RU2692452C1 - Method of jaw bone defects replacement - Google Patents
Method of jaw bone defects replacement Download PDFInfo
- Publication number
- RU2692452C1 RU2692452C1 RU2018102313A RU2018102313A RU2692452C1 RU 2692452 C1 RU2692452 C1 RU 2692452C1 RU 2018102313 A RU2018102313 A RU 2018102313A RU 2018102313 A RU2018102313 A RU 2018102313A RU 2692452 C1 RU2692452 C1 RU 2692452C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- defect
- bone
- jaw
- cells
- mesenchymal stem
- Prior art date
Links
- 230000007547 defect Effects 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 24
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000000278 osteoconductive effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 6
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims description 5
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 claims 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 17
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002138 osteoinductive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 4
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 3
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 101150019331 FGF2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 101000829171 Hypocrea virens (strain Gv29-8 / FGSC 10586) Effector TSP1 Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000005250 Spontaneous Fractures Diseases 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000004053 dental implant Substances 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 108010007093 dispase Proteins 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003195 fascia Anatomy 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000013394 immunophenotyping Methods 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000004840 osteo-chondrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004819 osteoinduction Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 1
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 230000001720 vestibular Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
- A61B17/00—Surgical instruments, devices or methods
- A61B17/24—Surgical instruments, devices or methods for use in the oral cavity, larynx, bronchial passages or nose; Tongue scrapers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Surgery (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, к области биотехнологии и может быть использовано с целью восполнения костных послеоперационных дефектов челюстей.The invention relates to medicine, to the field of biotechnology and can be used to fill the postoperative bone defects of the jaws.
На сегодняшний день существует значительное количество способов замещения дефектов челюстей.To date, there are a significant number of ways to replace defects of the jaws.
Из уровня техники известен способ замещения дефектов костей путем пластики с использованием аутогенного костно-хрящевого регенерата, выраженного с помощью деминерализованной костной аллоткани, отличающийся тем, что деминерализованную костную аллоткань подсаживают на фасцию или надкостницу, которые рассекают или перфорируют в нескольких местах соответственно зоне расположения деминерализованного трансплантата, выращенный аутогенный костно-хрящевой регенерат используют для замещения костных дефектов отдельно или же в комбинации с деминерализованными или недеминерализованными костными аллотрансплантатами (Патент РФ 2117453 от 20.08.2008). Известен способ замещения костных дефектов путем помещения имплантата из пористого никелида титана или сплавов на его основе в зону костного дефекта, отличающийся тем, что перед введением имплантат обрабатывают гидроксилапатитом на глубину 10 мм при комнатной температуре, причем при установке имплантата в конгруентное костное ложе последнее обрабатывают гидроксилапатитом (Патент РФ №2066982 от 27.09.1996 г.). Известен способ замещения костных дефектов челюстей, заключающийся в проведении хирургической обработки костного дефекта, деэпителизации разреза, наложении пленки «Диплен» с введенной в нее композиционной структурой, состоящей из 60 масс. % гидроксиапатита и 40 масс. % бета-трикальцийфосфата, на всю область костного дефекта, а также на его вестибулярную, внутриротовую, апроксимальные поверхности, при этом пленка должна перекрывать область костного дефекта на 3 мм по всему периметру (Патент РФ 2276587 от 20.05.2006).The prior art a method of replacing bone defects by plastics using autogenous bone and cartilage regenerate, expressed using demineralized bone allotment, characterized in that the demineralized bone allotment is placed on the fascia or periosteum, which are dissected or perforated in several places according to the area of the demineralized graft , a grown autogenous bone and cartilage regenerate is used to replace bone defects, alone or in combination nedemineralizovannymi or demineralized bone allografts (RF Patent No. 2117453 of 20.08.2008). There is a method of replacing bone defects by placing an implant of porous titanium nickelide or alloys based on it in the area of the bone defect, characterized in that before the introduction of the implant is treated with hydroxylapatite to a depth of 10 mm at room temperature, and when installing the implant in the congruent bone bed, the latter is treated with hydroxylapatite (Patent of the Russian Federation No. 2066982 dated 9/27/1996). There is a method of replacing bone defects of the jaws, which consists in carrying out surgical treatment of bone defects, de-epithelization of the incision, the imposition of the film "Diple" with a composite structure introduced into it, consisting of 60 masses. % hydroxyapatite and 40 mass. % beta tricalcium phosphate, over the entire area of the bone defect, as well as on its vestibular, intraoral, approximal surfaces, while the film must overlap the area of the bone defect by 3 mm around the perimeter (RF Patent 2276587 of 20.05.2006).
