RU2503459C2 - Agent for extreme performance stimulation, method for preparing and using it - Google Patents
Agent for extreme performance stimulation, method for preparing and using it Download PDFInfo
- Publication number
- RU2503459C2 RU2503459C2 RU2012110912/15A RU2012110912A RU2503459C2 RU 2503459 C2 RU2503459 C2 RU 2503459C2 RU 2012110912/15 A RU2012110912/15 A RU 2012110912/15A RU 2012110912 A RU2012110912 A RU 2012110912A RU 2503459 C2 RU2503459 C2 RU 2503459C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- peptides
- day
- brain
- nucleus
- water
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 title abstract 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 40
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 40
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 26
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 8
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims abstract description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 15
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 claims description 13
- 210000001259 mesencephalon Anatomy 0.000 claims description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 8
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 210000004727 amygdala Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000001159 caudate nucleus Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000005110 dorsal hippocampus Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000004884 grey matter Anatomy 0.000 claims description 7
- 210000005111 ventral hippocampus Anatomy 0.000 claims description 7
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 6
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 claims description 6
- 210000003715 limbic system Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 claims description 4
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 claims description 4
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 2
- 206010011416 Croup infectious Diseases 0.000 claims 1
- 201000010549 croup Diseases 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 16
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 15
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 abstract 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 9
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 230000036314 physical performance Effects 0.000 description 5
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 4
- 244000309715 mini pig Species 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 102220547770 Inducible T-cell costimulator_A23L_mutation Human genes 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 101100065878 Caenorhabditis elegans sec-10 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 101710118538 Protease Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002197 limbic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000007103 stamina Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины и касается медицинских средств для специфического воздействия на функции организма.The invention relates to medicine and relates to medical devices for a specific effect on body functions.
Известны технические решения, выполненные на уровне изобретений, которые повышают работоспособность и выносливость лиц, подверженных интенсивным физическим нагрузкам. [1-3]Known technical solutions made at the level of inventions, which increase the performance and endurance of persons subject to intense physical exertion. [1-3]
Указанные технические решения представляют собой обогащенный фосфолипидами продукт питания [1] или белково-аминокислотные продукты питания [2] или белково-пептидные модули для производства продуктов питания [3] для питания спортсменов или других лиц, ведущих активный образ жизни.The indicated technical solutions are a food product [1] enriched in phospholipids or protein-amino acid food products [2] or protein-peptide modules for food production [3] for nutrition of athletes or other persons leading an active lifestyle.
Характерно, что вышеуказанные продукты питания или добавки к продуктам питания, во-первых, несущественно повышают работоспособность и выносливость и только после продолжительного (2-3 месяца и более) употребления указанных продуктов, и, во-вторых, повышение работоспособности и выносливости происходит в основном за счет увеличения мышечной массы и, в-третьих, указанные продукты питания не являются стимуляторами работоспособности и выносливости как таковыми, т.е. не отвечают необходимым требованиям для работы в экстремальных условиях.It is characteristic that the above foods or food additives, firstly, do not significantly increase working capacity and endurance, and only after prolonged (2-3 months or more) consumption of these products, and, secondly, increasing health and stamina occurs mainly due to an increase in muscle mass and, thirdly, these foods are not stimulants of performance and endurance as such, i.e. do not meet the necessary requirements for work in extreme conditions.
В доступной научно-технической и патентной литературе не обнаружено аналогов и прототипа, отвечающих предложенному стимулятору для работы в экстремальных условиях.In the available scientific, technical and patent literature, no analogues and prototype are found that meet the proposed stimulator for working in extreme conditions.
Техническим результатом, на достижение которого направлено создание данного изобретения, является повышение работоспособности и выносливости при работе в экстремальных условиях (предельные и запредельные и продолжительные физические нагрузки, стрессовые ситуации, и т.п.), например, при проведении спецопераций и тому подобных ответственных мероприятий, требующих сохранения высокой работоспособности особенно в условиях экстремальных психоэмоциональных нагрузок. Также техническим результатом, на достижение которого направлено создание данного изобретения является получение высокоактивного средства для стимуляции работы в экстремальных условиях.The technical result, the achievement of which the creation of this invention is aimed, is to increase the working capacity and endurance when working in extreme conditions (extreme and transcendental and prolonged physical exertion, stressful situations, etc.), for example, during special operations and similar critical events requiring maintaining high performance especially in conditions of extreme psycho-emotional stress. Also the technical result, the achievement of which the creation of this invention is directed, is to obtain a highly active agent for stimulating work in extreme conditions.
