RU2662954C2 - Соединения для улучшенной дифференцировки стволовых клеток в гепатоциты - Google Patents
Соединения для улучшенной дифференцировки стволовых клеток в гепатоциты Download PDFInfo
- Publication number
- RU2662954C2 RU2662954C2 RU2015140469A RU2015140469A RU2662954C2 RU 2662954 C2 RU2662954 C2 RU 2662954C2 RU 2015140469 A RU2015140469 A RU 2015140469A RU 2015140469 A RU2015140469 A RU 2015140469A RU 2662954 C2 RU2662954 C2 RU 2662954C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- compound
- hepatocytes
- compound according
- formula
- benzoimidazole
- Prior art date
Links
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 50
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 119
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 title 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 11
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 24
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 15
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 15
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 15
- CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N trichlorofluoromethane Chemical compound FC(Cl)(Cl)Cl CYRMSUTZVYGINF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims description 6
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 claims description 6
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 abstract description 4
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 abstract 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 24
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 19
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 13
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 12
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical class CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 10
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- -1 dispersing media Substances 0.000 description 8
- TUAKCJMCPYVROG-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(3-chlorophenyl)ethylamino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)c1cccc2nc([nH]c12)-c1c(NCCc2cccc(Cl)c2)cc[nH]c1=O TUAKCJMCPYVROG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 7
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- SIHUZXVYNKGNFF-HSZRJFAPSA-N N-[(3-fluorophenyl)methyl]-2-[4-[[(2S)-2-hydroxy-2-phenylethyl]amino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound O[C@H](CNc1cc[nH]c(=O)c1-c1nc2cccc(C(=O)NCc3cccc(F)c3)c2[nH]1)c1ccccc1 SIHUZXVYNKGNFF-HSZRJFAPSA-N 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- RZOFMJXYQYHMAC-MRXNPFEDSA-N 2-[4-[[(2S)-2-hydroxy-2-phenylethyl]amino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxylic acid Chemical compound O[C@H](CNc1cc[nH]c(=O)c1-c1nc2cccc(C(O)=O)c2[nH]1)c1ccccc1 RZOFMJXYQYHMAC-MRXNPFEDSA-N 0.000 description 6
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 4
- ULJAQAHBPRIKED-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(4-chloro-2-oxo-1H-pyridin-3-yl)-1H-benzimidazole-4-carboxylate Chemical compound COC(=O)c1cccc2nc([nH]c12)-c1c(Cl)cc[nH]c1=O ULJAQAHBPRIKED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YZNFGRHAHBWLPH-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(3-chlorophenyl)ethylamino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-N-[(4-fluorophenyl)methyl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound FC1=CC=C(CNC(=O)C2=CC=CC=3N=C(NC32)C=3C(NC=CC3NCCC3=CC(=CC=C3)Cl)=O)C=C1 YZNFGRHAHBWLPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FCMJVGYEWYEPTI-UHFFFAOYSA-N N-benzyl-2-[4-[2-(3-chlorophenyl)ethylamino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound Clc1cccc(CCNc2cc[nH]c(=O)c2-c2nc3cccc(C(=O)NCc4ccccc4)c3[nH]2)c1 FCMJVGYEWYEPTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YVXSYNYWDDKDQO-HSZRJFAPSA-N N-benzyl-2-[4-[[(2S)-2-hydroxy-2-phenylethyl]amino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound O[C@H](CNc1cc[nH]c(=O)c1-c1nc2cccc(C(=O)NCc3ccccc3)c2[nH]1)c1ccccc1 YVXSYNYWDDKDQO-HSZRJFAPSA-N 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000710886 West Nile virus Species 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- CLOXPODBEPKGRZ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(4-iodo-2-methoxypyridin-3-yl)-1h-benzimidazole-4-carboxylate Chemical compound N=1C=2C(C(=O)OC)=CC=CC=2NC=1C1=C(I)C=CN=C1OC CLOXPODBEPKGRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MBFMZBWPNMXXFD-QGZVFWFLSA-N methyl 2-[4-[[(2S)-2-hydroxy-2-phenylethyl]amino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxylate Chemical compound COC(=O)c1cccc2nc([nH]c12)-c1c(NC[C@@H](O)c2ccccc2)cc[nH]c1=O MBFMZBWPNMXXFD-QGZVFWFLSA-N 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- QVSVMNXRLWSNGS-UHFFFAOYSA-N (3-fluorophenyl)methanamine Chemical compound NCC1=CC=CC(F)=C1 QVSVMNXRLWSNGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HYZJCKYKOHLVJF-UHFFFAOYSA-N 1H-benzimidazole Chemical compound C1=CC=C2NC=NC2=C1 HYZJCKYKOHLVJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MULFHSVMIPPUMG-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(3-chlorophenyl)ethylamino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-N-[(2-fluorophenyl)methyl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound FC1=C(CNC(=O)C2=CC=CC=3N=C(NC32)C=3C(NC=CC3NCCC3=CC(=CC=C3)Cl)=O)C=CC=C1 MULFHSVMIPPUMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UESJVVHIGSVEBJ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(3-chlorophenyl)ethylamino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-N-[(3-fluorophenyl)methyl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound FC=1C=C(CNC(=O)C2=CC=CC=3N=C(NC32)C=3C(NC=CC3NCCC3=CC(=CC=C3)Cl)=O)C=CC1 UESJVVHIGSVEBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DMOCVFXZGGMUPI-HSZRJFAPSA-N N-[(4-fluorophenyl)methyl]-2-[4-[[(2S)-2-hydroxy-2-phenylethyl]amino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide Chemical compound O[C@H](CNc1cc[nH]c(=O)c1-c1nc2cccc(C(=O)NCc3ccc(F)cc3)c2[nH]1)c1ccccc1 DMOCVFXZGGMUPI-HSZRJFAPSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 2
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 2
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- ZUTLATZPACDTNV-UHFFFAOYSA-N methyl 2-[4-[2-(3-chlorophenyl)ethylamino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-1H-benzimidazole-4-carboxylate Chemical compound COC(=O)c1cccc2nc([nH]c12)-c1c(NCCc2cccc(Cl)c2)cc[nH]c1=O ZUTLATZPACDTNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- ULSIYEODSMZIPX-MRVPVSSYSA-N (1s)-2-amino-1-phenylethanol Chemical compound NC[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 ULSIYEODSMZIPX-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- LRFWYBZWRQWZIM-UHFFFAOYSA-N (2-fluorophenyl)methanamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1F LRFWYBZWRQWZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- RHXSYTACTOMVLJ-UHFFFAOYSA-N 1H-benzimidazole-2-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C(=O)O)=NC2=C1 RHXSYTACTOMVLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UDSMKEWYHBEOAJ-UHFFFAOYSA-N 2,3-diamino-4-methylbenzoic acid Chemical compound CC1=CC=C(C(O)=O)C(N)=C1N UDSMKEWYHBEOAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRHVNPYOTNGECT-UHFFFAOYSA-N 2-(3-chlorophenyl)ethanamine Chemical compound NCCC1=CC=CC(Cl)=C1 NRHVNPYOTNGECT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ICDLMOQZNKBCNY-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(3-chlorophenyl)ethylamino]-2-oxo-1H-pyridin-3-yl]-N-[(4-fluorophenyl)methyl]benzimidazole-1-carboxamide Chemical compound FC1=CC=C(CNC(=O)N2C(=NC3=C2C=CC=C3)C=3C(NC=CC3NCCC3=CC(=CC=C3)Cl)=O)C=C1 ICDLMOQZNKBCNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CSDSSGBPEUDDEE-UHFFFAOYSA-N 2-formylpyridine Chemical compound O=CC1=CC=CC=N1 CSDSSGBPEUDDEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004179 3-chlorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C(Cl)=C1[H] 0.000 description 1
- BXCHJERCAUZLOE-UHFFFAOYSA-N 3-iodo-2-methoxypyridine Chemical group COC1=NC=CC=C1I BXCHJERCAUZLOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GNBKAOHTTIVAMT-UHFFFAOYSA-N 4-iodo-2-methoxypyridine-3-carbaldehyde Chemical compound COC1=NC=CC(I)=C1C=O GNBKAOHTTIVAMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- QXMYHFHIFSWQLJ-UHFFFAOYSA-N ClC1=CC=COC1=N Chemical compound ClC1=CC=COC1=N QXMYHFHIFSWQLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 101000745631 Homo sapiens Cyclic AMP-responsive element-binding protein 3-like protein 1 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTLZVHNRZJPSMI-UHFFFAOYSA-N N-ethylpiperidine Chemical compound CCN1CCCCC1 HTLZVHNRZJPSMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N Phenethylamine Chemical class NCCC1=CC=CC=C1 BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 108091006611 SLC10A1 Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000874347 Streptococcus agalactiae IgA FC receptor Proteins 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- ULSIYEODSMZIPX-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxyphenethylamine Natural products NCC(O)C1=CC=CC=C1 ULSIYEODSMZIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001500 aryl chlorides Chemical group 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003939 benzylamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007257 deesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000009760 functional impairment Effects 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- BLJHLOLVEXWHFS-UHFFFAOYSA-N methyl 2,3-diaminobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(N)=C1N BLJHLOLVEXWHFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 238000010208 microarray analysis Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002828 nitro derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000010534 nucleophilic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000007614 solvation Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 230000005919 time-dependent effect Effects 0.000 description 1
- YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N tripropylamine Chemical compound CCCN(CCC)CCC YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/067—Hepatocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/46—Amines, e.g. putrescine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2503/00—Use of cells in diagnostics
- C12N2503/02—Drug screening
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/45—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from artificially induced pluripotent stem cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению общей формулы I или его стереоизомеру, где R, R, R, R, R, R, R, R, Rи Rнезависимо представляют собой атом водорода или галогена и Rпредставляет собой атом водорода или группу гидрокси. Также изобретение относится к способу дифференцировки стволовых клеток в гепатоциты. Технический результат: получены новые гетероциклические соедиения для применения в качестве платформ для скрининга лекарственных средств и для использования при моделировании заболеваний. 2 н. и 25 з.п. ф-лы, 18 ил., 1 табл., 7 пр.
