RU2681219C1 - Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров - Google Patents
Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров Download PDFInfo
- Publication number
- RU2681219C1 RU2681219C1 RU2017144808A RU2017144808A RU2681219C1 RU 2681219 C1 RU2681219 C1 RU 2681219C1 RU 2017144808 A RU2017144808 A RU 2017144808A RU 2017144808 A RU2017144808 A RU 2017144808A RU 2681219 C1 RU2681219 C1 RU 2681219C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- expression
- ecy
- points
- patients
- capsule
- Prior art date
Links
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 title abstract description 12
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 title abstract description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims abstract description 41
- 206010061819 Disease recurrence Diseases 0.000 claims abstract 2
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 claims description 20
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 claims description 19
- 208000025661 ovarian cyst Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 21
- 102100035100 Transcription factor p65 Human genes 0.000 description 20
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 14
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 7
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 7
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 6
- 206010011732 Cyst Diseases 0.000 description 6
- 102100038595 Estrogen receptor Human genes 0.000 description 6
- 101710196141 Estrogen receptor Proteins 0.000 description 6
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 6
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 6
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 5
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 5
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 4
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 4
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 4
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 4
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 208000016018 endometrial polyp Diseases 0.000 description 3
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 3
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 3
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 3
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 206010044008 tonsillitis Diseases 0.000 description 3
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037656 Respiratory Sounds Diseases 0.000 description 2
- 206010062106 Respiratory tract infection viral Diseases 0.000 description 2
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 2
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 2
- 206010047924 Wheezing Diseases 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 238000002555 auscultation Methods 0.000 description 2
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- QTCANKDTWWSCMR-UHFFFAOYSA-N costic aldehyde Natural products C1CCC(=C)C2CC(C(=C)C=O)CCC21C QTCANKDTWWSCMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 230000000544 hyperemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 2
- ISTFUJWTQAMRGA-UHFFFAOYSA-N iso-beta-costal Natural products C1C(C(=C)C=O)CCC2(C)CCCC(C)=C21 ISTFUJWTQAMRGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002357 laparoscopic surgery Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 210000004705 lumbosacral region Anatomy 0.000 description 2
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000009247 menarche Effects 0.000 description 2
- 230000007778 menstrual function Effects 0.000 description 2
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 2
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 2
- 210000003903 pelvic floor Anatomy 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 2
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 2
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 2
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 1
- 208000000668 Chronic Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010009152 Chronic tonsillitis Diseases 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 208000006877 Insect Bites and Stings Diseases 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 206010033649 Pancreatitis chronic Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 208000037062 Polyps Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 208000023652 chronic gastritis Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 201000002595 endometriosis of ovary Diseases 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 208000030747 ovarian endometriosis Diseases 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 108010090388 progesterone receptor A Proteins 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 206010046811 uterine polyp Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и патологической анатомии, предназначено для прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников (ЭКЯ). Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров отличается тем, что высокий риск рецидива заболевания в течение 1,5 лет после оперативного лечения отмечают у пациенток с изменением экспрессии хотя бы одного из следующих факторов: PR-α > 220 баллов, ki-67 ≤ 1,0% в эпителиальном компоненте капсулы ЭКЯ и NF-kβ р65 ≤ 2 баллов, СОХ-2 ≤ 1 балла и b-катенин ≥ 2 балла в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ. 6 ил., 1 табл., 2 пр.
Description
Список сокращений:
ЭКЯ - эндометриоидная киста яичника,
ER-α - эстрогеновый рецептор а,
PR-α - прогестероновый рецептор а,
ki-67 - фактор пролиферации,
bcl-2 - регулятор апоптоза,
NF-kβ р65 - субъединица р65 ядерного фактора «каппа-би»,
СОХ-2 - циклооксигеназа-2
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и патологической анатомии, предназначено для прогнозирования рецидивирования ЭКЯ после оперативного лечения.
