RU2649134C1 - Means for reduction of glycoprotein-p functional activity and expression - Google Patents
Means for reduction of glycoprotein-p functional activity and expression Download PDFInfo
- Publication number
- RU2649134C1 RU2649134C1 RU2017101481A RU2017101481A RU2649134C1 RU 2649134 C1 RU2649134 C1 RU 2649134C1 RU 2017101481 A RU2017101481 A RU 2017101481A RU 2017101481 A RU2017101481 A RU 2017101481A RU 2649134 C1 RU2649134 C1 RU 2649134C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- glycoprotein
- afobazole
- functional activity
- drug
- pgp
- Prior art date
Links
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 title claims abstract description 22
- WWNUCVSRRUDYPP-UHFFFAOYSA-N fabomotizole Chemical compound N1C2=CC(OCC)=CC=C2N=C1SCCN1CCOCC1 WWNUCVSRRUDYPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 229960000871 fabomotizole Drugs 0.000 claims abstract description 27
- BTZWMMDTPPRLID-UHFFFAOYSA-N Cl.Cl.C(C)OC=1C=CC(=C(CC=2NC=CN2)C1)SCCN1CCOCC1 Chemical compound Cl.Cl.C(C)OC=1C=CC(=C(CC=2NC=CN2)C1)SCCN1CCOCC1 BTZWMMDTPPRLID-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 30
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 abstract description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 abstract description 5
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 abstract description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract description 3
- 108090000301 Membrane transport proteins Proteins 0.000 abstract description 2
- 102000003939 Membrane transport proteins Human genes 0.000 abstract description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 abstract description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N fexofenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RWTNPBWLLIMQHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229960003592 fexofenadine Drugs 0.000 description 11
- 102100033350 ATP-dependent translocase ABCB1 Human genes 0.000 description 10
- 108010047230 Member 1 Subfamily B ATP Binding Cassette Transporter Proteins 0.000 description 10
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 8
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 8
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 7
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 7
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 7
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 6
- 229960001722 verapamil Drugs 0.000 description 6
- XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N (2R,4S)-ketoconazole Chemical compound C1CN(C(=O)C)CCN1C(C=C1)=CC=C1OC[C@@H]1O[C@@](CN2C=NC=C2)(C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)OC1 XMAYWYJOQHXEEK-OZXSUGGESA-N 0.000 description 5
- SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-{[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl](methyl)amino}-2-(propan-2-yl)pentanenitrile Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1CCN(C)CCCC(C#N)(C(C)C)C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 5
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 229960004125 ketoconazole Drugs 0.000 description 5
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- LGGHDPFKSSRQNS-UHFFFAOYSA-N Tariquidar Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(=O)NC3=CC(OC)=C(OC)C=C3C(=O)NC3=CC=C(C=C3)CCN3CCC=4C=C(C(=CC=4C3)OC)OC)=CN=C21 LGGHDPFKSSRQNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 5-methoxy-2-{[(4-methoxy-3,5-dimethylpyridin-2-yl)methyl]sulfinyl}-1H-benzimidazole Chemical compound N=1C2=CC(OC)=CC=C2NC=1S(=O)CC1=NC=C(C)C(OC)=C1C SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700041567 MDR Genes Proteins 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 229960004580 glibenclamide Drugs 0.000 description 2
- ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N glyburide Chemical compound COC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NCCC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(=O)NC2CCCCC2)C=C1 ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 229960001910 lynestrenol Drugs 0.000 description 2
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 2
- 229960000381 omeprazole Drugs 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N quinidine Chemical compound C([C@H]([C@H](C1)C=C)C2)C[N@@]1[C@H]2[C@@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229950005890 tariquidar Drugs 0.000 description 2
- -1 tarkyvidar Chemical compound 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOFUBOWZWQFQJU-SNOJBQEQSA-N (2r,3s,4s,5r)-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolane-2,3,4-triol;(2s,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O.OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AOFUBOWZWQFQJU-SNOJBQEQSA-N 0.000 description 1
- CSGQVNMSRKWUSH-IAGOWNOFSA-N (3r,4r)-4-amino-1-[[4-(3-methoxyanilino)pyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-5-yl]methyl]piperidin-3-ol Chemical compound COC1=CC=CC(NC=2C3=C(CN4C[C@@H](O)[C@H](N)CC4)C=CN3N=CN=2)=C1 CSGQVNMSRKWUSH-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 1
- SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 1h-1,2-benzodiazepine Chemical compound N1N=CC=CC2=CC=CC=C12 SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OEZPQPRMLRINIE-UHFFFAOYSA-N 4-[2-[4-ethoxy-2-(1H-imidazol-2-ylmethyl)phenyl]sulfanylethyl]morpholine Chemical compound C(C)OC=1C=CC(=C(CC=2NC=CN=2)C=1)SCCN1CCOCC1 OEZPQPRMLRINIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000043966 ABC-type transporter activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010006533 ATP-Binding Cassette Transporters Proteins 0.000 description 1
- 206010001526 Air embolism Diseases 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100022595 Broad substrate specificity ATP-binding cassette transporter ABCG2 Human genes 0.000 description 1
- 241000700112 Chinchilla Species 0.000 description 1
- 102000004328 Cytochrome P-450 CYP3A Human genes 0.000 description 1
- 108010081668 Cytochrome P-450 CYP3A Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- RRJFVPUCXDGFJB-UHFFFAOYSA-N Fexofenadine hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC(C(C)(C(O)=O)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 RRJFVPUCXDGFJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010019851 Hepatotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 101000760943 Homo sapiens Arylacetamide deacetylase Proteins 0.000 description 1
- 101000823298 Homo sapiens Broad substrate specificity ATP-binding cassette transporter ABCG2 Proteins 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010007859 Lisinopril Proteins 0.000 description 1
- YNVGQYHLRCDXFQ-XGXHKTLJSA-N Lynestrenol Chemical compound C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 YNVGQYHLRCDXFQ-XGXHKTLJSA-N 0.000 description 1
- 101150066553 MDR1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100021339 Multidrug resistance-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010048723 Multiple-drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 1
- 229940122313 Nucleoside reverse transcriptase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010089503 Organic Anion Transporters Proteins 0.000 description 1
- 102000007990 Organic Anion Transporters Human genes 0.000 description 1