Поставленный технический результат достигается тем, что заявляемое средство для стимуляции работы в экстремальных условиях представляет собой смесь пептидов с молекулярной массой 2000 - 5000 Да, полученных из вентрального и дорзального гиппокампа (hippocampus) поясной борозды (sulcus cinguli) миндалевидного комплекса (nucleus amygdalae) лимбической системы и из хвостатого ядра (nucleus caudatus) и гипоталамуса (hypothalamus) (А) и пептидов с молекулярной массой 500-900 Да, полученных из центрального серого вещества, окружающего сильвиев водопровод (aquaeductus cerebri Sylvii) среднего мозга (mesencephalon) (Б) головного мозга крупного рогатого скота и/или свиней возрастом до одного года при массовом соотношении компонентов А и Б от 2/1 до 3/1, и концентрацией смеси пептидов в средстве 5,0-10,0 мг/мл в водном растворе или 5,0-10,0 мг/г в суппозитории на основе витепсола.The technical result is achieved by the fact that the claimed tool for stimulating work in extreme conditions is a mixture of peptides with a molecular weight of 2000-5000 Da, obtained from the ventral and dorsal hippocampus (hippocampus) of the sulcus (sulcus cinguli) amygdala complex (nucleus amygdalae) of the limbic system and from the caudate nucleus (nucleus caudatus) and the hypothalamus (hypothalamus) (A) and peptides with a molecular weight of 500-900 Da obtained from the central gray matter surrounding the sylvian aqueduct (aquaeductus cerebri Sylvii) of the midbrain ( mesencephalon) (B) the brain of cattle and / or pigs under the age of one year with a mass ratio of components A and B from 2/1 to 3/1, and the concentration of the mixture of peptides in the tool is 5.0-10.0 mg / ml in an aqueous solution or 5.0-10.0 mg / g in a suppository based on vitepsol.
Поставленный технический результат также достигается тем, что способ получения средства для стимулирования работы в экстремальных условиях включает измельчение замороженных частей вентрального и дорзального гиппокампа (hippocampus) поясной борозды (sulcus cinguli) миндалевидного комплекса (nucleus amygdalae) лимбической системы мозга, и хвостатого ядра (nucleus caudatus) и гипоталамуса (hypothalamus) (A) головного мозга крупного рогатого скота или свиней не старше 1 года, гомогенизацию в воде, гидролиз в присутствии уксусной кислоты и хлористого цинка, экстракцию гидролизата, отделение экстракта от балластных веществ сепарированием через материалы с задерживающей способностью 10000 Да, осаждение гидролизата 30% раствором уксусной кислоты, промывание осадка ацетоном, растворение осадка в воде и отделение фракции 2000-5000 Да препаративной хроматографией, растворение ее в воде и сушку лиофилизацией; при этом процесс также включает одновременное отделение среднего мозга, а именноThe technical result is also achieved by the fact that the method of obtaining funds for stimulating work in extreme conditions involves grinding the frozen parts of the ventral and dorsal hippocampus (hippocampus) of the waist sulcus (sulcus cinguli) of the amygdala complex (nucleus amygdalae) of the limbic system of the brain, and the caudate nucleus (nucleus caudatus ) and hypothalamus (hypothalamus) (A) of the brain of cattle or pigs not older than 1 year old, homogenization in water, hydrolysis in the presence of acetic acid and zinc chloride, extraction of hydrolysis zat, separation of the extract from ballast substances by separation through materials with a retention capacity of 10,000 Da, precipitation of the hydrolyzate with a 30% solution of acetic acid, washing the precipitate with acetone, dissolving the precipitate in water and separating the 2000-5000 Da fraction by preparative chromatography, dissolving it in water and drying by lyophilization; however, the process also includes simultaneous separation of the midbrain, namely
центрального серого вещества, окружающего сильвиев водопровод (aquaeductus cerebri Sylvii) (Б), замораживание, гидролиз и отделение экстракта от балластных веществ сепарированием через материалы с задерживающей способностью свыше 2000 Да и осаждение фракции до 2000 Да 30% раствором уксусной кислоты, промывание осадка ацетоном, растворение осадка в воде и выделение фракции 500-900 Да из растворенного экстракта сверхкритической флюидной экстракцией при критической температуре СОг 31,1°C и критическом давлении 7,3±0,1 атм., растворение фракции 500-900 Да в воде и сушку лиофилизацией и далее приготовление средства путем смешения водных растворов фракций 2000-5000 Да (А) и 500-700 Да (Б) при массовом соотношении от 2/1 до 3/1 и концентрацией 5,0-10,0 мг/мл в водном растворе или путем введения смеси в витепсол до содержания 5,0-10,0 мг/г и последующим формованием суппозиториев.the central gray matter surrounding the sylvian aqueduct (aquaeductus cerebri Sylvii) (B), freezing, hydrolyzing and separating the extract from the ballast substances by separation through materials with a retention capacity of more than 2000 Da and sedimentation of the fraction up to 2000 Da with 30% acetic acid solution, washing the precipitate with acetone, dissolving the precipitate in water and isolating the 500-900 Da fraction from the dissolved extract by supercritical fluid extraction at a critical CO2 temperature of 31.1 ° C and a critical pressure of 7.3 ± 0.1 atm., dissolving the 500-900 Da fraction in water and drying lyophilization and further preparation of the product by mixing aqueous solutions of fractions of 2000-5000 Da (A) and 500-700 Da (B) with a mass ratio of 2/1 to 3/1 and a concentration of 5.0-10.0 mg / ml in aqueous solution or by introducing the mixture into vitepsol to a content of 5.0-10.0 mg / g and then forming suppositories.
