RU2698715C1 - Способ получения ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров - Google Patents
Способ получения ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров Download PDFInfo
- Publication number
- RU2698715C1 RU2698715C1 RU2019119136A RU2019119136A RU2698715C1 RU 2698715 C1 RU2698715 C1 RU 2698715C1 RU 2019119136 A RU2019119136 A RU 2019119136A RU 2019119136 A RU2019119136 A RU 2019119136A RU 2698715 C1 RU2698715 C1 RU 2698715C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- age
- alkyl
- unsaturated
- acetylated
- alkyl glycerol
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 49
- 239000003925 fat Substances 0.000 title claims abstract description 33
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 37
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 26
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims abstract description 22
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 13
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims abstract description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol Substances OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 10
- WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N acetyl chloride Chemical compound CC(Cl)=O WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000012346 acetyl chloride Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 8
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims abstract description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 21
- -1 unsaturated alkyl glycerol esters Chemical class 0.000 claims description 19
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 11
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 abstract description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 29
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- NRWMBHYHFFGEEC-MDZDMXLPSA-N 3-[(e)-octadec-9-enoxy]propane-1,2-diol Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCCOCC(O)CO NRWMBHYHFFGEEC-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 10
- NRWMBHYHFFGEEC-UHFFFAOYSA-N selachyl alcohol Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCOCC(O)CO NRWMBHYHFFGEEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 9
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 6
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 5
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000001355 alkyl diacyl glycerols Chemical class 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- ASGJEMPQQVNTGO-UHFFFAOYSA-N benzene chloroform Chemical compound C(Cl)(Cl)Cl.C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1 ASGJEMPQQVNTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 3
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 210000000514 hepatopancreas Anatomy 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 2
- 241001161496 Berryteuthis magister Species 0.000 description 2
- 235000015854 Heliotropium curassavicum Nutrition 0.000 description 2
- 244000301682 Heliotropium curassavicum Species 0.000 description 2
- 102220547770 Inducible T-cell costimulator_A23L_mutation Human genes 0.000 description 2
- 241001423892 Somniosus microcephalus Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- 238000007445 Chromatographic isolation Methods 0.000 description 1
- 241000251209 Echinorhinus cookei Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- QFWWSZLGTLNVMS-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethoxyethane;hexane Chemical compound CC(O)=O.CCOCC.CCCCCC QFWWSZLGTLNVMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006266 etherification reaction Methods 0.000 description 1
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000002824 peroxisome Anatomy 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000010686 shark liver oil Substances 0.000 description 1
- 229940069764 shark liver oil Drugs 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/075—Ethers or acetals
- A61K31/08—Ethers or acetals acyclic, e.g. paraformaldehyde
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/56—Materials from animals other than mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
- C07C41/01—Preparation of ethers
- C07C41/18—Preparation of ethers by reactions not forming ether-oxygen bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C41/00—Preparation of ethers; Preparation of compounds having groups, groups or groups
- C07C41/01—Preparation of ethers
- C07C41/34—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к пищевой и фармацевтической промышленности и может быть использовано для получения из морских жиров алкил-глицериновых эфиров, обладающих высоким биологическим действием. Заявляемый способ включает гидролиз морского жира, нейтрализацию полученной жировой смеси разбавленной серной кислотой, промывку водным раствором NaCl, последовательную двойную кристаллизацию из ацетона при минус 15°С в течение 18 часов, отделение осадка насыщенных алкил-глицериновых эфиров и его сушку, упаривание жидкой фракции, содержащей ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры, выделение ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров колоночной хроматографией с элюирующей системой бензол:хлороформ = 10:0 → 0:10, об./об.; после чего очищенный концентрат алкил-глицериновых эфиров ацетилируют ацетилхлоридом, затем разделяют на индивидуальные ацетилированные алкил-глицериновые эфиры методом высокоэффективной жидкостной хроматорафии на колонке с обращенной фазой (С18) и элюцией 85%-ным водным этанолом, фракции с индивидуальными ацетилированными алкил-глицериновыми эфирами собирают и упаривают, ацетильные группы снимают щелочным гидролизом, алкил-глицериновые эфиры экстрагируют гексаном и упаривают. Способ обеспечивает в лабораторных условиях получение препаратов ненасыщенных АГЭ высокой степени очистки, пригодных к использованию, как в биохимических, так и в медицинских экспериментах. Получаемые по способу препараты снижают зависимость от импортной продукции и позволяют оперативно проводить необходимые научные исследования. 2 ил., 1 табл., 1 пр.