- 108010087367 P-glycoprotein 2 Proteins 0.000 description 1
- 229940049937 Pgp inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100039032 Phosphatidylcholine translocator ABCB4 Human genes 0.000 description 1
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical class C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 1
- 102100020886 Sodium/iodide cotransporter Human genes 0.000 description 1
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 206010048010 Withdrawal syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 206010056977 alcoholic pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 229940049706 benzodiazepine Drugs 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N cinchonine Natural products C1C(C(C2)C=C)CCN2C1C(O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 210000003725 endotheliocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007686 hepatotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000304 hepatotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000508 hormonal effect Toxicity 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 102000053952 human AADAC Human genes 0.000 description 1
- 230000001077 hypotensive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- RLAWWYSOJDYHDC-BZSNNMDCSA-N lisinopril Chemical compound C([C@H](N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 RLAWWYSOJDYHDC-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 229960002394 lisinopril Drugs 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 108010066052 multidrug resistance-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 210000000885 nephron Anatomy 0.000 description 1
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000820 nonprescription drug Substances 0.000 description 1
- 229940053934 norethindrone Drugs 0.000 description 1
- VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N norethisterone Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 1
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 210000000512 proximal kidney tubule Anatomy 0.000 description 1
- 229960001404 quinidine Drugs 0.000 description 1
- VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N ranitidine Chemical compound [O-][N+](=O)/C=C(/NC)NCCSCC1=CC=C(CN(C)C)O1 VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N 0.000 description 1
- 229960000620 ranitidine Drugs 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000008261 resistance mechanism Effects 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- 239000003419 rna directed dna polymerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 108010013351 sodium-iodide symporter Proteins 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000004500 stellate cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000002676 xenobiotic agent Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
- A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, клинической фармакологии, неврологии и онкологии, и предназначено для повышения эффективности фармакотерапии заболеваний центральной нервной системы и онкологических заболеваний лекарственными веществами-субстратами гликопротеина-Р (Pgp), прогнозирования возможной принадлежности изучаемых лекарственных препаратов к субстратам мембранного белка-транспортера гликопротеина-Р, использования афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола) в качестве положительного контроля пониженной активности Pgp при поиске веществ аналогичного действия.The invention relates to medicine, namely to pharmacology, clinical pharmacology, neurology and oncology, and is intended to increase the effectiveness of pharmacotherapy of diseases of the central nervous system and cancer with drugs-substrates of glycoprotein-P (Pgp), predicting the possible belonging of the studied drugs to membrane substrates glycoprotein-P transporter protein, the use of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole) as positive for ntrolya reduced activity of Pgp when searching for the same active substance.
Гликопротеин-Р (Pgp) является мембранным белком-транспортером, который использует энергию макроэргических связей АТФ для эффлюкса из клеток, различных по химической структуре эндо- и ксенобиотиков, среди которых большое число современных лекарственных средств. Pgp экспрессируется эпителиоцитами слизистой оболочки тонкого кишечника и проксимальных канальцев нефронов, гепатоцитами и эндотелиоцитами гистогематических барьеров. Транспортер ограничивает энтеральную абсорбцию лекарственных веществ, являющихся его субстратами в кишечнике, участвует в процессах их распределения и способствует их экскреции в желчь и мочу. Таким образом, от функциональной активности данного белка-транспортера зависит фармакокинетика лекарственных веществ-субстратов Pgp, а значит эффективность и безопасность фармакотерапии [F. Montanari, G.F. Ecker. Prediction of drug-ABC-transporter interaction - Recent advances and future challenges. // Adv. Drug. Rev. - 2015. - Vol. 86. - P. 17-26; Метаболизм лекарственных средств. Научные основы персонализованной медицины: руководство для врачей / В.Г. Кукес [и др.]. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 304 с.].Glycoprotein-P (Pgp) is a membrane transporter protein that uses the energy of ATP macroergic bonds for efflux from cells with different chemical structures endo- and xenobiotics, including a large number of modern drugs. Pgp is expressed by epithelial cells of the mucous membrane of the small intestine and proximal tubules of the nephrons, hepatocytes and endotheliocytes of histohematological barriers. The transporter limits the enteral absorption of drugs, which are its substrates in the intestine, participates in the processes of their distribution and promotes their excretion into bile and urine. Thus, the pharmacokinetics of drug substances substrates Pgp depends on the functional activity of this transporter protein, which means the effectiveness and safety of pharmacotherapy [F. Montanari, G.F. Ecker. Prediction of drug-ABC-transporter interaction - Recent advances and future challenges. // Adv. Drug. Rev. - 2015. - Vol. 86. - P. 17-26; Drug metabolism. Scientific foundations of personalized medicine: a guide for doctors / V.G. Kukes [et al.]. - M.: GEOTAR-Media, 2008. - 304 p.].
Pgp кодируется генами MDR (multidrug resistance gene), которые включают у человека два гена - MDR1 и MDR2. Ген MDR1 вовлечен в механизмы развития лекарственной устойчивости [Localization of the human multiple drug resistance gene, MDR1, to 7q21.1 / D.F. Callen [et al.] // Hum Genet. - 1987. - Vol. 77. - P. 142-144]. Pgp придается основное значение в формировании множественной резистентности опухолей к химиотерапии за счет эффлюкса лекарственных веществ из опухолевых клеток.Pgp is encoded by the MDR (multidrug resistance gene) genes, which include two genes in humans - MDR1 and MDR2. The MDR1 gene is involved in drug resistance mechanisms [Localization of the human multiple drug resistance gene, MDR1, to 7q21.1 / D.F. Callen [et al.] // Hum Genet. - 1987. - Vol. 77. - P. 142-144]. Pgp is given major importance in the formation of multiple resistance of tumors to chemotherapy due to the efflux of drugs from tumor cells.