Эндометриоз - процесс, при котором за пределами полости матки происходит доброкачественное разрастание ткани, по морфологическим и функциональным свойствам подобной эндометрию. У 25-50% женщин с бесплодием диагностирован эндометриоз и 30-50% женщин с эндометриозом страдают бесплодием [1]. Изменения тазовой анатомии, вызванные эндометриозом, могут нарушить процесс овуляции, а также захват яйцеклетки фимбриальным отделом маточной трубы и дальнейшую транспортировку по ней. Изменения перитонеальной биохимической среды при эндометриозе приводят к иммобилизации спермы, ухудшению акросомальной реакции и, в свою очередь, слиянию сперматозоида и яйцеклетки [1, 2]. У женщин с эндометриозом отмечают плохое качество ооцитов и эмбрионов, а также снижение рецептивности эутопического эндометрия [1, 3]. Эндометриоз яичников приводит к снижению овариального резерва как в результате самого заболевания, так и в результате его хирургического лечения [1, 4].
Поскольку только медикаментозное лечение имеет низкую эффективность, методом выбора при лечении ЭКЯ является оперативное лечение. Однако рецидивирование заболевания по-прежнему остается очень важной проблемой: у 40-45% пациентов наблюдается рецидив ЭКЯ в течение 5 лет после первичного оперативного лечения, что приводит к необходимости повторной операции [5]. Рецидив ЭКЯ и повторное хирургическое вмешательство могут усилить проявления болевого синдрома и снизить фертильность, еще больше снижая качество жизни больных женщин [6, 7, 8, 9]. Поэтому очень важно предотвратить рецидивирование ЭКЯ после первичного оперативного лечения [7, 8, 9].
Для предотвращения рецидивирования ЭКЯ может быть использована послеоперационная гормональная терапия, однако, эффективность ее ограничена [9, 10, 11, 12]. Кроме того, все медикаментозные препараты, назначаемые при эндометриозе, подавляют овуляцию, а также имеют побочные эффекты и высокую стоимость, поэтому их назначение после оперативного лечения всем пациенткам может быть излишним [10]. Разработка эффективных методик прогнозирования рецидивирования ЭКЯ позволит определить более четкие показания для назначения различных вариантов медикаментозной терапии в послеоперационном периоде. Кроме того, такая стратификация пациенток позволит оптимизировать биобанкирование ооцитов у пациенток с ЭКЯ [1]. Поэтому, определение и идентификация факторов риска рецидивирования ЭКЯ важны для повышения эффективности послеоперационной терапии и индивидуализации ведения пациенток в послеоперационном периоде [13, 14, 15].
В нескольких исследованиях [6, 7, 8, 9, 16], сосредоточенных на эпидемиологических и интраоперационных данных, изучены факторы риска рецидивирования ЭКЯ. Выявленные факторы риска достаточно хорошо характеризуют группу пациенток с высоким риском рецидивирования ЭКЯ на уровне популяции, однако, их точность часто имеет ограниченное значение на индивидуальном уровне. Поэтому биомаркеры в тканевых образцах могут стать более надежными предикторами рецидивирования ЭКЯ и иметь большое практическое значение. Однако, роль молекулярно-генетических факторов в тканевых образцах в качестве предикторов рецидивирования ЭКЯ оценивалась в единичных исследованиях [1, 5] и пока остается недостаточно изученной.
В задачу изобретения входило определить возможность использования факторов пролиферации и апоптоза (ki-67, bcl-2), воспалительных факторов (NF-kβ р65, СОХ-2), факторов адгезии (b-катенин), эстрогеновых (ER-α) и прогестероновых (PR-α) рецепторов в качестве иммуногистохимических предикторов рецидивирования ЭКЯ у женщин репродуктивного возраста после оперативного лечения.
Практически способ осуществляется следующим образом:
В работе использовали гистологический и иммуногистохимический методы исследования. После фиксации в 10% растворе нейтрального формалина в течение 24 часов и стандартного протокола гистологической проводки материал заливали в парафин. Далее серийные срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Исследование гистологических препаратов проводили на световом микроскопе при увеличении от х50 до х400.