Description
Настоящее изобретение относится к соединениям, их получению и к содержащим их фармацевтическим композициям для дифференцировки стволовых клеток в более подобные зрелым гепатоцитам клетки.
При исследовании и разработке лекарственных средств существует огромная потребность в надежных способах моделирования in vitro функции печени. Современные методы, в которых используются первичные культуры гепатоцитов человека, характеризуются убедительными, документально подтвержденными недостатками, а именно, вариабельностью в случае разных доноров и функциональной нестабильностью. Аналогичным образом, линии клеток гепатомы демонстрируют функциональную недостаточность и страдают от отягощающих генетических нарушений, присущих линиям опухолевых клеток.
Несмотря на то, что ткани, происходящие из плюрипотентных стволовых клеток, являются многообещающими с точки зрения разрешения проблемы вариабельности в случае разных доноров, до сих пор в большинстве сообщений, касающихся изучения гепатоцитов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека (human induced pluripotent stem cell, hiPSC), указывается на то, что они больше схожи в некоторых функциях с тканями плода, нежели взрослого, что может затруднить их экстраполяцию к взрослому организму в ситуации in vivo. Таким образом, существует потребность в улучшенных способах дифференцировки плюрипотентных стволовых клеток в более зрелые или похожие на клетки взрослых гепатоциты с целью создания более релевантных моделей для исследования лекарственных средств и тестирования их эффективности и безопасности.
Успешная дифференцировка hiPSC в похожие на клетки взрослых гепатоциты будет облегчать усилия в поиске лекарственных средств для лечения хронических заболеваний печени, таких как инфекция вирусом гепатита В (hepatitis В virus; HBV). Лечение хронической инфекции HBV (chronic HBV; СНВ) представляет собой огромную нереализованную потребность медицины, затрагивающую приблизительно 350 миллионов человек во всем мире. Существующие в настоящее время способы лечения - с применением нуклеоз(т)идных ингибиторов и интерферона (interferon; IFN) - являются неэффективными для выведения вируса и ассоциированы с устойчивостью вируса и/или с неблагоприятными побочными эффектами. Исходя из вариабельности последовательности его вирусного генома, HBV классифицируют на 7 генотипов (генотипы А-Н; при этом основными генотипами являются A-D). Результаты лечения HBV инфекции демонстрируют зависимость от возраста и генотипа. Так, по большей части, СНВ инфекция является результатом вертикальной (от матери к младенцу) передачи инфекции и/или инфекции, полученной в детском возрасте. В противоположность этому у приблизительно 90% взрослых, подвергшихся действию вируса, HBV, инфекция может быть устранена в течение 6 месяцев. Помимо этого, различные клинические данные показали, что вирусные генотипы влияют на прогрессирование вызванных HBV заболеваний и на ответ на лечение с использованием IFN. Также известно, что HBV уклоняется от иммунных ответов хозяина, используя различные механизмы, в том числе подавление интерферон-стимулированных генов (interferon-stimulated genes; ISG). Лучшее понимание сложного взаимодействия между HBV и врожденным иммунитетом хозяина может привести к открытию новых мишеней в системе хозяин/вирус для лечения СНВ инфекции. Тем не менее, усилиям по открытию новых, более эффективных противовирусных средств в отношении HBV препятствует отсутствие физиологических и надежных систем in vitro. Существующие в настоящее время системы на основе гепатом, используемых в качестве как клеток-продуцентов, так и клеток-мишеней, не являются ни надежными, ни охватывающими разнообразия генотипа HBV. Таким образом, будут очень желательны новые системы in vitro, которые являются более релевантными с точки зрения физиологии и поддержания устойчивой инфекции HBV всех основных генотипов, предпочтительно из клинических изолятов. Такие системы будут не только полезными в качестве платформ для скрининга лекарственных средств, но также для моделирования вызванных HBV заболеваний, включая оценку генотип-зависимого ответа на интерферон.
Таким образом, существует потребность в улучшенной дифференцировке происходящих из стволовых клеток гепатоцитов в более зрелые гепатоциты для поддержания устойчивой инфекции HBV различных генотипов, выделенными от пациентов, для применения в качестве платформ для скрининга лекарственных средств и моделирования заболеваний.
Изобретение относится к соединениям формулы I:
и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, где R1-R11 являются такими, как определено далее. Помимо этого настоящее изобретение относится к способам получения и применения соединений формулы I, а также к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения. Соединения формулы I полезны при дифференцировке стволовых клеток в более зрелые или похожие на клетки взрослых гепатоциты для применения в качестве платформ для скрининга лекарственных средств и в качестве платформ для моделирования заболеваний.
На Фиг. 1 приведена тепловая карта, показывающая общую усиленную экспрессию генов, обеспечивающих функцию гепатоцитов, при использовании многократных доз соединения из примера 1. Обычно биологические тепловые карты используются в молекулярной биологии для представления уровня экспрессии большого числа генов среди ряда сравниваемых образцов (например, клеток на разных стадиях развития, образцов от разных пациентов), поскольку их получают из образцов кДНК. На Фиг. 1 зеленым цветом отмечена низкая экспрессия, тогда как красным цветом отмечена высокая экспрессия. Графическое представление соотносится в каждой строке с данными, представляющими градиент от самой низкой экспрессии (зеленый цвет) к средней (черный цвет) до самой высокой экспрессии (красный цвет).
На Фиг. 2 показана усиленная экспрессия генов, обеспечивающих функцию гепатоцитов, в гепатоцитах, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, на основе результатов экспрессии генов из панели ассоциированных с созреванием генов после обработки соединениями из примеров 1-7.
