[go: up one dir, main page]

RU2684729C1 - Method for preparing agent with anti-inflammatory, hepatoprotective and choleretic activities - Google Patents

Method for preparing agent with anti-inflammatory, hepatoprotective and choleretic activities Download PDF

Info

Publication number
RU2684729C1
RU2684729C1 RU2018109812A RU2018109812A RU2684729C1 RU 2684729 C1 RU2684729 C1 RU 2684729C1 RU 2018109812 A RU2018109812 A RU 2018109812A RU 2018109812 A RU2018109812 A RU 2018109812A RU 2684729 C1 RU2684729 C1 RU 2684729C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
extraction
alcohol
water
extractant
filtered
Prior art date
Application number
RU2018109812A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Пунцык-Нима Базыровна Лубсандоржиева
Андрей Витальевич Федоров
Сергей Матвеевич Николаев
Зинаида Гомбожаповна Самбуева
Жаргал Бадлуевич Дашинамжилов
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт общей и экспериментальной биологии" Сибирского отделения Российской академии наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт общей и экспериментальной биологии" Сибирского отделения Российской академии наук filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Институт общей и экспериментальной биологии" Сибирского отделения Российской академии наук
Priority to RU2018109812A priority Critical patent/RU2684729C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2684729C1 publication Critical patent/RU2684729C1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/50Fumariaceae (Fumitory family), e.g. bleeding heart
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01DSEPARATION
    • B01D11/00Solvent extraction

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

FIELD: medicine; pharmaceuticals.SUBSTANCE: invention refers to pharmaceutical industry, namely to a method for preparing an agent possessing anti-inflammatory and hepatoprotective and choleretic activity. Method for producing an agent possessing anti-inflammatory and hepatoprotective, cholagogic activity, of leaves and flowers of direct hypercoacle by way of vegetable material extraction, in which dried leaves and hypecum flowers are stained from stems to particle size of 0.5–1.0 mm, mixed with 96 % ethanol in ratio of raw material: extractant 1:(10–12), at room temperature and extracted with constant stirring for 2 hours, second extraction is carried out by adding an extractant in an amount equal to the fused, for 1 hour, alcohol extracts are filtered, then extraction cake is extracted twice for 1 hour and 0.5 hour respectively at temperature of 90 °C, 40 % ethyl alcohol in raw material: extractant ratio 1:10 at first extraction, during second extraction, extractant is added in amount equal to that of drained, water-and-alcohol extracts are filtered, then extraction cake is extracted with water purified per 0.1 kg of initial raw material per 1 l of water, at 100 °C for 1 hour, water extraction is filtered and filtrate is combined with water residues of alcohol extract after alcohol removal, separated for removal of plant dust and ballast substances, concentrated, dried in vacuum drying cabinet at temperature of 40–60°C for 8 hours to obtain a dry extract.EFFECT: method described above enables to obtain an agent possessing pronounced anti-inflammatory, hepatoprotective, choleretic activity with high content of biologically active substances.1 cl, 9 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к фармации и касается способа получения средства из растительного сырья, обладающего противовоспалительной, гепатопротекторной активностями.The invention relates to pharmacy and relates to a method of obtaining funds from plant materials with anti-inflammatory, hepatoprotective activities.

Одним из важных приоритетов государственной политики в области развития медицинской науки России является разработка новых, конкурентоспособных, импортозамещающих лекарственных средств. Дикорастущие растения, имеющие возобновляемые сырьевые ресурсы - перспективные источники получения новых средств. Трава гипекоума прямого широко распространена в Центральной Азии, Сибири, имеет возобновляемые сырьевые ресурсы и применяется в практике тибетской медицины в составе многокомпонентных средств. Известно, что экстракт и сумма алкалоидов из травы гипекоума прямого обладают противовоспалительным, гипотензивным, жаропонижающим свойствами [Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т. 1. Семейства Magnoliaceae - Juglandaceae, Ulmaceae, Moraceae, Cannabaceae, Urticaceae. - СП.: M.: Товарищество научных изданий КМК. 2008. - 421 с.]. Известен метод получения из 4 кг травы гипекоума прямого 67,7 г (1,69% от массы сырья) хлороформной фракции, из которой было получено 7 алкалоидов общим весом 1,36 г (0,03% от массы сырья), обладающих антибактериальной активностью [Yinfen Su, Shengkun Li, Na Li et. al. Seven alkaloids and their antibacterial activity from Hypecoum erectum L. / Journal of medicinal plants research. - 2011. - Vol. 5 (22). - P. 5428-5432.]. К недостаткам известного метода можно отнести низкий выход конечного продукта, возможность возникновения побочных токсических реакции при длительном применении алкалоидов.One of the important priorities of the state policy in the development of medical science in Russia is the development of new, competitive, import-substituting drugs. Wild plants with renewable raw materials are promising sources of new funds. The grass of the hypokume direct is widespread in Central Asia, Siberia, has renewable raw materials and is used in the practice of Tibetan medicine as part of multi-component means. It is known that the extract and the amount of alkaloids from the grass of the direct hypokume possess anti-inflammatory, hypotensive, antipyretic properties [Plant resources of Russia: Wild flowering plants, their component composition and biological activity. T. 1. Families Magnoliaceae - Juglandaceae, Ulmaceae, Moraceae, Cannabaceae, Urticaceae. - SP: M .: KVM Scientific Publications Partnership. 2008. - 421 p.]. A known method of obtaining from a 4 kg of grass of the hypokume direct 67.7 g (1.69% by weight of the raw material) of the chloroform fraction, from which 7 alkaloids with a total weight of 1.36 g (0.03% by weight of the raw material) with antibacterial activity were obtained. [Yinfen Su, Shengkun Li, Na Li et. al. Seven alkaloids and their antibacterial activity from Hypecoum erectum L. / Journal of medicinal plants research. - 2011. - Vol. 5 (22). P. 5428-5432.]. The disadvantages of the known method include the low yield of the final product, the possibility of toxic side reactions with prolonged use of alkaloids.

Задача данного изобретения - создание суммарного растительного средства, содержащего фенольные соединения и каротиноиды, обладающие противовоспалительной, гепатопротекторной, желчегонной активностями за счет более высокого содержания биологически активных веществ (БАВ).The objective of this invention is the creation of total herbal remedies containing phenolic compounds and carotenoids with anti-inflammatory, hepatoprotective, choleretic activities due to the higher content of biologically active substances (BAS).

Техническим результатом заявленного решения более широкий спектр фармакологической активности средства, полученного заявленным способом.The technical result of the claimed solution is a wider range of pharmacological activity of the funds obtained by the claimed method.