Иммуногистохимическое исследование капсулы ЭКЯ проводили при помощи набора Tissue-Tek Quick-Ray (Unitma, Корея), который позволяет изготавливать парафиновые блоки с большим количеством образцов тканей (тканевые матрицы). Тканевая матрица (ТМА, tissue microarray) - это парафиновый блок, в котором упорядоченно расположены фрагменты тканей, вырезанные из заранее определенных участков других парафиновых блоков. Парафиновые столбики с образцами ткани, извлеченные с помощью ручки-перфоратора, помещали в готовые парафиновые матрицы, затем заливали парафином и отправляли на микротомию. Полученный после микротомии срез помещали на предметное стекло и подвергали дальнейшей окраске. В исследовании использовались кроличьи моноклональные антитела к ki-67 (clone 30-9, VENTANA), мышиные моноклональные антитела к bcl-2 (clone 124, VENTANA), СОХ-2 (clone СХ-294, Agilent) и b-катенину (clone 14, VENTANA), кроличьи поликлональные антитела к NF-kβ р65 (clone р65, Spring Bioscience Corp.) и кроличьи моноклональные антитела к ER-α (clone SP1, VENTANA) и PR-α (clone 1E2, VENTANA). Препараты готовили по стандартному протоколу с использованием иммунгистостейнера Ventana Ultra. Для правильной постановки иммуногистохимических реакций ставили положительные и отрицательные контроли. В качестве отрицательных контролей брали образцы исследуемых срезов, которые подвергались стандартной процедуре иммуногистохимической реакции, но без добавления первичных антител. Положительные контроли для каждого антитела выбирали в соответствии со спецификациями от фирмы производителя.
Оценку результатов для ki-67 осуществляли следующим образом: экспрессия ki-67 подсчитывалась в % на 3000 клеток одного типа.
Оценку результатов для bcl-2, СОХ-2 и b-катенина осуществляли следующим образом: 0 баллов - отсутствие экспрессии, 1 балл - слабая экспрессия, 2 балла - умеренная экспрессия, 3 балла - сильная экспрессия.
Оценку результатов для NF-kβ р65 осуществляли по иммуногистохимической шкале Ota [17]. Интенсивность оценивали в степенях: 1+, 2+ и 3+. Чувствительность оценивали в степенях: 1+ - 0-10% положительно окрашенных клеток - отсутствие экспрессии, 2+ - 10-50% положительно окрашенных клеток - слабая экспрессия, 3+ - >50% положительно окрашенных клеток - умеренная экспрессия.
Оценку результатов для ER-α и PR-α проводили с учетом количества окрашенных клеток и интенсивности окраски, используя метод гистологического счета H-score по формуле: HS=1a+2b+3с, где а - процент слабо окрашенных клеток, b - процент умеренно окрашенных клеток, с - процент сильно окрашенных клеток, 1, 2, 3 - интенсивность окрашивания, выраженная в баллах. Оценку результатов проводили по следующей шкале: 0-10 баллов - отсутствие экспрессии, 11-100 баллов - слабая экспрессия, 101-200 баллов - умеренная экспрессия, 201-300 баллов - выраженная экспрессия.
Статистический анализ полученных данных проводили с применением пакетов программ прикладного статистического анализа («Statistica 10.0», ((Microsoft Excel»). Для оценки межгрупповых различий значений признаков применяли U-тест Манна-Уитни. Для всех критериев и тестов величину критического уровня значимости принимали равной 0,05, т.е. различия признавали статистически значимыми при р<0,05.
Результаты исследования:
Исследована экспрессия факторов пролиферации и апоптоза (ki-67, bcl-2), воспалительных факторов (NF-kβ р65, СОХ-2), факторов адгезии (b-катенин), эстрогеновых (ER-α) и прогестероновых (PR-α) рецепторов у 19 пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ (основная группа) и 29 пациенток без рецидива ЭКЯ (группа сравнения) (Таблица 1, Фигура 1).
Среднее значение экспрессии PR-α в строме капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ составило 260,7 баллов (медиана 270, интерквартильный размах 250-280), среднее значение экспрессии PR-α в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения - 271,2 баллов (медиана 280, интерквартильный размах 270-280) (р=0,180, тест Манна-Уитни). Экспрессия PR-α в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ колебалась в пределах 10-280 баллов, среднее значение экспрессии PR-α составило 188,5 баллов (медиана 220, интерквартильный размах 220-250), экспрессия PR-α в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения колебалась в пределах 10-220 баллов, среднее значение экспрессии PR-α - 71,2 баллов (медиана 10, интерквартильный размах 10-20). Экспрессия PR-α в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток из основной группы достоверно выше по сравнению с пациентками из группы сравнения (р=0,028, тест Манна-Уитни) (Таблица 1, Фигура 1, Фигура 2).