На Фиг. 3А и 3В показана устойчивая HBV инфекция в iCell гепатоцитах. Фиг. 3А представляет собой гистограмму, показывающую, что обработка гепатоцитов, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток, соединением из примера 1 приводила к возникновению у клеток восприимчивости к HBV инфекции, проявляющейся дозозависимым образом. Фиг. 3В представляет собой гистограмму, показывающую, что вирусная инфекция ингибируется интерфероном (100 международных единиц (МЕ)/мл).
На Фиг. 4A-4D показана пан-генотипическая HBV инфекция в iCell гепатоцитах, представленная в виде серии гистограмм, отражающих тот факт, что происходящие из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоциты, обработанные соединением из примера 1, способны поддерживать устойчивую инфекцию HBV всех четырех основных генотипов (GT; genotype) (А-D). Постоянное присутствие соединения из примера 1 необходимо для поддержания устойчивой вирусной инфекции. Клетки либо предварительно обрабатывали соединением из примера 1 в течение 6 сут перед инфекцией HBV (6 сут), либо предварительно обрабатывали в течение 6 сут и также в процессе инфекции (весь период времени). Интерферон (IFN) используют, чтобы показать специфичность HBV инфекции.
Фиг. 5 представляет собой гистограмму, показывающую, что происходящие из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоциты, обработанные соединением из примера 1, поддерживают инфекцию вирусом HBV, выделенным из сывороток крови пациентов (клинических изолятов), а не происходящим из клеточных культур вирусом (HepG2.2.15). iCell гепатоциты, обработанные соединением из примера 1, поддерживают инфекцию вирусом HBV, выделенным от пациентов, а не происходящим из клеточных культур.
Фиг. 6A-I - 6A-IV касаются инфекционности HBV из сыворотки крови в сравнении с очищенным вирусом и представляют собой серию гистограмм, показывающих, что удаление избытка субвирусных частиц (subviral particles; SVP) поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg; Hepatitis В surface antigen), присутствующих в сыворотке крови, является необходимым предварительным условием для достижения устойчивой HBV инфекции в происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоцитах, обработанных соединением из примера 1. Перед инфекцией вирусом HBV проводили предварительную обработку клеток соединением из примера 1 в течение 6 суток (6 сут).
Фиг. 6B-I и 6B-II относятся к очистке вирусных частиц HBV от избытка субвирусных частиц (SVP) HBsAg и демонстрируют отделение очищенного вируса (частицы Дейна) от SVP HBsAg посредством ультрацентрифугирования в градиенте Optiprep.Для подтверждения успешности очистки вируса использовали вирусные маркеры (HBsAg и ДНК HBV) и анализ с применением электронной микроскопии.
Фиг. 7а представляет собой результаты анализа с применением микрочипов (тепловая карта) в отношении происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоцитов, обработанных соединением из примера 1. Показаны гены, которые после обработки оказались активированными и подавленными более чем в 2 раза (2 ч), более чем в 3 раза (24 ч) или более чем в 6 раз (7 суток). Соединение из примера 1 подавляло интерферон-стимулированные гены (ISG) уже через 2 ч. Показаны два гена (не являющиеся ISG), которые также могут принимать участие в восприимчивости iCell гепатоцитов к HBV инфекции: показано, что ген CREB3L1 (подавленный уже через 2 ч после обработки) участвует в ингибировании пролиферации клеток, инфицированных другими вирусами (вирусом гепатита С (HCV; hepatitis С virus), вирусом Западного Нила (WNV; West Nile virus) и ДНК-содержащими вирусами), а в отношении гена SLC10A1 (активированного на 7-е сутки после обработки) сообщалось, что он является геном рецептора HBV.
Фиг. 7b относится к влиянию соединения из примера 1 на интерферон-стимулированные гены (ISG) и представляет круговые диаграммы, показывающие кинетический эффект (kinetic effect) соединения из примера 1 на экспрессию ISG в гепатоцитах, происходящих из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток. Список из 975 интерферон-стимулированных генов (ISG) составлен на основе данных для известных ISG из общедоступной базы данных (см. Таблицу 1).
Фиг. 7с относится к влиянию соединения из примера 1 на экспрессию ISG (975 генов) и представляет круговые диаграммы, показывающие примеры ISG, модулируемых соединением из примера 1 через 24 ч и 7 суток после обработки соединением. Данный список из 975 интерферон-стимулированных генов (ISG) составлен на основе данных для известных ISG из общедоступной базы данных (см. Таблицу 1).
В Таблице 1 показан кинетический эффект соединения из примера 1 на ISG через 2 ч, 24 ч и 7 суток после обработки (р-значение<0,05).
Если не указано иное, следующие далее специальные термины и фразы, использованные в описании и формуле изобретения, определены так, как приведено ниже.
Термин "группировка" относится к атому или группе химически связанных атомов, который(ая) присоединен(а) к другому атому или другой молекуле одной или более чем одной химической связью, тем самым составляя часть молекулы. Например, переменные R1-R11 формулы I относятся к группировкам, которые присоединены к коровой структуре формулы I ковалентной связью.
При отсылке к конкретной группировке с одним или более атомами водорода термин "замещенный" относится к тому факту, что по меньшей мере один из атомов водорода в этой группировке заменен на другой заместитель или другую группировку.
Термин "возможно замещенный" относится к тому факту, что один или более атомов водорода группировки (содержащей один или более атомов водорода) может, но не обязательно должен, быть замещенным другим заместителем.
Термин "галоген" относится к группировке фтора, хлора, брома или йода.
Если не указано иное, термин "атом водорода" или "гидро" относится к группировке атома водорода (-Н) и не является Н2.
Термин "iCell гепатоциты" относится к происходящим из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток гепатоцитам от Cellular Dynamics International (CDI).
Если не указано иное, термин "соединение указанной формулы" или "соединение формулы" либо "соединения указанной формулы" или "соединения формулы" относится к любому соединению, выбранному из класса соединений, которые определены этой формулой (включая любую фармацевтически приемлемую соль или любой фармацевтически приемлемый сложный эфир любого такого соединения).
Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к тем солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства свободных оснований или свободных кислот, и которые не являются биологически или иным образом нежелательными. Соли могут быть образованы при взаимодействии с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобное, предпочтительно соляная кислота, и органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, салициловая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, N-ацетилцистеин и тому подобное. Помимо этого, соли могут быть получены путем добавления неорганического основания или органического основания к свободной кислоте. Соли, происходящие из неорганического основания, включают, но не ограничиваются этим, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция, магния и тому подобное. Соли, происходящие из органических оснований, включают, но не ограничиваются этим, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, включая природные замещенные амины, циклических аминов и основных ионообменных полимеров, таких как изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин, этаноламин, лизин, аргинин, N-этилпиперидин, пиперидин, полиаминные смолы и тому подобное.
Соединения по настоящему изобретению могут быть представлены в форме фармацевтически приемлемых солей. Соединения по настоящему изобретению также могут быть представлены в форме фармацевтически приемлемых сложных эфиров (т.е. метиловых и этиловых эфиров кислот формулы I). Соединения по настоящему изобретению также могут быть сольватированными, например, гидратированными. Сольватация может происходить в ходе процесса получения или может иметь место, например, вследствие гигроскопических свойств первоначально безводного соединения формулы I (гидратация).