Известно, что в настоящее время для определения локализации Pgp в организме, а также обнаружения его потенциальных субстратов в качестве ингибиторов белка-транспортера предложено значительное количество веществ, таких как, верапамил, циклоспорин, кетоконазол, тариквидар, хинидин и др. [K.K. Machavaram, J. Gundu, M.R. Yamsani. Effect of ketoconazole and rifampicin on the pharmacokinetics of ranitidine in healthy human volunteers: a possible role of P-glycoprotein // Drug Metabol. Drug Interact. - 2006. - Vol. 22, №1. - P. 47-65; E. Fox, S.E. Bates Tariquidar (XR9576): a P-glycoprotein drug efflux pump inhibitor // Expert Rev. Anticancer Ther. - 2007. - Vol. 7, №4. - P. 447-459].It is known that at present, a significant amount of substances such as verapamil, cyclosporin, ketoconazole, tarkyvidar, quinidine, etc. [K.K. Machavaram, J. Gundu, M.R. Yamsani. Effect of ketoconazole and rifampicin on the pharmacokinetics of ranitidine in healthy human volunteers: a possible role of P-glycoprotein // Drug Metabol. Drug Interact. - 2006. - Vol. 22, No. 1. - P. 47-65; E. Fox, S.E. Bates Tariquidar (XR9576): a P-glycoprotein drug efflux pump inhibitor // Expert Rev. Anticancer Ther. - 2007. - Vol. 7, No. 4. - P. 447-459].
Известно применение верапамила в дозе 9 мг/кг в качестве средства ингибирования функциональной активности Pgp в эксперименте на кроликах для анализа участия данного белка-транспортера в фармакокинетике омепразола [Involvement of cytochrome Р450 3А4 and P-glycoprotein in first-pass intestinal extraction of omeprazole in rabbits / H.M. Fang [et al.] // Act. Pharmacologica Sinica. - 2009. - Vol. 30. - P. 1566-1572]. Однако верапамил оказывает существенное влияние на сердечно-сосудистую систему: снижает частоту сердечных сокращений и атриовентрикулярную проводимость, обладает гипотензивным действием. Таким образом, возможность использования верапамила у людей ограничено выраженными системными эффектами, поэтому данный препарат можно использовать лишь по строгим показаниям.Verapamil is known to be used at a dose of 9 mg / kg as a means of inhibiting the functional activity of Pgp in a rabbit experiment to analyze the participation of this transporter protein in the pharmacokinetics of omeprazole [Involvement of cytochrome P450 3A4 and P-glycoprotein in first-pass intestinal extraction of omeprazole in rabbits / Hm Fang [et al.] // Act. Pharmacologica Sinica. - 2009. - Vol. 30. - P. 1566-1572]. However, verapamil has a significant effect on the cardiovascular system: it reduces heart rate and atrioventricular conduction, has a hypotensive effect. Thus, the possibility of using verapamil in humans is limited by pronounced systemic effects, so this drug can only be used according to strict indications.
Известно использование тариквидара для селективного ингибирования функциональной активности Pgp в гематоэнцефалическом барьере. Указанное вещество применялось на культурах клеток с повышенной экспрессией генов MDR1 (человеческого) и mdrla (мышиного) [(R)-[(11)C] verapamil is selectively transported by murine and human P-glycoprotein at the blood-brain barrier, and not by MRP1 and BCRP / K. Romermann [et al.] // Nucl Med Biol. - 2013. - Vol. 40, №7. - P. 873-878], кодирующих данный белок-транспортер и на крысах wistar Unilever в дозе 15 мг/кг с последующей оценкой проницаемости гематоэнцефалического барьера для субстратов белка-транспортера методом позитронно-эмиссионной томографии [Tariquidar-induced P-glycoprotein inhibition at the rat blood-brain barrier studied with (R)-11C-verapamil and PET / J.P. Bankstahl [et al.] // J. Nucl. Med. - 2008. - Vol. 49. - P. 1328-1335]. Однако тариквидар является дорогостоящим веществом зарубежного производства, не зарегистрированным в качестве лекарственного средства в Российской Федерации, что не позволяет применять его на людях для повышения эффективности фармакотерапии заболеваний головного мозга препаратами-субстратами Pgp.It is known to use tariquidar for selectively inhibiting the functional activity of Pgp in the blood-brain barrier. The indicated substance was used on cell cultures with increased expression of the MDR1 (human) and mdrla (mouse) genes [(R) - [(11) C] verapamil is selectively transported by murine and human P-glycoprotein at the blood-brain barrier, and not by MRP1 and BCRP / K. Romermann [et al.] // Nucl Med Biol. - 2013 .-- Vol. 40, No. 7. - P. 873-878], encoding this transporter protein and on wistar Unilever rats at a dose of 15 mg / kg, followed by assessment of the blood-brain barrier permeability for the transporter protein substrates by positron emission tomography [Tariquidar-induced P-glycoprotein inhibition at the rat blood-brain barrier studied with (R) -11C-verapamil and PET / JP Bankstahl [et al.] // J. Nucl. Med. - 2008 .-- Vol. 49. - P. 1328-1335]. However, tarqidvar is an expensive foreign-made substance that is not registered as a medicine in the Russian Federation, which does not allow its use in humans to increase the effectiveness of pharmacotherapy of brain diseases with Pgp substrates.
