RU2530612C1 - Method for nematode preparation for morphological and histological examination - Google Patents
Method for nematode preparation for morphological and histological examination Download PDFInfo
- Publication number
- RU2530612C1 RU2530612C1 RU2013141727/15A RU2013141727A RU2530612C1 RU 2530612 C1 RU2530612 C1 RU 2530612C1 RU 2013141727/15 A RU2013141727/15 A RU 2013141727/15A RU 2013141727 A RU2013141727 A RU 2013141727A RU 2530612 C1 RU2530612 C1 RU 2530612C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mixture
- castor oil
- fixing
- nematodes
- ethanol
- Prior art date
Links
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 12
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 title abstract 2
- 238000011206 morphological examination Methods 0.000 title abstract 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 62
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 31
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 30
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 claims abstract description 15
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 claims abstract description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 12
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 27
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 16
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 claims description 11
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims description 11
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 claims description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 abstract 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 abstract 1
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 241000243988 Dirofilaria immitis Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 210000003484 anatomy Anatomy 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 241001442499 Dirofilaria repens Species 0.000 description 1
- 208000003917 Dirofilariasis Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 201000009361 ascariasis Diseases 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 229940099686 dirofilaria immitis Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 238000005429 filling process Methods 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 244000000013 helminth Species 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000005184 irreversible process Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарной медицине, и биологии, в частности к гистологической технике, и может быть использовано для изготовления гистологических препаратов нематод (круглых гельминтов) при проведении научных морфологических исследований в ВУЗах и НИИ ветеринарного и биологического профиля.The invention relates to veterinary medicine, and biology, in particular to a histological technique, and can be used for the manufacture of histological preparations of nematodes (round helminths) during scientific morphological studies in universities and research institutes of veterinary and biological profile.
В настоящее время в нашей стране и за рубежом используется стандартный способ изготовления гистологических препаратов, который не изменился за последние 60 лет (Роскин Г.И. Микроскопическая техника. Изд-во «Наука», М., 1951, 447 с., Семченко В.В., Барашкова С.А., Ноздрин В.П., Артемьев В.Н. Гистологическая техника - 3-е изд. - Омск - Орел, 2006. - 290 с.). Стандартная схема изготовления гистологических препаратов при использовании заливки в парафин обязательно включает следующие операции.Currently, in our country and abroad, a standard method for the manufacture of histological preparations is used, which has not changed over the past 60 years (G. Roskin, Microscopic Technique. Nauka Publishing House, Moscow, 1951, 447 pp., Semchenko V .V., Barashkova S.A., Nozdrin V.P., Artemyev V.N. Histological technique - 3rd ed. - Omsk - Orel, 2006. - 290 p.). The standard manufacturing procedure for histological preparations when using paraffin embedding necessarily includes the following operations.
1. Фиксация гистологического материала (кусочков различных органов и тканей). Для фиксации чаще всего используют нейтральный или забуференный раствор формалина.1. Fixation of histological material (pieces of various organs and tissues). For fixation, a neutral or buffered formalin solution is most often used.
2. Промывка фиксированного материала в проточной воде.2. Flushing fixed material in running water.
3. Обезвоживание с помощью батареи спиртов возрастающей концентрации (50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 96% и 100% этанол).3. Dehydration with a battery of alcohols of increasing concentration (50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 96% and 100% ethanol).
4. Пропитывание в хлороформе (или бензоле, толуоле).4. Impregnation in chloroform (or benzene, toluene).
5. Пропитывание в смеси хлороформа (или бензола, толуола) и парафина в термостате при 37 градусах.5. Soaking in a mixture of chloroform (or benzene, toluene) and paraffin in a thermostat at 37 degrees.
6. Пропитывание расплавленным парафином в термостате при 56 градусах и заливка в парафин. Время экспозиции во всех предыдущих операциях зависят от размеров кусочков органов.6. Impregnation with molten paraffin in a thermostat at 56 degrees and pouring in paraffin. The exposure time in all previous operations depends on the size of the pieces of organs.
