RU2593499C2 - Лекарственная форма левокарримицина, способ его получения и использования - Google Patents
Лекарственная форма левокарримицина, способ его получения и использования Download PDFInfo
- Publication number
- RU2593499C2 RU2593499C2 RU2012156419/04A RU2012156419A RU2593499C2 RU 2593499 C2 RU2593499 C2 RU 2593499C2 RU 2012156419/04 A RU2012156419/04 A RU 2012156419/04A RU 2012156419 A RU2012156419 A RU 2012156419A RU 2593499 C2 RU2593499 C2 RU 2593499C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- carrimycin
- spiramycin
- iii
- levocarrimycin
- levorotatory
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 title description 4
- GIDHDUYAXIVIMN-JJORJHTQSA-N CCC(=O)O[C@@H]1CC(=O)O[C@H](C)C\C=C\C=C\[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]3C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O3)[C@@H]([C@H]2O)N(C)C)[C@H]1OC Chemical compound CCC(=O)O[C@@H]1CC(=O)O[C@H](C)C\C=C\C=C\[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]3C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O3)[C@@H]([C@H]2O)N(C)C)[C@H]1OC GIDHDUYAXIVIMN-JJORJHTQSA-N 0.000 claims abstract description 93
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 69
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 69
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 48
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 37
- 239000004187 Spiramycin Substances 0.000 claims abstract description 30
- 238000000634 powder X-ray diffraction Methods 0.000 claims abstract description 28
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims abstract description 27
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 22
- 229960001294 spiramycin Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 229930191512 spiramycin Natural products 0.000 claims abstract description 17
- 235000019372 spiramycin Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 15
- 229950003659 spiramycin iii Drugs 0.000 claims abstract description 14
- HSZLKTCKAYXVBX-VPIGJTHDSA-N Spiramycin-III Natural products CCC(=O)O[C@@H]1CC(=O)O[C@H](C)CC=CC=C[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]4C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O4)[C@@H]([C@H]3O)N(C)C)[C@H]1OC HSZLKTCKAYXVBX-VPIGJTHDSA-N 0.000 claims abstract description 11
- HSZLKTCKAYXVBX-LYIMTGTFSA-N Spiramycin III Chemical compound O([C@H]1/C=C/C=C/C[C@@H](C)OC(=O)C[C@H]([C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@](C)(O)C3)[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@@H](CC=O)C[C@H]1C)OC)OC(=O)CC)[C@H]1CC[C@H](N(C)C)[C@@H](C)O1 HSZLKTCKAYXVBX-LYIMTGTFSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 7
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims abstract 4
- ACTOXUHEUCPTEW-BWHGAVFKSA-N 2-[(4r,5s,6s,7r,9r,10r,11e,13e,16r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-5-[(2s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-4,6-dimethyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-3-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-10-[(2s,5s,6r)-5-(dimethylamino)-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-5-methoxy-9,16-dimethyl-2-o Chemical compound O([C@H]1/C=C/C=C/C[C@@H](C)OC(=O)C[C@@H](O)[C@@H]([C@H]([C@@H](CC=O)C[C@H]1C)O[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@](C)(O)C2)[C@@H](C)O1)N(C)C)O)OC)[C@@H]1CC[C@H](N(C)C)[C@@H](C)O1 ACTOXUHEUCPTEW-BWHGAVFKSA-N 0.000 claims abstract 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 192
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 142
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 136
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 135
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 96
- GCIQAGXAZPUQNA-YDPAJNKASA-N CO[C@H]1[C@H](O)CC(=O)O[C@H](C)C\C=C\C=C\[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@@H]1O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O2)[C@@H]([C@H]1O)N(C)C Chemical compound CO[C@H]1[C@H](O)CC(=O)O[C@H](C)C\C=C\C=C\[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@@H]1O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O2)[C@@H]([C@H]1O)N(C)C GCIQAGXAZPUQNA-YDPAJNKASA-N 0.000 claims description 84
- PNMQDIDLWTXQLZ-RZELCZIWSA-N CO[C@H]1[C@@H](CC(=O)O[C@H](C)C\C=C\C=C\[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@@H]1O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O2)[C@@H]([C@H]1O)N(C)C)OC(C)=O Chemical compound CO[C@H]1[C@@H](CC(=O)O[C@H](C)C\C=C\C=C\[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@@H]1O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O2)[C@@H]([C@H]1O)N(C)C)OC(C)=O PNMQDIDLWTXQLZ-RZELCZIWSA-N 0.000 claims description 78
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 39
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 33
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 33
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 33
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 29
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 29
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 27
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 26
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 25
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 25
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 claims description 21
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 claims description 21
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 21
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 18
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims description 17
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims description 15
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 claims description 15
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 14
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 11
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 10
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 claims description 10
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 10
- DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H aluminium sulfate (anhydrous) Chemical compound [Al+3].[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 10
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 10
- 208000007764 Legionnaires' Disease Diseases 0.000 claims description 8
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 8
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 claims description 7
- 241000589248 Legionella Species 0.000 claims description 7
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 7
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 7
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 claims description 7
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 7
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 claims description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 6
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 6
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 5
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 5
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 claims description 4
- 241000607768 Shigella Species 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 claims description 3
- 241000202898 Ureaplasma Species 0.000 claims description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 3
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 claims description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 3
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 2
- 241000589244 Fluoribacter bozemanae Species 0.000 claims description 2
- 241000589278 Fluoribacter gormanii Species 0.000 claims description 2
- 241000589276 Legionella jordanis Species 0.000 claims description 2
- 241001523956 Parengyodontium album Species 0.000 claims description 2
- 241000605861 Prevotella Species 0.000 claims description 2
- 241001505901 Streptococcus sp. 'group A' Species 0.000 claims description 2
- 241000589262 Tatlockia micdadei Species 0.000 claims description 2
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 claims description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims description 2
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 3
- 241001647372 Chlamydia pneumoniae Species 0.000 claims 1
- 241000606153 Chlamydia trachomatis Species 0.000 claims 1
- 241000589282 Fluoribacter dumoffii Species 0.000 claims 1
- 241000605909 Fusobacterium Species 0.000 claims 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims 1
- 241000589242 Legionella pneumophila Species 0.000 claims 1
- 241000202934 Mycoplasma pneumoniae Species 0.000 claims 1
- 241000108664 Nitrobacteria Species 0.000 claims 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims 1
- 241000208474 Protea Species 0.000 claims 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 claims 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 claims 1
- 229940038705 chlamydia trachomatis Drugs 0.000 claims 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims 1
- 229940115932 legionella pneumophila Drugs 0.000 claims 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 claims 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 41
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 38
- 229950006796 spiramycin ii Drugs 0.000 abstract description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 15
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 7
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 abstract description 5
- ZPCCSZFPOXBNDL-LWXQEXJOSA-N Spiramycin-II Natural products CO[C@H]1[C@@H](CC(=O)O[C@H](C)CC=CC=C[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@@H](CC=O)[C@@H]1O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]4C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O4)[C@@H]([C@H]3O)N(C)C)OC(=O)C ZPCCSZFPOXBNDL-LWXQEXJOSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract description 3
- 229950001955 spiramycin i Drugs 0.000 abstract description 3
- VCZCNQGYDMIUGX-FLROPGNWSA-N [(4r,5s,6s,7r,9r,10r,11e,13e,16r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-5-[(2s,4r,5s,6s)-5-acetyloxy-4-hydroxy-4,6-dimethyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-3-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-10-[(2r,5s,6r)-5-(dimethylamino)-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-methoxy-9,16-dimethyl-2-oxo-7 Chemical compound O([C@H]1/C=C/C=C/C[C@@H](C)OC(=O)C[C@H]([C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](OC(C)=O)[C@](C)(O)C3)[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@@H](CC=O)C[C@H]1C)OC)OC(=O)CC)[C@H]1CC[C@H](N(C)C)[C@@H](C)O1 VCZCNQGYDMIUGX-FLROPGNWSA-N 0.000 abstract 1
- ACTOXUHEUCPTEW-ZOTSFZJCSA-N spiramycin I Natural products CO[C@H]1[C@H](O)CC(=O)O[C@H](C)CC=CC=C[C@H](O[C@H]2CC[C@@H]([C@@H](C)O2)N(C)C)[C@H](C)C[C@H](CC=O)[C@@H]1O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]4C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O4)[C@@H]([C@H]3O)N(C)C ACTOXUHEUCPTEW-ZOTSFZJCSA-N 0.000 abstract 1
- ZPCCSZFPOXBNDL-RSMXASMKSA-N spiramycin II Chemical compound O([C@H]1/C=C/C=C/C[C@@H](C)OC(=O)C[C@H]([C@@H]([C@H]([C@@H](CC=O)C[C@H]1C)O[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@](C)(O)C2)[C@@H](C)O1)N(C)C)O)OC)OC(C)=O)[C@H]1CC[C@H](N(C)C)[C@H](C)O1 ZPCCSZFPOXBNDL-RSMXASMKSA-N 0.000 abstract 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 90
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 70
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 60
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 51
- ACTOXUHEUCPTEW-CEUOBAOPSA-N 2-[(4r,5s,6s,7r,9r,10r,11e,13e,16r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-5-[(2s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-4,6-dimethyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-3-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-10-[(2r,5s,6r)-5-(dimethylamino)-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-5-methoxy-9,16-dimethyl-2-o Chemical class O([C@H]1/C=C/C=C/C[C@@H](C)OC(=O)C[C@@H](O)[C@@H]([C@H]([C@@H](CC=O)C[C@H]1C)O[C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H](O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@](C)(O)C2)[C@@H](C)O1)N(C)C)O)OC)[C@H]1CC[C@H](N(C)C)[C@@H](C)O1 ACTOXUHEUCPTEW-CEUOBAOPSA-N 0.000 description 43
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 42
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 34
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 32
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 32
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 30
- 229960004099 azithromycin Drugs 0.000 description 28
- MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N azithromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)N(C)C[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 MQTOSJVFKKJCRP-BICOPXKESA-N 0.000 description 28
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 21
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 20
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 19
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 19
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 18