Соединения, которые имеют одну и ту же молекулярную формулу, но различаются природой или последовательностью присоединения своих атомов или системой расположения своих атомов в пространстве, называются "изомерами". Изомеры, которые различаются системой расположения своих атомов в пространстве, называются "стереоизомерами". Диастереомеры, которые не являются энантиомерами, представляют собой стереоизомеры с противоположной конфигурацией при одном или более хиральных центрах. Стереоизомеры, несущие один или более асимметрических центров, не совпадающие с зеркальными отображениями друг друга, называются "энантиомерами". В том случае, когда соединение имеет асимметрический центр, например, если атом углерода соединен с четырьмя разными группами, то возможно существование пары энантиомеров. Энантиомер может быть охарактеризован абсолютной конфигурацией его асимметрического центра или центров и описан в соответствии с правилами последовательности Кана, Ингольда и Прелога в R- и S-номенклатуре или охарактеризован способом, которым молекула вращает плоскость поляризации света, и обозначен как правовращающий или левовращающий (т.е. как (+)- или (-)-изомер, соответственно). Хиральное соединение может существовать или в виде отдельного энантиомера, или в виде их смеси. Смесь, содержащая энантиомеры в равной пропорции, называется "рацемической смесью".
Термин "терапевтически эффективное количество" соединения означает количество соединения, которое является эффективным для предотвращения, ослабления или уменьшения интенсивности симптомов заболевания или для удлинения продолжительности жизни подвергаемого лечению субъекта. Определение терапевтически эффективного количества относится к компетенции специалиста в данной области техники. Терапевтически эффективное количество или дозировку соединения по данному изобретению можно варьировать в широких пределах, и можно определять способом, известным в данной области техники. Такая дозировка будет соответствовать индивидуальным требованиям в каждом конкретном случае, включая конкретное(ые) соединение(я), предназначенное(ые) для введения, путь введения, подвергаемое лечению состояние, а также подвергаемого лечению пациента. Как правило, в случае перорального или парентерального введения взрослым людям весом приблизительно 70 кг может быть приемлема суточная дозировка от примерно 0,1 мг до примерно 5000 мг; от 1 мг до примерно 1000 мг или от 1 мг до 100 мг, хотя нижний и верхний пределы могут быть превышены, если на то имеются показания. Суточную дозировку можно вводить в виде разовой дозы или в разделенных дозах либо, в случае парентерального введения, ее можно вводить в виде непрерывной инфузии.
Подразумевается, что термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает в себя любое вещество и все вещества, совместимое(ые) с фармацевтическим введением, включая растворители, диспергирующие среды, вещества покрытий, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотонические и замедляющие всасывание агенты и другие вещества и соединения, совместимые с фармацевтическим введением. За исключением случаев, когда какая-либо традиционная среда или какой-либо агент является несовместимой(ым) с активным соединением, их применение в композициях по изобретению предусмотрено. В данные композиции также могут быть введены дополнительные активные соединения.
Подробно, настоящее изобретение относится к соединениям формулы I:
и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 и R10 независимо представляют собой атом водорода или галогена; и R11 представляет собой атом водорода или группу гидрокси. Если не указано иное, соединения в пределах класса формулы I охватывают все возможные стереоизомеры (т.е. (R)-энантиомеры, (S)-энантиомеры), а также их рацемические и скалемические смеси.
В одном из воплощений R1, R2, R3, R4 и R5 все представляют собой атом водорода. В другом воплощении по меньшей мере один из R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом галогена. В другом воплощении по меньшей мере один из R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом фтора. В другом воплощении R1, R3 и R5 все представляют собой атом водорода, и один из R2 или R4 представляет собой атом фтора, а другой представляет собой атом водорода.
В другом конкретном воплощении R6, R7, R8, R9 и R10 все представляют собой атом водорода. В другом воплощении по меньшей мере один из R6, R7, R8, R9 и R10 представляет собой атом галогена. В другом воплощении по меньшей мере один из R6, R7, R8, R9 и R10 представляет собой атом хлора. В другом воплощении R6, R8 и R10 все представляют собой атом водорода, и один из R7 или R9 представляет собой атом хлора, а другой представляет собой атом водорода.
В одном из воплощений R11 представляет собой атом водорода. В более конкретном воплощении один из R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом галогена (предпочтительно фтора), а другие представляют собой атом водорода; и R6, R7, R8, R9, R10 и R11 представляют собой атом водорода.
В другом воплощении R11 представляет собой гидрокси. В более конкретном воплощении один из R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом галогена (предпочтительно фтора), а другие представляют собой атом водорода; R6, R7, R8, R9 и R10 представляют собой атом водорода, и R11 представляет собой группу гидрокси.
В одном из воплощений настоящее изобретение относится к соединениям формулы IA:
и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 и R10 независимо представляют собой атом водорода или галогена; и R11 представляет собой группу гидрокси.
В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединениям формулы IB:
и их фармацевтически приемлемым солям и сложным эфирам, где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 и R10 независимо представляют собой атом водорода или галогена; и R11 представляет собой группу гидрокси.
В одном из воплощений настоящее изобретение относится к соединению формулы:
В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы:
В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы:
В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы:
В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы:
В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы:
В другом воплощении настоящее изобретение относится к соединению формулы:
Исходные вещества и реагенты, использованные при получении этих соединений, как правило, либо приобретаются у коммерческих поставщиков, таких как Aldrich Chemical Co., либо их получают способами, известными специалистам в данной области техники. Приведенные ниже схемы реакций синтеза всего лишь иллюстрируют некоторые способы, посредством которых можно синтезировать соединения по настоящему изобретению, и могут быть выполнены различные модификации этих схем реакций синтеза, которые будут предложены специалисту в данной области техники. Дополнительное разъяснение можно найти в специальных примерах.
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены любым традиционным способом. Подходящие способы синтеза этих соединений приведены в примерах. Обычно соединения формулы I могут быть получены в соответствии с проиллюстрированными ниже схемами.
Исходный метилдиаминобензоат 2, который может быть приобретен или получен путем восстановления нитросоединения 1 с использованием водорода и палладия на угле, может быть конденсирован с пиридинальдегидом 3 и после этого окислен in situ йодом с получением бензоимидазола 4. 2-Метокси-3-иод-пиридиновую группировку бензоимидазола можно превратить в 3-хлор-пиримидон 5, используя 4 М соляную кислоту в диоксане и нагревание до 100°С в течение нескольких часов. Арилхлоридная группировка соединения 5 может быть замещена 2-фенилэтиламинами в результате проведения реакции нуклеофильного замещения в ароматическом ядре в присутствии основания типа триэтиламина или N-метилморфолина в полярном растворителе типа ацетонитрила или N,N-диметилформамида и при нагревании в течение нескольких часов. Полученное соединение можно подвергнуть реакции деэтерификации с использованием стандартных методов, подобных применению гидроксида лития в тетрагидрофуране и воде и слабого нагревания с получением бензоимидазолкарбоновой кислоты 6. Конечные соединения, подобные соединению 7, могут быть получены в результате конденсации кислоты 6 с бензиламинами в стандартных условиях амидного сочетания, таких как использование N,N-диизопропил-этиламина и O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфата в полярном растворителе типа диметилформамида (DMF).
Примеры
Хотя в данном описании проиллюстрированы и изложены некоторые типичные воплощения, соединения по настоящему изобретению могут быть получены с использованием соответствующих исходных веществ согласно способам, приведенным в общих чертах в данном описании, и/или способами, доступными среднему специалисту в данной области техники.