Description
Изобретение относится к пищевой и фармацевтической промышленности и может быть использовано для получения из морских жиров алкил-глицериновых эфиров, обладающих высоким биологическим действием.
Липиды с простой эфирной связью, в том числе 1-О-алкил-глицериновые эфиры (АГЭ), привлекают внимание медиков, диетологов, биохимиков высокой биологической активностью. На фиг. 1 приведены структурные формулы главных ненасыщенных природных алкил-глицериновых эфиров, при условии, если: R1=C16H33 - химиловый спирт, R1=C18H37 - батиловый спирт, R1=C18H35 - селахиловый спирт.
В организме АГЭ входят в состав мембран в виде плазмалогенных структур, особенно значительные их количества присутствуют в нервной ткани, в первую очередь в головном мозге. Находясь в липидных рафтах регулируют транспорт холестерина, белков, активность секретаз, отвечающих за расщепление амилоидного белка β42, препятствуя развитию нейродегенеративных заболеваний. Первыми принимают на себя последствия окислительного стресса, защищая другие жизненно важные молекулы от окисления и предотвращая более тяжкие последствия для организма (Wood P., Khan A., Mankidy R., Goodenowe D. «Plasmalogen deficit: a new and testable hypothesis for the etiology of Alzheimer's disease». In: «Alzheimer's disease pathogenesis - Core Concepts, Shifting Paradigms and Therapeutic Targets». 2011. Р. 561-588).
Диета современного человека такова, что данные соединения всегда находятся в дефиците. Учитывая, что с возрастом пероксисомы теряют активность по синтезу простой эфирной связи, необходимо иметь дополнительные источники этих важных липидов. Наземные растения и животные бедны ими, в отличие от обитателей морских глубин - акул, скатов, кальмаров. За рубежом и в России реализованы технологии получения АГЭ. Однако, радикал в первом положении глицерина может быть насыщенным или ненасыщенным. В случае с насыщенными АГЭ, их выделение достаточно проработано, чего не сказать о ненасыщенных АГЭ.
Последние исследования выявили особую биологическую активность у ненасыщенного селахилового спирта, 
, чем у насыщенных АГЭ (A.-L. Deniau, P. Mosset, D.Le Bot, A.B. Legrand Which alkylglycerols from shark liver oil have anti-tumour activities? / Biochimie. 2010. Р. 1-3). Поэтому поиск методов выделения таких соединений и создания препаратов с их участием является важным в свете профилактики и лечения многих недугов человека.
Особо стоит остановиться о возможности получения данных соединений в лабораторных условиях, поскольку от биохимических и медицинских исследований зависит дальнейшее продвижение создаваемых препаратов. Отсутствие некоторых из них на рынке не должно ограничивать исследователей в проводимых ими экспериментах.
На данный момент не существует способа получения в одном процессе ненасыщенных АГЭ с высокими концентрацией и выходом, упрощением всей технологической схемы, позволяющей осуществлять способ доступными средствами в любой лаборатории.
Известен способ получения концентратов ненасыщенных АГЭ из печени колючей акулы (катрана), гренландской акулы и химеры (Hallgren B., Larsson S.O. «Separation and identification of alkoxyglycerols» // Acta Chem. Scand. 1959. Vol. 13, N 7. P. 2147-2148). Способ осуществляют следующим образом: неомыляемые вещества, извлеченные из гидролизованного печеночного жира рыб, хроматографируют на колонке с активированной окисью алюминия, для элюции АГЭ используют смесь 10%-ного раствора метанола в метиленхлориде. Получены концентраты ненасыщенных АГЭ следующего содержания (по селахиловому спирту) - 47,8% для катрана, 59,4% для гренландской акулы и 53,6% для химеры. Другие уточняющие данные по выделению АГЭ отсутствуют.
Недостатки способа:
1) осуществление данного способа скорее иллюстрирует само наличие АГЭ в печени гидробионтов, чем действительно предлагает рациональный способ их выделения;
2) хроматографическое выделение АГЭ, без предварительного концентрирования, для получения препаратов в значительных объемах не приемлемо - низкая эффективность метода, проблемы с регенерацией сорбента, а, главное, высокая себестоимость получаемого продукта;
3) использование метилового спирта снижает интерес к способу, так как использует чрезвычайно токсичный растворитель, не допустимый в пищевых производствах.