Известно применение циклоспорина в качестве средства для ингибирования функциональной активности Pgp, например, при оценке распределения, фармакокинетики и метаболизма его субстрата глибенкламида [Effects of Selected ОАТР and/or ABC Transporter Inhibitors on the Brain and Whole-Body Distribution of Glyburide / N. Tournier [et al.] // AAPS J. - 2013. - Vol. 15, №4. - P. 1082-1090]. В другом исследовании, выполненном на ВИЧ-инфицированных взрослых добровольцах было установлено, что циклоспорин в дозе 4 мг/кг ингибирует Pgp Т-лимфоцитов крови [Oral cyclosporin A inhibits CD4 Т cell P-glycoprotein activity in HIV-infected adults initiating treatment with nucleoside reverse transcriptase inhibitors / T. Hulgan [et al.] // J. Clin. Pharmacol. - 2009. - Vol. 65, №11 - P. 1081-1088], a в дозе 16 мг/кг/день в комплексной терапии антрациклин резистентной миелогенной лейкемии увеличивает продолжительность ремиссии [Benefit of cyclosporine (CsA) modulation of anthracycline resistance in high-risk AML: A Southwest Oncology Group study / A.F. List [et al.] // Blood. - 1998. - Vol. 92 (1). - P. 312а]. Однако циклоспорин является иммуносупрессором, при использовании в терапевтической дозе характеризуется значительной аллергенностью и токсичностью: нежелательным действием на желудочно-кишечный тракт, печень, почки, систему кроветворения, поэтому не может рекомендоваться в качестве ингибитора Pgp [Cyclosporine Nephrotoxicity / By Emmanuel [et al.] // Bennett Seminars in Nephrology. - 2003. - Vol. 23, №5. - Р. 465-476].It is known to use cyclosporin as an agent for inhibiting the functional activity of Pgp, for example, in assessing the distribution, pharmacokinetics and metabolism of its glibenclamide substrate [Effects of Selected OATP and / or ABC Transporter Inhibitors on the Brain and Whole-Body Distribution of Glyburide / N. Tournier [ et al.] // AAPS J. - 2013. - Vol. 15, No. 4. - P. 1082-1090]. In another study performed on HIV-infected adult volunteers, it was found that cyclosporin at a dose of 4 mg / kg inhibits Pgp of blood T-lymphocytes [Oral cyclosporin A inhibits CD4 T cell P-glycoprotein activity in HIV-infected adults initiating treatment with nucleoside reverse transcriptase inhibitors / T. Hulgan [et al.] // J. Clin. Pharmacol - 2009. - Vol. 65, No. 11 - P. 1081-1088], and at a dose of 16 mg / kg / day in the complex therapy of anthracycline-resistant myelogenous leukemia increases the duration of remission [Benefit of cyclosporine (CsA) modulation of anthracycline resistance in high-risk AML: A Southwest Oncology Group study / AF List [et al.] // Blood. - 1998. - Vol. 92 (1). - P. 312a]. However, cyclosporine is an immunosuppressive agent, when used in a therapeutic dose, it is characterized by significant allergenicity and toxicity: an undesirable effect on the gastrointestinal tract, liver, kidneys, and hematopoietic system; therefore, it cannot be recommended as an inhibitor of Pgp [Cyclosporine Nephrotoxicity / By Emmanuel [et al.] // Bennett Seminars in Nephrology. - 2003. - Vol. 23, No. 5. - R. 465-476].
Применение кетоконазола в дозе 400 мг один раз в день в течение 4 дней на здоровых добровольцах также может вызывать состояние ингибирования функциональной активности Pgp [Inhibitory effect of ketoconazole on the pharmacokinetics of a multireceptor tyrosine kinase inhibitor BMS-690514 in healthy participants: assessing the mechanism of the interaction with physiologically-based pharmacokinetic simulations / Z. Yang [et al.] // J. Clin Pharmacol. - 2013. - Vol. 53, №2. - Р. 217-227]. Однако значительная гепатотоксичность кетокойазола [Human arylacetamide deacetylase hydrolyzes ketoconazole to trigger hepatocellular toxicity / T. Fukami [et al.] // Biochem Pharmacol. - 2016. - Vol. 116. - P. 153-161] ограничивает применение препарата в качестве ингибитора Pgp.The use of ketoconazole at a dose of 400 mg once a day for 4 days in healthy volunteers can also cause a state of inhibition of the functional activity of Pgp [Inhibitory effect of ketoconazole on the pharmacokinetics of a multireceptor tyrosine kinase inhibitor BMS-690514 in healthy participants: assessing the mechanism of the interaction with physiologically-based pharmacokinetic simulations / Z. Yang [et al.] // J. Clin Pharmacol. - 2013 .-- Vol. 53, No. 2. - R. 217-227]. However, significant hepatotoxicity of ketocoyazole [Human arylacetamide deacetylase hydrolyzes ketoconazole to trigger hepatocellular toxicity / T. Fukami [et al.] // Biochem Pharmacol. - 2016. - Vol. 116. - P. 153-161] limits the use of the drug as an inhibitor of Pgp.
Продемонстрировано использование синтетического прогестина - линестренола (14-дневный курс перорального введения в дозе 110 мкг/кг однократно в сутки) с целью ингибирования функциональной активности Pgp [Пат. 2553362 Рос. Федерация, G09B 23/28. Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-Р линестренолом в эксперименте / А.А. Котлярова, Е.Н. Якушева, РязГМУ им. акад. И.П. Павлова. - №2014100531 /15; заявл. 09.01.2014; опубл. 10.06.15, Бюл. №16]. Однако данное вещество является пролекарством гормонального вещества норэтистерона, связывающегося с рецепторами прогестерона. Таким образом, данный препарат может вызывать побочные эффекты, связанные с его гормональным действием.The use of synthetic progestin - linestrenol (a 14-day course of oral administration at a dose of 110 μg / kg once daily) has been demonstrated to inhibit the functional activity of Pgp [US Pat. 2553362 Ros. Federation, G09B 23/28. The method of modeling the state of inhibition of the functional activity of glycoprotein-P by linestrenol in the experiment / A.A. Kotlyarova, E.N. Yakushev, Ryazan State Medical University Acad. I.P. Pavlova. - No. 2014100531/15; declared 01/09/2014; publ. 06/10/15, Bull. No. 16]. However, this substance is a prodrug of the hormone Norethisterone, which binds to progesterone receptors. Thus, this drug can cause side effects associated with its hormonal effect.
Способность афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) ингибировать активность Pgp в настоящий момент в научной литературе не описана. Афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) - это оригинальный отечественный селективный анксиолитик с нейропротекторной активностью, предотвращающий стресс-индуцированное падение связывания в бензодиазепиновом участке ГАМКА-рецепторного комплекса, одобренный для клинического применения в РФ в 2005 году. Препарат не обладает характерными для бензодиаземинов гипноседативным, амнестическим и миорелаксантным эффектами, однако по анксиолитическим свойствам им не уступает [С.Б. Середенин, М.В. Воронин. Фармакология нового анксиолитика афобазола. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2009. - Т. 72, №1. - С. 3-11].The ability of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) to inhibit the activity of Pgp is currently not described in the scientific literature. Afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) is an original domestic selective anxiolytic with neuroprotective activity that prevents the stress-induced decrease in binding in the benzodiazepine site of the GABA A receptor complex, approved for clinical use by the Russian Federation in 2005. The drug does not have hypnosedative, amnestic, and muscle relaxant effects characteristic of benzodiazemines, however, it is not inferior to them in anxiolytic properties [S. B. Seredenin, M.V. Voronin. Pharmacology of the new anxiolytic afobazole. // Experimental and clinical pharmacology. - 2009. - T. 72, No. 1. - S. 3-11].