Среднее значение экспрессии ki-67 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ составило 14,31% (медиана 10%, интерквартильный размах 5-14,30%), среднее значение экспрессии ki-67 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения - 11,41% (медиана 10%, интерквартильный размах 10-15%) (р=0,487, тест Манна-Уитни). Экспрессия ki-67 в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ колебалась в пределах 0-10%, среднее значение экспрессии ki-67 составило 3,08% (медиана 0%, интерквартильный размах 5-12,50%), экспрессия ki-67 в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения колебалась в пределах 1-30%, среднее значение экспрессии ki-67 - 9,07% (медиана 5%, интерквартильный размах 2-13,75%). Экспрессия ki-67 в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток из основной группы достоверно ниже по сравнению с пациентками из группы сравнения (р=0,044, тест Манна-Уитни) (Таблица 1, Фигура 1, Фигура 3).
Экспрессия NF-kβ р65 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ колебалась в пределах 0-4 баллов, среднее значение экспрессии NF-kβ р65 составило 2,54 баллов (медиана 3, интерквартильный размах 2-3). Экспрессия NF-kβ р65 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения колебалась в пределах 2-5 баллов, среднее значение экспрессии NF-kβ р65 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения - 3,50 баллов (медиана 4, интерквартильный размах 3-4).
Экспрессия NF-kβ р65 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из основной группы достоверно ниже по сравнению с пациентками из группы сравнения (р=0,0082, тест Манна-Уитни). Среднее значение экспрессии NF-kβ р65 в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ составило 4,50 баллов (медиана 5, интерквартильный размах 4-5), среднее значение экспрессии NF-kβ р65 в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения - 4,79 баллов (медиана 5, интерквартильный размах 5-5) (р=0,267, тест Манна-Уитни) (Таблица 1, Фигура 1, Фигура 4).
Экспрессия СОХ-2 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ колебалась в пределах 0-1 баллов, среднее значение экспрессии СОХ-2 составило 0,23 балла (медиана 0, интерквартильный размах 0-0). Экспрессия СОХ-2 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения колебалась в пределах 0-3 баллов, среднее значение экспрессии СОХ-2 составило 1,38 баллов (медиана 1, интерквартильный размах 1-2). Экспрессия СОХ-2 в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из основной группы достоверно ниже по сравнению с пациентками из группы сравнения (р=0,0025, тест Манна-Уитни). Среднее значение экспрессии СОХ-2 в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ составило 2,82 баллов, среднее значение экспрессии СОХ-2 в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения - 3,00 балла (р=0,411, тест Манна-Уитни) (Таблица 1, Фигура 1, Фигура 5).
Экспрессия b-катенина в строме капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ колебалась в пределах 2-3 баллов, среднее значение экспрессии b-катенина составило 2,50 баллов (медиана 3, интерквартильный размах 2-3). Экспрессия b-катенина в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения колебалась в пределах 0-3 баллов, среднее значение экспрессии b-катенина составило 1,59 баллов (медиана 2, интерквартильный размах 1-2). Экспрессия b-катенина в строме капсулы ЭКЯ у пациенток из основной группы достоверно выше по сравнению с пациентками из группы сравнения (р=0,017, тест Манна-Уитни). Среднее значение экспрессии b-катенина в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ составило 2,92 баллов (медиана 3, интерквартильный размах 3-3), среднее значение экспрессии b-катенина в эпителии капсулы ЭКЯ у пациенток из группы сравнения - 2,90 баллов (медиана 3, интерквартильный размах 3-3) (р=0,943, тест Манна-Уитни) (Таблица 1, Фигура 1, Фигура 6).
* данные представлены как среднее значение, медиана (М) и интерквартильный размах (ИКР), тест Манна-Уитни.
Клинические примеры:
1) Пациентка: П. Возраст: 26 лет
Жалобы: Тянущие боли внизу живота.
История заболевания: По данным УЗИ: Эндометриоидная киста левого яичника.
Анамнез жизни: Перенесенные заболевания: в/оспа, ОРВИ, ОРЗ, бронхин, пневмония, ангина, хр.тонзиллит, хр.панкреатит, хр.гастрит. Перенесенные операции: не было. Семейный анамнез: не отягощен. Аллергоанамнез: укусы насекомых (температура, опухание укуса). Гемотрансфузионный анамнез: Гемо-плазмотрансфузии отрицает. Вредные привычки: Отрицает.