Известен способ выделения алкил-глицериновых эфиров из жира командорского кальмара Berryteuthis magister (Патент РФ № 2415125 МПК C07C 43/13, C07C 41/16, C07C 41/40, опубл. 27.03.2011). Способ включает гидролиз морского жира для выделения свободных жирных кислот и высвобождения неомыляемой фракции, содержащей АГЭ, нейтрализацию полученной жировой смеси кислотой, промывку водой и последовательную двойную кристаллизацию из органического растворителя, фильтрацию и сушку образующегося осадка после каждой кристаллизации. Для проведения первой и второй кристаллизации жировую смесь в органическом растворителе выдерживают сначала в течение 10-12 часов при комнатной температуре, а затем в течение 12-15 часов при 0-4°С.
В процессе используют ацетон или гексан, причем может использоваться только один растворитель во всем процессе или их комбинация.
При использовании в качестве органического растворителя гексана соотношение жировая смесь - гексан составляет при первой кристаллизации 1:10, кг/л, а при второй кристаллизации промежуточного продукта 1:50, кг/л.
При использовании в качестве органического растворителя ацетона целесообразно соотношение жировая смесь - ацетон 1:10, кг/л, как при первой, так и при второй кристаллизации промежуточного продукта.
Метод позволяет получать насыщенные АГЭ с выходом 50-59,0% и чистотой более 99%.
Недостатки:
1) метод использует значительные объемы растворителей, что требует использование больших емкостей, соответствующих фильтровальных установок и постоянную регенерацию растворителей;
2) две кристаллизации метода разделены сушкой осадка для того, чтобы при смене растворителя не было загрязнения одного растворителя другим; сушка реально прерывает процесс и откладывает последующую вторую кристаллизацию на несколько часов;
3) продолжительность проведения всего процесса - от исходного жира до целевого продукта (АГЭ) - составляет не менее 59 часов, в среднем 65 часов, притом, что проведение процесса между стадиями является неразрывным. Такая большая продолжительность процесса крайне негативно сказывается на производительности линии получения АГЭ и не позволяет быстро и своевременно перерабатывать поступающее сырье.
4) АГЭ, выделяемые по данному способу на 98-99% состоят из насыщенных соединений, все ненасыщенные АГЭ, обладающие наибольшей биологической активностью, остаются в неиспользуемом остатке и теряются из-за не разработанности технологии.
Известен способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров (Патент РФ № 2476611, МПК C22B 7/04, C22B 15/00, C22B 23/00, C22B 4/06, опубл. 27.02.2013), включающий гидролиз морского жира для выделения свободных жирных кислот и высвобождения неомыляемой фракции, содержащей АГЭ, нейтрализацию полученной жировой смеси кислотой, промывку водой и последовательную двойную кристаллизацию из органического растворителя, фильтрацию и сушку образующегося осадка на последней стадии кристаллизации. Для проведения первой кристаллизации жировую смесь комнатной температуры смешивают с органическим растворителем температуры -15°-5°С при интенсивном перемешивании и сразу отфильтровывают образовавшийся осадок, промывают его небольшим количеством органического растворителя при той же температуре и этот аморфный осадок вновь смешивают с органическим растворителем температуры -15°-5°С (2-я кристаллизация) при интенсивном перемешивании и сразу отфильтровывают осадок и высушивают его от растворителя при комнатной температуре, получая целевой продукт - АГЭ. Соотношение жировая смесь : органический растворитель при первой кристаллизации составляет 1:1-5, кг/л, на второй также - 1:1-5, кг/л, в расчете на начальное количество жировой смеси. В качестве органических растворителей могут быть взяты ацетон и гексан, причем весь процесс должен использовать только один растворитель для избежания загрязнения одного растворителя другим.
Общий выход по АГЭ - 50-59%.
Недостатки:
1) в продукте содержатся практически только насыщенные АГЭ;
2) способ не обеспечивает полного извлечения АГЭ из липидов, поэтому все ненасыщенные АГЭ, обладающие высоким биологическим потенциалом, остаются в фильтрате и, в дальнейшем, попадают в отходы.
Наиболее близким к заявляемому изобретению является способ получения концентрата ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских липидов (Патент РФ №2649014, МКП С11В 11/00, опубл.29.03.2018). Способ включает (пример 1) гидролиз морского жира для выделения свободных жирных кислот и высвобождения неомыляемой фракции, содержащей АГЭ, нейтрализацию полученной жировой смеси разбавленной серной кислотой, промывку водой и последовательную двойную кристаллизацию из ацетона при минус 15°С в течение 18 часов, фильтрацию и сушку образующегося осадка. Осадок содержит насыщенные АГЭ (суммарно более 99%), которые применяют, как БАД «Липидомарин» или в диетологии (Патент РФ №2658431 «Сухая питательная смесь для диетического питания», МКП A23J 1/04, A23L 33/00, A23L 17/50, опубл. 21.06.2018).