Указанная цель достигается посредством того, что способ включает экстракцию высушенных и измельченных до размера частиц 0,5-1,0 мм листьев и цветков гипекоума прямого 96% этанолом двукратно при комнатной температуре в течение 2 ч и 1 ч, в соотношении сырье: экстрагент 1: (10-12), затем 40% этанолом при температуре 90±5°С двукратно в течение 1 ч и 0,5 в соотношении 1:10, затем водой очищенной однократно при 100°С в течение 1 ч в соотношении 1:10. Конечный продукт получают объединением спиртовых фракции после удаления спирта с водным извлечением, сепарированием, концентрированием и высушиванием экстракта в вакуум-сушильном шкафу. Выход конечного продукта - экстракта сухого составляет 41-46% от массы сухого сырья) Способ позволяет получить продукт постоянного состава, обладающего противовоспалительной, гепатопротекторной активностями.This goal is achieved by the fact that the method involves the extraction of dried and crushed to a particle size of 0.5-1.0 mm of the leaves and flowers of the hyccium with direct 96% ethanol twice at room temperature for 2 hours and 1 hour, in the ratio raw material: extractant 1 : (10-12), then with 40% ethanol at a temperature of 90 ± 5 ° С twice within 1 h and 0.5 in a ratio of 1:10, then with purified water once at 100 ° С for 1 h in a ratio of 1:10 . The final product is obtained by combining the alcohol fraction after removal of the alcohol with water extraction, separation, concentration and drying of the extract in a vacuum oven. The yield of the final product - dry extract is 41-46% by weight of dry raw material) The method allows to obtain a product of constant composition, which has anti-inflammatory, hepatoprotective activities.

Выявленные отличительные признаки позволяют сделать вывод о соответствии предлагаемого технологического решения критерию «новизна» и условию патентоспособности «изобретательский уровень». Для доказательства существенности предложенных признаков способа проведены серии экспериментов, данные которых приведены ниже.The identified distinctive features allow to make a conclusion about the compliance of the proposed technological solutions to the criterion of "novelty" and the condition of patentability "inventive step". To prove the materiality of the proposed features of the method, a series of experiments were conducted, the data of which are given below.

В связи с тем, что гепатопротекторной активностью обладают вещества фенольной природы, изучен качественный состав фенольных соединений листьев и цветков гипекоума прямого. Для количественного анализа БАВ использованы описанные в литературе фармакопейные методики [Государственная Фармакопея РФ XIII изд.]. Установлено, что содержание полифенолов в траве гипекоума прямого составляет 1,31%, в листьях - 1,48%, в цветках - 1,25%, в стеблях - 0,18%. Из-за незначительного содержания полифенолов в стеблях для получения экстракта использованы листья и цветки гипекоума прямого.Due to the fact that substances of a phenolic nature possess hepatoprotective activity, the qualitative composition of the phenolic compounds of the leaves and flowers of the direct hypecum has been studied. For the quantitative analysis of biologically active substances used in the literature described pharmacopoeial techniques [State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIII ed.]. It was established that the content of polyphenols in the grass of the hypokume direct is 1.31%, in the leaves - 1.48%, in flowers - 1.25%, in the stems - 0.18%. Due to the insignificant content of polyphenols in the stems, the leaves and flowers of the direct hypocium are used to obtain the extract.

Для изучения качественного состава 0,5 кг листьев и цветков гипекоума прямого экстрагировали 60% спиртом при настаивании в течение 3 суток трехкратно. После удаления спирта водный остаток обработали последовательно хлороформом, этилацетатом, бутанолом, получили 19,95 г хлороформной, 8,2 г этилацетатной фракции, 21,5 г бутанольной,. 36,31 г водной фракции. Для хроматографии на бумаге и тонком слое силикагеля использованы системы растворителей: хлороформ-метанол, 9:1 (I), 15% уксусная кислота (II), бутанол-уксусная кислота - вода, 4:1:2 (III), хлороформ (IV). Для нисходящей хроматографии кумаринов использовали импрегнированную смесью формамид-ацетон (1:1) бумагу. В табл. 1 приведены данные об обнаружении биологически активных веществ в разных фракциях.To study the qualitative composition, 0.5 kg of the leaves and flowers of the hypokum were directly extracted with 60% alcohol and the mixture was drawn three times for 3 days. After removal of the alcohol, the aqueous residue was treated successively with chloroform, ethyl acetate, butanol, to obtain 19.95 g of chloroform, 8.2 g of ethyl acetate fraction, 21.5 g of butanol ,. 36.31 g of water fraction. For chromatography on paper and a thin layer of silica gel, the following solvent systems were used: chloroform-methanol, 9: 1 (I), 15% acetic acid (II), butanol-acetic acid - water, 4: 1: 2 (III), chloroform (IV ). For descending coumarin chromatography, impregnated formamide-acetone (1: 1) paper was used. In tab. 1 shows the detection of biologically active substances in different fractions.

Figure 00000001
Figure 00000001

Примечание: «+++» - доминирование на хроматограмме; «++» - присутствие; «+» - следы, «0» - вещества не обнаруженыNote: "+++" - dominance in the chromatogram; “++” - presence; “+” - traces, “0” - no substances detected

В хлороформной и этилацетатной фракции извлечения обнаружены 4 кумарина с Rf (IV): 0,09 (на уровне стандартного образца эскулетин с ярко-зеленой окраской), 0,18 (зеленое пятно), 0,35 (фиолетовое пятно), 0,65 (фиолетовое пятно). В этилацетатной фракции методом двумерной хроматографии (желтое окрашивание пятен на хроматограмме с 3% спиртовым раствором алюминия хлористого) обнаружены 8 веществ флавоноидной природы с Rf (ПЛИ): 0/0,88; 0/0,72; 0,34/0,66; 0,33/0,58 (доминирующее пятно); 0,50/0,57; 0,15/0,49; 0,46/0,49 (доминирующее пятно); 0,43/0,39. В хлороформной фракции проявляются 3 вещества флавоноидной природы с Rf (I): 0,15; 0,30; 0,63. На хроматограммах этилацетатной, бутанольной фракции проявляются 5 фенолокислот с Rf (III): 0,62 (на уровне образца хлорогеновой кислоты); 0,75; 0,77: 0,84 (на уровне образца феруловой кислоты); 0,87.Four coumarins with R f (IV) were found in the chloroform and ethyl acetate fractions of the extraction: 0.09 (at the level of a standard sample of esculetin with a bright green color), 0.18 (green spot), 0.35 (purple spot), 0, 65 (purple spot). In the ethyl acetate fraction by the method of two-dimensional chromatography (yellow staining of the spots on the chromatogram with a 3% alcohol solution of aluminum chloride), 8 substances of flavonoid nature with R f (PLI) were found: 0 / 0.88; 0 / 0.72; 0.34 / 0.66; 0.33 / 0.58 (dominant spot); 0.50 / 0.57; 0.15 / 0.49; 0.46 / 0.49 (dominant spot); 0.43 / 0.39. In the chloroform fraction, 3 substances of a flavonoid nature appear with R f (I): 0.15; 0.30; 0.63. On the chromatograms of the ethyl acetate and butanol fractions, 5 phenolic acids with R f (III) appear: 0.62 (at the level of the sample of chlorogenic acid); 0.75; 0.77: 0.84 (at the level of the ferulic acid sample); 0.87.