Продемонстрировано отсутствие кумуляции афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) в связи с особенностями химического строения и тканевой доступности. Поэтому данный препарат может назначаться несколько раз в день в течение длительного времени [Фармакокинетическая оценка пролонгированной лекарственной формы афобазола в сравнении с таблетками препарата, выпускаемыми промышленностью / П.О. Бочков [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2013. - Т. 76, №11. - С. 33-35].The absence of cumulation of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) due to the peculiarities of the chemical structure and tissue accessibility was demonstrated. Therefore, this drug can be prescribed several times a day for a long time [Pharmacokinetic evaluation of a prolonged dosage form of afobazole in comparison with tablets manufactured by the industry / P.O. Bochkov [et al.] // Experimental and Clinical Pharmacology. - 2013. - T. 76, No. 11. - S. 33-35].
Применение афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) не сопровождается гипноседативными эффектами (проявляются лишь в дозах, превышающих ED50 для анксиолитического действия более чем в 40 раз). У препарата не выявлены миорелаксантные свойства и отрицательное влияние на показатели внимания и памяти, к нему не формируется лекарственная зависимость и не развивается синдром отмены. Это позволяет отнести афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) к безопасным безрецептурным средствам [А.С. Аведисова. Афобазол - безопасный препарат для лечения тревоги в общей практике. // Русский медицинский журнал. - 2006. - Т. 14, №22. - С. 1-3].The use of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) is not accompanied by hypnosedative effects (they are manifested only in doses exceeding the ED 50 for anxiolytic action by more than 40 times). The drug has no muscle relaxant properties and a negative effect on indicators of attention and memory, drug dependence is not formed for it, and withdrawal syndrome does not develop. This allows us to classify afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) as a safe over-the-counter drug [A.S. Avedisova. Afobazole is a safe medication for treating anxiety in general practice. // Russian medical journal. - 2006. - T. 14, No. 22. - S. 1-3].
Целью изобретения является поиск средств, обладающих способностью ингибировать функциональную активность и экспрессию Pgp.The aim of the invention is the search for agents with the ability to inhibit the functional activity and expression of Pgp.
Поставленная задача достигается тем, что в качестве ингибитора Pgp выбран безопасный и экономически доступный лекарственный препарат афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид).The task is achieved in that a safe and economically affordable drug Afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) was chosen as a Pgp inhibitor.
Для решения поставленной задачи нами выполнено исследование на 17 половозрелых кроликах-самцах породы Шиншилла средней массой 3500-4300 г в соответствии с правилами лабораторной практики (приказ МЗ РФ №199н от 1 апреля 2016 г.).To solve this problem, we performed a study on 17 sexually mature male Chinchilla rabbits with an average weight of 3500-4300 g in accordance with the rules of laboratory practice (order of the Ministry of Health of the Russian Federation No. 199n of April 1, 2016).
Животные были разделены на 2 серии: в первой серии (n=7) исследовали влияние афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) на функциональную активность Pgp, во второй (n=10) оценивали влияние тестируемого средства на экспрессию транспортера в печени, почках, тонком кишечнике и головном мозге животных.The animals were divided into 2 series: in the first series (n = 7), the effect of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) on the functional activity of Pgp was investigated, in the second (n = 10), the effect was evaluated a test agent for expression of a transporter in the liver, kidneys, small intestine, and brain of animals.
В качестве маркерного субстрата Pgp использовали фексофенадин, который не подвергается метаболизму в организме и выводится печенью (90%) и почками данным белком-транспортером. Первая серия животных получала фексофенадин (таблетки, покрытые оболочкой Телфаст, 180 мг, Aventis Pharma, Италия) однократно внутрижелудочно (в/ж) в дозе 67,5 мг/кг [Функциональная активность гликопротеина-Р при экспериментальных манипуляциях. / Е.Н. Якушева [и др.] // Рос. мед.-биол. вестн. им. акад. И.П. Павлова. - 2014. - №2. - С. 74-77] до и после 14-дневного введения им препарата афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) (таблетки Афобазол, 10 мг, ОАО «Фармстандарт-Лексредства», Россия) в дозе 3,8 мг/кг массы в виде 10%-ной суспензии на воде, очищенной 3 раза в день (в/ж) [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриев; под общ. ред. чл.-кор. РАМН проф. Р.У. Хабриева. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: ОАО Издательство «Медицина», 2005. - С. 48-51]. Следует отметить, что последнее введение афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) осуществлялось за 1 час до введения маркерного субстрата для возможности выявления непосредственного воздействия препарата на молекулу Pgp, но исключения взаимодействия веществ в ЖКТ. Затем забирали у кроликов кровь из краевой вены уха в объеме 5 мл в гепаринизированные пробирки, 10 мин центрифугировали при 3000 об/мин для получения плазмы. В плазме крови определяли концентрацию фексофенадина методом ВЭЖХ на хроматографической системе «Stayer» по методике, описанной ранее [Функциональная активность гликопротеина-Р при экспериментальных манипуляциях. / Е.Н. Якушева [и др.] // Рос. мед.-биол. вестн. им. акад. И.П. Павлова. - 2014. - №2. - С. 74-77].Fexofenadine, which is not metabolized in the body and excreted by the liver (90%) and kidneys by this transporter protein, was used as a marker substrate of Pgp. The first series of animals received fexofenadine (tablets coated with Telfast, 180 mg, Aventis Pharma, Italy) once intragastrically (w / w) at a dose of 67.5 mg / kg [Functional activity of glycoprotein-R during experimental manipulations. / E.N. Yakusheva [et al.] // Ros. medical biol. Vestn. them. Acad. I.P. Pavlova. - 2014. - No. 2. - S. 74-77] before and after 14-day administration of the drug afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) (Afobazol tablets, 10 mg, Pharmstandard-Leksredstva OJSC, Russia ) at a dose of 3.8 mg / kg of mass in the form of a 10% suspension in water purified 3 times a day (w / w) [Guide to the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances / R.U. Khabriev; under the general. ed. Corr. RAMS prof. RU. Khabrieva. - 2-ed., Revised. and add. - M.: Publishing House "Medicine", 2005. - S. 48-51]. It should be noted that the last administration of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) was carried out 1 hour before the introduction of a marker substrate to be able to detect the direct effect of the drug on the Pgp molecule, but exclude the interaction of substances in the digestive tract. Then, blood was collected from rabbits from the marginal ear vein in a volume of 5 ml in heparinized tubes, centrifuged at 3000 rpm for 10 min to obtain plasma. In the blood plasma, the concentration of fexofenadine was determined by HPLC on a Stayer chromatographic system according to the method described previously [Functional activity of glycoprotein-R during experimental manipulations. / E.N. Yakusheva [et al.] // Ros. medical biol. Vestn. them. Acad. I.P. Pavlova. - 2014. - No. 2. - S. 74-77].