Жидкую фракцию, содержащую свободные жирные кислоты и ненасыщенные АГЭ, упаривают от растворителя, этерифицируют раствором серной кислоты в безводном этаноле, добавляют воду, отделяют липиды и экстрагируют ненасыщенные АГЭ из липидной смеси водными растворами этанола, упаривают.
Полученный продукт ненасыщенных АГЭ очищают (пример 3, часть В) методом колоночной хроматографии на силикагеле с элюирующей системой петролейный эфир - этилацетат в градиенте.
Способ имеет следующие недостатки:
1. Этерификация предполагает использование безводного этанола, что означает серьезную подготовку к этой стадии - в качестве осушителя нужно будет использовать либо бензол (азеатропная перегонка), либо молекулярные сита, либо щелочные металлы и пр.
2. Экстракция АГЭ из липидов водными растворами этанола длительный процесс, так как в каждом случае нужно добиться равновесия системы, при котором АГЭ максимально переходят в водно-спиртовой слой, а этиловые эфиры жирных кислот, наоборот, из него удаляются. Процесс ускорен применением центрифуги, но это не сокращает времени на его проведение.
3. Колоночная хроматография, используемая в процессе, допускает получение объединенного концентрата ненасыщенных АГЭ (суммарно 96,8% с выходом 91,1% на стадии).
Однако получение индивидуальных ненасыщенных АГЭ, в первую очередь, селахилового спирта, она не предполагает. Поэтому метод можно рассматривать как один из возможных путей реализации задачи выделения чистых суммарных ненасыщенных АГЭ, но никак ни метод получения ценных индивидуальных соединений.
Техническая проблема, поставленная перед изобретением, - разработка эффективного и экономичного способа получения из морских жиров ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров, с целью максимального их извлечения из сырья при одновременно высоком качестве целевого продукта (высокая степень чистоты), как перспективных средств профилактики социально-значимых заболеваний.
Поставленная техническая проблема решается тем, что в известном способе выделения ненасыщенных и насыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров, включающим гидролиз морского жира для выделения свободных жирных кислот и высвобождения неомыляемой фракции, содержащей АГЭ, нейтрализацию полученной жировой смеси разбавленной серной кислотой, промывку 1%-ным раствором NaCl, последовательную двойную кристаллизацию из ацетона при минус 15°С в течение 18 часов, фильтрацию и сушку образующегося осадка содержащего насыщенные АГЭ. Полученную жидкую фракцию, содержащую ненасыщенные АГЭ, упаривают, из упаренного продукта выделяют суммарные ненасыщенные АГЭ методом колоночной хроматографии на силикагеле с элюирующей системой, согласно изобретению, в качестве элюирующей системы используют бензол : хлороформ = 10:0→0:10, об./об., очищенный концентрат АГЭ ацетилируют ацетилхлоридом, после чего разделяют на индивидуальные ацетилированные АГЭ методом высокоэффективной жидкостной хроматорафии на колонке с обращенной фазой (С18) и элюцией 85%-ным водным этанолом, фракции с индивидуальными ацетилированными АГЭ собирают и упаривают, ацетильные группы снимают щелочным гидролизом, АГЭ экстрагируют гексаном и упаривают.
При разработке способа были найдены решения, позволившие осуществить его наиболее экономичным, а главное, простым способом.
Использование новой элюирующей системы для выделения чистых ненасыщенных АГЭ: система бензол-хлороформ, 10:0→0:10, об./об., с повышением градиента позволило не только очистить методом колоночной хроматографии на силикагеле концентрат ненасыщенных АГЭ до содержания в нем основного вещества более 98%, но и применить очистку непосредственно после упаривания жидкой фракции. Таким образом, в отличии от прототипа отсутствует необходимость этерифицикации свободных жирных кислотх липидной смеси раствором серной кислоты в безводном этаноле, отделение липидов от реакционной смеси и проведение многократной экстракции ненасыщенных АГЭ из липидной смеси водными растворами этанола, объединение экстрактов и их упаривание.
Отклонение от параметров системы бензол-хлороформ, 10:0→0:10, об./об., в ту или другую сторону снижало выход или чистоту продукта.
