RU2522952C1 - Method of obtaining lipophilic substances from chaga - Google Patents
Method of obtaining lipophilic substances from chaga Download PDFInfo
- Publication number
- RU2522952C1 RU2522952C1 RU2013116569/15A RU2013116569A RU2522952C1 RU 2522952 C1 RU2522952 C1 RU 2522952C1 RU 2013116569/15 A RU2013116569/15 A RU 2013116569/15A RU 2013116569 A RU2013116569 A RU 2013116569A RU 2522952 C1 RU2522952 C1 RU 2522952C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- chaga
- extract
- melanin
- lipophilic substances
- fraction
- Prior art date
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 42
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 17
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 11
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 claims 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims 1
- -1 sterol compounds Chemical class 0.000 abstract description 23
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 abstract description 22
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 abstract description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 12
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 150000002634 lipophilic molecules Chemical class 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N (10S)-3c-Acetoxy-4.4.10r.13c.14t-pentamethyl-17c-((R)-1.5-dimethyl-hexen-(4)-yl)-(5tH)-Delta8-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren Natural products CC12CCC(OC(C)=O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C BQPPJGMMIYJVBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N (3beta,5alpha)-4,4-Dimethylcholesta-8,24-dien-3-ol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21 CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 14alpha-methylzymosterol Natural products CC12CCC(O)CC1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C XYTLYKGXLMKYMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-lanostan Natural products C1CC2C(C)(C)C(O)CCC2(C)C2C1C1(C)CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 FPTJELQXIUUCEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N Gluanol Natural products CC(C)CC=CC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4CC3 BKLIAINBCQPSOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N Lanosterol Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 LOPKHWOTGJIQLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N Nerifoliol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N dihydrolanosterol Natural products CC(C)CCCC(C)C1CCC2(C)C3=C(CCC12C)C4(C)CCC(C)(O)C(C)(C)C4CC3 QBSJHOGDIUQWTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N lanosterol Chemical compound C([C@]12C)C[C@@H](O)C(C)(C)[C@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@H]([C@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@@]21C CAHGCLMLTWQZNJ-RGEKOYMOSA-N 0.000 description 3
- 229940058690 lanosterol Drugs 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 3
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 2
- KKWJCGCIAHLFNE-UHFFFAOYSA-N 22R-hydroxylanosterol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(C(O)CC=C(C)C)C)CCC21C KKWJCGCIAHLFNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CSYGXJQNODZRQO-UHFFFAOYSA-N Inotodiol Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CCC2(C)C3=C(CC(O)C12C)C4(C)CCC(O)C(C)(C)C4CC3 CSYGXJQNODZRQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- KKWJCGCIAHLFNE-KFPHZHIMSA-N inotodiol Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@@H]([C@H](O)CC=C(C)C)C)CC[C@]21C KKWJCGCIAHLFNE-KFPHZHIMSA-N 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к получению фракции биологически активных липофильных соединений на основе лекарственного сырья - гриба чаги.The invention relates to the pharmaceutical industry, in particular to the production of a fraction of biologically active lipophilic compounds based on medicinal raw materials - fungus fungus.
Природные липофильные вещества, в частности стериновые соединения, обладают высоким фармакологическим потенциалом. Для ряда этих соединений, выделенных из чаги, показаны высокие противоопухолевые, имунномодулирующие и противовоспалительные свойства (Kahlos К. [and others] // Planta Medica. - 1986. - №52. - P. 554, Nakata T. [and others] // Bioorganic & Medicinal Chemistry. - 2007.- V.15, I. 1. - P.257-264; M.J. Chung [and others] // Nutrition research and practice. - 2010. - V.4, №3. - P.177-182).Natural lipophilic substances, in particular sterol compounds, have a high pharmacological potential. High antitumor, immunomodulating and anti-inflammatory properties are shown for a number of these compounds isolated from chaga (Kahlos K. [and others] // Planta Medica. - 1986. - No. 52. - P. 554, Nakata T. [and others] / / Bioorganic & Medicinal Chemistry. - 2007.- V.15, I. 1. - P.257-264; MJ Chung [and others] // Nutrition research and practice. - 2010. - V.4, No. 3. - P.177-182).