Животные второй серии были разделены на 2 группы по 5 кроликов в каждой. Первая группа представляла собой интактных животных, которые подвергались эвтаназии методом воздушной эмболии, после чего у них для анализа забирали образцы печени и тонкой кишки и фиксировали ткани в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Второй группе животных вводили афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) в дозе 3,8 мг/кг (в/ж) 14-дневным курсом, затем у них также забирались органы для иммуногистохимического исследования.Animals of the second series were divided into 2 groups of 5 rabbits in each. The first group consisted of intact animals that were euthanized by air embolism, after which liver and small intestine samples were taken for analysis and tissue was fixed in a 10% solution of neutral formalin. The second group of animals was injected with afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) at a dose of 3.8 mg / kg (w / w) by a 14-day course, then organs were also taken for immunohistochemical studies .
Гистологический материал подвергался стандартной обработке: обезвоживание в растворах этанола возрастающей концентрации, просветление ксилолом и помещение в парафин. Перед реакцией иммунного окрашивания производили демаскировку антигенов тканей посредством нагревания на водяной бане в 10 мМ цитратном буфере (pH 6,0), блокировали эндогенную пероксидазу 3% раствором пероксида водорода. Затем инкубировали срезы с первичными антителами к Pgp (ABCBl antibody-middle region, Aviva Systems Biology, США) в разведении 1:100 по стандартной методике. Для иммунного окрашивания использовали полимерную систему детекции с пероксидазной меткой («Ventana», США). Ядра клеток докрашивали гематоксилином.The histological material was subjected to standard processing: dehydration in ethanol solutions of increasing concentration, xylene clarification and placement in paraffin. Before the immunostaining reaction, tissue antigens were unmasked by heating in a water bath in 10 mM citrate buffer (pH 6.0), endogenous peroxidase was blocked with a 3% hydrogen peroxide solution. Then incubated sections with primary antibodies to Pgp (ABCBl antibody-middle region, Aviva Systems Biology, USA) at a dilution of 1: 100 according to standard methods. For immune staining, a peroxidase-labeled polymer detection system was used (Ventana, USA). Cell nuclei were stained with hematoxylin.
Микропрепарат фотографировали с помощью цифровой камеры «ЛОМО ТС-500» (Россия) при увеличении в 400 раз. В каждом гистологическом препарате оценивали 10 репрезентативных участков (10 фотографий). В дальнейшем изображения анализировали с помощью медицинской программы для анализа и обработки цифровых изображений ImageJ (США). С помощью плагина Colour Deconvolution, имеющего встроенную схему для анализа окраски «гематоксилин + диаминобензидин», изображение разделяли на синий и коричневый цвет. Интенсивность окраски «диаминобензидина» на фотографиях кишечника оценивали с использованием модуля «гистограмма» в диапазоне от 0 (черное) до 255 (белое), а затем переводили полученные значения в «+»: где 255 - «+», а 0 - «+++» [Ингибирование активированных звездчатых клеток лизиноприлом для предупреждения фиброза поджелудочной железы в модели хронического алкогольного панкреатита / М.Е. Ничитайло [и др.] // Клiн. xip - 2012. - №7. - С. 52-56; Quantitative Immunohistochemical Analysis Reveals Association between Sodium Iodide Symporter and Estrogen Receptor Expression in Breast Cancer / R. Malhotra [et al.] // PLoS ONE. - 2013. - Vol. 8 (1). - P. 1-9]. В печени определяли относительную площадь мембран, экспрессирующих Pgp, которую рассчитывалась автоматически как: площадь мембран, экспрессирующих Pgp (pix2)/общая площадь поля зрения (pix2).The micropreparation was photographed using a LOMO TS-500 digital camera (Russia) at a magnification of 400 times. In each histological preparation, 10 representative plots were evaluated (10 photographs). Subsequently, the images were analyzed using a medical program for the analysis and processing of digital images ImageJ (USA). Using the Color Deconvolution plugin, which has a built-in hematoxylin + diaminobenzidine color analysis scheme, the image was divided into blue and brown. The color intensity of “diaminobenzidine” in the photographs of the intestine was evaluated using the “histogram” module in the range from 0 (black) to 255 (white), and then the obtained values were converted to “+”: where 255 is “+” and 0 is “+ ++ "[Inhibition of activated stellate cells with lisinopril to prevent pancreatic fibrosis in a model of chronic alcoholic pancreatitis / M.E. Nothing [and others] // Klin. xip - 2012. - No. 7. - S. 52-56; Quantitative Immunohistochemical Analysis Reveals Association between Sodium Iodide Symporter and Estrogen Receptor Expression in Breast Cancer / R. Malhotra [et al.] // PLoS ONE. - 2013 .-- Vol. 8 (1). - P. 1-9]. In the liver, the relative area of membranes expressing Pgp was determined, which was calculated automatically as: the area of membranes expressing Pgp (pix 2 ) / total area of the field of view (pix 2 ).
Фармакокинетические параметры фексофенадина рассчитывали модельно-независимым методом вручную.The pharmacokinetic parameters of fexofenadine were calculated manually by an independent model method.