Ацетилирование очищенного концентрата АГЭ ацетилхлоридом позволило разделить фракции ненасыщенных АГЭ в виде их ацетилированных производных методом высоэффективной жидкостной хроматографии на индивидуальные ненасыщенных АГЭ. При этом наносимый на колонку препарат является жидким, в отличие от исходных веществ, легко наносится на колонку и легко разделяется, так как полярные гидроксильные группы этерифицированы, на индивидуальные соединения элюирующей системой этанол-вода 85:15, об./об.
Описание общей схемы заявленного способа.
Гидролиз жира из пищеварительной железы командорского кальмара (согласно прототипу)
Начальной стадией выделения АГЭ является щелочной гидролиз липидов пищеварительной железы кальмара, в результате которого происходит отщепление ЖК от молекулы алкил-диацил-глицерина (АДАГ), схема гидролиза приведена на фиг. 2.
К 2 кг жира добавляют 1,5 л 96%-ного этанола и 1 л 40%-ого раствора КОН. Реакцию проводят при 60°С в течение 1 ч. Окончание реакции гидролиза контролируют методом тонкослойной хроматографии.
По окончании реакции смесь переносят в делительную воронку, прибавляют 4 л воды и нейтрализуют водным раствором H2SO4 до значения pH=4 по индикаторной бумаге. Гидролизованные липиды дважды промывают 3 л 1%-го раствора NaCl.
Осаждение насыщенных алкил-глицериновых эфиров
Отбирают 1 кг гидролизованных липидов, приливают 2,8 л холодного (-15°С) ацетона, интенсивно перемешивают и помещают в морозильную камеру (-15°С) на 18 часов для осаждения (кристаллизация) насыщенных АГЭ. Процесс кристаллизации из ацетона проводят дважды.
Осадок после второй кристаллизации отфильтровывают через фильтрованную бумагу при -15°С. Полученный фильтрат, содержащий жирные кислоты и ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры упаривают под вакуумом.
Колоночная хроматография
Полученный концентрат ненасыщенных АГЭ очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле 230-400 mesh, 60А («Merck»), используя элюирующую систему бензол : хлороформ 10:0→0:10, об./об. с повышением градиента. Фракции, содержащие суммарные чистые АГЭ, объединяют и упаривают.
Высокоэффективная жидкостная хроматография
Для получения индивидуальных ненасыщенных АГЭ, очищенный концентрат АГЭ ацетилируют ацетилхлоридом известным методом, при котором гидроксильные группы АГЭ образуют сложноэфирную связь с уксусной кислотой («Lipid analysis: a practical approach»/ Ed. by R. J. Hamilton and Sh. Hamilton, Oxford University Press, 1992. Protocol 37. P. 55), добавляя к АГЭ по каплям ацетилхлорид и выдерживая на бане в течение 1 минуты, добавляют 3-х кратный объем воды и экстрагируют ацетильные производные АГЭ хлороформом, упаривают растворитель.
ВЭЖХ ацетилированных АГЭ проводят на хроматографе LC-8A (Shimadzu, Япония) с рефрактометрическим детектором RID-10A. Препаративное разделение осуществляют на колонке Discovery HS С-18, 10 μм 25 см × 50 мм (Supelco, США) в изократическом режиме системой растворителей этанол-вода (85:15, об./об.). Скорость элюирования - 50 мл/мин. Элюаты индивидуальных ацетилированных ненасыщенных АГЭ собирают и упаривают под вакуумом.
Снятие ацетильных групп проводят щелочным гидролизом, обрабатывая индивидуальные ацетилированные АГЭ 5%-ным водно-спиртовым раствором NaOH, добавляют равный объем воды и экстрагируют индивидуальные ненасыщенные АГЭ гексаном, упаривают.
Изобретение иллюстрируется следующими фиг. и табл.
На фиг 1. приведена структурная формула алкил-глицериновых эфиров,
* - если R1= C16H33 - химиловый спирт,
R1= C18H37 - батиловый спирт,
R1= C18H35 - селахиловый спирт;
на фиг. 2 - схема щелочного гидролиз алкил-диацил-глицеридов (АДАГ);
в табл. 1 представлен состав липидов в продуктах (и полупродуктах) на разных стадиях выделения ненасыщенных АГЭ.
Способ осуществляют следующим образом.
ПРИМЕР 1. Выделение насыщенных и ненасыщенных АГЭ из жира пищеварительной железы командорского кальмара Berryteuthis magister.
Основными классами липидов пищеварительной железы являются алкил-диацил-глицерины (АДАГ) и свободные жирные кислоты, 37,5% и 29,7% соответственно. Кроме перечисленных компонентов, в состав липидов входят также триацил-глицерины (18,5%), холестерин (7,0%). Полярные липиды, эфиры стеринов и воски присутствуют в незначительных количествах.
