[go: up one dir, main page]

RU2698455C1 - Biopolymer matrix based on chitosan, arabinogalactan succinate and a method for production thereof - Google Patents

Biopolymer matrix based on chitosan, arabinogalactan succinate and a method for production thereof Download PDF

Info

Publication number
RU2698455C1
RU2698455C1 RU2018141734A RU2018141734A RU2698455C1 RU 2698455 C1 RU2698455 C1 RU 2698455C1 RU 2018141734 A RU2018141734 A RU 2018141734A RU 2018141734 A RU2018141734 A RU 2018141734A RU 2698455 C1 RU2698455 C1 RU 2698455C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
chitosan
arabinogalactan
bpm
succinate
succinic anhydride
Prior art date
Application number
RU2018141734A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Виктор Григорьевич Шелепов
Владимир Александрович Углов
Александр Валерьевич Душкин
Любовь Петровна Сунцова
Елена Валерьевна Бородай
Николай Эдуардович Поляков
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Сибирский федеральный научный центр агробиотехнологий Российской академии наук
Priority to RU2018141734A priority Critical patent/RU2698455C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2698455C1 publication Critical patent/RU2698455C1/en

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/335Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

FIELD: biochemistry.
SUBSTANCE: invention relates to a biologically active biopolymer matrix (BPM) for use in medicine, food industry and agriculture. Matrix is based on chitosan succinate (3.0–5.0 wt%), succinic anhydride (2.0–4.0 wt%), arabinogalactan (15.0–20.0 wt%) and covalently associated with it dihydroquercetin (3–5 wt%). BPM production is based on two-phase mechanochemical activation of initial components, as a result of which, at the first stage, chitosan succinate is obtained when it is crosslinked with succinic anhydride, and at second – modification of arabinogalactan with chitosan succinate by mixing solid substances at molecular level and formation of solid-phase target product.
EFFECT: technical result consists in obtaining safe BPM with high complexing ability, bioavailability, hydrophilicity with respect to hardly soluble in water various compounds and chemical elements, high penetrating power, having a complex of therapeutic and preventive properties (antioxidant, actoprotective, radioprotective and antiseptic).
4 cl, 3 dwg, 4 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к биологически активной биополимерной матрице на основе сукцината хитозана и арабиногалактана и может быть использовано в медицине, пищевой промышленности и сельском хозяйстве.The invention relates to a biologically active biopolymer matrix based on chitosan and arabinogalactan succinate and can be used in medicine, food industry and agriculture.

В производстве пищевых, фармакологических препаратов и в кормах сельскохозяйственных животных находят широкое применение различные биологически активные вещества животного, и/или растительного и/или минерального происхождения. Активизируя обмен веществ и иммунный статус организма при приеме внутрь в качестве пищевой добавки, они улучшают физиологическое состояние организма, а также кожи при наружном применении. Однако многие биологически активные вещества (БАВ), входящие в состав этих добавок обладают низкой биодоступностью из-за недостаточной растворимости в водных растворах. Поэтому повышение их биодоступности и растворимости является актуальной задачей.Various biologically active substances of animal, and / or vegetable and / or mineral origin are widely used in the production of food, pharmacological preparations and in the feed of farm animals. By activating the metabolism and immune status of the body when taken orally as a dietary supplement, they improve the physiological state of the body, as well as the skin when applied externally. However, many biologically active substances (BAS) that are part of these additives have low bioavailability due to insufficient solubility in aqueous solutions. Therefore, increasing their bioavailability and solubility is an urgent task.

Известна композиция с повышенной фармакологической активностью на основе дигидрокверцитина и растительных полисахаридов-арабиногалактана (варианты) RU 2 421 215 (заявл. 15.04.2010, опубл. 20.06.2011) (1).A known composition with increased pharmacological activity based on dihydroquercitin and plant polysaccharides-arabinogalactan (options) RU 2 421 215 (claimed. 15.04.2010, publ. 20.06.2011) (1).

Авторами предложены две водорастворимые лекарственные композиции (варианты): одна представляет собой порошкообразную смесь флавоноида (дигидрокверцетина) и полисахарида (арабиногалактана) из лиственницы сибирской или лиственницы Гмелина в соотношении от 1:5 до 1:20, полученную путем ударно-истирающего воздействия с механической энергией не менее 20-40 Дж/г в течение 4 часов; другая представляет собой порошкообразную смесь флавоноида дигидрокверцетина и гликопротеина из акации японской. Композиции повышают растворимость дигидрокверцетина в водных растворах, увеличивают скорость кровотока в микрососудах, тем самым оказывая капилляротерапевтическое действие.The authors proposed two water-soluble medicinal compositions (options): one is a powder mixture of flavonoid (dihydroquercetin) and polysaccharide (arabinogalactan) from Siberian larch or Gmelin larch in a ratio of 1: 5 to 1:20, obtained by impact-abrasion with mechanical energy not less than 20-40 J / g for 4 hours; the other is a powdery mixture of flavonoid dihydroquercetin and glycoprotein from Japanese acacia. Compositions increase the solubility of dihydroquercetin in aqueous solutions, increase the speed of blood flow in microvessels, thereby exerting a capillary therapeutic effect.

Недостатком композиции является ее ограниченная биологическая активность, связанная только с изучением капилляротерапевтического эффекта.The disadvantage of the composition is its limited biological activity associated only with the study of capillary therapeutic effect.

Задача заявленного изобретения заключается в создании биополимерной матрицы (БПМ) на основе сшитых полисахаридов - арабиногалактана (АГ) и сукцината хитозана (СХ), используемой в качестве основы для создания различных соединений, в том числе фармакологических препаратов и разработка способа ее получения.The objective of the claimed invention is to create a biopolymer matrix (BPM) based on crosslinked polysaccharides - arabinogalactan (AG) and chitosan succinate (CX), used as the basis for the creation of various compounds, including pharmacological preparations and the development of a method for its preparation.

Технический результат изобретения состоит в получении безопасной БПМ с высокой комплексообразующей способностью, биодоступностью, гидрофильностью в отношении труднорастворимых в воде различных соединений и химических элементов, повышенной проникающей способностью, обладающей комплексом лечебно-профилактических свойств (антиоксидантные, актопротектные, радиопротекторные и антисептические).The technical result of the invention is to obtain safe BPM with high complexing ability, bioavailability, hydrophilicity in relation to water-insoluble various compounds and chemical elements, increased penetrating ability, with a complex of therapeutic properties (antioxidant, actoprotective, radioprotective and antiseptic).

Существует ряд методов, позволяющих повысить эффективность лекарственных средств и биологически активных добавок (БАД), в том числе так называемые методы получения твердых дисперсий (ТД) - особым образом приготовленных твердофазных композиций биологически активных веществ (БАВ) с различными вспомогательными веществами (ВВ). При растворении, за счет различных физико-химических механизмов, имеет место повышение растворимости малорастворимых химических компонентов и соединений. К таким механизмам относится ионизация полярных молекул, а также включение их молекул в супрамолекулярные водорастворимые образования - межмолекулярные комплексы, мицеллы и т.д. Обычно ТД получают с применением жидкофазных технологий - из растворов или расплавов. Этот метод имеет существенные ограничения, связанные с термической стабильностью и совместной растворимостью веществ. Также недостатком жидкофазного синтеза является многостадийность процесса и необходимость использования растворителей [2].There are a number of methods that can improve the effectiveness of drugs and biologically active additives (BAA), including the so-called methods of producing solid dispersions (TD) - specially prepared solid-phase compositions of biologically active substances (BAS) with various auxiliary substances (BB). Upon dissolution, due to various physicochemical mechanisms, there is an increase in the solubility of poorly soluble chemical components and compounds. Such mechanisms include the ionization of polar molecules, as well as the inclusion of their molecules in supramolecular water-soluble formations - intermolecular complexes, micelles, etc. Typically, TDs are prepared using liquid-phase technologies — from solutions or melts. This method has significant limitations associated with thermal stability and joint solubility of substances. Another disadvantage of liquid-phase synthesis is the multi-stage process and the need for solvents [2].