В настоящее время для получения биологически активных стериновых соединений и их производных в фармацевтической промышленности используется направленный химический синтез (Lednicer D. Steroid chemistry at a glance / D. Lednicer. - 2011. - 144 p.).Currently, to obtain biologically active sterol compounds and their derivatives in the pharmaceutical industry, directed chemical synthesis is used (Lednicer D. Steroid chemistry at a glance / D. Lednicer. - 2011. - 144 p.).
Недостатками химической технологии получения целевых соединений являются сложность и трудоемкость процесса, сопряженные с высокими экономическими затратами.The disadvantages of the chemical technology for obtaining the target compounds are the complexity and complexity of the process, associated with high economic costs.
Известен способ выделения биологически активных соединений из сухого экстракта чаги (Г.Л. Рыжова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 1997. - №10. - С.44-47). Способ включает осаждение меланина путем подкисления хлористоводородной кислотой экстракта чаги, проведение гидролиза меланина в автоклаве при давлении 1,5 атм и температуре 126°С, дальнейшее экстрагирование гидролизата хлороформом и обработку бикарбонатом натрия.There is a method of isolating biologically active compounds from a dry extract of chaga (G.L. Ryzhova [et al.] // Chemical-Pharmaceutical Journal. - 1997. - No. 10. - P.44-47). The method includes precipitating melanin by acidifying the chaga extract with hydrochloric acid, hydrolyzing the melanin in an autoclave at a pressure of 1.5 atm and a temperature of 126 ° C, further extracting the hydrolyzate with chloroform and treating with sodium bicarbonate.
Недостатком данного способа является проведение гидролиза меланина в жестких условиях (повышенное давление и высокая температура), что не позволяет выделить биологически активные соединения в нативном состоянии. Способ позволяет извлечь в основном вещества фенольной природы, из липофильных соединений удается извлечь только высшие жирные кислоты.The disadvantage of this method is the hydrolysis of melanin in harsh conditions (high pressure and high temperature), which does not allow to isolate biologically active compounds in their native state. The method allows to extract mainly substances of a phenolic nature, only higher fatty acids can be extracted from lipophilic compounds.
Наиболее близким к заявляемому способу является способ выделения липофильных соединений из водного экстракта чаги (W. Mazurkiewicz [and others] // Acta Poloniae Pharmaceutica. - 2010. - V.67, I. 4. - P.397-406). Сконцентрированный и высушенный водный экстракт чаги перерастворяют в горячей воде, проводят гидролиз хлористоводородной кислотой, отделяют осадок 1, оставшийся фильтрат упаривают досуха и получают осадок 2. Осадки 1 и 2 обрабатывают этилацетатом и метанолом, полученные экстракты объединяют и удаляют растворители под вакуумом с получением сухого остатка черного цвета. Разделение веществ сухого остатка проводят с помощью колоночной хроматографии. Был идентифицирован ряд биологически активных соединений, в том числе липофильные, представленные насыщенными и ненасыщенными углеводородами, высшими алифатическими спиртами и альдегидами, высшими жирными кислотами и их эфирами.Closest to the claimed method is a method of isolating lipophilic compounds from an aqueous extract of chaga (W. Mazurkiewicz [and others] // Acta Poloniae Pharmaceutica. - 2010. - V.67, I. 4. - P.397-406). The concentrated and dried chaga aqueous extract is redissolved in hot water, hydrolysis is carried out with hydrochloric acid, precipitate 1 is separated, the remaining filtrate is evaporated to dryness and precipitate 2 is obtained. Precipitates 1 and 2 are treated with ethyl acetate and methanol, the resulting extracts are combined and the solvents removed under vacuum to obtain a dry residue black color. The separation of solids is carried out using column chromatography. A number of biologically active compounds have been identified, including lipophilic, represented by saturated and unsaturated hydrocarbons, higher aliphatic alcohols and aldehydes, higher fatty acids and their esters.
