RU2698871C1 - Method of photochemotherapy of vitiligo - Google Patents
Method of photochemotherapy of vitiligo Download PDFInfo
- Publication number
- RU2698871C1 RU2698871C1 RU2018129485A RU2018129485A RU2698871C1 RU 2698871 C1 RU2698871 C1 RU 2698871C1 RU 2018129485 A RU2018129485 A RU 2018129485A RU 2018129485 A RU2018129485 A RU 2018129485A RU 2698871 C1 RU2698871 C1 RU 2698871C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- irradiation
- particles
- uva
- photosensitizer
- long
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 87
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 76
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims abstract description 74
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 43
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 13
- 241000212376 Ammi Species 0.000 claims abstract description 5
- 235000007034 Carum copticum Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims abstract 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 18
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 claims description 15
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 claims description 14
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 238000011285 therapeutic regimen Methods 0.000 abstract 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 38
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 32
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 29
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 23
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 23
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 19
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 18
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 12
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 11
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 8
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 7
- 230000036074 healthy skin Effects 0.000 description 7
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 7
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 7
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 6
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 6
- GIQRBVVYHBZHIU-UHFFFAOYSA-N 4,9-dimethoxyfuro[3,2-g]chromen-7-one;4-methoxyfuro[3,2-g]chromen-7-one Chemical compound O1C(=O)C=CC2=C1C=C1OC=CC1=C2OC.O1C(=O)C=CC2=C1C(OC)=C1OC=CC1=C2OC GIQRBVVYHBZHIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 5
- 238000001126 phototherapy Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000037338 UVA radiation Effects 0.000 description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 4
- 210000004209 hair Anatomy 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 238000012014 optical coherence tomography Methods 0.000 description 4
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 4
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 4
- 244000160914 Ammi majus Species 0.000 description 3
- 235000005750 Ammi majus Nutrition 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 3
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000002562 urinalysis Methods 0.000 description 3
- 206010006784 Burning sensation Diseases 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000009535 clinical urine test Methods 0.000 description 2
- 238000001218 confocal laser scanning microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000035614 depigmentation Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 230000003810 hyperpigmentation Effects 0.000 description 2
- 208000000069 hyperpigmentation Diseases 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 2
- 229910001710 laterite Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011504 laterite Substances 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000008099 melanin synthesis Effects 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 230000002165 photosensitisation Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 150000003194 psoralenes Chemical class 0.000 description 2
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 2
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HQBKFSFXKKNIDP-QRPNPIFTSA-N (2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HQBKFSFXKKNIDP-QRPNPIFTSA-N 0.000 description 1
- OIQXFRANQVWXJF-QBFSEMIESA-N (2z)-2-benzylidene-4,7,7-trimethylbicyclo[2.2.1]heptan-3-one Chemical class CC1(C)C2CCC1(C)C(=O)\C2=C/C1=CC=CC=C1 OIQXFRANQVWXJF-QBFSEMIESA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical class [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- QXKHYNVANLEOEG-UHFFFAOYSA-N Methoxsalen Chemical compound C1=CC(=O)OC2=C1C=C1C=COC1=C2OC QXKHYNVANLEOEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009193 PUVA therapy Methods 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 206010040914 Skin reaction Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L calcium chloride dihydrate Chemical compound O.O.[Cl-].[Cl-].[Ca+2] LLSDKQJKOVVTOJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940052299 calcium chloride dihydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002389 environmental scanning electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010579 first pass effect Methods 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- -1 methylangelicin compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 231100000435 percutaneous penetration Toxicity 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 238000007539 photo-oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002215 photochemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004694 pigment cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical class C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 description 1
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 230000035483 skin reaction Effects 0.000 description 1
- 231100000430 skin reaction Toxicity 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
- A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
- A61K31/37—Coumarins, e.g. psoralen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
- A61K33/06—Aluminium, calcium or magnesium; Compounds thereof, e.g. clay
- A61K33/10—Carbonates; Bicarbonates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N5/00—Radiation therapy
- A61N5/06—Radiation therapy using light
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
- A61N7/00—Ultrasound therapy
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и направлено на лечение витилиго методом фотохимиотерапии с использованием фотосенсибилизирующего средства. The invention relates to medicine and is directed to the treatment of vitiligo by photochemotherapy using a photosensitizing agent.
Витилиго – хроническое заболевание, клиническим проявлением которого является формирование на коже и ее производных, а также слизистых оболочках депигментированных пятен различной формы и размера, возникающих вследствие разрушения и снижения количества меланоцитов.Vitiligo is a chronic disease, the clinical manifestation of which is the formation on the skin and its derivatives, as well as the mucous membranes of depigmented spots of various shapes and sizes, arising from the destruction and reduction in the number of melanocytes.
Фотохимиотерапия витилиго основывается на использовании в качестве фотосенсибилизаторов соединений фурокумаринового ряда (псораленов) в комбинации с длинноволновым ультрафиолетовым излучением (PUVA-терапия). Примерами применяемых в клинической практике фотосенсибилизаторов являются фурокумарины растительного происхождения (препарат «Аммифурин», Россия), а также синтетические препараты («Оксорален», Австрия; «Пувален», Финляндия; «Ламадин», Франция).Vitiligo photochemotherapy is based on the use of furocoumarin compounds (psoralenes) in combination with long-wave ultraviolet radiation (PUVA therapy) as photosensitizers. Examples of photosensitizers used in clinical practice are plant-derived furocoumarins (Ammifurin, Russia), as well as synthetic drugs (Oxoralen, Austria; Puwalen, Finland; Lamadin, France).
Известен фотосенсибилизатор, представляющий собой композицию, содержащую в качестве активного вещества псоралены, и образующую пленку на коже при нанесении (патент № CN1327836C, МПК A61P17/00, A61K35/78). Наличие пленкообразующего вещества в предлагаемой композиции способствует повышению эффективности чрескожного проникновения активного вещества и увеличению длительности его нахождения в зоне нанесения. A photosensitizer is known, which is a composition containing psoralenes as an active substance and forming a film on the skin when applied (Patent No. CN1327836C, IPC A61P17 / 00, A61K35 / 78). The presence of a film-forming substance in the proposed composition improves the efficiency of percutaneous penetration of the active substance and increases the duration of its presence in the application zone.
Недостатком указанной композиции является малая эффективность трансдермального переноса активного вещества, которая составляет 0.5-6 %. Кроме того, в данном изобретении отсутствует раскрытие специфики, сроков и пояснений к пролонгации терапевтического действия.The disadvantage of this composition is the low transdermal transfer efficiency of the active substance, which is 0.5-6%. In addition, in this invention there is no disclosure of the specificity, timing and explanation for the prolongation of the therapeutic effect.
Традиционная схема фотохимиотерапии витилиго при лечении распространенных форм витилиго предполагает пероральное применение фотосенсибилизатора с последующим УФА облучением [Федеральные клинические рекомендации по ведению больных витилиго// Российское общество дерматовенерологов и косметологов. Москва, 2015]. УФА облучение начинают с ½ минимальной эритемной дозы (МЭД), постепенно увеличивают до 5-6 МЭД. Процедуры проводят в виде повторных курсов, состоящих из 15-25 процедур (2-3 раза в неделю) с интервалом 1-3 месяца или одного продолжительного курса, включающего 100 процедур и более. Каждая процедура требует приема в среднем 40 мг активного вещества, что соответствует приему 100-150 таблеток препаратов из ряда псораленов за один курс. Такая схема лечения является дорогостоящей, учитывая как цену самого препарата, так и необходимость проведения сеансов ультрафиолетового облучения и содержания больного в стационаре. Кроме того, следует учитывать, что лечение этим методом сопровождается наибольшим количеством побочных эффектов, а также может приводить к выраженной гиперпигментации и формированию резкого контраста между пораженной, репигментированной и видимо здоровой кожей. The traditional scheme of vitiligo photochemotherapy in the treatment of common forms of vitiligo involves oral administration of a photosensitizer followed by UVA radiation [Federal clinical guidelines for the management of vitiligo patients // Russian Society of Dermatovenerologists and Cosmetologists. Moscow, 2015]. UVA irradiation begins with ½ of the minimum erythema dose (MED), gradually increasing to 5-6 MED. The procedures are carried out in the form of repeated courses consisting of 15-25 procedures (2-3 times a week) with an interval of 1-3 months or one long course, including 100 procedures or more. Each procedure requires an average intake of 40 mg of the active substance, which corresponds to taking 100-150 tablets of drugs from a number of psoralen in one course. Such a treatment regimen is expensive, taking into account both the price of the drug itself and the need for conducting sessions of ultraviolet radiation and keeping the patient in a hospital. In addition, it should be borne in mind that treatment with this method is accompanied by the greatest number of side effects, and can also lead to severe hyperpigmentation and the formation of a sharp contrast between the affected, repigmented and apparently healthy skin.
При лечении больных с ограниченными формами заболевания применяют терапию в виде наружного использования растворов фотосенсибилизатора с последующим облучением УФА [Опыт применения фотосенсибилизирующего препарата Аммифурин. Информация для специалистов// ЗАО «Фармцентр ВИЛАР». Москва, 2012. с. 12]. Такая терапия обладает меньшим количеством побочных эффектов, по сравнению с их системным применением, поскольку обеспечивает снижение системного побочного действия на организм и нагрузку на ЖКТ. Однако такой метод является менее эффективным и при этом не менее дорогостоящим и ресурсозатратным: он предполагает проведение терапии в виде 4-6 повторных курсов, состоящих из 20-25 процедур (3-4 раза в неделю) с интервалом 1-1,5 месяца, и требует стационарного пребывания пациента в лечебном учреждении.In the treatment of patients with limited forms of the disease, therapy is applied in the form of an external use of photosensitizer solutions followed by UVA irradiation [Experience with the use of the photosensitizing drug Ammifurin. Information for specialists // CJSC Pharmacenter VILAR. Moscow, 2012. 12]. Such therapy has fewer side effects compared with their systemic use, since it provides a decrease in systemic side effects on the body and the load on the digestive tract. However, this method is less effective and at the same time no less expensive and resource-consuming: it involves conducting therapy in the form of 4-6 repeated courses consisting of 20-25 procedures (3-4 times a week) with an interval of 1-1.5 months, and requires an inpatient stay in a hospital.
Меньшая терапевтическая эффективность фотохимиотерапии витилиго с использованием наружных форм фотосенсибилизаторов, по сравнению с пероральными, обусловлена избирательной проницаемостью кожного покрова. Роговой слой кожи выполняет роль барьера для проникновения поверхностно нанесенных веществ. Таким образом, при аппликации на поверхность кожи активного вещества малый процент его преодолевает кожный барьер и оказывает терапевтическое воздействие, в то время как большая часть препарата остается на поверхности кожного покрова. Следовательно, классическая схема терапии является нерациональной и требует усовершенствования. Обеспечение аккумуляции лекарственной композиции в зоне патологии способно повысить ее терапевтическую эффективность. The lower therapeutic efficacy of vitiligo photochemotherapy using external forms of photosensitizers, compared with oral ones, is due to the selective permeability of the skin. The stratum corneum acts as a barrier to the penetration of surface-applied substances. Thus, when an active substance is applied to the skin surface, a small percentage overcomes the skin barrier and exerts a therapeutic effect, while most of the drug remains on the surface of the skin. Therefore, the classical therapy regimen is irrational and requires improvement. Ensuring the accumulation of the drug composition in the pathology zone can increase its therapeutic effectiveness.
С целью снижения токсических эффектов фотохимиотерапии, были разработаны различные подходы к ее воплощению. Предлагалось применение таких добавок, как производные бензилиден-камфоры, которые способны поглощать часть падающего УФ-излучения и защищать тем самым кожный покров от негативных эффектов, связанных с применением псораленов в сочетании с УФА-излучением (патент № US4994263A, МПК A61K31/365). Была показана перспективность использования фотосенсибилизаторов на основе фурокумаринов ангелицинового ряда (соединения метилангелицина), обладающих меньшей токсичностью по сравнению с фурокумаринами псораленового ряда (патент № US5001147A, МПК A61K31/35). Кроме того, предлагалось использование коротковолнового ультрафиолета (УФБ излучение 311 нм) вместо длинноволнового (патент № US6979327B2, МПК A61N5/06).In order to reduce the toxic effects of photochemotherapy, various approaches to its implementation have been developed. It was proposed the use of additives such as benzylidene camphor derivatives, which are able to absorb part of the incident UV radiation and thereby protect the skin from the negative effects associated with the use of psoralen in combination with UVA radiation (patent No. US4994263A, IPC A61K31 / 365). The prospects of using photosensitizers based on the furocoumarins of the angelicin series (methylangelicin compounds), which have less toxicity compared to the psoralen series furocoumarins (Patent No. US5001147A, IPC A61K31 / 35), has been shown. In addition, it was proposed the use of a short-wave ultraviolet (UVB radiation of 311 nm) instead of a long-wave (patent No. US6979327B2, IPC A61N5 / 06).
