда метастазирует в лимфатические узлы. Введение опухолевых клеток в селезенку приводит к активации пролиферации в самой опухоли, так и к бласттрансформации в селезенке, в результате развиваются лимфомы и лейкемии, происходят изменения в тимусе и мезентериальных лимфатических узлах (см. Бобро Л.И., Фильчаков Ф.В., Гриневич Ю.А., Шумилина Е.С. Морфологические изменения в органах иммуногенеза при трансплантации карциномы Герена в селезенку / Арх. пат. - 2004. - N 4. - С. 30-35).
Техническим результатом настоящего изобретения является разработка способа получения экспериментальной модели меланомы у крыс, метастазирующей лимфогенным и гематогенным путем.
Поставленный технический результат достигается тем, что через 2 недели после предварительного выведения селезенки под кожу передней брюшной стенки в нее имплантируют суспензию опухолевых клеток мышиной меланомы В16 в физиологическом растворе в объеме 0,1 мл и в разведении 1:10, и через полгода от момента перевивки регистрируют лимфогенный и гематогенный путь распространения меланомы с морфологически подтвержденным метастатическим поражением внутренних органов.
Для пояснения предлагаемого изобретения предложены рисунки.
На фиг. 1 изображена диффузная инфильтрация опухолевыми клетками меланомы В16 с крупной эозинофильной цитоплазмой, неравномерным скоплением гранул меланина в трабекулах селезенки.
На фиг. 2 изображено нарушение дольковой структуры в тимусе, нет четкой градации коркового и мозгового вещества, отмечается выраженная диффузная инфильтрация лимфоцитами и опухолевыми клетками меланомы В16 с крупными гиперхромными ядрами, патологическими митозами.
На фиг. 3 изображен метастаз в лимфоузле эпителиоидноклеточной меланомы с апоптозом отдельных клеток.
На фиг. 4 изображено скопление крупных атипичных опухолевых клеток с микровезикулярной цитоплазмой, содержащих мелкие гранулы меланина вокруг центральных вен в центральных отделах печени.
На фиг. 5 изображена диффузная инфильтрация опухолевыми клетками в парапанкреатической жировой клетчатке, представленными эпителиодными клеточными элементами, содержащими меланин.
На фиг. 6 изображена диффузная инфильтрация опухолевыми клетками, в стенке кишки с вовлечением мышечной оболочки, представленными эпителиодными клеточными элементами, содержащими меланин.
Изобретение «Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс» является новым, так как оно неизвестно в области экспериментальных исследований в онкологии о воспроизведении мышиной меланомы В16 у крыс.
Новизна изобретения заключается в ксеногенной трансплантации опухолевого штамма меланомы В16 в селезенку нелинейных белых крыс, в результате чего мышиная опухоль начинает расти в селезенке крысы, постепенно нарушая ее работу и метастазируя лимфогенным и гематогенным путем в тимус, регионарные лимфоузлы, кишечник, печень, поджелудочную железу, легкие.
Изобретение «Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс» является промышленно применимым, так как может быть использовано в научно-исследовательских учреждениях онкологического профиля для воспроизведения экспериментальной модели меланомы у крыс, метастазирующей лимфогенным и гематогенным путем с целью изучения патогенеза этого заболевания и дальнейшей разработки методов его экспериментальной терапии.
«Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс» выполняется следующим образом.
Все манипуляции с животными производятся в боксе. Инструменты, посуду, руки дезинфицируют общепринятым способом. Ассистент фиксирует крысу в положении на спине, удаляет шерсть с передней поверхности тела, смазывает кожу живота 70% спиртом и дает эфирный наркоз.
Затем экспериментатор в стерильных условиях проводит верхнюю срединную лапаротомию, аккуратно отсепарорывает кожу от мышц, формируя «карман», и делает небольшой вертикальный разрез в мышечном слое передней брюшной стенки под левой реберной дугой, достаточный, чтобы через него «прошла» селезенка без повреждений.
После того как экспериментатор извлек селезенку из отверстия в мышцах, он ушивает этот разрез, чтобы селезенка фиксировалась под кожей в кармане. Далее ассистент ушивает операционную рану и обрабатывает шов 5% спиртовым раствором йода.