Среди разнообразия ВВ наибольший интерес представляют уже использующийся в медицинской и пищевой промышленности - комплексообразующий агент -водорастворимый полисахарид арабиногалактан (АГ), полученный из лиственниц Сибирской (Larix sibirica) и Гмелина (Larix gmelinii). Он обеспечивает увеличение растворимости биологически активных веществ из полученных твердых дисперсий с повышенной растворимостью исходных субстанций, а также повышает химическую стабильность твердых суспензий за счет включения их молекул в межмолекулярные комплексы.Among the variety of explosives, the most interesting is already used in the medical and food industry - a complexing agent - a water-soluble polysaccharide arabinogalactan (AG), obtained from Siberian larch (Larix sibirica) and Gmelin (Larix gmelinii). It provides an increase in the solubility of biologically active substances from the obtained solid dispersions with increased solubility of the starting substances, and also increases the chemical stability of solid suspensions due to the inclusion of their molecules in intermolecular complexes.

Арабиногалактан (АГ) представляет собой водорастворимый природный полисахарид, содержащий ковалентно не связанный с ним флавоноид дигидрокверцетин. Арабиногалактан является иммуномодулятором, активирующими ретикулоэндотелиальную систему (РЭС). Кроме того, он увеличивает фагоцитарный индекс. Биологическая активность АГ во многом зависит от особенностей тонкой структуры макромолекул, т.е. от строения всех боковых цепей, их расположения вдоль главной цепи, конформации макромолекул, механизма образования агрегатов. Установлено, что АГ - целенаправленный носитель для доставки диагностических и терапевтических агентов, а также ферментов, нуклеиновых кислот, витаминов или гормонов к определенным клеткам, в частности к гепатоцитам (паренхимным клеткам печени). При этом образуется комплекс между доставляемым агентом и арабиногалактаном, способным взаимодействовать с асиалогликопротеиновым рецептором клетки.Arabinogalactan (AG) is a water-soluble natural polysaccharide containing flavonoid dihydroquercetin covalently unrelated to it. Arabinogalactan is an immunomodulator that activates the reticuloendothelial system (RES). In addition, it increases the phagocytic index. The biological activity of hypertension largely depends on the features of the fine structure of macromolecules, i.e. from the structure of all side chains, their location along the main chain, the conformation of macromolecules, the mechanism of formation of aggregates. It has been established that AH is a targeted carrier for the delivery of diagnostic and therapeutic agents, as well as enzymes, nucleic acids, vitamins, or hormones to certain cells, in particular hepatocytes (parenchymal liver cells). In this case, a complex is formed between the delivered agent and arabinogalactan capable of interacting with the asialoglycoprotein receptor of the cell.

Дигидрокверцетин относится к фенольным антиоксидантам натурального происхождения, или биофлавоноидам. Дигидрокверцетин входит в состав молекулы арабиногалактана в виде клатраного (супрамолекулярного) соединения (3-5%). Дигидрокверцетин, превосходит по своей фармабиологической активности все известные науке флавоноиды, обладает выраженным антиоксидантным эффектом, защищает мембраны клеток от повреждающего действия свободных радикалов, оказывает противовоспалительное, противоотечное и гепатопротекторное действиеDihydroquercetin refers to phenolic antioxidants of natural origin, or bioflavonoids. Dihydroquercetin is part of the arabinogalactan molecule in the form of a clathra (supramolecular) compound (3-5%). Dihydroquercetin, surpasses all known flavonoids in its pharmacological activity, has a pronounced antioxidant effect, protects cell membranes from the damaging effects of free radicals, has anti-inflammatory, decongestant and hepatoprotective effects

Основным свойством дигидрокверцетина (ДГК) является его способность подавлять токсическое действие свободных радикалов, образующихся в клетках организма в результате обмена веществ. Он используется для выведения из организма солей тяжелых металлов и радионуклидов.The main property of dihydroquercetin (DHA) is its ability to suppress the toxic effect of free radicals formed in the cells of the body as a result of metabolism. It is used to remove salts of heavy metals and radionuclides from the body.

Область применения его достаточно широка, но главным его преимуществом является высокая степень антиоксидантной защиты, суть которой состоит в разрушении свободных радикалов. Они являются причиной возникновения различных серьезных заболеваний человека: атеросклероз, рак, инфаркт, инсульт и др. ДГК служит сильным профилактическим средством в отношении указанных заболеваний, обладает иммунопрофилактическим эффектом, положительно влияет на нервную систему и активизирует ее деятельность. Высокая антиоксидантная активность ДГК состоит в нейтрализации и выведении из организма человека свободных радикалов, в результате чего предотвращается развитие указанных выше заболеваний человека.Its scope is wide enough, but its main advantage is a high degree of antioxidant protection, the essence of which is the destruction of free radicals. They are the cause of various serious human diseases: atherosclerosis, cancer, heart attack, stroke, etc. DHA serves as a strong prophylactic against these diseases, has an immunoprophylactic effect, positively affects the nervous system and activates its activity. The high antioxidant activity of DHA consists in neutralizing and eliminating free radicals from the human body, as a result of which the development of the above human diseases is prevented.

Повышенный интерес к ДГК связан также и с его высокими антиокислительными свойствами. Он обеспечивает сохранность органолептических свойств готового продукта и его устойчивость к хранению.The increased interest in DHA is also associated with its high antioxidant properties. It ensures the safety of the organoleptic properties of the finished product and its resistance to storage.

Особенность строения макромолекул АГ (фиг. 1), может способствовать образованию прочных межмолекулярных комплексов действующих веществ, молекулы которых, вероятнее всего, могут связываться межмолекулярными водородными связями в пространстве, образованном боковыми цепями. Учитывая конформационную подвижность макромолекул АГ, размеры этого пространства могут варьироваться, способствуя образованию супрамолекулярных комплексов с широким кругом веществ.The structural feature of AG macromolecules (Fig. 1) can contribute to the formation of strong intermolecular complexes of active substances, the molecules of which are most likely to be bound by intermolecular hydrogen bonds in the space formed by the side chains. Given the conformational mobility of AG macromolecules, the size of this space can vary, contributing to the formation of supramolecular complexes with a wide range of substances.

Включение в твердофазовые дисперсии сукцината хитозана и АГ позволяют получать растворимую в воде композицию. Поликатионный полисахарид хитозан, продукт деацетилирования хитина, широко применяется в различных отраслях промышленности, биотехнологии, медицине и косметике.The inclusion of chitosan and AH in solid-phase dispersions makes it possible to obtain a water-soluble composition. The polycationic polysaccharide chitosan, a product of chitin deacetylation, is widely used in various industries, biotechnology, medicine and cosmetics.

