RU2517069C1 - Способ прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника - Google Patents
Способ прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника Download PDFInfo
- Publication number
- RU2517069C1 RU2517069C1 RU2012149560/15A RU2012149560A RU2517069C1 RU 2517069 C1 RU2517069 C1 RU 2517069C1 RU 2012149560/15 A RU2012149560/15 A RU 2012149560/15A RU 2012149560 A RU2012149560 A RU 2012149560A RU 2517069 C1 RU2517069 C1 RU 2517069C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- developing
- relapse
- feces
- defensin
- blood
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 title abstract description 8
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 title abstract description 4
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 title abstract 4
- 102000001109 Leukocyte L1 Antigen Complex Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 108010069316 Leukocyte L1 Antigen Complex Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 108050002883 beta-defensin Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 102000012265 beta-defensin Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 102000018568 alpha-Defensin Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108050007802 alpha-defensin Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims abstract 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims description 28
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 22
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 15
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 claims description 10
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 claims description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 11
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 9
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 9
- 102000000541 Defensins Human genes 0.000 description 8
- 108010002069 Defensins Proteins 0.000 description 8
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 5
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N mesalamine Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 5
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 4
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 3
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 2
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 2
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N nifedipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C)NC(C)=C(C(=O)OC)C1C1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O HYIMSNHJOBLJNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 2
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 description 1
- 108010075016 Ceruloplasmin Proteins 0.000 description 1
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000004266 Collagen Type IV Human genes 0.000 description 1
- 108010042086 Collagen Type IV Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010061819 Disease recurrence Diseases 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 description 1
- 241001092500 Photinia x fraseri Species 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010057071 Rectal tenesmus Diseases 0.000 description 1
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000004006 Tick-borne encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000002052 colonoscopy Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 210000002175 goblet cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 208000030208 low-grade fever Diseases 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000001020 rhythmical effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 208000012271 tenesmus Diseases 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника. Сущность способа состоит в том, что у больных с воспалительными заболеваниями кишечника с помощью иммуноферментного анализа в крови определяют уровень α-дефензина (αД) в нг/мл в плазме крови и содержание β-дефензина (βД) в нг/г и кальпротектина (ФК) в мкг/г в кале, рассчитывают вероятность развития рецидива воспалительного заболевания кишечника (p) в % по формуле. При полученном значении вероятности, равном или превышающем 50%, прогнозируют высокий риск развития рецидива, а при полученном значении вероятности менее 50% прогнозируют низкий риск развития рецидива. Использование заявленного способа позволяет своевременно спрогнозировать риск развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника. 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, гастроэнтерологии и может быть применено для прогнозирования развития рецидива неспецифического язвенного колита или болезни Крона по результатам иммуноферментного определения в крови и образцах кала антимикробных пептидов.
В описании изобретения к патенту «Полипептиды с противомикробной активностью и кодирующие их полинуклеотиды» (патент РФ №2393224, опубл. 27.06.2010) дана характеристика различных классов дефензинов, их способности вызывать гибель или ингибировать рост микробных клеток. В патенте указано, что полипептиды с противомикробной активностью обладают способностью снижать количество живых клеток Escherichia coli (DSM 1576) и Bacillus subtilis (АТСС 6633) до 1/100 через 8 часов, ингибировать рост Escherichia coli (DSM 1576) и Bacillus subtilis (АТСС 6633) в течение 24 часов при 25°C в субстрате для микробного роста, что может быть использовано в качестве лечебного или профилактического средства для больного с инфекционной патологией.
В исследованиях других авторов (Вахрамеева Т.Н., Бедарева Т.Ю. «Дефензины как маркер системной активации нейтрофилов при клещевых нейроинфекциях» // Медицина в Кузбассе. -2008. - №3. - С.15-19) было доказано, что в динамике инфекционного заболевания уровень дефензинов соответствовал клинической выраженности общеинфекционного синдрома: в остром периоде уровень дефензинов повышался, при микст-инфекциях отмечалось более высокое содержание дефензинов в сравнении с моноинфекциями. При этом, развивающиеся воспалительные изменения в ликворе коррелировали с ростом уровня дефензинов. В период регресса общеинфекционных проявлений количество дефензинов при менингеальной форме клещевого энцефалита значительно снижалось, достигая практически нормальных показателей. Таким образом, авторы делают вывод о возможности определения концентрации дефензинов в крови как биоцидных продуктов нейтрофилов для объективизации тяжести течения инфекции.