В качестве сырья для получения пептидов используют части отделов головного мозга забитого крупного рогатого скота и/или свиней (КРС) не старше 1 года, а именно: вентрального и дорзального гиппокампа (hippocampus) поясной борозды (sulcus cinguli) миндалевидного комплекса (nucleus amygdalae) лимбической системы мозга, а также хвостатого ядра (nucleus caudatus) и гипоталамуса (hypothalamus), и среднего мозга (mesencephalon), а именно: центрального серого вещества, окружающего сильвиев водопровод (aquaeductus cerebri Sylvii).As a raw material for the production of peptides, parts of the brain departments of slaughtered cattle and / or pigs (cattle) no older than 1 year old are used, namely, the ventral and dorsal hippocampus (hippocampus) of the lumbar groove (sulcus cinguli) of the amygdala complex (nucleus amygdalae) limbic brain system, as well as the caudate nucleus (nucleus caudatus) and the hypothalamus (hypothalamus), and the midbrain (mesencephalon), namely: the central gray matter surrounding the sylvian aqueduct (aquaeductus cerebri Sylvii).
Гидролиз измельченных частей отделов головного мозга осуществляют либо в кислой среде (уксусная кислота+хлористый цинк), либо в присутствии протеолитических ферментов - сериновых протеаз -грибковой сериновой эндопротеазы, пепсина, пектофостидина (П10Х) и т.п.The hydrolysis of the crushed parts of the brain is carried out either in an acidic medium (acetic acid + zinc chloride) or in the presence of proteolytic enzymes - serine proteases, fungal serine endoprotease, pepsin, pectofostidine (P10X), etc.
Отделение активных компонентов средства в процессе гидролиза и разделения гидролизата осуществляют методами ультрафильтрации и препаративной хроматографии, а также сверхкритической флюидной экстракцией.The separation of the active components of the agent during hydrolysis and separation of the hydrolyzate is carried out by ultrafiltration and preparative chromatography, as well as supercritical fluid extraction.
Предлагаемое средство для стимулирования работы в экстремальных условиях представляет собой водный раствор смеси (А) - пептидов с молекулярной массой 2000-5000 Да, полученных методом препаративной хроматографии очищенного и отфильтрованного гидролизата частей отделов головного мозга забитого крупного рогатого скота и/или свиней (КРС) не старше 1 года, а именно: вентрального и дорзального гиппокампа (hippocampus) поясной борозды (sulcus cinguli), миндалевидного комплекса (nucleus amygdalae) лимбической системы мозга, а также хвостатого ядра (nucleus caudatus) и гипоталамуса (hypothalamus) и (Б) - пептидов с молекулярной массой 500-900 Да, полученных из очищенного и отфильтрованного гидролизата центрального серого вещества, окружающего сильвиев водопровод (aquaeductus cerebri Sylvii) среднего мозга (mesencephalon), и при этом массовое соотношение пептидов с молекулярной массой 2000-5000 Да (А) и 500-900 Да (Б) в средстве составляет от 2/1 до 3/1 соответственно и концентрация смеси в растворе составляет 5,0-10,0 мг/мл или 5,0-10,0 мг/г в суппозитории на основе витепсола.The proposed tool for stimulating work in extreme conditions is an aqueous solution of a mixture of (A) peptides with a molecular weight of 2000-5000 Da obtained by preparative chromatography of purified and filtered hydrolyzate of parts of the brain parts of slaughtered cattle and / or pigs (cattle) older than 1 year, namely: ventral and dorsal hippocampus (hippocampus) of the cingulate sulcus (sulcus cinguli), amygdala complex (nucleus amygdalae) of the limbic system of the brain, as well as the caudate nucleus (nucleus caudatus) and hypothalamus ca (hypothalamus) and (B) - peptides with a molecular weight of 500-900 Da, obtained from a purified and filtered hydrolyzate of the central gray matter surrounding the sylvian aqueduct (aquaeductus cerebri Sylvii) of the midbrain (mesencephalon), and the mass ratio of peptides to molecular weighing 2000-5000 Da (A) and 500-900 Da (B) in the product is from 2/1 to 3/1, respectively, and the concentration of the mixture in the solution is 5.0-10.0 mg / ml or 5.0-10 , 0 mg / g in suppositories based on Vitepsol.
Следует отметить, что заявляемое средство состоит из двух активных компонентов каждый из которых также (как это будет показано ниже на примерах конкретного применения заявляемого средства) оказывает стимулирующее воздействие на работу в экстремальных условиях, однако при совместном их применении проявляется синергический эффект - при равной массе используемого средства смесь двух компонентов оказывается вдвое эффективнее каждого компонента по отдельности.It should be noted that the claimed tool consists of two active components, each of which also (as will be shown below on examples of specific applications of the claimed tool) has a stimulating effect on work in extreme conditions, however, when used together, a synergistic effect is manifested - with an equal weight used means, a mixture of two components is twice as effective as each component separately.
