RU2533272C1 - Method for estimating level of post-vaccine immunity to influenza virus - Google Patents
Method for estimating level of post-vaccine immunity to influenza virus Download PDFInfo
- Publication number
- RU2533272C1 RU2533272C1 RU2013134674/15A RU2013134674A RU2533272C1 RU 2533272 C1 RU2533272 C1 RU 2533272C1 RU 2013134674/15 A RU2013134674/15 A RU 2013134674/15A RU 2013134674 A RU2013134674 A RU 2013134674A RU 2533272 C1 RU2533272 C1 RU 2533272C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- influenza virus
- post
- vaccine
- influenza
- serum
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 title claims abstract description 10
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title abstract description 10
- 230000036039 immunity Effects 0.000 title abstract description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 claims description 5
- 230000009800 post vaccination immunity Effects 0.000 claims description 4
- 238000012800 visualization Methods 0.000 claims description 3
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 claims 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 8
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 abstract description 2
- 229940124873 Influenza virus vaccine Drugs 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 11
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 10
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 9
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 9
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910003481 amorphous carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010049190 Red blood cell agglutination Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 230000003616 anti-epidemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000004071 soot Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционной иммунологии, и касается разработки иммунологической видоспецифической системы для оценки сероконверсии в ответ на иммунизацию в ходе вакцинопрофилактики гриппа на основе безинструментального определения уровня антител.The invention relates to medicine, namely to infectious immunology, and for the development of an immunological species-specific system for evaluating seroconversion in response to immunization during influenza vaccination based on tool-free determination of antibody levels.
Ежегодно в РФ проводится профилактическая иммунизация населения, направленная на предупреждение, ограничение распространения и ликвидацию инфекционных болезней. Законодательством регламентирована вакцинация населения в рамках национального календаря прививок, а также по эпидемическим показателям. Для оценки эффективности профилактических мер осуществляют мониторинг напряженности поствакцинального иммунитета, основанный на измерении содержания антител в сыворотке крови испытуемых.Every year in the Russian Federation, preventive immunization of the population is carried out, aimed at preventing, limiting the spread and elimination of infectious diseases. The legislation regulates the vaccination of the population in the framework of the national vaccination calendar, as well as epidemic indicators. To assess the effectiveness of preventive measures, the post-vaccination immunity is monitored based on the measurement of the antibody content in the blood serum of the subjects.
Одним из наиболее социально значимых заболеваний в РФ является грипп. Ежегодно в течение первого полугодия происходит сезонный подъем заболеваемости гриппом, в период которого количество больных достигает в определенных регионах 70-100 человек на 10000 населения. Профилактические мероприятия ежегодно затрагивают более 30 млн человек, из которых примерно половину составляют дети. При этом статистика свидетельствует о том, что процент заболеваемости среди привитых пациентов весьма высок и достигает 35-40%. Система тотального мониторинга эффективности вакцинации в системе противоэпидемических мер отсутствует. В качестве причины чаще всего называют отсутствие аналитических инструментов (тест-систем), пригодных для быстрого, эффективного, упрощенного тестирования.One of the most socially significant diseases in the Russian Federation is the flu. Every year during the first half of the year there is a seasonal increase in the incidence of influenza, during which the number of patients in certain regions reaches 70-100 people per 10,000 population. Preventive measures affect more than 30 million people each year, of which approximately half are children. Moreover, statistics indicate that the percentage of morbidity among vaccinated patients is very high and reaches 35-40%. There is no system of total monitoring of vaccination effectiveness in the system of anti-epidemic measures. The reason most often cited is the lack of analytical tools (test systems) suitable for quick, effective, simplified testing.
Высокая продолжительность эпидемического подъема заболевания (в среднем по РФ 4-6 недель), масштаб его негативного влияния на социально-экономическую сферу обуславливают необходимость совершенствования методов серологической диагностики, которые позволили бы более оперативно, и в то же время с высокой степенью надежности, производить мониторинг состояния противогриппозного иммунитета среди населения в условиях напряженной эпидемической ситуации.The high duration of the epidemic rise of the disease (on average in the Russian Federation 4-6 weeks), the scale of its negative impact on the socio-economic sphere necessitates the improvement of serological diagnostic methods, which would allow more rapid, and at the same time with a high degree of reliability, monitoring the state of anti-influenza immunity among the population in a tense epidemic situation.