Для обнаружения алкалоидов по 0,05 г фракции смешивали с 2 мл 10% раствора аммиака, затем обработали 5 мл хлороформа трижды, хлороформное извлечение высушили на водяной бане, к сухому остатку добавили 5 мл 10% раствора серной кислоты, извлечение обработали 5 мл диэтилового эфира трижды, после отделения эфирного слоя к остатку сернокислого раствора добавили концентрированный аммиак до pH 8,0, затем экстрагировали 5 мл хлороформа трижды. Хлороформное извлечение высушивали, растворяли в 96% спирту, хроматографировали, при обработке хроматограммы реактивом Драгендорфа проявляются оранжево-розовые пятна алкалоидов с Rf (III): 0,59; 0,68, 0,88. В остальных фракциях алкалоиды не проявляются.To detect alkaloids, 0.05 g of the fraction was mixed with 2 ml of 10% ammonia solution, then treated with 5 ml of chloroform three times, the chloroform extraction was dried on a water bath, 5 ml of 10% sulfuric acid solution was added to the dry residue, and the extraction was treated with 5 ml of diethyl ether three times, after separation of the ether layer, concentrated ammonia was added to the residue of the sulphate solution to pH 8.0, then extracted with 5 ml of chloroform three times. The chloroform extraction was dried, dissolved in 96% alcohol, chromatographed, while processing the chromatogram with the Dragendorff reagent there appeared orange-pink spots of alkaloids with R f (III): 0.59; 0.68, 0.88. In the remaining fractions alkaloids do not appear.

Для обнаружения полисахаридов 0,05 г извлечения растворяли 5 мл воды очищенной, добавляли 15 мл 96% спирта, оставляли на холоду в течение 3 ч, выпавший осадок отфильтровали, количественное содержание полисахаридов определяли гравиметрически. Данные качественного анализа показали, что фенольные соединения распределены во всех фракциях, и для их извлечения в экстракт необходимы экстрагенты разной полярности.For the detection of polysaccharides, 0.05 g of extraction was dissolved in 5 ml of purified water, 15 ml of 96% alcohol was added, left in the cold for 3 hours, the precipitated precipitate was filtered, the quantitative content of polysaccharides was determined gravimetrically. The data of qualitative analysis showed that phenolic compounds are distributed in all fractions, and extractants of different polarity are necessary for their extraction into the extract.

В табл. 2 приведены данные по определению оптимальных условий экстракции листьев и цветков гипекоума прямого.In tab. 2 shows the data on the determination of the optimal conditions for the extraction of leaves and flowers of the direct hypokium.

Figure 00000002
Figure 00000002

Примечание: знак «-» означает, что определение веществ затруднено из-за минимального содержания (менее 0,01%); * - полисахариды не выпадают в осадок.Note: the sign "-" means that the definition of substances is difficult due to the minimum content (less than 0.01%); * - polysaccharides do not precipitate.

Для извлечения каротиноидов, агликонов фенольных и тритерпеновых соединений и других неполярных веществ экстракцию вели 96% спиртом этиловым при комнатной температуре, гликозидов фенольных и тритерпеновых веществ - 40 -96% спиртом и полисахаридов - водой очищенной. Контроль выхода липофильных веществ проводили спектрофотометрическим методом по содержанию каротиноидов при комнатной температуре для предотвращения деструкции термолабильных веществ, среднеполярных фенольных соединений - титриметрическим методом по количеству полифенолов, окисляемых перманганатом калия. Наибольшее количество каротиноидов извлекается 96% спиртом, полифенолов - 40% спиртом. Подобраны оптимальные соотношения для экстракции 96% спиртом - (1:10-12), 40% спиртом - 1:10 (Табл. 2). Измельчение сырья до 0,5-1,0 мм обеспечивает наиболее полный выход биологически активных веществ. Выход фенольных соединений увеличивается при повышении температуры экстракции, и оптимальной выбрана температура при 90±5°С (табл. 2).For the extraction of carotenoids, aglycones of phenolic and triterpene compounds and other non-polar substances, extraction was carried out with 96% ethyl alcohol at room temperature, glycosides of phenolic and triterpene substances - 40 -96% alcohol and polysaccharides - with purified water. The control of the yield of lipophilic substances was carried out spectrophotometrically by the content of carotenoids at room temperature to prevent the destruction of thermolabile substances, medium polar phenolic compounds by the titrimetric method by the amount of polyphenols oxidized by potassium permanganate. The greatest amount of carotenoids is extracted with 96% alcohol, polyphenols - 40% alcohol. Optimal ratios were selected for extraction with 96% alcohol - (1: 10-12), 40% alcohol - 1:10 (Table 2). Grinding of raw materials to 0.5-1.0 mm provides the most complete yield of biologically active substances. The yield of phenolic compounds increases with increasing temperature of extraction, and the optimum temperature is chosen at 90 ± 5 ° С (Table 2).

Установлено, что при двукратной экстракции 96% спиртом в течение 2 ч и 1 ч извлекается основное количество липофильных веществ, при двукратной экстракции 40% этанолом в течение 1 часа и 0,5 ч при температуре 90°С - среднеполярных веществ. Полисахариды не осаждаются в извлечениях второй и третьей экстракции, таким образом, однократная экстракция водой при 100°С извлекает большую часть оставшихся в шроте водорастворимых полисахаридов. Способ получения экстракта сухого гипекоума прямого с использованием оптимальных параметров экстракции приведен в примерах 1-3.It was established that with double extraction with 96% alcohol for 2 hours and 1 hour, the main amount of lipophilic substances is extracted, with double extraction with 40% ethanol for 1 hour and 0.5 hours at a temperature of 90 ° C - medium-polar substances. Polysaccharides are not deposited in the extraction of the second and third extraction, thus, a single extraction with water at 100 ° C extracts most of the water-soluble polysaccharides remaining in the meal. The method of obtaining the direct dry hypokium extract using the optimal extraction parameters is given in examples 1-3.