Пример 1
Синтез 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида
2-(4-Иод-2-метокси-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир
В круглодонной колбе емкостью 250 мл объединяли метил-2,3-диаминобензоат (1,5 г; 9,03 ммоль) с метанолом (25 мл), получая желтый раствор, который перемешивали в атмосфере азота и охлаждали в бане вода/сухой лед. К нему по каплям добавляли 4-иод-2-метоксиникотинальдегид (2,37 г; 9,03 ммоль), растворенный в метаноле (15 мл) и DMF (10 мл). В процессе добавления в реакционную смесь дополнительно добавляли метанол (25,0 мл). Реакционную смесь выдерживали в бане вода/сухой лед в течение 2,5 ч, оставляли на 3 ч нагреваться до комнатной температуры и затем охлаждали в бане вода/сухой лед. В эту смесь по каплям добавляли йод (1,49 г; 5,87 ммоль), растворенный в метаноле (15 мл), и затем реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли этилацетатом (200 мл) и насыщенным Na2S2O3 (200 мл) и выполняли перемешивание. Присутствовало значительное количество нерастворенного вещества, и смесь фильтровали. Полученное твердое вещество промывали этилацетатом и водой. Фильтрат разделяли и полученный водный слой экстрагировали этилацетатом (100 мл) и дихлорметаном (DCM) (3×150 мл). Органические слои промывали насыщенным Na2S2O3 и рассолом, объединяли, сушили над MgSO4 и концентрировали до красного масла/твердого вещества. Нерастворенное твердое вещество из первоначального экстракта промывали DCM (5×100 мл) и фильтрат концентрировали до темно-красного/черного твердого вещества. Жидкое экстрагированное неочищенное вещество и твердое экстрагированное неочищенное вещество растворяли в минимальном объеме DCM, объединяли и очищали флэш-хроматографией (силикагель, 120 г; от 0% до 60% этилацетата в гексанах), получая 2-(4-иод-2-метокси-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде пурпурного твердого вещества (0,73 г). LC/MS (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия) рассчит. для C15H12IN3O3 (m/e) 409,0; обнаружено 410,0 (М+Н); 1Н ЯМР (ядерный магнитный резонанс) (DMSO-d6 (диметилсульфоксид)) δ: 12.68 (s, 1Н), 8.05 (d, J=5,5 Гц, 1Н), 8.01 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.88-7.95 (m, 1Н), 7.67 (d, J=5,3 Гц, 1Н), 7.38 (t, J=7,9 Гц, 1Н), 3.96 (s, 3Н), 3.82 (s, 3Н). Первоначальное нерастворенное твердое вещество, оставшееся после экстрагирования DCM, впоследствии экстрагировали кипящим метанолом (5×20 мл). Метанольный фильтрат концентрировали и сушили, получая дополнительный продукт (с чистотой 83% по данным LC/MS) в форме натриевой соли (предположительно) и в виде темно-пурпурного твердого вещества (0,57 г). После экстракции остальной части первоначального нерастворенного твердого вещества DCM и метанолом получали дополнительный продукт (с чистотой 90% по данным LC/MS) в форме натриевой соли (предположительно) в виде пурпурного твердого вещества (0,88 г). Объединенный выход составлял 59%.
2-(4-Хлор-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир
Сначала проводили в параллели две реакции и перед нагреванием смеси объединяли. (В круглодонной колбе емкостью 200 мл объединяли 2-(4-иод-2-метокси-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир (твердое вещество, выделенное в результате жидкостной экстракции) (0,88 г; 2,15 ммоль) с 1,4-диоксаном (3 мл), получая черную суспензию, порциями добавляли 4 М HCl в 1,4-диоксане (14,5 мл; 58,1 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. В круглодонной колбе емкостью 200 мл объединяли метил-2-(4-иод-2-метокси-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир (выделенный посредством флэш-хроматографии) (0,73 г; 1,78 ммоль) с 1,4-диоксаном (2 мл), получая черную суспензию, добавляли 4 М HCl в 1,4-диоксане (12 мл; 48,2 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч). Отдельные реакционные смеси объединяли с добавлением 1,4-диоксана (для споласкивания) и 4 М HCl в 1,4-диоксане (20 мл). Реакционную смесь нагревали в масляной бане при 100°С в течение 3 ч и затем оставляли охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали, твердое вещество промывали 1,4-диоксаном, водой, 1,4-диоксаном, гексанами и сушили с использованием бытового вакуумного прибора (house vacuum), получая 2-(4-хлор-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир (0,91 г; выход 76,2%) в виде черного твердого вещества. LC/MS рассчит. для C14H10CIN3O3 (m/e) 303,0; обнаружено 304,1 (М+Н); 1Н ЯМР (DMSO-d6) δ: 8.05-8.16 (m, 2Н), 8.01 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 7.66-7.76 (m, 1Н), 7.50 (t, J=7,9 Гц, 1Н), 3.92-4.04 (m, 3Н).
2-[4-((S)-2-Гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир
Во флаконе емкостью 40 мл объединяли 2-(4-хлор-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир (0,91 г; 3,00 ммоль), (S)-2-амино-1-фенилэтанол (822 мг; 5,99 ммоль) и N-метилморфолин (909 мг; 988 мкл; 8,99 ммоль) с DMF (20 мл), получая черную суспензию. Флакон герметично закрывали, нагревали в сухом термостате при 85°С в течение 6,5 ч и оставляли охлаждаться до комнатной температуры в течение выходных. Реакционную смесь разбавляли водой и полученный осадок промывали водой и гексанами, получая 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир (0,87 г; выход 71,8%) в виде светло-пурпурного твердого вещества. LC/MS рассчит. для C22H20N4O4 (m/е) 404,0; обнаружено 405,2 (М+Н); 1Н ЯМР (DMSO-d6) δ: 13.53 (s, 1Н), 11.26 (d, J=5,8 Гц, 1Н), 10.85 (t, J=5,1 Гц, 1Н), 7.85 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.76-7.82 (m, 1Н), 7.55 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 7.34-7.42 (m, 3Н), 7.26-7.34 (m, 2Н), 6.22 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 5.80 (d, J=4,5 Гц, 1Н), 4.85-5.00 (m, 1Н), 3.98 (s, 3Н), 3.64-3.77 (m, 1Н), 3.53-3.63 (m, 1Н).
2-[4-((S)-2-Гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновая кислота
В круглодонной колбе емкостью 200 мл объединяли 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир (0,87 г; 2,15 ммоль) и LiOH (258 мг; 10,8 ммоль) с тетрагидрофураном (THF) (20 мл) и водой (5 мл), получая пурпурную суспензию. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. На следующий день реакционную смесь нагревали в сухом термостате при 50°С в течение 3,5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли водой, концентрировали, разбавляли большим количеством воды, подкисляли 1 М HCl и фильтровали. Полученное твердое вещество промывали водой и гексанами и сушили сушили с использованием бытового вакуумного прибора, получая 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновую кислоту (0,86 г; выход 102%) в виде пурпурного твердого вещества. LC/MS рассчит.для C21H18N4O4 (m/e) 390,0; обнаружено 391,2 (М+Н); 1Н ЯМР; (DMSO-d6) δ: 13.35 (s, 1Н), 11.19 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 10.97 (t, J=4,9 Гц, 1Н), 7.75 (dd, J=7.7, 3,9 Гц, 2Н), 7.56 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 7.22-7.44 (m, 5Н), 6.20 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 5.80 (br. s., 1Н), 4.92 (t, J=5,5 Гц, 1Н), 3.54-3.74 (m, 3Н).
2-[4-((S)-2-Гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламид
В круглодонной колбе 100 мл объединяли 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновую кислоту (0,84 г; 2,15 ммоль), 3-фтор-бензиламин (296 мг; 270 мкл; 2,37 ммоль) и диизопропилэтиламин (DIEA) (612 мг; 827 мкл; 4,73 ммоль) с DMF (10 мл), получая черный раствор, и к нему добавляли гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (HATU) (982 мг; 2,58 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. На следующий день реакционную смесь по каплям добавляли в воду, полученный осадок отфильтровывали и промывали водой, этиловым эфиром и гексанами. Пурпурное твердое вещество полностью растворялось в минимальном объеме кипящего этанола и полученное твердое вещество, которое образовалось после охлаждения, фильтровали и промывали этанолом и гексанами, получая 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламид в виде светло-пурпурного твердого вещества. LC/MS рассчит. для C28H24FN5O3 (m/е) 497,0; обнаружено 497,9 (М+Н); 1Н ЯМР (DMSO-d6-TFA (трифторуксусная кислота)) δ: 11.25 (br. s., 1Н), 10.77 (br. s., 1Н), 9.32 (t, J=5,8 Гц, 1Н), 7.71-7.97 (m, 2Н), 7.14-7.63 (m, 10Н), 7.03-7.13 (m, 1Н), 6.21 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 4.84 (br. s., 1Н), 4.68 (br. s., 2Н), 3.65 (d, J=12,5 Гц, 1H), 3.46 (d, J=7,0 Гц, 1H).