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 18
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 14
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 10
- -1 combination Substances 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- 201000005019 Chlamydia pneumonia Diseases 0.000 description 9
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 9
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 9
- 208000030773 pneumonia caused by chlamydia Diseases 0.000 description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 9
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 7
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 7
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 6
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 6
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 6
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 6
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 6
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 description 6
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 6
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 6
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 5
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 4
- 206010018612 Gonorrhoea Diseases 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 4
- 208000001786 gonorrhea Diseases 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 4
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 3
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 3
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 3
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 3
- 208000001572 Mycoplasma Pneumonia Diseases 0.000 description 3
- 201000008235 Mycoplasma pneumoniae pneumonia Diseases 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 229960001701 chloroform Drugs 0.000 description 3
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 3
- FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxomagnesium;hydrate Chemical compound O.[Mg]=O.[Mg]=O.[Mg]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O.O=[Si]=O FPAFDBFIGPHWGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 3
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 2
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N adipic acid Chemical compound OC(=O)CCCCC(O)=O WNLRTRBMVRJNCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000012059 conventional drug carrier Substances 0.000 description 2
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 2
- FLKPEMZONWLCSK-UHFFFAOYSA-N diethyl phthalate Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)OCC FLKPEMZONWLCSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 2
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 2
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000007944 soluble tablet Substances 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 241001251200 Agelas Species 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 241000606123 Bacteroides thetaiotaomicron Species 0.000 description 1
- 241000606215 Bacteroides vulgatus Species 0.000 description 1
- 108020004256 Beta-lactamase Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 1
- 241000498849 Chlamydiales Species 0.000 description 1
- 206010009137 Chronic sinusitis Diseases 0.000 description 1
- 241000588923 Citrobacter Species 0.000 description 1
- 241001112696 Clostridia Species 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical class CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000605978 Fusobacterium russii Species 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 1
- 208000004547 Hallucinations Diseases 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000606210 Parabacteroides distasonis Species 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920003081 Povidone K 30 Polymers 0.000 description 1
- 241001135261 Prevotella oralis Species 0.000 description 1
- 241000605860 Prevotella ruminicola Species 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000607715 Serratia marcescens Species 0.000 description 1
- 206010041925 Staphylococcal infections Diseases 0.000 description 1
- 208000031320 Teratogenesis Diseases 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 229920002494 Zein Polymers 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- OZZOVSQSDIWNIP-UHFFFAOYSA-N acetic acid;azane Chemical compound [NH4+].[NH4+].CC([O-])=O.CC([O-])=O OZZOVSQSDIWNIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- 239000001361 adipic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011037 adipic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003466 anti-cipated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012984 antibiotic solution Substances 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001914 calming effect Effects 0.000 description 1
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 235000019993 champagne Nutrition 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 208000027157 chronic rhinosinusitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 1
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 1
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 1
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000000688 enterotoxigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 239000000246 fibrin derivative Substances 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- USSIQXCVUWKGNF-QGZVFWFLSA-N levomethadone Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C[C@@H](C)N(C)C)(C(=O)CC)C1=CC=CC=C1 USSIQXCVUWKGNF-QGZVFWFLSA-N 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006742 locomotor activity Effects 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 208000015688 methicillin-resistant staphylococcus aureus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 201000001245 periodontitis Diseases 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 108010088880 plasmagel Proteins 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 229940043274 prophylactic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 150000003856 quaternary ammonium compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000565 sealant Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000026425 severe pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- ACTOXUHEUCPTEW-UHFFFAOYSA-N spiramycins Chemical class CC1CC(CC=O)C(OC2C(C(C(OC3OC(C)C(O)C(C)(O)C3)C(C)O2)N(C)C)O)C(OC)C(O)CC(=O)OC(C)CC=CC=CC1OC1CCC(N(C)C)C(C)O1 ACTOXUHEUCPTEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 206010044008 tonsillitis Diseases 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 208000025301 tympanitis Diseases 0.000 description 1
- 208000000143 urethritis Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000004552 water soluble powder Substances 0.000 description 1
- 239000005019 zein Substances 0.000 description 1
- 229940093612 zein Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
- C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
- C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к левокарримицину и его использованию для создания лекарств против инфекционных заболеваний. Предложенный левокарримицин представляет собой смесь изовалерилспирамицина III, II и I в качестве основного компонента и содержит один из следующих компонентов: изобутирилспирамицин III и II, бутирилспирамицин III и II, пропионилспирамицин III и II, а также ацетилспирамицин III и II, при этом содержание изовалерилспирамицина III не менее 30% по массе, суммарное содержание изовалерилспирамицина III, II и I не менее 60% по массе, а содержание ацилспирамицина от 80 до 98% по массе, и указанный левокарримицин также содержит спирамицин III и другие компоненты, среди которых содержание спирамицина III не превышает 1,0%, а суммарное содержание других компонентов составляет от 2,0 до 19% по массе, при этом изовалерилспирамицин III характеризуется пиками при 2θ=8,0°, 10,0°, 11,2°, 11,7°, 16,4°, 19,1°, 19,6°, 20,0°, 21,4°, 22,9°, 23,6° и 29,4°, изовалерилспирамицин II характеризуется пиками при 2θ=10,0°, 11,6°, 16,4°, 17,3°, 19,1°, 21,2°, 22,1°, 22,7°, 26,4°, 26,9°, 27,5° и 31,5° и изовалерилспирамицин I характеризуется пиками при 2θ=7,6°, 8,0°, 10,0°, 11,4°, 16,4°, 17,0°, 17,5°, 17,9°, 19,5°, 22,7°, 23,7° и 24,4° при дифракции рентгеновских лучей на порошке, измеренной с применением излучения Cu-Kα; причем указанный левокарримицин получен способом, включающим культивирование клонированного штамма WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, сбраживание, экстракцию с последующей хроматографией и сбором целевого пика; перекристаллизацию левоизовалерилспирамицина I, II или III; смешивание полученного кристаллического левоизовалерилспирамицина I, II или III с левокарримицином, полученным в результате хроматографии. Предложен новый антибиотический состав, обладающий большей растворимостью и эффективностью. 4 н. и 14 з.п. ф-лы, 46 пр., 6 табл., 8 ил.
Description
Техническая область
Изобретение относится к нерасфасованной лекарственной форме Карримицина (Carrimycin) и его лекарственным препаратам, конкретно говоря, относится к макролидным антибиотикам в генной инженерии, а именно лекарственные средства левовращающего Карримицина (Carrimycin), их способу приготовления и их употреблению в приготовлении лечебных и профилактических средств против инфекционных заболеваний.
Техническая среда
Карримицин (Carrimycin) - дериват спирамицина нового поколения, разработанный с помощью генной инженерии, носил первоначальное название «Biotechspiramycin», также биотехмицин (Biotechmycin) [Номер патента: ZL97104440.6]. Согласно «Принципу выбора названий лекарственных препаратов Китая» в результате технической проверки и изучения Государственной фармакопейной комиссией Китая было принято решение переименовать Biotechspiramycin в Карримицин (Carrimycin), название на английском языке «Carrimycin».
Карримицин (Carrimycin) является продуктом сбраживания в генной инженерии, с точки зрения химической структуры его основным составом является 4′′-изовалерил-спирамицин, включающий 4′′-изовалерил-спирамицины I, II, III, кроме этого, Карримицин (Carrimycin) содержит и примерно 6 видов спирамицинов с ацилированной 4-оксигруппой, поэтому он носит общее химическое название 4′′-ацилированный спирамицин».
Химическая структура основного состава Карримицин (Carrimycin) показана на (I):
В том числе:
| R | R' |
| Изовалерил-спирамицин I | H | COCH2CH(CH3)2 |
| Изовалерил-спирамицин II | COCH3 | COCH2CH(CH3)2 |
| Изовалерил-спирамицин III | COCH2CH3 | COCH2CH(CH3)2 |
Карримицин (Carrimycin) представляет собой шестнадцатичленные макролидные антибиотики, механизм действия заключается в сочетании с тельцем Паладе бактерий для ингибирования синтеза белков.
Результаты теста in vitro показали, что Карримицин (Carrimycin) хорошо воздействует на грамм-положительные бактерии, особенно некоторые лекарственно-устойчивые микробы (к примеру, золотистый стафилококк, стойкий к β-лактаму, золотистый стафилококк, стойкий к эритромицину и т.д.), не имеет заметной перекрестной устойчивости к подобным лекарственным средствам. Тем временем, обладает хорошей антибактериальной активностью в отношении микоплазмы и хламидии, части грамм-отрицательных бактерий, обладает благоприятной антибактериальной активностью и проницаемостью тканей в отношении токсоплазм, легионеллы, а также потенциальной иммунологической регуляцией. Антибактериальная активность внутри организма превосходит активность вне организма (ZL200310122420.9). Клинические исследования показали, что прием таблеток Карримицин (Carrimycin) в течение 5-7 дней по 0,2 мг - 0,4 мг в день, дает положительные эффекты в лечении острого бактериального фарингита и острого гнойного тонзиллита, вызванного streptococcus pyogenes; бактериального хронического синусита и острого бронхита, вызванного сенситивными бактериями; не сильной пневмонии, вызванной пневмококком, гемофильной палочкой и микоплазмой пневмония; негонококкового уретрита, вызванного микоплазмой, хламидией; инфекции кожи и мягких тканей, периодонтита, тимпанита и других инфекционных болезней, вызванных сенситивными бактериями. Общий коэффициент полезного действия составляет 92,68%, Карримицин (Carrimycin) безопасен и эффективен.
Результаты фармакокинетических исследований показали, что в Карримицине (Carrimycin) самыми активными составами являются изовалерил-спирамицины I, II, III. После поступления в организм Карримицин (Carrimycin) быстро метаболирует с образованием спирамицина, расчет суммы AUC0-t материнских средств изовалерил-спирамицинов I, II, III и активных метаболитов - спирамицинов I, II, III показал, что при пероральном применении абсолютная биодоступность составляет в среднем 91,6%. По источникам, абсолютная биодоступность спирамицина при пероральном применении для человека составляет в пределах 30-40% (Frydman AM et al JAntimicrob Chemother. 1988, 22 (suppl B): 93-103). Чем доказано, что структура изовалерил-спирамицина в значительной степени улучшила биологическую доступность активного вещества - спирамицина. Разовый прием Карримицина (Carrimycin) медленно дает эффект, Т1/2β в пределах 23-27 ч.