Через 2 недели после заживления операционной раны и восстановления животного интралиенально вводят 0,1 мл взвеси опухолевых клеток мышиной меланомы В16 в физиологическом растворе в разведении 1:10. Для этого, соблюдая все условия асептики, описанные выше, ассистент фиксирует крысу на спине. Селезенка визуализируется в виде бугорка на животе крысы. Над местом возвышения ассистент сбривает шерсть, обрабатывает кожу 5% спиртовым раствором йода. Экспериментатор рукой в стерильной перчатке захватывает кожную складку с выступающей селезенкой и в месте максимального ее возвышения, что приблизительно соответствует центру органа, иглой 5 см3 шприца прокалывает кожу и селезенку не глубоко, примерно до середины органа, и вводит опухолевую взвесь. Затем извлекает иглу, и место введения плотно, сильно не надавливая, прижимает ватным тампоном, смоченным в 70% спирте с небольшим добавлением йода, на 1 минуту, чтобы исключить вытекание вводимой взвеси.
Через 1,5 месяца после интралиенального введения опухолевой взвеси в селезенку она становится плотной. Через полгода - крысы вялые, аппетит снижен, из носа кровянистые выделения, видимые кожные покровы и слизистые - бледные, одышка, живот умеренно увеличен в размерах, при пальпации - флюктуирует.
При вскрытии:
I. Макроскопически
В плевральной и брюшной полостях - прозрачная жидкость, желтоватого оттенка, объемом 1,5-2 мл (гидроторакс, асцит). Селезенка находится под кожей в фиброзной капсуле, плотная, темного цвета, незначительно увеличена. Тимус увеличен до 1 см3, шаровидной формы, черно-серого цвета. Легкие и сердце визуально не изменены. Печень неоднородной окраски: по бледному фону с желтоватым оттенком - красная зернистость. В толще хвостатой доли объемное опухолевое образование, размером 1-1,5 см3. Петли тонкого кишечника раздуты, окрашены в желтый цвет. В брюшной полости - опухолевый конгломерат, исходящий из брыжейки или кишечника, размером 11,25 см3, бугристый, неоднородной окраски (темные и светлые участки). Опухоль проросла желудок, 12-перстную кишку, поджелудочную железу. Увеличены пейеровы бляшки, мезентеральные лимфатические узлы выглядят как «бусы» или «гроздья». Надпочечники увеличены в размерах, черного цвета. Кровоизлияние в верхний полюс правого семенника.
II. Микроскопически
В трабекулах селезенки - диффузная инфильтрация опухолевыми клетками меланомы В16 с крупной эозинофильной цитоплазмой, неравномерным скоплением гранул меланина (фиг. 1).
В тимусе - нарушение дольковой структуры, нет четкой градации коркового и мозгового вещества, отмечается выраженная диффузная инфильтрация лимфоцитами и опухолевыми клетками меланомы В16 с крупными гиперхромными ядрами, патологическими митозами (фиг. 2).
В лимфоузле - метастаз эпителиоидноклеточной меланомы с апоптозом отдельных клеток (фиг. 3).
В центральных отделах печени, вокруг центральных вен - скопление крупных атипичных опухолевых клеток с микровезикулярной цитоплазмой, содержащих мелкие гранулы меланина (фиг. 4).
В парапанкреатической жировой клетчатке - диффузная инфильтрация опухолевыми клетками, представленными эпителиодными клеточными элементами, содержащими меланин (фиг. 5).
В стенке кишки с вовлечением мышечной оболочки диффузная инфильтрация опухолевыми клетками, представленными эпителиодными клеточными элементами, содержащими меланин (фиг. 6).
Технико-экономическая эффективность «Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы B16 у белых нелинейных крыс» заключается в том, что полученные метастазы в легкие, печень, кишечник и другие органы являются морфологически подтвержденными метастазами меланомы, растут и приводят к гибели животных. Способ осуществляется на белых беспородных крысах с применением опухолевого штамма мышиной меланомы В16 и предполагает распространение метастазов двумя путями: лимфогенным и гематогенным, что приближает данную экспериментальную модель меланомы к меланоме, развивающейся в организме человека. Способ экономичен, доступен.