Также известен способ подготовки биологического материала для морфологического и гистологического исследования, включающий фиксацию исследуемого материала смесью 70% этилового спирта с 10% нейтральным формалином, его обезвоживание в спиртах, заливку смесью равных частей касторового масла и целлоидина, промывку материала от касторового масла, пропитку парафином посредством термостатирования и дополнительную заливку парафином (Г.А. Меркулов, Курс патологогистологической техники, Изд-во «Медицина», 1969 г., с.60-61 - прототип).Also known is a method of preparing biological material for morphological and histological studies, including fixing the test material with a mixture of 70% ethyl alcohol with 10% neutral formalin, dehydrating it in alcohols, pouring equal parts of castor oil and celloidin with a mixture, washing the material from castor oil, and paraffin impregnating with temperature control and additional paraffin filling (G.A. Merkulov, Course of pathological histological equipment, Publishing House "Medicine", 1969, S. 60-61 - prototype).
Недостатками известных технических решений являются - длительность процесса изготовления препаратов из-за продолжительного времени фиксации, подбора батареи спиртов возрастающей концентрации для обезвоживания и недостаточный срок хранения без изменения гистологических структур исследуемого материала, а также отсутствие возможности качественного морфологического и гистологического исследования срезов нематод, организм которых состоит из дыхательной, пищеварительной и других систем, состоящих из разного вида тканей, насыщенных жидкостью, что препятствует изготовлению качественных срезов, для исследования которых требуются разные смеси для фиксации и методы обезвоживания.The disadvantages of the known technical solutions are the length of the manufacturing process of the preparations due to the long fixation time, the selection of a battery of alcohol of increasing concentration for dehydration and the insufficient shelf life without changing the histological structures of the test material, as well as the lack of the possibility of a qualitative morphological and histological study of sections of nematodes whose body consists from the respiratory, digestive and other systems consisting of different types of tissues saturated with dkostyu that prevents the production of high-quality sections for the study of which requires a different mixture for fixation and dehydration methods.
Техническим результатом является сокращение срока, повышение срока хранения без изменения гистологических структур исследуемого материала и качество окраски ткани исследуемого материала для исследований.The technical result is to shorten the shelf life, increase the shelf life without changing the histological structures of the test material and the quality of the dyeing of the test material for research.
Технический результат достигается тем, что в способе подготовки нематод для морфологического и гистологического исследования, включающем фиксацию исследуемого материала смесью этилового спирта с 10% нейтральным формалином, его обезвоживание в спиртах, заливку смесью равных частей касторового масла и целлоидина, промывку материала от касторового масла, пропитку парафином посредством термостатирования и дополнительную заливку парафином, согласно изобретению в качестве исследуемого материала используют нематоды, фиксирующая смесь дополнительно содержит хлорид натрия в количестве не более 1 г на 100 мл смеси, при этом используют 70% этиловый спирт и берут его с 10% нейтральным формалином при следующем соотношении: 9:1, при этом фиксацию осуществляют в течение 3-4 часов, обезвоживание проводят пятикратно 96% этиловым спиртом и заливку исследуемого материала смесью касторового масла и целлоидина выдерживают в течение 10-12 часов.The technical result is achieved by the fact that in the method of preparing nematodes for morphological and histological studies, including fixing the test material with a mixture of ethyl alcohol with 10% neutral formalin, dehydrating it in alcohols, pouring a mixture of equal parts of castor oil and celloidine, washing the material from castor oil, impregnating paraffin by means of temperature control and additional paraffin filling, according to the invention, nematodes are used as the test material, fixing the mixture to optionally contains sodium chloride in an amount of not more than 1 g per 100 ml of the mixture, using 70% ethyl alcohol and taking it with 10% neutral formalin in the following ratio: 9: 1, while fixing is carried out for 3-4 hours, dehydration five times with 96% ethanol is carried out and the test material is poured with a mixture of castor oil and celloidine and incubated for 10-12 hours.