В качестве прототипа выбрана указанная выше стандартная методика фотохимиотерапии витилиго, включающая аппликацию на поверхность кожи фотосенсибилизирующего средства, содержащего в качестве активного вещества псоралены, с последующим длинноволновым ультрафиолетом облучением, начиная с ½ минимальной эритемной дозы (МЭД), постепенно увеличивая до 5-6 МЭД [Опыт применения фотосенсибилизирующего препарата Аммифурин. Информация для специалистов// ЗАО «Фармцентр ВИЛАР». Москва, 2012. с. 12].As a prototype, the above standard vitiligo photochemotherapy technique was selected, which includes applying a photosensitizing agent containing psoralen as the active substance, followed by long-wave ultraviolet radiation, starting with ½ of the minimum erythema dose (MED), gradually increasing to 5-6 DER [ Experience with the use of the photosensitizing drug Ammifurin. Information for specialists // CJSC Pharmacenter VILAR. Moscow, 2012. 12].
Технической проблемой заявляемого изобретения является разработка способа амбулаторной фотохимиотерапии витилиго, отличающегося адресностью и терапевтической точностью.The technical problem of the claimed invention is the development of an outpatient photochemotherapy method of vitiligo, characterized by targeted and therapeutic accuracy.
Технический результат заявляемого изобретения заключается в формировании очагов репигментации методом фотохимиотерапии при оптимизации схемы терапии, достигаемой сокращением длительности ультрафиолетового облучения, количества процедур, усовершенствованием технологии внедрения лекарственного препарата, уменьшением продолжительности курсового лечения, возможность перевода данной категории пациентов со стационарного режима терапии на амбулаторный за счет повышения эффективности трансдермального переноса и аккумуляции активного вещества в коже и ее придатках (в частности, в волосяных фолликулах).The technical result of the claimed invention consists in the formation of foci of repigmentation by photochemotherapy while optimizing the treatment regimen, achieved by reducing the duration of ultraviolet radiation, the number of procedures, improving the technology for introducing the drug, reducing the duration of the course of treatment, the possibility of transferring this category of patients from inpatient to outpatient treatment by increasing the effectiveness of transdermal transfer and accumulation of active of a substance in the skin and its appendages (in particular, in the hair follicles).
Указанный технический результат достигается тем, что в способе фотохимиотерапии витилиго, включающем аппликацию на поверхность кожи фотосенсибилизирующего средства, содержащего в качестве активного вещества псоралены, с последующим длинноволновым ультрафиолетом облучением, согласно решению, в качестве фотосенсибилизирующего средства выбирают средство на основе субмикронных пористых частиц карбоната кальция размером менее 1.5 мкм, содержащих 2-20% активного вещества Амми большой плодов фурокумарины (Ammi majus fructuum furocumarines) в виде спиртовой суспензии в дозе 15-20 мг частиц/см2, что в пересчете на активное вещество соответствует 0.3-4 мг/см2, с последующим воздействием при помощи терапевтического низкоинтенсивного ультразвука интенсивностью не более 1 Вт/см2 в течение 1-4 минут, при этом облучение длинноволновым ультрафиолетом (УФА, λ=320-400 нм) осуществляют в течение времени, соответствующего 1/4-1/3 минимальной эритемной дозы (МЭД) УФА, не превышая 1/2 МЭД УФА, фотохимиотерапию проводят в виде повторных курсов, состоящих из 10 процедур частотой 1 раз в неделю, с интервалом 50 дней, при этом дополнительно проводят сеанс облучения ультрафиолетом без фотосенсибилизирующего средства 1 раз в неделю.The specified technical result is achieved by the fact that in the vitiligo photochemotherapy method, comprising applying to the skin surface a photosensitizing agent containing psoralen as an active substance, followed by long-wave ultraviolet irradiation, according to the solution, an agent based on submicron porous particles of calcium carbonate is selected as a photosensitizing agent less than 1.5 microns, containing 2-20% of the active substance Ammi large fruits furocoumarins (Ammi majus fructuum furocumarines) in the form of alcohol th suspension at a dose of 15-20 mg particles / cm 2 , which in terms of the active substance corresponds to 0.3-4 mg / cm 2 , followed by exposure using therapeutic low-intensity ultrasound with an intensity of not more than 1 W / cm 2 for 1-4 minutes while irradiation with long-wave ultraviolet (UVA, λ = 320-400 nm) is carried out for a time corresponding to 1 / 4-1 / 3 of the minimum erythema dose (MED) of UVA, not exceeding 1/2 MED of UVA, photochemotherapy is carried out in the form of repeated courses consisting of 10 procedures with a frequency of 1 time per week, with an interval of 50 days, while additionally conduct a session of irradiation with ultraviolet light without a
Постепенная деградация контейнеров в течение 12 дней, вплоть до их полной резорбции, внутри волосяных фолликулов обеспечивает пролонгированное высвобождение активного вещества, осуществляя его адресную доставку вглубь фолликула и прилегающие области. Согласно схеме терапии, общее количество процедур в год составляет 60 сеансов. Процедуры проводят в виде повторных курсов, состоящих из 10 процедур частотой 2 раза в неделю, включающих в себя 2 сеанса облучения ультрафиолетом, один из которых сопровождается аппликацией лекарственной композиции, с интервалом 50 дней. Количество курсов в год достигает 6. The gradual degradation of containers over 12 days, up to their complete resorption, inside the hair follicles provides a sustained release of the active substance, carrying out its targeted delivery deep into the follicle and surrounding areas. According to the treatment regimen, the total number of procedures per year is 60 sessions. The procedures are carried out in the form of repeated courses consisting of 10 procedures with a frequency of 2 times a week, including 2 sessions of irradiation with ultraviolet light, one of which is accompanied by the application of the medicinal composition, with an interval of 50 days. The number of courses per year reaches 6.
Изобретение поясняется чертежами, описание которых приведено ниже.The invention is illustrated by drawings, the description of which is given below.
Фиг. 1. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а, в) и через 48 часов после (б, г) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 0.5 минут (1/20 МЭД): изображения (а, б) и (в, г) соответствуют двум разным респондентам.FIG. 1. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a, c) and 48 hours after (b, d) application of a free AMFF solution, followed by exposure to long-wave ultraviolet for 0.5 minutes (1/20 DER): images (a, b) and (c, d) correspond to two different respondents.
Фиг. 2. Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а, в) и через 48 часов после (б, г) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 0.5 минут (1/20 МЭД): изображения (а, б) и (в, г) соответствуют двум разным респондентам.FIG. 2. Macrographs of the forearm areas of a healthy volunteer before (a, c) and 48 hours after (b, d) application of a free AMFF solution, followed by exposure to long-wave ultraviolet for 0.5 minutes (1/20 DER): images (a, b) and (c, d) correspond to two different respondents.
Фиг. 3. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а, в) и через 48 часов после (б, г) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 5 минут (1/2 МЭД): изображения (а, б) и (в, г) соответствуют двум разным респондентам.FIG. 3. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a, c) and 48 hours after (b, d) application of a free solution of AMFF, followed by exposure to long-wave ultraviolet for 5 minutes (1/2 DER): images (a, b) and (c, d) correspond to two different respondents.
Фиг. 4. Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а, в) и через 48 часов после (б, г) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 5 минут (1/2 МЭД): изображения (а, б) и (в, г) соответствуют двум разным респондентам.FIG. 4. Macrographs of the forearm areas of a healthy volunteer before (a, c) and 48 hours after (b, d) application of a free AMFF solution, followed by exposure to long-wave ultraviolet for 5 minutes (1/2 DER): images (a, b) and (c, d) correspond to two different respondents.
Фиг. 5. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и через 48 часов после (б) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 3 минут (1/3 МЭД).FIG. 5. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and 48 hours after (b) the application of a free solution of AMFF, followed by irradiation with long-wave ultraviolet light for 3 minutes (1/3 DER).
Фиг. 6. Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и через 48 часов после (б) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 3 минут (1/3 МЭД).FIG. 6. Photographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and 48 hours after (b) the application of a free AMFF solution, followed by exposure to long-wave ultraviolet light for 3 minutes (1/3 DER).
Фиг. 7. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 15 дней после облученияFIG. 7. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d) the application of a free AMFF solution, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 15 days after irradiation
Фиг. 8.Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г, д) нанесения свободного раствора AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 15 дней после облучения, д – через 75 дней после облучения.FIG. 8.Macrophotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d, e) the application of a free solution of AMFF, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 15 days after irradiation, d - 75 days after irradiation.
Фиг. 9. Изображения ненагруженных частиц карбоната кальция, полученные методом сканирующей электронной микроскопии при различных увеличениях.FIG. 9. Images of unloaded particles of calcium carbonate obtained by scanning electron microscopy at various magnifications.
Фиг. 10. Изображения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, полученные методом сканирующей электронной (а) и флуоресцентной конфокальной микроскопии (б)FIG. 10. Images of calcium carbonate particles containing AMFF photosensitizer obtained by scanning electron (a) and fluorescence confocal microscopy (b)
Фиг. 11. А-сканы контрольного участка кожи (а) и участка с внедрением частиц карбоната кальция, нагруженных AMFF (б), полученные in vivo с помощью оптической когерентной томографии. Длина масштабного отрезка соответствует 500 мкм, прямоугольниками выделены пустые (а) и обильно заполненные частицами (б) волосяные фолликулы.FIG. 11. A-scans of the control area of the skin (a) and the area with the introduction of particles of calcium carbonate loaded with AMFF (b), obtained in vivo using optical coherence tomography. The length of the scale segment corresponds to 500 μm, empty (a) and hair follicles abundantly filled with particles (b) are highlighted by rectangles.
Фиг. 12. Флуоресцентные изображения волоса, изъятого из фолликула, до (а–в) и после внедрения нагруженных AMFF частиц (г–е), полученные методом сканирующей лазерной конфокальной микроскопии: а, г - светлопольные изображения; б, д - флуоресцентные изображения; в, е - наложение светлопольного и флуоресцентного каналов.FIG. 12. Fluorescence images of hair removed from the follicle before (a – c) and after the introduction of loaded AMFF particles (g – f) obtained by scanning laser confocal microscopy: a, d — bright-field images; b, d - fluorescence images; c, e - superposition of bright field and fluorescent channels.
Фиг. 13. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г) нанесения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 72 часа после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 15 дней после облучения.FIG. 13. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d) the application of calcium carbonate particles containing the AMFF photosensitizer, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - 72 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 15 days after irradiation.
Фиг. 14. Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г, д) нанесения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 15 дней после облучения, д – через 75 дней после облучения.FIG. 14. Macrographs of the forearm areas of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d, e) the application of calcium carbonate particles containing the AMFF photosensitizer, followed by exposure to long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - after 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 15 days after irradiation, d - 75 days after irradiation.
Фиг. 15. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г) нанесения ненагруженных частиц карбоната кальция, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 15 дней после облучения.FIG. 15. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d) the application of unloaded particles of calcium carbonate, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 15 days after irradiation.
Фиг. 16. Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г) нанесения ненагруженных частиц карбоната кальция, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 75 дней после облучения.FIG. 16. Macrographs of the forearm areas of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d) the application of unloaded particles of calcium carbonate, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 75 days after irradiation.
Фиг. 17. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г) ультразвукового воздействия длительность 2 минут интенсивностью 0.5 Вт/см2, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 15 дней после облучения.FIG. 17. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d) ultrasonic exposure lasting 2 minutes with an intensity of 0.5 W / cm 2 , followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - through 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 15 days after irradiation.
Фиг. 18. Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после (б, в, г) ультразвукового воздействия длительность 2 минут интенсивностью 0.5 Вт/см2, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 75 дней после облучения.FIG. 18. Photographs of the forearm areas of a healthy volunteer before (a) and after (b, c, d) ultrasonic exposure lasting 2 minutes with an intensity of 0.5 W / cm 2 , followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - through 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, g - 75 days after irradiation.