Claims (1)
- Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс, заключающийся в том, что через 2 недели после предварительного выведения селезенки под кожу передней брюшной стенки в нее имплантируют суспензию опухолевых клеток мышиной меланомы В16 в физиологическом растворе в объеме 0,1 мл и в разведении 1:10, и через полгода от момента перевивки регистрируют лимфогенный и гематогенный путь распространения меланомы с морфологически подтвержденным метастатическим поражением внутренних органов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015152954A RU2615908C1 (ru) | 2016-05-16 | 2016-05-16 | Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015152954A RU2615908C1 (ru) | 2016-05-16 | 2016-05-16 | Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2615908C1 true RU2615908C1 (ru) | 2017-04-11 |
Family
ID=58642303
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015152954A RU2615908C1 (ru) | 2016-05-16 | 2016-05-16 | Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2615908C1 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2650587C1 (ru) * | 2017-04-26 | 2018-04-16 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ модификации хронической болью злокачественного роста меланомы в16 у мышей |
| RU2740443C1 (ru) * | 2020-07-22 | 2021-01-14 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" | Способ трансплантации фрагмента опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодефицитной мыши |
| RU2757676C1 (ru) * | 2021-04-06 | 2021-10-20 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ стимуляции гематогенной диссеминации карциномы в эксперименте |
| RU2779698C1 (ru) * | 2022-02-10 | 2022-09-12 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ экспериментальной биотерапии меланомы В16/F10 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2424241C2 (ru) * | 2008-12-29 | 2011-07-20 | Сергей Павлович Сяткин | Производные ксантина, обладающие антипролиферативной активностью, модуляторы клеточной дифференцировки, способ замедления скорости пролиферации опухолевых клеток, способ индукции дифференциации в клетках |
| RU2425053C2 (ru) * | 2001-07-13 | 2011-07-27 | СиЭмЭс ПЕПТАЙДЗ ПЭЙТЕНТ ХОЛДИНГ КОМПАНИ ЛИМИТЕД | Выделенный пептид, стимулирующий противоопухолевый иммунный ответ, фармацевтическая композиция на его основе, способ лечения млекопитающего и способ модуляции иммунного ответа |
| EA016660B1 (ru) * | 2006-04-20 | 2012-06-29 | Сциклон Фармасьютиклз, Инк. | Способ лечения меланомы |
| EA018453B1 (ru) * | 2005-09-07 | 2013-08-30 | Эмджен Фримонт Инк. | Моноклональные антитела человека к киназе-1, подобной рецептору активина, и их применение |
-
2016
- 2016-05-16 RU RU2015152954A patent/RU2615908C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2425053C2 (ru) * | 2001-07-13 | 2011-07-27 | СиЭмЭс ПЕПТАЙДЗ ПЭЙТЕНТ ХОЛДИНГ КОМПАНИ ЛИМИТЕД | Выделенный пептид, стимулирующий противоопухолевый иммунный ответ, фармацевтическая композиция на его основе, способ лечения млекопитающего и способ модуляции иммунного ответа |
| EA018453B1 (ru) * | 2005-09-07 | 2013-08-30 | Эмджен Фримонт Инк. | Моноклональные антитела человека к киназе-1, подобной рецептору активина, и их применение |
| EA016660B1 (ru) * | 2006-04-20 | 2012-06-29 | Сциклон Фармасьютиклз, Инк. | Способ лечения меланомы |
| RU2424241C2 (ru) * | 2008-12-29 | 2011-07-20 | Сергей Павлович Сяткин | Производные ксантина, обладающие антипролиферативной активностью, модуляторы клеточной дифференцировки, способ замедления скорости пролиферации опухолевых клеток, способ индукции дифференциации в клетках |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| TAKASHIMA K Tracking of green fluorescent protein (GFP)-labeled LAK cells in mice carrying B16 melanoma metastases. Anticancer Res. 2006 Sep-Oct;26(5A):3327-32. LENTINI A. et al. Anti-invasive effects of theophylline on experimental B16-F10 melanoma lung metastasis, Cancer Journal 1997, 10(5), 274-278. * |
| БОБРО Л.И. и др. Морфологические изменения в органах иммуногенеза при трансплантации карциномы Герена в селезенку. Архив патологии, 2004, N 4, С. 30-35. * |
| БОБРО Л.И. и др. Морфологические изменения в органах иммуногенеза при трансплантации карциномы Герена в селезенку. Архив патологии, 2004, N 4, С. 30-35. ЗИМАКОВА Н.И. Фармакокинетические исследования дикарбамина у мышей с меланомой В16. Российский биотерапевтический журнал, 2012, Том 11, Номер 2, С. 19. TAKASHIMA K Tracking of green fluorescent protein (GFP)-labeled LAK cells in mice carrying B16 melanoma metastases. Anticancer Res. 2006 Sep-Oct;26(5A):3327-32. LENTINI A. et al. Anti-invasive effects of theophylline on experimental B16-F10 melanoma lung metastasis, Cancer Journal 1997, 10(5), 274-278. * |