Известен способ определения в кале кальпротектина (связанный с кальцием протеин, содержащийся в нейтрофильных гранулоцитах) как маркера воспаления слизистой оболочки толстой кишки («Fecal sample test device and methods of use», US, 7780915, 24.08.2010). В описании изобретения к патенту указано, что содержание кальпротектина ниже 50 мкг/г свидетельствует об отсутствии воспаления слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта. Однако, автор не указывает возможностей для оценки активности воспалительного процесса и его ремиссии.
В исследовании других авторов представлено, что фекальный кальпротектин отражает активность воспалительного процесса у детей с воспалительными заболеваниями кишечника (Татьянина О.Ф., Потапов А.С., Намазова-Баранова Л.С., Цимбалова Е.Г., Кучеренко А.Г. Возможности кальпротектина в диагностике воспалительных заболеваний кишечника у детей // Вопросы диагностики в педиатрии. - 2009. - №1. - С.42-48). При ремиссии неспецифического язвенного колита содержание фекального кальпротектина составило 94,43±13,23 мкг/г, при низкой и высокой клинической активности заболевания, соответственно, 193,14±24,02 мкг/г и 253,17±26,85 мкг/г. Однако, содержание кальпротектина в стуле у детей имеет отличительные особенности по сравнению со взрослыми пациентами, что требует изучения проблемы в различные возрастные периоды.
Известен также способ определения степени активности неспецифического язвенного колита у детей (патент РФ №2391669, опубликован 10.06.2010). Способ включает определение степени активности неспецифического язвенного колита у детей по содержанию коллагена IV типа в крови. При значении последнего в пределах от 53 до 104 мкг/л в сыворотке крови определяют 1 степень, от 104 до 201 мкг/л - 2 степень, от 201 мкг/л и выше - 3 степень активности колита.
Известен также способ определения показаний к иммунологической коррекции болезни Крона и неспецифического язвенного колита (патент РФ №2258223, опубл. 10.08.2005), согласно которому уточняют содержание сывороточных фактора некроза опухоли-α, интерлейкина-6, интерлейкина-12 до и после введения препарата ремикейда в дозе 4-6 мг/кг и при снижении содержания сывороточного фактора некроза опухоли-α вдвое и интерлейкина-6 на 37% и более и при повышении уровня интерлейкина-12 на 230-250%, считают иммунологическую коррекцию болезни Крона и неспецифического язвенного колита доказанной. Таким образом, по содержанию в крови иммунологических факторов судят о степени активности заболевания и наступлении ремиссии.
Общим недостатком приведенных способов является то, что определение маркеров воспаления в крови, в частности, у взрослых пациентов с возможной коморбидной воспалительной патологией, характеризует общую характеристику заболевания, а не локальный статус активности воспаления. Определение факторов, отражающих степень активности воспалительного процесса в биоптате слизистой толстой кишки при эндоскопическом исследовании травматично и инвазивно, не может использоваться часто, а при измерении концентрации маркеров воспаления в кале следует учитывать протеолитическую активность фекальных ферментов. Быстрое разрушение интерлейкинов, фактора некроза опухоли-α, коллагена IV протеолитическими ферментами, содержащимися в кале, препятствует их широкому использованию в клинической практике.
Выходом из сложившейся ситуации является определение антимикробных пептидов в кале с одновременным определением их в крови, так как они не подвержены воздействию протеолитических ферментов, сохраняются в образцах стула в течение 7 дней при комнатной температуре, а для исследования методом иммуноферментного анализа (ИФА) требуется небольшое количество образца до 50 мг.
Задачей заявляемого изобретения является оценка вероятности развития рецидива у больных с воспалительными заболеваниями кишечника по результатам анализа содержания в крови и кале комплекса антимикробных пептидов.
Указанная задача достигается тем, что у больных с воспалительными заболеваниями кишечника с помощью ИФА в крови определяют уровень α-дефензина, а в кале - содержание β-дефензина и кальпротектина. Полученные значения подставляют в математическую формулу линейной множественной регрессии и рассчитывают прогнозируемую величину вероятности развития рецидива язвенного колита в %. Если вероятность равна 50% и более, то у пациента риск развития рецидива высокий и необходима модификация лечения. Если вероятность развития рецидива менее 50%, то состояние больного классифицируется как ремиссия, что не требует дополнительного обследования больного и изменения лечения.
Новизна изобретения состоит в том, что одновременная оценка сразу трех антимикробных пептидов как в крови, так и в кале, позволяет повысить чувствительность прогноза диагностики обострения воспалительных заболеваний кишечника, более точно отражает изменение активности заболевания.