Гинекологический анамнез: Менструальная функция: менархе в 14 лет, установились сразу, длительность менструации 5-6 дней, продолжительность менструального цикла 25-35 дней, последняя менструация: 02.02.2016, день менструального цикла: 19.
Гинекологические заболевания: уреаплазмоз, кандидоз, ВПЧ 16,18, январь 2015 г. - эндометриоидная киста яичника, полип эндометрия.
Начало половой жизни: 20 лет, Количество беременностей 0.
Объективно: Т тела: 36,6 ЧСС: 64 АД слева: 110/80 АД справа: 115/80 Рост: 173 Вес: 75 ИМТ: 25,06 ОБЩЕЕ СОСТОЯНИЕ: удовлетворительное, сознание ясное. НАРУЖНЫЙ ОСМОТР: Кожа и видимые слизистые чистые, бледно-розовой окраски. Молочные железы симметричные, мягко-эластические, без патологии. ЖИВОТ равномерно участвует в акте дыхания, мягкий, безболезненный во всех отделах. Симптомы раздражения брюшины отрицательные. Притупления в отлогих местах нет. Печень по краю реберной дуги. Селезенка не пальпируется. ОРГАНЫ ДЫХАНИЯ дыхание при аускультации везикулярное, проводится во все отделы грудной клетки, хрипов нет. ОРГАНЫ КРОВООБРАЩЕНИЯ: тоны ясные, ритмичные, шумов нет. ПОКОЛАЧИВАНИЕ по поясничной области безболезненное с обеих сторон. Мочеиспускание самостоятельное, безболезненное, моча светло-желтая. Пальпация по ходу вен нижних конечностей б/болезненная. Отеков нет. НЕВРОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС без особенностей, контактна, адекватна.
Гинекологический статус: Оволосение по женскому типу. Наружные половые органы развиты правильно. Влагалище нерожавшей женщины, слизистая негиперемирована. Шейка матки цилиндрической формы, неэрозирована. Тело матки нормальной величины, плотное, подвижно, безболезненное. ПРИДАТКИ МАТКИ СЛЕВА: пальпируется образование размерами до 5,0 см, чувствительное при пальпации. ПРИДАТКИ МАТКИ СПРАВА: без особенностей. Своды выражены, безболезненные. Состояние мышц тазового дна: тонус нормальный. Крестцово-маточные связки: чувствительные при пальпации. Выделения из половых путей: светлые.
Диагноз: Основное заболевание: Эндометриоидная киста левого яичника. Эндометриоз правого яичника. Очаги эндометриоза крестцово-маточных связок. Железисто-фиброзный полип эндометрия. Шифр по МКБ: N80.1
Проведенное оперативное лечение: Лапароскопия, резекция левого яичника, биопсия правого яичника, коагуляция очагов эндометриоза крестцово-маточных связок. Гистерорезектоскопия, полипэктомия, диагностическое выскабливание эндометрия.
Гистологическое исследование: В соскобе эндометрия железисто-фиброзный полип эндометрия с воспалительными изменениями, фрагменты слизистой тела матки средней стадии пролиферации. Эндометриоидная киста и ткань левого яичника с наличием кистозно-атрезирующихся, первичных и примордиальных фолликулов. Фрагмент правого яичника с наличием первичных и примордиальных фолликулов, эндометриоидной гетеротопией. Иммуногистохимическое исследование: экспрессия PR-α в эпителии - 10 баллов, экспрессия ki-67 в эпителии - 15,0%, экспрессия NF-kβ р65 в строме - 4 балла, экспрессия СОХ-2 в строме - 2 балла, экспрессия b-катенина в строме - 1 балл.
В соответствии с формулой изобретения такой иммунофенотип капсулы ЭКЯ соответствует низкому риску развития рецидива ЭКЯ.
УЗИ в НЦ от 25.05.2016: «Объемной патологии со стороны органов малого таза не выявлено». Сейчас беременность 4 мес.
2) Пациентка: К. Возраст: 31 год
Жалобы: Тянущие боли внизу живота.
История заболевания: По данным УЗИ: Эндометриоидные кисты больших размеров с обеих сторон.