В результате исследования эффективных составов Карримицина (Carrimycin) было обнаружено, что в молекулярной структуре самого активного состава Карримицина (Carrimycin) - изовалерил-спирамицина I, II, III существует несколько хиральных атомов углеводорода. Хиральность (Chirality) - основное свойство трехмерных предметов, является одним из основных свойств природы. В качестве важной основы жизненной деятельности, почти все биологические макромолекулы, как протеин, полисахарид, нуклеиновая кислота, ферменты и т.д., хиральные, и эти макромолекулы, как правило, исполняют важную физиологическую функцию внутри тела. Под хиральными лекарствами (chiral drug) понимаются пары оптических антиподов, являющихся зеркальными отражениями друг друга и полученных после ввода хирального центра в молекулярную структуру лекарства.
Эти оптические антиподы обладают принципиально аналогичными физико-химическими свойствами, отличаются только оптической активностью, откуда и выделились R (правовращающие) или S (левовращающие), рацемические.
За последние 20 лет углубленные изучения в фармации доказали различную стереоспецифичность (stereoselectivity) антиподов лекарственных веществ, они имеют различный аффинитет с рецепторами, в результате чего сильно отличаются фармакологические свойства.
Антиподы хиральных лекарств, имеющие повышенную активность, называют оптимальными антиподами (Eutomer); а антиподы, имеющие низкую активность или не имеющие активности, называют неактивными антиподами (Distomer).
В большинстве случаев, неактивные антиподы не дают эффективности, но они еще частично нейтрализуют эффективность оптимальных антиподов, иногда даже вызывают серьезные токсичные и побочные реакции, что доказало сложность в разнице эф4)ективности лекарственных средств и значительное отличие терапевтического индекса антипода одного антипода от его рацемата, как всем известно, что терапевтическая эффективность синтомицина DL-(+-) составляет только половину хлорамфеникола D(-); а активность L -изомера пропранолола (propranolol) в 100 раз больше чем D-изомер; (-) метадон представляет собой сильное болеутоляющее средство, а (+) не действующее.
Сильно отличается и токсичность, например, оба антипода талидомида (thalidomide) обладают аналогичным успокаивающим действием в отношении мышей, но только S(-) изомер и его метаболит обладают зародышевой токсичностью и тератогенезом; кетамин -широкораспространенные наркотические и болеутоляющие средства, но они дают галлюцинацию и другие побочные действия. Изучения показали, что S(+) дает эффект в 3-4 раза больше R(-), а токсичные и побочные действия явно связаны с последним.
Значительное различие в терапевтической эффективности хиральных лекарств стимулировало развитию работ по разработке, разделению и анализу хиральных лекарств.
Применение техники «Хиральность» позволило удалять из лекарственных средств антиподы, не дающие эффекта или имеющие токсичные и побочные действия, производить чистые хиральные лекарственные вещества, имеющие структуру с одним направлением, что позволило повышать чистоту состава препарата, быстро проявлять терапевтическую эффективность и сокращать курс лечения.
В связи с этим, разработка хиральных лекарств стала одним из новых направлений в разработке новых лекарственных средств мира. Правительства и крупные фармацевтические фирмы разных стран начали вносить большие средства в разработку хиральных лекарственных препаратов, хирального сырья и хиральных интермедиатов, чтобы завоевать фармацевтический рынок мира хиральных лекарственных веществ.
Более того, с непрерывным улучшением хиральной технологии и быстрым распространением жидкостной хроматографии была продвинута работа по разделению, анализу и определению антиподов хиральных лекарств. Хиральные моноэнантиомерные средства получили широкое применение.
В отношении вопроса, обладает ли Карримицин (Carrimycin) оптической активностью, изобретателями был проведен ряд исследований, им было приятно обнаружить, что путем регулирования и оптимизирования условий культивирования и сбраживания получали Карримицин (Carrimycin), который обладает оптической активностью и лучшей противоинфекционной активностью. Ввиду этого, изобретение относится к левовращающему Карримицину (Carrimycin), способу его приготовления, а также его употреблению в приготовлении лечебных и профилактических средств против инфекционных заболеваний.
Общее описание изобретения
Первый объект изобретения относится к левовращающему Карримицину (Carrimycin), который имеет оптическую активность и также отличную противоинфекционную активность.
Второй объект изобретения относится к лекарственной комбинации левовращающего Карримицина (Carrimycin), содержащей левовращающий Карримицин (Carrimycin) с оптической активностью и фармацевтически приемлемые носители.
Третьим объектом изобретения является способ приготовления левовращающего Карримицина (Carrimycin), отличающийся упрощенной технологией производства, удобством контролировать критерий качества. Приготовленный левовращающий Карримицин (Carrimycin) обладает отличной эффективностью, оптической активностью, а также отличной противоинфекционной активностью.
Четвертым объектом изобретения является употребление указанного левовращающего Карримицина (Carrimycin) и лекарственной комбинации левовращающего Карримицина (Carrimycin) в приготовлении лечебных и/или профилактических средств против инфекционных заболеваний, левовращающий Карримицин (Carrimycin) и его лекарственные комбинации высокоэффективны в отношении бактерий, хламидии и микоплазмы, могут использоваться для лечения инфекционных заболеваний.
Для осуществления первого объекта изобретения приняли следующие технические решения:
Левовращающий Карримицин (Carrimycin), отличающийся тем, что он является смесью изовалерил-спирамицинов III, II и I, содержит определенное количество изобутилил-спирамицинов III, II, бутирилспирамицинов III, II, пропионил-спирамицинов III, II и ацетилспирамицинов III, II, в т.ч. содержание изовалерил-спирамицина III не ниже 30% (масс.), общее содержание изовалерил-спирамицинов III, II, I не ниже 60% (масс.), содержание ацилированного спирамицина 80-98% (масс.), предпочтительно 85-98% (масс.), более предпочтительно 90-98% (масс.), еще более предпочтительно 95-98% (масс.); удельная постоянная вращения левовращающего Карримицина (Carrimycin) в хлороформном растворе составляет [α]D-52°~ -57° при 25°С и 0,02 г/мл, предпочтительно -54°~ -56°, более предпочтительно -55°.
Изобретатели проводили многочисленные исследования о Карримицине (Carrimycin), регулировали и оптимизировали условия культивирования и сбраживания, особенно регулировали уровень pH в процессе сбраживания с помощью средства для регулирования уровня pH, чтобы зависимость уровня pH от времени в процессе сбраживания показывала три непрерывных этапа, и каждый из этапов удовлетворял определенному уравнению, таким образом, получали левовращающий Карримицин (Carrimycin) с оптической активностью. Это может объясняться либо изменением содержания составов с оптической активностью в таких условиях культивирования и сбраживания, либо изменением оптической конфигурации в таких условиях культивирования и сбраживания.
Метод определения удельной постоянной вращения левовращающего Карримицина (Carrimycin): точно взвешивают левовращающий Карримицин (Carrimycin), полученный по настоящему изобретению, добавляют трихлорметан, растворяют и разбавляют до концентрации 20 мг / 1 мл, определяют постоянную вращения калиброванным поляриметром с разрешением до 0,0001° с помощью D-линии спектра натрия (589,3 нм), длина 1 дм, температура 25°С.
Точка плавления левовращающего Карримицина (Carrimycin) изобретения составляет: 112-122°C, предпочтительно 114-120°С, более предпочтительно 116-118°С.
Метод определения: взвешивают сухой указанный препарат в умеренном количестве, кладут в капилляр для определения точки плавления, повторяют определение три раза и принимают среднюю величину.
Карримицин (Carrimycin) изобретения имеет оптическую активность, согласно современной мармакологии в связи с различной стереоспецифичностью антипода лекарственных веществ, они имеют различный аффинитет с рецепторами, в результате чего сильно отличаются фармакологические свойства. Внутренняя и наружная эффективность препарата доказала, что левовращающий Карримицин (Carrimycin) изобретения обладает благоприятным антиинфекционным эффектом и сильной фармакологической активностью. Таким образом, предоставляли новые лекарственные средства для лечения инфекционных заболеваний и закладывали основу для разработки хиральных лекарственных препаратов Карримицин (Carrimycin).
Результаты тестов in vivo и in vitro доказали, что левовращающий Карримицин (Carrimycin) изобретения обладает высокой чувствительностью и низкой лекарственной устойчивостью, эффективен к золотистому Стафилококку, стойкому к лекарствам, кроме этого, он обладает неоценимой ценностью в отношении инфекций, вызванных в результате злоупотребления антибиотиков. Например, инфекции, вызванные Золотистым Стафилококком (MRSA), стойким к метицилину; инфекции, вызванные кишечной палочкой, продуцирующей β-лактамазы расширенного спектра действия (ESBL); инфекционные болезни, вызванные клостридиями диффициле (C-diff), все эти инфекции были вызваны в результате злоупотребления антибиотиков. Такая проблема может быть контролирована с выходом в свет левовращающего Карримицина (Carrimycin).
Указанный в изобретении левовращающий Карримицин (Carrimycin) также содержит спирамицин III и другие составы, в т.ч. содержание спирамицина III не более 1,0%, суммарное содержание других составов 2,0-19% (масс.), предпочтительно 2,0-14,0% (масс.), более предпочтительно 2,0-9,0% (масс.), еще более предпочтительно 2,0-4,0% (масс.).
Указанные в изобретении другие составы содержат не менее 3 улучшенных гомолога спирамицина.
Левовращающий Карримицин (Carrimycin) изобретения является смесью с изовалерил-спирамицинами III, II и I в качестве основных составов, указанный изовалерил-спирамицин III является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III, или указанный изовалерил-спирамицин II является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II, или указанный изовалерил-спирамицин I является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Когда изовалерил-спирамицин III является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III, порошковая рентгеновская дифракция кристалла, измеренная Cu-Kα-лучами, показывает характеристический пик при 2θ, равном 8,0°, 10,0°, 11,2°, 11,7°, 16,4°, 19,1°, 19,6°, 20,0°, 21,4°, 22,9°, 23,6° и 29,4°;
Когда изовалерил-спирамицин II является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II, порошковая рентгеновская дифракция кристалла, измеренная Cu-Kα-лучами, показывает характеристический пик при 2θ, равном, 10,0°, 11,6°, 16,4°, 17,3°, 19,1°, 21,2°, 22,1°, 22,7°, 26,4°, 26,9°, 27,5° и 31,5°;
Когда изовалерил-спирамицин I является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I, порошковая рентгеновская дифракция кристалла, измеренная Cu-Kα-лучами, показывает характеристический пик при 2θ, равном, 7,6°, 8,0°, 10,0°, 11,4°, 16,4°, 17,0°, 17,5°, 17,9°, 19,5°, 22,7°, 23,7° и 24,4°.