Изобретение имеет изобретательский уровень, так как для специалиста-гастроэнтеролога явным образом не следует из уровня медицины в данной области клинической практики.
В доступных источниках информации России и зарубежных не обнаружено аналогичного предлагаемому способа прогнозирования обострения у больных с воспалительными заболеваниями кишечника.
Заявляемое изобретение является промышленно применимым, так как может быть многократно повторено и использовано при оценке вероятности развития рецидива у больных с воспалительными заболеваниями кишечника, и воспроизведено в различных лечебно-профилактических и научных медицинских учреждениях, особенно гастроэнтерологического и терапевтического профиля.
Способ прогнозирования рецидива у больных с воспалительными заболеваниями кишечника, осуществляется следующим образом.
У больных с установленным диагнозом неспецифического язвенного колита или болезнью Крона забирают образцы венозной крови и кала. Содержание осдефензина в плазме крови определяют с помощью иммунофер-ментного анализа (ELISA) и стандартных диагностических наборов в нг/мл. Контролем служит HNP-1 (human neutropil peptide-1). Плазму получают путем центрифугирования при 3000 об/мин крови, взятой с консервантом (3,8% цитрат натрия) в соотношении 9:1.
Образец кала собирают в чистую пробирку. С помощью специального устройства для экстракции экстрагируют 50-100 мг исходного образца кала для определения кальпротектина. Возможно хранение при температуре 2-8°C в течение 6 дней. Количественное определение содержания кальпротектина в образцах стула проводят иммуноферментным анализом (ELISA) с помощью стандартных наборов. Преаналитический этап заключается в предварительной процедуре экстракции образцов. В пустую полипропиленовую пробирку помещают 50-100 мг образца кала и 2,5-5,0 мл буферного раствора для экстракции (1 объем кала к 49 объемам буферного раствора). Смесь в течение 30 мин энергично встряхивают на вортексе, затем 1,5 мл гомогената переносят в чистую пробирку и центрифугируют в течение 5 мин при 10000 g. Полученный супернатант помещают в чистую пробирку и хранят при 20°C до проведения ИФА (экстракты стабильны в течение 4 мес.). Дальнейшее тестирование проводят с помощью ИФА, результаты регистрируют на микропланшетном фотометре при длине волны 450 нм. Расчет концентрации кальпротектина производят с помощью калибровочной кривой. Концентрацию ФК выражают в мкг кальпротектина на 1 г фекалий.
Уровень β-дефензина в кале также определяют с помощью иммуноферментной тест-системы для количественного определения анализируемого вещества в кале в нг/г.
Найденные величины содержания пептидов в биологических средах подставляют в формулу линейной множественной регрессии, полученную методом множественной регрессии, и рассчитывают вероятность развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника в %:
р=(0,0014·βД+0,0005·αД+0,002·ФК-0,4)·100%,
где р - вероятность развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника в %;
βД - содержание β-дефензина в кале в нг/г;
αД - содержание α-дефензина в крови в нг/мл;
ФК - содержание кальпротектина в кале в мкг/г.
Если вероятность развития рецидива равна 50% и более, то у пациента риск развития рецидива высокий и необходима оптимизация лечения. Если вероятность развития рецидива менее 50%, то состояние больного расценивается как состояние ремиссии, что не требует дополнительного обследования и продолжения лечения.
При проведении ROC-анализа были определены диагностические точки разделения для уровней β-дефензина, α-дефензина и кальпротектина с целью дифференцирования состояний рецидива болезни и ремиссии. У больных с воспалительными заболеваниями кишечника рецидив развивался при превышении содержания β-дефензина в кале более 213 нг/г (диагностическая чувствительность - 78%, диагностическая специфичность - 85%), α-дефензина в крови - более 312 нг/мл (диагностическая чувствительность - 71%, диагностическая специфичность - 88%), кальпротектина в кале - более 232 мкг/г (диагностическая чувствительность - 82%, диагностическая специфичность - 89%). Вероятность развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника при достижении указанных диагностических точек разделения трех антимикробных пептидов равна 50%.
При превышении уровней сразу трех антимикробных пептидов в биологических жидкостях диагностическая чувствительность возрастала до 87%, а диагностическая специфичность составила 92%.
Практическое применение заявляемого способа иллюстрируется примерами из клинической практики.