Фиг. 19. Микрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после облучения длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 15 дней после облучения.FIG. 19. Microphotographs of the areas of the forearm of a healthy volunteer before (a) and after irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, d - 15 days after irradiation .
Фиг. 20. Макрофотографии зон предплечья здорового добровольца до (а) и после облучения длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД): б – через 48 часов после облучения, в – через 7 дней после облучения, г – через 75 дней после облучения.FIG. 20. Photographs of the forearm areas of a healthy volunteer before (a) and after exposure to long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER): b - 48 hours after irradiation, c - 7 days after irradiation, d - 75 days after irradiation .
Фиг. 21. Кинетика индекса меланина: А – зона с внедрением ненагруженных частиц карбоната кальция; график Б – зона с внедрением частиц карбоната кальция, нагруженных фотосенсибилизатором; график В – зона с аппликацией раствора фотосенсибилизатора. 1 – до нанесения исследуемой композиции и УФА-облучения; 2 – через 15 минут после УФА-облучения; 3 – через 24 часа; 4 – через 48 часов; 5 – через 96 часов; 6 – через 120 часов; 7 – через 168 часов (7 дней); 8 – через 192 часа; 9 – через 360 часов (15 дней) после УФА-облучения.FIG. 21. Kinetics of the melanin index: A - zone with the introduction of unloaded particles of calcium carbonate; graph B - zone with the introduction of particles of calcium carbonate loaded with a photosensitizer; graph B - zone with the application of the photosensitizer solution. 1 - before applying the test composition and UVA irradiation; 2 - 15 minutes after UVA exposure; 3 - after 24 hours; 4 - after 48 hours; 5 - after 96 hours; 6 - after 120 hours; 7 - after 168 hours (7 days); 8 - after 192 hours; 9 - 360 hours (15 days) after UVA exposure.
Фиг. 22. Микрофотографии зоны в области очага витилиго у добровольца до и после нанесения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД).FIG. 22. Microphotographs of the zone in the area of the vitiligo focus of the volunteer before and after the application of calcium carbonate particles containing the AMFF photosensitizer, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER).
Фиг. 23. Макрофотографии зоны в области очага витилиго у добровольца до и после нанесения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД).FIG. 23. Closeups of the zone in the area of the vitiligo focus of the volunteer before and after the application of calcium carbonate particles containing the AMFF photosensitizer, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER).
Фиг. 24. Макрофотографии, сделанные в лучах лампы Вуда, зоны в области очага витилиго у добровольца до и после нанесения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД).FIG. 24. Photographs taken in the rays of the Wood lamp, zones in the area of the vitiligo focus of the volunteer before and after the application of calcium carbonate particles containing the AMFF photosensitizer, followed by irradiation with long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER).
Фиг. 25. Микрофотографии контрольной зоны в области очага витилиго у добровольца (без нанесения частиц и воздействия длинноволновым ультрафиолетом).FIG. 25. Microphotographs of the control zone in the area of the vitiligo focus in a volunteer (without particle application and exposure to long-wave ultraviolet light).
Фиг. 26. Макрофотографии контрольной зоны в области очага витилиго у добровольца (без нанесения частиц и воздействия длинноволновым ультрафиолетом).FIG. 26. Closeups of a control zone in the area of a vitiligo focus in a volunteer (without particle application and exposure to long-wave ultraviolet).
Фиг. 27. Макрофотографии контрольной зоны в области очага витилиго у добровольца (без нанесения частиц и воздействия длинноволновым ультрафиолетом), сделанные в лучах лампы Вуда.FIG. 27. Closeups of the control zone in the area of the volunteer vitiligo focus (without particle application and exposure to long-wave ultraviolet), taken in the rays of the Wood lamp.
Фиг. 28. Микрофотографии зоны в области за пределами очага витилиго у добровольца (здоровая область) до и после нанесения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД).FIG. 28. Microphotographs of the zone in the area outside the volunteer vitiligo focus (healthy area) before and after the application of calcium carbonate particles containing the AMFF photosensitizer, followed by exposure to long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER).
Фиг. 29. Макрофотографии зоны в области за пределами очага витилиго у добровольца (здоровая область) до и после нанесения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор AMFF, сопровождаемого облучением длинноволновым ультрафиолетом в течение 2.5 минут (1/4 МЭД).FIG. 29. Closeups of the area in the area outside the volunteer vitiligo focus (healthy area) before and after the application of calcium carbonate particles containing the AMFF photosensitizer, followed by exposure to long-wave ultraviolet for 2.5 minutes (1/4 DER).
Фиг. 30. Микрофотографии контрольной зоны в области за пределами очага витилиго у добровольца (без нанесения частиц и воздействия длинноволновым ультрафиолетом).FIG. 30. Microphotographs of the control zone in the area outside the focus of vitiligo in a volunteer (without applying particles and exposure to long-wave ultraviolet light).
Фиг. 31. Микрофотографии контрольной зоны в области за пределами очага витилиго у добровольца (без нанесения частиц и воздействия длинноволновым ультрафиолетом).FIG. 31. Microphotographs of the control zone in the area outside the focus of vitiligo in a volunteer (without applying particles and exposure to long-wave ultraviolet light).
Позициями на фигурах обозначены:The positions in the figures indicated:
1 – незаполненные волосяные фолликулы;1 - unfilled hair follicles;
2 – заполнение волосяных фолликулов частицами карбоната кальция;2 - filling of hair follicles with calcium carbonate particles;
3 – россыпь частиц карбоната кальция.3 - placer particles of calcium carbonate.
Раскрытие изобретения.Disclosure of the invention.
Предлагаемый способ фотохимиотерапии витилиго предполагает применение иммобилизованной в микроконтейнеры формы фотосенсибилизатора фурокумаринового ряда (псоралена) в комбинации с длинноволновым ультрафиолетовым излучением.The proposed method of vitiligo photochemotherapy involves the use of a furocoumarin photosensitizer (psoralen) form immobilized in microcontainers in combination with long-wave ultraviolet radiation.
Контейнеры представляют собой микроразмерные или субмикронные пористые частицы карбоната кальция в кристаллографической модификации ватерита. Предлагаемая матрица является биосовместимой, биоразлагаемой и обладает рядом таких достоинств, как мягкие условия разрушения (растворение при рН<6.5), простота приготовления и низкая себестоимость. Синтез частиц осуществляется путем кристаллизации из раствора при непосредственном сливании стерильных эквиобъемных эквимолярных растворов солей хлорида кальция (CaCl2) и карбоната натрия (Na2CO3) с последующей промывкой образовавшегося осадка 95% этиловым спиртом и сушкой в асептических условиях при температуре 25-60 °С. The containers are micro-sized or sub-micron porous particles of calcium carbonate in crystallographic modification of vaterite. The proposed matrix is biocompatible, biodegradable and has a number of advantages such as mild fracture conditions (dissolution at pH <6.5), ease of preparation and low cost. Particles are synthesized by crystallization from a solution by directly draining sterile equivolume equimolar solutions of calcium chloride salts (CaCl 2 ) and sodium carbonate (Na 2 CO 3 ), followed by washing the precipitate with 95% ethyl alcohol and drying under aseptic conditions at a temperature of 25-60 ° FROM.
Высокопористая архитектура ватеритных контейнеров обеспечивает иммобилизацию до 20 вес.% фотосенсибилизатора псораленового ряда (под вес.% подразумевается отношение массы иммобилизованного активного вещества к массе частиц).The highly porous architecture of the laterite containers provides immobilization of up to 20% by weight of the psoralen photosensitizer (by weight% refers to the ratio of the mass of the immobilized active substance to the mass of particles).
Предлагаемый способ фотохимиотерапии включает использование запатентованного ранее способа трансдермальной доставки биологически активных веществ (патент № RU2633928 МПК A61K9/16) с целью повышения эффективности трансдермального переноса и аккумуляции фотосенсибилизатора в коже и в волосяных фолликулах. Лекарственная форма представляет собой порошок для приготовления суспензий для наружного применения. Предполагается диспергирование порционной навески сухих частиц в медицинском антисептическом растворе до концентрации диапазона 0.1-1.0 мг/мл непосредственно перед применением. Трансфолликулярная доставка контейнеров осуществляется путем аппликации суспензии частиц на поверхность кожи в области патологии до достижения дозы 15-20 мг частиц/см2, что в пересчете на активное вещество соответствует 0.3-4 мг/см2, и последующего их внедрения при помощи терапевтического ультразвука (0.89-1 МГц) интенсивностью не более 1 Вт/см2 в течение 1-4 минут. Такой подход обеспечивает увеличение эффективности и глубины заполнения волосяных фолликулов ватеритными контейнерами, а значит позволяет повысить эффективность трансдермального переноса и аккумуляции в коже и волосяных фолликулах фотосенсибилизатора, содержащегося в них. The proposed method of photochemotherapy involves the use of a previously patented method for transdermal delivery of biologically active substances (patent No. RU2633928 IPC A61K9 / 16) in order to increase the efficiency of transdermal transfer and accumulation of the photosensitizer in the skin and in the hair follicles. The dosage form is a powder for the preparation of suspensions for external use. It is intended to disperse a portioned portion of dry particles in a medical antiseptic solution to a concentration range of 0.1-1.0 mg / ml immediately before use. The transfollicular delivery of containers is carried out by applying a suspension of particles to the skin surface in the pathology region until a dose of 15-20 mg particles / cm 2 is reached, which, in terms of the active substance, corresponds to 0.3-4 mg / cm 2 , and their subsequent introduction using therapeutic ultrasound ( 0.89-1 MHz) with an intensity of not more than 1 W / cm 2 for 1-4 minutes. This approach provides an increase in the efficiency and depth of filling the hair follicles with lateritic containers, which means that it can increase the efficiency of transdermal transfer and accumulation of the photosensitizer contained in the skin and hair follicles.
Известно, что при витилиго, последними участки депигментации покидают меланоциты, локализующиеся в волосяных фолликулах [Pathak M.A., Riley F.C., Fitspatrik T.B.// Journal of Invest. Dermatol. 1962. 435–443]. Именно эти меланоциты являются привлекательной мишенью для воздействия лекарственных препаратов и ультрафиолетовых лучей. Таким образом, при адресном введении осуществляется доставка фотосенсибилизатора в участки максимальной концентрации меланоцитов. Активированные меланоциты способны мигрировать с внешнего корневого влагалища волосяного фолликула в базальный клеточный слой репигментировать ахромические участки.In vitiligo, melanocytes located in the hair follicles are the last to leave depigmentation sites [Pathak M.A., Riley F.C., Fitspatrik T.B. // Journal of Invest. Dermatol. 1962. 435–443]. It is these melanocytes that are an attractive target for exposure to drugs and ultraviolet rays. Thus, with targeted administration, the photosensitizer is delivered to areas of maximum melanocyte concentration. Activated melanocytes are able to migrate from the external root vagina of the hair follicle to the basal cell layer to repigrate achromic sites.
Таким образом, предлагаемая в заявляемом способе форма фотосенсибилизатора, иммобилизованного в матрицу частиц карбоната кальция, отличается от обычной наружной формы препаратов, во-первых, адресностью действия, поскольку обеспечивает доставку лекарственной композиции в зоне сосредоточения стволовых клеток меланоцитов (пространство волосяных фолликулов), что приводит к увеличению локальной концентрации действующего вещества в зоне патологии и позволяет повысить эффективность терапии. Использование подхода трансдермальной доставки фотосенсибилизаторов позволит снизить токсические эффекты и нагрузку на ЖКТ, благодаря отсутствию эффекта первого прохождения [Kajimoto K. et al. International Journal of Pharmaceutics, 2011, 403, p. 57-65].Thus, the form of the photosensitizer immobilized in the matrix of calcium carbonate particles proposed in the claimed method differs from the usual external form of the preparations, firstly, by the targeted action, since it ensures the delivery of the drug composition in the area of concentration of stem cells of melanocytes (the space of hair follicles), which to increase the local concentration of the active substance in the pathology zone and can improve the effectiveness of therapy. Using the transdermal photosensitizer delivery approach will reduce toxic effects and the load on the digestive tract, due to the absence of the first-pass effect [Kajimoto K. et al. International Journal of Pharmaceutics, 2011, 403, p. 57-65].
