RU2653388C1 - Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/НЬЮ ЙОРК/15/5364 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей - Google Patents
Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/НЬЮ ЙОРК/15/5364 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2653388C1 RU2653388C1 RU2017104678A RU2017104678A RU2653388C1 RU 2653388 C1 RU2653388 C1 RU 2653388C1 RU 2017104678 A RU2017104678 A RU 2017104678A RU 2017104678 A RU2017104678 A RU 2017104678A RU 2653388 C1 RU2653388 C1 RU 2653388C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pdm09
- new york
- influenza
- virus
- strain
- Prior art date
Links
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 title claims abstract description 11
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title abstract description 45
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 37
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 claims description 10
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 6
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 claims description 5
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 abstract description 21
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 abstract description 21
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 abstract description 21
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 abstract description 21
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 abstract description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 17
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 abstract description 10
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 abstract description 10
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 abstract description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 abstract description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract 1
- 210000003837 chick embryo Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 abstract 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 abstract 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 8
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 7
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 7
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 5
- 208000037801 influenza A (H1N1) Diseases 0.000 description 5
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 5
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 1
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 1
- 229940124873 Influenza virus vaccine Drugs 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000712464 Orthomyxoviridae Species 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000003067 hemagglutinative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012070 whole genome sequencing analysis Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицинской вирусологии и касается штамма вируса гриппа. Вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 - реассортант, полученный путем скрещивания «дикого» вируса А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09 с холодоадаптированным температурочувствительным вирусом А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) - донором аттенуации, безвредным для людей. Штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32°C, характеризуется температурочувствительностью и холодоадаптированностью и безвредностью для лабораторных животных. Реассортант унаследовал гены, кодирующие поверхностные антигены вируса гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA), от эпидемического родительского вируса и остальные шесть генов, кодирующих внутренние негликозилированные белки, от донора аттенуации. Представленое решение может быть использовано в практическом здравоохранении для профилактики заболеваемости гриппом среди взрослых и детей. 5 табл.
Description
Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики заболеваемости гриппом среди взрослых и детей с помощью живой гриппозной интраназальной вакцины из штамма вируса гриппа А, семейства Orthomyxoviridae, рода Influenzavirus А A/17/Нью Иорк/15/5364 (H1N1)pdm09.
В апреле 2009 года Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) объявила о появлении в циркуляции среди людей нового вируса гриппа A(H1N1)pdm. Новый вирус А/Калифорния/07/2009 (H1N1)pdm имеет генетическое родство по определенным генам с вирусами, вызывающими грипп свиней, птиц и человека, и никогда ранее не циркулировал среди людей. Вирус с легкостью передавался от человека к человеку и был более контагиозен, чем сезонные штаммы. ВОЗ рекомендовал использовать этот вирус как прототип для подготовки пандемической противогриппозной вакцины [World Health Organization. Characteristics of the emergent influenza A(H1N1) viruses and recommendations for vaccine development http://www.who.int/influenza/vaccines/virus/recommendations/2017_south/en/].
Позднее было обнаружено, что гемагглютинин вируса гриппа А/Калифорния/07/2009 (H1N1)pdm содержит ряд аминокислотных позиций, снижающих его стабильность, а также способность к размножению в развивающихся куриных эмбрионах. В процессе циркуляции природная популяция вирусов приобрела стабилизирующие мутации, в связи с чем H1N1pdm штаммы гриппа более поздних лет выделения более стабильны. Одиночная аминокислотная замена Glu-47-Lys в субьединице НА2 гемагглютинина, расположенная в области ножки, повышает стабильность тримерной молекулы гемагглютинина, влияет на эффективность проникновения вирусной частицы в клетку и, как следствие, инфекционность А/Калифорния/07/2009-подобных вирусов [Cotter CR, Jin Н, Chen Z. A single amino acid in the stalk region of the H1N1pdm influenza virus HA protein affects viral fusion, stability and infectivity. PLoS Pathol. 2014. Vol. 10 (1). P.el003831; Yang H, Chang JC, Guo Z et al. Structural stability of influenza A(H1N1)pdm09 virus hemagglutinins. J. Virol. 2014. Vol. 88 (9). P. 4828-4838].