| ЗИМАКОВА Н.И. Фармакокинетические исследования дикарбамина у мышей с меланомой В16. Российский биотерапевтический журнал, 2012, Том 11, Номер 2, С. 19. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2650587C1 (ru) * | 2017-04-26 | 2018-04-16 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ модификации хронической болью злокачественного роста меланомы в16 у мышей |
| RU2740443C1 (ru) * | 2020-07-22 | 2021-01-14 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" | Способ трансплантации фрагмента опухоли рака яичника человека в яичник самки иммунодефицитной мыши |
| RU2757676C1 (ru) * | 2021-04-06 | 2021-10-20 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ стимуляции гематогенной диссеминации карциномы в эксперименте |
| RU2779698C1 (ru) * | 2022-02-10 | 2022-09-12 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ экспериментальной биотерапии меланомы В16/F10 |
| RU2786322C1 (ru) * | 2022-05-06 | 2022-12-20 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ предотвращения развития инфаркта миокарда мышей с меланомой, развившейся на фоне хронической нейрогенной боли |
| RU2794762C1 (ru) * | 2022-07-13 | 2023-04-24 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ выбора митохондрий для экспериментальной терапии меланомы в16-f10 |
| RU2796892C1 (ru) * | 2022-10-25 | 2023-05-29 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ образования опухолевых узлов меланомы в организме экспериментальных животных |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kuo et al. | Liver colonization competence governs colon cancer metastasis. | |
| Manzotti et al. | Importance of orthotopic implantation for human tumors as model systems: relevance to metastasis and invasion | |
| Coman | Mechanisms responsible for the origin and distribution of blood-borne tumor metastases: a review | |
| RU2615908C1 (ru) | Способ моделирования лимфогенного и гематогенного метастазирования мышиной меланомы В16 у белых нелинейных крыс | |
| CN114009399B (zh) | 肝癌免疫检查点抗体耐药小鼠及细胞株的制备与应用 | |
| Fidler | Host and tumour factors in cancer metastasis | |
| CN102766600A (zh) | 一种食管鳞癌原代瘤株ch-h-2的应用 | |
| Arjomandnejad et al. | HeLa cell line xenograft tumor as a suitable cervical cancer model: growth kinetic characterization and immunohistochemistry array | |
| CN110812496B (zh) | 一种抗肿瘤药物的快速药敏检测方法 | |
| CN106466315B (zh) | 亚丁基苯酞的用途 | |
| Prasad et al. | Transmission of mouse neuroblastoma by a cell-free extract | |
| Toth | Studies on the incidence, morphology, transplantation, and cell-free filtration of malignant lymphomas in the Syrian golden hamster | |
| Elias et al. | Hyperplastic and metaplastic responses of human mammary fibroadenomas and dysplasias in organ culture | |
| CN108567736B (zh) | 一种治疗乳腺癌的皮下注射用原位凝胶及其用途 | |
| RU2538243C1 (ru) | Способ получения метастазов печени в эксперименте | |
| RU2750127C1 (ru) | Способ моделирования первично-множественного роста злокачественных опухолей с подавлением одной опухоли другой в условиях первичного иммунодефицита | |
| RU2847289C1 (ru) | Способ создания метастатической модели солидного рака человека на иммунодефицитных мышах | |
| Kit et al. | Modeling of Lymphogenous and Hematogenous Metastasizing from Murine В16 Melanoma in Rats | |
| RU2725273C1 (ru) | Способ трансплантации фрагмента нейроэндокринной опухоли поджелудочной железы человека в поджелудочную железу иммунодефицитных мышей | |
| Meirowsky et al. | The response of embryonic chick membrane to Bowen's intraepithelial cancer | |
| Fibiger | Investigations on Spiroptera carcinoma and the experimental induction of cancer | |
| Alvarez | B16 murine melanoma: Historical perspective on the development of a solid tumor model | |
| CN106138067A (zh) | 蟾蜍二烯内酯类化合物在制备抗胃癌药物中的应用 | |
| Woglom | Chapter II. Attempts to produce tumors | |
| RU2759487C1 (ru) | Способ усиления роста меланомы В16/F10 по сравнению с ростом меланомы В16/F10 при самостоятельной перевивке и замедления роста LLC (карциномы Льюиса) по сравнению с ростом LLC при самостоятельной перевивке при первично-множественных злокачественных опухолях на фоне первичного иммунодефицита |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180517 |