Основным и наиболее близким по технической сущности к разработанному способу является метод серологического анализа гриппа при помощи сухого гриппозного диагностикума, используемого в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) (Рег. номер 94/161/330 ФС 42-310 ВС-90, утв. приказом Минздравмедпрома РФ от 10.08.1994 №161).The main and closest in technical essence to the developed method is the method of serological analysis of influenza using a dry influenza diagnosticum used in the hemagglutination inhibition test (RTGA) (Reg. Number 94/161/330 FS 42-310 BC-90, approved by order of the Ministry of Health and Medical RF dated 10.08.1994 No. 161).
Сущность способа-прототипа заключается в следующем.The essence of the prototype method is as follows.
Диагностикум представляет собой лиофильно высушенные штаммы вируса гриппа. Реакция основывается на способности иммунной сыворотки ингибировать инициированную вирусом агглютинацию эритроцитов кур.Diagnosticum is a freeze-dried strain of the influenza virus. The reaction is based on the ability of the immune serum to inhibit chicken-initiated red blood cell agglutination.
Реакцию проводят в U-образных лунках полистирольного планшета. Готовят серию двукратных разведений исследуемого образца, к каждому разведению добавляют диагностикум. Инкубацию проводят в течение часа при температуре 25°C. После этого в лунки вносят 1% суспензию эритроцитов, предварительно трехкратно отмытых физиологическим раствором и центрифугированием. При наличии в сыворотке антител к вирусу гриппа агглютинации эритроцитов не наблюдается.The reaction is carried out in U-shaped wells of a polystyrene plate. A series of twofold dilutions of the test sample is prepared, a diagnosticum is added to each dilution. Incubation is carried out for one hour at a temperature of 25 ° C. After that, a 1% suspension of red blood cells, previously washed three times with physiological saline and centrifuged, is introduced into the wells. In the presence of antibodies to the influenza virus serum, erythrocyte agglutination is not observed.
Основными недостатками описанного метода является:The main disadvantages of the described method are:
- необходимость наличия и предварительной подготовки эритроцитов кур;- the need for the availability and preliminary preparation of chicken red blood cells;
- необходимость длительной подготовки пробы и диагностикума перед процедурой анализа (титрование раствора антигена, истощение пробы в отношении неспецифических индукторов агглютинации);- the need for lengthy preparation of the sample and diagnosticum before the analysis procedure (titration of the antigen solution, depletion of the sample in relation to non-specific agglutination inducers);
- нестабильность при хранении эритроцитарного диагностикума;- instability during storage of the erythrocyte diagnosticum;
- невозможность сохранения (документирования) результатов анализа;- the inability to save (document) the analysis results;
- потребность в постановке дополнительных контрольных опытов, демонстрирующих отсутствие неспецифической агглютинации.- the need for additional control experiments demonstrating the absence of non-specific agglutination.
Предлагаемое изобретение решает задачу по созданию более простой, высокочувствительной, оперативной, наглядной и надежной диагностической системы для оценки напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа.The present invention solves the problem of creating a simpler, highly sensitive, operational, visual and reliable diagnostic system for assessing the intensity of post-vaccination immunity to influenza virus.
Решение задачи осуществляется благодаря тому, что процедурный формат тест-системы носит безинструментальный характер и предусматривает использование для сенсибилизации твердой фазы противогриппозной вакцины, при том что визуализация сформировавшихся в ходе инкубации сенсибилизированной поверхности иммуносорбента с тестируемой сывороткой, содержащей антитела к вирусу гриппа, комплексов антиген-антитело проводят при помощи оптически контрастного конъюгата G белок-углерод в течение 10-15 минут.The solution to the problem is due to the fact that the procedural format of the test system is tool-less and involves the use of an influenza vaccine for sensitization of the solid phase, while visualization of the antigen-antibody complexes formed during incubation of the sensitized surface of the immunosorbent with the test serum containing antibodies to the influenza virus carried out using optically contrasting conjugate G protein-carbon for 10-15 minutes.