Следует также отметить, что выход массового соотношения компонентов А и Б за заявленные пределы в сторону уменьшения или увеличения приводит либо к уменьшению стимулирующего эффекта, либо практически не изменяет его. То же самое можно сказать и о разовой дозе приема заявляемого средства (10-30 мг в зависимости от возраста рецепиента)It should also be noted that the mass ratio of components A and B beyond the stated limits in the direction of decreasing or increasing leads either to a decrease in the stimulating effect, or practically does not change it. The same can be said about a single dose of the proposed drug (10-30 mg, depending on the age of the recipient)
Еще одной существенной особенностью заявляемого средства является то, что аналитическими средствами оно может быть обнаружено в крови реципиента только в течение первых 15-25 мин. после парентерального введения (а при ректальном введении оно вообще не может быть обнаружено современными аналитическими средствами). Указанное обстоятельство имеет решающее значение в практике стимулирования спортсменов.Another significant feature of the claimed tool is that it can be detected in the blood of the recipient by analytical means only during the first 15-25 minutes. after parenteral administration (and with rectal administration, it cannot be detected at all by modern analytical means). This circumstance is crucial in the practice of stimulating athletes.
Получают средство для стимулирования работы в экстремальных условиях следующим образом.Get a tool to stimulate work in extreme conditions as follows.
У забитых животных (10-месячные телята и 8-месячные поросята) извлекают головной мозг, иссекают части вентрального и дорзального гиппокампа поясной борозды миндалевидного комплекса лимбической системы мозга, хвостатое ядро и гипоталамус (А), а также центральное серое вещество среднего мозга, окружающее сильвиев водопровод (Б). Указанные части головного мозга А и Б замораживают по отдельности по меньшей мере до и -40°C [6] и затем измельчают и гомогенизируют в воде, гомогенат А подвергают гидролизу при 20°C в присутствии уксусной кислоты и хлористого цинка, экстрагируют, отделяют экстракт от балластных веществ сепарированием через материалы с задерживающей способностью 10000 Да, осаждают гидролизат 30% раствором уксусной кислоты, промывают осадок ацетоном, растворяют осадок в воде и отделяют фракции 2000-5000 Да препаративной хроматографией (хроматограф LC-30 Nexera, насос LC-8A, внутренний диаметр колонки 20 мм), отделяют фракцию 2000-5000 Да, растворяют ее в воде и сушат лиофилизацией (выход 1,35 г/100 г сырья), а гомогенат части Б отдела головного мозга подвергают гидролизу при 20°С в присутствии пепсина, далее гидролизат экстрагируют, отделяют экстракт от балластных веществ сепарированием через материалы с задерживающей способностью свыше 2000 Да, разделяют очищенный экстракт флюидной экстракцией при критической температуре СО2 31,1°C и критическом давлении 7,3±0,1 атм., отделяют фракцию 500-900 Да, растворяют ее в воде и сушат лиофилизацией (выход 1,07 г/100 г сырья); далее готовят средство путем смешения растворов фракций 2000-5000 Да (А) и 500-700 Да (Б) при массовом соотношении от 2/1 до 3/1 и концентрацией 5,0-10,0 мг/мл в водном растворе или путем введения смеси в витепсол до содержания 5,0-10,0 мг/г и последующим формованием суппозиториев.In slaughtered animals (10-month-old calves and 8-month-old pigs), the brain is removed, parts of the ventral and dorsal hippocampus of the cingulate sulcus of the amygdala complex of the limbic system of the brain, the caudate nucleus and hypothalamus (A), as well as the central gray matter of the midbrain surrounding the sylvia water supply (B). The indicated parts of the brain A and B are individually frozen at least to -40 ° C [6] and then ground and homogenized in water, homogenate A is hydrolyzed at 20 ° C in the presence of acetic acid and zinc chloride, extracted, the extract is separated off from ballast substances by separation through materials with a retention capacity of 10,000 Da, the hydrolyzate is precipitated with a 30% acetic acid solution, the precipitate is washed with acetone, the precipitate is dissolved in water and 2000-5000 Da fractions are separated by preparative chromatography (LC-30 Nexera chromatograph, LC-8A pump, the inner diameter of the column is 20 mm), the fraction 2000-5000 Da is separated, it is dissolved in water and dried by lyophilization (yield 1.35 g / 100 g of raw material), and the homogenate of part B of the brain is hydrolyzed at 20 ° C in the presence of pepsin, then the hydrolyzate is extracted, the extract is separated from the ballast substances by separation through materials with a retention capacity of more than 2000 Da, the purified extract is separated by fluid extraction at a critical temperature of СО 2 of 31.1 ° C and a critical pressure of 7.3 ± 0.1 atm, and a fraction of 500 is separated -900 Yes, dissolve it in water and dry the lyoph ilization (yield 1.07 g / 100 g of raw material); then prepare the tool by mixing solutions of fractions of 2000-5000 Da (A) and 500-700 Da (B) with a mass ratio of 2/1 to 3/1 and a concentration of 5.0-10.0 mg / ml in an aqueous solution or by introducing the mixture into vitepsol to a content of 5.0-10.0 mg / g and then forming suppositories.