Кроме того, такой препарат обладает пролонгированным действием, поскольку высвобождение иммобилизованного фотосенсибилизатора в пространстве сально-волосяного фолликула происходит в процессе деградации внедренных частиц (в течение 8-12 дней). Применение такого подхода к фототерапии витилиго позволяет сократить число терапевтических процедур, а также обеспечить перевод пациентов с хроническими дерматозами со стационарного режима терапии на амбулаторный. In addition, this drug has a prolonged effect, since the release of the immobilized photosensitizer in the space of the sebaceous hair follicle occurs during the degradation of the embedded particles (within 8-12 days). The application of this approach to vitiligo phototherapy can reduce the number of therapeutic procedures, as well as ensure the transfer of patients with chronic dermatoses from an inpatient to an outpatient treatment regimen.
После процедуры внедрения частиц с фотосенсибилизатором осуществляется смывка их избытка с поверхности кожи при помощи ватного тампона.After the procedure for introducing particles with a photosensitizer, their excess is washed off with the help of a cotton swab.
Для каждого респондента предварительно определяется минимальная эритемная (МЭД) - условная единица, применяемая в фототерапии для обозначения количества энергии ультрафиолетовых лучей, которое вызывает пороговую, т. е. минимальную, но ясно очерченную, эритемную реакцию кожи.For each respondent, the minimum erythema (MED) is preliminarily determined - a conventional unit used in phototherapy to indicate the amount of energy of ultraviolet rays, which causes a threshold, i.e., minimal, but clearly defined, erythema skin reaction.
Согласно предлагаемой схеме фототерапии витилиго, проводится облучение длинноволновым ультрафиолетом (УФА, λ=320-400 нм) зоны внедрения частиц в течение 2-3 минут, что соответствует 1/4 - 1/3 минимальной эритемной дозы (МЭД) УФА, не превышая 1/2 МЭД.According to the proposed scheme of vitiligo phototherapy, long-wave ultraviolet (UVA, λ = 320-400 nm) particles are introduced into the injection zone for 2-3 minutes, which corresponds to 1/4 - 1/3 of the minimum erythema dose (MED) of UVA, not exceeding 1 / 2 MED.
Фотосенсибилизатор, применяемый в сочетании с УФА облучением, повышает чувствительность кожи к ультрафиолетовым лучам и индуцирует, тем самым, образование меланина в меланоцитах эпидермиса и волосяных фолликулов, что способствует восстановлению утраченной пигментации при витилиго: меланин синтезируется из α-амино-β-(п-гидроксифенил) пропионовой кислоты (тирозина) в меланоцитах в результате цепочки окислительных превращений, а затем поступает в клетки эпидермиса – кераноциты, накапливается и распространяется, восстанавливая утраченную пигментацию участка кожи. Механизм клинического действия связывают с фотоприсоединением псораленов к молекулам ДНК слоя эпидермиса (цитотоксический эффект) и образованием реакционноспособных фотоокисленных молекул, способных ковалентно присоединяться к белкам, окислять ненасыщенные жирные кислоты [Ягодвик Н. З., Белугина И. Н. Принципы терапии псориаза //Международный медицинский журнал. – 2004]. Это приводит к торможению клеточной пролиферации, подавлению патологической кератинизации, оказывает влияние на метаболизм простагландинов, проницаемость клеточных мембран. Накопление окисленных продуктов, повышение окислительного потенциала кожи и ингибирование пролиферативных процессов оказывают терапевтический эффект.The photosensitizer used in combination with UVA irradiation increases the skin's sensitivity to ultraviolet rays and thereby induces the formation of melanin in epidermal melanocytes and hair follicles, which helps restore lost pigmentation in vitiligo: melanin is synthesized from α-amino-β- (p- hydroxyphenyl) propionic acid (tyrosine) in melanocytes as a result of a chain of oxidative transformations, and then enters the epidermal cells - keranocytes, accumulates and spreads, restoring lost pigmentation of the skin area. The mechanism of clinical action is associated with the photoaddition of psoralen to the DNA molecules of the epidermis layer (cytotoxic effect) and the formation of reactive photooxidized molecules that can covalently attach to proteins, oxidize unsaturated fatty acids [Yagodvik N.Z., Belugina I.N. Principles of psoriasis therapy // International medical journal. - 2004]. This leads to inhibition of cell proliferation, the suppression of pathological keratinization, affects the metabolism of prostaglandins, the permeability of cell membranes. The accumulation of oxidized products, an increase in the oxidative potential of the skin and inhibition of proliferative processes have a therapeutic effect.
Схема терапии предусматривает общеклиническое исследование перед началом терапии (сбор анамнеза, осмотр, проведение лабораторных исследований: общий анализ крови, биохимический анализ крови, общий анализ мочи). Кроме того, каждому респонденту на протяжении всего периода исследования проводится мониторинг лабораторных общеклинических показателей (общий анализ крови, биохимический анализ крови, общий анализ мочи) каждые 10 дней. The treatment regimen provides for a general clinical study before starting therapy (medical history, examination, laboratory tests: general blood test, biochemical blood test, general urine test). In addition, each respondent throughout the study period monitors laboratory general clinical indicators (general blood test, biochemical blood test, general urine test) every 10 days.
Согласно предлагаемой схеме терапии общее количество процедур в год составляет 60 сеансов. Процедуры проводят в виде повторных курсов, состоящих из 10 процедур (2 раза в неделю, включающих в себя 2 сеанса облучения ультрафиолетом, один из которых сопровождается аппликацией лекарственной композиции) с интервалом 50 дней. Количество курсов в год достигает 6. According to the proposed treatment regimen, the total number of procedures per year is 60 sessions. The procedures are carried out in the form of repeated courses consisting of 10 procedures (2 times a week, including 2 sessions of irradiation with ultraviolet light, one of which is accompanied by the application of the medicinal composition) with an interval of 50 days. The number of courses per year reaches 6.
Примеры реализации способаMethod implementation examples
Здоровые добровольцы. Healthy volunteers.
Пример 1. УФА-облучение с применением раствора фотосенсибилизатораExample 1. UVA irradiation using a solution of a photosensitizer
Исследование проводится in vivo на внешней поверхности предплечья здорового добровольца: возрастной диапазон – 25 - 30 лет; 1-3 фототип кожи (по Фитцпатрику). Перед проведением исследования респонденты подписали информированное согласие на выполнение манипуляций. Проводился мониторинг состояния волосяных фолликулов и уровня меланина в исследуемой области с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия). Создание макро- и микроизображений производилось компетентным практикующим врачом, чтобы избежать диверсификации во время процедуры. Анализ данных был выполнен двумя независимыми специалистами.The study is carried out in vivo on the outer surface of the forearm of a healthy volunteer: age range - 25-30 years; 1-3 skin phototype (according to Fitzpatrick). Before conducting the study, respondents signed an informed consent to perform manipulations. The condition of the hair follicles and the level of melanin in the study area was monitored using the Soft Plus apparatus (Callegari, Italy). Macro and micro images were created by a competent practitioner in order to avoid diversification during the procedure. Data analysis was performed by two independent experts.
Для каждого больного предварительно определяется минимальная эритемная доза (МЭД) ультрафиолетового облучения - условная единица, применяемая в фототерапии для обозначения количества энергии ультрафиолетовых лучей, которое вызывает пороговую (т. е. минимальную, но ясно очерченную) эритемную реакцию кожи.For each patient, the minimum erythema dose (MED) of ultraviolet radiation is preliminarily determined - the conventional unit used in phototherapy to indicate the amount of ultraviolet energy that causes a threshold (i.e., minimal, but clearly defined) skin erythema reaction.
В качестве фотосенсибилизатора псораленового ряда применяется препарат «Аммифурин» (Россия) - Амми большой плодов фурокумарины (Ammi majus fructuum furocumarines, AMFF). Осуществляется нанесение раствора AMF на поверхность кожи здоровых добровольцев с последующим воздействием при помощи низкоинтенсивного терапевтического ультразвука УЗТ-1.01Ф («МедТеКо», Россия) частотой 0.88 МГц и интенсивностью 0.4 Вт/см2 в течение 2 минут на область аппликации.As a photosensitizer of the psoralen row, the drug Ammifurin (Russia) is used - Ammi large fruits of furocoumarin (Ammi majus fructuum furocumarines, AMFF). AMF solution is applied to the skin surface of healthy volunteers, followed by exposure using a low-intensity therapeutic ultrasound UZT-1.01F (MedTeCo, Russia) with a frequency of 0.88 MHz and an intensity of 0.4 W / cm 2 for 2 minutes on the application area.
После внедрения раствора фотосенсибилизатора осуществляется смывка его избытка с поверхности кожи. При визуальном осмотре в зоне нанесения фотосенсибилизатора до облучения не наблюдалось дополнительных очагов пигментации, отсутствовал сосудистый компонент (Фиг.1а, 1в, 2а, 2в, 3а, 3в, 4а, 4в, 5а, 6а, 7а, 8а).After the introduction of the photosensitizer solution, the excess is washed off from the skin surface. When visual inspection in the area of application of the photosensitizer before irradiation was not observed additional foci of pigmentation, there was no vascular component (Figa, 1B, 2A, 2B, 3A, 3B, 4A, 4B, 5A, 6A, 7A, 8A).
Далее осуществляется сеанс УФА-облучения с помощью люминесцентной лампы мощностью 9 Вт (METEC-SUNNY 2000, Германия). С целью подбора оптимального режима облучения, время экспозиции варьировалось в пределах от 0.5 мин (1/20 МЭД) до 5 минут (1/2 МЭД). Результаты представлены в виде макрофотографий очага внедрения до (Фиг. 2a, 2в, 4а, 4в, 6а, 8а) и после облучения (Фиг. 2б, 2г, 4б, 4г, 6б, 8б), а также микрофотографий дерматоскопической картины с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия) до (Фиг. 1а, 1в, 3а, 3в, 5а, 7а) и через 48 часов после облучения (Фиг. 1б, 1г, 3б, 3г, 5б, 7б).Next, a UVA irradiation session is performed using a 9 W fluorescent lamp (METEC-SUNNY 2000, Germany). In order to select the optimal irradiation regime, the exposure time varied from 0.5 min (1/20 DER) to 5 minutes (1/2 DER). The results are presented as macrographs of the insertion site before (Fig. 2a, 2c, 4a, 4c, 6a, 8a) and after irradiation (Fig. 2b, 2g, 4b, 4g, 6b, 8b), as well as micrographs of the dermatoscopic picture using the apparatus Soft Plus (Callegari, Italy) before (Fig. 1a, 1c, 3a, 3c, 5a, 7a) and 48 hours after irradiation (Fig. 1b, 1g, 3b, 3g, 5b, 7b).
При экспозиции ультрафиолетового излучения в течение 0.5 мин двум респондентам с 1 и 2 фототипом кожи (что соответствовало 1/20 МЭД данных респондентов) при клиническом осмотре не наблюдалось появления очагов пигментации в зоне нанесения раствора (Фиг. 2б, 2г). При проведении дерматоскопического исследования клинически значимых изменений не выявлено (Фиг. 1б, 1г). Данный режим облучения признан неэффективным для проведения терапии.When exposure to ultraviolet radiation for 0.5 min, two respondents with 1 and 2 phototypes of the skin (which corresponded to 1/20 of the MED data of the respondents) during clinical examination did not show the appearance of foci of pigmentation in the area of the solution (Fig. 2b, 2d). When conducting a dermatoscopic examination, clinically significant changes were not detected (Fig. 1b, 1d). This radiation regimen was recognized as ineffective for therapy.
При облучении области нанесения фотосенсибилизатора двум респондентам со 2 и 3 фототипом кожи в течение 5 мин (что соответствовало ½ МЭД данных респондентов) при клиническом осмотре через 48 часов после проведения сеанса терапии наблюдалось появление очагов эритемы ярко-розового цвета (Фиг. 4б, 4г). При проведении дерматоскопии отмечалось появление ярко выраженного сосудистого компонента, чешуек белесоватого цвета (Фиг. 3б, 3г). Субъективно респондентов беспокоили чувство жжения и незначительный зуд. Данный режим облучения признан избыточным и принят за крайнюю границу УФА облучения, превышение которой считается неприемлемым при проведении терапии.When irradiating the photosensitizer application area to two respondents with 2 and 3 skin phototypes for 5 min (which corresponded to ½ of the MED data of the respondents), 48 hours after the treatment session, the appearance of bright pink erythema foci was observed (Fig. 4b, 4d) . When conducting dermatoscopy, the appearance of a pronounced vascular component, whitish scales (Fig. 3b, 3d) was noted. Subjectively, respondents were worried about a burning sensation and slight itching. This irradiation regimen was recognized as excessive and was taken as the extreme boundary of UVA irradiation, the excess of which is considered unacceptable during therapy.