Новизна разработанного способа заключается в использовании противогриппозной вакцины в качестве сенситина. Идентичность антигенов, используемых в вакцине и применяемых для сенсибилизации твердой фазы, обеспечивает высокую чувствительность и специфичность разработанной системы. Высокие показатели чувствительности, позволяющие определять наличие антител в разведении сыворотки 1/51200, делают возможным использование разработанного способа не только для анализа поствакцинального иммунитета, но и для качественной характеристики вакцин, выпускаемых различными производителями.The novelty of the developed method is the use of influenza vaccine as sensitin. The identity of the antigens used in the vaccine and used for sensitization of the solid phase, provides high sensitivity and specificity of the developed system. High sensitivity indices, which make it possible to determine the presence of antibodies in 1/51200 serum dilutions, make it possible to use the developed method not only for the analysis of post-vaccination immunity, but also for the qualitative characterization of vaccines produced by various manufacturers.
Описание разработанного способа. В качестве твердой фазы используется мембрана из нитроцеллюлозы с диаметром пор 0,45 мкм (Bio-Rad, США).Description of the developed method. As a solid phase, a nitrocellulose membrane with a pore diameter of 0.45 μm (Bio-Rad, USA) is used.
На диски из нитроцеллюлозной мембраны диаметром 5 мм наносили сенситин (вакцину) по 5 мкл в забуференном фосфатами физиологическом растворе с азидом натрия (ЗФР). В качестве внутреннего отрицательного контроля сорбировали бычий сывороточный альбумин (БСА) в концентрации 0,1 мг/мл.Sensitin (vaccine) 5 μl in phosphate buffered saline with sodium azide (PBS) was applied to disks from a nitrocellulose membrane with a diameter of 5 mm. As an internal negative control, bovine serum albumin (BSA) was sorbed at a concentration of 0.1 mg / ml.
После подсушивания мембраны и инкубации (5 мин) в блокирующем растворе, в качестве которого использовали забуференный фосфатами физиологический раствор, содержащий 0,05% твина-20 (ЗФРТ), мембраны помещали в лунки планшета, заполненные сыворотками вакцинированных пациентов с серийным разведением, кратным двум, начиная с разведения 1:50 на 30 минут. После чего мембраны промывали ЗФРТ и осуществляли детекцию конъюгатом G белок-углерод в течение 10-15 минут. Конъюгат G белок-углерод готовили по оригинальному способу (Раев М.Б. Частицы коллоидного углерода в качестве меток диагностических реагентов // Вестник уральской медицинской академической науки. 2006. №3(1). С.202-205). В качестве источника частиц углерода использовали аморфный углерод, который получали в виде сажи путем конденсирования из пламени горящего толуола на стеклянной поверхности с последующей тщательной промывкой и высушиванием.After the membranes were dried and incubated (5 min) in a blocking solution, using phosphate buffered saline containing 0.05% Tween-20 (PBS), the membranes were placed in the wells of the plate filled with serum of vaccinated patients with serial dilution in two starting with a 1:50 dilution for 30 minutes. After that, the membranes were washed with PBS and detection was carried out by conjugate G protein-carbon for 10-15 minutes. Protein-carbon conjugate G was prepared according to the original method (MB Raev. Colloidal carbon particles as diagnostic reagent labels // Bulletin of the Ural Medical Academic Science. 2006. No. 3 (1). S.202-205). Amorphous carbon was used as a source of carbon particles, which was obtained in the form of soot by condensation from a flame of burning toluene on a glass surface, followed by thorough washing and drying.