Пример 1. 0,138 кг высушенной травы гипекоума прямого, раскладывают на столе, отделяют стебли от листьев и цветков. Отделенные от стеблей 0,10 кг листьев и цветков гипекоума прямого измельчают до размера частиц 0,5 мм загружают в экстракционный аппарат, заливают 1,2 л 96% спирта этилового, экстрагируют при постоянном перемешивании в течении 2 ч, извлечение фильтруют в сборник, повторяют экстракцию в течение 1 ч, добавляя спирт в количестве, равном слитому, извлечение фильтруют. Шрот экстрагируют 1,0 л 40% спирта в течение 1 ч при температуре 90±5°С, извлечение фильтруют. Экстракцию повторяют в течение 0,5 ч, добавляя экстрагент в количестве, равном слитому, отфильтрованные спиртовые извлечения объединяют. Шрот после спиртовой экстракции экстрагируют при температуре 100°С 1,0 л воды очищенной в течение 1 ч при постоянном помешивании, водное извлечение фильтруют. Спиртовые извлечения упаривают на роторном испарителе под вакуумом, водные остатки объединяют с водным извлечением пятой экстракции, сепарируют для удаления растительной пыли и балластных веществ, сгущают до 1/10 первоначального объема, высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре 40-60°С в течение 8 ч. Получают 46,0 г экстракта сухого с влажностью 2,8%, выход - 46% от массы листьев и цветков или 33,3% от массы травы гипекоума прямого.Example 1. 0.138 kg of dried grass of the hypokum straight, laid out on the table, separating the stems from the leaves and flowers. Separated from the stems, 0.10 kg of leaves and flowers of the hypokume are directly crushed to a particle size of 0.5 mm are loaded into an extraction apparatus, 1.2 l of 96% ethyl alcohol is poured, extracted with constant stirring for 2 hours, the extract is filtered into a collection, repeat extraction for 1 h, adding alcohol in an amount equal to the drained, the extract is filtered. The meal is extracted with 1.0 l of 40% alcohol for 1 hour at a temperature of 90 ± 5 ° С, and the extract is filtered. The extraction is repeated for 0.5 h, adding an extractant in an amount equal to the drained, the filtered alcohol extracts are combined. The meal after alcohol extraction is extracted at a temperature of 100 ° C with 1.0 l of purified water for 1 h with constant stirring, the water extract is filtered. Alcoholic extracts are evaporated on a rotary evaporator under vacuum, the aqueous residues are combined with the aqueous extraction of the fifth extraction, separated to remove vegetable dust and ballast substances, concentrated to 1/10 of the original volume, dried in a vacuum oven at a temperature of 40-60 ° C for 8 h. 46.0 g of dry extract with a moisture content of 2.8% is obtained, the yield is 46% by weight of the leaves and flowers, or 33.3% by weight of the grass of the direct hypokium.

Пример 2. 0,072 кг высушенной травы гипекоума прямого, раскладывают на столе, отделяют стебли от листьев и цветков. Отделенные от стеблей 0,05 кг листьев и цветков гипекоума прямого измельчают до размера частиц 0,5 мм загружают в экстракционный аппарат, заливают 0,6 л 96% спирта этилового, экстрагируют при постоянном перемешивании в течении 2 ч, извлечение фильтруют в сборник, повторяют экстракцию в течение 1 ч, добавляя спирт в количестве, равном слитому, извлечение фильтруют. Шрот экстрагируют 0,5 л 40% спирта в течение 1 ч при температуре 90±5°С, извлечение фильтруют. Экстракцию повторяют в течение 0,5 ч, добавляя экстрагент в количестве, равном слитому, отфильтрованные спиртовые извлечения объединяют. Шрот после спиртовой экстракции экстрагируют при температуре 100°С 0,5 л воды очищенной в течение 1 ч при постоянном помешивании, водное извлечение фильтруют. Спиртовые извлечения упаривают на роторном испарителе под вакуумом, водные остатки объединяют с водным извлечением пятой экстракции, сепарируют для удаления растительной пыли и балластных веществ, сгущают до 1/10 первоначального объема, высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре 40-60°С в течение 8 ч. Получают 21,8 г экстракта сухого с влажностью 3,1%, выход - 43,6% от массы листьев и цветков или 30,3% от массы травы.Example 2. 0.072 kg of dried grass of the hypokum straight, laid out on the table, separating the stems from the leaves and flowers. Separated from the stems, 0.05 kg of leaves and flowers of the hypokume are directly crushed to a particle size of 0.5 mm are loaded into the extraction apparatus, 0.6 l of 96% ethyl alcohol is poured, extracted with constant stirring for 2 hours, the extract is filtered into a collection, repeat extraction for 1 h, adding alcohol in an amount equal to the drained, the extract is filtered. The meal is extracted with 0.5 l of 40% alcohol for 1 hour at a temperature of 90 ± 5 ° C, the extract is filtered. The extraction is repeated for 0.5 h, adding an extractant in an amount equal to the drained, the filtered alcohol extracts are combined. The meal after alcohol extraction is extracted at a temperature of 100 ° C with 0.5 l of purified water for 1 h with constant stirring, the water extract is filtered. Alcoholic extracts are evaporated on a rotary evaporator under vacuum, the aqueous residues are combined with the aqueous extraction of the fifth extraction, separated to remove vegetable dust and ballast substances, concentrated to 1/10 of the original volume, dried in a vacuum oven at a temperature of 40-60 ° C for 8 h. Obtain 21.8 g of dry extract with a moisture content of 3.1%, yield - 43.6% by weight of the leaves and flowers, or 30.3% by weight of the grass.

Пример 3. 0,141 кг высушенной травы гипекоума прямого, раскладывают на столе, отделяют стебли от листьев и цветков. Отделенные от стеблей 0,10 кг листьев и цветков гипекоума прямого измельчают до размера частиц 0,5 мм загружают в экстракционный аппарат, заливают 1,0 л 96% спирта этилового, экстрагируют при постоянном перемешивании в течении 2 ч, извлечение фильтруют в сборник, повторяют экстракцию в течение 1 ч, добавляя спирт в количестве, равном слитому, извлечение фильтруют. Шрот экстрагируют 1,0 л 40% спирта в течение 1 ч при температуре 90±5°С, извлечение фильтруют. Экстракцию повторяют в течение 0,5 ч, добавляя экстрагент в количестве, равном слитому, отфильтрованные спиртовые извлечения объединяют. Шрот после спиртовой экстракции экстрагируют при температуре 100°С 1,0 л воды очищенной в течение 1 ч при постоянном помешивании, водное извлечение фильтруют. Спиртовые извлечения упаривают на роторном испарителе под вакуумом, водные остатки объединяют с водным извлечением пятой экстракции, сепарируют для удаления растительной пыли и балластных веществ, сгущают до 1/10 первоначального объема, высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре 40-60°С в течение 8 ч. Получают 41,0 г экстракта сухого с влажностью 3,5%, выход - 41% от массы листьев и цветков или 29,1% от массы травы.Example 3. 0.141 kg of dried grass of the hypokum straight, laid out on the table, separating the stems from the leaves and flowers. Separated from the stems, 0.10 kg of leaves and flowers of the hypokume are directly crushed to a particle size of 0.5 mm are loaded into an extraction apparatus, 1.0 l of 96% ethyl alcohol is poured, extracted with constant stirring for 2 hours, the extract is filtered into a collection, repeat extraction for 1 h, adding alcohol in an amount equal to the drained, the extract is filtered. The meal is extracted with 1.0 l of 40% alcohol for 1 hour at a temperature of 90 ± 5 ° С, and the extract is filtered. The extraction is repeated for 0.5 h, adding an extractant in an amount equal to the drained, the filtered alcohol extracts are combined. The meal after alcohol extraction is extracted at a temperature of 100 ° C with 1.0 l of purified water for 1 h with constant stirring, the water extract is filtered. Alcoholic extracts are evaporated on a rotary evaporator under vacuum, the aqueous residues are combined with the aqueous extraction of the fifth extraction, separated to remove vegetable dust and ballast substances, concentrated to 1/10 of the original volume, dried in a vacuum oven at a temperature of 40-60 ° C for 8 h. Obtain 41.0 g of dry extract with a moisture content of 3.5%, yield - 41% by weight of leaves and flowers, or 29.1% by weight of the grass.