Хитозан хороший гелеобразователь и эмульгатор. Доказана его способность образовывать комплексные соединения с протеинами и липидами. Наличие гидроксильных групп высокой электронной плотности с неподеленными электронными парами вдоль молекулы приводит к образованию водородных связей с другими биополимерными соединениями, в первую очередь формируются прочные комплексы с липидами и белками, в которых хитозан выполняет роль ядра.Chitosan is a good gelling agent and emulsifier. Its ability to form complex compounds with proteins and lipids has been proven. The presence of high electron density hydroxyl groups with lone electron pairs along the molecule leads to the formation of hydrogen bonds with other biopolymer compounds, first of all, strong complexes with lipids and proteins are formed in which chitosan acts as a nucleus.

Благодаря позитивно заряженным молекулам и свойствам сорбента хитозан крепко связывается с негативно заряженными молекулами, расположенными на мембранах микробов (тейхоевые кислоты, фосфорнокислые и карбоксильные группы). Фиксация мембран парализует их работу, особенно транспорт ионов, полезных веществ, что ведет к усилению чувствительности возбудителей заболеваний к различным антибактериальным веществам. Полезные и важные особенности хитозана заключаются и в том, что он соединяется с любой живой тканью, обладает мукоадгезивными свойствами, разлагается и открывает плотные сочленения между клетками. С помощью использования этих свойств доставка лекарственного средства через слизистую мембрану может быть существенно улучшена. Протонированный хитозан в организме распадается при помощи лизоцима, превращаясь в глюкозамин и сопряженное основание кислоты - сукцинат. Сукцинат хитозана представляет собой соль деацетилированного хитина и янтарной кислоты. Сукцинат хитозана гипоаллергенен, биосовместим, биоразлагаем. Благодаря деацетилированию, хитозан приобретает два важных свойства, обуславливающие особенности и сферу его использования.Due to the positively charged molecules and the properties of the sorbent, chitosan binds strongly to negatively charged molecules located on the membranes of microbes (teichoic acids, phosphate and carboxylic groups). Fixation of the membranes paralyzes their work, especially the transport of ions, beneficial substances, which leads to increased sensitivity of pathogens to various antibacterial substances. Useful and important features of chitosan are that it combines with any living tissue, has mucoadhesive properties, decomposes and opens tight joints between cells. By using these properties, drug delivery through the mucous membrane can be significantly improved. Protonated chitosan in the body breaks down with the help of lysozyme, turning into glucosamine and the conjugated acid base - succinate. Chitosan succinate is a salt of deacetylated chitin and succinic acid. Chitosan succinate is hypoallergenic, biocompatible, biodegradable. Due to deacetylation, chitosan acquires two important properties that determine the features and scope of its use.

Сукцинат хитозана хорошо растворим в воде; его деацитилированные и замещенные группы при значениях рН<7 приобретают положительный заряд, т.е. хитозановый гель представляет собой поликатион, который соответственно связывается с отрицательно заряженными молекулами.Chitosan succinate is highly soluble in water; its deacylated and substituted groups at pH <7 acquire a positive charge, i.e. chitosan gel is a polycation, which accordingly binds to negatively charged molecules.

Производство биополимерной матрицы основано на механохимической активации двух полисахаридов: растительного (арабиногалактан) и хитинового (сукцинат хитозана).The production of the biopolymer matrix is based on the mechanochemical activation of two polysaccharides: plant (arabinogalactan) and chitin (chitosan succinate).

Метод механохимической активации позволяет проводить измельчение твердых тел до молекулярного уровня.The method of mechanochemical activation allows the grinding of solids to a molecular level.

В результате измельченные частички образуют агрегаты, а при продолжении механической активации происходит смешивание твердых веществ на молекулярном уровне. При этом в зависимости от природы веществ происходят химические реакции с образованием твердой фазы, в которой молекулы вступают в различного рода взаимодействия. Далее при тепловом воздействии или гидратации быстро происходит химическая реакция с образованием целевых продуктов.As a result, the crushed particles form aggregates, and with continued mechanical activation, mixing of solids occurs at the molecular level. In this case, depending on the nature of the substances, chemical reactions occur with the formation of a solid phase in which molecules enter into various kinds of interactions. Further, during thermal exposure or hydration, a chemical reaction quickly occurs with the formation of the target products.

Процесс получения БПМ проходит в два этапа.The process of obtaining BPM takes place in two stages.

На первом этапе был получен сукцинат хитозана - деацетилированием хитина, имеющего степень деацетилирования больше или равную 75% и молекулярную массу в диапазоне от 1 кДа до 30 кДа, механохимическим способом его сшивали янтарным ангидридом. В результате механической активации происходит количественное ацилирование всех аминогрупп хитозана, что подтверждается кондуктометрическим титрованием. Существенно, что сам принцип проведения реакции в твердофазовом состоянии не потребует растворения ангидридов дикарбоновых кислот в органическом растворителе.At the first stage, chitosan succinate was obtained by deacetylation of chitin having a degree of deacetylation greater than or equal to 75% and a molecular weight in the range from 1 kDa to 30 kDa, and mechanochemically it was crosslinked with succinic anhydride. As a result of mechanical activation, quantitative acylation of all amino groups of chitosan occurs, which is confirmed by conductometric titration. It is significant that the very principle of carrying out the reaction in the solid state state does not require the dissolution of dicarboxylic acid anhydrides in an organic solvent.

На втором этапе для модификации арабиногалактана, полученный сукцинат хитозана механическим способом соединяли на молекулярном уровне с арабиногалактаном, полученный мелкодисперсный порошок растворяли в воде и нейтрализацию смеси проводили водным щелочным раствором и сушили методом распылительной или вакуумной сушки. Для этого предварительно проводили механохимическую обработку исходных компонентов в ротационной (валковой) мельницей ВМ-1 с барабаном, имеющим фторопластовую футеровку. В качестве мелющих тел использовали стальные шары (марка стали ШХ-15). В количестве 15 штук и массой 44,3 г. Ускорение мелющих тел - 10-60 g. Объем барабана - 300 мл, скорость вращения 157 об/мин, общая загрузка компонентов 100 г, время обработки 4 ч.At the second stage, for the modification of arabinogalactan, the obtained chitosan succinate was mechanically combined at the molecular level with arabinogalactan, the obtained fine powder was dissolved in water and the mixture was neutralized with an aqueous alkaline solution and dried by spray or vacuum drying. To this end, mechanochemical processing of the starting components was preliminarily carried out in a VM-1 rotary (roll) mill with a drum having a fluoroplastic lining. As grinding media used steel balls (steel grade SHX-15). In the amount of 15 pieces and a mass of 44.3 g. Acceleration of grinding media - 10-60 g. Drum volume - 300 ml, rotation speed 157 rpm, total component loading 100 g, processing time 4 hours

БПМ приобретает пластичную структуру частиц хитозана, отличающаяся тем, что она имеет вид поперечно сшитого сетчатого полимера с множеством сферических полостей, имеющих размер не менее 1,0 нм и не более 5000,0 нм.BPM acquires a plastic structure of chitosan particles, characterized in that it has the form of a cross-linked network polymer with many spherical cavities having a size of not less than 1.0 nm and not more than 5000.0 nm.

Предлагаемый состав биополимерной матрицы включает сукцинат хитозана, янтарный ангидрид и арабиногалактан, содержащий ковалентно не связанный с ним дигидрокверцетин.The proposed composition of the biopolymer matrix includes chitosan succinate, succinic anhydride and arabinogalactan containing dihydroquercetin covalently unrelated to it.