К основным недостаткам указанных способов можно отнести использование остеокондуктивных синтетических или аллогенных остеонидуктивных материалов несоответствующих антигенной структурой индивидуальному организму. В настоящее время данный недостаток нивелируется использованием мезенхимальных стволовых клеток.The main disadvantages of these methods are the use of osteoconductive synthetic or allogeneic osteonidative materials that do not match the antigenic structure of the individual organism. Currently, this deficiency is leveled by the use of mesenchymal stem cells.
Выявлено, что мезенхимальные стволовые клетки обладают иммуномодулирующим эффектом, ингибируют пролиферацию Т-клеток и снижают вероятность возникновения и степень выраженности РТПХ при совместной трансплантации с гемопоэтическими стволовыми клетками. При этом они существенно ускоряют восстановление поврежденного гемопоэза. Полученные данные о том, что мезенхимальные стволовые клетки не содержат мембранных маркеров, характерных для гемопоэтических клеток, а также антигенов гистосовместимости позволяют рассматривать мезенхимальные стволовые клетки как кандидаты не только для аутологичной, но и для аллогенной клеточной терапии.It was revealed that mesenchymal stem cells have an immunomodulatory effect, inhibit the proliferation of T-cells and reduce the likelihood and severity of GVHD during joint transplantation with hematopoietic stem cells. At the same time, they significantly accelerate the recovery of damaged hematopoiesis. The findings that mesenchymal stem cells do not contain membrane markers characteristic of hematopoietic cells, as well as histocompatibility antigens, allow mesenchymal stem cells to be considered as candidates not only for autologous, but also for allogeneic cellular therapy.
Результатом трансплантации больным мезенхимальных стволовых клеток костного мозга может быть восстановление популяции стромальных клеток в различных органах. Стромальные клетки являются источником важных цитокинов и ростовых факторов, которые способствуют активированию и нормализации иммунного ответа, сниженного в результате болезни, а также развитию регенеративных процессов в поврежденных тканях и органах.The result of bone marrow mesenchymal stem cell transplantation may be the restoration of the stromal cell population in various organs. Stromal cells are a source of important cytokines and growth factors that contribute to the activation and normalization of the immune response, reduced as a result of the disease, as well as the development of regenerative processes in damaged tissues and organs.
Известен способ пролиферации мезенхимальных стволовых клеток человека, предназначенных для реконструкции костных и хрящевых сегментов, например, в травматологической хирургии. В соответствии с этим патентом образец костного мозга человека промывают в физиологическом растворе с фосфатным буфером. Клетки с ядрами подсчитывают с использованием красителя и в среде F12, включающей 10% сыворотки и 1 нг/мг FGF -2, высевают на дно культурального сосуда в количестве 5×106 клеток в виде нефракционированного костного мозга на 10 кв.см сосуда для культуры ткани. Через 48 часов эту среду удаляют, клетки промывают в физиологическом растворе с фосфатным буфером и выдерживают 24-48 часов в среде F12 без каких-либо добавок. Для поддержания остеохондрогенного потенциала в мезенхимальных стволовых клетках и способствования пролиферации клеток в среду добавляют определенную смесь факторов (Патент РФ 2272839 от 27.03.2006).There is a method of proliferation of human mesenchymal stem cells intended for the reconstruction of bone and cartilage segments, for example, in trauma surgery. In accordance with this patent, a sample of human bone marrow is washed in phosphate-buffered saline. Cells with nuclei are counted using dye and in F12 medium, including 10% serum and 1 ng / mg FGF -2, seeded at the bottom of the culture vessel in the amount of 5 × 10 6 cells as unfractionated bone marrow per 10 cm 2 tissue culture vessel . After 48 hours, this medium is removed, the cells are washed in phosphate-buffered saline and incubated for 24-48 hours in F12 medium without any additives. To maintain the osteochondrogenic potential in mesenchymal stem cells and to promote cell proliferation, a certain mixture of factors is added to the medium (Patent of the Russian Federation 2272839 of 03.03.2006).