В результате последующих исследований изобретатели обнаружили, что после очистки и выделения полученного левовращающего Карримицина (Carrimycin) получали однокомпонентный изовалерил-спирамицин I, П, или III, далее путем перекристаллизации одного из компонентов получали кристаллы изовалерил-спирамицина I, II, III, потом перемешивали с левовращающим Карримицином (Carrimycin), таким образом, получали левовращающий Карримицин (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III, II, или I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III, II, или I. Тест in vivo показал, что левовращающий Карримицин (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III, II, или I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III. II, или I, обладает лучшей эффективностью, чем простой левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Для осуществления второго объекта изобретения приняли следующие технические решения:
Лекарственная комбинация левовращающего Карримицина (Carrimycin), в т.ч. указанная лекарственная комбинация левовращающего Карримицина (Carrimycin) содержит вышеуказанные левовращающий Карримицин (Carrimycin) и фармацевтически приемлемые носители.
В лекарственной комбинации, указанной в изобретении, содержание левовращающего Карримицина (Carrimycin) является безопасным и терапевтически эффективным количеством левовращающего Карримицина (Carrimycin), предпочтительное содержание левовращающего Карримицина (Carrimycin) в лекарственной комбинации составляет 10-90% (масс.) более предпочтительно 25-75% (масс.), еще более предпочтительно 40-60% (масс.)
Под термином «безопасное и терапевтически эффективное количество», указанным в изобретении, понимается доза лекарственного средства, соединения, комбинации, продукта или препарата, достаточная для облегчения, реверсирования или лечения заболеваний человека или других млекопитающих, при этом применение таких средств или препаратов не оказывает серьезного повреждающего действия на ткани млекопитающих.
Под термином «фармацевтически приемлемый носитель», указанным в изобретении, понимается обычный носитель лекарственного препарата в области фармацевтики, например разбавитель, воспринимающее средство, как вода; заполняющее вещество, как крахмал, сахароза; связитель, как производные фибрина, соль альгиновой кислоты, желатина и поливиниловый пирролидон; смачиватель как глицерин; дезинтегрирующее средство, как агар, углекислый кальций и натрия гидрокарбонат; активатор поглощения как четвертичные аммониевые соединения; поверхностно-активный агент как цетиловый спирт; адсорбционный носитель, как каолин и бентонит; мягчительное средство как тальковый порошок, стеариновый кальций и магний, полиэтиленгликоль и т.д.. Кроме этого, можно добавлять в комбинацию другие вспомогательные материалы как ароматизирующее вещество, сахаристое вещество и другие.
Для комбинации изобретения можно выбирать безопасное и терапевтически эффективное количество любых из разбавителя, дезинтегранта, мягчительного средства, наполнителя, заполняющего вещества, связителя, смачивателя, активатора поглощения, поверхностно-активного агента, воспринимающего средства или безопасное и терапевтически эффективное количество любого обычного фармацевтического носителя данной области.
Указанная в изобретении лекарственная комбинация левовращающего Карримицина (Carrimycin) приготовлена в формах, подходящих для фармацевтической цели, и может быть жидкими, твердыми, полутвердыми или газообразными препаратами, указанный жидкий препарат выбирают среди раствора для инъекции, трансфузионной среды, раствора, микстуры, сахарного сиропа, настойки, золи, ароматизированной воды, глицеринового раствора, коллоидального раствора, слизи, взвеси или эмульсии; указанный твердый препарат выбирают среди порошка для инъекций, лиофилизированного порошка, таблеток, желатиновых капсул, порошка, пилюль или пленок; указанный полутвердый препарат выбирают среди мази, пластыри, свечи; суппозитория, экстракта, желатин ирующего вещества; указанный газообразный препарат выбирают среди аэрозоли или распыляемого раствора.
В лекарственной комбинации левовращающего Карримицина (Carrimycin), доза применения левовращающего Карримицина (Carrimycin) составляет 10-1500 мг на единичную форму, предпочтительно 100-1000 мг, более предпочтительно 200-500 мг.
Для осуществления третьего объекта изобретения приняли следующие технические решения:
Способ приготовления левовращающего Карримицина (Carrimycin), включает культивирование, сбраживание и экстрагирование, в т.ч. указанное культивирование и сбраживание включают: культивирование клонированного штамма WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, на наклонной питательной среде, потом засев и культивирование на питательной среде семени, далее засев на питательную ферментационную среду, контролирование процесса сбраживания с помощью средства для регулирования уровня pH, сбраживание при уровне pH 6,0-9,0, предпочтительно 6,0-8,0, более предпочтительно 6,0-7,5, при этом зависимость уровня pH от времени показывает три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=k1x1+6,0, где 0,0227≤k1≤1364, 0<x1≤22; второй этап удовлетворял уравнению y2=k2x2+b2, где -0,0735≤k2<0, 6,5<b2≤10,62, 22≤x2≤56, третий этап удовлетворял уравнению y3=k3x3+b3, где 0<k3≤0,0078, 6,06≤b3<6,5, 56≤x3≤120.
Регулировали и оптимизировали условия культивирования и сбраживания, особенно регулировали уровень pH в процессе сбраживания с помощью средства для регулирования уровня pH, чтобы зависимость уровня pH от времени в процессе сбраживания показывала три непрерывных этапа, каждый из этапов удовлетворял определенному уравнению, таким образом, получали левовращающий Карримицин (Carrimycin) с оптической активностью.
В изобретении решающим фактором является процесс сбраживания, во всем процессе следует время от времени определять уровень pH, который контролируют путем добавки средства для регулирования уровня pH, в т.ч. в качестве которого выбирают любой среди глюкозы, лимоннокислоты, соляной кислоты, уксусной кислоты, нашатырного спирта, каустической соды, гидроокиси калия, или их комбинацию, предпочтительна глюкоза, лимоннокислота, уксусная кислота, нашатырный спирт или их комбинация, более предпочтительна глюкоза, нашатырный спирт или их комбинация.
Упомянутый в изобретении способ приготовления, в т.ч. указанное экстрагирование включает: обработку сбраживаемой жидкости сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулирование уровня pH фильтрата до 8,5-9,0, экстрагирование бутилацетатом, промывку бутилацетатного экстракта обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагирование водой pH 2,0-2,5 для получения водофазного экстракта, регулирование уровня pH до 4,5-5,5, удаление остаточного бутилацетата возгонкой для получения водного экстракта, фильтрование, регулирование уровня pH фильтрата до 8,5-9,0, осаждение, орошение очищенной воды для получения влажного вещества, далее осушение для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin).
Упомянутый в изобретении способ приготовления, в т.ч. указанная наклонная питательная среда содержит муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, CaCO3 0,5%, NaCl 0,4% и агар 2%.
Упомянутый в изобретении способ приготовления, в т.ч. указанная питательная среда семени содержит муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3%, NaCl 0,4%, СаСО3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%.
Упомянутый в изобретении способ приготовления, в т.ч. указанная питательная ферментационная среда содержит глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO30,6%, NaCl 1,0%, CaCO3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%.
Упомянутый в изобретении способ приготовления, в т.ч. под упомянутым культивированием на наклонной питательной среде понимается культивирование в течение 8-15 сут. при 28-38°С.
Упомянутый в изобретении способ приготовления, в т.ч. под упомянутым культивированием на питательной среде семени понимается культивирование в течение 40-80 ч. при 25-30°С.
Упомянутый в изобретении способ приготовления, в т.ч. под упомянутым сбраживанием на питательной ферментационной среде понимается культивирование в течение 72-120 ч. при 26-30°С.
Когда левовращающий Карримицин (Carrimycin) содержит кристаллы изовалерил-спирамицина I, II или III, указанный способ приготовления также включает следующие шаги:
a) Выделение и очистка левовращающего Карримицина (Carrimycin) для получения левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III;
b) Перекристаллизация полученного левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III для получения кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III;
c) Удаление ацетонитрила вращающим испарением из левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученного по п. a) после выделения и очистки от левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III, потом экстрагирование однократным этилацетатом, удаление из экстракта этилацетата вращающим испарением для получения пастообразных проб; переплавление полученных проб петролейньш эфиром, далее удаление петролейного эфира вращающим испарением для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin);
d) Смешивание кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III, полученных по п. b), с левовращающим Карримицином (Carrimycin), полученным по п. c) для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I, II или III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III.
Способ приготовления, согласно изобретению, в т.ч. указанные в п. a) выделение и очистка включают:
очистку левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученного после предварительного выделения препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией, применяя хроматографическую колонну ODS, проведение градиентной элюции с помощью ацетонитрила и буферного раствора уксуснокислого амминия, ультрафиолетового контроля, регистрации ультрафиолетовой спектрограммы выделения, сбор целевого пика состава левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III:
Хроматографическая колонна: приготовление хроматографической колонны из ODS;
Подвижная фаза: ацетонитрил (А), 0,1 моль водный раствор уксуснокислого амминия (В);
Градиент: применяли линейный градиент 0-60 мин., А: 25% - 65%; 61-90 мин., А: 65%-90%;
Скорость потока: 260 мЛ/мин;
Объем вводимого образца: 10 мЛ;
Концентрация вводимого образца: 0,5 г/мЛ;
Контрольная длина волны: 231 нм;
Способ сбора: ультрафиолетовый пуск;
Собирают образцы левовращающего изовалерил-спирамицина I согласно времени выдержки левовращающего изовалерил-спирамицина I RT 44,759 мин; или собирают образцы левовращающего изовалерил-спирамицина II согласно времени выдержки левовращающего изовалерил-спирамицина II RT 43,34 мин; или собирают образцы левовращающего изовалерил-спирамицина III согласно времени выдержки левовращающего изовалерил-спирамицина III RT 48,009 мин. Далее удаляют ацетонитрил вращающим испарением, потом экстрагируют однократным этилацетатом, удаляют из экстракта этилацетат вращающим испарением для получения пастообразных проб; переплавливают полученные пробы петролейным эфиром, далее удаляют петролейный эфир вращающим испарением для получения белых порошковых частиц левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III.
Способ приготовления, согласно изобретению, в т.ч.
когда изовалерил-спирамицин I является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I, данный кристалл получается по следующему методу перекристаллизации: сначала растворяют полученные белые порошковые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина I в смешанном растворителе безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, потом наливают очищенную воду с одновременным перемешиванием, после налива очищенной воды температура снижается до 5°С - 15°С, при этом продолжают перемешивание до получения кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I. В примененном смешанном растворителе отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляет 1:0,1-10:0,5-1, предпочтительно 1:2-8:0,8-1.