В связи с вышеизложенным в качестве А/Калифорния/07/2009-подобного вируса был выбран штамм А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1)pdm09, гемагглютинин и нейраминидаза которого генетически и антигенно сходны с другими H1N1pdm-подобными вирусами, циркулирующими в настоящее время. Гемагглютинин данного штамма содержит стабилизирующую аминокислотную замену Glu-47-Lys в субъединице НА2, отсутствующую у А/Калифорния/07/2009 эталонного вируса [Cotter CR, Jin Н, Chen Z. A single amino acid in the stalk region of the H1N1pdm influenza virus HA protein affects viral fusion, stabilityand infectivity. PLoS Pathol. 2014. Vol. 10 (1). P.e1003831; Yang H, Chang JC, Guo Z et al. Structural stability of influenza A(H1N1)pdm09 virus hemagglutinins. J. Virol. 2014. Vol. 88 (9). Р. 4828-4838]. Также гемагглютинин штамма А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1)pdm09 содержит одиночную замену Asp-127-Glu в субъединице НА1 гемагглютинина, позволяющую повысить показатели репликации в развивающихся куриных эмбрионах без изменения антигенных свойств штамма, что является дополнительным преимуществом при производстве живой гриппозной вакцины [Wang, W., Lu, J., Cotter, С.R., Wen, К., Jin, H., & Chen, Z. (2013). Identification of critical residues in the hemagglutinin and neuraminidase of influenza virus H1N1pdm for vaccine virus replication in embryonated chicken eggs. Journal of virology, 87 (8), 4642-4649].
В результате появления в циркуляции нового высокостабильного эпидемического штамма вируса гриппа, А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1)pdm09, известный вакцинный штамм А/17/Калифорния/2009/38 (H1N1) - прототип [Ларионова Н.В., Киселева И.В., Александрова Г.И., Руденко Л.Г. Штамм вируса гриппа А/17/Калифорния/2009/38 (H1N1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей Патент РФ №2413765 от 16.09.09. опубл. БИ 2011, №7] - утратил свою актуальность.
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение антигенно актуального А/Калифорния/07/2009 (Н1N1)pdm-подобного вакцинного штамма живой гриппозной вакцины для взрослых и для детей на основе холодоадаптированного донора аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) и нового эпидемического вируса А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1)pdm09, обладающего стабильностью гемагглютинина и высокой репродуктивной активностью.
Применяемые в настоящее время штаммы для живых гриппозных вакцин получают методом генетической реассортации эпидемически актуальных вирусов с холодоадаптированными штаммами - донорами аттенуации [Александрова Г.И. Применение метода генетической рекомбинации для получения вакцинных штаммов вируса гриппа. Вопросы вирусологии. 1977. №4. С. 387-395].
Донор аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) - холодоадаптированный (са) и температурочувствительный (ts) штамм вируса гриппа, разрешенный для получения безвредных живых интраназальных вакцин для взрослых и детей [Александрова Г.И. Новое в эпидемиологии и профилактике вирусных инфекций. Л., 1968. С. 66-83].
Цель реассортации - получить штамм с вакцинной формулой генома 6:2. Гены, кодирующие поверхностные белки вируса гриппа гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA), наследуются от антигенно актуального циркулирующего эпидемического штамма, а шесть генов, кодирующих внутренние и неструктурные белки (РВ2, РВ1, PA, NP, М, NS), от безвредного донора аттенуации. На основе донора аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) был создан вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 - прототип.
Получение вакцинного штамма
Вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1)pdm09 получен методом генетической реассортации эпидемического вируса А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09c донором аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) путем одновременного инфицирования в развивающихся куриных эмбрионах (РКЭ) смесью родительских вирусов в эквивалентных инфекционных дозах, с последующей селекцией клонов с заданными свойствами при пониженной до 26°C температуре инкубации в присутствии антисыворотки к донору аттенуации. Клоны дополнительно очищены тремя последовательными клонированиями методом предельных разведений в присутствии антисыворотки к донору аттенуации при пониженной (26°C) и оптимальной (32°C) температурах инкубации. Чистый клон проверен по фенотипическим характеристикам (ts, са-фенотип) и по формуле генома на соответствие требованиям, предъявляемым к реассортантному вакцинному штамму.