В процессе получения суспензии углеродных частиц к 2-х процентному раствору белка G в ЗФР добавляли аморфный углерод до конечной концентрации 5% в условиях вихревого перемешивания на магнитной мешалке. Полученную суспензию озвучивали в ультразвуковом дезинтеграторе, центрифугировали, активировали при помощи глутарового альдегида в присутствии G белка. Процесс конъюгирования проводили в течение 1 часа 40 минут при комнатной температуре и интенсивном перемешивании, после чего реагент центрифугировали при 6000 g и освобождали от избытка глутарового альдегида и несвязавшегося анти-лиганда гель-фильтрацией на колонке с Сефарозой CL-6B. Полученный конъюгат использовали для детекции в системах анализа. In the process of obtaining a suspension of carbon particles, amorphous carbon was added to a 2% solution of protein G in PBS to a final concentration of 5% under vortex mixing on a magnetic stirrer. The resulting suspension was voiced in an ultrasonic disintegrator, centrifuged, activated with glutaraldehyde in the presence of G protein. The conjugation process was carried out for 1 hour 40 minutes at room temperature with vigorous stirring, after which the reagent was centrifuged at 6000 g and freed from excess glutaraldehyde and unbound anti-ligand by gel filtration on a Sepharose CL-6B column. The resulting conjugate was used for detection in analysis systems.
ПримерExample
На диски из нитроцеллюлозной мембраны диаметром 5 мм наносили сенситин (вакцину противогриппозную «Ваксигрипп», разведенную в ЗФР 1:16) по 5 мкл. В качестве внутреннего отрицательного контроля сорбировали бычий сывороточный альбумин (БСА) в концентрации 0,1 мг/мл.Sensitin was applied to disks from a nitrocellulose membrane with a diameter of 5 mm (vaccine influenza vaccine “Waxigripp” diluted in PBS 1:16), 5 μl each. As an internal negative control, bovine serum albumin (BSA) was sorbed at a concentration of 0.1 mg / ml.
После подсушивания мембраны и инкубации (5 мин) в блокирующем растворе, в качестве которого использовали забуференный фосфатами физиологический раствор, содержащий 0,05% твина-20 (ЗФРТ), мембраны помещали в лунки планшета, заполненные сывороткой вакцинированных с серийным разведением, кратным двум, начиная с разведения 1:50. Тестированию подвергали по четыре сыворотки от каждого пациента: взятые в день вакцинации, спустя 3, 4 и 5 недель после нее. В качестве внешнего положительного контроля использовали сыворотку здорового кролика в аналогичных разведениях в том же буфере. После этого мембраны промывали ЗФРТ и осуществляли детекцию конъюгатом G белок-углерод в течение 10-15 минут.After drying of the membrane and incubation (5 min) in a blocking solution, which was used as phosphate buffered saline containing 0.05% Tween-20 (PBS), the membranes were placed in the wells of the plate filled with serum vaccines with serial dilution in two, starting at a 1:50 dilution. Four sera from each patient were tested: taken on the day of vaccination, 3, 4 and 5 weeks after it. Healthy rabbit serum in similar dilutions in the same buffer was used as an external positive control. After this, the membranes were washed with PBS and detection was carried out by conjugate G protein-carbon for 10-15 minutes.
Результаты представлены на рисунке 1. Чувствительность сконструированной системы превышает на 2 порядка чувствительность РТГА - стандартного метода серологической диагностики гриппа, длительность аналитической процедуры не превышает 45 минут, результаты исследования можно хранить бесконечно долго и использовать при необходимости мониторинга качественных показателей иммуногенности вакцин и иммунореактивности вакцинируемых пациентов.The results are shown in Figure 1. The sensitivity of the designed system exceeds by 2 orders of magnitude the sensitivity of rtga - the standard method for serological diagnosis of influenza, the duration of the analytical procedure does not exceed 45 minutes, the results of the study can be stored indefinitely and can be used if necessary to monitor qualitative indicators of vaccine immunogenicity and immunoreactivity of vaccinated patients.