При проведении сеанса фототерапии с 3-минутной экспозицией ультрафиолетового излучения респонденту со 2 фототипом кожи (что соответствовало 1/3 МЭД данного респондента) при визуальном осмотре наблюдалось появление очагов эритемы светло-розового цвета (Фиг. 6б). Дерматоскопическое исследование выявило наличие выраженного сосудистого компонента, очагов пигментации светло-коричневого цвета, а также чешуек белесоватого цвета через 48 часов после облучения (Фиг. 5б). Однако, при проведении терапии респондента беспокоило незначительно выраженное чувство жжения в месте внедрения. Режим признан менее эффективным, ввиду присутствия субъективных ощущений, но приемлемым для проведения терапии.When conducting a phototherapy session with a 3-minute exposure to ultraviolet radiation to a respondent with 2 skin phototypes (which corresponded to 1/3 of the respondent's MED), a visual appearance of light pink erythema foci was observed (Fig. 6b). A dermatoscopic examination revealed a pronounced vascular component, light brown pigmentation foci, and also whitish scales 48 hours after irradiation (Fig. 5b). However, during therapy, the respondent was disturbed by a slightly expressed burning sensation at the injection site. The regimen was recognized as less effective, due to the presence of subjective sensations, but acceptable for therapy.
При экспозиции ультрафиолетового излучения в течение 2.5 мин респонденту с 1 фототипом кожи (что соответствовало 1/4 МЭД данного респондента) при клиническом осмотре через 48 часов наблюдалось появление очагов пигментации в зоне нанесения раствора от коричневого до красно-коричневого цвета (Фиг. 8б). При проведении дерматоскопического исследования отмечалось диффузное распределения пигмента с выраженным сосудистым компонентом и большим количеством чешуек белесоватого цвета (Фиг. 7б). Данный режим облучения был принят за оптимальный и внесен в схему проведения фотохимиотерапии.When exposure to ultraviolet radiation for 2.5 min, the respondent with 1 skin phototype (which corresponded to 1/4 of the MED of this respondent) upon clinical examination after 48 hours, the appearance of foci of pigmentation in the area of application of the solution from brown to red-brown (Fig. 8b). When conducting a dermatoscopic examination, a diffuse distribution of the pigment with a pronounced vascular component and a large number of whitish scales was noted (Fig. 7b). This irradiation mode was taken as optimal and included in the scheme of photochemotherapy.
Дальнейший мониторинг области облучения ультрафиолетом показал постепенное прогрессирование изменений клинической картины с заметным усилением интенсивности пигментации: область постепенно приобретала красно-коричневую окраску (Фиг. 7в, 8в) и в результате был сформирован очаг гиперпигментации ярко-коричневого цвета овальной формы с четкими границами (Фиг. 7г, 8г). Через 75 дней зона нанесения имела выраженный коричневый оттенок, было отмечено разрастание и выравнивание пигментации по всей области внедрения фотосенсибилизатора (Фиг. 8д).Further monitoring of the ultraviolet irradiation area showed a gradual progression of changes in the clinical picture with a marked increase in pigmentation intensity: the area gradually acquired a red-brown color (Figs. 7c, 8c) and, as a result, a focus of hyperpigmentation of a bright brown oval shape with clear boundaries (Fig. 7g, 8g). After 75 days, the application zone had a pronounced brown hue, there was an increase and alignment of pigmentation throughout the area of implementation of the photosensitizer (Fig. 8e).
На протяжении всего периода проведения исследования побочных эффектов со стороны органов и систем у респондентов не наблюдалось. В общеклинических анализах (общем анализе крови, биохимическом анализе крови, общем анализе мочи) патологии выявлено не было.Throughout the entire period of the study, side effects from organs and systems of the respondents were not observed. In general clinical analyzes (general blood test, biochemical blood test, general urinalysis), no pathology was detected.
Таким образом, было установлено, что нанесение раствора фотосенсибилизатора с последующим УФА-облучением зоны нанесения в течение 2.5 минут (1/4 МЭД) приводит к появлению очагов пигментации с относительно равномерным характером распределения по всей зоне внедрения. Thus, it was found that the application of a photosensitizer solution followed by UVA irradiation of the application zone for 2.5 minutes (1/4 DER) leads to the appearance of foci of pigmentation with a relatively uniform distribution throughout the insertion zone.
Пример 2. УФА-облучение с применением фотосенсибилизатора, иммобилизованного в частицы карбоната кальцияExample 2. UVA irradiation using a photosensitizer immobilized in particles of calcium carbonate
Синтез ватеритных контейнеров производится по методике [Parakhonskiy B.V. et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 51 (2012) 1195–1197], согласно которой 1-М растворы дигидрата хлорида кальция и карбоната натрия одинаковых объемов смешиваются с этиленгликолем, а затем между собой, содержание ЭГ в смеси составляет 83% от ее общего объема. Перемешивание реакционной смеси осуществляется с помощью магнитной мешалки со скоростью 600 оборотов в минуту в течение 3 часов при комнатной температуре. Далее проводится троекратная промывка осадка частиц карбоната кальция трижды 95% этиловым спиртом и сушка при температуре 60оС в течение 30 минут. В качестве фотосенсибилизатора псораленового ряда применяется препарат «Аммифурин» (Россия) - Амми большой плодов фурокумарины (Ammi majus fructuum furocumarines, AMFF). Иммобилизация фотосенсибилизатора осуществляется методом его адсорбции из раствора, для чего навеска сухих частиц карбоната кальция выдерживается в растворе иммобилизуемого вещества в течение 30 минут при непрерывном встряхивании с помощью шейкера. Затем осадок частиц однократно промывается 95% раствором этилового спирта и высушивается в асептических условиях при температуре 25 °С. The synthesis of material containers is carried out according to the method of [Parakhonskiy BV et al. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 51 (2012) 1195–1197], according to which 1-M solutions of calcium chloride dihydrate and sodium carbonate of equal volumes are mixed with ethylene glycol, and then with each other, the EG content in the mixture is 83% of its total volume. Stirring of the reaction mixture is carried out using a magnetic stirrer at a speed of 600 rpm for 3 hours at room temperature. Further washing is carried out threefold precipitate calcium carbonate particles three times 95% ethyl alcohol and drying at 60 ° C for 30 minutes. As a photosensitizer of the psoralen row, the drug Ammifurin (Russia) is used - Ammi large fruits of furocoumarin (Ammi majus fructuum furocumarines, AMFF). The photosensitizer is immobilized by its adsorption from solution, for which a sample of dry calcium carbonate particles is kept in the solution of the immobilized substance for 30 minutes with continuous shaking using a shaker. Then the particle precipitate is washed once with a 95% solution of ethyl alcohol and dried under aseptic conditions at a temperature of 25 ° C.
Далее проводится интрафолликулярное внедрение полученных носителей фотосенсибилизатора путем аппликации суспензии частиц карбоната кальция на поверхность кожи здоровых добровольцев с последующей обработкой зоны нанесения низкоинтенсивным терапевтическим ультразвуком УЗТ-1.01Ф («МедТеКо», Россия) частотой 0.88 МГц и интенсивностью 0.4 Вт/см2 в течение 2 минут с целью увеличения трансдермального переноса суспензии. После нанесения полученной суспензии на поверхность кожи внешней поверхности предплечья здорового добровольца избыток частиц смывается с поверхности кожи ватным тампоном, смоченным в воде.Then, the intrafollicular introduction of the obtained photosensitizer carriers is carried out by applying a suspension of calcium carbonate particles to the skin surface of healthy volunteers, followed by treatment of the application zone with low-intensity therapeutic ultrasound UZT-1.01F (MedTeKo, Russia) with a frequency of 0.88 MHz and an intensity of 0.4 W / cm 2 for 2 minutes in order to increase the transdermal transfer of the suspension. After applying the resulting suspension to the skin surface of the outer surface of the forearm of a healthy volunteer, excess particles are washed off the skin surface with a cotton swab dipped in water.
Исследование проводится in vivo на внешней поверхности предплечья здорового добровольца: возрастной диапазон – 25 - 26 лет; 1-2 фототип кожи (по Фитцпатрику). Проводился мониторинг состояния волосяных фолликулов и уровня меланина в исследуемой области до проведения эксперимента с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия); эритемомеланинометра «ЭММ-002Е» (Россия). Создание макро- и микроизображений производилось компетентным практикующим врачом, чтобы избежать диверсификации во время процедуры. Анализ данных был выполнен двумя независимыми специалистами.The study is conducted in vivo on the outer surface of the forearm of a healthy volunteer: age range - 25 - 26 years; 1-2 skin phototype (according to Fitzpatrick). The condition of the hair follicles and the level of melanin in the study area was monitored prior to the experiment using the Soft Plus apparatus (Callegari, Italy); erythema melaninometer "EMM-002E" (Russia). Macro and micro images were created by a competent practitioner in order to avoid diversification during the procedure. Data analysis was performed by two independent experts.
Исследование морфологии полученных структур было произведено при помощи сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) на приборе MIRA II LMU (Tescan) со сканирующим электронным микроскопом XL 30 ESEM FEG (Philips). СЭМ-изображения частиц карбоната кальция до загрузки фотосенсибилизатором AMFF приведены на Фиг. 9, средний размер полученных контейнеров составил 0.7±0.2 мкм. Частицы обладают пористой структурой (Фиг. 9б), что определяет высокую эффективность включения лекарственных форм в их объем, а также обуславливает развитость поверхности, увеличивая ее адсорбционную емкость. СЭМ-изображение нагруженных препаратом AMFF частиц приведено на Фиг. 10а.The morphology of the obtained structures was studied using scanning electron microscopy (SEM) on a MIRA II LMU instrument (Tescan) with a scanning
Оптическое исследование процесса иммобилизации AMFF в CaCO3-контейнеры проведено методом флуоресцентной микроскопии на конфокальном лазерном сканирующем микроскопе Leica TCS SP8 (Leica Microsystems, Великобритания) и данные представлены на Фиг. 10б. По сравнению с ненагруженными матрицами, данные частицы имели более гладкую поверхность (Фиг. 10а), а также обладали выраженной флуоресценцией при возбуждении лазером с λ=405 нм (Фиг. 10б), что свидетельствует об успешности включения в них фотосенсибилизатора. Количественное определение эффективности загрузки препарата осуществлялось путем исследования спектров флуоресценции исходного раствора и собранных в процессе загрузки частиц надосадочных жидкостей с помощью многофункционального гибридного фотометра для микропланшетов Synergy H1 (BioTek, США). Препарат обладает выраженной флуоресценцией с максимумом на λ=460 нм при возбуждении светом с длиной волны λ=405 нм. Спектрофлуориметрическое исследование показало, что эффективность загрузки AMFF в контейнеры, представляющая собой отношение массы загруженного действующего вещества к массе частиц, выраженное в процентах, составила 2%.An optical study of the process of immobilization of AMFF in CaCO 3 containers was carried out by fluorescence microscopy using a Leica TCS SP8 confocal laser scanning microscope (Leica Microsystems, UK) and the data are presented in FIG. 10b. Compared with unloaded matrices, these particles had a smoother surface (Fig. 10a) and also had pronounced fluorescence when excited by a laser with λ = 405 nm (Fig. 10b), which indicates the success of incorporating a photosensitizer into them. Quantitative determination of the loading efficiency of the preparation was carried out by studying the fluorescence spectra of the initial solution and the particles of supernatants collected during loading using a multifunctional hybrid photometer for Synergy H1 microplates (BioTek, USA). The drug has pronounced fluorescence with a maximum at λ = 460 nm when excited with light with a wavelength of λ = 405 nm. A spectrofluorimetric study showed that the efficiency of loading AMFF into containers, which is the ratio of the mass of the loaded active substance to the mass of particles, expressed as a percentage, was 2%.