Пример 2
Синтез 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты бензиламида
2-[4-((S)-2-Гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты бензиламид синтезировали из 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты, бензиламина, DIEA, HATU и DMF с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида, получая 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты бензиламид. LC/MS рассчит.для C28H25N5O3 (m/e) 479.0; обнаружено 480 (М+Н). 1Н ЯМР (таутомеры 1:2; DMSO-d6) δ: 13.38-13.52 (m, 1Н), 11.14-11.38 (m, 1Н), 10.33-11.02 (m, 1Н), 9.18-9.43 (m, 1Н), 7.69-7.99 (m, 2Н), 7.15-7.61 (m, 12Н), 6.12-6.30 (m, 1Н), 5.74-5.99 (m, 1Н), 4.52-4.96 (m, 3Н), 3.49-3.30 (m, 2Н).
Пример 3
Синтез 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1.2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 4-фтор-бензиламида
2-[4-((S)-2-Гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 4-фтор-бензиламид синтезировали из 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты, бензиламина, DIEA, HATU и DMF с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида, получая 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 4-фтор-бензиламид. LC/MS рассчит. для C28H24FN5O3 (m/е) 497,0; обнаружено 498 (М+Н). 1Н ЯМР (DMSO-d6) δ: 13.35-13.53 (m, 1Н), 11.13-11.38 (m, 1Н), 10.35-11.03 (m, 1Н), 9.19-9.42 (m, 1Н), 7.68-7.97 (m, 2Н), 7.24-7.58 (m, 9Н), 7.08-7.22 (m, 2Н), 6.13-6.30 (m, 1Н), 5.74-6.02 (m, 1Н), 4.49-4.98 (m, 3Н), 3.49-3.29 (m, 2Н).
Пример 4
Синтез 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты бензиламида
2-{4-[2-(3-Хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир синтезировали из 2-(4-хлор-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метилового эфира, 2-(3-хлор-фенил)-этиламина, триэтиламина и ацетонитрила (ACN) с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метилового эфира, получая 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метиловый эфир.
2-{4-[2-(3-Хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновую кислоту синтезировали из 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты метилового эфира, LiOH, THF и воды с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты, получая 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновую кислоту.
2-{4-[2-(3-Хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты бензиламид синтезировали из 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты, бензиламина, DIEA, HATU и DMF с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида, получая 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты бензиламид. LC/MS рассчит. для C28H24CIN5O2 (m/е) 497,0; обнаружено 498 (М+Н).
Пример 5
2-(4-[2-(3-Хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 4-фтор-бензиламид
2-{4-[2-(3-Хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 4-фтор-бензиламид синтезировали из 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты, бензиламина, DIEA, HATU и DMF с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида, получая 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 4-фтор-бензиламид. LC/MS рассчит. для C28H23CIFN5O2 (m/е) 515,0; обнаружено 516 (М+Н). 1Н ЯМР (таутомеры, DMSO-d6) δ: 13.30-13.51 (m, 1Н), 11.11-11.49 (m, 1Н), 9.98-10.95 (m, 1Н), 9.06-9.36 (m, 1Н), 7.68-8.00 (m, 2Н), 6.93-7.65 (m, 11Н), 6.22 (d, J=7,3 Гц, 1H), 4.47-4.74 (m, 2Н), 3.59-3.85 (m, 2Н), 3.05 (t, J=6,9 Гц, 2H).
Пример 6
Синтез 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида
2-{4-[2-(3-Хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламид синтезировали из 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты, бензиламина, DIEA, HATU и DMF с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида, получая 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-3-карбоновой кислоты 4-фтор-бензиламид. LC/MS рассчит. для C28H23CIFN5O2 (m/е) 515,0; обнаружено 516 (М+Н). 1Н ЯМР (таутомеры, DMSO-d6) δ: 13.42 (s, 1Н), 11.15-11.46 (m, 1Н), 10.00-10.91 (m, 1Н), 9.08-9.41 (m, 1Н), 7.69-8.00 (m, 2Н), 6.98-7.59 (m, 11Н), 6.22 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 4.49-4.78 (m, 2Н), 3.63-3.82 (m, 2Н), 3.05 (t, J=6,8 Гц, 2Н).
Пример 7
Синтез 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино1-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил)-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 2-фтор-бензиламида
2-{4-[2-(3-Хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 2-фтор-бензиламид синтезировали из 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты, бензиламина, DIEA, HATU и DMF с использованием методики, аналогичной получению 2-[4-((S)-2-гидрокси-2-фенил-этиламино)-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил]-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 3-фтор-бензиламида, получая 2-{4-[2-(3-хлор-фенил)-этиламино]-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил}-3Н-бензоимидазол-4-карбоновой кислоты 2-фтор-бензиламид. LC/MS рассчит. для C28H23CIFN5O2 (m/е) 515,0; обнаружено 516 (М+Н). 1Н ЯМР (таутомеры, DMSO-d6) δ: 13.33-13.49 (m, 1Н), 11.14-11.45 (m, 1Н), 10.05-10.92 (m, 1Н), 9.08-9.32 (m, 1Н), 7.70-7.98 (m, 2Н), 7.02-7.61 (m, 11Н), 6.16-6.32 (m, 1Н), 4.53-4.80 (m, 2Н), 3.43-3.84 (m, 2Н), 2.75-3.12 (m, 2Н).
Соединения формулы I обладают чрезвычайно полезными свойствами. Обнаружено, что указанные соединения полезны при дифференцировке стволовых клеток в более зрелые или похожие на клетки взрослых гепатоциты, применяемые для проведения более точного тестирования и исследования фармацевтических продуктов. Активность соединений по настоящему изобретению при дифференцировке стволовых клеток в более зрелые или похожие на клетки взрослых гепатоциты демонстрируется в следующих далее анализах. Помимо этого также описано влияние соединений по настоящему изобретению на гены хозяина, которое приводило к возникновению у клеток восприимчивости к HBV.
Тестирование in vitro с применением индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека
Происходящие из iPSC гепатоциты человека (iCell® гепатоциты) подвергали воздействию соединений формулы I с целью идентификации условий, способствующих большей функциональности, которая лучше моделирует орган взрослого человека. Для изучения экспрессии 32 генов, обеспечивающих спектр функций гепатоцитов, которые либо были слабо выражены, либо демонстрировали незрелый фенотип в происходящих из hiPSC гепатоцитах по сравнению с первичными гепатоцитами у взрослого человека, использовали высокопроизводительную микрофлюидную количественную полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией (колич. ОТ-ПЦР). При первичном скрининге идентифицировали многочисленные соединения, действие которых приводило к значительному усилению экспрессии ряда ассоциированных с созреванием генов. Изменения генной экспрессии проверяли и подтверждали при вторичном скрининге и ставили вопрос о функциональных последствиях.
Клетки и условия культивирования
Свежеполученные iCell® гепатоциты (от 20 до 23 суток) рассевали и культивировали в соответствии с руководством для пользователей по отделению и рассеву iCell гепатоцитов в количестве 60 тыс.клеток на одну лунку в 96-луночных покрытых коллагеном IV типа планшетах BIO (№ по каталогу BD 354429). Через 4 часа после рассева среду С удаляли и заменяли на верхний слой матригеля (№ по каталогу 354227), разведенного 1:50 в среде D. Через 24 часа после рассева авторы изобретения проводили обработку клеток 5 мкМ соединения в среде D и 1%-ным DMSO. На 3-й сутки среды удаляли и еще раз проводили такую же обработку 5 мкМ. На 4-е сутки собирали РНК.