Каждый ряд дисков на рис.1 соответствует одной исследованной сыворотке, в верхней части рисунка указаны их разведения, на все диски нанесена вакцина в разведении 1:16. 0, 3, 4, 5 - сыворотки пациента, полученные соответственно в день вакцинации, спустя 3, 4 и пять недель после нее; Кр - сыворотка здорового кролика; ОК - внутренний отрицательный контроль - диск с нанесенным БСА в концентрации 0,1 мг/мл, инкубированный с сывороткой пациента, полученной в день вакцинации. Стрелками обозначены последние визуализированные точки в рядах серийных разведений.Each row of disks in Fig. 1 corresponds to one studied serum, their dilutions are indicated in the upper part of the figure, a vaccine in a 1:16 dilution was applied to all disks. 0, 3, 4, 5 - patient serum obtained, respectively, on the day of vaccination, after 3, 4 and five weeks after it; Cr - healthy rabbit serum; OK - internal negative control - a disk with applied BSA at a concentration of 0.1 mg / ml, incubated with the patient's serum obtained on the day of vaccination. Arrows indicate the last visualized points in the series of serial dilutions.
На рисунке видно, что с помощью разработанной системы были выявлены восьмикратный прирост титра антител в сыворотке крови пациента спустя 3 недели после вакцинации и его сохранение в течение последующих двух недель. Максимальное разведение сыворотки, в котором были обнаружены антитела против вируса гриппа, составило 1:51200, что на 2 порядка выше, чем в стандартном методе анализа (РТГА).The figure shows that with the help of the developed system, an eight-fold increase in the titer of antibodies in the patient's
Таким образом, разработанный метод позволяет усовершенствовать оценку состояния поствакцинального противогриппозного иммунитета, упростить ее на фоне существенного повышения чувствительности тестирования, создав условия для возможности тотальной оценки эффективности профилактических мер. Важнейшими составляющими результатов внедрения разработанного способа является возможность своевременного внесения коррекции в процесс вакцинации и/или оценить качество вакцинного препарата.Thus, the developed method allows us to improve the assessment of the state of post-vaccination influenza immunity, to simplify it against the background of a significant increase in the sensitivity of testing, creating conditions for the possibility of a total assessment of the effectiveness of preventive measures. The most important components of the results of the implementation of the developed method is the possibility of timely correction in the vaccination process and / or to evaluate the quality of the vaccine preparation.
Таким образом, предложенный способ позволяет существенно улучшить и сократить по времени оценку напряженности иммунитета в ответ на вакцинацию, за счет высокой чувствительности системы определения специфических антител в сыворотке: 1:51200, и увеличить специфичность оценки за счет использования в качестве сенситина противогриппозной вакцины.Thus, the proposed method can significantly improve and reduce in time the assessment of immunity in response to vaccination, due to the high sensitivity of the system for the determination of specific antibodies in serum: 1: 51200, and increase the specificity of the assessment due to the use of influenza vaccine as sensitin.
Технический результат от использования изобретения заключается в повышении диагностической эффективности при сохранении высокой чувствительности и видоспецифичности способа, сокращении времени на проведение исследования, неинструментальной визуализации результатов исследования и возможности сохранения (документирования) результата исследования в течение длительного времени.The technical result from the use of the invention is to increase diagnostic efficiency while maintaining high sensitivity and species-specificity of the method, reducing the time to conduct the study, non-instrumental visualization of the results of the study and the possibility of saving (documenting) the result of the study for a long time.