Известен способ культивирования фибробластов для заместительной терапии, включающий выделение клеток и инкубирование в питательной среде, отличающийся тем, что выделение фибробластов осуществляют из биоптатов кожи человека путем ферментативной обработки в растворе DMEM/5% ЭБС/0,2% диспазы/0.1 мг/мл коллагеназы I типа при постоянном помешивании и пипетировании при температуре 37°С в течение 1,5 ч в стерильных условиях, полученную суспензию клеток центрифугируют 5 мин при 200 g, супернатант сливают, осевшие клетки ресуспендируют в среде DMEM/10% ЭБС/100 ед/мл пенициллина, 100 ед/мл стрептомицина, 100 ед/мл фунгизона и высевают на чашки, затем фибробласты переводят на длительное культивирование в среде с собственной сывороткой крови пациента: DMEM/10% ССКП/100 ед/мл стрептомицина, 100 ед/мл фунгизона или в терапевтической среде AIM-V, перед введением пациентам клетки несколько раз отмывают в буфере Krebs-Ring, обрабатывают раствором 0,25% трипсина/0,02% ЭДТА для снятия клеток с подложки, добавляют 1 мл Krebs-Ringer, центрифугируют 5 мин при 200 g, супернатант сливают, клетки ресуспендируют в новой порции раствора Krebs-Ringer для введения пациентам (Патент РФ 2320720 от 27.03.2008).There is a method of cultivating fibroblasts for replacement therapy, including cell isolation and incubation in a nutrient medium, characterized in that the isolation of fibroblasts is carried out from human skin biopsies by enzymatic treatment in a DMEM / 5% ELISA / 0.2% dispase / 0.1 mg / ml collagenase solution Type I with constant stirring and pipetting at 37 ° C for 1.5 h under sterile conditions, the resulting cell suspension is centrifuged for 5 minutes at 200 g, the supernatant is drained, the settled cells are resuspended in DMEM / 10% ELS / 100 units / ml penicillin, 100 units / ml streptomycin, 100 units / ml of fungizone and plated, then fibroblasts are transferred to long-term cultivation in the medium with the patient's own blood serum: DMEM / 10% SSCP / 100 units / ml streptomycin, 100 units / ml of Fungizone or in a therapeutic environment AIM-V, before the introduction of the patient cells are washed several times in Krebs-Ring buffer, treated with a solution of 0.25% trypsin / 0.02% EDTA to remove cells from the substrate, add 1 ml of Krebs-Ringer, centrifuged 5 min at 200 g, the supernatant is discarded, the cells are resuspended in a new batch of Krebs-Ringer d solution I administration to patients (RF Patent No. 2320720 dated 27.03.2008).
Известен способ культивирования мезенхимальных стволовых клеток (МСК) человека ex vivo включает по меньшей мере два цикла культивирования ядросодержащих костномозговых клеток в ростовой среде до получения заданного количества мезенхимальных стволовых клеток. В процессе каждого цикла высевают выделенные клетки в соответствующий культуральный сосуд, регулярно определяют рН ростовой среды и заменяют ростовую среду, рН которой менее 6,0 или более 8,0, на ростовую среду, рН которой лежит в пределах от 6,0 до 8,0, при этом регулярно элиминируют клетки, не относящиеся к популяции мезенхимальных стволовых клеток. Процесс культивирования в каждом цикле ведут до образования сплошного монослоя популяции МСК, который извлекают из культурального сосуда путем его обработки 0,03-0,1%-ным раствором трипсина, а перед и после указанной обработки МСК отмывают в изотоническом растворе от следов ростовой среды и следов трипсина соответственно. Изобретение позволяет за достаточно короткий период (приблизительно 40 суток) вырастить из 0,5-1,0 мл пунктата костного мозга эффективную терапевтическую дозу МСК (по меньшей мере 5⋅107-108) (Патент РФ 2323252 27.04.2008).A known method of cultivating human mesenchymal stem cells (MSCs) ex vivo human includes at least two cycles of cultivating nucleated bone marrow cells in a growth medium to obtain a given amount of mesenchymal stem cells. During each cycle, the isolated cells are sown in the appropriate culture vessel, the pH of the growth medium is regularly determined and a growth medium is replaced, the pH of which is less than 6.0 or more than 8.0, with a growth medium whose pH ranges from 6.0 to 8, 0, while regularly eliminating cells that are not related to the population of mesenchymal stem cells. The cultivation process in each cycle leads to the formation of a continuous monolayer of the MSC population, which is removed from the culture vessel by treating it with a 0.03-0.1% trypsin solution, and before and after this treatment, the MSC is washed in an isotonic solution from the traces of the growth medium and traces of trypsin, respectively. The invention allows for a rather short period (approximately 40 days) to grow from 0.5-1.0 ml of bone marrow punctate an effective therapeutic dose of MSC (at least 5 · 107-108) (RF Patent 2323252 04/27/2008).