Качественный и количественный состав смесей липидов на всех стадия процесса оценивают, используя метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) (пластинки «Sorbfil», система гексан-диэтиловый эфир-уксусная кислота 50:50:1, об./об./об.) с использованием планшетного сканера и оценки плотности (интенсивности) проявленных на ТСХ-хроматограммах пятен, применяя программу «ТСХ-менеджер версия 3.1 2005 @PinSoft».
Состав АГЭ, выделенных из гидролизованных липидов, а также полученных фракций определяли ГХ-МС.
Берут 100 кг пищеварительной железы (замороженные внутренности кальмара) нагревают в шнеке с водяной рубашкой и сепарируют. Получают 48,5 кг жира.
Гидролиз липидов пищеварительной железы кальмара
К 2 кг жира добавляют 1,5 л 96%-ного этанола и 1 л 40%-ого раствора КОН. Реакцию проводят при 60°С в течение 1 ч. Окончание реакции гидролиза контролируют методом тонкослойной хроматографии.
По окончании реакции смесь переносят в делительную воронку, прибавляют 4 л воды и нейтрализуют водным раствором H2SO4 до значения pH=4 по индикаторной бумаге. Отделившиеся липиды дважды промывают 3 л 1%-ного водного раствора NaCl.
Получено 1,76 кг гидролизованного жира.
Выход (на исходную массу липидов) - 88,0%.
Состав липидов после проведенного гидролиза показан в сводной табл.
Выделение насыщенных алкил-глицериновых эфиров
После щелочного гидролиза проводят кристаллизацию насыщенных АГЭ из ацетона, согласно разработанному ранее методу (Патент РФ №2476611 «Способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров», МПК C22B 7/04, C22B 15/00, C22B 23/00, C22B 4/06, опубл. 27.02.2013). На первой стадии кристаллизации при -15°С образовывался осадок, который повторно осаждают из ацетона при той же температуре.
Отбирают 1 кг гидролизованных липидов, приливают 2,8 л холодного (-15°С) ацетона, интенсивно перемешивают и помещают в морозильную камеру (-15°С) на 18 часов для осаждения насыщенных АГЭ. Процесс повторяют при тех же самых условиях. Выпавший осадок отфильтровывают через фильтрованную бумагу при -15°С. Полученный продукт представляет собой смесь насыщенных АГЭ с чистотой 99,2%, основным компонентом которой являлся химиловый спирт (содержание 93,4%).
Выход насыщенных АГЭ составил 11,0% от взятых на кристаллизацию липидов, или 42,0% от содержания АГЭ в гидролизованных липидах.
Полученный фильтрат, содержащий жирные кислоты и ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры, упаривают под вакуумом и выделяют из него ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры.
Выделение суммарных ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров
Колоночная хроматография
2 г полученного суммарного концентрата ненасыщенных АГЭ очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле 230-400 mesh, 60А («Merck»), используя элюирующую систему бензол : хлороформ 10:0→0:10, об./об. с повышением градиента. Фракции, содержащие суммарные чистые АГЭ, объединяли и упаривали.
Получено: 320 мг ненасыщенных АГЭ с содержанием АГЭ-18:1 (селахиловый спирт) 74,5% и АГЭ-20:1 (радикал в 1-м положении - 20:1) 11,8%.
Выход на стадии: 100% % (для селахилового спирта, АГЭ-18:1)
100% для АГЭ-20:1.
Высокоэффективная жидкостная хроматография
Для получения индивидуальных ненасыщенных АГЭ (селахилового спирта), очищенный концентрат АГЭ в количестве 320 мг ацетилируют ацетилхлоридом известным методом («Lipid analysis: a practical approach»/ Ed. by R. J. Hamilton and Sh. Hamilton, Oxford University Press, 1992. Protocol 37. P. 55), добавляя к АГЭ по каплям ацетилхлорид и выдерживая на бане в течение 1 минуты, добавляют 3-х кратный объем воды и экстрагируют ацетильные производные АГЭ хлороформом, упаривают растворитель.
ВЭЖХ ацетилированных АГЭ проводят на хроматографе LC-8A (Shimadzu, Япония) с рефрактометрическим детектором RID-10A. Препаративное разделение осуществляют на колонке Discovery HS С-18, 10 μм 25 см × 50 мм (Supelco, США) в изократическом режиме системой растворителей этанол-вода (85:15, об./об.). Скорость элюирования - 50 мл/мин. Элюаты индивидуальных ацетилированных ненасыщенных АГЭ объединяют и упаривают под вакуумом.