Заявляемое техническое решение соответствует критерию «промышленное применение», так как применяемые реагенты доступны, а исследования легко выполняемы.The claimed technical solution meets the criterion of "industrial application", since the reagents used are available, and research is easily performed.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013134674/15A RU2533272C1 (en) | 2013-07-23 | 2013-07-23 | Method for estimating level of post-vaccine immunity to influenza virus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013134674/15A RU2533272C1 (en) | 2013-07-23 | 2013-07-23 | Method for estimating level of post-vaccine immunity to influenza virus |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2533272C1 true RU2533272C1 (en) | 2014-11-20 |
Family
ID=53382648
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013134674/15A RU2533272C1 (en) | 2013-07-23 | 2013-07-23 | Method for estimating level of post-vaccine immunity to influenza virus |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2533272C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2376604C2 (en) * | 2007-11-02 | 2009-12-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия" Росздрава | Method for detection of antigen or antibody in immune-enzyme analysis |
| RU2464573C1 (en) * | 2011-02-21 | 2012-10-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Сибирского отделения РАМН | Instrument-free diagnostic technique for pseudotuberculosis |
-
2013
- 2013-07-23 RU RU2013134674/15A patent/RU2533272C1/en active IP Right Revival
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2376604C2 (en) * | 2007-11-02 | 2009-12-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханская государственная медицинская академия" Росздрава | Method for detection of antigen or antibody in immune-enzyme analysis |
| RU2464573C1 (en) * | 2011-02-21 | 2012-10-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Сибирского отделения РАМН | Instrument-free diagnostic technique for pseudotuberculosis |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| РАЕВ М.Б. Неинструментальные иммунодиагностические системы на основе углеродных наночастиц Санкт-Петербург 13.03.2008. Автореферат [он-лайн] [найдено 26.05.2014] [Найдено из google.ru: http://medical-diss.com/docpager/62808/a/normal/1]. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Feyssaguet et al. | Multicenter comparative study of a new ELISA, PLATELIA™ RABIES II, for the detection and titration of anti-rabies glycoprotein antibodies and comparison with the rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT) on human samples from vaccinated and non-vaccinated people | |
| US9389229B2 (en) | Methods for detecting and measuring aggregation | |
| Almanzar et al. | Assessment of IgG avidity against pertussis toxin and filamentous hemagglutinin via an adapted enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using ammonium thiocyanate | |
| Felman et al. | Syphilis serology today | |
| JP2010521680A (en) | Cellular immune response assay and kit therefor | |
| Rheins et al. | A modification of the latex-fixation test for the study of rheumatoid arthritis | |
| Rockstroh et al. | Specific detection and differentiation of tick‐borne encephalitis and West Nile virus induced IgG antibodies in humans and horses | |
| Bulat Lokas et al. | Allergen‐Specific IgE Measurement: Intermethod Comparison of Two Assay Systems in Diagnosing Clinical Allergy | |
| CN113624972A (en) | A dry immunofluorescence chromatography type A/B influenza virus antigen detection kit | |
| Zhang et al. | Development of receptor binding domain-based double-antigen sandwich lateral flow immunoassay for the detection and evaluation of SARS-CoV-2 neutralizing antibody in clinical sera samples compared with the conventional virus neutralization test | |
| Bergmann et al. | Comparison of four commercially available point-of-care tests to detect antibodies against canine distemper virus in dogs | |
| Warrener et al. | Evaluation of a rapid diagnostic test for measles IgM detection; accuracy and the reliability of visual reading using sera from the measles surveillance programme in Brazil, 2015 | |
| RU2533272C1 (en) | Method for estimating level of post-vaccine immunity to influenza virus | |
| Tater et al. | Effects of routine prophylactic vaccination or administration of aluminum adjuvant alone on allergen-specific serum IgE and IgG responses in allergic dogs | |
| Ferentinos et al. | Validation of dried blood spot sampling for detecting SARS-CoV-2 antibodies and total immunoglobulins in a large cohort of asymptomatic young adults | |
| RU2464573C1 (en) | Instrument-free diagnostic technique for pseudotuberculosis | |
| RU2472162C1 (en) | Method of serologic diagnosis of viral gastrointestinal infections in cattle by method of enzyme-immunoassay | |
| Semelka et al. | Frailty and age impact immune responses to Moderna COVID-19 mRNA vaccine | |
| JP3547729B2 (en) | Assay | |
| Mendoza-Benitez et al. | Evaluation of the Interference of Lipemia and Hemolysis in the Detection Limit of Anti-HIV-1 Antibodies. | |
| Sun et al. | Quantified CSF antibody reactivity against myelin in multiple sclerosis | |
| Contin‐Bordes et al. | Comparison of ADVIA Centaur® and Pharmacia UniCAP® tests in the diagnosis of food allergy in children with atopic dermatitis | |
| JP2008107154A (en) | Diagnosis method of Japanese cedar pollinosis | |
| Sallam et al. | Prevalence and classes of SARS-CoV-2 antibodies among COVID-19 suspected patients who attended a health care setting in Sana’a, Yemen | |
| Karameşe et al. | A comparison of a new diagnostic test of the human Brucellosis, the Brucella Coombs Gel Test, with other methods |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190724 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20210426 |