Задачей изобретения является ускорение процесса регенерации костной ткани в послеоперационных дефектах челюстей.The objective of the invention is to accelerate the process of regeneration of bone tissue in the postoperative defects of the jaws.
Техническим результатом изобретения является восстановление архитектоники челюсти путем стимулирования регенерации костной ткани индивидуальными остеоиндуктивными и синтетическими остеокондуктивными средствами.The technical result of the invention is the restoration of the architectonics of the jaw by stimulating the regeneration of bone tissue by individual osteoinductive and synthetic osteoconductive agents.
Технический результат достигается за счет того, что способ замещения костных дефектов челюстей заключается в проведении под инфильтрационной местной анестезией забора фрагмента десны размером два на два миллиметра у пациента с планируемым послеоперационным дефектом челюсти, культивировании из полученной ткани мезинхимальных стволовых клеток, имбибировании указанными клетками остеопластическим материалом Bio-oss до полного насыщения, проведении операции пациенту, адекватной установленному диагнозу, с формированием разреза и костного дефекта, внесении в интраоперационный дефект полученной композиции объемом соответствующего 80% от объема костного дефекта, перекрытии на 3 мм по периметру костного дефекта коллагеновой мембраной, наложении швов.The technical result is achieved due to the fact that the method of replacing bone defects of the jaws is to conduct a two-to-two-millimeter gum fragment intake under a local infiltration anesthesia in a patient with a planned postoperative jaw defect, cultivating mesenchymal stem cells from the resulting tissue, imbibing these cells with osteoplastic material Bio. -oss to complete saturation, carrying out the operation to the patient, adequate to the established diagnosis, with the formation of the incision and bone defect, a defect entry in the intra resulting composition volume corresponding to 80% of the bone defect volume overlap by 3 mm along the perimeter of the defect bone collagen membrane suturing.
Выделение мезенхимальных стволовых клеток из слизистой оболочки щеки обеспечивает индивидуализацию остеоиндукции замещения дефекта челюсти.Isolation of mesenchymal stem cells from the mucous membrane of the cheek provides for the individualization of osteoinduction of replacement of the jaw defect.
Использование в процессе остеокондуктивного остеопластического материала Bio-oss обеспечивает восстановление архитектоники челюсти осуществляя профилактику патологических переломов, а перекрытие в процессе операции периметра дефекта коллагеновой мембраной, профилактику образования втянутых рубцов слизистой прикрепленной десны и выпадении остеопластической композиции в подслизистое пространство. В предлагаемом композиционном материале, в отличие от известных ранее, применяется препарат Bio oss, органического происхождения в котором из базового вещества - гидроксиапатита вымыт ранее считавшийся незаменимым и наиболее активным компонентом бета три кальций фосфат.Using the osteoplastic osteoplastic material, Bio-oss provides for the restoration of jaw architectonics by preventing pathological fractures, and by blocking the defect perimeter during the operation with a collagen membrane, preventing the formation of retracted scars of the attached mucous gums and deposition of the osteoplastic composition into the submucosal space. In the proposed composite material, in contrast to the previously known ones, the preparation Bio oss is used, in which organic origin has washed out calcium phosphate, which was previously considered an irreplaceable and most active component of beta, from the base substance - hydroxyapatite.