Анамнез жизни: Перенесенные заболевания: В/оспа, ОРЗ, ОРВИ, бронхит, ангина, хр. ринит, полипы в носу. Перенесенные операции: не было. Семейный анамнез: не отягощен. Аллергоанамнез: шерсть собак (пятна на коже). Гемотрансфузионный анамнез: Гемо-плазмотрансфузии отрицает. Вредные привычки: Отрицает.
Гинекологический анамнез: Менструальная функция: менархе в 13 лет, установились сразу, длительность менструации 6 дней, продолжительность менструального цикла 28-29 дней, последняя менструация: 25.09.2015, день менструального цикла: 13.
Гинекологические заболевания: Эрозия ш/матки.
Начало половой жизни: 16 лет, Количество беременностей 0.
Объективно: Т тела: 36,6 ЧСС: 64 АД слева: 110/80 АД справа: 115/80 Рост: 170 Вес: 67 ИМТ: 23,18 ОБЩЕЕ СОСТОЯНИЕ: удовлетворительное, сознание ясное. НАРУЖНЫЙ ОСМОТР: Кожа и видимые слизистые чистые, бледно-розовой окраски. Молочные железы симметричные, мягко-эластические, без патологии. ЖИВОТ равномерно участвует в акте дыхания, мягкий, безболезненный во всех отделах. Симптомы раздражения брюшины отрицательные. Притупления в отлогих местах нет. Печень по краю реберной дуги. Селезенка не пальпируется. ОРГАНЫ ДЫХАНИЯ дыхание при аускультации везикулярное, проводится во все отделы грудной клетки, хрипов нет. ОРГАНЫ КРОВООБРАЩЕНИЯ: тоны ясные, ритмичные, шумов нет. ПОКОЛАЧИВАНИЕ по поясничной области безболезненное с обеих сторон. Мочеиспускание самостоятельное, безболезненное, моча светло-желтая. Пальпация по ходу вен нижних конечностей б/болезненная. Отеков нет. НЕВРОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС без особенностей, контактна, адекватна.
Гинекологический статус: Оволосение по женскому типу. Наружные половые органы развиты правильно. Влагалище нерожавшей женщины, слизистая негиперемирована. Шейка матки цилиндрической формы, неэрозирована. Тело матки нормальной величины, плотное, подвижно, безболезненное. ПРИДАТКИ МАТКИ СЛЕВА: пальпируется образование размерами до 8,0-9,0 см, чувствительное при пальпации. ПРИДАТКИ МАТКИ СПРАВА: пальпируется образование размерами до 9,0 см, чувствительное при пальпации. Своды выражены, безболезненные. Состояние мышц тазового дна: тонус нормальный. Крестцово-маточные связки: чувствительные при пальпации. Выделения из половых путей: светлые.
Диагноз: Основное заболевание: Двусторонние эндометриоидные кисты обоих яичников. Наружно-генитальный эндометриоз брюшины и крестцово-маточных связок. Спаечный процесс в малом тазу. Шифр по МКБ: N80.1
Проведенное оперативное лечение: Лапароскопия, резекция обоих яичников. Разделение спаек в полости малого таза. Коагуляция очагов эндометриоза. Гистероскопия, диагностическое выскабливание эндометрия.
Гистологическое исследование: в соскобе из полости матки эндометрий стадии пролиферации. Эндометриоидная киста левого яичника. Эндометриоидная киста правого яичника. Заключение: двухсторонние эндометриоидные кисты яичников.
Иммуногистохимическое исследование: экспрессия PR-α в эпителии - 250 баллов, экспрессия ki-67 в эпителии - 0 баллов, экспрессия NF-kβ р65 в строме - 2 балла, экспрессия СОХ-2 в строме - 0 баллов, экспрессия b-катенина в строме - 3 балла.
В соответствии с формулой изобретения такой иммунофенотип капсулы ЭКЯ соответствует высокому риску развития рецидива ЭКЯ.
УЗИ в НЦ 21.11.2016: «Киста ЖТЛЯ с кровоизлиянием. Три ЭК левого яичника» (рецидив эндометриоза).