ПРИМЕРЫ:
Пример 1. Больная С., 32 лет. Находилась на обследовании и лечении в отделении гастроэнтерологии. Диагноз: язвенный колит, левосторонняя форма, рецидивирующие течение, средней тяжести, высокой степени активности, стадия обострения.
Жалобы на частый жидкий стул (до 9 раз в сутки) с примесью крови и слизи, субфебрильную лихорадку, тенезмы, переодические боли схвадкообразного характера в левом фланке живота, потерю веса 6 кг за последние 1,5 месяца, общую слабость. Болеет 10 лет. Обострения 2-3 раза в год. Получала препараты 5-АСК, микроклизмы с гидрокортизоном. Последние месяцы принимала 5 мг преднизолона (отменен около 3 недель назад).
Объективно. Удовлетворительного питания, кожные покровы и видимые слизистые бледные. Язык густо обложен белым налетом. Сердце, легкие без отклонений от нормы. Живот болезненный при пальпации по ходу нисходящего отдела толстой кишки. Печень, селезенка пальпаторно не увеличены.
Общий анализ крови: эритроциты 2,94×1012/л, Hb 87 г/л, лейкоциты 8,2×109/л, тромбоциты 230×109/л, эозинофилы 2%, сегментоядерные нейтрофилы 69%, палочкоядерные 4%, лимфоциты 22%, моноциты 3%. СОЭ 20 мм/ч. Общий анализ мочи без патологии. Общий белок 78 г/л. Билирубин общий 10,78 мкмоль/л, СРБ (+), сиаловые кислоты 200 ед., фибриноген 6,95 г/л, глюкоза крови 4,7 ммоль/л, АлАТ 11 Ед/л, АсАТ 15 Ед/л, сывороточное железо 11,9 мкмоль/л, кальций сыворотки 2,3 ммоль/л, калий - 4,9 ммоль/л. Простейшие в кале не обнаружены, выявлен дисбактериоз кишечника 2 степени.
Ирригоскопия: кишка несколько укорочена, левая половина лишена гаустр. Контур кишки деформирован, складки сглажены. Колоноскопия: в нисходящем отделе ободочной кишки визуализируются единичные воспалительные полипы 0,3-0,6 см в Д с ярко красной верхушкой и наложением фибрина, подслизистые геморрагии и эрозии. Слизистая рыхлая, легко кровоточит. Сосудистый рисунок отсутствует. Гистологически: обильная лимфоцитарно-нейтрофильная инфильтрация собственной пластинки с очагами деструкции. Снижение количества бокаловидных клеток, нарушение архитектоники железистого эпителия.
Результаты изучения содержания антимикробных пептидов при обострении: β-дефензин в кале 278 нг/г, α-дефензин в крови 485 нг/мл, кальпротектин в кале 312 мкг/г. Вероятность рецидива - 85,5% (более 50%).
Больной был назначен салофальк в дозе 4 г/сут (3 г внутрь и 1 грамм ректально в виде свечей). Клинические симптомы исчезли через 3 недели. Поддерживающая терапия составляла 3 г салофалька в сутки. Через каждые 2 мес.мониторировали содержание антимикробных пептидов в крови и кале. Через 2 мес. β-дефензин в кале 175 нг/г, α-дефензин в крови 289 нг/мл, кальпротектин в кале 86 мкг/г.Вероятность рецидива - 16,1% (менее 50%).
На 4 мес. β-дефензин в кале 238 нг/г, α-дефензин в крови 406 нг/мл, кальпротектин в кале 244 мкг/г. Вероятность рецидива - 62%. Поскольку вероятность рецидива возросла более 50%, то это потребовало увеличения суточной дозы салофалька до 4 г/сутки. Дальнейший мониторинг за больной в течение 8 месяцев наблюдения констатировал наступление ремиссии Ж.
Пример 2. Больной Б., 31 года. Статус через 6 мес. после выписки из гастроэнтерологического отделения. Диагноз: язвенный колит, левосторонняя форма, рецидивирующие течение, средней тяжести, низкой степени активности, ремиссия. Болеет в течение 9 лет. Находится на поддерживающей терапии салофальком 2,5 г в сутки.
Жалоб не предъявляет.
Объективно: удовлетворительного питания. Кожа и видимые слизистые розовые. Язык умеренно обложен белым налетом у корня. Тоны сердца звучные, пульс 76 в 1 минуту, ритмичный, АД 110/70 мм рт.ст. В легких дыхание везикулярное. Живот мягкий, безболезненный. Печень, селезенка не увеличены.