Пример применения способа замещения костных дефектов челюстей:An example of applying the method of replacing bone defects of the jaws:
У пациента под инфильтрационной анестезией хирургическим скальпелем осуществляется забор поверхностного слоя слизистой оболочки прикрепленной десны. Полученный фрагмент помещается в 0,05% раствор коллагеназы 2-го типа на 16 часов в термостат при +37°С, с дальнейшим проведением пипетирования осадка и добавления полной питательной среды, состоящей из DMEM/F12 (Invitrogen, США), содержащей 10% телячью фетальную сыворотку («HyCloneDefined», HyClone, США), инсулин 0,4 мкМ, 0,25 мг/л гентамицина.A patient under infiltration anesthesia with a surgical scalpel takes the surface layer of the attached gingival mucosa. The resulting fragment is placed in a 0.05% solution of type 2 collagenase for 16 hours in a thermostat at + 37 ° C, with further pipetting the precipitate and adding a complete nutrient medium consisting of DMEM / F12 (Invitrogen, USA) containing 10% calf fetal serum (HyClone Defined, HyClone, USA), insulin 0.4 μM, 0.25 mg / l gentamicin.
Культивирование мезенхимальных стволовых клеток (МСК) осуществляется в стандартных условиях в СO2-инкубаторе с концентрацией СO2 5%, атмосферного воздуха 95% и с повышенной влажностью. Замену культуральной среды на свежую осуществляется каждые 72 часа. Пассирование клеток осуществляли следующим образом: после образования субконфлюэнтногомонослоя (80-90%о площади культурального пластика) клетки однократно отмывают раствором Версена, затем снимают с помощью раствора Версена с 0,25% трипсином, центрифугируют при 350g, убирают надосадок, осадок ресуспендируют в полной питательной среде и разливали в новую культуральную посуду. Стандартизованную дифференцировку МСК КМ осуществляли в соответствии с протоколами STEMPRO® MSC SFM; StemPro® AdipogenesisDifferentiationKit; StemPro® ChondrogenesisDifferentiationKit; StemPro® OsteogenesisDifferentiationKit. Иммунофенотипирование осуществляли на проточномцитофлуориметре Gallios (БекманКультер, США). Анализ проводили при помощи ПО AN43172 SoftwareVersion.Cultivation of mesenchymal stem cells (MSC) is carried out under standard conditions in a CO2 incubator with a concentration of CO2 of 5%, atmospheric air of 95% and with high humidity. Replacing the culture medium with fresh every 72 hours. Passage of the cells was carried out as follows: after the formation of a subconfluently bilayer (80-90% of the area of culture plastic), the cells were washed once with Versene's solution, then removed using Versene's solution with 0.25% trypsin, centrifuged at 350g, the supernatant was removed, the precipitate was resuspended in full nutrient medium and poured into a new culture dish. The standardized differentiation of MSC CM was performed in accordance with the STEMPRO® MSC SFM protocols; StemPro® AdipogenesisDifferentiationKit; StemPro® ChondrogenesisDifferentiationKit; StemPro® OsteogenesisDifferentiationKit. Immunophenotyping was performed on a Gallios flow cytometer (BeckmanCulter, USA). The analysis was performed using software AN43172 SoftwareVersion.
Далее гранулы остеопластического материала Bio-oss (Щвецария) были приведены к приблизительно одному размеру и форме - гранулы 150-400 мкм, путем стерильного измельчения при температуре жидкого азота, после чего их отмывали 3 раза в забуференном физиологическом растворе (PBS) следующим образом:Next, the granules of osteoplastic material Bio-oss (Shvetsariya) were reduced to approximately the same size and shape - granules 150-400 μm, by sterile grinding at liquid nitrogen temperature, after which they were washed 3 times in buffered saline (PBS) as follows:
- гранулы были разложены в одинаковом количестве в стерильные пробирки объемом 2 мл в 4 повторах;- the granules were decomposed in the same amount into sterile 2 ml tubes in 4 repeats;
- в каждую пробирку вводили 2 мл PBS и встряхивали на лабораторном шейкере (shaker) 60 сек., после чего давали материалу осесть и супернатант удаляли отсасыванием.- 2 ml of PBS was injected into each tube and shaken on a laboratory shaker for 60 seconds, then the material was allowed to settle and the supernatant was removed by suction.