В т.ч. первое предпочтительное техническое решение по перекристаллизации кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I заключается в том, что объем вводимой очищенной воды в 2-9 раз больше суммы объема этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, предпочтительно 2,5-7,5 раза; скорость ввода очищенной воды 4-10 мл/мин, предпочтительно 6-8 мл/мин.
Второе предпочтительное техническое решение по перекристаллизации кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I заключается в том, что в примененной смеси растворителей отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляет 1: 0,1-10; 0,5-1, предпочтительно 1: 2-8: 0,8-1.
Третье предпочтительное техническое решение по перекристаллизации указанных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I заключается в том, что скорость перемешивания вводимой очищенной воды 30-60 р/мин, предпочтительно 45-60 р/мин; после ввода очищенной воды скорость перемешивания 10-30 р/мин, предпочтительно 10-20 р/мин.
Четвертое предпочтительное техническое решение по перекристаллизации указанных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I заключается в том, что скорость охлаждения после ввода очищенной воды 1-3°C /ч, предпочтительно 1-1.5°C /ч.
когда изовалерил-спирамицин II является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II, данный кристалл получается по следующему методу перекристаллизации: сначала растворяют полученные белые порошковые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина II в смешанном растворителе безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, потом наливают очищенную воду с одновременным перемешиванием, после налива очищенной воды температура снижается до 5°С - 15°С, при этом продолжают перемешивание до получения кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II. В примененном смешанном растворителе отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляет 1: 0,1-10: 0,5-1, предпочтительно 1: 2-8: 0,8-1;
В т.ч. первое предпочтительное техническое решение по перекристаллизации кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II заключается в том, что объем вводимой очищенной воды в 2-9 раз больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, предпочтительно 2,5-7,5 раза; скорость ввода очищенной воды 4-10 мл/мин, предпочтительно 6-8 мл/ мин.
Второе предпочтительное техническое решение по перекристаллизации кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II заключается в том, что в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему безводного ацетона и к объему абсолютного этилового спирта составляет 1: 0,1-10: 0,5-1, предпочтительно 1: 2-8: 0,8-1.
Третье предпочтительное техническое решение по перекристаллизации указанных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II заключается в том, что скорость перемешивания вводимой очищенной воды 30-60 р/мин, предпочтительно 45-60 р/мин; после ввода очищенной воды скорость перемешивания 10-30 р/мин, предпочтительно 10-20 р/мин.
Четвертое предпочтительное техническое решение по перекристаллизации указанных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II заключается в том, что скорость охлаждения после ввода очищенной воды 1-3°С /ч, предпочтительно 1-1.5°С /ч.
Когда изовалерил-спирамицин III является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III, данный кристалл получается по следующему методу перекристаллизации: сначала растворяют полученные белые порошковые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина III в смешанном растворителе безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, потом наливают очищенную воду с одновременным перемешиванием, после налива очищенной воды температура снижается до 5°С - 15°С, при этом продолжают перемешивание до получения кристалла левовращающего изовалерил-спирамицина III. В примененном смешанном растворителе отношение объема безводного метанола к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляет 1: 0,1-10: 0,5-1, предпочтительно 1: 2-8; 0,8-1.
В т.ч. первое предпочтительное техническое решение по перекристаллизации кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III заключается в том, что объем вводимой очищенной воды в 2-9 раз больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, предпочтительно 2,5-7,5 раза; скорость ввода очищенной воды 4-10 мл/мин, предпочтительно 6-8 мл/мин.
Второе предпочтительное техническое решение по перекристаллизации кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III заключается в том, что в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляет 1: 0,1-10: 0,5-1, предпочтительно 1: 2-8: 0,8-1.
Третье предпочтительное техническое решение по перекристаллизации указанных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III заключается в том, что скорость перемешивания вводимой очищенной воды 30-60 р/мин, предпочтительно 45-60 р/мин; после ввода очищенной воды скорость перемешивания 10-30 р/мин, предпочтительно 10-20 р/мин.
Четвертое предпочтительное техническое решение по перекристаллизации указанных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III заключается в том, что скорость охлаждения после ввода очищенной воды 1-3°C /ч, предпочтительно 1-1,5°C /ч.
Изобретение также относится к употреблению левовращающего Карримицина (Carrimycin) или лекарственной комбинации левовращающего Карримицина (Carrimycin) в приготовлении лечебных средств против инфекционных заболеваний.
Указанные в изобретении инфекционные заболевания вызваны заражением грамм-положительными бактериями, золотистым Стафилококком, пневмококком, микоплазмой пневмония, хламидией пневмониз, уреаплазмой уреалитикум, трахоматозными хламидиями, streptococcus pyogenes, микрококком катаральным, нейссерией гонорея, гемофильной палочкой, легионеллой или анаэробными бактериями.
Изобретение также относится к употреблению указанного левовращающего Карримицина (Carrimycin) или указанной лекарственной комбинации левовращающего Карримицина (Carrimycin) в приготовлении антибактериальных средств, указанные бактерии:
пневмококк, стрептококк группы A, streptococcus pyogenes, энтерококк, золотистый стафилококк, эпидермальный стафилококк, микрококк катаральный, нейссерия гонорея, гемофильная палочка, колибацилла или кишечная палочка, энтеротоксигенные кишечные палочки, патогенная кишечная палочка, enteroinvasive escherichia coli, синегнойная палочка, клебсиелла пневмонии, протеус вульгарис, тифозная палочка, акинетобактерии, лимоннокислота, цитробактер, serratia marcescens, шигелла зонне, шигелла Флекснера, бацилла, tritirachium album; легионеллы. как легионеллезная пневмония, legionella gormanii, legionella bozemanii, legionella dumoifii, legionella jordanis, legionella micdadei; анаэробные бактерии, как бактероиды фрагилис, bacteroides thetaiotaomicron, бактероиды вульгатус, bacteroides distasonis, bacteroides ruminicola, prevotella asaccharolyticus, prevotella oralis, палочка Плаута, fusobacterium russii, бифидобактерии, лактобацилла, пептострептококки, пропионибактерии акне, клостридии перфрингенс, дрожжеподобный гриб.
Как правило, специалисты данной области понимают, что количество требуемого в лечении активного вещества зависит от многих факторов, включая характер болезни, возраст и состояние пациента, и в конце концов решение принимается ведущим врачом. При введении лекарственной комбинации левовращающего Карримицина (Carrimycin) данного изобретения на единичную форму, доза применения указанного левовращающего Карримицина (Carrimycin) составляет 10-1500 мг на единичную форму, предпочтительно 100-1000 мг, более предпочтительно 200-500 мг. Тотальная доза в сутки разделяется на унифицированные дозы или фракционированные дозы. Тесты фармакодинамические in vivo и vitro доказали, что активное вещество левовращающего Карримицина (Carrimycin) или лекарственной комбинации левовращающего Карримицина (Carrimycin) обладает оптической активностью и также относительно хорошей антиинфекционной эффектностью, имеет не только антибактериальную активность в отношении грамм-положительных бактерий, особенно золотистого стафилококка, стойкого к эритромицину и β-лактаму, пневмококка, streptococcus pyogenes, но и в отношении нескольких отрицательных бактерий, как микрококка катарального, нейссерии гонорея, гемофильной палочки, части легионеллов и анаэробных бактерий, особенно заметную активность в отношении микоплазмы пневмония, хламидии пневмониз.
По сравнению с существующей технологией, изобретение имеет следующие преимущества:
1) Левовращающий Карримицин (Carrimycin) изобретения имеет оптическую активность, согласно современной мармакологии, в связи с различной стереоспецифичностью антипода лекарственных веществ, они имеют различный аффинитет с рецепторами, в результате чего сильно отличаются фармакологические свойства. Результаты тестов in vivo и in vitro доказали, что левовращающий Карримицин (Carrimycin) данного изобретения имеет отличную антиинфекционную эффектность и весьма сильную фармакологическую активность, таким образом, получили новый препарат для лечения инфекционных заболеваний, что и заложило основание для исследования и разработки хиральных лекарственных препаратов Карримицина (Carrimycin); а в результате тестов in vivo было обнаружено, что левовращающий Карримицин (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I II или III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I II или III, при лечении мышей, зараженных 12 штаммами бактерий, проявлял более благоприятную защитную эффективность;
2) Согласно способу приготовления левовращающего Карримицина (Carrimycin), указанному в изобретении, регулировали и оптимизировали условия культивирования и сбраживания, особенно регулировали уровень pH в процессе сбраживания с помощью средства для регулирования уровня pH, чтобы зависимость уровня pH от времени в процессе сбраживания показывала три непрерывных этапа, каждый из этапов удовлетворял определенному уравнению, таким образом, получали левовращающий Карримицин (Carrimycin) с оптической активностью;
3) Указанный в изобретении способ приготовления левовращающего Карримицина (Carrimycin) отличается упрощенной технологией производства и рассчитан на масштабное промышленное производство. Список рисунков
Рис.1: Зависимость уровня pH от времени в процессе сбраживания по примеру 1 изобретения;
Рис.2: Зависимость уровня pH от времени в процессе сбраживания по примеру 2 изобретения;
Рис.3: Зависимость уровня pH от времени в процессе сбраживания по примеру 3 изобретения;
Рис.4: Жидкостная хроматограмма составов стандартного образца Карримицина (Carrimycin), в т.ч.
1 - Спирамицин III
2 - Монометиловый спирамицин II
3 - Монометиловый спирамицин III
4 - Пропионил-спирамицин II
5 - Пропионил-спирамицин III
6 - Изобутирил-спирамицин II
7 - Изовалерил-спирамицин I
8 - Изобутирил-спирамицин III
9 - Изовалерил-спирамицин II
10 - Изовалерил-спирамицин III
Рис.5: Жидкостная хроматограмма левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученного по Примеру 4 изобретения.
Рис.6: Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I изобретения;
Рис.7: Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II изобретения;
Рис.8: Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III изобретения.
Подробные примеры
Настоящее изобретение поясняется с помощью нижеследующих примеров, которые нужно рассматривать как пояснительные, а не ограничивающие объем охраны изобретения.
Пример 1. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin).