Для определения оптимального соотношения компонентов БПМ и его растворимости, полученные порошкообразные композиции, а также навески каротиноидов, эквивалентные их содержанию в композициях, растворяли в 5 мл дистиллированной воды при температуре +25°С, при перемешивании 150 об/мин в течение 30 мин. Навеска образца соответствовала массе, необходимой для достижения расчетной концентрации полисахаридов 10 г/л, каротиноида - 0,1 г/л. Затем надосадочную жидкость центрифугировали и фильтровали через бумажный фильтр. Для растворов полисахаридов отобранную аликвоту 1 см3 разбавляли дистиллированной водой до 25 см3. Концентрацию БПМ определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии относительно их специально приготовленных стандартных спиртовых растворов.To determine the optimal ratio of BPM components and its solubility, the obtained powder compositions, as well as weighed carotenoids equivalent to their content in the compositions, were dissolved in 5 ml of distilled water at a temperature of + 25 ° С, with stirring 150 rpm for 30 minutes. A sample of the sample corresponded to the mass necessary to achieve the calculated polysaccharide concentration of 10 g / l, carotenoid - 0.1 g / l. Then the supernatant was centrifuged and filtered through a paper filter. For polysaccharide solutions, a selected aliquot of 1 cm 3 was diluted with distilled water to 25 cm 3 . BPM concentration was determined by high performance liquid chromatography relative to their specially prepared standard alcohol solutions.

Из полученных микрофотографий следует, что при механической обработке происходит измельчение частиц исходных компонентов и образование их композитных агрегатов, что способствует быстрому взаимодействию компонентов при гидратации.From the obtained micrographs it follows that during mechanical processing the particles of the starting components are crushed and their composite aggregates are formed, which contributes to the rapid interaction of the components during hydration.

На фиг. 2 представлены электронные микрофотографии порошков БПМ после механической обработки композиций в течение 4 часов.In FIG. 2 presents electronic micrographs of BPM powders after machining the compositions for 4 hours.

На приведенных микрофотографиях присутствуют характерные для кристаллических полисахаридов фазовые переходы плавления. В механохимически обработанных смесях происходит уменьшение теплоты плавления и интенсивностей рефлексов РФА, этот эффект позволяет предположить, что в результате механической обработки происходит частичная потеря кристалличности твердых фаз полисахаридов. Наиболее характерно это видно на фиг. 2 при соотношении хитозан/ янтарный диангидрид/ арабиногалактан 4:3:20.The microphotographs show melting phase transitions characteristic of crystalline polysaccharides. In mechanochemically treated mixtures, a decrease in the heat of fusion and intensities of the XRPA reflections occurs, this effect suggests that, as a result of mechanical treatment, a partial loss of crystallinity of the solid phases of polysaccharides occurs. This is most typically seen in FIG. 2 with a ratio of chitosan / succinic dianhydride / arabinogalactan 4: 3: 20.

В результате механической обработки полисахарида АГ с сукцинатом хитозана, в присутствии янтарного ангидрида, наряду с нарушением кристаллической структуры полисахаридов, происходит диспергирование молекул СХ в матрицу водорастворимого полисахарида АГ, что также способствует их ускоренному высвобождению в раствор и образованию межмолекулярных комплексов при гидратации. Данные по изменению растворимости флавоноидов из смесей с АГ приведены в таблице 1.As a result of mechanical processing of AG polysaccharide with chitosan succinate in the presence of succinic anhydride, along with a violation of the crystal structure of polysaccharides, CX molecules are dispersed into the matrix of water-soluble AG polysaccharide, which also contributes to their accelerated release into solution and the formation of intermolecular complexes during hydration. Data on changes in the solubility of flavonoids from mixtures with AG are shown in table 1.

Figure 00000001
Figure 00000001

Для исследования межмолекулярных взаимодействий молекул хитозана с молекулами АГ в растворе был применен метод динамической 1Н ЯМР-спектроскопии - исследование спин-спиновой релаксации Т2, параметры которой очень чувствительны к диффузионной подвижности молекул. При комплексообразовании молекул хитозана с макромолекулами АГ время релаксации протонов существенно сокращаются из-за замедления диффузионной подвижности. В ситуации, когда молекулы хитозана в комплексе и в растворе находятся в состоянии «быстрого» обмена, изменение сигнала ЯМР с помощью импульсной последовательности CPMG описывается моноэкспоненциальным законом. В этих условиях наблюдаемая величина времени релаксации (Тнаб) является суперпозицией величин T21 и Т22.To study the intermolecular interactions of chitosan molecules with AG molecules in solution, the method of dynamic 1 H NMR spectroscopy was used - the study of spin-spin relaxation of T 2 , the parameters of which are very sensitive to the diffusion mobility of the molecules. During the complexation of chitosan molecules with AG macromolecules, the proton relaxation time is significantly reduced due to the slowing down of diffusion mobility. In a situation when the chitosan molecules in the complex and in the solution are in a state of “quick” exchange, the change in the NMR signal using the pulse sequence CPMG is described by a monoexponential law. Under these conditions, the observed relaxation time (T nab ) is a superposition of T 21 and T 22 .

l/Tнаб=Pl/T21+(1-P1)/T22 l / T nab = P l / T 21 + (1-P 1 ) / T 22

Быстрая компонента P1 соответствует доле молекул находящихся в комплексе. T21 и Т22 - времена спин-спиновой релаксации в комплексе и в растворе, соответственно. Типичные значения Т2 для молекул в растворе - это 0,5-5 сек, а в комплексе с АГ - 50-150 мсек.The fast component P 1 corresponds to the proportion of molecules in the complex. T 21 and T 22 are the times of spin-spin relaxation in the complex and in solution, respectively. Typical values of T 2 for molecules in solution are 0.5-5 seconds, and in combination with AG, 50-150 ms.

Потеря кристалличности (аморфизация) полисахаридов в результате механической обработки также способствует ускорению перевода их в растворенное состояние.The loss of crystallinity (amorphization) of polysaccharides as a result of mechanical processing also helps to accelerate their transfer to a dissolved state.

При растворении в воде твердых дисперсий наблюдается значительное повышение растворимости твердофазовой смеси полисахаридов в зависимости от соотношения компонентов по отношению к хитозану.When solid dispersions are dissolved in water, a significant increase in the solubility of the solid-phase mixture of polysaccharides is observed, depending on the ratio of components with respect to chitosan.

Из твердых дисперсий полисахаридов сукцинат хитозана/арабиногалактан достигается большее значение их водорастворимости в отношении малорастворимого хитозана. Это связано с потерей кристалличности (аморфизацией) фаз полисахаридов при механической обработке и подчеркивает преимущество получения ТД с помощью механохимической технологии по сравнению со смешением компонентов без механической обработки.From solid dispersions of chitosan / arabinogalactan succinate polysaccharides, a greater value of their water solubility in relation to sparingly soluble chitosan is achieved. This is due to the loss of crystallinity (amorphization) of the polysaccharide phases during mechanical processing and emphasizes the advantage of obtaining TD using mechanochemical technology compared to the mixing of components without mechanical processing.

Соответственно предложенное соотношение компонентов БПМ 4:3:15-20 является оптимальным и выносится в формулу изобретения.Accordingly, the proposed ratio of BPM components 4: 3: 15-20 is optimal and is made in the claims.