В полученных экстрактах определено содержание каротиноидов в пересчете на β - каротин - 27,97 ± мг %, флавоноидов - в пересчете на кверцетин - 0,14±0,01%, полифенолов - в пересчете на танин - 3,17±0,09%, аскорбиновой кислоты - 3,54±0,07%, полисахаридов - 17,0±0,8%.The obtained extracts determined the content of carotenoids in terms of β - carotene - 27.97 ± mg%, flavonoids - in terms of quercetin - 0.14 ± 0.01%, polyphenols - in terms of tannin - 3.17 ± 0.09 %, ascorbic acid - 3.54 ± 0.07%, polysaccharides - 17.0 ± 0.8%.

Изучение фармакологических свойств полученного экстракта гипекоума прямого (далее экстракт - для обозначения в таблицах) проведено согласно методическим рекомендациям [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. МЗ РФ. Департамент контроля качества, эффективности и безопасности фармакологических средств. Фармакологический комитет МЗ РФ. 2 изд., перераб. и доп. - М., 2005]. LD50 экстракта гипекоума при однократном внутрибрюшинном введении белым мышам обоего пола массой 25-30 г составлял 2217±147,3 мг/кг, что позволяет отнести его к относительно безвредным веществам по действующей классификации Кербера [Требования по доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ. - М., 1984. - 49 с.].The study of the pharmacological properties of the obtained direct hypokume extract (hereinafter the extract - for designation in tables) was carried out according to the methodological recommendations [Guidelines for experimental (preclinical) study of new pharmacological substances. Ministry of Health of the Russian Federation. Department of quality control, efficacy and safety of pharmacological agents. Pharmacological Committee of the Ministry of Health of the Russian Federation. 2 ed., Pererab. and add. - M., 2005]. The LD 50 of the hypokume extract when administered once intraperitoneally to white mice of both sexes weighing 25-30 g was 2217 ± 147.3 mg / kg, which makes it possible to relate it to relatively harmless substances according to the current classification of Kerber [Requirements for preclinical study of the general toxic effect of new pharmacological substances. - M., 1984. - 49 p.].

Изучение противовоспалительной активности экстракта сухого гипекоума прямого. Острое асептическое воспаление воспроизводили путем субплантарного введения крысам в правую заднюю лапку 0,1 мл 3% раствора формалина. Экстракт гипекоума прямого в дозе 50 мг/кг вводили внутрижелудочно в объеме 1 мл/100 г массы животных за 3 часа до субплантарного введения формалина, а затем через 5 и 18 ч после этого. Оценку антиэкссудативного эффекта экстракта проводили онкометрическим методом через 24 ч после введения формалина.The study of the anti-inflammatory activity of the extract of the dry hyko direct direct. Acute aseptic inflammation was reproduced by subplantar administration of 0.1 ml of a 3% formalin solution into rats in the right hindpaw. The direct hypokume extract at a dose of 50 mg / kg was administered intragastrically in a volume of 1 ml / 100 g animal mass 3 hours before subplanar administration of formalin, and then 5 and 18 hours after that. Evaluation of the anti-exudative effect of the extract was performed by the onmetric method 24 hours after the introduction of formalin.

Моделирование воспалительного процесса осуществляли по методу Менкина. Экстракт гипекоума прямого в дозе 50 мг/кг вводили животным в течение 29 дней. Животные контрольной группы получали воду очищенную по аналогичной схеме в эквиобъемных количествах. На 9, 20 и 29 сутки эксперимента оценивали площадь кожно-мышечного дефекта планиметрическим методом.Simulation of the inflammatory process was carried out according to the method of Menkin. The direct extract of a hypokume at a dose of 50 mg / kg was administered to animals for 29 days. The animals of the control group received purified water in a similar way in equivalent volumes. On the 9th, 20th and 29th day of the experiment, the area of the skin-muscle defect was estimated by the planimetric method.

Для определения влияния экстракта гипекоума на пролиферативную стадию воспаления животным под эфирным наркозом подкожно имплантировали стерильные ватные тампоны (шарики) массой 20 мг. Экстракт гипекоума в дозе 50 мг/кг в виде водного раствора вводили крысам внутрижелудочно один раз в сутки в течение 7 дней. Спустя 7 суток с начала опыта извлеченные у животных под эфирным наркозом гранулемы взвешивали до помещения в термостат и после высушивания при температуре 56°С в течение 24 часов. На основании полученных данных оценивали влияние испытуемого средства на пролиферативную стадию воспаления. Результаты опытов приведены в таблице 3.To determine the effect of the hypokum extract on the proliferative stage of inflammation, sterile cotton swabs (balls) weighing 20 mg were implanted subcutaneously into animals under ether anesthesia. Hypokouum extract at a dose of 50 mg / kg as an aqueous solution was administered intragastrically to rats once a day for 7 days. After 7 days from the beginning of the experiment, the granulomas extracted from animals under ether anesthesia were weighed before placing in a thermostat and after drying at 56 ° C for 24 hours. Based on the data obtained, the effect of the test substance on the proliferative stage of inflammation was evaluated. The results of the experiments are shown in table 3.

Figure 00000003
Figure 00000003

Установлено, что экстракт гипекоума в указанной дозе оказывает выраженное антиэкссудативное действие, угнетая развитие формалинового отека на 31% по отношению к контролю (Табл. 3). Курсовое введение животным экстракта гипекоума в течение 25 дней сопровождается торможением действия флогогенного агента и стимуляцией заживление кожно-мышечного дефекта, вызванного 9% раствором уксусной кислоты. На 9 сутки опыта площадь некротизированной ткани у крыс, получавших экстракт гипекоума по сравнению с таковой у крыс контрольной группы снижалось на 22% (р>0,05), на 20 сутки отмечено достоверное уменьшение площадей деструкции, которые составляли 29% и на 29 сутки - 30%, что свидетельствовало о стимулировании процессов регенерации в очаге воспаления под влиянием испытуемого экстракта (Табл. 3).It has been established that the extract of the hypecum at the indicated dose has a pronounced antiexudative effect, inhibiting the development of formalin edema by 31% relative to the control (Table 3). The course administration of an extract of the hypokum to animals for 25 days is accompanied by the inhibition of the action of the phlogogenic agent and the stimulation of the healing of the skin and muscular defect caused by a 9% solution of acetic acid. On the 9th day of the experiment, the area of necrotic tissue in rats receiving the hycucoma extract as compared to that in the rats of the control group decreased by 22% (p> 0.05), on the 20th day a significant decrease in the areas of destruction was noted, which was 29% and on the 29th day - 30%, which testified to the stimulation of regeneration processes in the inflammatory focus under the influence of the test extract (Table 3).