Антигенная характеристика вакцинного штамма
Изучение антигенных свойств вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1)pdm09 показало, что:
- ответственный за антигенную специфичность поверхностный белок вакцинного штамма - гемагглютинин (НА) - в РТГА с гомологичной сывороткой антигенно идентичен эпидемическому вирусу А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1)pdm09, поскольку показатели взаимодействия реассортанта A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 и родительского штамма А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09 с крысиной антисывороткой, полученной к вирусу А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1)pdm09, полностью совпадали (табл. 1). Кроме того, перекрестная постановка РТГА вирусов А/Калифорния/07/2009 (H1N1) pdm и А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09 с соответствующими гипериммунными крысиными сыворотками подтвердила близкое антигенное родство этих вирусов (табл. 1);
- второй ответственный за антигенную специфичность поверхностный белок вакцинного штамма нейраминидаза (NA) - проверен методом микс-ПЦР, а также полногеномным секвенированием и идентичен вирусу А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09.
Для анализа состава генома полученных реассортантов использовали микс-ПЦР анализ ДНК копий генов [Киселева И.В. с соавт. Анализ состава генома штаммов сезонной и пандемической живой гриппозной вакцины. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2011. №4. С. 29-36], основанный на различиях в размерах соответствующих амплифицируемых фрагментов генов донора аттенуации или «дикого» вируса.
Формула генома 6:2 соответствует требованиям, предъявляемым к штаммам живой гриппозной вакцины: гены, кодирующие поверхностные белки гемагглютинин (НА) и нейраминидазу (NA), принадлежат пандемическому родительскому вирусу А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09, гены, кодирующие внутренние белки (РВ2, РВ1, PA, NP, М, NS), принадлежат донору аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2). Результаты анализа всех генов вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 представлены в табл. 2.
Данные, полученные при первичном отборе вакцинного кандидата, были подтверждены полным секвенированием его генома и показали, что вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 унаследовал все 6 генов, кодирующих внутренние и неструктурные белки, от донора аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) (табл. 2).
Все кодирующие нуклеотидные замены, охарактеризованные для донора аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) как ответственные за его аттенуацию (табл. 3), присутствуют во внутренних генах реассортантного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09. Таким образом, полное секвенирование генома вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 показало генетическую стабильность аттенуирующих мутаций.
1 Лен17 - ген принадлежит донору аттенуацииА/Ленинград/134/17/57 (H2N2);
2 Нью Йорк - ген принадлежит эпидемическому вирусу А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09.
В гемагглютинине вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 присутствует стабилизирующая аминокислота - лизин - в позиции 47 субъединицы НА2, которая, по данным Yang et. al. [Yang H., Chang J.С, Guo Z. et al. Structural stability of influenza A(H1N1)pdm09 virus hemagglutinins. J. Virol. 2014. Vol. 88 (9). P. 4828-4838.] и Cotter et. al. [Cotter C.R., Jin H., Chen Z. A single amino acid in the stalk region of the H1N1pdm influenza virus HA protein affects viral fusion, stabilityand infectivity. PLoS Pathol 2014. Vol. 10 (1). Pe1003831], приводит к повышению стабильности и инфекционности Калифорния-подобных вирусов (Glu-47-Lys).
Оценку фенотипических свойств вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 проводили путем его параллельного титрования в развивающихся куриных эмбрионах при разных температурах. Вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 обладает выраженным температурочувствительным и холодоадаптированным фенотипом, идентичным фенотипу донора аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2). Установлено, что вакцинный вирус является температурочувствительным (ts фенотип) - его инфекционная активность при температуре 40°C составила менее 3,0 log10 ЭИД50/мл, и холодоадаптированным (са фенотип) - инфекционная активность при пониженной до 26°C температуре инкубации составила 7,4 log10 ЭИД50/мл, что свидетельствует о его безвредности для человека, поскольку по этим показателям он идентичен донору аттенуации А/Ленинград/134/17/57 (H2N2). Все результаты фенотипического анализа представлены в таблице 4.
Генетическая стабильность кодирующих мутаций
Генетическую стабильность вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 изучали сравнением сохранности кодирующих мутаций во внутренних генах до и после пятикратного пассирования вакцинного штамма в куриных эмбрионах. Полногеномное секвенирование показало, что нуклеотидная последовательность вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 до и после его пятикратного пассирования, осталась неизменной, в том числе в генах полимеразного комплекса (РВ2, РВ1, РА), ответственных за аттенуирующий фенотип (см. табл. 3). Фенотипические характеристики пассажного варианта также не претерпели никаких изменений (см. табл. 4).