Общий анализ крови: эритроциты 4,1×1012/л, Hb 147 г/л, лейкоциты 6,9×109/л, тромбоциты 280×109 /л, эозинофилы -0, сегментоядерные нейтрофилы 65%, палочкоядерные - 1%, лимфоциты 29%, моноциты 4%. СОЭ 12 мм/ч. Общий анализ мочи без патологии. СРВ (-), церулоплазмин 2,0 ммоль/л, сиаловые кислоты 100 ед, фибриноген 3,87 г/л. Общий белок 82 г/л. Билирубин общий 16,7 мкмоль/л, глюкоза крови 4,6 ммоль/л, АлАТ 11 Ед/л, АсАТ 14 Ед/л, сывороточное железо 11,9 мкмоль/л. Микроэлементы плазмы: Ca, Na, K, Mg в норме. Простейшие в кале не обнаружены, выявлен дисбактериоз кишечника 2-й степени.
Результаты изучения содержания антимикробных пептидов: (3-дефензин в кале 164 нг/г, β-дефензин в крови 189 нг/мл, кальпротектин в кале 112 мкг/г. Вероятность рецидива - 14,8%). Поскольку вероятность рецидива низкая (менее 50%), то поддерживающая терапия оставалась прежней. Рецидива в последующие 6 мес.наблюдения не возникало.
Технико-экономическая эффективность заявляемого способа заключается в том, что высокая прогностическая вероятность развития рецидива у больных воспалительными заболеваниями кишечника позволяет провести своевременную профилактику и лечение патологии, что способствует снижению риска инвалидизации пациента и потери им своего социального и трудового потенциала. Исследование безопасно, инвазивные вмешательства (забор крови из вены и кала) минимальны, доступно для профильных учреждений здравоохранения, нетрудоемкое, затраты на оборудование и обучение персонала минимальные.
Claims (1)
- Способ прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника, заключающийся в количественной оценке вероятности развития обострения болезни по содержанию антимикробных пептидов в крови и кале, отличающийся тем, что с помощью иммуноферментного анализа определяют уровень α-дефензина (αД) в нг/мл в плазме крови и содержание β-дефензина (βД) в нг/г и кальпротектина (ФК) в мкг/г в кале, рассчитывают вероятность развития рецидива воспалительного заболевания кишечника (p) в % по формуле p=(0,0014·βД+0,0005·αД+0,002·ФК-0,4)·100%, при этом при полученном значении вероятности, равном или превышающем 50%, прогнозируют высокий риск развития рецидива, а при полученном значении вероятности менее 50% прогнозируют низкий риск развития рецидива.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012149560/15A RU2517069C1 (ru) | 2012-11-21 | 2012-11-21 | Способ прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012149560/15A RU2517069C1 (ru) | 2012-11-21 | 2012-11-21 | Способ прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2517069C1 true RU2517069C1 (ru) | 2014-05-27 |
Family
ID=50779374
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012149560/15A RU2517069C1 (ru) | 2012-11-21 | 2012-11-21 | Способ прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2517069C1 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2574914C1 (ru) * | 2014-12-19 | 2016-02-10 | Элеонора Васильевна Дудникова | Способ неинвазивной диагностики хронического гастродуоденита у детей |
| RU2618451C1 (ru) * | 2015-12-28 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ прогнозирования колита |
| RU2755492C1 (ru) * | 2021-03-22 | 2021-09-16 | Кнара Андраниковна Юмукян | Способ прогнозирования риска развития рецидива язвенного колита |
| RU2764870C1 (ru) * | 2021-03-30 | 2022-01-21 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Способ диагностики активности воспалительных заболеваний кишечника на основе совокупности электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110045476A1 (en) * | 2009-04-14 | 2011-02-24 | Prometheus Laboratories Inc. | Inflammatory bowel disease prognostics |
-
2012
- 2012-11-21 RU RU2012149560/15A patent/RU2517069C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20110045476A1 (en) * | 2009-04-14 | 2011-02-24 | Prometheus Laboratories Inc. | Inflammatory bowel disease prognostics |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ИЛЬЯШЕНКО М.Г. и др. Эндогенные антимикробные пептиды и их клинико-патогенетическая значимость при воспалительных заболеваниях кишечника // Cовременные проблемы науки и образования. N2. 2012. * |