Исследование влияния заявляемого средства на повышение адаптогенной активности, работоспособности и выносливости человека (и животных), находящихся в состоянии высокой физической и психоэмоциональной нагрузки проводят в соответствии с ГОСТ Р 15.105-2001, по стандартным операционным процедурам лабораторий и согласно «Правилам лабораторной практики в Российской Федерации» (Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации №267 от 19.06.2003 г.), а также национальному стандарту Российской федерации «Принципы надлежащей лабораторной практики» ГОСТ Р 53434-2009. Для исследования свойств заявляемого средства приготовили следующие композиции (см. Таблицу 1)The study of the impact of the claimed funds on improving adaptogenic activity, performance and endurance of humans (and animals) in a state of high physical and psycho-emotional stress is carried out in accordance with GOST R 15.105-2001, according to standard operating procedures of laboratories and according to the "Rules of laboratory practice in the Russian Federation "(Order of the Ministry of Health of the Russian Federation No. 267 of 06/19/2003), as well as the national standard of the Russian Federation" Principles of Good Laboratory Practice tics ”GOST R 53434-2009. To study the properties of the claimed funds, the following compositions were prepared (see Table 1)
Пример 1.Example 1
Определение изменения физической работоспособности беспородных белых крыс при нагрузках аэробной мощности.Determination of changes in physical performance of outbred white rats under aerobic power loads.
Влияние заявляемого средства на физическую работоспособность определяют измерением продолжительности бега на тредбане от начала бега до момента развития у животного состояния окончательного отказа от выполнения физической нагрузки. Продолжительность одного цикла испытаний - 27 дней.The influence of the claimed means on physical performance is determined by measuring the duration of the run on the treadmill from the start of the run until the animal develops a state of final refusal to perform physical activity. The duration of one test cycle is 27 days.
Испытание проводят по следующей схеме. Предварительная тренировка животных на стенде (тредбан, 1 день, 10 мин при угле наклона ленты беговой дорожки 20° и ее скорости 23 м/мин), введение средства животным (в течение 21 дня), наблюдение животных после прекращения введения средства (7 дней). Повторный цикл испытаний с введением средства проводятThe test is carried out as follows. Preliminary training of animals at the stand (treadmill, 1 day, 10 min at an angle of inclination of the
Формируют 4 группы лабораторных крыс по 12 голов. Первая группа получает заявляемое средство (состав 1. Таблица 1), вторая - пептиды А, (состав 3, Таблица 1), третья - пептиды Б (состав 4, Таблица 1) и четвертая (контроль) - физиологический раствор. Препараты вводят ректально.
Дозы введения: А - 0,5 мг/гол., Б - 0,30 мг/гол., А+Б - 0,25+0,15, т.е. 0,40 мг/гол.Doses of administration: A - 0.5 mg / goal., B - 0.30 mg / goal., A + B - 0.25 + 0.15, i.e. 0.40 mg / goal.
Через 40 минут после введения средства - бег 15 минут при скорости 27 м/мин и при наклоне ленты 20°. Напряжение - 40 В. Показатели снимают на 1, 8, 15, 21 и 27 день эксперимента. Основной показатель - суммарное время контакта крысы с электроплощадкой и время бега.40 minutes after the introduction of the product - run 15 minutes at a speed of 27 m / min and with a tape inclination of 20 °. The voltage is 40 V. The indicators are taken on the 1st, 8th, 15th, 21st and 27th day of the experiment. The main indicator is the total contact time of the rat with the electric platform and the running time.
Выносливость крыс при беге на тредбане представлена в Таблице 2.The endurance of rats when running on a treadmill is presented in Table 2.
Как видно из Таблицы 2 выносливость крыс по сравнению с контрольной группой возрастает значительно. Следует отметить проявление синергического эффекта при использовании смеси пептидов А и Б.As can be seen from Table 2, the endurance of rats compared with the control group increases significantly. It should be noted the manifestation of a synergistic effect when using a mixture of peptides A and B.