В применяемом композиционном материале, для усиления адгезивных и пролиферативных свойств применяется материал Bio oss, который после стерильного измельчения при температуре жидкого азота и трехкратного отмыва забуферным физиологическим раствором, подвергается циклической тепловой обработке в термостате при температуре от 70 до 90 градусов Цельсия, три раза по 90 минутIn the composite material used, Bio oss material is used to enhance the adhesive and proliferative properties, which, after sterile grinding at liquid nitrogen temperature and washed three times with a buffered saline solution, undergo a cyclic heat treatment in a thermostat at a temperature of from 70 to 90 degrees Celsius, three times 90 times minutes
К отмытому материалу добавили 1 мл питательной среды и помещали на 24 часа в СO2-инкубатор, к не промытому материалу также добавили среду на 24 часа для проверки стерильности.1 ml of the nutrient medium was added to the washed material and placed in a CO 2 incubator for 24 hours, and the medium was added to the unwashed material for 24 hours to verify sterility.
Для проведения скрининга остеопластических материалов при исследовании пролиферационной активности применяли перевиваемую линию фибробластов 3T3/NIH, которая входит в список рекомендованых ГОСТ Р ИСО 10993.5-99.For the screening of osteoplastic materials in the study of proliferative activity, the 3T3 / NIH transplantable fibroblast line was used, which is included in the list of recommended GOST R ISO 10993.5-99.
В результате серии экспериментов in vitro нами доказано что, отмыв всех прочих остеопластических материалов, ухудшают адгезивные и пролиферативные свойства.As a result of a series of in vitro experiments, we proved that washing off all other osteoplastic materials impairs adhesion and proliferative properties.
Считая, что поверхность гранул с контролем (50 мкл суспезии Цитодекс №3) составляет 8 см2, была рассчитана посевная концентрация клеток линии 3Т3, которая составила 30% от 100% монослоя. Конечный объем среды после засева составил 1,5 мл на диаметр раневой поверхности 10 мм Изменение количества применяемого для лечения клеток в ту или другую сторону даже на 3 процента приводит к ингибирующему эффекту и останавливает как адгезию, так и рост и размножение клеток.Considering that the surface of the control granules (50 µl of Cytodex No. 3 suspension) was 8 cm 2 , the inoculum concentration of 3T3 cells was calculated, which was 30% of the 100% monolayer. The final volume of the medium after seeding was 1.5 ml per 10 mm diameter of the wound surface. A change in the amount used to treat cells in one direction or the other even by 3 percent leads to an inhibitory effect and stops both adhesion and cell growth and multiplication.
Пробирки с образцами материалов с клетками помещали в программируемый ротатор RM-1 (Elmi), скорость вращения 2 об/мин.Test tubes with samples of materials with cells were placed in a programmable rotator RM-1 (Elmi), the rotation speed of 2 rpm.
Культивирование продолжали в ротаторе, помещенном в термостат, в течение 96 часов при 37°С.Cultivation was continued in a rotator placed in a thermostat for 96 hours at 37 ° C.
Следует отметить что в существующей лечебной практике дефекты с раневой поверхностью 5 мм и более полностью не восстанавливаются. В нашем случае при применении композиционного материала получено восстановление дефекта с раневой поверхностью диаметром 10 мм Пациенту проводили операцию на челюсти с формированием костного дефекта. Полученную композицию остеоконуктивного материала имбибированного МСК вводили в образованный костный дефект в объеме, составляющем 80% от общего объема дефекта. Края дефекта перекрывали коллагеновой мембраной по периметру, перекрывая 3 мм собственной костной ткани. Рану ушивали наглухо узловыми швами.It should be noted that in the existing medical practice, defects with a wound surface of 5 mm and more are not fully restored. In our case, using a composite material, the restoration of a defect with a wound surface of 10 mm in diameter was obtained. The patient underwent an operation on the jaw with the formation of a bone defect. The resulting composition of osteoconductive material imbibed MSC was introduced into the formed bone defect in a volume of 80% of the total volume of the defect. The edges of the defect were blocked by a collagen membrane along the perimeter, overlapping 3 mm of its own bone tissue. The wound was sutured tightly with interrupted sutures.