Новизна заявляемого способа заключается в том, что использование новой совокупности признаков, а именно: фиксирующая смесь, содержащая хлорид натрия в количестве не более 1 г на 100 мл смеси, 70% этиловый спирт и 10% нейтральный формалин, взятые соответственно при соотношении: 9:1, обезвоживание которое проводят пятикратно 96% этиловым спиртом; осуществление фиксации в течение 3-4 часов и заливка исследуемого материала смесью касторового масла и целлоидина, которую выдерживают в течение 10-12 часов, обеспечивает сокращение срока и повышение качества подготовки нематод для морфологического и гистологического исследования за счет исключения набухания и сморщивания тканей исследуемого материала, а также увеличение срока хранения без изменения гистологических структур исследуемого материала. Причем следует отметить, что, по заключению паразитологов, заявляемый способ применим для исследования всех видов нематод, вызывающих болезни как у растений, так у животных и человека, например Dirofilaria immitis, Dirofilaria repens - вызывают дирофиляриоз, геманхоз у животных и человека; Askaridia suis - вызывает заболевание у свиней - аскаридоз и гетерокидоз. Качественно полученный срез нематод позволяет точно описать новые виды нематод и точнее определить вид или класс, к которому они относятся, а значит, появляется возможность более точно определить метод лечения болезней, вызываемых нематодами.The novelty of the proposed method lies in the fact that the use of a new set of features, namely: a fixing mixture containing sodium chloride in an amount of not more than 1 g per 100 ml of the mixture, 70% ethyl alcohol and 10% neutral formalin, taken respectively with a ratio of: 9: 1, dehydration which is carried out five times with 96% ethanol; fixing for 3-4 hours and pouring the test material with a mixture of castor oil and celloidin, which is held for 10-12 hours, provides a shorter time period and an improvement in the quality of preparation of nematodes for morphological and histological studies by eliminating the swelling and wrinkling of the tissues of the test material, as well as increasing the shelf life without changing the histological structures of the test material. Moreover, it should be noted that, according to the conclusion of parasitologists, the claimed method is applicable for the study of all types of nematodes that cause diseases in plants, animals and humans, for example, Dirofilaria immitis, Dirofilaria repens - cause dirofilariasis, hemanchosis in animals and humans; Askaridia suis - causes a disease in pigs - ascariasis and heterokidosis. A qualitatively obtained section of nematodes allows you to accurately describe new types of nematodes and to more accurately determine the type or class to which they belong, which means that it becomes possible to more accurately determine the method of treatment of diseases caused by nematodes.
Предлагаемый способ работоспособный, воспроизводимый и нашел применение в ветеринарной медицине, в частности используется на кафедре анатомии Кубанского агроуниверситета и в лаборатории гистологии Краснодарского ветеринарного НИИ, что отвечает критерию охраноспособности «промышленная применимость».The proposed method is workable, reproducible and has found application in veterinary medicine, in particular, it is used at the Department of Anatomy of the Kuban Agricultural University and in the histology laboratory of the Krasnodar Veterinary Research Institute, which meets the industrial applicability criterion.
По данным научно-технической и патентной литературы не обнаружена аналогичная совокупность признаков, позволяющая достигать технический результат, получаемый заявленным способом, что позволяет утверждать о наличии «изобретательского уровня».According to the scientific, technical and patent literature, a similar set of features has not been found that allows to achieve a technical result obtained by the claimed method, which allows us to claim the presence of "inventive step".
Сущность изобретения поясняется иллюстрирующим материалом, где на фото 1 представлен окрашенный срез нематоды, полученный стандартным способом подготовки; на фото 2 представлен окрашенный срез нематоды, полученный заявляемым способом подготовки.The invention is illustrated by illustrative material, where photo 1 shows a colored section of a nematode obtained by a standard preparation method; photo 2 shows a stained section of a nematode obtained by the claimed preparation method.
Способ подготовки нематод для морфологического и гистологического исследования осуществляется следующим образом.The method of preparation of nematodes for morphological and histological studies is as follows.