Снятие ацетильных групп проводят щелочным гидролизом, обрабатывая индивидуальные ацетилированные АГЭ 5%-ным водно-спиртовым раствором NaOH. Добавляют равный объем воды и экстрагируют индивидуальные ненасыщенные АГЭ углеводородным растворителем гексаном, упаривают.
Получено: 224,0 мг АГЭ-18:1 (селахиловый спирт) с концентрацией 98,1 %
Выход на стадии: 91,4%.
Получено: 35,7 мг АГЭ-20:1 (радикал в 1-м положении - 20:1) с концентрацией 97,8%.
Выход: 89,5%.
Предложенный методический подход позволил получить как насыщенные АГЭ с чистотой 99,2% (содержание химилового спирта, АГЭ-16:0 - 93.4%), так и индивидуальные ненасыщенные АГЭ-18:1 (селахиловый спирт) с чистотой 98,1% и АГЭ-20:1 с чистотой 97,8%. При этом особенностью является использование простых, доступных в современных лабораториях методов выделения.
Нами было осуществлено выделение индивидуальных ненасыщенных АГЭ из морского сырья с помощью сочетания колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюирующей системы бензол - хлороформ (10:0→0:10, об./об.) с возрастающей полярностью и высокоэффективной жидкостной хроматографии с элюирующей системой этанол - вода (85:15, об./об.), причем для увеличения подвижности разделяли не сами АГЭ, а их ацетилированные производные.
Преимуществом данного метода является возможность выделять чистые индивидуальные ненасыщенные АГЭ.
Способ обеспечивает в лабораторных условиях получение препаратов ненасыщенных АГЭ высокой степени очистки, пригодных к использованию, как в биохимических, так и в медицинских экспериментах.
Получаемые по способу препараты снижают зависимость от импортной продукции и позволяют оперативно проводить необходимые научные исследования.
| Таблица | ||||||
| АГЭ | Исходные | Осадок (насыщен. АГЭ) |
Фильтрат (объединенный) |
Колоночная хроматография | ВЭЖХ (АГЭ-18:1) |
ВЭЖХ (АГЭ-20:1) |
| 14:0 | 1.211 | 1.04 | 1.93 | 1.88 | - | - |
| 15:0 | 0.33 | 0.22 | сл. | сл. | - | - |
| 16:0 (химиловый спирт) |
73.52 | 93.43 | 6.39 | 6.21 | - | - |
| 17:0 | 0.50 | 0.47 | 0.16 | 0.14 | - | - |
| 18:0 (батиловый спирт) |
5.62 | 3.84 | сл. | сл. | - | 1.95 |
| 16:1 | 0.62 | - | 3.42 | 3.49 | 0.41 | - |
| 18:1 (селахиловый спирт) |
14.06 | - | 74.50 | 74.79 | 98.10 | - |
| 20:1 | 2.18 | - | 11.82 | 11.95 | 1.39 | 97.81 |
| 22:1 | 0.49 | - | 1.47 | 1.54 | 0.10 | 0.24 |
| ∑ нас. | 82.65 | 100 | 8.79 | 8.09 | - | 1.95 |
| ∑ ненас. | 17.35 | - | 91.21 | 91.91 | 100 | 98.05 |
| Содержание АГЭ продуктах, % |
19.14 | 99.22 | 7.35 | 100 | 100 | 100 |
| Выход на стадии, % | - | 42.0 | 100 | 100 | 91.4 | 89.5 |
1 нас. - насыщенные алкильные фрагменты, ненас. - ненасыщенные алкильные фрагменты, сл. - следовые количества (менее 0.1%).