Из данных, приведенных в табл.3 видно, что экстракт гипекоума стимулирует образование фиброзно-грануляционной ткани на 15%. Следовательно, экстракт сухой обладает умеренной пролиферативной активностью. Таким образом, испытуемый экстракт гипекоума обладает выраженной антиэкссудативной, антиальтеративной и умеренной пролиферативной активностью.From the data given in table 3 it can be seen that the extract of the hyccium stimulates the formation of fibrous granulation tissue by 15%. Therefore, the dry extract has a moderate proliferative activity. Thus, the tested extract of the hypokume has a pronounced antiexudative, anti-alterative and moderate proliferative activity.

Изучение гепатопротекторной и желчегонной активности экстракта гипекоума. Предварительно было установлено, что увеличение дозы выше 50 мг/кг не приводит к существенному увеличению секреции желчи (Табл. 4) и в связи с этим, для последующих экспериментов экстракт гипекоума использовали в дозе 50 мг/кг.Study of hepatoprotective and choleretic activity of the extract of the hypecum. Previously it was found that increasing the dose above 50 mg / kg does not lead to a significant increase in the secretion of bile (Table 4) and therefore, for subsequent experiments, the extract of the hypoquaum was used at a dose of 50 mg / kg.

Figure 00000004
Figure 00000004

Экспериментальный гепатит воспроизводили внутрибрюшинным введением крысам D-галактозамина в дозе 0,5 г/кг массы животных 1 раз в сутки в течение 3 дней. Экстракт гипекоума в дозе 50 мг/кг вводили животным с 1-го дня эксперимента 1 раз в сутки в течение 7 дней. В качестве препарата сравнения использовали карсил в дозе 50 мг/кг. Животные контрольной группы получали дистиллированную воду в соответствующем объеме по аналогичной схеме. Интервал между введениями указанных средств и D-галактозамина составлял 5 часов. Исследования проводили через на 3 и 7 сутки от начала эксперимента. В каждой исследуемой группе было по 6-8 животных.Experimental hepatitis was reproduced by intraperitoneal administration of D-galactosamine to rats at a dose of 0.5 g / kg animal weight 1 time per day for 3 days. Hypokouum extract at a dose of 50 mg / kg was administered to animals from the 1st day of the experiment 1 time per day for 7 days. Karsil at a dose of 50 mg / kg was used as a reference drug. Animals of the control group received distilled water in the appropriate volume according to a similar scheme. The interval between the introduction of these funds and D-galactosamine was 5 hours. Studies were performed after 3 and 7 days from the start of the experiment. In each study group there were 6-8 animals.

Для оценки функциональной состоятельности печени в сыворотке крови определяли активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатамино-трансферазы (ACT), щелочной фосфатазы (ЩФ); концентрацию холестерина, β-липопротеидов и общего билирубина. Для оценки интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) определяли содержание диеновых конъюгатов (ДК) в сыворотке крови, содержание малонового диальдегида (МДА) и активность каталазы в гомогенате печени, содержание восстановленного глутатиона (ВГ) в сыворотке крови. Желчеобразовательную и желчевыделительную функцию печени оценивали по скорости секреции и общему количеству выделенной желчи. Энергообеспеченность гепатоцитов определяли по количеству АТФ, пирувата и лактата в гомогенате печени, а также по соотношению пируват/лактат. Результаты исследований представлены в таблицах 5, 6, 7, 8, 9.To assess the functional viability of the liver in serum, the activity of alanine aminotransferase (ALT), aspartate amino transferase (ACT), alkaline phosphatase (ALP) was determined; the concentration of cholesterol, β-lipoproteins and total bilirubin. To assess the intensity of lipid peroxidation (LPO), the content of diene conjugates (DC) in serum, the content of malondialdehyde (MDA) and catalase activity in the liver homogenate, the content of reduced glutathione (VG) in blood serum were determined. The bile formation and biliary function of the liver was assessed by the rate of secretion and the total amount of bile secreted. The energy supply of hepatocytes was determined by the amount of ATP, pyruvate and lactate in the liver homogenate, as well as by the ratio of pyruvate / lactate. The research results are presented in tables 5, 6, 7, 8, 9.

Повреждение печени лабораторных животных D-галактозамином сопровождается резкой активацией процессов ПОЛ, о чем свидетельствовало повышение концентрации продуктов пероксидации липидов в тканях, а также угнетение активности эндогенной антиокислительной системы (АОС) животных контрольной группы (Табл. 5). Так, содержание МДА в гомогенате печени контрольных крыс на 3 сутки эксперимента повышалось в 2,6 раза, ДК в сыворотке крови - в 7,0 раз по сравнению с показателями крыс интактной группы. Наряду с этим, на 3 и 7 сутки опыта активность каталазы в гомогенате печени снижалась в среднем в 2,0 раза, содержание ВГ - соответственно в 3,0 и 2,0 раза по сравнению с интактом (Табл. 5).The damage to the liver of laboratory animals by D-galactosamine is accompanied by a sharp activation of the POL processes, as evidenced by an increase in the concentration of lipid peroxidation products in the tissues, as well as inhibition of the activity of the endogenous antioxidant system (AOS) in the control group (Table 5). So, the content of MDA in the liver homogenate of control rats on day 3 of the experiment increased 2.6 times, and DK in blood serum — 7.0 times as compared with the rats of the intact group. Along with this, on the 3rd and 7th day of the experiment, the catalase activity in the liver homogenate decreased on average by 2.0 times, the GV content, respectively, by 3.0 and 2.0 times as compared with intact (Table 5).

Курсовое введение животным экстракта гипекоума оказывало выраженное антиоксидантное действие, уменьшая интенсивность процессов ПОЛ и повышая активность АОС (Табл. 5).The course introduction of the hypokume extract to animals exerted a pronounced antioxidant effect, reducing the intensity of the POL processes and increasing the activity of AOC (Table 5).

Figure 00000005
Figure 00000005

Примечание: * - здесь и далее означает, что различия значимы по сравнению с данными у животных контрольной группы при р<0,05.Note: * - hereinafter means that the differences are significant compared with the data in animals of the control group at p <0.05.