В Таблице 3 представлена выносливость крыс при действии различных видов заявляемого средства (по составу и дозировкам)Table 3 presents the endurance of rats under the action of various types of the claimed funds (in composition and dosage)
На Фиг.1 (см. стр.10 описания) представлено влияние заявляемого средства на выносливость подопытных животных от исходной (100%). Области 20 дней представляют применение заявляемого средства, 30 дней - перерыв в применении. На оси абсцисс отложено время испытаний (дни) и на оси ординат - изменение выносливости в процентах от исходного.значения. На Фиг.2 (см. стр.10 описания) представлено влияние заявляемого средства на выносливость подопытных животных при контакте с электростимулирующей площадкой тредбана. На оси абсцисс отложено время испытаний (дни) и на оси ординат - продолжительность контакта. Линии 1, 2, 3 и 4 показывают действие заявляемого средства (А+Б), пептидов А и пептидов Б по отдельности и данные по контрольной группе соответственно.Figure 1 (see
Пример 2Example 2
Для выявления фармакологической активности заявляемого средства проводят тест «отчаяния» или вынужденного плавания, который отражает состояние депрессии животных. Тест принудительного плавания представляет собой комбинированный жесткий вид стресса, сочетающий физический и эмоциональный компоненты.To identify the pharmacological activity of the claimed drug, a test of "despair" or forced swimming, which reflects the state of depression of animals. The forced swimming test is a combined hard form of stress that combines physical and emotional components.
В эксперименте животных всех групп подвергают стрессу - плаванию в бассейне с грузом. Температура воды +24°С.In the experiment, animals of all groups are subjected to stress - swimming in a pool with a load. Water temperature + 24 ° С.
Результаты испытаний представлены в Таблице 4The test results are presented in Table 4
Пример 3Example 3
Тест на гипоксию.Hypoxia test.
Мерой оценки чувствительности животных к острой гипобарической гипоксии служит продолжительность жизни на «высоте». Каждое животное «поднимают» на критическую высоту (11,5 тыс.м) со скоростью 165 м/сек, где оно находилось до агонального состояния. Обозначения:A measure of the sensitivity of animals to acute hypobaric hypoxia is the life expectancy at the "height". Each animal is "raised" to a critical height (11.5 thousand m) at a speed of 165 m / s, where it was located to an agonal state. Designations:
ВПП - время первого падения (переход в лежачее положение), характеризующее порог реакции организма на данное воздействие.Runway - the time of the first fall (transition to a lying position), characterizing the threshold of the body's reaction to this effect.
ВЖ - время жизни на «высоте» (до появления агонального дыхания).VZh - life time at "height" (before the appearance of agonal breathing).
ВВП - время восстановления позы после «спуска» животного с «высоты»GDP - the time of posture recovery after the animal “descends” from the “height”
КЭЗ - коэффициент эффективности защиты (время жизни в опыте/время жизни в контроле) Результаты испытаний острой гипобарической гипоксии представлены в Таблице 5KEZ - coefficient of effectiveness of protection (life time in the experiment / life time in the control) The results of tests of acute hypobaric hypoxia are presented in Table 5
Показатели эффективности защиты (КЭЗ)* при острой гипобарической гипоксии (к собственным фоновым показателям) представлены в Таблице 6Protection effectiveness indicators (CEC) * for acute hypobaric hypoxia (to its own background indicators) are presented in Table 6
Пример 4Example 4
Воздействие заявляемого средства на крупных лабораторных животных (мини-свиньи) при максимальных физических нагрузках.The impact of the proposed drug on large laboratory animals (mini-pigs) at maximum physical exertion.
Формируют 4 группы по 6 голов мини-свиней массой 18±1,9 кг, самцы, возраст 8 месяцев. Первая группа получает заявляемое средство, вторая -пептиды А, третья - пептиды Б и четвертая (контроль) - плацебо. Препараты вводят ректально. Дозы введения: А - 0,56 мг/кг, Б - 0,28 мг/кг, средство (А+Б) - 0,28+0,14 мг/кг, Животных принудительно заставляют бежать по тредбану. (Torneo T-203).4 groups of 6 heads of mini-pigs weighing 18 ± 1.9 kg are formed, males,
Измеряют продолжительность бега и пройденную дистанцию.The duration of the run and the distance covered are measured.
Показатели выносливости мини-свиней представлены в Таблице 7The endurance indicators of mini-pigs are presented in Table 7
Следует отметить, что одновременно с повышением выносливости у мини-свиней повышалась и скорость передвижения.It should be noted that, along with an increase in endurance, mini-pigs also increased their speed of movement.