Claims (1)
- Способ получения ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров, включающий гидролиз морского жира, нейтрализацию полученной жировой смеси разбавленной серной кислотой, промывку водным раствором NaCl, последовательную двойную кристаллизацию из ацетона при минус 15°С в течение 18 часов, отделение осадка насыщенных алкил-глицериновых эфиров и его сушку, упаривание жидкой фракции, содержащей ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры, их выделение колоночной хроматографией с элюирующей системой отличающийся тем, что в качестве элюирующей системы используют бензол:хлороформ = 10:0 → 0:10, об./об.; очищенный концентрат алкил-глицериновых эфиров ацетилируют ацетилхлоридом, после чего разделяют на индивидуальные ацетилированные алкил-глицериновые эфиры методом высокоэффективной жидкостной хроматорафии на колонке с обращенной фазой (С18) и элюцией 85%-ным водным этанолом, фракции с индивидуальными ацетилированными алкил-глицериновыми эфирами собирают и упаривают, ацетильные группы снимают щелочным гидролизом, алкил-глицериновые эфиры экстрагируют гексаном и упаривают.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019119136A RU2698715C1 (ru) | 2019-06-20 | 2019-06-20 | Способ получения ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2019119136A RU2698715C1 (ru) | 2019-06-20 | 2019-06-20 | Способ получения ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2698715C1 true RU2698715C1 (ru) | 2019-08-29 |
Family
ID=67851655
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019119136A RU2698715C1 (ru) | 2019-06-20 | 2019-06-20 | Способ получения ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2698715C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1076706A (en) * | 1964-08-17 | 1967-07-19 | William Chalmers | A process for the preparation and concentration of free hydroxylic substances from marine oils |
| RU2476211C1 (ru) * | 2011-09-16 | 2013-02-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук | Способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров |
| RU2649014C1 (ru) * | 2017-04-13 | 2018-03-29 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Национальный научный центр морской биологии" Дальневосточного отделения Российской академии наук (ННЦМБ ДВО РАН) | Способ получения концентрата ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских липидов |
-
2019
- 2019-06-20 RU RU2019119136A patent/RU2698715C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1076706A (en) * | 1964-08-17 | 1967-07-19 | William Chalmers | A process for the preparation and concentration of free hydroxylic substances from marine oils |
| RU2476211C1 (ru) * | 2011-09-16 | 2013-02-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук | Способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров |
| RU2649014C1 (ru) * | 2017-04-13 | 2018-03-29 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Национальный научный центр морской биологии" Дальневосточного отделения Российской академии наук (ННЦМБ ДВО РАН) | Способ получения концентрата ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских липидов |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5172281B2 (ja) | 海産および淡水産動物の組織から脂質を抽出する方法 | |
| CN104370954B (zh) | 一种硅胶柱层析法分离纯化鱼卵中卵磷脂的方法 | |
| Grima et al. | Gram-scale purification of eicosapentaenoic acid (EPA, 20: 5n-3) from wet Phaeodactylum tricornutum UTEX 640 biomass | |
| US5677472A (en) | Method for extracting sphingomyelin | |
| RU2698715C1 (ru) | Способ получения ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров | |
| Wang et al. | Simultaneous quantification of the lipids phosphatidylcholine, 3-sn-phosphatidylethanolamine, sphingomyelin, and L-α-lysophosphatidylcholine extracted from the tissues of the invasive golden apple snail (Pomacea canaliculata) using UHPLC-ESI-MS/MS | |
| RU2415125C1 (ru) | Способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров | |
| RU2649014C1 (ru) | Способ получения концентрата ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских липидов | |
| JPH0327538B2 (ru) | ||
| RU2398590C1 (ru) | Способ комплексной переработки плоских морских ежей | |
| KR100573466B1 (ko) | 누에번데기로부터 기름의 추출, 분리 및 정제방법 | |
| RU2642294C1 (ru) | Способ получения концентрата ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских гидробионтов | |
| CN119161378A (zh) | 一种同时制备高纯度鞘磷脂和甘油磷酸胆碱的方法 | |
| RU2698720C1 (ru) | Способ получения докозагексаеновой кислоты | |
| JP2009227765A (ja) | プラスマローゲン含有脂質の製造方法 | |
| RU2078130C1 (ru) | Способ получения концентрата этиловых эфиров полиненасыщенных высших жирных кислот | |
| JP7202646B2 (ja) | オリザノールの抽出方法 | |
| RU2778451C1 (ru) | Способ получения спиртового экстракта из устрицы crassostrea gigas | |
| JPH0297393A (ja) | エイコサペンタエン酸を含むリン脂質組成物の海洋微生物による製造法 | |
| JPH01160989A (ja) | ドコサヘキサエノイルホスファチジルコリンの製造法 | |
| Li et al. | Chemical constituents and antioxidant activities of waste liquid extract from Apostichopus japonicus Selenka processing | |
| Kononenko et al. | The effect of the Brassica oleracea extract on the structural components of mucous cells of the stomach in its ulcerative damage | |
| EP2848251B1 (en) | Extracts and isolated compounds from Cakile arabica for treatment of ulcer | |
| RU2195296C2 (ru) | Способ получения ганглиозидов | |
| RU2627273C1 (ru) | Способ получения арахидоновой кислоты |