| ТАТЬЯНИНА О.Ф. и др. Возможности кальпротектина в диагностике воспалительных заболеваний кишечника у детей // Вопросы диагностики в педиатрии. 2009. Т1. N1. KAPEL N et. al Fecal beta-defensin-2 in children with inflammatory bowel diseases. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2009, v 48(1), р.117-20. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2574914C1 (ru) * | 2014-12-19 | 2016-02-10 | Элеонора Васильевна Дудникова | Способ неинвазивной диагностики хронического гастродуоденита у детей |
| RU2618451C1 (ru) * | 2015-12-28 | 2017-05-03 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) | Способ прогнозирования колита |
| RU2755492C1 (ru) * | 2021-03-22 | 2021-09-16 | Кнара Андраниковна Юмукян | Способ прогнозирования риска развития рецидива язвенного колита |
| RU2764870C1 (ru) * | 2021-03-30 | 2022-01-21 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Способ диагностики активности воспалительных заболеваний кишечника на основе совокупности электрических и вязкоупругих параметров эритроцитов |
| RU2824983C1 (ru) * | 2024-03-16 | 2024-08-19 | Анна Дмитриевна Зубова | Способ прогнозирования эффективности терапии язвенного колита |
| RU2841925C1 (ru) * | 2024-10-29 | 2025-06-18 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования наличия воспалительных заболеваний кишечника у пациентов с отсутствием неспецифических лабораторных критериев воспаления |
| RU2853076C1 (ru) * | 2025-05-23 | 2025-12-18 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства" | Способ прогнозирования тяжести течения ротавирусной инфекции у детей |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111602057B (zh) | 使用降钙素原和中区肾上腺髓质素原的风险评估和患者管理的工作流程 | |
| WO2012106396A2 (en) | Citrullinated histone h3 (cit h3) in septic shock | |
| Huang et al. | High concentrations of procoagulant microparticles in the cerebrospinal fluid and peripheral blood of patients with acute basal ganglia hemorrhage are associated with poor outcome | |
| Groznik et al. | Increased perioperative C-reactive protein and decreased postoperative albumin is associated with acute posttraumatic osteomyelitis in patients with high-energy tibial fractures | |
| RU2517069C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития рецидива воспалительных заболеваний кишечника | |
| Saadoun et al. | Serum visfatin as a diagnostic marker of active inflammatory bowel disease. | |
| Karpińska et al. | A prothrombotic state and denser clot formation in patients following acute limb ischemia of unknown cause | |
| Jójárt et al. | Plasminogen activator inhibitor 1 is a novel faecal biomarker for monitoring disease activity and therapeutic response in inflammatory bowel diseases | |
| KR20070051287A (ko) | 맹장염 진단 방법 및 장치 | |
| CN115754304A (zh) | 骨形态蛋白-7作为生物标志物在脓毒血症诊断、预后或治疗监测中的用途 | |
| RU2738012C1 (ru) | Способ прогнозирования риска рецидивирования мочекаменной болезни на стадии первичного кальций-оксалатного нефролитиаза | |
| Cheng et al. | Predictive value of serum soluble B7‐H4 in acute pancreatitis | |
| RU2706537C1 (ru) | Способ оценки риска развития осложнений в раннем послеоперационном периоде у больных с дисплазией соединительной ткани | |
| Kurutas et al. | Evaluation Of Raftlin And 8-Iso Prostaglandin Levels On The Clinical Severity Of Cases With Covid-19 In Turkey: A Cross-Sectional Study | |
| RU2475754C2 (ru) | Способ прогнозирования течения гастродуоденальной патологии у детей | |
| CN113514643A (zh) | 剪接相关蛋白130用于特发性肺间质纤维化诊断和疾病严重程度评估 | |
| Calvo-Rodriguez et al. | Utility of biomarkers in abdominal pain management | |
| Jana et al. | Adhesive diseases in children. Prevention, diagnosis and treatment strategies | |
| CN106198953B (zh) | 白介素-33在制备诊断肺源性急性肺损伤试剂盒中的用途 | |
| RU2755492C1 (ru) | Способ прогнозирования риска развития рецидива язвенного колита | |
| Shentova et al. | Surrogate Markers of Intestinal Inflammation in Paediatric Patients with Inflammatory Bowel Disease | |
| Nazeer et al. | Section: General Medicine | |
| RU2729730C1 (ru) | Способ оценки течения раннего послеоперационного периода у больных ургентными болезнями живота | |
| RU2761732C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики уремического псевдоперитонита и перитонита у пациентов, получающих заместительную почечную терапию - программный гемодиализ | |
| JP2015503106A (ja) | テネイシンｃおよび関節リウマチにおけるその使用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20141122 |