Заключение: Мы обнаружили, что ряд исследуемых нами маркеров может выступать в качестве предикторов рецидивирования эндометриоза. Так, достоверно отличается экспрессия PR-α (повышена) и ki-67 (понижена) в эпителиальном компоненте ЭКЯ пациенток с рецидивом болезни. Кроме того, экспрессия NF-kb р65 и СОХ-2 достоверно понижена в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ, а экспрессия b-катенина достоверно повышена в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ.
Иммуногистохимическое исследование экспрессии PR-α, ki-67, NF-kb р65, СОХ-2 и b-катенина в капсуле ЭКЯ может использоваться для предикции рецидивирования ЭКЯ после оперативного лечения. Это позволит сразу после операции определять пациенток с высоким риском рецидивирования ЭКЯ и оптимально индивидуализировать послеоперационную тактику ведения пациенток с этим заболеванием.
Источники информации:
Подписи к чертежам
Фиг. 1. Иммуногистохимическая экспрессия факторов пролиферации и апоптоза (ki-67, bcl-2), воспалительных факторов (NF-kβ р65, СОХ-2), факторов адгезии (b-катенин), эстрогеновых (ER-α) и прогестероновых (PR-α) рецепторов в капсуле ЭКЯ пациенток из основной группы и группы сравнения (×400).
Фиг. 2. Экспрессия PR-α в строме (А) и эпителии (Б) капсулы ЭКЯ от пациенток из основной группы и группы сравнения.
Фиг. 3. Экспрессия ki-67 в строме (А) и эпителии (Б) капсулы ЭКЯ от пациенток из основной группы и группы сравнения.
Фиг. 4. Уровень экспрессии NF-kβ р65 в строме (А) и эпителии (Б) капсулы ЭКЯ от пациенток из основной группы и группы сравнения.
Фиг. 5. Экспрессия СОХ-2 в строме (А) и эпителии (Б) капсулы ЭКЯ от пациенток из основной группы и группы сравнения.
Фиг. 6. Экспрессия b-катенина в строме (А) и эпителии (Б) капсулы ЭКЯ от пациенток из основной группы и группы сравнения.
Claims (1)
- Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров, отличающийся тем, что высокий риск рецидива заболевания в течение 1,5 лет после оперативного лечения отмечают у пациенток с изменением экспрессии хотя бы одного из следующих факторов: PR-α > 220 баллов, ki-67 ≤ 1,0% в эпителиальном компоненте капсулы ЭКЯ и NF-kβ р65 ≤ 2 баллов, СОХ-2 ≤ 1 балла и b-катенин ≥ 2 балла в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017144808A RU2681219C1 (ru) | 2017-12-20 | 2017-12-20 | Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017144808A RU2681219C1 (ru) | 2017-12-20 | 2017-12-20 | Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2681219C1 true RU2681219C1 (ru) | 2019-03-05 |
Family
ID=65632934
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017144808A RU2681219C1 (ru) | 2017-12-20 | 2017-12-20 | Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2681219C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2757236C1 (ru) * | 2021-04-09 | 2021-10-12 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Приволжский исследовательский медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО "ПИМУ" Минздрава России) | Способ прогнозирования рецидива эндометриоидных кист яичников после хирургического лечения |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2304782C1 (ru) * | 2005-12-28 | 2007-08-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова | Способ прогнозирования рецидива эндометриоидной кисты яичника |
| RU2315317C1 (ru) * | 2006-06-13 | 2008-01-20 | ФГУ Ростовский НИИ акушерства и педиатрии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Способ прогнозирования рецидива кист яичника после пункционной склеротерапии |
-
2017
- 2017-12-20 RU RU2017144808A patent/RU2681219C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2304782C1 (ru) * | 2005-12-28 | 2007-08-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова | Способ прогнозирования рецидива эндометриоидной кисты яичника |
| RU2315317C1 (ru) * | 2006-06-13 | 2008-01-20 | ФГУ Ростовский НИИ акушерства и педиатрии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Способ прогнозирования рецидива кист яичника после пункционной склеротерапии |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| BOSS EA et al. Glutathione S-transferases P1-1 and A1-1 in ovarian cyst fluids. Eur J Gynaecol Oncol. 2001;22(6):427-32. PMID: 11874074. * |