1) Культивирование и сбраживание
Культивировали клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, на наклонной питательной среде, потом засевали на питательную среду семени, культивировали, далее засевали на питательную ферментационную среду, контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и нашатырного спирта, проводили сбраживание при уровне pH 6,0-9,0, время сбраживания 120 и зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,1364x1+6,0, где 0<x1≤22; второй этап удовлетворял уравнению y2=-0,0735x2+10,64, где 22≤x2≤56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56≤x3≤120, зависимость уровня pH от времени приведена на Рис.1, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 9,0, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,5 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 4,5, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 8,5, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Cammycin).
Пример 2. Приготовление левовращающего Карримицина (Cammycin).
1) Культивирование и сбраживание
Культивировали клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, на наклонной питательной среде, потом засевали на питательную среду семени, культивировали, далее засевали на питательную ферментационную среду, контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и каустической соды, проводили сбраживание при уровне pH 6,0-8,0, время сбраживания 110 ч, зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,0909x1+6,4, где 0<x1<22; второй этап удовлетворял уравнению y2=-0,0441x2+7,8, где 22<x2<56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56≤x3≤110, зависимость уровня pH от времени приведена на Рис.2, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 8,9, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,2 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 4,2, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 8,6, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Пример 3. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin).
1) Культивирование и сбраживание
Культивировали клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, на наклонной питательной среде, потом засевали на питательную среду семени, культивировали, далее засевали на питательную ферментационную среду, контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и лимоннокислоты. проводили сбраживание при уровне pH 6,0-7,5, время сбраживания 115 ч, зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,068x1+6,0, где 0<x1<22; второй этап удовлетворял уравнению y2=0,0294x2+8,147, где 22<x2<56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56<x3<115, зависимость уровня pH от времени приведена на Рис.3, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 8,6, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,3 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 5,2, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 8,7, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Пример 4. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin).
1) Культивирование и сбраживание
Клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, культивировали в течение 15 сут. при 28°C на наклонной питательной среде, содержащей муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, CaCO3 0,5%, NaCl 0,4% и агара 2%, засевали на питательную среду семени, содержащую муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3,0%, NaCl 0,4%, CaCO3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%, культивировали в течение 80 ч. при 25°C, далее засевали прививочную дозу 0,1% на питательную ферментационную среду, содержащую глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO3 0,6%, NaCl 1,0%, CaCO3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%;
контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и нашатырного спирта, проводили сбраживание при уровне рН 6,0-9,0, время сбраживания 120 ч, и зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,1364x1+6,0, где 0<x1≤22; второй этап удовлетворял уравнению y2=-0,0735x2+10,64, где 22≤x2≤56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56≤x3≤120, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 8,5, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,0 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 4,5, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 8,5, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Cammycin).
Пример 5. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin).
1) Культивирование и сбраживание
Клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, культивировали в течение 8 сут. при 38°С на наклонной питательной среде, содержащей муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, CaCO3 0,5%, NaCl 0,4% и агара 2%, засевали на питательную среду семени, содержащую муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3,0%, NaCl 0,4%, CaCO3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%, культивировали в течение 40 ч. при 30°С, далее засевали прививочную дозу 20% на питательную ферментационную среду, содержащую глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO3 0,6%, NaCl 1,0%, CaCO3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%; контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и нашатырного спирта, проводили сбраживание при уровне pH 6,0-7,5 и 30°С, время сбраживания 115 ч, и зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,0682x1+6,0, где 0<x1<22; второй этап удовлетворял уравнению y2=-0,0294x2+8,147, где 22<x2<56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56<x3<115, зависимость уровня pH от времени приведена на Рис.3, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 9,0, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,5 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 4,5-5,5, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 9,0, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Пример 6. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin).
1) Культивирование и сбраживание
Клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, культивировали в течение 12 сут. при 30°С на наклонной питательной среде, содержащей муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, CaCO3 0,5%, NaCl 0,4% и агара 2%, засевали на питательную среду семени, содержащую муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3,0%, NaCl 0,4%, СаСО3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%, культивировали в течение 60 ч. при 28°С, далее засевали прививочную дозу 10% на питательную ферментационную среду, содержащую глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO3 0,6%, NaCl 1,0%, CaCO3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%; контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и нашатырного спирта, проводили сбраживание при уровне pH 6,0-7,5 и 28°С, время сбраживания 90h, и зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,0682x1+6,0, где 0<x1<22; второй этап удовлетворял уравнению y2=-0,0294x2+8,147, где 22<x2<56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56<x3<90, зависимость уровня pH от времени приведена на Рис.3, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 8,7, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,2 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 5,0, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 8,7, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Пример 7. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin).
1) Культивирование и сбраживание
Клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, культивировали в течение 10 сут. при 35°С на наклонной питательной среде, содержащей муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, CaCO3 0,5%, NaCl 0,4% и агара 2%, засевали на питательную среду семени, содержащую муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3,0%, NaCl 0,4%, СаСО3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%, культивировали в течение 55 ч. при 26°С, далее засевали прививочную дозу 15% на питательную ферментационную среду, содержащую глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO3 0,6%, NaCl 1,0%, СаСО3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%; контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и нашатырного спирта, проводили сбраживание при уровне pH 6,0-7,5 и 27°C, время сбраживания 115h, и зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,0682x1+6,0, где 0<x1<22; второй этап удовлетворял уравнению y2=-0,0294x2+8,147, где 22<x2<56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56<x3<110, зависимость уровня pH от времени приведена на Рис.3, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 8,6, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,3 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 4,8, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 8,8, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Пример 8. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin).
1) Культивирование и сбраживание
Клонированный штамм WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4”-изовалерил-трансферазы, культивировали в течение 13 сут. при 36°C на наклонной питательной среде, содержащей муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, CaCO3 0,5%, NaCl 0,4% и агара 2%, засевали на питательную среду семени, содержащую муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3,0%, NaCl 0,4%, CaCO3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%, культивировали в течение 75 ч. при 27°С, далее засевали прививочную дозу 0,5% на питательную ферментационную среду, содержащую глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO3 0,6%, NaCl 1,0%, CaCO3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%; контролировали процесс сбраживания с помощью глюкозы и нашатырного спирта, проводили сбраживание при уровне pH 6,0-8,0 и 29°С, время сбраживания 98 ч, и зависимость уровня pH от времени показывала три непрерывных этапа, первый этап удовлетворял уравнению y1=0,0909x1+6,4, где 0<x1<22; второй этап удовлетворял уравнению y2=-0,0441x2+7,8, где 22<x2<56; третий этап удовлетворял уравнению y3=0,0078x3+6,06, где 56≤x3≤110, зависимость уровня pH от времени приведена на Рис.2, таким образом, получали сбраживаемую жидкость.
2) Экстрагирование
Обрабатывали сбраживаемую жидкость сернокислым алюминием для получения фильтрата, регулировали уровень pH фильтрата до 8,9, экстрагировали бутилацетатом, промывали бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4 соответственно, экстрагировали водой pH 2,4 для получения водофазного экстракта, регулировали уровень pH до 4,6, удаляли остаточный бутилацетат возгонкой для получения водного экстракта, фильтровали, регулировали уровень pH фильтрата до 8,6, осаждали, орошали осадок очищенной водой для получения влажного вещества, далее осушали и получали левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Пример 9. Метод качественного определения по методу HPLC.
Проводили определение согласно высокоэффективной жидкостной хроматографии (Китайская фармакопея, 2005 г., выпуск 2, Приложение D).
Применяли хроматографическую колонну (AGELA TECHNOLOGIES) Venusil XBP 
подвижную фазу А - ацетонитрил, подвижную фазу В-0,01 мол·Л-1 раствор уксуснокислого амминия (регулировали уровень pH до 7,0 с помощью нашатырного спирта), проводили градиентную элюцию согласно нижеследующей таблице; длина волны - 232 нм; скорость потока - 1,0 мЛ·мин-1, температура колонны - 25°С; объем вводимого образца - 20 мкл.
| Время(мин) | Подвижная фаза А (%) | Подвижная фаза В (%) |
| 0 | 35 | 65 |
| 15 | 50 | 50 |
| 50 | 65 | 35 |
| 51 | 35 | 65 |
| 70 | 35 | 65 |
Испытания на хроматографические условия и системную применимость проводили согласно жидкостной хроматограмме составов стандартного образца Карримицина (Carrimycin) (Рис.4), регулировали хроматографические условия, при необходимости можно изменять условия градиентной элюции подвижной фазы, чтобы диаграмма состава входного образца левовращающий Карримицин (Carrimycin) соответствовала диаграмме состава стандартного образца Карримицина (Carrimycin) (Рис.4).
Стандартный раствор: точно взвешивали стандартный образец в умеренном количестве, растворяли в смеси 0,01 мол/Л раствора уксуснокислого амминия (регулировали уровень рН до 7,0 с помощью нашатырного спирта) - ацетонитрила (65: 35) до 0,4 мг/мл - 0,6 мг/мл в качестве стандартного раствора, размешивали до полного растворения на дальнейшее использование.
Испытуемый раствор: точно взвешивали указанный раствор 50 мг, растворяли в смеси 0,01 мол/Л раствора уксуснокислого амминия (регулировали уровень рН до 7,0 с помощью нашатырного спирта) - ацетонитрила (65: 35) до 50 мл в качестве испытуемого раствора, размешивали до полного растворения на дальнейшее использование.
Рассчитывали по площади пика изовалерил-спирамицина III по методу внешнего стандарта. Изовалерил-спирамицин III не ниже 30%; изовалерил-спирамицин (I+II+III) не ниже 60%; общее содержание 9 компонентов ацилированного спирамицина не ниже 80%; содержание спирамицина III не более 1,0%, общее содержание других неизвестных компонентов не более 5,0%. Формула расчета:
Изовалерил-спирамицин III%=Aизовалерил III×Ws×P/(AS×WT)×100%
Изовалерил-спирамицин (I+II+III)%=(Aизовалерил I+Aизовалерил II+Aизовалерил III)×WS×P/(AS×WT)×100%
Общее содержание ацилированного спирамицина %=(Aацетил II+Aацетил III+Aпропионил II+ Aпропионил III+Aизобутилил II+Aизовалерил I+Aизобутилил III+Aизовалерил II+Aизовалерил III)×WS×P/(AS×WT)×100%
Изовалерил-спирамицин III%=Aизовалерил III×WS×P/(AS×WT)×100%
Неизвестные компоненты %=AW×WS×P/(AS×WT)×100%
Где: WS - масса стандартного образца, г;
AS - Площадь пика изовалерил-спирамицина III в стандартном образце;
WT - масса испытуемого образца, г;
AW - сумма площади пика неизвестных компонентов в испытуемом образце;
Р - Чистота изовалерил-спирамицина III в стандартном образце.