Данный способ не позволяет извлечь из сырья стериновые соединения, а использование кислотного гидролиза, как и в вышеописанном способе, приводит к изменению химической структуры биологически активных веществ.This method does not allow to extract sterol compounds from raw materials, and the use of acid hydrolysis, as in the above method, leads to a change in the chemical structure of biologically active substances.
Технической задачей настоящего изобретения является разработка способа получения фракции биологически активных липофильных веществ, включающих стериновые соединения, из чаги.An object of the present invention is to develop a method for producing a fraction of biologically active lipophilic substances, including sterol compounds, from chaga.
Поставленная задача достигается способом, в котором сначала из водного экстракта чаги осаждают меланин путем добавления водного раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0, удаляют фильтрат, меланин экстрагируют петролейным эфиром при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, причем массовое соотношение меланин:петролейный эфир составляет 1:5, затем смесь замораживают, а после размораживания отделяют слой органического экстракта, удаляют растворитель с получением сухого остатка фракции липофильных веществ.The problem is achieved in a way in which melanin is first precipitated from an aqueous extract of chaga by adding an aqueous solution of hydrochloric acid to a pH of 1.5-2.0, the filtrate is removed, the melanin is extracted with petroleum ether with stirring to obtain a mixture of a uniform consistency, and the mass ratio of melanin: petroleum ether is 1: 5, then the mixture is frozen, and after thawing, the organic extract layer is separated, the solvent is removed to obtain a dry residue of the lipophilic substances fraction.
Технический результат заключается в получении фракции биологически активных липофильных веществ, включающих стериновые соединения.The technical result consists in obtaining a fraction of biologically active lipophilic substances, including sterol compounds.
Сущность способа заключается в следующем.The essence of the method is as follows.
Для осаждения меланина используют водный экстракт чаги, так как экстракция чаги водой позволяет извлечь из нее максимальное количество меланина по сравнению с другими растворителями. При этом водный экстракт чаги может быть получен любым известным способом (например, способом, описанным в патенте RU №2343930). После добавления к экстракту чаги водного раствора хлористоводородной кислоты происходит осаждение меланина. После удаления фильтрата меланин с влажностью 90±2% экстрагируют петролейным эфиром, выбор которого в качестве растворителя обоснован селективностью по отношению к липофильным веществам чаги, в том числе и к стериновым соединениям, при этом в петролейном эфире не растворяются вещества фенольной природы, содержащиеся в чаге в значительном количестве. Экстрагирование проводят при перемешивании до получения смеси однородной консистенции. Массовое соотношение меланин:эфир 1:5 является оптимальным для получения однородной стабильной при нормальных условиях смеси, разрушение которой возможно лишь при замораживании. После размораживания происходит разделение смеси на два слоя: верхний слой органического экстракта и нижний водный слой.An aqueous extract of chaga is used to precipitate melanin, since the extraction of chaga with water makes it possible to extract the maximum amount of melanin from it compared to other solvents. In this case, an aqueous extract of chaga can be obtained by any known method (for example, by the method described in patent RU No. 2343930). After adding an aqueous solution of hydrochloric acid to the chaga extract, melanin precipitates. After removal of the filtrate, melanin with a moisture content of 90 ± 2% is extracted with petroleum ether, the choice of which as a solvent is justified by the selectivity for chaga lipophilic substances, including sterol compounds, while phenolic substances contained in chaga are not soluble in petroleum ether in a significant amount. The extraction is carried out with stirring until a mixture of uniform consistency is obtained. The mass ratio of melanin: ether 1: 5 is optimal to obtain a homogeneous mixture stable under normal conditions, the destruction of which is possible only by freezing. After thawing, the mixture is divided into two layers: the upper layer of the organic extract and the lower aqueous layer.
Верхний слой органического экстракта, содержащий липофильные вещества, отделяют, после удаления растворителя под вакуумом получают сухой остаток фракции липофильных веществ.The upper layer of the organic extract containing lipophilic substances is separated, after removal of the solvent under vacuum, a dry residue of the fraction of lipophilic substances is obtained.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.The invention is illustrated by the following examples of specific performance.