На Фиг.3 (см. стр.15 описания) представлено действие заявляемого средства в зависимости от формы применения (кривая 1 - ректально, кривая 2 - парентерально) и от дозы вводимого средства (мг).Figure 3 (see
На Фиг.4 (см. 15 стр.описания) представлено циклическое воздействие заявляемого средства с максимумом эффекта (области ограниченные прямоугольниками, штрих линии) обозначающими максимум эффекта в период с 21-го по 41-й день и далее с 65-го по 85-й день и т.д. с обозначенной периодичностью с интервалами между максимальным эффектом с 42-го по 64-й день, с 86-го по 108-й.. и т.д.Figure 4 (see
Пример 5Example 5
Действие заявляемого средства проверяют на спортсменах. Отбирают добровольцев - велосипедистов (24 человека с близкими антропометрическими данными, возраст 20-22 года), и пловцов (24 человека с близкими антропометрическими данными, возраст 18-20 лет). Как велосипедистов, так и пловцов разделяют на 4 группы по 6 человек в каждой. Первая группа получает заявляемое средство (состав 1. Таблица 1), вторая - пептиды А, (состав 3, Таблица 1), третья - пептиды Б (состав 4, Таблица 1) и четвертая (контроль) - физиологический раствор. Препараты вводят ректально. Дозы введения: А - 20,0 мг, Б - 10,0 мг, А+Б - 10,0+5,0 мг.The effect of the claimed funds is checked on athletes. Volunteers are selected - cyclists (24 people with close anthropometric data, age 20-22), and swimmers (24 people with close anthropometric data, age 18-20 years). Both cyclists and swimmers are divided into 4 groups of 6 people each. The first group receives the claimed agent (
Влияние заявляемого средства на физическую работоспособность велосипедистов определяют измерением продолжительности «гонок» на велоэргометре (911S) с регулируемой нагрузкой (подъем 20°) от начала «гонки» до момента развития у спортсмена состояния окончательного отказа от выполнения физической нагрузки.The influence of the claimed means on the physical performance of cyclists is determined by measuring the duration of the “races” on a bicycle ergometer (911S) with an adjustable load (20 ° rise) from the start of the “race” until the athlete develops a state of final refusal to perform physical activity.
В Таблице 8 представлено влияние заявляемого средства на физическую работоспособность велосипедистов при максимальной скорости (спурт).Table 8 presents the effect of the claimed funds on the physical performance of cyclists at maximum speed (spurt).
В Таблице 9 представлено влияние заявляемого средства на физическую работоспособность велосипедистов при стайерской скорости (~60% от максимальной скоростной нагрузки).Table 9 shows the effect of the claimed tool on the physical performance of cyclists at the stayer speed (~ 60% of the maximum speed load).
Влияние заявляемого средства на общую физическую выносливость пловцов (кроль) определяют измерением продолжительности плавания со скоростью 60-62% от соревновательной от начала заплыва до момента развития у спортсмена состояния отказа от выполнения физической нагрузки.The influence of the claimed means on the overall physical endurance of swimmers (crawl) is determined by measuring the duration of swimming at a speed of 60-62% of the competition from the start of the swim until the athlete develops a state of refusal to perform physical activity.
В Таблице 10 представлено влияние заявляемого средства на общую физическую выносливость пловцов.Table 10 presents the effect of the claimed funds on the overall physical endurance of swimmers.
Влияние заявляемого средства на скоростные возможности пловцов определяют измерением пройденного расстояния за 5 минут плавания со скоростью предположительно ~95% от соревновательной. В Таблице 11 представлено влияние заявляемого средства на скоростные возможности пловцов.The influence of the proposed tool on the speed capabilities of swimmers is determined by measuring the distance traveled over 5 minutes of swimming at a speed of presumably ~ 95% of the competition. Table 11 presents the effect of the proposed tool on the speed capabilities of swimmers.
1717
Как видно из описания, приведенных примеров воздействия заявляемого средства на работоспособность в экстремальных условиях (особенно при воздействии экстремальных физических и психо=эмоциональных нагрузок), а также из сопоставления с контрольными примерами заявляемое средство стимулирует повышение работоспособности и выносливости у тренированных людей по меньшей мере на 20% по сравнению с исходными,As can be seen from the description, examples of the impact of the claimed drug on performance in extreme conditions (especially when exposed to extreme physical and psycho = emotional stress), as well as from comparison with control examples, the claimed tool stimulates an increase in performance and endurance in trained people by at least 20 % compared to the original,
Источники информации, принятые во внимание при составлении заявки.Sources of information taken into account when preparing the application.