Для исследования были отобраны нематоды вида Dirofilaria immitis, в половозрелой стадии, имеющие размер от 8 см до 24 см. Для опыта были отобраны особи размером от 1 до 2 (см).For the study, nematodes of the species Dirofilaria immitis, in a mature stage, ranging in size from 8 cm to 24 cm were selected. For the experiment, individuals from 1 to 2 (cm) in size were selected.
Для подготовки нематод предварительно их помещают в фиксирующую смесь, состоящую из 70% этилового спирта с 10% нейтральным формалином, взятых в соотношении 9:1 и 1 г хлорида натрия на 100 мл смеси на 3-4 часа. Количество компонентов, входящих в состав смеси, обусловлено следующим: при использовании 70% этанола происходит не такое резкое сжатие белковых молекул, как при использовании 96% этилового спирта. С целью смягчения действия этанола добавляют 10% нейтральный формалин, который способствует физико-химическому процессу сжатия материала, потом набухания и затем вторичного сжатия, для того чтобы обеспечить баланс действия этанола и формалина, их берут в соотношении 9:1, при нарушении этого соотношения, например, если этанола будет больше, то будет большее количество не восстановленных молекул белков, а при меньшем количестве не будет осуществляться достаточное осаждение белков, что касается количества формалина, то при большем его количестве будут происходить необратимые процессы, приводящие к разрушению молекул, при меньшем количестве - будет происходить не полноценный физико-химический процесс. Таким образом, нарушение соотношения между этанолом и формалином приведет к не качественному приготовлению тканей нематод. Добавление в фиксирующую смесь хлорида натрия в количестве 1 г обеспечивает равномерную диффузию этанола с формалином в толщу материала, обеспечивая осмотическое давление, аналогичное прижизненному, сохраняя при этом физико-химические свойства ткани. При количестве меньше или больше 1 грамма нарушается равномерность диффузии, что ухудшает качество ткани. Кроме того, использование такого состава фиксирующей смеси обеспечивает возможность проводить фиксацию в более короткие сроки в течение 3-4 часов, что доказано экспериментально. При фиксации более 3-х часов уже сохраняются ткани и клетки прижизненного строения нематод, содержание и локализация химических веществ. После фиксации проводят промывку нематод от различных осадков фиксирующей смеси и пятикратное обезвоживание исследуемого материала 96% этиловым спиртом. Обезвоживание проводят в пяти чистых высушенных емкостях, заполненных 96% этиловым спиртом. Экспериментально доказано, что нет необходимости использовать батарею спиртов с повышающей концентрацией для обезвоживания нематод, ткани которых насыщены жидкостью, именно пятикратное использование 96% этилового спирта обеспечивает качественное обезвоживание, а при меньшем количестве происходит недостаточное обезвоживание, а при большем - происходит сморщивание. Далее исследуемый материал заливают смесью равных частей касторового масла и целлоидина, выдерживают в течение 10-12 часов. Использование касторового масла обеспечивает долгосрочное хранение без изменения гистологических структур исследуемого материала. Затем осуществляют промывку материала от касторового масла, пропитку парафином посредством термостатирования и дополнительную заливку парафином. После процесса заливки парафином делают срез нематод специальным режущим инструментом, например микротомом.To prepare the nematodes, they are preliminarily placed in a fixing mixture consisting of 70% ethanol with 10% neutral formalin, taken in a ratio of 9: 1 and 1 g of sodium chloride per 100 ml of the mixture for 3-4 hours. The number of components that make up the mixture is due to the following: when using 70% ethanol, the protein molecules are not compressed so sharply as when using 96% ethanol. In order to mitigate the action of ethanol, 10% neutral formalin is added, which contributes to the physicochemical process of compression of the material, then swelling and then secondary compression, in order to ensure a balance of the action of ethanol and formalin, they are taken in a ratio of 9: 1, in violation of this ratio, for example, if there is more ethanol, then there will be a larger number of unreduced protein molecules, and with a smaller amount, sufficient protein precipitation will not be carried out, as for the amount of formalin, then with a larger amount of it Irreversible processes will occur, leading to the