Получение фракции липофильных соединений проводили при использовании различных партий сырья чаги, поскольку сырье может существенно отличаться по количественному и качественному составу липофильных веществ в зависимости от места и времени сбора или от возраста гриба.The fraction of lipophilic compounds was obtained using various lots of chaga raw materials, since the raw materials can significantly differ in the quantitative and qualitative composition of lipophilic substances depending on the place and time of collection or on the age of the fungus.
Пример 1.Example 1
Использовали сырье ООО «КФХ «Кентавр», партия 011209.We used the raw materials of LLC “KFH“ Centaur ”, lot 011209.
Водный экстракт чаги получали по фармакопейной статье (Государственная Фармакопея СССР: Вып.2. - М.: Медицина, 1990. - 400 с.).Chaga water extract was obtained according to the pharmacopeia article (State Pharmacopoeia of the USSR: Issue 2. - M .: Medicine, 1990. - 400 p.).
50 г чаги заливали 1200 мл воды, настаивали 1 ч при комнатной температуре, далее кипятили 2 ч, отделяли экстракт и доводили объем экстракта до 2500 мл. Из водного экстракта добавлением 25% раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0 осаждали 50±2 г меланина, фильтрат удаляли. К меланину приливали 250 мл петролейного эфира и проводили экстрагирование при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, затем смесь замораживали, после размораживания отделяли верхний слой органического экстракта, удаляли петролейный эфир на вакуумном испарителе при 25-30°С и получали 0,033±0,001 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составило 2,83±0,20 мас.% от экстрактивных веществ.50 g of chaga were poured into 1200 ml of water, insisted for 1 h at room temperature, then boiled for 2 h, the extract was separated and the extract volume was adjusted to 2500 ml. From the aqueous extract, 50 ± 2 g of melanin was precipitated by adding a 25% solution of hydrochloric acid to a pH of 1.5-2.0, and the filtrate was removed. 250 ml of petroleum ether was added to melanin and extraction was carried out with stirring until a mixture of homogeneous consistency was obtained, then the mixture was frozen, after thawing the upper layer of the organic extract was separated, the petroleum ether was removed on a vacuum evaporator at 25-30 ° С and 0.033 ± 0.001 g of lipophilic fraction was obtained substances. The obtained fraction of lipophilic substances shows the presence of sterol compounds, the quantitative content of which was 2.83 ± 0.20 wt.% Of the extractives.
Пример 2.Example 2
Использовали сырье ОАО «Красногорсклексредства», партия 61208.We used raw materials of Krasnogorsklexredstvo OJSC, batch 61208.
Водный экстракт чаги получали методом ремацерации (патент RU №2343930, А61К 36/06, B01D 11/02, 2007).An aqueous extract of chaga was obtained by the method of remaceration (patent RU No. 2343930, A61K 36/06, B01D 11/02, 2007).
50 г чаги заливали 300 мл воды, настаивали 5 ч при температуре 70°С, отделяли экстракт с первой стадии, к оставшемуся шроту чаги добавляли 200 мл воды, настаивали еще 5 ч при температуре 70°С, отделяли экстракт со второй стадии и объединяли с экстрактом с первой стадии. Из объединенного водного экстракта (390±10 мл) добавлением 25% раствора хлористоводородной кислоты до pH 1,5-2,0 осаждали 50±3 г меланина, фильтрат удаляли. К меланину приливали 250 мл петролейного эфира и проводили экстрагирование при перемешивании до получения смеси однородной консистенции, затем смесь замораживали, после размораживания отделяли верхний слой органического экстракта, удаляли петролейный эфир на вакуумном испарителе и получали 0,0387±0,0165 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составило 3,53±0,83 мас.% от экстрактивных веществ.50 g of chaga were poured into 300 ml of water, insisted for 5 hours at 70 ° C, the extract was separated from the first stage, 200 ml of water was added to the remaining chaga meal, insisted for another 5 hours at 70 ° C, the extract was separated from the second stage and combined with extract from the first stage. From the combined aqueous extract (390 ± 10 ml), 50 ± 3 g of melanin was precipitated by adding a 25% solution of hydrochloric acid to a pH of 1.5-2.0, and the filtrate was removed. 250 ml of petroleum ether was added to melanin and extraction was carried out with stirring until a mixture of uniform consistency was obtained, then the mixture was frozen, after thawing, the upper layer of the organic extract was separated, the petroleum ether was removed on a vacuum evaporator and 0.0387 ± 0.0165 g of lipophilic substances fraction was obtained. The obtained fraction of lipophilic substances shows the presence of sterol compounds, the quantitative content of which was 3.53 ± 0.83 wt.% Of the extractives.