Определение профиля экспрессии генов
РНК образцов выделяли, используя набор TaqMan® Gene Expression Cells-to-CT™ (Life Technologies; № по каталогу 4387299), замораживали при -80°C в различные моменты времени после обработки соединениями. Все образцы анализировали посредством микрофлюидной количественной ПЦР с использованием чипов Biomark Fluidigm 96.96 (BMK-М-96.96) и зондов ABI Taqman. Нормирование и подсчет результатов измерений экспрессии на основе выбранной модели осуществляли, используя программное обеспечение Biogazelle qBASE и Genorm. Все данные, касающиеся образцов, представляют собой средние значения по результатам трех измерений, и для получения относительной величины экспрессии генов их нормировали к 5 генам домашнего хозяйства. Величины экспрессии рассчитывают по кратности изменения относительно разбавителя в качестве контроля. См. Фиг. 1 и 2.
Самые лучшие соединения выбирали на основании их способности изменять экспрессию генов способом, предопределяющим усиление зрелости клеток, например, увеличение количества маркеров, специфичных для взрослых, или уменьшение количества маркеров, специфичных для плода. Что касается вторичного подтверждающего скрининга, то лучшие соединения отбирали на основании зависимости доза-ответ в отношении более широкой панели генов. Авторы изобретения обнаружили, что соединение из примера 1 вызывало общую усиленную экспрессию генов, обеспечивающих функцию гепатоцитов, при использовании многократных доз (Фиг. 1). Воздействие соединения из примера 1 и шести других структурных аналогов (примеры 2-7) приводит к аналогичному фенотипическому изменению iCell гепатоцитов, обусловленному экспрессией генов из панели ассоциированных с созреванием генов (Фиг. 2). Результаты применения соединения из примера 1 демонстрировали воспроизводимые изменения экспрессии генов для более чем 5 независимых партий iCell гепатоцитов, и будут исследоваться далее с целью идентификации механизмов действия и функциональных последствий. После обработки соединением из примера 1 iCell гепатоциты приобретают способность к инфицированию вирусом HBV многочисленных генотипов и генерируют устойчивое количество инфицированных гепатоцитов по данным иммуногистохимического (IHC; immunohistochemistry) и иммуноферментного анализа (ELISA; enzyme-linked immunosorbent assay).
Анализ с применением микрочипов
Обработка iCell гепатоцитов соединением из примера 1 приводит к активации и подавлению многочисленных генов, в том числе к зависящему от времени воздействию на экспрессию интерферон-стимулированных генов (ISG). См. Фиг. 7а, 7b, 7с и Таблицу 1.
Очистка HBV из сыворотки крови
Двести микролитров HBV-содержащей сыворотки крови наносили на градиент Optiprep (10-50%) в пробирках для центрифуги SW41. Образцы центрифугировали при 100000 × g в течение 2 ч при 4°С. Сверху отбирали фракции по пятьсот микролитров; каждую фракцию анализировали в отношении HBsAg (ELISA) и ДНК HBV (TaqMan ПЦР). Фракции, содержащие вирус, хранили при -80°С. См. Фиг. 6b.
Инфицирование iCell гепатоцитов вирусом HBV
Свежеполученные iCell® гепатоциты (от 20 до 23 суток) рассевали и культивировали в соответствии с руководством для пользователей по отделению и рассеву iCell гепатоцитов в количестве 60 тыс.клеток на одну лунку в 96-луночных покрытых коллагеном IV типа планшетах BIO (№ по каталогу BD 354429). Через 4 часа после рассева среду С удаляли и заменяли на верхний слой матригеля (№ по каталогу 354227), разведенного 1:50 в среде D. Через двадцать четыре часа после рассева проводили обработку клеток 1 мкм соединения в среде D, содержащей 1% DMSO. Спустя 2 суток дополняли среду, содержащую свежую порцию соединения. На 4-е сутки после рассева клетки инфицировали вирусом HBV с множественностью заражения (MOI; multiplicity of infection) 10. Кратко, очищенный вирус разбавляли в среде D, содержащей соединение из примера 1, и инкубировали с клетками в течение 4-6 ч или в течение ночи. После удаления вирусного инокулята добавляли свежую порцию среды, содержащей соединение из примера 1 в концентрации 1 мкМ, и клетки инкубировали в течение 14 суток с заменой среды каждые 2 суток. Культуральные среды анализировали на предмет присутствия секретируемых вирусных антигенов (HBsAg, HBeAg (антиген е гепатита В)) и ДНК HBV. См. Фиг. 3, 4, 5, 6а.
В своей совокупности эти данные показывают, что использование соединений формулы I в качестве эндогенных сигналов обеспечивает быстрый, эффективный, негенетический и малозатратный способ модулирования функциональности iCell гепатоцитов. Благодаря получению iCell гепатоцитов, инфицированных HBV с использованием соединений формулы I, предложен способ для применения в фундаментальной вирусологии и разработке лекарственных средств. Скрининги библиотек низкомолекулярных соединений в отношении функционального улучшения клеток, происходящих из стволовых клеток, могут привести к созданию анализов in vitro нового поколения направленных на разработку лекарственных средств.
Claims (40)
1. Соединение формулы I:
или его стереоизомер; где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 и R10 независимо представляют собой атом водорода или галогена и R11 представляет собой атом водорода или группу гидрокси.
2. Соединение по п. 1, где R1, R2, R3, R4 и R5 все представляют собой атом водорода.
3. Соединение по п. 1, где по меньшей мере один из R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом галогена.
4. Соединение по п. 1, где по меньшей мере один из R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом фтора.
5. Соединение по п. 1, где R1, R3 и R5 все представляют собой атом водорода и один из R2 или R4 представляет собой атом фтора, а другой представляет собой атом водорода.
6. Соединение по п. 1, где R6, R7, R8, R9 и R10 все представляют собой атом водорода.
7. Соединение по п. 1, где по меньшей мере один из R6, R7, R8, R9 и R10 представляет собой атом галогена.
8. Соединение по п. 1, где по меньшей мере один из R6, R7, R8, R9 и R10 представляет собой атом хлора.
9. Соединение по п. 1, где R6, R8 и R10 все представляют собой атом водорода и один из R7 или R9 представляет собой атом хлора, а другой представляет собой атом водорода.
10. Соединение по п. 1, где R11 представляет собой атом водорода.
11. Соединение по п. 1, где один из R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом фтора, а другие представляют собой атом водорода; R6, R7, R8, R9, R10 и R11 представляют собой атом водорода.
12. Соединение по п. 1, где R11 представляет собой гидрокси.
13. Соединение по п. 1, где R1, R2, R3, R4 или R5 представляет собой атом фтора, а другие представляют собой атом водорода; R6, R7, R8, R9 и R10 представляют собой атом водорода и R11 представляет собой гидрокси.
14. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы:
15. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы:
16. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы:
17. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы:
18. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы:
19. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы:
20. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы:
21. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы IA:
где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 и R10 независимо представляют собой атом водорода или галогена и R11 представляет собой атом водорода или группу гидрокси.
22. Соединение по п. 1, представляющее собой соединение формулы IB:
где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 и R10 независимо представляют собой атом водорода или галогена и R11 представляет собой атом водорода или группу гидрокси.
23. Способ дифференцировки стволовых клеток в гепатоциты, включающий введение в указанные стволовые клетки соединения по п. 1.
24. Способ по п.23, где гепатоциты инфицированы вирусом гепатита В.
25. Способ по п.24, где инфицированные гепатоциты применяют для скрининга соединений для лечения инфекции вируса гепатита В.
26. Способ по п.23, где интерферон-стимулированные гены подавлены в дифференцированных гепатоцитах.