Полученные результаты обрабатывали с помощью программы «StatSoft Statistica 7.0». Наличие достоверных различий между значениями Тmax фексофенадина оценивали с помощью критерия Вилкоксона, а полученные результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (Med, lq, uq). Статистическую значимость различий между фармакокинетическими параметрами, за исключением Тmax, оценивали исходя из представления о лог-нормальном распределении данных. Сравнение изучаемых фармакокинетических параметров проводили с применением дисперсионного анализа повторных измерений (ANOVA) после их логарифмирования. Статистически значимыми принимали различия при значении p<0,05. Дополнительно рассчитывали двухсторонний 90%-й доверительный интервал отношения геометрических средних значений фармакокинетических параметров на фоне введения афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) к параметрам интактных животных. Согласно рекомендациям U.S. Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research значимыми считаются различия между фармакокинетическими параметрами, если двухсторонний 90%-й доверительный интервал их отношения находится вне диапазона 0,8-1,25 (80-125%). Полученные результаты представлены в таблицах в виде среднего геометрического и его 95% доверительного интервала.The results were processed using the program "StatSoft Statistica 7.0". The presence of significant differences between the values of T max of fexofenadine was evaluated using the Wilcoxon test, and the results are presented as median, lower and upper quartiles (Med, lq, uq). The statistical significance of the differences between the pharmacokinetic parameters, with the exception of T max , was evaluated based on the concept of the log-normal distribution of data. Comparison of the studied pharmacokinetic parameters was performed using repeated analysis of variance (ANOVA) after their logarithm. Differences were considered statistically significant at p <0.05. An additional 90% confidence interval was calculated for the ratio of geometric mean pharmacokinetic parameters against the background of the administration of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) to the parameters of intact animals. According to the recommendations of the US Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research, differences between pharmacokinetic parameters are considered significant if the bilateral 90% confidence interval of their relationship is outside the range of 0.8-1.25 (80-125%). The results are presented in tables in the form of geometric mean and its 95% confidence interval.
Для сравнения показателей, характеризующих экспрессию гликопротеина-Р, использовали критерий Манна-Уитни. Полученные результаты представлены в виде медианы, нижнего и верхнего квартилей (Med, lq, uq).Mann-Whitney test was used to compare indicators characterizing the expression of glycoprotein-P. The results are presented in the form of the median, lower and upper quartiles (Med, lq, uq).
Введение кроликам-самцам афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) курсом 14 дней приводило к следующей динамике основных фармакокинетических параметров фексофенадина (табл. 1).The administration of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) to male rabbits for 14 days resulted in the following dynamics of the main pharmacokinetic parameters of fexofenadine (Table 1).
Было выявлено, что на фоне курсового введения животным афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) происходило увеличение AUC0-t, в 2,05 раза (90%-й ДИ 1,14; 5,06, р=0,053), AUC0-∞, в 2,32 раза (90%-й ДИ 1,3; 6,07, p=0,04) и снижение общего клиренса в 0,43 раза (90%-й ДИ 0,16; 0,76, p=0,04). Cmax фексофенадина, коэффициент абсорбции и Tmax достоверно от показателей интактных животных не отличались.It was revealed that against the background of the course administration of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) to animals, there was an increase in AUC 0-t , 2.05 times (90% CI 1.14; 5.06, p = 0.053), AUC 0-∞ , 2.32 times (90% CI 1.3; 6.07, p = 0.04) and a decrease in total clearance by 0.43 times (90 % CI 0.16; 0.76, p = 0.04). C max fexofenadine, the absorption coefficient and T max were not significantly different from the indices of intact animals.
Курсовое введение кроликам афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) приводило к снижению экспрессии Pgp в печени на 23,2% (р=0,032) по сравнению с показателями интактных животных. В тонком кишечнике экспрессия транспортера статистически значимо не изменялась (см. табл. 2).The course administration of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) to rabbits resulted in a 23.2% decrease in liver Pgp expression (p = 0.032) compared with intact animals. In the small intestine, transporter expression did not statistically significantly change (see Table 2).
Изменение фармакокинетических параметров фексофенадина отражает динамику функциональной активности Pgp, в связи с тем, что всасывание, распределение и экскреция данного препарата контролируется преимущественно данным белком-транспортером [Design of Fexofenadine Prodrugs Based on Tissue-Specific Esterase Activity and Their Dissimilar Recognition by P-Glycoprotein / K. Ohura [et al.] // J. Pharm. Sci. -2015. - Vol. 104, №9. - P. 3076-3083].The change in the pharmacokinetic parameters of fexofenadine reflects the dynamics of the functional activity of Pgp, due to the fact that the absorption, distribution and excretion of this drug is mainly controlled by this transporter protein [Design of Fexofenadine Prodrugs Based on Tissue-Specific Esterase Activity and Their Dissimilar Recognition by P-Glycoprotein / K. Ohura [et al.] // J. Pharm. Sci. 2015. - Vol. 104, No. 9. - P. 3076-3083].
Обнаруженная динамика фармакокинетики фексофенадина после курсового введения кроликам афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) свидетельствует о том, что содержание маркерного субстрата в плазме крови животных повысилось, а его экскреции замедлилась, что является доказательством ингибирования функциональной активности Pgp. Причем снижение функциональной активности транспортера коррелировало с ингибированием его экспрессии в печени.The observed dynamics of the pharmacokinetics of fexofenadine after course administration of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) to rabbits suggests that the content of the marker substrate in the blood plasma of animals has increased and its excretion has slowed, which is evidence of inhibition functional activity of Pgp. Moreover, a decrease in the functional activity of the transporter correlated with inhibition of its expression in the liver.
В проведенном исследовании изучено влияние афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) на функциональную активность Pgp. Достоверное повышение значений AUC0-24, AUC0-∞, а также снижение значений Сl фексофенадина могут служить доказательством ингибирующего влияния афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорида) на функциональную активность белка-транспортера Pgp на уровне целостного организма.The study studied the effect of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) on the functional activity of Pgp. A significant increase in the values of AUC 0-24 , AUC 0-∞ , as well as a decrease in the values of Cl fexofenadine can serve as evidence of the inhibitory effect of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) on the functional activity of the Pgp transporter protein at the level of the whole organism.