Пример 3.Example 3
Аналогичен примеру 2, но использовано сырье ОАО «Красногорсклексредства», партия 10210.Similar to example 2, but the raw materials used by OJSC Krasnogorsklexredstva, party 10210.
Получили 0,0097±0,0046 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составляет 7,98±1,46 мас.% от экстрактивных веществ.Received 0.0097 ± 0.0046 g of a fraction of lipophilic substances. The obtained fraction of lipophilic substances shows the presence of sterol compounds, the quantitative content of which is 7.98 ± 1.46 wt.% Of the extractives.
Пример 4.Example 4
Аналогичен примеру 2, но использовано сырье ООО «КФХ «Кентавр», партия 011209.Similar to example 2, but the raw materials used by LLC “KFH“ Centaur ”, lot 011209.
Получили 0,0113±0,002 г фракции липофильных веществ. В полученной фракции липофильных веществ показано наличие стериновых соединений, количественное содержание которых составляет 9,9±0,3 мас.% от экстрактивных веществ.Received 0.0113 ± 0.002 g of a fraction of lipophilic substances. In the obtained fraction of lipophilic substances, the presence of sterol compounds is shown, the quantitative content of which is 9.9 ± 0.3 wt.% Of the extractives.
Качественный состав полученных фракций липофильных веществ определяли методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Sorbfil» с использованием двух систем растворителей: для разделения нейтральных липофильных соединений - №1 (петролейный эфир - диэтиловый эфир - уксусная кислота в соотношении 90:10:1, Кейтс М. Техника липидологии / М. Кейтс. - М., 1975. - 324 с.) и для разделения стериновых соединений - №2 (толуол - муравьиная кислота - этилацетат в соотношении 5:1:4, Y. Shin [and others] // Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I. 4. - P.313-316).The qualitative composition of the obtained fractions of lipophilic substances was determined by thin-layer chromatography on Sorbfil plates using two solvent systems: for separation of neutral lipophilic compounds - No. 1 (petroleum ether - diethyl ether - acetic acid in a ratio of 90: 10: 1, Cates M. Technique lipidology / M. Cates. - M., 1975. - 324 p.) and for the separation of sterol compounds - No. 2 (toluene - formic acid - ethyl acetate in the ratio 5: 1: 4, Y. Shin [and others] // Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I. 4. - P.313-316).
Хроматограммы обрабатывали специфичным реагентом на стериновые соединения - раствором хлорного железа (Кейтс М. Техника липидологии / М. Кейтс.- М., 1975. - 324 с.). Идентификацию веществ проводили по значениям коэффициента распределения (Rf). Присутствие в экстрактах сквалена и ланостерола подтверждено использованием стандартов-метчиков: Lanosterol (№8446793-1ЕА Sigma-Aldrich) и Squalene (№83626-10ML Sigma-Aldrich).Chromatograms were treated with a specific reagent for sterol compounds - a solution of ferric chloride (Cates M. Technique of lipidology / M. Cates.- M., 1975. - 324 p.). Identification of substances was carried out according to the values of the distribution coefficient (Rf). The presence of squalene and lanosterol in the extracts was confirmed using standard taps: Lanosterol (No. 84,46793-1EA Sigma-Aldrich) and Squalene (No. 83626-10ML Sigma-Aldrich).
Результаты хроматографии представлены в таблицах 1 и 2.The chromatography results are presented in tables 1 and 2.
∗∗ - для сырья ОАО «Красногорсклексредства», партия 10210. * - Cates M. Technique of lipidology / M. Cates.- M., 1975. - 324 s;
∗∗ - for the raw materials of Krasnogorsklexredstvo OJSC, batch 10210.