Комплексообразующая способность супрамолекулярной композиции: сукцинат хитозана, янтарный ангидрид, арабиногалактан, исследована методом оптической спектроскопии с целью оценки степени увеличения растворимости гидрофобных лекарственных соединений в воде.The complexing ability of the supramolecular composition: chitosan succinate, succinic anhydride, arabinogalactan, was studied by optical spectroscopy to assess the degree of increase in the solubility of hydrophobic drug compounds in water.

Для исследования были взяты два соединения, карведилол и зеаксантин, обладающие низкой собственной растворимостью в воде. В качестве комплексообразователя использовалась механохимически приготовленная смесь: хитозан, янтарный ангидрид, арабиногалактан в соотношении 4:3:20.Two compounds, carvedilol and zeaxanthin, which have a low intrinsic solubility in water, were taken for the study. As a complexing agent, a mechanochemically prepared mixture was used: chitosan, succinic anhydride, arabinogalactan in a ratio of 4: 3: 20.

Приготовление комплекса:Preparation of the complex:

1) БПМ и лекарственное соединение (ЛС) в соотношении 10:1 перемешивались перетиранием в ступке.1) BPM and drug compound (LS) in a ratio of 10: 1 were mixed by grinding in a mortar.

2) К смеси добавлялось небольшое количество хлороформа для растворения ЛС и лучшего смачивания порошка.2) A small amount of chloroform was added to the mixture to dissolve the drug and better wet the powder.

3) Затем смесь высушивалась и разбавлялась дистиллированной водой для получения 1% раствора комплекса (50 мг на 5 мл воды).3) Then the mixture was dried and diluted with distilled water to obtain a 1% solution of the complex (50 mg per 5 ml of water).

4) Данный раствор перемешивался на магнитной мешалке в течение 2-х часов при комнатной температуре.4) This solution was stirred on a magnetic stirrer for 2 hours at room temperature.

5) Затем раствор центрифугировался для осаждения нерастворившегося осадка (5 мин при 10000 об/мин).5) Then, the solution was centrifuged to precipitate an insoluble precipitate (5 min at 10,000 rpm).

Полученный после центрифугирования прозрачный раствор анализировался на спектрофотометре для определения концентрации растворенного ЛС. Численное значение концентрации получалось делением величины оптической плотности раствора на известный из литературы (или измеренный нами) коэффициент экстинкции данного ЛС в максимуме поглощения.The transparent solution obtained after centrifugation was analyzed on a spectrophotometer to determine the concentration of dissolved drug. The numerical value of the concentration was obtained by dividing the optical density of the solution by the extinction coefficient of this drug known from the literature (or measured by us) at the absorption maximum.

Комплексообразующая способность супромолекулярной композиции иллюстрируется следующими примерами.The complexing ability of the supramolecular composition is illustrated by the following examples.

Пример 1:Example 1:

Композиция каротиноид зеаксантин - 1:10The composition of the carotenoid zeaxanthin - 1:10

Зеаксантин - один из распространенных антиоксидантов и пигментов каротиноидной группы. Зеаксантин является одним из двух каротиноидов, которые содержатся в сетчатке глаза (зона макулы). Как антиоксидант, он способен нейтрализовать свободные радикалы, которые окисляют и повреждают сетчатку, а это значит, предотвращает развитие катаракты, служит профилактикой возрастной макулярной дегенерации. Одним из основных ограничений применения зеаксантина в фармакологии и пищевой промышленности является его крайне низкая растворимость в воде.Zeaxanthin is one of the common antioxidants and pigments of the carotenoid group. Zeaxanthin is one of two carotenoids that are found in the retina (macular zone). As an antioxidant, it is able to neutralize free radicals that oxidize and damage the retina, which means it prevents the development of cataracts and serves as a preventive measure for age-related macular degeneration. One of the main limitations of the use of zeaxanthin in pharmacology and the food industry is its extremely low solubility in water.

Обнаружено, что комплексообразование с более чем в 1000 раз повышает растворимость зеаксантина в воде. Измеренная нами концентрация комплекса зеаксантин - БПМ 1:10 составила 40 микромолей или 22 мг/л. Измеренная величина повышения растворимости (1000 раз) является нижней оценкой, поскольку его собственная растворимость ниже предела чувствительности прибора.It was found that complexation with more than 1000 times increases the solubility of zeaxanthin in water. The concentration of the zeaxanthin – BPM 1:10 complex measured by us was 40 micromoles or 22 mg / L. The measured increase in solubility (1000 times) is a lower estimate, since its intrinsic solubility is below the sensitivity limit of the device.

Пример 2:Example 2:

Композиция карведилол - 1:10Carvedilol composition - 1:10

Карведилол - антиангинальное, антиоксидантное, гипотензивное, вазодила-тирующее лекарственное средство. Слабо растворим в воде. Биодоступность около 25%.Carvedilol is an antianginal, antioxidant, hypotensive, vasodilating drug. Slightly soluble in water. Bioavailability is about 25%.

Обнаружено, что комплексообразование с БПМ повышает растворимость карведилола в воде в 40 раз (фиг. 3). Измеренная нами концентрация комплекса карведилол-БПМ 1:10 составила 50 микромолей или 20 мг/л. Абсолютное значение растворимости рассчитано из измеренного коэффициента экстинкции карведиола на длине волны 332 нм равного 4760 л моль-1 см-1. Общий вывод - композиция БПМ обладает высокой комплексообразующей способностью.It was found that complexation with BPM increases the solubility of carvedilol in water by 40 times (Fig. 3). The concentration of the carvedilol-BPM 1:10 complex measured by us was 50 micromoles or 20 mg / L. The absolute solubility value is calculated from the measured extinction coefficient of carvediol at a wavelength of 332 nm equal to 4760 l mol -1 cm -1 . The general conclusion is that the BPM composition has a high complex-forming ability.

Исследование общетоксического действия композиции БПМ проводили в соответствии с «Методическими рекомендациями по изучению общетоксического действия фармакологических средств», утвержденных Управлением государственного контроля лекарственных средств и медицинской техники Минздрава России 29 декабря 1997 г. The study of the general toxic effect of the BPM composition was carried out in accordance with the “Methodological recommendations for the study of the general toxic effect of pharmacological agents”, approved by the Department of State Control of Medicines and Medical Equipment of the Ministry of Health of Russia on December 29, 1997.

Целью изучения общетоксического действия композиции на основе сукцината хитозана и арабиногалактана является установление характера и выраженности его повреждающего действия на организм экспериментальных животных и оценка его безопасности.The purpose of studying the general toxic effect of a composition based on chitosan succinate and arabinogalactan is to establish the nature and severity of its damaging effects on the body of experimental animals and assess its safety.

Изучение общетоксического действия позволяет выявить наиболее чувствительные к изучаемому препарату органы и системы организма, характер и степень патологических изменений в них.The study of the general toxic effect allows us to identify the organs and systems of the body that are most sensitive to the studied drug, the nature and degree of pathological changes in them.

Для выявления возможности использования композиции на основе сукцината хитозана и арабиногалактана в качестве биологически активной добавки, изучали на неполовозрелых крысах в возрасте одного месяца десяти дней.To identify the possibility of using a composition based on chitosan succinate and arabinogalactan as a dietary supplement, they were studied on immature rats at the age of one month of ten days.