Визуализация и изучение состояния волосяных фолликулов in vivo были проведены методом оптической когерентной томографии (ОКТ) с помощью установки для спектральной ОКТ OCP930SR (Thorlabs, США) со следующими параметрами: центральная длина волны излучения 930±5 нм, ширина полосы излучения 100±5 нм, длина области сканирования 6 мм, аксиальное и латеральное разрешение на воздухе 6.2 мкм и 9.6 мкм, соответственно. Результаты визуализации участка кожи до и после нанесения суспензии частиц представлены Фиг. 11а и 11б, соответственно. Visualization and study of the state of hair follicles in vivo was carried out by optical coherence tomography (OCT) using an OCP930SR spectral OCT setup (Thorlabs, USA) with the following parameters: central radiation wavelength 930 ± 5 nm, radiation bandwidth 100 ± 5 nm, the length of the scan area is 6 mm, axial and lateral resolution in air are 6.2 μm and 9.6 μm, respectively. The results of visualization of the skin area before and after application of the particle suspension are presented in FIG. 11a and 11b, respectively.
Незаполненные волосяные фолликулы контрольного участка (темные каналы, выделенные прямоугольниками, на Фиг. 11а четко различимы на продольных виртуальных ОКТ-сканах кожи. Изображение после внедрения контейнеров демонстрирует обильное заполнение фолликулов на всю визуализируемую глубину (заполненные фолликулы выделены прямоугольниками на Фиг. 11б.The unfilled hair follicles of the control site (the dark channels highlighted by rectangles in Fig. 11a are clearly visible on longitudinal virtual OCT scans of the skin. The image after the introduction of the containers shows abundant filling of the follicles to the entire visualized depth (filled follicles are highlighted with rectangles in Fig. 11b.
Для оценки эффективности интрафолликулярного внедрения AMFF с помощью ватеритных контейнеров, осуществлялась также экстракция не менее 10 волос из области внедрения с последующим исследованием флуоресцентного сигнала от них методом конфокальной флуоресцентной микроскопии (Leica TCS SP8, Leica Microsystems, Великобритания) при возбуждении лазером с длиной волны λ=405 нм. Флуоресцентные изображения волос, изъятых из фолликулов до и после внедрения контейнеров, приведены на Фиг. 12а-в и Фиг. 12г-е, соответственно. To evaluate the effectiveness of the intra-follicular implantation of AMFF with the help of laterite containers, at least 10 hairs were also extracted from the implantation area, followed by a study of the fluorescent signal from them using confocal fluorescence microscopy (Leica TCS SP8, Leica Microsystems, UK) when excited with a laser with a wavelength of λ = 405 nm. The fluorescence images of hair removed from the follicles before and after the introduction of the containers are shown in FIG. 12a-c and FIG. 12th, respectively.
Наличие яркого флуоресцентного сигнала, регистрируемого от россыпи частиц после разрушения волосяного «мешочка», (Фиг. 12д-е) указывает на успешность переноса фотосенсибилизатора по волосяным фолликулам при помощи CaCO3 частиц. Отсутствие выраженной флуоресценции при заданных параметрах съемки до внедрения частиц (Фиг. 12б-в) подтвердило, что указанный сигнал относится к внедренным в фолликул контейнерам.The presence of a bright fluorescent signal recorded from a scattering of particles after the destruction of the hair "bag" (Fig. 12e-e) indicates the success of the photosensitizer transfer through the hair follicles using CaCO 3 particles. The absence of pronounced fluorescence at the given shooting parameters before the introduction of particles (Fig. 12b-c) confirmed that this signal refers to containers embedded in the follicle.
После внедрения частиц карбоната кальция, содержащих фотосенсибилизатор, в волосяные фолликулы внешней поверхности предплечья здорового добровольца осуществляется смывка его избытка с поверхности. При визуальном осмотре в зоне нанесения фотосенсибилизатора до облучения не наблюдалось дополнительных очагов пигментации, отсутствовал сосудистый компонент (Фиг. 13а, 14а).After the introduction of calcium carbonate particles containing a photosensitizer into the hair follicles of the outer surface of the forearm of a healthy volunteer, their excess is washed off from the surface. When visual inspection in the area of application of the photosensitizer before irradiation was not observed additional foci of pigmentation, there was no vascular component (Fig. 13a, 14a).
Согласно схеме лечения, далее проводится сеанс УФА-облучения участков внедрения суспензии с помощью люминесцентной лампы (METEC-SUNNY 2000, Германия) в течение 2.5 минут (1/4 МЭД данного респондента) и изучается характер пигментации кожи. Данные дерматоскопического исследования области приведены на Фиг. 17. Фотофиксация исследуемых участков проводилась через 48 часов, 7 и 75 дней, результаты представлены на Фиг. 14б, 14в, 14г, соответственно.According to the treatment regimen, a UVA-irradiation session is then carried out on the suspension injection sites using a fluorescent lamp (METEC-SUNNY 2000, Germany) for 2.5 minutes (1/4 of this respondent's MED) and the skin pigmentation is studied. Dermatoscopic examination of the area is shown in FIG. 17. Photofixation of the studied areas was carried out after 48 hours, 7 and 75 days, the results are presented in FIG. 14b, 14c, 14g, respectively.
В течении всего исследования в области аппликации при визуальном осмотре наблюдалось постепенное появление пигмента от светло-коричневого до красно-коричневого цвета в зоне нанесения суспензии частиц кальция карбоната нагруженных фотосенсибилизатором с диффузным, равномерным его распределением по всей зоне внедрения (Фиг. 14б, 14в, 14г). Через 75 дней зона нанесения имела выраженный коричневый оттенок, было отмечено разрастание и выравнивание пигментации по всей области внедрения фотосенсибилизатора (Фиг. 14д). При проведении дерматоскопии наблюдалось скопление пигмента ярко-коричневого цвета с тенденцией к перифолликулярной локализации; наличие сосудистого компонента и чешуек белесоватого цвета (Фиг. 13б, 13в, 13г).Throughout the study in the field of application during visual inspection, a gradual appearance of pigment from light brown to red-brown in the zone of application of the suspension of calcium carbonate particles loaded with a photosensitizer with diffuse, uniform distribution over the entire injection zone was observed (Fig. 14b, 14c, 14d) ) After 75 days, the application zone had a pronounced brown tint, there was an increase and equalization of pigmentation throughout the area of photosensitizer incorporation (Fig. 14e). During dermatoscopy, an accumulation of pigment of a bright brown color was observed with a tendency to perifollicular localization; the presence of a vascular component and flakes of whitish color (Fig. 13b, 13c, 13g).
На протяжении всего периода проведения исследования побочных эффектов со стороны органов и систем у респондентов не наблюдалось. В общеклинических анализах (общем анализе крови, биохимическом анализе крови, общем анализе мочи) патологии выявлено не было.Throughout the entire period of the study, side effects from organs and systems of the respondents were not observed. In general clinical analyzes (general blood test, biochemical blood test, general urinalysis), no pathology was detected.
Таким образом, при нанесении суспензии частиц карбоната кальция нагруженных фотосенсибилизатором отмечается появление диффузных очагов пигментации с преимущественной концентрацией пигмента вокруг волосяных фолликулов, что свидетельствует об успешной доставке фотосенсибилизатора в пространство волосяных фолликулов. В целом пигментация исследуемой области носила более равномерный характер и выраженный характер, чем при применении раствора фотосенсибилизатора (сравнение Фиг. 8д и Фиг. 14д).Thus, when applying a suspension of calcium carbonate particles loaded with a photosensitizer, the appearance of diffuse pigmentation centers with a predominant concentration of pigment around the hair follicles is observed, which indicates the successful delivery of the photosensitizer to the space of hair follicles. In general, the pigmentation of the study area was more uniform and pronounced than when using a photosensitizer solution (comparison of Fig. 8d and Fig. 14d).
Пример 3. УФА-облучение с применением ненагруженных частиц карбоната кальция (контроль 1)Example 3. UVA irradiation using unloaded particles of calcium carbonate (control 1)
Исследование проводится in vivo на внешней поверхности предплечья здорового добровольца (возрастной диапазон – 25 - 26 лет; 1-2 фототип кожи по Фитцпатрику) по схеме, описанной в примере 2, с тем отличием, что вместо нагруженных фотосенсибилизатором частиц применяются ненагруженные частицы карбоната кальция. Параметры ультразвукового воздействия и облучения выбраны те же, что и в примере 2.The study is carried out in vivo on the outer surface of the forearm of a healthy volunteer (age range 25 - 26 years; 1-2 skin phototypes according to Fitzpatrick) according to the scheme described in Example 2, with the difference that instead of particles loaded with a photosensitizer, unloaded calcium carbonate particles are used. The parameters of ultrasonic exposure and irradiation are selected the same as in example 2.
Данные дерматоскопического исследования области приведены на Фиг. 15. Фотофиксация исследуемых участков проводилась до, а также через 48 часов, 7 и 75 дней после облучения УФА, результаты представлены на Фиг. 16.Dermatoscopic examination of the area is shown in FIG. 15. Photofixation of the test sites was carried out before, as well as 48 hours, 7 and 75 days after UVA irradiation, the results are presented in FIG. 16.
При визуальном осмотре и при проведении дерматоскопического исследования клинически значимых изменений не выявлено на протяжении всего периода исследования. During a visual examination and during a dermatoscopic examination, clinically significant changes were not detected throughout the study period.
Таким образом, аппликация ненагруженных частиц карбоната кальция с последующим воздействием терапевтическим ультразвуком и сеансом ультрафиолетового облучения не дает выраженного клинического эффекта. Частицы карбоната кальция сами по себе не вносят вклада в формирование пигментации.Thus, the application of unloaded particles of calcium carbonate with subsequent exposure to therapeutic ultrasound and a session of ultraviolet irradiation does not give a pronounced clinical effect. Particles of calcium carbonate alone do not contribute to the formation of pigmentation.
Пример 4. УФА-облучение с применением ультразвука (контроль 2)Example 4. UVA irradiation using ultrasound (control 2)
Исследование проводится in vivo на внешней поверхности предплечья здорового добровольца: возрастной диапазон – 25 - 26 лет; 1-2 фототип кожи (по Фитцпатрику) по схеме, описанной в примере 2, с тем отличием, что исследуемая область остается свободной от внедрения как частиц карбоната кальция, так и фотосенсибилизатора. Параметры ультразвукового воздействия и облучения выбраны те же, что и в примере 2.The study is conducted in vivo on the outer surface of the forearm of a healthy volunteer: age range - 25 - 26 years; 1-2 skin phototype (according to Fitzpatrick) according to the scheme described in example 2, with the difference that the studied area remains free from the introduction of both particles of calcium carbonate and a photosensitizer. The parameters of ultrasonic exposure and irradiation are selected the same as in example 2.
Данные дерматоскопического исследования области приведены на Фиг. 17. Фотофиксация исследуемых участков проводилась до, а также через 48 часов, 7 и 75 дней после облучения УФА, результаты представлены на Фиг. 18.Dermatoscopic examination of the area is shown in FIG. 17. Photofixation of the test sites was carried out before, as well as 48 hours, 7 and 75 days after UVA irradiation, the results are presented in FIG. eighteen.
При визуальном осмотре и при проведении дерматоскопического исследования клинически значимых изменений не выявлено на протяжении всего периода исследования. During a visual examination and during a dermatoscopic examination, clinically significant changes were not detected throughout the study period.
На протяжении всего периода исследования при клиническом осмотре не было выявлено клинически значимых изменений. При проведении дерматоскопического исследования клинически значимых изменений выявлено не было.Throughout the study period, no clinically significant changes were detected during the clinical examination. When conducting a dermatoscopic examination, clinically significant changes were not detected.
Таким образом, воздействие терапевтического ультразвука с комбинации не дает клинически значимых изменений и не вносит вклада в формирование пигментации.Thus, the effect of therapeutic ultrasound with a combination does not produce clinically significant changes and does not contribute to the formation of pigmentation.
Пример 5. Зона исследования, свободная от воздействий (контроль 3) Example 5. The study area, free from influences (control 3)
Исследование проводится in vivo на внешней поверхности предплечья здорового добровольца: возрастной диапазон – 25 - 26 лет; 1-2 фототип кожи (по Фитцпатрику). В данной зоне исследования не проводилось каких-либо воздействий (интактная кожа). The study is conducted in vivo on the outer surface of the forearm of a healthy volunteer: age range - 25 - 26 years; 1-2 skin phototype (according to Fitzpatrick). In this area of the study was not conducted any effects (intact skin).