Данные, приведенные в таблице 1, показывают, что независимо от исходного сырья и способа получения водного экстракта чаги все полученные фракции липофильных соединений, содержат ряд биологически активных веществ, в том числе и стериновые соединения. Из обнаруженных веществ при хроматографировании в системе №2 были идентифицированы 5 стериновых соединений (табл.2), обладающих выраженной биологической активностью (Y. Shin [and others] // Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I. 4. - P.313-316.). Неидентифицированные соединения с Rf=0,89-0,90, 0,61-0,63 и 0,37-0,38 также можно отнести к стериновым веществам по специфической окраске пятен на хроматограмме.The data shown in table 1 show that, regardless of the feedstock and the method of obtaining an aqueous extract of chaga, all obtained fractions of lipophilic compounds contain a number of biologically active substances, including sterol compounds. Of the detected substances, chromatography in system No. 2 identified 5 sterol compounds (Table 2) with pronounced biological activity (Y. Shin [and others] // Journal of Wood Science. - 2001. - V.47, I. 4 . - P.313-316.). Unidentified compounds with R f = 0.89-0.90, 0.61-0.63 and 0.37-0.38 can also be attributed to sterol substances according to the specific color of the spots on the chromatogram.
Спектрофотометрическим методом было определено количество стериновых соединений во фракциях липофильных веществ, выделенных из водных экстрактов чаги (Антипов Л.В. Физические методы контроля сырья и продуктов в мясной промышленности. - СПб.: ГИОРД, 2006. - 200 с.). Показано, что в зависимости от используемой партии сырья их содержание составляет 2,83-9,90 мас.% от экстрактивных веществ фракций.The spectrophotometric method was used to determine the amount of sterol compounds in the fractions of lipophilic substances isolated from water extracts of chaga (Antipov L.V. Physical methods for controlling raw materials and products in the meat industry. - St. Petersburg: GIORD, 2006. - 200 p.). It is shown that, depending on the batch of raw materials used, their content is 2.83-9.90 wt.% Of the extractive substances of the fractions.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет извлечь из чаги фракцию липофильных веществ, включающих стериновые соединения, обладающие выраженной биологической активностью. Необходимо отметить, что на получение фракции липофильных веществ, включающих стериновые соединения, не оказывают влияние выбор партии сырья, а также способ получения водного экстракта чаги. Фракция липофильных веществ, полученная предлагаемым способом, может быть использована для разработки биологически активных добавок и лекарственных препаратов различной направленности действия.Thus, the proposed method allows to extract from chaga a fraction of lipophilic substances, including sterol compounds with pronounced biological activity. It should be noted that the choice of a batch of raw materials, as well as the method of obtaining an aqueous extract of chaga, do not influence the preparation of a fraction of lipophilic substances, including sterol compounds. The fraction of lipophilic substances obtained by the proposed method can be used to develop biologically active additives and drugs of various directions.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013116569/15A RU2522952C1 (en) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Method of obtaining lipophilic substances from chaga |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013116569/15A RU2522952C1 (en) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Method of obtaining lipophilic substances from chaga |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2522952C1 true RU2522952C1 (en) | 2014-07-20 |
Family
ID=51217554
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013116569/15A RU2522952C1 (en) | 2013-04-11 | 2013-04-11 | Method of obtaining lipophilic substances from chaga |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2522952C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2582972C1 (en) * | 2015-03-24 | 2016-04-27 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский национальный исследовательский технологический университет" (ФГБОУ ВО "КНИТУ") | Process for the preparation of melanin chaga |
| RU2618397C1 (en) * | 2016-07-18 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный технический университет" (ВолгГТУ) | Method of producing melanin from shelf fungus |