Все вышесказанное подтверждает высокую генетическую стабильность вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09.
Безвредность для морских свинок
Доклинические исследования острой токсичности вакцинного штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 проводили на морских свинках обоего пола в соответствии с Методическими рекомендациями по доклиническим испытаниям новых иммунобиологических препаратов [Методические рекомендации «Доклинические испытания эффективности и безопасности новых иммунобиологических лекарственных препаратов». М.:2010. 39 с.] и с «Правилами лабораторной практики» [Правила лабораторной практики. Приказ Минздрава РФ №708н от 23.08.20010. http://www.rg.ru/2010/10/22/laboratornaya-praktika-dok.html].
Морским свинкам вводили однократно 5 мл вакцинного вируса подкожно в дозе 7.0 lg ЭИД50/0.2 мл. Животным контрольной группы вводили подкожно физиологический раствор. Ежедневно в течение всего исследования (7 дней) проводился контроль общего состояния каждого животного. Показана безвредность вакцинного штамма для лабораторных животных при его подкожном введении (табл. 5).
Данные физиологического исследования показали, что подкожное введение вакцинного штамма не вызывало гибели экспериментальных животных и не приводило к изменению их внешнего вида, поведения, не отражалось на потреблении ими пищи и воды, что свидетельствует о безвредности вакцинного препарата.
1ВШ - вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1)pdm09.
Заключение
В результате проведенных доклинических исследований установлено, что заявляемый вакцинный штамм живой гриппозной вакцины АЛ7/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму: антигенной специфичностью эпидемического вируса А/Нью Йорк/61/2015 (H1N1) pdm09, структурой генома 6:2, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, а также характерной для донора аттенуации температурочувствительностью и холодоадаптированностью и безвредностью для лабораторных животных, что коррелирует с аттенуацией для человека.
Образец паспорта на вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 прилагается.
Таким образом, вакцинный штамм A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 по основным биологическим свойствам, изученным в доклинических экспериментах in vitro и in vivo, соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам Фармакопейной статьей (ФСП: Р N003224/01-270313) на Ультравак®, вакцину гриппозную аллантоисную живую для интраназального применения для взрослых и для детей.
Полученный штамм A/17/Нью Йорк/15/5 364 (H1N1) pdm09 депонирован 28.11.2016 в Государственную коллекцию вирусов ФГБУ «ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского (Россия RU, 123098, город Москва, улица Гамалеи, 16) под №2836 и имеет характеристики, представленные в образце паспорта штамма.
ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММА
Инфекционная активность штамма A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 32°C в течение 48 часов - 8.5 log10 ЭИД50/мл.
Гемагглютинирующая активность - 1:256.
Штамм проявляет генетическую стабильность фенотипических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).
Полезным свойством вакцинного штамма вируса гриппа A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 является его пригодность для наработки живой гриппозной вакцины. Предлагаемый по изобретению вакцинный штамм вируса гриппа A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09 может быть использован для профилактики гриппа как у взрослых, так и у детей с трехлетнего возраста.