Животные содержались в условиях вивария, соответствующих санитарным нормам, при свободном доступе к воде и пище и естественном фоне освещенности и температуре воздуха 21-22°С. Животных брали в опыт после 10-дневного карантина. Для исключения возможности групповой токсичности каждая группа животных размещалась в отдельной клетке. Опытные животные получали препарат с кормом 6 раз в неделю в течение месяца. Продолжительность наблюдения за животными составляла 30 дней. Два раза в неделю проводили взвешивание и один раз в неделю - отбор крови. Фиксировали общее состояние животных, особенности их поведения, интенсивность и характер двигательной активности, координацию движения, реакцию на тактильные, болевые, звуковые и световые раздражители, частоту и глубину дыхательных движений, состояние волосяного и кожного покрова, положение хвоста и другие показатели, которые могут свидетельствовать о токсических эффектах композиции БПМ. Учитывался аппетит и прирост массы тела. Исследовали периферическую кровь, мочу. Исследования проводили общепринятыми методами. После эвтаназии брали на исследование органы: печень, почки, сердце, селезенку. Окраску гистологических препаратов производили гематоксилином и эозином.The animals were kept in vivarium conditions corresponding to sanitary standards, with free access to water and food, and the natural background of illumination and air temperature of 21-22 ° C. Animals were taken after 10 days of quarantine. To exclude the possibility of group toxicity, each group of animals was housed in a separate cage. Experienced animals received the drug with food 6 times a week for a month. The duration of observation of animals was 30 days. Weighing twice a week and once a week blood sampling. We recorded the general condition of the animals, their behavior, the intensity and nature of motor activity, coordination of movement, response to tactile, pain, sound and light stimuli, the frequency and depth of respiratory movements, the condition of the hair and skin, tail position and other indicators that may indicate on the toxic effects of the BPM composition. Take into account appetite and weight gain. Peripheral blood and urine were examined. Studies were carried out by conventional methods. After euthanasia, organs were taken for examination: liver, kidneys, heart, spleen. Histological preparations were stained with hematoxylin and eosin.

В эксперименте на животных использовали 10 самцов и 10 самок белых лабораторных крыс весом 58-64 г (по 5 животных в каждой группе). Самки и самцы содержались раздельно. Опытные животные получали препарат 6 раз в неделю с кормом по 0,5 г на группу (по 0,1 г на голову). Один раз в неделю производили забор крови у контрольных и опытных животных путем пункции сердца.In an animal experiment, 10 males and 10 female white laboratory rats weighing 58-64 g were used (5 animals in each group). Females and males were kept separately. Experimental animals received the drug 6 times a week with a feed of 0.5 g per group (0.1 g per head). Once a week, blood was drawn from control and experimental animals by heart puncture.

В течение всего периода наблюдения не было зафиксировано гибели крыс и не выявлено выраженных признаков интоксикации. Животные правильно реагировали на звуковые и световые раздражители, слизистые оболочки были обычной окраски. Состояние животных в опытных группах было идентичным состоянию в контрольных группах, кроме самцов опытной группы. У них наблюдалась большая двигательная активность и аппетит. Причем, эти отличия начали проявляться на третий день после введения в рацион добавки. Самцы опытной группы были очень подвижны, быстрее остальных съедали свой корм, меньше времени спали. По нашим наблюдениям, максимальная активность самцов проявилась на 10-й день приема кормовой добавки (животные очень подвижны, быстро съели весь корм, несколько раз опрокидывали тяжелую поилку, постоянно возились в клетке). В дальнейшем их активность снизилась, но оставалась несколько выше, чем у крыс других групп.During the entire observation period, death of rats was not recorded and no pronounced signs of intoxication were detected. Animals correctly reacted to sound and light stimuli, mucous membranes were of usual color. The condition of the animals in the experimental groups was identical to the state in the control groups, except for males of the experimental group. They had great motor activity and appetite. Moreover, these differences began to appear on the third day after the introduction of supplements into the diet. The males of the experimental group were very mobile, they ate their food faster than the rest, slept less time. According to our observations, the maximum activity of the males was manifested on the 10th day of taking the feed supplement (animals are very mobile, quickly ate the whole feed, tipped over a heavy drinker several times, constantly fiddling in the cage). Subsequently, their activity decreased, but remained slightly higher than in rats of other groups.

После проведения пункции все животные находились в угнетенном состоянии, не прикасались к воде и корму, лежали, сбившись в кучу. Однако, через 30 мин самцы опытной группы начинали проявлять прежнюю активность, принимать воду и пищу, играть друг с другом. Животные остальных групп восстанавливались примерно через 2 часа.After the puncture, all animals were in a depressed state, did not touch the water and feed, lay in a heap. However, after 30 minutes the males of the experimental group began to show the same activity, take water and food, play with each other. Animals of the remaining groups recovered after about 2 hours.

По физиологическому состоянию, функциям сердечно-сосудистой и дыхательной систем, прибавлении в весе различий не было. Фекалии были нормально сформированы, моча светлого цвета, прозрачная.There were no differences in physiological state, functions of the cardiovascular and respiratory systems, weight gain. The feces were normally formed, the urine was light in color, transparent.

Установлено, что гематологические показатели у подопытных крыс существенно не изменялись.It was found that the hematological parameters in experimental rats did not change significantly.

По окончании наблюдения животных вскрывали, проводили макроскопическое описание внутренних органов, определяли их массу и изучали морфологическую структуру тканей.At the end of the observation, the animals were opened, a macroscopic description of the internal organs was carried out, their mass was determined, and the morphological structure of the tissues was studied.

У грызунов опытных групп в сравнении с контрольными масса внутренних органов не претерпела значительных изменений (таблица 2).In rodents of the experimental groups, in comparison with the control, the mass of internal organs did not undergo significant changes (table 2).

Figure 00000002
Figure 00000002

Интегральные показатели хронической интоксикации (ИПХИ) животных опытных и контрольных групп примерно одинаковы, что свидетельствует об отсутствии патологических изменений органов, и указывает на отсутствие токсичности препарата БПМ (таблица 3).The integral indicators of chronic intoxication (IPCI) of animals from the experimental and control groups are approximately the same, which indicates the absence of pathological changes in organs, and indicates the absence of toxicity of the BPM preparation (table 3).

Figure 00000003
Figure 00000003

При осмотре внутренних органов существенных изменений не выявлено.When examining the internal organs, no significant changes were detected.

При гистологическом исследовании органов и тканей некробиотических и дистрофических изменений не выявлено ни у одного животного.A histological examination of organs and tissues of necrobiotic and dystrophic changes was not detected in any animal.

На основании проведенных токсикологических исследований сделано заключение о том, что композицию БПМ по параметрам острой токсичности можно отнести к 4 классу малоопасных соединений согласно ГОСТ 12.1.007-76, что допускает его применение в медицине, ветеринарии, растениеводстве, фармацевтической и пищевой промышленности.Based on the conducted toxicological studies, it was concluded that the BPM composition in terms of acute toxicity can be attributed to class 4 low-hazard compounds according to GOST 12.1.007-76, which allows its use in medicine, veterinary medicine, plant growing, pharmaceutical and food industries.

Учитывая, что эффективность биологически активных добавок определяется не только химическим составом, но и способностью повышать естественную резистентность живого организма, были проведены опыты по изучению влияния супрамолекулярного соединения хитозан/янтарный ангидрид/арабиногалактан БПМ на факторы неспецифической резистентности.Considering that the effectiveness of biologically active additives is determined not only by the chemical composition, but also by the ability to increase the natural resistance of a living organism, experiments were conducted to study the effect of the supramolecular compound chitosan / succinic anhydride / arabinogalactan BPM on factors of non-specific resistance.