| RU2618398C1 (en) * | 2016-04-19 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный технический университет" (ВолгГТУ) | Method of producing melanins from chaga |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20070064225A (en) * | 2006-05-17 | 2007-06-20 | 이태봉 | Mass production method of chaga mycelium using grains or herbs |
-
2013
- 2013-04-11 RU RU2013116569/15A patent/RU2522952C1/en active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20070064225A (en) * | 2006-05-17 | 2007-06-20 | 이태봉 | Mass production method of chaga mycelium using grains or herbs |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| W. MAZURKIEWICZ et all. Separation of an aqueous extract Inonotus Obliquus (Chaga), a novel look at the efficiency of its influence on proliferation of A549 human lung carcinoma cells.// Acta Poloniae Pharmaceutica- Drug Research., Vol.67, No4, 2010, pp.397-406 СЫСОЕВА М.А. Высокоактивные антиоксиданты на основе гриба (Inonotus obliquus) //Автореферат дисс. На соиск. Ученой степени доктора хим. Наук, Казань 2009, стр.16,25-27 ZHANG M et ll. Analysis of antioxidant metabolites by solvent extraction from sclerotia of Inonotus obliquus (Chaga) //Phytochem Anal., 2011, 22(2): 95-102 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2582972C1 (en) * | 2015-03-24 | 2016-04-27 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Казанский национальный исследовательский технологический университет" (ФГБОУ ВО "КНИТУ") | Process for the preparation of melanin chaga |
| RU2618398C1 (en) * | 2016-04-19 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный технический университет" (ВолгГТУ) | Method of producing melanins from chaga |
| RU2618397C1 (en) * | 2016-07-18 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Волгоградский государственный технический университет" (ВолгГТУ) | Method of producing melanin from shelf fungus |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2329816A1 (en) | An anti-cancer active substance from antrodia camphorata, method for preparing the same and use thereof | |
| AU2010288101B2 (en) | Picrorhiza Kurroa extract for prevention, elimination and treatment of DNA based viruses in humans and in biotech industry | |
| CA2837028C (en) | Composition comprising cashew apple extract | |
| RU2522952C1 (en) | Method of obtaining lipophilic substances from chaga | |
| US9603885B2 (en) | Picrorhiza extract for prevention, elimination and treatment of infection diseases | |
| CN104163844A (en) | Steroidal ketene compound caulerpa ketene and preparation and purpose thereof | |
| CN107802626B (en) | Hypoglycemic composition and preparation method and application thereof | |
| CN101708201B (en) | Medicine for treating gastric ulcer | |
| CN104107225B (en) | Chinese crude drug Radix Polygalae anticoagulation effective site and extracting method thereof and application | |
| CN107674108B (en) | Application of stigmastane steroid compound in preparing medicine for treating diabetes or obesity | |
| CN101708202B (en) | Medicament for inhibiting asodilatatioin | |
| Calvo et al. | Controlling concentration of bioactive components in cat's claw based products with a hybrid separation process | |
| RU2530636C1 (en) | Method of producing fraction of lipophilic substances from shelf fungus | |
| CN111617145B (en) | Composition for improving expression of cell tight junction protein and preparation method and application thereof | |
| RU2812565C1 (en) | Method of processing plant raw materials | |
| CN112812127B (en) | C20-diterpene alkaloid compound and preparation method and application thereof | |
| RU2270686C2 (en) | Method for preparing hepatoprotective and hypocholesterolemic agent | |
| CN108409540A (en) | A kind of compound that treating osteoarthritis and its preparation and application | |
| RU2566067C1 (en) | Method for quantitative determination of tetracyclic triterpenes in shelf fungus material or shelf fungus preparation | |
| CN118085021A (en) | Oligopeptide with activity of resisting acute alcohol-induced intestinal injury, and preparation method and application thereof | |
| TWI566777B (en) | Use of toona sinensis leaf extract for activating peroxisome proliferators activated receptor α | |
| CN106580933A (en) | Application of 3,5-dihydroxy-2-[3,7-dimethyl-2(E),6-octadienyl]-bibenzyl | |
| CN105106258A (en) | Method for preparing colonic cancer resistance bupleurum smithii extract powder in large scale | |
| BRPI1000614A2 (en) | process for fractionation of propolis in dry powder and paste composed of waxes and resulting products | |
| JP2014201529A (en) | Method for producing apigenin |