Claims (1)
- Штамм вируса гриппа A/17/Нью Йорк/15/5364 (H1N1) pdm09, депонированный в Государственную коллекцию вирусов ФГБУ «ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России Институт вирусологии им. Д.И. Ивановского под №2836, используемый для получения живой гриппозной интраназальной гриппозной вакцины для взрослых и для детей.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017104678A RU2653388C1 (ru) | 2017-02-13 | 2017-02-13 | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/НЬЮ ЙОРК/15/5364 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017104678A RU2653388C1 (ru) | 2017-02-13 | 2017-02-13 | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/НЬЮ ЙОРК/15/5364 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2653388C1 true RU2653388C1 (ru) | 2018-05-08 |
Family
ID=62105523
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017104678A RU2653388C1 (ru) | 2017-02-13 | 2017-02-13 | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/НЬЮ ЙОРК/15/5364 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2653388C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2735291C1 (ru) * | 2019-12-17 | 2020-10-29 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ") | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/БРИСБЕН/2018/8175 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2413765C1 (ru) * | 2009-09-16 | 2011-03-10 | Учреждение Российской Академии Медицинских Наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-западного отделения РАМН (НИИЭМ СЗО РАМН) | Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/калифорния/2009/38 (h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
| RU2605314C1 (ru) * | 2015-10-23 | 2016-12-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ") | ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Боливия/2013/6585 (H1N1) pdm09 ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ |
-
2017
- 2017-02-13 RU RU2017104678A patent/RU2653388C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2413765C1 (ru) * | 2009-09-16 | 2011-03-10 | Учреждение Российской Академии Медицинских Наук Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-западного отделения РАМН (НИИЭМ СЗО РАМН) | Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/калифорния/2009/38 (h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
| RU2605314C1 (ru) * | 2015-10-23 | 2016-12-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ") | ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Боливия/2013/6585 (H1N1) pdm09 ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| V. BALDO et al. The new pandemic influenza A/(H1N1)pdm09 virus: is it really "new"?, PREV MED HYG 2016, Vol.57, pp.E19-E22. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2735291C1 (ru) * | 2019-12-17 | 2020-10-29 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ") | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/БРИСБЕН/2018/8175 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sylte et al. | Influenza neuraminidase as a vaccine antigen | |
| US10793834B2 (en) | Live-attenuated virus and methods of production and use | |
| Cox et al. | Production of a novel influenza vaccine using insect cells: protection against drifted strains | |
| Liu et al. | A subunit vaccine candidate derived from a classic H5N1 avian influenza virus in China protects fowls and BALB/c mice from lethal challenge | |
| Haque et al. | Confronting potential influenza A (H5N1) pandemic with better vaccines | |
| RU2746274C2 (ru) | Вакцинный штамм вируса гриппа В/60/Колорадо/2017/1 (Линия Виктория) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2653388C1 (ru) | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/НЬЮ ЙОРК/15/5364 (H1N1) pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2556833C2 (ru) | Аттенуированный холодоадаптированный штамм вируса гриппа а/рr/8/59/m2 (h1n1), предназначенный для получения вакцинных штаммов вируса гриппа в качестве донора аттенуации, вакцинные штаммы вируса гриппа а/59/м2/калифорния/66/2211 (н2n2) и а/59/м2/токио/67/22111 (н2n2) | |
| RU2605314C1 (ru) | ВАКЦИННЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Боливия/2013/6585 (H1N1) pdm09 ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ | |
| RU2627188C1 (ru) | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/Южная Африка/2013/01 (H1N1)pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2563352C2 (ru) | ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Техас/2012/30 (H3N2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ | |
| RU2606019C1 (ru) | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/ГОНКОНГ/2014/8296 (H3N2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2605926C1 (ru) | ШТАММ ВИРУСА ГРИППА В/60/Пхукет/2013/26 ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ | |
| RU2563351C2 (ru) | ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Ануи/2013/61 (H7N9) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ГРИППОЗНОЙ ВАКЦИНЫ | |
| RU2683500C1 (ru) | Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/сингапур/2016/3571 (h3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2783876C1 (ru) | Реассортантный штамм вируса гриппа А/17/Сидней/2019/156 (H3N2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2757397C1 (ru) | Реассортантный штамм вируса гриппа В/60/Вашингтон/2019/3676 (линия Виктория) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2783887C1 (ru) | Реассортантный штамм вируса гриппа А/17/Ньюкасл/2018/22 (H3N2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2783894C1 (ru) | Реассортантный штамм вируса гриппа А/17/Гонконг/2019/2573 (H3N2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2724706C1 (ru) | Вакцинный штамм вируса гриппа А/17/СЛОВЕНИЯ/2015/1121 (H1N1)pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2757396C1 (ru) | Вакцинный штамм вируса гриппа В/60/Гонконг/2017/5584 (линия Виктория) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2825583C1 (ru) | Реассортантный вакцинный штамм вируса гриппа А/17/Мичиган/2020/484 (H3N2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| RU2783877C1 (ru) | Реассортантный штамм вируса гриппа А/17/Южная Австралия/2019/122 (H3N2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей | |
| Vincent et al. | Global evolution of influenza A viruses in swine | |
| RU2702834C1 (ru) | Штамм вируса гриппа A/UNL/HK/2:6/2017 (H5N8) для получения инактивированных и живых гриппозных вакцин |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200214 |