Под естественной резистентностью понимают способность организма противостоять неблагоприятному воздействию факторов внешней среды. Состояние естественной резистентности определяется неспецифическими защитными факторами организма, связанными с деятельностью гормональной, вегетативной и центральной нервной систем, с функцией биологических механизмов: клеточных, гуморальных, секреторных систем, обладающих многогранным воздействием и зависящих от возрастных и индивидуальных особенностей организма.By natural resistance is understood the ability of an organism to withstand the adverse effects of environmental factors. The state of natural resistance is determined by the nonspecific protective factors of the body associated with the activity of the hormonal, autonomic and central nervous systems, with the function of biological mechanisms: cellular, humoral, secretory systems that have a multifaceted effect and depend on age and individual characteristics of the body.

Фундаментальными исследованиями доказано, что иммуноглобулины, лизоцим, бетализин, гликопротеиды, пропердин, фагоцитарная и бактерицидная активность лейкоцитов являются факторами защиты организма. Наиболее значительным иммунологическим барьером всей лимфоидной системы макроорганизма является субэпителиальная ткань дыхательного и пищеварительного трактов (макро- и микрофаги).Basic research has shown that immunoglobulins, lysozyme, betalizine, glycoproteins, properdine, phagocytic and bactericidal activity of leukocytes are factors in protecting the body. The most significant immunological barrier of the entire lymphoid system of a macroorganism is the subepithelial tissue of the respiratory and digestive tracts (macro- and microphages).

Помимо специфического действия иммуноглобулины вместе с лизоцимом воздействуют на микробную клетку, усиливают фагоцитоз, обладают интерфероногенным свойством и бактериостатическим действием.In addition to the specific action, immunoglobulins together with lysozyme act on a microbial cell, enhance phagocytosis, have an interferonogenic property and bacteriostatic effect.

Лизоцим синтезируется лейкоцитами (гранулоцитами и моноцитами), присутствует во всех тканях животного организма. Он разрушает грамположительные и грамотрицательные микробные клетки, стимулирует образование нормальных и специфических антител, обеспечивает фагоцитарную способность зернистых гранулоцитов.Lysozyme is synthesized by leukocytes (granulocytes and monocytes), is present in all tissues of the animal body. It destroys gram-positive and gram-negative microbial cells, stimulates the formation of normal and specific antibodies, provides the phagocytic ability of granular granulocytes.

Изучение влияния БПМ на лизоцимную активность сыворотки крови было проведено на крысах.A study of the effect of BPM on the lysozyme activity of blood serum was conducted in rats.

Животные были разделены на 3 группы: I, II и III (контрольная); каждая группа размещалась в отдельной клетке. В каждой группе по 10 животных.Animals were divided into 3 groups: I, II and III (control); each group was housed in a separate cell. In each group of 10 animals.

Животным I и II опытных групп каждый день, в течение 30 дней, перед приемом пищи вводили исследуемый препарат с помощью зонда внутрижелудочно в указанной дозировках.The animals of the I and II experimental groups every day, for 30 days, before a meal was administered the study drug using a probe intragastrically in the indicated dosages.

Крысам I-ой опытной группы - образец 1 (концентрация 5%); животным II-ой опытной группы - Образец 2 (концентрация 10) в виде 1%-ного водного раствора соотношение 1:1). Одновременно контрольным животным вводили дистиллированную воду. Результаты опытов представлены в табл. 4.To rats of the I-th experimental group - sample 1 (concentration of 5%); animals of the II experimental group - Sample 2 (concentration 10) in the form of a 1% aqueous solution (1: 1 ratio). At the same time, distilled water was administered to control animals. The results of the experiments are presented in table. four.

Анализируя представленную таблицу необходимо отметить, что введение препаратов достоверно повышает уровень лизоцимной активности сыворотки крови у лабораторных животных в 2,9-3,2 раза.Analyzing the table, it should be noted that the introduction of drugs significantly increases the level of lysozyme activity of blood serum in laboratory animals by 2.9-3.2 times.

Figure 00000004
Figure 00000004

Таким образом, проведенные исследования подтвердили, что БПМ обладает высокой биологической активностью как самостоятельно, так и в комплексе с другими веществами. Разработанная биологически активная биополимерная матрица, включающая мас. %: сукцинат хитозана 3,0-5,0; янтарный ангидрид 2,0-4,0; арабипогалактан 15,0-20,0; дигирокверцетин 3-5 обладает широким спектром БАВ, имеет достаточно широкую область применения за счет высокой биодоступности, отсутствия побочных эффектов, что существенно расширяет арсенал применения биологически активных композиций. Ее существенное преимущество является и то, что производство АГ основано на использовании отходов лесоперерабатывающей промышленности (щепы лиственницы), ресурсы которой практически безграничны.Thus, studies have confirmed that BPM has high biological activity both independently and in combination with other substances. Developed biologically active biopolymer matrix, including wt. %: chitosan succinate 3.0-5.0; succinic anhydride 2.0-4.0; arabipogalactan 15.0-20.0; digiroquercetin 3-5 has a wide range of biologically active substances, has a fairly wide scope due to its high bioavailability, and the absence of side effects, which significantly expands the arsenal of the use of biologically active compositions. Its significant advantage is the fact that AG production is based on the use of waste from the wood processing industry (larch chips), the resources of which are practically unlimited.

Следует отметить, что производство хитозана основано на использовании отходов рыбодобывающей промышленности (панцири ракообразных), ресурсы которых также безграничны.It should be noted that the production of chitosan is based on the use of fishing industry waste (shellfish shells), whose resources are also unlimited.

Использованная литератураReferences

1. RU 2421215 Композиция с повышенной фармакологической активностью на основе - дигидрокверцетина и растительных полисахаридов - арабиногалактана (варианты). Заявл. 15.04.2010, опубл. 20.06. 2011.1. RU 2421215 Composition with increased pharmacological activity based on - dihydroquercetin and plant polysaccharides - arabinogalactan (options). Claim 04/15/2010, publ. 06/20. 2011.

2. Сунцова А.П., Метелева Е.С., Душкин А.В. Механохимическое получение и исследование водорастворимых композиций на основе флавоноидов - генистеина, дигидрокверцитина, рутина. Фундаментальные исследования, №11, 2014. С. 2174-2179.2. Suntsova A.P., Meteleva E.S., Dushkin A.V. Mechanochemical preparation and study of water-soluble compositions based on flavonoids - genistein, dihydroquercetin, rutin. Fundamental research, No. 11, 2014.S. 2174-2179.