1. RU 2370158 С2, М. кл. A23L 1/30, опубл. 2010 г.1. RU 2370158 C2, M. cl.
2. RU 2375923 С2, М. кл. A23L 1/30, опубл. 2010 г.2. RU 2375923 C2, M. cl.
3. RU 2388350 С2, М. кл. A23L 1/30, опубл. 2010 г.3. RU 2388350 C2, M. cl.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012110912/15A RU2503459C2 (en) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | Agent for extreme performance stimulation, method for preparing and using it |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012110912/15A RU2503459C2 (en) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | Agent for extreme performance stimulation, method for preparing and using it |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012110912A RU2012110912A (en) | 2013-11-20 |
| RU2503459C2 true RU2503459C2 (en) | 2014-01-10 |
Family
ID=49554878
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012110912/15A RU2503459C2 (en) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | Agent for extreme performance stimulation, method for preparing and using it |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2503459C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2141483C1 (en) * | 1997-07-04 | 1999-11-20 | Небольсин Владимир Евгеньевич | Peptide derivatives or their pharmaceutically acceptable salts, method of their synthesis, use and pharmaceutical composition |
| RU2152219C1 (en) * | 1998-04-08 | 2000-07-10 | Научно-Исследовательский Институт Трансплантологии И Искусственных Органов | Peptides showing immunostimulating activity, method of their synthesis, drug based on thereof, splenopid and its using |
| CN101292697A (en) * | 2007-04-23 | 2008-10-29 | 北京康比特体育科技股份有限公司 | Motion nutrition candy |
-
2012
- 2012-03-22 RU RU2012110912/15A patent/RU2503459C2/en active IP Right Revival
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2141483C1 (en) * | 1997-07-04 | 1999-11-20 | Небольсин Владимир Евгеньевич | Peptide derivatives or their pharmaceutically acceptable salts, method of their synthesis, use and pharmaceutical composition |
| RU2152219C1 (en) * | 1998-04-08 | 2000-07-10 | Научно-Исследовательский Институт Трансплантологии И Искусственных Органов | Peptides showing immunostimulating activity, method of their synthesis, drug based on thereof, splenopid and its using |
| CN101292697A (en) * | 2007-04-23 | 2008-10-29 | 北京康比特体育科技股份有限公司 | Motion nutrition candy |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Makletsova MG., et al., Effect of delta sleep-inducing peptide on macromolecule biosynthesis in brain tissue of stressed rodents. Bull Exp Biol Med. 2006 Apr; 141(4):416-9. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012110912A (en) | 2013-11-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McCarthy et al. | Preliminary studies on the use of plasma β-endorphin in horses as an indicator of stress and pain | |
| BR112021000653A2 (en) | DOSAGE REGIME FOR TREATMENT OF COGNITIVE AND MOTOR COMMITMENTS WITH BLOOD PLASMA AND BLOOD PLASMA PRODUCTS | |
| Nie et al. | Electro‐acupuncture alleviates adolescent cocaine exposure‐enhanced anxiety‐like behaviors in adult mice by attenuating the activities of PV interneurons in PrL | |
| US6726932B2 (en) | Fatty acid-containing composition | |
| KR101689259B1 (en) | Composition having effects of preventing or recovering fatigue or stress | |
| RU2503459C2 (en) | Agent for extreme performance stimulation, method for preparing and using it | |
| JP6671671B1 (en) | Preventive and / or therapeutic drug for allergic rhinitis | |
| RU2496504C1 (en) | Agent for extreme performance stimulation, method for preparing and using it | |
| RU2503457C2 (en) | Agent for extreme performance stimulation | |
| KR20120069221A (en) | Bee venom composition | |
| Gao et al. | Abdominal ultrasound stimulation alleviates DSS-induced colitis and behavioral disorders in mice by mediating the microbiota–gut–brain axis balance | |
| CN104138396B (en) | The use of albicans albicans in the preparation of anti-fatigue health products | |
| Hafedh et al. | Exercise training improves memory and produces changes in the adrenal gland morphology in the experimental autoimmune encephalomyelitis | |
| Songailaitė et al. | THE INFLUENCE OF ORIGANUM ONITES L. EXTRACT ON MALONDIALDEHYDE (MDA) IN VIVO | |
| Mohammadi et al. | The effect of four weeks of physical activity in the enriched environment on inflammatory and anti-inflammatory factors in the dorsal horn of the spinal cord of mice with experimental autoimmune encephalomyelitis | |
| Zhang et al. | Effects of goshajinkigan (niu-che-sen-qi-wan) for resiniferatoxin-sensitive afferents on detrusor overactivity induced by acetic acid in conscious rats | |
| Nerdy et al. | Mucolytic activity of roselle (Hibiscus sabdariffa L.) Calyces extract on cow intestinal mucus | |
| Djukanovic et al. | Wheal-and-flare responses to intradermally injected adenosine 5′-monophosphate, hypertonic saline, and histamine: comparison of atopic and nonatopic subjects | |
| CN117838829A (en) | Traditional Chinese medicine composition for improving inflammation-associated fatigue | |
| Shi et al. | Effects of casein non-phosphopeptide on the development of rat muscle analyzed using computed tomography scanning technology | |
| CN102475680A (en) | Stephanine hydrochloride injection and preparation method and detection method thereof | |
| Fan et al. | Microscopic Examination to Clarify the Micro-Neural Changes and Mechanisms of the Intestinal Mucosal Immune Barrier Structure and Function during Excessive Martial Arts Training. | |
| JPS6144822A (en) | Health promoting and keeping agent containing chondroitin sulfate | |
| Salazar et al. | CRISPR-mediated knockdown of oxytocin receptor in extended amygdala reduces stress-induced social avoidance and vigilance | |
| CN119633028A (en) | Application of Himalayan Mirabilis jalapa extract and its chemical components in anti-fatigue |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RH4A | Copy of patent granted that was duplicated for the russian federation |
Effective date: 20141021 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140323 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20150510 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160323 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20190207 |
|
| HE4A | Change of address of a patent owner |
Effective date: 20200806 |