destruction of molecules, with a smaller number, an incomplete physicochemical process will occur. Thus, a violation of the ratio between ethanol and formalin will lead to poor-quality preparation of nematode tissues. The addition of 1 g of sodium chloride to the fixing mixture ensures uniform diffusion of ethanol with formalin in the thickness of the material, providing osmotic pressure similar to in vivo, while maintaining the physicochemical properties of the tissue. When the quantity is less than or more than 1 gram, the uniformity of diffusion is violated, which affects the quality of the tissue. In addition, the use of such a composition of the fixing mixture provides the ability to fix in a shorter time within 3-4 hours, which is proved experimentally. When fixing for more than 3 hours, tissues and cells of the intravital structure of nematodes, the content and localization of chemicals are already preserved. After fixation, the nematodes are washed from various sediments of the fixing mixture and five-fold dehydration of the test material with 96% ethanol. Dehydration is carried out in five clean, dried containers filled with 96% ethanol. It has been experimentally proved that there is no need to use a battery of alcohols with a higher concentration for dehydration of nematodes whose tissues are saturated with liquid, just five times using 96% ethyl alcohol provides high-quality dehydration, and with less, dehydration occurs, and with a larger amount, wrinkling occurs. Next, the test material is poured with a mixture of equal parts of castor oil and celloidin, incubated for 10-12 hours. The use of castor oil provides long-term storage without changing the histological structures of the test material. Then the material is washed from castor oil, paraffin impregnated by means of temperature control and additional paraffin filling. After the paraffin filling process, the nematodes are cut with a special cutting tool, for example, a microtome.
В условиях научно-исследовательской лаборатории кафедры анатомии Кубанского агроуниверситета проводились опыты по подготовке нематод для гистологических исследований разными способами. В результате научных исследований выяснилось, что срез (фото 2), полученный из нематод, подготовленных предложенным способом, оказался более четким, чем срез (фото 1), полученный из нематод, подготовленных стандартным способом подготовки.In the conditions of the research laboratory of the Department of Anatomy of the Kuban Agricultural University, experiments were carried out to prepare nematodes for histological studies in different ways. As a result of scientific research, it turned out that the slice (photo 2) obtained from nematodes prepared by the proposed method turned out to be more clear than the slice (photo 1) obtained from nematodes prepared by the standard preparation method.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013141727/15A RU2530612C1 (en) | 2013-09-10 | 2013-09-10 | Method for nematode preparation for morphological and histological examination |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013141727/15A RU2530612C1 (en) | 2013-09-10 | 2013-09-10 | Method for nematode preparation for morphological and histological examination |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2530612C1 true RU2530612C1 (en) | 2014-10-10 |
Family
ID=53381725
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013141727/15A RU2530612C1 (en) | 2013-09-10 | 2013-09-10 | Method for nematode preparation for morphological and histological examination |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2530612C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2613175C1 (en) * | 2015-12-31 | 2017-03-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Чувашский государственный университет имени И.Н. Ульянова" | Method of manufacturing histological preparations |
| RU2645073C1 (en) * | 2016-09-26 | 2018-02-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины | Method for excavation of laboratory cultured lyrins of parasitic nematodes of the strongilate pillar |
| RU2703280C1 (en) * | 2018-11-07 | 2019-10-16 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии" (ФБУН "Ростов НИИ микробиологии и паразитологии") | Method of preparing samples of material for identification of nematode species by maldi toff biotyper method |