Таким образом, благодаря полученному с учетом требований к композиционному материалу, впервые в мире удалось получить эффект полноценного (100%) заживления дефекта костной ткани челюсти диаметром более 5 мм и восстановление оптической плотности кости в срок на 3 месяца раньше по сравнению с естественным течением репаративного процесса (6 месяцев). В случае естественного репаративного процесса помимо длительных сроков заживления, заполнение дефекта осуществляется в объеме не более 70 процентов, что наряду с несостоятельностью костной ткани в месте дефекта является основной причиной осложнений при последующей иплантации (протезирования). Ниже приведены данные по плотности кости в единицах ХаунсфилдаThus, due to the resulting composite material, for the first time in the world, it was possible to obtain the effect of full (100%) healing of a jaw bone defect with a diameter of more than 5 mm and restoration of bone optical density 3 months earlier than the natural reparative process (6 months). In the case of the natural reparative process, in addition to the long healing time, the defect is filled in no more than 70 percent, which, along with the failure of the bone tissue at the site of the defect, is the main cause of complications during subsequent implantation (prosthetics). Below are data on bone density in Hounsfield units.
Срок 3 месяца, плотность кости при использовании композиционного материла с мезенхимальными стволовыми клетками из десны составляет (761.45. HU) по сравнению с контролем (566.23).в то время как плотность кости на 6 месяце составляет (851.21. HU). Сокращение сроков восстановления костной ткани крайне существенно, поскольку позволяет вдвое сократить срок перевода пациентов на полноценное питание и осуществить полноценное протезирование, в том числе установку дентальных имплантатов в восстановленную костную ткань.The period of 3 months, bone density when using composite material with mesenchymal stem cells from the gums is (761.45. HU) compared to the control (566.23). While the bone density at 6 months is (851.21. HU). Reducing the time for recovery of bone tissue is extremely significant, as it allows halving the period for transferring patients to full nutrition and carrying out full prosthetics, including the installation of dental implants in the reconstructed bone tissue.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018102313A RU2692452C1 (en) | 2018-01-22 | 2018-01-22 | Method of jaw bone defects replacement |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018102313A RU2692452C1 (en) | 2018-01-22 | 2018-01-22 | Method of jaw bone defects replacement |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2692452C1 true RU2692452C1 (en) | 2019-06-24 |
Family
ID=67038313
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018102313A RU2692452C1 (en) | 2018-01-22 | 2018-01-22 | Method of jaw bone defects replacement |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2692452C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2818178C1 (en) * | 2023-08-07 | 2024-04-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Национальный медицинский исследовательский центр "Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for simultaneous volume replacement of lost bone tissue and attached gingiva |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010041792A1 (en) * | 2000-02-03 | 2001-11-15 | Donda Russell S. | Extraction of growth factors from tissue |
| RU2276587C1 (en) * | 2004-12-16 | 2006-05-20 | ГОУ ВПО "Московский государственный медико-стоматологический университет Министерства здравоохранения РФ" | Method for substituting jaw bone defects |
| UA47704U (en) * | 2009-07-01 | 2010-02-25 | Валерий Исаевич Куцевляк | method for restoration of bone tissues of jaw |
| UA48324U (en) * | 2009-10-15 | 2010-03-10 | Артур Иванович Панькевич | Method for removing defects of bone tissue |
| RU2437633C1 (en) * | 2010-06-15 | 2011-12-27 | ООО "Медицинский лечебно-профилактический центр по проблеме сахарного диабета" | Method of bone plasty during direct dental implantation |
| WO2012080825A2 (en) * | 2010-12-15 | 2012-06-21 | Health Corporation - Rambarn | Vertical bone augmentation using endothelial progenitor cells |
-
2018
- 2018-01-22 RU RU2018102313A patent/RU2692452C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010041792A1 (en) * | 2000-02-03 | 2001-11-15 | Donda Russell S. | Extraction of growth factors from tissue |
| RU2276587C1 (en) * | 2004-12-16 | 2006-05-20 | ГОУ ВПО "Московский государственный медико-стоматологический университет Министерства здравоохранения РФ" | Method for substituting jaw bone defects |
| UA47704U (en) * | 2009-07-01 | 2010-02-25 | Валерий Исаевич Куцевляк | method for restoration of bone tissues of jaw |
| UA48324U (en) * | 2009-10-15 | 2010-03-10 | Артур Иванович Панькевич | Method for removing defects of bone tissue |