Проводился мониторинг состояния волосяных фолликулов и уровня меланина в исследуемой области до проведения эксперимента с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия); эритемомеланинометра «ЭММ-002Е» (Россия). Данные дерматоскопического исследования области приведены на Фиг. 19. Фотофиксация исследуемых участков проводилась до, а также через 48 часов, 7 и 75 дней после облучения УФА, результаты представлены на Фиг. 20.The condition of the hair follicles and the level of melanin in the study area was monitored prior to the experiment using the Soft Plus apparatus (Callegari, Italy); erythema melaninometer "EMM-002E" (Russia). Dermatoscopic examination of the area is shown in FIG. 19. Photofixation of the studied sites was carried out before, as well as 48 hours, 7 and 75 days after UVA irradiation, the results are presented in FIG. twenty.
На протяжении всего периода исследования в зоне, свободной от терапевтического воздействия, при визуальном осмотре и дерматоскопии клинически значимых изменений выявлено не было. Такая зона была выбрана в каждом из описанных в примерах 1-4 исследовании и использована в качестве референсной с целью выявления клинически значимых эффектов.Throughout the entire period of the study, no clinically significant changes were detected in a visual examination and dermatoscopy in a zone free of therapeutic effects. Such a zone was selected in each of the studies described in examples 1-4 and used as a reference in order to identify clinically significant effects.
Вывод по примерам 1 – 5The conclusion of examples 1 to 5
Сопоставление результатов, полученных при проведении описанных исследований (примеры 1-5), позволяет сделать вывод об эффективности предлагаемого подхода для формирования очагов пигментации у здоровых добровольцев.A comparison of the results obtained during the studies described (examples 1-5), allows us to conclude that the proposed approach is effective for the formation of foci of pigmentation in healthy volunteers.
Результаты мониторинга уровня меланина в зонах исследования от времени после УФА-облучения, выполненного с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия) и эритемомеланинометра «ЭММ-002Е» (Россия), представлены на Фиг. 21, где график А – зона с внедрением ненагруженных частиц карбоната кальция; график Б – зона с внедрением частиц карбоната кальция, нагруженных фотосенсибилизатором; график В – зона с аппликацией раствора фотосенсибилизатора.The results of monitoring the level of melanin in the study areas from time to time after UVA irradiation performed using the Soft Plus apparatus (Callegari, Italy) and the EMM-002E erythema melanometer (Russia) are presented in FIG. 21, where graph A is a zone with the introduction of unloaded particles of calcium carbonate; graph B - zone with the introduction of particles of calcium carbonate loaded with a photosensitizer; graph B - zone with the application of the photosensitizer solution.
На Фиг. 21 отчетливо различимы две волны пигментации после УФА-облучения. Первая – так называемое, мгновенное пигментное потемнение, объясняется фотоокислением уже присутствующих в тканях предшественников меланина. Этот процесс начинается сразу же после воздействия УФА-излучения и длится до 72 часов. Далее, на первый план выходит пигментация, называемая замедленным пигментным потемнением и являющаяся следствием расширения пула меланоцитов и активацией продукции меланина – «вторая волна пигментации» [Fajuyigbe D. et al. Pigment Cell Melanoma 2016; 29 (6): 607–618; Pathak M.A. et al. Journal of Invest. Dermatol. 1962: 435 – 443]. Таким образом, при адресной доставке фотосенсибилизатора в объем волосяных фолликулов с помощью частиц карбоната кальция минимизируется фотосенсибилизатор-стимулированная мобилизация присутствующих в эпидермисе предшественников меланина, что обуславливает более умеренный характер пигментации этой зоны в течение первых 96 часов, по сравнению с зоной, где осуществлялась аппликация свободной формы препарата. Через 168 часов больший вклад в формирование очага пигментации вносит «вторая волна», вызванная активацией продукции меланина, и, в связи с этим, интенсифицируется пигментация зоны c внедрением нагруженных фотосенсибилизатором частиц.In FIG. 21 clearly visible two waves of pigmentation after UVA irradiation. The first - the so-called instantaneous dark pigmentation, is explained by the photooxidation of melanin precursors already present in the tissues. This process begins immediately after exposure to UVA radiation and lasts up to 72 hours. Further, pigmentation, called delayed pigmentation darkening and resulting from the expansion of the pool of melanocytes and the activation of melanin production — the “second wave of pigmentation” [Fajuyigbe D. et al. Pigment Cell Melanoma 2016; 29 (6): 607-618; Pathak M.A. et al. Journal of Invest. Dermatol. 1962: 435 - 443]. Thus, with targeted delivery of the photosensitizer to the hair follicle volume using calcium carbonate particles, photosensitizer-stimulated mobilization of melanin precursors present in the epidermis is minimized, which leads to a more moderate pigmentation of this zone during the first 96 hours, compared to the zone where free application was carried out form of the drug. After 168 hours, the “second wave” makes a greater contribution to the formation of the focus of pigmentation, caused by the activation of melanin production, and, in connection with this, zone pigmentation is intensified with the introduction of particles loaded with a photosensitizer.
Поскольку, при витилиго последними участки депигментации покидают меланоциты, локализующиеся в волосяных фолликулах, то именно они являются привлекательной мишенью для воздействия лекарственных препаратов и ультрафиолетовых лучей. Таким образом, при адресном введении осуществляется доставка фотосенсибилизатора в участки максимальной концентрации меланоцитов. В связи с этим, предложенный способ адресной доставки AMFF позволяет оптимизировать методику фотохимиотерапевтического воздействия.Since, with vitiligo, melanocytes localized in hair follicles leave the last depigmentation sites, it is they that are an attractive target for exposure to drugs and ultraviolet rays. Thus, with targeted administration, the photosensitizer is delivered to areas of maximum melanocyte concentration. In this regard, the proposed method of targeted delivery of AMFF allows you to optimize the method of photochemotherapeutic exposure.
Таким образом установлено, что частицы карбоната кальция, выступающие в роли контейнера-носителя, способны осуществить адресную доставку фотосенсибилизатора AMFF в пространство волосяных фолликулов. Данный подход обеспечивает высокую избирательность и терапевтическую точность, что гарантирует увеличение эффективности фотохимиотерапии при его применении.Thus, it has been found that calcium carbonate particles acting as a carrier container are capable of targeted delivery of the AMFF photosensitizer to the space of hair follicles. This approach provides high selectivity and therapeutic accuracy, which guarantees an increase in the effectiveness of photochemotherapy in its application.
Пациенты с витилиго. Patients with vitiligo.
Пример 6. УФА-облучение зоны очага витилиго с применением фотосенсибилизатора, иммобилизованного в частицы карбоната кальцияExample 6. UVA irradiation of the vitiligo focus zone using a photosensitizer immobilized into calcium carbonate particles
Исследование проводится in vivo в области очага витилиго у пациента (возрастной диапазон – 25 - 26 лет; 1-2 фототип кожи по Фитцпатрику). Перед проведением исследования респонденты подписали информированное согласие на выполнение манипуляций.The study is carried out in vivo in the area of the vitiligo focus in the patient (age range - 25 - 26 years; 1-2 skin phototype according to Fitzpatrick). Before conducting the study, respondents signed an informed consent to perform manipulations.
Осуществляется аппликация частиц карбоната кальция, нагруженных фотосенсибилизатором AMFF, на поверхность исследуемой области очага витилиго с последующей обработкой зоны нанесения низкоинтенсивным терапевтическим ультразвуком УЗТ-1.01Ф («МедТеКо», Россия) частотой 0.88 МГц и интенсивностью 0.4 Вт/см2 в течение 2 минут с целью увеличения трансдермального переноса суспензии. После внедрения избыток частиц смывается с поверхности кожи ватным тампоном, смоченным в воде. Calcium carbonate particles loaded with the AMFF photosensitizer are applied to the surface of the studied area of the vitiligo focus, followed by treatment of the application zone with low-intensity therapeutic ultrasound UZT-1.01F (MedTeKo, Russia) with a frequency of 0.88 MHz and an intensity of 0.4 W / cm 2 for 2 minutes the purpose of increasing the transdermal transfer of the suspension. After implantation, excess particles are washed off the skin surface with a cotton swab dipped in water.
Далее осуществляется сеанс УФА-облучения с помощью люминесцентной лампы мощностью 9 Вт (METEC-SUNNY 2000, Германия) в течение 2.5 минут (1/4 МЭД).Then a UVA irradiation session is carried out using a 9 W fluorescent lamp (METEC-SUNNY 2000, Germany) for 2.5 minutes (1/4 DER).
Было проведено 10 процедур по описанной схеме частотой 2 раза в неделю, включающих в себя 2 сеанса облучения ультрафиолетом, один из которых сопровождается аппликацией лекарственной композиции. Осуществлялся мониторинг состояния кожного покрова и волосяных фолликулов в исследуемой области до проведения эксперимента с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия) и фотофиксация области. Таким образом, длительность терапии составляла 5 недель, мониторинг формирования пигментации продолжался в течение последующих 5 месяцев после прекращения терапии. Создание макро- и микроизображений производилось компетентным практикующим врачом, чтобы избежать диверсификации во время процедуры. Анализ данных был выполнен двумя независимыми специалистами. Микрофотографии дерматоскопической картины области исследования до и после облучения приведены на Фиг. 22, макрофотографии на Фиг. 23. С целью проведения дифференциального диагноза и динамического наблюдения фотофиксация очага так же проводилась в сопровождении лампы Вуда, результаты представлены на Фиг. 24.10 procedures were carried out according to the described scheme with a frequency of 2 times a week, including 2 sessions of irradiation with ultraviolet light, one of which is accompanied by the application of the medicinal composition. The condition of the skin and hair follicles was monitored in the study area prior to the experiment using the Soft Plus apparatus (Callegari, Italy) and photofixation of the area. Thus, the duration of therapy was 5 weeks, monitoring of the formation of pigmentation continued for the next 5 months after discontinuation of therapy. Macro and micro images were created by a competent practitioner in order to avoid diversification during the procedure. Data analysis was performed by two independent experts. Microphotographs of the dermatoscopic picture of the study area before and after irradiation are shown in FIG. 22, closeups of FIG. 23. For the purpose of differential diagnosis and dynamic observation, the photofixation of the focus was also carried out accompanied by a Wood lamp, the results are presented in FIG. 24.
На протяжении всего периода исследования при визуальном осмотре наблюдалось постепенное формирование очагов репигментации ярко-коричневого цвета, локализующиеся по периферии и в центре очага, постепенное сглаживание границ очага поражения, умеренное вовлечение сосудистого компонента. При проведении дерматоскопии наблюдались образование скоплений пигмента ярко-коричневого цвета с тендецией к перифолликулярной локализации и умеренно выраженный сосудистый компонент. Субъективных ощущений у пациента не отмечалось. Throughout the entire period of the study, during visual inspection, a gradual formation of foci of repigmentation of a bright brown color was observed, localized along the periphery and in the center of the focus, gradual smoothing of the borders of the lesion, moderate involvement of the vascular component. During dermatoscopy, the formation of pigment clusters of a bright brown color with a tendency to peripheral localization and a moderately pronounced vascular component were observed. Subjective sensations in the patient were not observed.
Кроме того, на протяжении всего периода проведения исследования побочных эффектов со стороны органов и систем у респондентов не наблюдалось. В общеклинических анализах (общем анализе крови, биохимическом анализе крови, общем анализе мочи) патологии выявлено не было. In addition, during the entire period of the study, side effects from organs and systems of the respondents were not observed. In general clinical analyzes (general blood test, biochemical blood test, general urinalysis), no pathology was detected.
Таким образом, внедрение частиц карбоната кальция, нагруженных фотосенсибилизатором AMFF, приводит к появлению очагов репигментации не только по периферии очага, но и точечно в центре, что свидетельствует как об успешной доставке частиц в волосяные фолликулы, так и о выраженном терапевтическом эффекте от их применения.Thus, the introduction of calcium carbonate particles loaded with an AMFF photosensitizer leads to the appearance of repigmentation foci not only along the periphery of the focus, but also pointwise in the center, which indicates both the successful delivery of particles to the hair follicles and the pronounced therapeutic effect of their use.