| HIROTAKA OTA et al. Expression of major histocompatibility complex class II antigen in endometriotic tissue in patients with endometriosis and adenomyosis. Vol. 60, N.5, November 1993, p. 834-838. * |
| ШКЛЯР А.А. и др. Рецепторный статус эндометриоидных гетеротопий как критерий назначения гормональной терапии при узловой и диффузной формах аденомиоза. Проблемы репродукции. 2, 2015, с. 88-93. * |
| ШКЛЯР А.А. и др. Рецепторный статус эндометриоидных гетеротопий как критерий назначения гормональной терапии при узловой и диффузной формах аденомиоза. Проблемы репродукции. 2, 2015, с. 88-93. HIROTAKA OTA et al. Expression of major histocompatibility complex class II antigen in endometriotic tissue in patients with endometriosis and adenomyosis. Vol. 60, N.5, November 1993, p. 834-838. BOSS EA et al. Glutathione S-transferases P1-1 and A1-1 in ovarian cyst fluids. Eur J Gynaecol Oncol. 2001;22(6):427-32. PMID: 11874074. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2757236C1 (ru) * | 2021-04-09 | 2021-10-12 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Приволжский исследовательский медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО "ПИМУ" Минздрава России) | Способ прогнозирования рецидива эндометриоидных кист яичников после хирургического лечения |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Liu et al. | Comparison of the prevalence of chronic endometritis as determined by means of different diagnostic methods in women with and without reproductive failure | |
| Farquhar et al. | Female subfertility | |
| RU2651762C1 (ru) | Способ оценки рецептивности эндометрия в период "имплантационного окна" | |
| RU2617515C1 (ru) | Способ прогнозирования рецептивности эндометрия на основании оценки экспрессии GnRG и GnRGR в "окно имплантации" в эндометрии женщин бесплодием и неудачными попытками программы эко | |
| RU2724381C1 (ru) | Способ оценки рецептивности эндометрия при эндометриоз-ассоциированном бесплодии | |
| RU2553340C1 (ru) | Способ диагностирования нарушения рецептивности эндометрия у пациенток с миомой матки и бесплодием | |
| RU2681219C1 (ru) | Способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников после оперативного лечения при помощи иммуногистохимических маркеров | |
| Elbehery et al. | Insulin-like growth factor binding protein-1 and glycodelin levels in uterine flushing before and after hysteroscopic polypectomy | |
| Dzhumaniyazovna et al. | IMMUNOHISTOCHEMICAL APPROACHES TO THE DIAGNOSIS OF EARLY MISCARRIAGE | |
| RU2625723C1 (ru) | Способ доклинической диагностики преждевременного истощения яичников у женщин репродуктивного возраста | |
| RU2334987C1 (ru) | Способ диагностики патологии эндометрия у больных миомой матки | |
| RU2334986C1 (ru) | Способ ранней диагностики опухолей яичников | |
| RU2694882C1 (ru) | Способ прогнозирования рецидива эндометриоидных кист яичника | |
| RU2676035C1 (ru) | Способ прогнозирования вероятности развития пролиферирующей миомы матки | |
| RU2765639C1 (ru) | Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия на основании эндометриальной экспрессии vdr, hoxa 11 в программах врт у женщин старшего репродуктивного возраста с трубно-перитонеальным фактором бесплодия | |
| RU2724384C1 (ru) | Способ оценки имплантационной состоятельности эндометрия при пролиферативно-воспалительных нарушениях в эндометрии при эндометриозе, ассоциированном с эндометриальным фактором бесплодия | |
| Ness et al. | Fetal fibronectin as a marker to discriminate between ectopic and intrauterine pregnancies | |
| RU2676050C1 (ru) | Способ прогнозирования вероятности развития аденомиоза у женщин с миомой матки | |
| RU2828967C1 (ru) | Способ определения степени выраженности хронического эндометрита | |
| Bhattacharya et al. | Management of Infertility for the MRCOG and Beyond | |
| RU2735218C1 (ru) | Способ прогнозирования имплантации в программах врт у женщин старшего репродуктивного возраста с трубно-перитонеальным фактором бесплодия | |
| RU2540499C1 (ru) | Способ прогнозирования неразвивающейся беременности | |
| RU2749290C1 (ru) | Способ диагностики малых форм эндометриоза | |
| RU2626676C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития быстрорастущей миомы матки | |
| RU2327164C1 (ru) | Способ диагностики гиперпластических процессов эндометрия у больных миомой матки |