| RU2437633C1 (en) * | 2010-06-15 | 2011-12-27 | ООО "Медицинский лечебно-профилактический центр по проблеме сахарного диабета" | Method of bone plasty during direct dental implantation |
| WO2012080825A2 (en) * | 2010-12-15 | 2012-06-21 | Health Corporation - Rambarn | Vertical bone augmentation using endothelial progenitor cells |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Рузин И.А. Разработка материала для восстановления костных деффектов с использованием аутологичных клеток. Московский государственный медико-стоматологичекий университет им. А.И. Евдокимова. Сборник трудов конференции SCIENCE: DISCOVERIES AND PROGRESS, Киров, с. 535-538. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2818178C1 (en) * | 2023-08-07 | 2024-04-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Национальный медицинский исследовательский центр "Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for simultaneous volume replacement of lost bone tissue and attached gingiva |
| RU2818178C9 (en) * | 2023-08-07 | 2024-08-30 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Национальный медицинский исследовательский центр "Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for simultaneous volume replacement of lost bone tissue and attached gingiva |
| RU2836321C1 (en) * | 2024-06-28 | 2025-03-13 | Анастасия Александровна Чеканова | Method for simultaneous elimination of gingival recession and replacement of volume of lost bone tissue of alveolar process in area of gingival recession |
| RU2845608C1 (en) * | 2024-09-13 | 2025-08-22 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Национальный медицинский исследовательский центр "Центральный научно-исследовательский институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for elimination of soft and bone tissues deficiency in patients planning orthodontic treatment |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5408578B2 (en) | Composition for autologous or allogeneic transplantation using dental pulp stem cells and use thereof | |
| ES2546734T3 (en) | Rapid preparation and use of tissues and structures obtained by tissue engineering as individual implants | |
| Han et al. | Xenogeneic native decellularized matrix carrying PPARγ activator RSG regulating macrophage polarization to promote ligament-to-bone regeneration | |
| d’Aquino et al. | Periosteum-derived micro-grafts for tissue regeneration of human maxillary bone | |
| CN103768656A (en) | Tissue engineered bone constructed from allogeneic bone marrow mesenchymal stem cells and application thereof | |
| JP2012031127A (en) | Composition including umbilical cord matrix stromal cell | |
| JP2003144139A (en) | Cell engraftment method on three-dimensional structure surface | |
| JPWO2019216438A1 (en) | Periodontal disease therapeutic agent containing culture supernatant of mesenchymal cells | |
| RU2380105C1 (en) | Biotransplant, method for making thereof and method of treating degenerative and traumatic diseases of maxillofacial bone tissue | |
| WO2004092359A1 (en) | Process for producing cartilage cells for transplantation | |
| US20190015551A1 (en) | Construct for preventing immunological rejection generated when used in transplants, and method for using collagen in a gel state, in the form of dry lyophilised spongy mouldings and 3d matrices | |
| Sándor et al. | Combining adipose-derived stem cells, resorbable scaffolds and growth factors: An overview of tissue engineering | |
| JP2008503281A (en) | Stem cell use, tissue engineering methods, dental tissue use, and biological substitute teeth | |
| Karpyuk et al. | Innovation-based approach in reconstruction of reduced jaw alveolar ridge bone using cell regeneration technologies | |
| RU86455U1 (en) | BIO ENGINEERING DESIGN | |
| EP0049341B1 (en) | Process for conditioning alloplastic implantations and transplantations | |
| RU2692452C1 (en) | Method of jaw bone defects replacement | |
| RU2265445C1 (en) | Biotransplant, method for its obtaining (variants) and method for treating parodontium diseases | |
| RU2645963C2 (en) | Method of increasing the volume of bone tissue of the crest of alveolar process of the jaw | |
| RU2685148C1 (en) | Composite material for bone defect replacement | |
| RU2570034C1 (en) | Method for bone augmentation within alveolar process defect | |
| RU2605630C1 (en) | Method of autotransplantation of tooth with preserving its pulp viability | |
| RU2320285C2 (en) | Method for restoring alveolar jaw bone crest and periodontium tissues having reduced recovery potential | |
| RU2210341C1 (en) | Method for obtaining transplants for filling oseous defects at surgical treatment of parodontium inflammatory diseases | |
| CN114028616A (en) | Preparation method of tissue engineering material for alveolar bone defect repair |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200123 |