Показанная способность афобазола (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) снижать функциональную активность и экспрессию Pgp позволяет применять его для ингибирования Pgp в гематоэнцефалическом барьере и опухолевой ткани для повышения проникновения лекарственных веществ-субстратов транспортера в головной мозг и клетки опухоли для более эффективной фармакотерапии заболеваний центральной нервной системы и онкологических болезней, а также использовать афобазол (5-этокси-2-[2-(морфолино)этилтио]бензилимидазола дигидрохлорид) в качестве положительного контроля пониженной функциональной активности белка-транспортера при поиске веществ аналогичного действия и для прогнозирования потенциальных субстратов Pgp при изучении лекарственных веществ на этапе доклинических исследований.The shown ability of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydrochloride) to reduce the functional activity and expression of Pgp allows its use to inhibit Pgp in the blood-brain barrier and tumor tissue to increase the penetration of drug transporter substrate substances into the brain and tumor cells for more effective pharmacotherapy of diseases of the central nervous system and cancer, as well as the use of afobazole (5-ethoxy-2- [2- (morpholino) ethylthio] benzylimidazole dihydride ochloride) as a positive control of the decreased functional activity of the transporter protein in the search for substances of a similar effect and for predicting potential Pgp substrates in the study of drugs at the stage of preclinical studies.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017101481A RU2649134C1 (en) | 2017-01-17 | 2017-01-17 | Means for reduction of glycoprotein-p functional activity and expression |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017101481A RU2649134C1 (en) | 2017-01-17 | 2017-01-17 | Means for reduction of glycoprotein-p functional activity and expression |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2649134C1 true RU2649134C1 (en) | 2018-03-29 |
Family
ID=61866925
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017101481A RU2649134C1 (en) | 2017-01-17 | 2017-01-17 | Means for reduction of glycoprotein-p functional activity and expression |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2649134C1 (en) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2010146152A (en) * | 2010-11-12 | 2012-05-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова Российской академ | MEDICINE WITH CARDIOPROTECTIVE ACTIVITY |
| WO2016054403A1 (en) * | 2014-10-01 | 2016-04-07 | University Of South Florida | Afobazole nanoparticles formulation for enhanced therapeutics |
| US20160220537A1 (en) * | 2013-07-26 | 2016-08-04 | William J. Garner | Compositions to improve the therapeutic benefit of bisantrene and analogs and derivatives thereof |
| RU2597848C2 (en) * | 2013-03-12 | 2016-09-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Drug for prevention and treatment of diabetes |
-
2017
- 2017-01-17 RU RU2017101481A patent/RU2649134C1/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2010146152A (en) * | 2010-11-12 | 2012-05-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова Российской академ | MEDICINE WITH CARDIOPROTECTIVE ACTIVITY |
| RU2597848C2 (en) * | 2013-03-12 | 2016-09-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова" | Drug for prevention and treatment of diabetes |
| US20160220537A1 (en) * | 2013-07-26 | 2016-08-04 | William J. Garner | Compositions to improve the therapeutic benefit of bisantrene and analogs and derivatives thereof |
| WO2016054403A1 (en) * | 2014-10-01 | 2016-04-07 | University Of South Florida | Afobazole nanoparticles formulation for enhanced therapeutics |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| DI BARTOLOMEO S. et al. P-Glycoproteion is not a key target for the chemosensitizing effect of 1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol in HepG2 cells exposed to doxorubicin. Drug metab. Lett. 2010 Jan 4(1): 39-44 Реферат [он лайн] [найдено 23.11.2017] (найдено из интернет: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20201777). * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Poli et al. | Morphofunctional effects of mitotane on mitochondria in human adrenocortical cancer cells | |
| Mei et al. | FA-97, a new synthetic caffeic acid phenethyl ester derivative, ameliorates DSS-induced colitis against oxidative stress by activating Nrf2/HO-1 pathway | |
| Zhang et al. | Metformin alleviates hepatic steatosis and insulin resistance in a mouse model of high-fat diet-induced nonalcoholic fatty liver disease by promoting transcription factor EB-dependent autophagy | |
| Morgenweck et al. | Investigation of the role of βarrestin2 in kappa opioid receptor modulation in a mouse model of pruritus | |
| Shan et al. | Berberine analogue IMB-Y53 improves glucose-lowering efficacy by averting cellular efflux especially P-glycoprotein efflux | |
| Xu et al. | A combinatorial CRISPR–Cas9 screen identifies ifenprodil as an adjunct to sorafenib for liver cancer treatment | |
| Yong et al. | Hypouricemic Effects of Ganoderma applanatum in Hyperuricemia Mice through OAT1 and GLUT9 | |
| Davis | Cholestasis and endogenous opioids: liver disease and exogenous opioid pharmacokinetics | |
| Zhang et al. | Scutellarin ameliorates hepatic lipid accumulation by enhancing autophagy and suppressing IRE1α/XBP1 pathway | |
| Qi et al. | Myricetin-loaded nanomicelles protect against cisplatin-induced acute kidney injury by inhibiting the DNA damage-cGAS–STING signaling pathway | |
| Baraz et al. | mTOR inhibition by everolimus in childhood acute lymphoblastic leukemia induces caspase-independent cell death | |
| Sun et al. | Lycopene alleviates chronic stress-induced liver injury by inhibiting oxidative stress-mediated endoplasmic reticulum stress pathway apoptosis in rats | |
| Del Moral et al. | Chronic cyclosporin A nephrotoxicity, P-glycoprotein overexpression, and relationships with intrarenal angiotensin II deposits | |
| CN117919232B (en) | Application of indoxyl propionic acid in treating liver cirrhosis and immune liver injury | |
| Hyung et al. | Identification of the primary determining factor (s) governing the oral absorption of edaravone in rats | |
| McKeown et al. | Pilot study of jadomycin B pharmacokinetics and anti-tumoral effects in zebrafish larvae and mouse breast cancer xenograft models | |
| US20230190850A1 (en) | Use of terpenoids in the treatment or prevention of fibrotic diseases | |
| Qi et al. | A herbal product inhibits carbon tetrachloride-induced liver fibrosis by suppressing the epidermal growth factor receptor signaling pathway | |
| WO2022062223A1 (en) | Application of auranofin in preparation of drug for treatment of castration-resistant prostate cancer | |
| RU2649134C1 (en) | Means for reduction of glycoprotein-p functional activity and expression | |
| US20210283117A1 (en) | Prophylactic or therapeutic agent for prostate cancer | |
| Deters et al. | Influence of cyclosporine on the serum concentration and biliary excretion of mycophenolic acid and 7-O-mycophenolic acid glucuronide | |
| Piekielna-Ciesielska et al. | Antinociceptive potency of a fluorinated cyclopeptide Dmt-c [D-Lys-Phe-p-CF3-Phe-Asp] NH2 | |
| CN107184570B (en) | Deferoxamine is preparing the application in the drug for treating nonalcoholic fatty liver | |
| Deans-Fielder et al. | Mechanisms driving fasting-induced protection from genotoxic injury in the small intestine |