Пример 10. Контроль компонентов готового левовращающего Карримицина (Carrimycin) по методу HPLC.
Экстрагировали сбраживаемую жидкость из 8 сбраживаний левовращающего Карримицина (Carrimycin) согласно процессу экстрагирования левовращающего Карримицина (Carrimycin) по Примеру 4 и методу качественного определения по методу HPLC по Примеру 9, результаты контроля HPLC компонентов полученной продукции показаны на табл.1, жидкостная хроматограмма показана на Рис.5.
| Табл. 1 | |||||||||
| Результаты контроля компонентов 8 партий готового левовращающего Карримицина (Carrimycin) по методу HPLC | |||||||||
| Процентное содержание (%) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | Средняя величина |
| isv-III | 35,71 | 34,40 | 34,80 | 32,19 | 35,71 | 35,80 | 35,59 | 35,44 | 34,96 |
| isv-II | 24,67 | 24,93 | 24,36 | 24,85 | 20,02 | 23,91 | 23,87 | 23,76 | 23,80 |
| isv-I | 2,30 | 2,94 | 4,07 | 3,18 | 3,46 | 2,90 | 3,40 | 3,00 | 3,16 |
| bu-III | 3,56 | 2,75 | 3,54 | 3,50 | 3,50 | 3,90 | 4,10 | 4,00 | 3,61 |
| ibu-III | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| bu-II | 0,99 | 1,00 | 1,15 | 1,07 | 1,20 | 1,30 | 1,20 | 0,99 | |
| ibu-II | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| pr-III | 7,91 | 8,09 | 7,65 | 8,19 | 8,24 | 8,40 | 8,70 | 8,50 | 8,21 |
| pr-II | 2,91 | 2,65 | 3,07 | 3,72 | 3,90 | 5,40 | 5,11 | 5,36 | 4,02 |
| ac-III | 1,50 | 1,19 | 1,07 | 0,96 | 1,14 | 1,36 | 1,68 | 1,29 | 1,27 |
| ac-II | 2,84 | 2,92 | 3,05 | 3,08 | 3,47 | 1,89 | 3,18 | 3,09 | 2,94 |
| Общий isv | 62,68 | 62,27 | 63,23 | 60,22 | 59,19 | 62,61 | 62,86 | 62,20 | 61,91 |
| Общ, ацилирование | 82,39 | 80,87 | 81,61 | 80,82 | 80,51 | 84,76 | 86,93 | 85,64 | 82,94 |
Проводили вышеуказанный контроль левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученного по другим примерам, полученная жидкостная хроматограмма показана на Рис.5.
Пример 11. Определение удельной постоянной вращения левовращающего Карримицина (Carrimycin).
Точно взвешивали левовращающий Карримицин (Carrimycin), полученный по примерам изобретения, добавляли трихлорметан, растворяли и разбавляли до концентрации 20 мг / 1 мл, определяли постоянную вращения калиброванным поляриметром с разрешением до 0.0001° с помощью D-линии спектра натрия (589,3 нм), длина 1 дм, температура 25°С.
| Табл. 2 | ||||||||
| Результаты определения удельных постоянных вращения | ||||||||
| № примеров | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
| [α]25 | -52° | -55,2° | -57° | -56° | -54° | -55,3° | 55,1° | 55,4° |
Пример 12. Таблетки-ядра Левовращающий Карримицин (Carrimycin) (10000 таблеток).
Рецептура:
| сырой порошок левовращающего | |
| Карримицина (Carrimycin), полученного по примеру 4 | 1000г |
| оксипропилцеллюлоза с низкой степенью замещения (5%) | 92,5 г |
| карбоксиметил-крахмал натрия (3%) | 55,5 г |
| стеариновый магний (1%) | 18,5 г |
| крахмал | общий вес - вес прочих сырья и вспомогательных материалов |
| общий вес | 1850 г |
Технология приготовления: взвешивали крахмал в подходящем количестве, растворяли до концентрации 15%, нагревали до пастообразного состояния, чтобы получить связитель; просеивали на сите в 100 меш основное сырье Карримицин (Carrimycin), вспомогательные материалы - крахмал, оксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения, карбоксиметил-крахмал натрия, и стеарат магния, взвешивали основное сырье и вспомогательные материалы в необходимом количестве согласно рецептуре; равномерно перемешивали Карримицин (Carrimycin), крахмал и оксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения, приготавливали мягкий агент с помощью крахмальной пасты концентрацией крахмала 15%, гранулировали на сите в 14 меш, осушали при 50-60°С, обеспечивали влажность в пределах 3-5%, формировали гранулы на сите в 14 меш, добавляли карбоксиметил-крахмал натрия и стеариновый магний, и перемешивали, определяли содержание частиц; согласно содержанию частиц рассчитывали вес таблетки, таблетировал (шампон диаметр 9 мм с неглубокой впадиной), проверяли разницу веса таблетки; после получения положительных результатов проводили упаковку.
Пример 13. Желатиновые капсулы Левовращающий Карримицин (Carrimycin) (10000 желатиновых капсул). Рецептура:
| сырой порошок левовращающего | |
| Карримицина (Carrimycin), полученного по Примеру 4 | 1000 г |
| Крахмал (фармацевтический) | 1080 - вес сырого порошка |
| фармацевтическая капсула #3 | 1000 шт. |
| жидкий парафин | 50 мл |
Технология приготовления: взвешивали основное сырье - Карримицин (Carrimycin) и вспомогательные материалы - фармацевтический крахмал согласно рецептуре, положили в миксер и равномерно перемешивали в течение 1,5-2 ч.; отобрали пробы и проверяли содержание, результаты должны принципиально соответствовать теоретическим данным (содержимое в каждой капсуле примерно 0,105 г), положили проверенные с положительными результатами фармацевтические капсулы #3 и перемешанную смесь в загрузочный аппарат для наполнения капсул согласно требованиям к эксплуатации автоматизированной капсулонаполнительной машины, проверяли разницу наполненных капсул (в пределах ±10%, менее 0,3 г), скорость растворения отвечала требованиям, потом положили проверенные с положительными результатами капсулы в фармацевтическую полировочную машину, куда наливали жидкий парафин для проведения полирования в течение 15-20 мин., далее вынимали, проводили упаковку конечных продуктов и проверку.
Пример 14. Дражированные таблетки Левовращающий Карримицин (Carrimycin) (10000 таблеток).
Рецептура: то же, как Пример 12.
Технология приготовления: согласно Примеру 12 положили годные таблетки-ядра в сосуд для нанесения сахарного слоя, медленно положили приготовленный сахарный сироп (концентрация 65-70%) в сосуд, постепенно повышали температуру до 40°С, добавляли умеренное количество талькового порошка, осушали несколько раз подачей воздуха по 25-30 мин., после выравнивания талькового слоя, покрывали сахарным слоем в течение 15-20 мин., после выравнивания сахарного слоя наносили покровный слой нужного цвета, положили приготовленную гестотертую краску в сахарный сироп, равномерно перемешивали и положили в сосуд, повторяли процесс перемешивания по 15-20 мин.
Пример 15. Сухой сахарный сироп Левовращающий Карримицин (Carrimycin) (10000 пакетов). Рецептура:
| сырой порошок левовращающего | |
| Карримицина (Carrimycin), полученного по Примеру 4 | 1250 г |
| лимонная кислота (0,5%) (лимоннокислота) | 15 г |
| сахароза | общий вес - вес прочих сырья и вспомогательных материалов |
| общий вес | примерно 500 г |
| пигмент (куркумин) | примерно 1 г |
Технология приготовления: измельчали сырой порошок Карримицин (Carrimycin), лимонную кислоту и сахарозу высокоскоростным измельчителем до частицы, чтобы 85% частиц прошло через сито в 300 меш, 15% - через сито в 180 меш, далее взвешивали измельченный мелкозернистый порошок по рецептуре и равномерно перемешивали в течение 1-1,5 ч., определяли содержание и рассчитывали вместимость (теоретическая вместимость 500 мг /пакет), далее вмещали смесь в упаковочную машину, устанавливали алюминиевую фольгу, сортировали согласно требованиям к эксплуатации сортировочной машины, разница вместимости в пределах ±5%, после этого проверяли и проводили наружную упаковку.
Пример 16. Кишечно-растворимая таблетка Левовращающий Карримицин (Carrimycin) (10000 таблеток).
Рецептура: то же, как Пример 12.
Технология приготовления: таблетки-ядра приготавливали по Примеру 12, положили годные таблетки-ядра в сосуд для нанесения сахарного слоя, покрывали трем нижним слоем с помощью сахарного сиропа концентрацией 60~70% и талькового порошка, потом покрывали изоляционным слоем, добавляли 10%-спиртовый раствор зеина, продували вращением в течение 10-15 мин., далее закапывали в сосуд диэтилфталат, ацетон, ацетатфталат целлюлозы, спиртовой раствор, т.е. кишечно-растворимый раствор, 2-3 раза продували вращением по 10-15 мин. После проверки с получением положительных результатов покрывали слоем сахара по Примеру 7.
Пример 17. Желудочно-растворимая таблетка Левовращающий Карримицин (Carrimycin) (10000 таблеток).
Рецептура: то же, как Пример 12.
Технология приготовления: таблетки-ядра приготавливали по Примеру 12, положили годные таблетки-ядра в высокоэффективную машину для нанесения покровного слоя, потом приготавливали из годного порошка (включая липорастворимый и водорастворимый порошок) раствор для нанесения покровного слоя, далее положили раствор для нанесения покровного слоя в коллоид, измельчали и фильтровали. Подогревали высокоэффективный сосуд для нанесения покровного слоя с загруженными таблетками-ядрами при скорости вращения в пределах 5-10 р/мин и температуре в пределах 45-60°С, опрыскивали аэрозольным соплом (более 300 меш) раствор для нанесения покровного слоя в сосуд, потом осушали 8-12 раз по 25-35 мин. до равномерного нанесения, осушали естественным способом, проверяли и упаковывали.
Пример 18. Гранулы Левовращающий Карримицин (Carrimycin) (10000 пакетов).