Пример 7. Зона очага витилиго, свободная от воздействий (контроль 4)Example 7. Zone of vitiligo focus, free from influences (control 4)
Исследование проводится in vivo в области очага витилиго у пациента (возрастной диапазон – 25 - 26 лет; 1-2 фототип кожи по Фитцпатрику). Проводился мониторинг состояния волосяных фолликулов в исследуемой области до проведения эксперимента с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия) и фотофиксация области. Микрофотографий дерматоскопической картины области исследования до и после облучения приведены на Фиг. 25, макрофотографии на Фиг. 26, макрофотографии, выполненные с лампой Вуда, на Фиг. 27.The study is carried out in vivo in the area of the vitiligo focus in the patient (age range - 25 - 26 years; 1-2 skin phototype according to Fitzpatrick). The condition of the hair follicles in the study area was monitored before the experiment using the Soft Plus apparatus (Callegari, Italy) and photofixation of the area. Microphotographs of the dermatoscopic picture of the study area before and after irradiation are shown in FIG. 25, closeups of FIG. 26, macrographs taken with a Wood lamp; FIG. 27.
На протяжении всего периода исследования в зоне, свободной от терапевтического воздействия, при визуальном осмотре и дерматоскопии клинически значимых изменений выявлено не было. Такая зона была выбрана и использована в качестве референсной с целью выявления клинически значимых эффектов при проведении терапии.Throughout the entire period of the study, no clinically significant changes were detected in a visual examination and dermatoscopy in a zone free of therapeutic effects. Such a zone was selected and used as a reference in order to identify clinically significant effects during therapy.
Пример 8. УФА-облучение зоны исследования в пределах здоровой кожи с применением фотосенсибилизатора, иммобилизованного в частицы карбоната кальцияExample 8. UVA irradiation of the study area within healthy skin using a photosensitizer immobilized into calcium carbonate particles
Исследование проводится in vivo в области за пределами очага витилиго у пациента (в пределах здоровой кожи) возрастного диапазона 25-26 лет с 1-2 фототипом кожи (по Фитцпатрику) по схеме, отписанной в примере 6. Проводился мониторинг состояния волосяных фолликулов в исследуемой области до проведения эксперимента с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия) и фотофиксация области. Микрофотографий дерматоскопической картины области исследования до и после облучения приведены на Фиг. 28, макрофотографии на Фиг. 29.The study is conducted in vivo in the area outside the focus of vitiligo in a patient (within healthy skin) in the age range of 25-26 years with 1-2 skin phototypes (according to Fitzpatrick) according to the scheme described in Example 6. The condition of the hair follicles in the study area was monitored before the experiment using the apparatus Soft Plus (Callegari, Italy) and photofixation of the area. Microphotographs of the dermatoscopic picture of the study area before and after irradiation are shown in FIG. 28, closeups of FIG. 29.
На протяжении всего периода исследования при визуальном осмотре и дерматоскопии наблюдалось появление очагов пигментации, обусловленное воздействием ультрафиолетового излучения. Пигментация носила диффузный характер. Throughout the entire period of the study, visual examination and dermatoscopy showed the appearance of foci of pigmentation due to exposure to ultraviolet radiation. Pigmentation was diffuse.
Пример 9. Зона исследования в пределах здоровой кожи, свободная от воздействий (контроль 5)Example 9. The study area within healthy skin, free from exposure (control 5)
Исследование проводится in vivo в области за пределами очага витилиго у пациента (в пределах здоровой кожи) возрастного диапазона 25-26 лет с 1-2 фототипом кожи (по Фитцпатрику) по схеме, отписанной в примере 6. Проводился мониторинг состояния волосяных фолликулов в исследуемой области до проведения эксперимента с использованием аппарата Soft Plus (Callegari, Италия) и фотофиксация области. Микрофотографий дерматоскопической картины области исследования до и после облучения приведены на Фиг. 30, макрофотографии на Фиг. 31.The study is conducted in vivo in the area outside the focus of vitiligo in a patient (within healthy skin) in the age range of 25-26 years with 1-2 skin phototypes (according to Fitzpatrick) according to the scheme described in Example 6. The condition of the hair follicles in the study area was monitored before the experiment using the apparatus Soft Plus (Callegari, Italy) and photofixation of the area. Microphotographs of the dermatoscopic picture of the study area before and after irradiation are shown in FIG. 30, closeups of FIG. 31.
В данной зоне исследования не проводилось каких-либо воздействий (контроль). In this area of the study, no effects were carried out (control).
На протяжении всего периода исследования в зоне, свободной от терапевтического воздействия, при визуальном осмотре и дерматоскопии клинически значимых изменений выявлено не было. Такая зона была выбрана и использована в качестве референсной с целью выявления клинически значимых эффектов при проведении терапии. Throughout the entire period of the study, no clinically significant changes were detected in a visual examination and dermatoscopy in a zone free of therapeutic effects. Such a zone was selected and used as a reference in order to identify clinically significant effects during therapy.
Вывод по примерам 6 – 9The conclusion of examples 6 - 9
Сопоставление результатов, полученных при проведении исследований на больных с витилиго (примеры 6-9), позволяет сделать вывод об эффективности предлагаемого терапевтического подхода. Применение частиц карбоната кальция, нагруженных фотосенсибилизатором, в совокупности с УФА-излучением обеспечило появление репигментации с четкой тенденцией к перифолликулярной локализации. Притом, очаги репигментации располагались как по периферии, так и в центре очага - в местах локализации волосяных фолликулов, что свидетельствует о возможной активации меланоцитов, находящихся в пределах волосяного фолликула. Данные дерматоскопического исследования в данной зоне также свидетельствуют об перифолликулярном характере репигментации. В зоне исследования, локализованной в пределах здоровой кожи, подверженной ультрафиолетовому облучению, также наблюдались очаги пигментации с диффузным распределением пигмента, без тендеции к перифолликулярной локализации. В то время, как в зонах очага и здоровой кожи, свободных от воздействий, клинически значимых изменений выявлено не было. A comparison of the results obtained during studies on patients with vitiligo (examples 6-9), allows us to conclude that the proposed therapeutic approach is effective. The use of particles of calcium carbonate loaded with a photosensitizer in combination with UVA radiation provided the appearance of repigmentation with a clear tendency to perifollicular localization. Moreover, the foci of repigmentation were located both on the periphery and in the center of the focus - in the places of localization of the hair follicles, which indicates the possible activation of melanocytes located within the hair follicle. Dermatoscopic findings in this area also indicate the perifollicular nature of repigmentation. In the study area, localized within healthy skin, exposed to ultraviolet radiation, there were also observed foci of pigmentation with a diffuse distribution of pigment, without a tendency to perifollicular localization. While in the areas of the focus and healthy skin, free from exposure, clinically significant changes were not detected.
Предлагаемый способ позволяет увеличить эффективность терапии, снизить риск развития побочных эффектов, упростить процедуру лечения, а также повысить приверженность к терапии со стороны пациента.The proposed method allows to increase the effectiveness of therapy, reduce the risk of side effects, simplify the treatment procedure, and increase the patient's adherence to therapy.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018129485A RU2698871C1 (en) | 2018-08-14 | 2018-08-14 | Method of photochemotherapy of vitiligo |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018129485A RU2698871C1 (en) | 2018-08-14 | 2018-08-14 | Method of photochemotherapy of vitiligo |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2698871C1 true RU2698871C1 (en) | 2019-08-30 |
Family
ID=67851445
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018129485A RU2698871C1 (en) | 2018-08-14 | 2018-08-14 | Method of photochemotherapy of vitiligo |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2698871C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2780288C1 (en) * | 2021-10-22 | 2022-09-21 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского" (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) | Method for healing of complicated purulent wounds in patients with diabetes mellitus after open urological operations |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU160569A1 (en) * | ||||
| RU2147896C1 (en) * | 1999-06-23 | 2000-04-27 | Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт | Method for treating the cases of circumscribed scleroderma |
| WO2003026600A1 (en) * | 2001-09-27 | 2003-04-03 | Ceramoptec Industries, Inc. | Topical application of chromophores for hair removal |
| RU2209098C1 (en) * | 2002-11-28 | 2003-07-27 | Государственное учреждение "Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт" | Method for treating the cases of vitiligo |
| WO2007103555A2 (en) * | 2006-03-08 | 2007-09-13 | Nuviance, Inc. | Transdermal drug delivery compositions and topical compositions for application on the skin |
| RU2633928C1 (en) * | 2016-08-24 | 2017-10-19 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский национальный исследовательский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского" | Method of transdermal delivery of biologically active substances |
-
2018
- 2018-08-14 RU RU2018129485A patent/RU2698871C1/en active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU160569A1 (en) * | ||||
| RU2147896C1 (en) * | 1999-06-23 | 2000-04-27 | Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт | Method for treating the cases of circumscribed scleroderma |
| WO2003026600A1 (en) * | 2001-09-27 | 2003-04-03 | Ceramoptec Industries, Inc. | Topical application of chromophores for hair removal |
| RU2209098C1 (en) * | 2002-11-28 | 2003-07-27 | Государственное учреждение "Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт" | Method for treating the cases of vitiligo |
| WO2007103555A2 (en) * | 2006-03-08 | 2007-09-13 | Nuviance, Inc. | Transdermal drug delivery compositions and topical compositions for application on the skin |
| RU2633928C1 (en) * | 2016-08-24 | 2017-10-19 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский национальный исследовательский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского" | Method of transdermal delivery of biologically active substances |
Non-Patent Citations (6)
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2780288C1 (en) * | 2021-10-22 | 2022-09-21 | Государственное бюджетное учреждение здравоохранения Московской области "Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского" (ГБУЗ МО МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского) | Method for healing of complicated purulent wounds in patients with diabetes mellitus after open urological operations |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2444385C2 (en) | Method for photodynamic therapy both for treating cellulites, and for cosmetic purposes | |
| Bender et al. | Lipid cubic phases for improved topical drug delivery in photodynamic therapy | |
| Kozarev et al. | Novel laser therapy in treatment of onychomycosis | |
| JP2019123708A (en) | Topical composition for photodynamic therapy, occlusive dressing material, kit using the same, photodynamic therapy material, and method for photodynamic therapy | |
| JP4630395B2 (en) | Solutions for diagnosing or treating tissue lesions | |
| US20030028227A1 (en) | Locally confined photodynamic treatment for diseased tissue | |
| Han et al. | Microneedle-based approaches for skin disease treatment | |
| WO2002007630A1 (en) | Treatment for epithelial diseases | |
| Chen et al. | Cubosomes-assisted transdermal delivery of doxorubicin and indocyanine green for chemo-photothermal combination therapy of melanoma | |
| Samy et al. | Effect of methylene blue-mediated photodynamic therapy for treatment of basal cell carcinoma | |
| HUE032192T2 (en) | Oxidative photoactivated skin rejuvenating composition containing hyaluronic acid, glucose amine or allantoin | |
| US20180125975A1 (en) | Emissive polymeric matrices | |
| Fritsch et al. | Fluorescence diagnosis and photodynamic therapy in dermatology from experimental state to clinic standard methods | |
| CA3235710A1 (en) | Topical compositions and methods for photodynamic therapy | |
| US20150150788A1 (en) | Method and composition for delivering a compound through a biological barrier | |
| JP2023502519A (en) | Microneedle patches for immunostimulatory drug delivery | |
| RU2698871C1 (en) | Method of photochemotherapy of vitiligo | |
| US20240382543A1 (en) | Perilesional treatment of skin conditions | |
| RU2296595C2 (en) | Method for treating patients with laser radiation | |
| RU2234963C2 (en) | Method for treating the cases of hypertrophic and keloid skin cicatrices | |
| Gharib et al. | Tranexamic versus Kligman in melasma treatment | |
| Geng et al. | A novel therapeutic approach to hemangiomas: Combining photothermal therapy and ferroptosis in a microneedle delivery system | |
| BR102014019194A2 (en) | compositions containing 5-aminolevulinic acid (5-ala) and its methyl-5-ala derivative (m-ala) and use of the compositions | |
| Gaillard‐Bigot et al. | Vascular Effects of Treprostinil Cutaneous Iontophoresis on the Leg, Finger, and Foot. | |
| RU2621845C2 (en) | Method for non-oncologic cosmetic skin defects photodynamic therapy |