Так, концентрация МДА в гомогенате печени животных опытной группы на 3 и 7 сутки опыта снижалась соответственно на 29% и 37%, ДК - на 32% и 22% по сравнению с аналогичными показателями крыс контрольной группы. Одновременно с этим, под влиянием испытуемого средства отмечалось повышение активности каталазы соответственно на 58% и 11%, содержание ВГ в крови на 56% и 36% по сравнению с данными крыс контрольной группы. Установлено, что введение животным D-галактозамина вызывает ухудшение энергообеспеченности гепатоцитов (Табл. 6).Thus, the concentration of MDA in the liver homogenate of animals of the experimental group on days 3 and 7 of the experiment decreased by 29% and 37%, respectively, DK - by 32% and 22% compared with the same indicators in rats of the control group. At the same time, under the influence of the test substance, catalase activity increased by 58% and 11%, the blood SH content by 56% and 36%, respectively, compared with the rats of the control group. It has been established that the administration of D-galactosamine to animals causes a deterioration in the energy supply of hepatocytes (Table 6).

Figure 00000006
Figure 00000006

Так, в гомогенате печени животных контрольной группы на 7 сутки эксперимента отмечается снижение количества АТФ на 52%, увеличение содержания молочной кислоты в 2,0 раза по сравнению с указанными показателями животных интактной группы, что свидетельствует о напряженности метаболических процессов аэробного и анаэробного гликолиза в организме.Thus, in the homogenate of the liver of animals of the control group on the 7th day of the experiment, there was a decrease in the amount of ATP by 52%, an increase in the content of lactic acid by 2.0 times compared with the indicated indicators of animals of the intact group, which indicates the intensity of metabolic processes of aerobic and anaerobic glycolysis in the body .

Введение животным экстракта гипекоума и карсила нормализует энергетическое состояние тканей печени при D-галатозаминовом гепатите. Так, концентрация АТФ в гомогенате печени животных опытных групп повышается в 1,7 и 1,4 раза соответственно, содержание молочной кислоты снижается на 28% и 23% по сравнению с аналогичными показателями у животных контрольной группы. Соотношение пируват : лактат в опытных группах составляет 1:15 и 1:16, тогда как в контрольной группе - 1:24, что указывает на нормализацию углеводного обмена в гепатоцитах (Табл. 6).The administration of an extract of hypocoum and carsle to animals normalizes the energy state of the liver tissues in D-galatosamine hepatitis. Thus, the ATP concentration in the liver homogenate of animals from the experimental groups increases 1.7 and 1.4 times, respectively, the content of lactic acid decreases by 28% and 23% compared with the same indicators in animals of the control group. The ratio of pyruvate: lactate in the experimental groups is 1:15 and 1:16, whereas in the control group it is 1:24, which indicates the normalization of carbohydrate metabolism in hepatocytes (Table 6).

На фоне введения D-галактозамина у животных отмечалось развитие синдромов цитолиза и холестаза (Табл. 7).The development of cytolysis and cholestasis syndromes was observed in animals against the background of the introduction of D-galactosamine (Table 7).

Figure 00000007
Figure 00000007

Так, на 3 сутки исследований у крыс контрольной группы активность трансаминаз в сыворотке крови повышалась в среднем в 4,0 раза, активность ЩФ - в 2,6 раза, концентрация β-липопротеидов и билирубина - в 1,9 и 2,4 раза соответственно по сравнению с аналогичными показателями животных интактной группы (Табл. 7). На фоне введения экстракта гипекоума у крыс опытной группы на 3 и 7 сутки эксперимента активность АЛТ снижалась соответственно на 23% и 26%, ACT - на 20% и 44%, активность ЩФ - на 12% и 30%, концентрация β-липопротеидов - на 18% и 21% и билирубина - на 14% и 29% по сравнению с указанными показателями контрольных животных. Таким образом, экстракт гипекоума оказывал выраженное гепатопротекторное действие, уменьшая выраженность нарушений функциональной состоятельности печени.So, on the 3rd day of research in rats of the control group, transaminase activity in serum increased on average 4.0 times, ALP activity 2.6 times, β-lipoprotein and bilirubin concentrations 1.9 and 2.4 times respectively in comparison with the same indicators of animals of the intact group (Table 7). On the background of the introduction of a hypecum extract in rats of the experimental group on days 3 and 7 of the experiment, ALT activity decreased by 23% and 26% respectively, ACT - by 20% and 44%, ALP activity - by 12% and 30%, β-lipoproteins concentration by 18% and 21% and bilirubin - by 14% and 29% compared with the indicated indicators of control animals. Thus, the extract of the hycucous had a pronounced hepatoprotective effect, reducing the severity of impaired functional viability of the liver.

Развитие D-галактозаминового гепатита сопровождалось выраженным угнетением желчеобразовательной и желчевыделительной функций печени (Табл. 8, 9).The development of D-galactosamine hepatitis was accompanied by pronounced inhibition of the bile-producing and biliary functions of the liver (Tables 8, 9).

Figure 00000008
Figure 00000008

В частности, скорость секреции желчи у животных контрольной группы на 3 сутки опыта снижалась в среднем на 22%, а на 7 сутки - на 27% по отношению к показателям интактных крыс. Кроме этого, в контроле на 7 сутки опыта наблюдали более выраженное снижение содержания основных компонентов желчи по отношению к интакту : холаты - на 20%, билирубин - на 30% и холестерин на - 34% (Табл. 9).In particular, the rate of bile secretion in animals of the control group on the 3rd day of the experiment decreased by an average of 22%, and on the 7th day - by 27% in relation to the indices of intact rats. In addition, in the control on the 7th day of the experiment a more pronounced decrease in the content of the main components of bile with respect to the intact was observed: cholates - by 20%, bilirubin - by 30% and cholesterol - by 34% (Table 9).

Figure 00000009
Figure 00000009

Применение экстракта гипекоума ингибировало нарушения желчеобразовательной функции печени, вызванные введением животным D-галактозамина. Так, скорость секреции желчи у животных опытной группы возрастала и превышала таковую у крыс контрольной группы на 3 сутки опыта в среднем на 19%, на 7 сутки - на 45%. Кроме того, экстракт гипекоума повышал экскрецию билирубина и холестерина с желчью. Содержание их в желчи на 3 сутки опыта превышало контроль в среднем на 27%, а на 7 сутки соответственно на 19% и 41% (Табл. 9). Полученные данные свидетельствуют, что экстракт гипекоума прямого в дозе 50 мг/кг оказывает желчегонное действие.The use of the extract of the hypokium inhibited disorders of the biliary function of the liver caused by the administration of D-galactosamine to animals. Thus, the rate of bile secretion in animals of the experimental group increased and exceeded that in rats of the control group on the 3rd day of the experiment by an average of 19%, on the 7th day - by 45%. In addition, the extract of hycucous increased the excretion of bilirubin and cholesterol with bile. Their content in bile on the 3rd day of the experiment exceeded the control by an average of 27%, and on the 7th day, respectively, 19% and 41% (Table 9). The data obtained indicate that the direct extract of the hypokoom at a dose of 50 mg / kg has a choleretic effect.

Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что экстракт сухой гипекоума прямого обладает противовоспалительной, гепатопротекторной, желчегонной активностями, снижая развитие синдромов цитолиза и холестаза, повышая энергетический потенциал и ограничивая дистрофические и некротические изменения гепатоцитов, ингибируя свободно-радикальное окисление биомакромолекул и активируя антиоксидантную систему организма, и может рассматриваться как многофункциональный гепатопротектор для фармакологической коррекции повреждений печени.Thus, the obtained data allow us to conclude that the extract of the dry direct hypocouma has anti-inflammatory, hepatoprotective, choleretic activities, reducing the development of cytolysis and cholestasis syndromes, increasing the energy potential and limiting the dystrophic and necrotic changes of hepatocytes, inhibiting free-radical oxidation of biomacromolecules and activating the antioxidant system , and can be considered as a multifunctional hepatoprotector for the pharmacological correction of damage the liver.

Claims (1)

Способ получения средства, обладающего противовоспалительной и гепатопротекторной, желчегонной активностями, из листьев и цветков гипекоума прямого путем экстрагирования растительного материала, отличающийся тем, что отделенные от стеблей высушенные листья и цветки гипекоума прямого измельчают до размера частиц 0,5-1,0 мм, смешивают с 96% спиртом этиловым в соотношении сырье:экстрагент 1:(10-12), при комнатной температуре и экстрагируют при постоянном помешивании в течение 2 ч, проводят вторую экстракцию, добавляя экстрагент в количестве, равном слитому, в течение 1 ч, спиртовые извлечения фильтруют, затем шрот экстрагируют дважды в течение 1 ч и 0,5 ч, соответственно, при температуре 90°С, 40% спиртом этиловым в соотношении сырье:экстрагент 1:10 при первой экстракции, при второй экстракции добавляют экстрагент в количестве, равном слитому, водно-спиртовые извлечения фильтруют, затем шрот экстрагируют водой очищенной из расчета 0,1 кг исходного сырья на 1 л воды, при 100°С в течение 1 ч, водное извлечение фильтруют и фильтрат объединяют с водными остатками спиртовых извлечений после удаления спирта, сепарируют для удаления растительной пыли и балластных веществ, концентрируют, высушивают в вакуум-сушильном шкафу при температуре 40-60°С в течение 8 ч для получения экстракта сухого.The method of obtaining funds with anti-inflammatory and hepatoprotective, choleretic activity from the leaves and flowers of the hycuume directly by extraction of plant material, characterized in that the dried leaves and flowers of the hycucous separated from the stems are directly crushed to a particle size of 0.5-1.0 mm, mixed with 96% ethyl alcohol in the ratio of raw materials: extractant 1: (10-12), at room temperature and extracted with constant stirring for 2 h, a second extraction is carried out, adding an extractant in an amount equal to for 1 hour, the alcoholic extracts are filtered, then the meal is extracted twice for 1 hour and 0.5 hours, respectively, at a temperature of 90 ° C, 40% ethyl alcohol in the ratio of raw materials: extractant 1:10 at the first extraction, during the second extraction, the extractant is added in an amount equal to the drained one, the water-alcohol extracts are filtered, then the meal is extracted with purified water at the rate of 0.1 kg of raw material per 1 l of water, at 100 ° C for 1 h, the water is filtered and the filtrate is combined with water residues of alcoholic extracts after removal alcohol Ia, separated for removal of dust and plant roughage, concentrated, dried in a vacuum oven at 40-60 ° C for 8 hours to obtain a dry extract.
RU2018109812A 2018-03-20 2018-03-20 Method for preparing agent with anti-inflammatory, hepatoprotective and choleretic activities RU2684729C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018109812A RU2684729C1 (en) 2018-03-20 2018-03-20 Method for preparing agent with anti-inflammatory, hepatoprotective and choleretic activities

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018109812A RU2684729C1 (en) 2018-03-20 2018-03-20 Method for preparing agent with anti-inflammatory, hepatoprotective and choleretic activities

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2684729C1 true RU2684729C1 (en) 2019-04-12

Family

ID=66168187

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018109812A RU2684729C1 (en) 2018-03-20 2018-03-20 Method for preparing agent with anti-inflammatory, hepatoprotective and choleretic activities

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2684729C1 (en)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
НИКОЛАЕВ С.М. et all. Желчегонное и гепатотропное влияние экстракта Hypecoum erectum в эксперименте //Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология 2014, 110(10): 59-63. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Fu et al. Extraction optimization of oleanolic and ursolic acids from pomegranate (Punica granatum L.) flowers
Hoefler et al. Comparative choleretic and hepatoprotective properties of young sprouts and total plant extracts of Rosmarinus officinalis in rats
CN105878538A (en) Extracts of Coptis chinensis for prevention, elimination and treatment of DNA viroids in human and biotechnology industry
Zuparova et al. Determining The Authenticity Of Immunacea Bio Tablets With Immunomodulatory Action
EP1848449A2 (en) Bioactive complex of triterpene acids, its production process and medicinal products with therapeutical uses
RU2206572C1 (en) Method of isolation of betulinol
JP3274506B2 (en) External preparation for skin
RU2112524C1 (en) Composition of components for drug
RU2684729C1 (en) Method for preparing agent with anti-inflammatory, hepatoprotective and choleretic activities
Gonçalves et al. Cynaropicrin-and chlorogenic acid-rich extracts easily prepared from Cynara cardunculus var. scolymus: Antioxidant and antigenotoxic properties
EP0220453A2 (en) Use of extracts of plant pollen in the manufacture of pharmaceutical preparations which reduce the growth of tumour cells, and process for preparing the same
RU2068269C1 (en) Method of preparing agent showing antisclerotic and cholagogue activity
Avello et al. Identification of water-soluble compounds contained in aqueous extracts and fractions obtained from leaves of ugni molinae to determine their effect on the viability of human gastric cancer cells
JPH05345705A (en) Skin-beautifying cosmetic composition
CN110559303A (en) Refined bear gall powder for reducing blood fat, preventing and treating cardiovascular and cerebrovascular diseases and atherosclerosis
Tchogou Toxicity Assessment of Sarcocephalus latifolius Root Extract
Osifeso et al. Protective Effect of Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken (Miracle Leaf) Extract on Butylglycol-Induced Hepatotoxicity
RU2413527C1 (en) Anti-inflammatory and antibacterial drug
JP2003221333A (en) Hyaluronidase inhibitor
RU2665630C1 (en) Method for producing dry extract of common horse chestnut seeds
RU2270686C2 (en) Method for preparing hepatoprotective and hypocholesterolemic agent
Alfarajat et al. Reno-protective effect of Citrus sinensis by regulating antioxidant capability and gene expression in adenine-induced chronic kidney in rats
RU2827099C1 (en) Method of producing herbal agent having anti-inflammatory action
RU2557990C1 (en) Method for preparing medicinal product possessing choleretic, anti-inflammatory activities
DE60316681T2 (en) Vapor fraction of Glycine max (L.) merr. Seeds and corresponding composition

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20200321