| RU2768162C1 (en) * | 2021-06-09 | 2022-03-23 | Мария Владимировна Видманова | Method for preparation of mature nematodes for identification by maldi tof mass spectrometry |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2186360C1 (en) * | 2000-11-04 | 2002-07-27 | Чернышева Елена Сергеевна | Method for diagnostics of helminthic invasion according to histological preparations out of feces and wet and method for preparing such preparations |
-
2013
- 2013-09-10 RU RU2013141727/15A patent/RU2530612C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2186360C1 (en) * | 2000-11-04 | 2002-07-27 | Чернышева Елена Сергеевна | Method for diagnostics of helminthic invasion according to histological preparations out of feces and wet and method for preparing such preparations |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Г.А. МЕРКУЛОВ, Курс патологогистологической техники, Изд-во медицина, 1969 г. с.60-61 РОСКИН Г.И. Микроскопическая техника. Изд.-во «Наука», М., 1951, с.447 Семченко В.В. и др. Гистологическая техника. 3-е изд. Омск - Орел, 2006, с.290 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2613175C1 (en) * | 2015-12-31 | 2017-03-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Чувашский государственный университет имени И.Н. Ульянова" | Method of manufacturing histological preparations |
| RU2645073C1 (en) * | 2016-09-26 | 2018-02-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины | Method for excavation of laboratory cultured lyrins of parasitic nematodes of the strongilate pillar |
| RU2703280C1 (en) * | 2018-11-07 | 2019-10-16 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии" (ФБУН "Ростов НИИ микробиологии и паразитологии") | Method of preparing samples of material for identification of nematode species by maldi toff biotyper method |
| RU2768162C1 (en) * | 2021-06-09 | 2022-03-23 | Мария Владимировна Видманова | Method for preparation of mature nematodes for identification by maldi tof mass spectrometry |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102279121B (en) | Green making technology of animal tissue paraffin section | |
| Zanini et al. | Evaluation of two commercial and three home-made fixatives for the substitution of formalin: a formaldehyde–free laboratory is possible | |
| DE602004004138T2 (en) | PROCESS FOR PREPARING HISTOLOGICAL SAMPLES | |
| RU2530612C1 (en) | Method for nematode preparation for morphological and histological examination | |
| WO2007077199A2 (en) | A method for treating a biological sample | |
| CN109470534B (en) | Pathological tissue transparent dewaxing liquid and preparation method thereof | |
| EP2823282B1 (en) | Fomalin free fixatives for histological staining of tissue samples | |
| ATE485502T1 (en) | METHOD AND DEVICE FOR PRODUCING AND PRESENTING A TISSUE SAMPLE FOR HISTOLOGICAL EXAMINATION | |
| CN107843470A (en) | A kind of preparation method of Skin slice | |
| Sani et al. | Pharmacognostic studies of the stem bark of Detarium microcarpum | |
| CN103471898A (en) | Rapid neuron staining method based on Golgi silver staining method | |
| RU2499242C2 (en) | Method for preparing biological tissue samples for histopathological examinations | |
| Kingsbury | Histological technique: A guide for use in a laboratory course in histology | |
| CN106018019A (en) | Dehydration liquid prepared from compound type biological tissue samples | |
| RU2429462C2 (en) | Optical clarification of biological tissue specimens | |
| CN104865115A (en) | Method used for detecting monoclonal antibody drug tissue cross-reactivity with fresh frozen tissues | |
| CN111487096A (en) | Method for analyzing distribution and damage degree of micro-plastic by using zebra fish | |
| RU2408887C1 (en) | Method to produce histological preparations and compositions for its realisation (versions) | |
| JP3723204B1 (en) | Impermeable tissue quick fixative | |
| RU2530613C1 (en) | Nematode histodiasnosis fixative | |
| US20250369839A1 (en) | Improved composition for the treatment of biological, cytological, histological and autopsical samples | |
| Monfils et al. | A quantitative comparison of synaptic density following perfusion versus immersion fixation in the rat cerebral cortex | |
| Mardiyyaningsih et al. | Preparation of leaf anatomy slide using modification protocols | |
| RU2716216C1 (en) | Method of staining a nerve cell | |
| Vorobievskaya et al. | Production of biologically and toxicologically safe semi-solid and wet anatomic preparations |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150911 |