Claims (4)

1. Биологически активная биополимерная матрица на основе сукцината хитозана, янтарного ангидрида, арабиногалактана и ковалентно не связанного с ним дигидрокверцетина, при этом она является супрамолекулярным твердофазным механокомпозитом следующего состава, мас.%: сукцинат хитозана 3,0-5,0; янтарный ангидрид 2,0-4,0; арабиногалактан 15,0-20,0; дигидрокверцетин 3-5.1. A biologically active biopolymer matrix based on chitosan succinate, succinic anhydride, arabinogalactan and covalently unrelated dihydroquercetin, while it is a supramolecular solid-phase mechanocomposite of the following composition, wt.%: Chitosan succinate 3.0-5.0; succinic anhydride 2.0-4.0; arabinogalactan 15.0-20.0; dihydroquercetin 3-5. 2. Биополимерная матрица по п. 1, отличающаяся тем, что сукцинат хитозана получен деацетилированием хитина, имеющего степень деацетилирования больше или равную 75% и молекулярную массу в диапазоне от 1 до 30 кДа.2. Biopolymer matrix according to claim 1, characterized in that the chitosan succinate is obtained by deacetylation of chitin having a degree of deacetylation greater than or equal to 75% and a molecular weight in the range from 1 to 30 kDa. 3. Биополимерная матрица по п. 1, отличающаяся тем, что хитозан сшит с янтарным ангидридом механохимическим способом.3. The biopolymer matrix according to claim 1, characterized in that chitosan is crosslinked with succinic anhydride by a mechanochemical method. 4. Биополимерная матрица по п. 1, отличающаяся тем, что арабиногалактан модифицирован сукцинатом хитозана механохимическим способом на молекулярном уровне.4. The biopolymer matrix according to claim 1, characterized in that the arabinogalactan is modified by chitosan succinate mechanochemical method at the molecular level.
RU2018141734A 2018-11-26 2018-11-26 Biopolymer matrix based on chitosan, arabinogalactan succinate and a method for production thereof RU2698455C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018141734A RU2698455C1 (en) 2018-11-26 2018-11-26 Biopolymer matrix based on chitosan, arabinogalactan succinate and a method for production thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018141734A RU2698455C1 (en) 2018-11-26 2018-11-26 Biopolymer matrix based on chitosan, arabinogalactan succinate and a method for production thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2698455C1 true RU2698455C1 (en) 2019-08-27

Family

ID=67733846

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018141734A RU2698455C1 (en) 2018-11-26 2018-11-26 Biopolymer matrix based on chitosan, arabinogalactan succinate and a method for production thereof

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2698455C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2797950C1 (en) * 2022-02-25 2023-06-13 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования" Министерства здравоохранения Российской Федерации Means of chronic venous insufficiency treatment

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2421215C1 (en) * 2010-04-15 2011-06-20 Открытое Акционерное Общество Завод Экологической Техники И Экопитания "Диод" Composition with higher pharmacological activity of dihydroquercetin and herbal polysaccharides (versions)
US8710027B2 (en) * 2012-04-10 2014-04-29 Flavitpure, Inc. Method of using nutritional compounds dihydroquercetin (taxifolin) and arabinogalactan in combination with dihydroquercetin (taxifolin) to reduce and control cardiometabolic risk factors associated with metabolic syndrome and hypercholesterolemia
RU2533231C1 (en) * 2013-05-14 2014-11-20 Владимир Сергеевич Остронков Supramolecular complex, possessing anti-inflammatory and angioprotective activity and method of obtaining thereof
RU2560518C1 (en) * 2014-05-29 2015-08-20 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративноймедицины имени Е.Д. Гольдберга" (НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга) Agent possessing lymphokinetic activity

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2421215C1 (en) * 2010-04-15 2011-06-20 Открытое Акционерное Общество Завод Экологической Техники И Экопитания "Диод" Composition with higher pharmacological activity of dihydroquercetin and herbal polysaccharides (versions)
US8710027B2 (en) * 2012-04-10 2014-04-29 Flavitpure, Inc. Method of using nutritional compounds dihydroquercetin (taxifolin) and arabinogalactan in combination with dihydroquercetin (taxifolin) to reduce and control cardiometabolic risk factors associated with metabolic syndrome and hypercholesterolemia
RU2533231C1 (en) * 2013-05-14 2014-11-20 Владимир Сергеевич Остронков Supramolecular complex, possessing anti-inflammatory and angioprotective activity and method of obtaining thereof
RU2560518C1 (en) * 2014-05-29 2015-08-20 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративноймедицины имени Е.Д. Гольдберга" (НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга) Agent possessing lymphokinetic activity

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2797950C1 (en) * 2022-02-25 2023-06-13 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования" Министерства здравоохранения Российской Федерации Means of chronic venous insufficiency treatment

Similar Documents

Publication Publication Date Title
de Oliveira Pedro et al. Self-assembled amphiphilic chitosan nanoparticles for quercetin delivery to breast cancer cells
Praphakar et al. A pH-sensitive guar gum-grafted-lysine-β-cyclodextrin drug carrier for the controlled release of 5-flourouracil into cancer cells
Chen et al. Chitosan/β-lactoglobulin core–shell nanoparticles as nutraceutical carriers
Shen et al. Quercetin/chitosan-graft-alpha lipoic acid micelles: A versatile antioxidant water dispersion with high stability
Lin et al. Corn protein hydrolysate as a novel nano-vehicle: Enhanced physicochemical stability and in vitro bioaccessibility of vitamin D3
Pool et al. Polymeric nanoparticles as oral delivery systems for encapsulation and release of polyphenolic compounds: Impact on quercetin antioxidant activity & bioaccessibility
JP6346561B2 (en) N, N, N-trialkyl polymer, process for its preparation and use thereof
EP1206251A1 (en) Amplification of folate-mediated targeting to tumor cells using nanoparticles
CN101775082A (en) Amphoteric ion-based charge reversal chitosan derivative and application thereof in medicament
Hu et al. Synthesis and characterization of low-toxicity N-caprinoyl-N-trimethyl chitosan as self-assembled micelles carriers for osthole
CA3020772A1 (en) Anti-infective compositions comprising phytoglycogen nanoparticles
Radha et al. Dual therapeutic 5-fluorouracil and hesperidin loaded Chitosan nanocarrier system: understanding its synergism on anti-cancer activity
Balde et al. Crab (Charybdis natator) exoskeleton derived chitosan nanoparticles for the in vivo delivery of poorly water-soluble drug: ibuprofen
Wu et al. Calcium phosphate coated core-shell protein nanocarriers: Robust stability, controlled release and enhanced anticancer activity for curcumin delivery
KR20070078196A (en) Hydrophilic Chitosan Oligosaccharide Nanoparticles Containing an Anticancer Agent and Hydrophobic Bile Acids
CN114225046A (en) Antibacterial/healing-promoting dual-drug delivery system, pharmaceutical composition and preparation method and application thereof
RU2698455C1 (en) Biopolymer matrix based on chitosan, arabinogalactan succinate and a method for production thereof
KR100882611B1 (en) Low molecular weight water soluble chitosan nanoparticles for gene delivery with a polycarboxylic acid as a target ligand and a method of preparing the same
Zhou et al. The construction of yeast β-glucan coated-edible dock protein nanomicelles for the encapsulation and sustained release of apigenin
Sivasankaran et al. Synthesis and Anticancer Activity Evaluation of Self-assembled Curcumin Loaded Gelatin− Oleic acid–Carboxymethyl Chitosan Nanoparticles on MCF-7 cells
CN116139294B (en) L-glutamine-zein-naringenin nanoparticles and applications thereof
Chen et al. Chondroitin sulfate micro granules embedded with oligochitosan-calcium complexes for potential osteoporosis prevention
JPS62209100A (en) Iron derivatives of globin and acetylglobin with properties useful to living organisms, their preparation methods and pharmaceutical formulations
Yusan et al. Isolation and Characterization of Chitosan Nanoparticles From Crab Shell Waste (Portunus Pelagicus)
Balde et al. Extraction of squilla (Harpiosquilla annandalei) shell derived chitosan and its nanocarrier efficiency for sustained protein delivery