27. Способ по п.26, где указанные гепатоциты инфицированы вирусом гепатита В.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201361792019P | 2013-03-15 | 2013-03-15 | |
| US61/792,019 | 2013-03-15 | ||
| US201361811155P | 2013-05-22 | 2013-05-22 | |
| US61/811,155 | 2013-05-22 | ||
| PCT/EP2014/054763 WO2014140058A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-03-12 | Compounds for improved stem cell differentiation into hepatocytes |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015140469A RU2015140469A (ru) | 2017-04-21 |
| RU2662954C2 true RU2662954C2 (ru) | 2018-07-31 |
Family
ID=50272618
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015140469A RU2662954C2 (ru) | 2013-03-15 | 2014-03-12 | Соединения для улучшенной дифференцировки стволовых клеток в гепатоциты |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9334480B2 (ru) |
| EP (1) | EP2970178B1 (ru) |
| JP (1) | JP6129360B2 (ru) |
| KR (1) | KR101767802B1 (ru) |
| CN (1) | CN105051023B (ru) |
| BR (1) | BR112015023185A2 (ru) |
| CA (1) | CA2900690A1 (ru) |
| MX (1) | MX346497B (ru) |
| RU (1) | RU2662954C2 (ru) |
| WO (1) | WO2014140058A1 (ru) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20230248723A1 (en) * | 2017-12-04 | 2023-08-10 | Hoffmann-La Roche Inc. | Pyrrolo[2,3-b]pyrazine compounds as cccdna inhibitors for the treatment of hepatitis b virus (hbv) infection |
| BR112022018092A2 (pt) | 2020-03-11 | 2022-11-22 | Bit Bio Ltd | Método de gerar células hepáticas |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA016633B1 (ru) * | 2006-05-23 | 2012-06-29 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Инновационная Фармацевтика" | Замещенные индолы, способ их получения и применения |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7498171B2 (en) * | 2002-04-12 | 2009-03-03 | Anthrogenesis Corporation | Modulation of stem and progenitor cell differentiation, assays, and uses thereof |
| JPWO2005024004A1 (ja) * | 2003-08-27 | 2006-11-02 | 株式会社レノメディクス研究所 | 間葉系幹細胞の肝細胞への分化方法及び人工ヒト肝臓細胞 |
| EP2698365B8 (en) * | 2011-04-15 | 2018-02-14 | National University Corporation Tottori University | Synthesis and analysis of novel compound capable of inducing differentiation of human mesenchymal stem cell into hepatocyte |
-
2014
- 2014-03-12 EP EP14709646.5A patent/EP2970178B1/en not_active Not-in-force
- 2014-03-12 MX MX2015011505A patent/MX346497B/es active IP Right Grant
- 2014-03-12 CA CA2900690A patent/CA2900690A1/en not_active Abandoned
- 2014-03-12 RU RU2015140469A patent/RU2662954C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-03-12 JP JP2015562101A patent/JP6129360B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-03-12 KR KR1020157025369A patent/KR101767802B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2014-03-12 CN CN201480012330.0A patent/CN105051023B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2014-03-12 WO PCT/EP2014/054763 patent/WO2014140058A1/en not_active Ceased
- 2014-03-12 BR BR112015023185A patent/BR112015023185A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2014-03-12 US US14/205,893 patent/US9334480B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2015
- 2015-02-03 US US14/612,893 patent/US9181218B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA016633B1 (ru) * | 2006-05-23 | 2012-06-29 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Инновационная Фармацевтика" | Замещенные индолы, способ их получения и применения |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Ying Li и др. "Inhibition of hepatitis B virus gene expression and replication by helioxanthin and its derivative", Antiviral chemistry & chemotherapy, 16, стр.193-201. * |
| Yun-Fei Li и др. "Identification of 1-isopropylsulfonyl-2-amine benzimidazoles as a new class of inhibitors of hepatitis B virus", European Journal of Medicicnal Chemistry, 42(11-12), 2007, стр.1358-1364. * |
| Yun-Fei Li и др. "Identification of 1-isopropylsulfonyl-2-amine benzimidazoles as a new class of inhibitors of hepatitis B virus", European Journal of Medicicnal Chemistry, 42(11-12), 2007, стр.1358-1364. Ying Li и др. "Inhibition of hepatitis B virus gene expression and replication by helioxanthin and its derivative", Antiviral chemistry & chemotherapy, 16, стр.193-201. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2015011505A (es) | 2016-01-22 |
| US9181218B2 (en) | 2015-11-10 |
| HK1217199A1 (zh) | 2016-12-30 |
| EP2970178B1 (en) | 2017-06-14 |
| MX346497B (es) | 2017-03-22 |
| CN105051023B (zh) | 2017-08-22 |
| KR101767802B1 (ko) | 2017-08-11 |
| US20150197726A1 (en) | 2015-07-16 |
| WO2014140058A1 (en) | 2014-09-18 |
| CN105051023A (zh) | 2015-11-11 |
| JP6129360B2 (ja) | 2017-05-17 |
| JP2016511276A (ja) | 2016-04-14 |
| BR112015023185A2 (pt) | 2017-07-18 |
| US20150158840A1 (en) | 2015-06-11 |
| CA2900690A1 (en) | 2014-09-18 |
| EP2970178A1 (en) | 2016-01-20 |
| US9334480B2 (en) | 2016-05-10 |
| RU2015140469A (ru) | 2017-04-21 |
| KR20150119342A (ko) | 2015-10-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN116370479B (zh) | 化合物atv014在制备用于治疗新冠病毒感染的产品中的用途 | |
| JP2014159492A (ja) | Ｉｄｏ阻害剤 | |
| Xu et al. | Synthesis and anti-hepatitis B virus activities of Matijing-Su derivatives | |
| WO2012162912A1 (zh) | 苯并噻嗪硫酮衍生物及其制备方法和用途 | |
| WO2017219915A1 (zh) | 一种腺嘌呤衍生物的膦酸酯前药及其在医药上的应用 | |
| JP7098212B2 (ja) | Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染の処置のためのｃｃｃＤＮＡ阻害剤としてのピロロ［２，３－ｂ］ピラジン化合物 | |
| RU2662954C2 (ru) | Соединения для улучшенной дифференцировки стволовых клеток в гепатоциты | |
| CN100494167C (zh) | 抗乙肝病毒的叔胺氧化物及制备方法和制备药物的应用 | |
| CN118176202B (zh) | 一种含氰基取代的多肽类化合物的晶型及其制备方法 | |
| CN108129366B (zh) | 抗病毒化合物、制备方法及其用途 | |
| CN113620903A (zh) | 一种4-(苯并噻唑-2-基)-n-取代苯胺化合物及其制备方法和应用 | |
| CN117730074A (zh) | 作为mpro蛋白酶和sars-cov-2复制的抑制剂的利尿酸衍生物 | |
| CN104774159B (zh) | 一种酰肼类化合物及其在制备抗手足口病药物中的应用 | |
| CN106632338B (zh) | 一种9-取代-n-（2-氯苄基）嘌呤-6-胺类衍生物及其制备方法和应用 | |
| HK1217199B (en) | Compounds for improved stem cell differentiation into hepatocytes | |
| WO2020103924A1 (zh) | 一种乙肝表面抗原抑制剂的晶型 | |
| CN113264917B (zh) | 一种抗乙肝病毒化合物及其制备方法和应用 | |
| US20230132370A9 (en) | Crystal forms of thiazole compound and application thereof | |
| CN115197164B (zh) | 新型噻唑类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN115141206B (zh) | 一种ɑ-硫辛酸石蒜碱偶联物及其制备方法和应用 | |
| JP7656784B2 (ja) | 新規化合物及び抗コロナウイルス剤 | |
| US11807647B2 (en) | Crystal form of hepatitis B surface antigen inhibitor and application thereof | |
| CN111205287B (zh) | 一种吡啶并[2,3-d]嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其制备方法和应用 | |
| CN114605417A (zh) | 双酰胺吡啶类化合物，其药物组合物、制备方法和应用 | |
| CN108290904A (zh) | 氘修饰的elbasvir 衍生物、含有该化合物的药物组合物及其用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200313 |