Рецептура:
| сырой порошок левовращающего | |
| Карримицина (Carrimycin), полученного по Примеру 5 | 1250 г |
| сахарная пудра | 20000 г |
| декстрин | 9000 г |
| 5%PVP-K30 | в умеренном количестве |
Технология приготовления: рассеивали сырой порошок Карримицина (Carrimycin), сахарную пудру и декстрин на сите в 120, взвешивали Карримицин (Carrimycin), сахарную пудру и декстрин согласно рецептуре и равномерно перемешивали, приготавливали мягкий агент из равномерно перемешенных вышеуказанных материалов с помощью плазмагеля 5%PVP-K30, осушали и формировали колеблющие гранулы при 70°C, проверяли с положительными результатами и проводили сортировку.
Пример 19. Лиофилизированный порошок для инъекций Левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Взвешивали сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) 500 мг, полученный по Примеру 6 и адипиновую кислоту эквимолекулярных количеств, после равномерного перемешивания, растворяли в 5 мл воды, получали желтоватый прозрачный раствор уровнем pH 4,6-5,6. Добавляли маннитол 40 мг в качестве расклинивающего агента лиофилизированного порошка, быстро замораживали в течение 9 ч в криогенном режиме, замораживали и осушали, получали желтоватый рыхлый массив, который перед применением растворяют в стерильной воде 10 мл.
Пример 20. Лиофилизированный порошок для инъекций Левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Взвешивали сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) 500 мг, полученный по Примеру 4 и лимоннокислоту эквимолекулярных количеств, после равномерного перемешивания, растворяли в 5 мл воды, получали желтоватый прозрачный раствор уровнем pH 4,6-5,6. Добавляли маннитол 40 мг в качестве расклинивающего агента лиофилизированного порошка, быстро замораживали в течение 9 ч. в криогенном режиме, замораживали и осушали, получали желтоватый рыхлый массив, который перед применением растворяют в стерильной воде 10 мл.
Пример 21. Лиофилизированный порошок для инъекций Левовращающий Карримицин (Carrimycin).
Взвешивали сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) 500 мг, полученный по Примеру 5 и малеиновую кислоту эквимолекулярных количеств, после равномерного перемешивания, растворяли в 5 мл воды, получали желтоватый прозрачный раствор уровнем pH 4,6-5,6. Добавляли маннитол 40 мг в качестве расклинивающего агента лиофилизированного порошка, быстро замораживали в течение 9 ч. в криогенном режиме, замораживали и осушали, получали желтоватый рыхлый массив, который перед применением растворяют в стерильной воде 10 мл
Пример 22. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Выделяли и очищали Левовращающий Карримицин (Carrimycin), полученный по Примеру 1.
Очистка левовращающего изовалерил-спирамицина I: очищали образцы, полученные после предварительного выделения, препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией, приготавливали хроматографическую колонну из ODS, проводили градиентную элюцию с помощью ацетонитрила и буферного раствора уксуснокислого амминия, ультрафиолетовый контроль, регистрировали ультрафиолетовую спектрограмму выделения, собирали целевой пик состава левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Хроматографическая колонна: приготовление хроматографической колонны из ODS;
Подвижная фаза: ацетонитрил (А), 0.1 моль водный раствор уксуснокислого амминия (В);
Градиент: применяли линейный градиент 0-60 мин., А: 25%-65%; 61-90 мин., А:
65% - 90%;
Скорость потока: 260 мл/мин;
Объем вводимого образца: 10 мл.;
Концентрация вводимого образца: 0,5 г/мл;
Контрольная длина волны: 231 нм;
Способ сбора: ультрафиолетовый пуск;
Собирали образец левовращающего изовалерил-спирамицина I, согласно времени выдержки левовращающего изовалерил-спирамицина I - 44,759 мин, очищали его от ацетонитрила вращающим испарением, потом экстрагировали однократным этилацетатом, удаляли из экстракта этилацетат вращающим испарением для получения пастообразных проб; переплавливали полученные пробы петролейным эфиром, далее удаляли петролейный эфир вращающим испарением для получения белых порошковых частиц левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Далее перекристаллизировали полученные белые порошковые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина I, способ перекристаллизации как ниже следующее:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина I, полученные по Примеру 1, в смеси растворителей этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 10: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 2,5 раза больше суммы объема этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 4 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 30 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 5°С, скорость понижения температуры 1°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 10 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Порошковая рентгеновская дифракция полученных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I, измеренная Cu-Kα-лучами, показывала характеристический пик при 2θ равном, 7,6°, 8,0°, 10,0°, 11,4°, 16,4°, 17,0°, 17,5°, 17,9°, 19,5°, 22,7°, 23,7° и 24,4°, диаграмма порошковой рентгеновской дифракции показана на Рис.6.
Удаляли ацетонитрил вращающим испарением из вышеуказанного левовращающего Карримицина (Carrimycin), очищенного от левовращающего изовалерил-спирамицина I, потом экстрагировали однократным этилацетатом, удаляли из экстракта этилацетат вращающим испарением для получения пастообразных проб; переплавливали полученные пробы петролейным эфиром, далее удаляли петролейный эфир вращающим испарением для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin); далее перемешивали полученный левовращающий Карримицин (Carrimycin) с вышеуказанным полученным кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Пример 23. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Остальные шаги те же, как Пример 22, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина I в смеси растворителей этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 10: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 9 раз больше суммы объема этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 10 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 60 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 15°С, скорость понижения температуры 3°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 10 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I, измеренная Cu-Kα-лучами аналогична Рис.6.
Пример 24. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Остальные шаги те же, как Пример 22, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина I в смеси растворителей этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 5: 0,8;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 7.5 раза больше суммы объема этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 6 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 40 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 10°С, скорость понижения температуры 2°С в час, при этом продолжали перемешивание со скоростью 115 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I, измеренная Cu-Kα-лучами аналогична Рис.6.
Пример 25. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Остальные шаги те же, как Пример 22, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина I в смеси растворителей этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 2: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 7,5 раза больше суммы объема этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 8 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 45 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 12°С, скорость понижения температуры 2,5°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 20 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I, измеренная Cu-Kα-лучами аналогична Рис.6.
Пример 26 Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I
Остальные шаги те же, как Пример 22, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина I в смеси растворителей этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема этилацетата к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 5: 0,8;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 5 раз больше суммы объема этилацетата, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 7 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 60 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 12°С, скорость понижения температуры 1.2°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 15 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина I, измеренная Cu-Kα-лучами аналогична Рис.6.
Пример 27. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Очищали левовращающий Карримицин (Carrimycin), полученный по Примеру 2, согласно Примеру 22, процесс отличался тем, что собирали образцы левовращающего изовалерил-спирамицина II согласно времени выдержки левовращающего изовалерил-спирамицина II RT 43.34.
Потом приготовляли кристаллы из полученныъ белых порошковых частиц левовращающего изовалерил-спирамицина II, способ приготовления как ниже следующее:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина II, полученные по Примеру 2, в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему безводного ацетона и к объему абсолютного этилового спирта составляло 1: 10: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 2,5 раза больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 4 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 30 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 5°С, скорость понижения температуры 1°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 10 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Порошковая рентгеновская дифракция полученных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II, измеренная Cu-Kα-лучами, показывала характеристический пик при 2θ равном, 10,0°, 11,6°, 16,4°, 17,3°, 19,1°, 21,2°, 22,1°, 22,7°, 26,4°, 26,9°, 27,5° и 31,5°, диаграмма порошковой рентгеновской дифракции показана на Рис.7.
Удаляли ацетонитрил вращающим испарением из вышеуказанного левовращающего Карримицина (Carrimycin), очищенного от левовращающего изовалерил-спирамицина II, потом экстрагировали однократным этилацетатом, удаляли из экстракта этилацетат вращающим испарением для получения пастообразных проб; переплавливали полученные пробы петролейным эфиром, далее удаляли петролейный эфир вращающим испарением для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin); далее перемешивали полученный левовращающий Карримицин (Carrimycin) с вышеуказанным полученным кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Пример 28. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Остальные шаги те же, как Пример 27, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина II в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему безводного ацетона и к объему абсолютного этилового спирта составляло 1: 10: 0,8;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 9 раз больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 10 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 60 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 15°С, скорость понижения температуры 3°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 10 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II, измеренная Cu-Kα-лучами, аналогична Рис.7.
Пример 29. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Остальные шаги те же, как Пример 27, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина II в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему безводного ацетона и к объему абсолютного этилового спирта составляло 1: 5: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 7,5 раза больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 6 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 40 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 10°С, скорость понижения температуры 2°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 15 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II, измеренная Cu-Kα-лучами, аналогична Рис.7.
Пример 30. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Остальные шаги те же, как Пример 27, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина II в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему безводного ацетона и к объему абсолютного этилового спирта составляло 1: 3: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 7,5 раза больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 8 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 45 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 12°С, скорость понижения температуры 2,5°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 20 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II, измеренная Cu-Kα-лучами, аналогична Рис.7.
Пример 31. Приготовление левовращающего Карримицина (Carriniycin), изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Остальные шаги те же, как Пример 27, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина II в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему безводного ацетона и к объему абсолютного этилового спирта составляло 1: 6: 0,8;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 5 раз больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 7 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 60 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 12°С, скорость понижения температуры 1.2°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 15 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина II, измеренная Cu-Kα-лучами, аналогична Рис.7.
Пример 32. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Очищали левовращающий Карримицин (Carrimycin), полученный по Примеру 3, согласно Примеру 22, собирали образцы левовращающего изовалерил-спирамицина III согласно времени выдержки левовращающего изовалерил-спирамицина III RT 48,009.
Потом приготовляли кристаллы из полученных белых порошковых частиц левовращающего изовалерил-спирамицина III, способ приготовления как ниже следующий:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина III, полученные по Примеру 3, в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 10: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 2,5 раза больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 4 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 30 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 5°С, скорость понижения температуры 1°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 10 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Порошковая рентгеновская дифракция полученных кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III, измеренная Cu-Kα-лучами, показывала характеристический пик при 2θ, равном, 8,0°, 10,0°, 11,2°, 11,7°, 16,4°, 19,1°, 19,6°, 20,0°, 21,4°, 22,9°, 23,6° и 29,4°, диаграмма порошковой рентгеновской дифракции показана на Рис.8.
Удаляли ацетонитрил вращающим испарением из вышеуказанного левовращающего Карримицина (Carrimycin), очищенного от левовращающего изовалерил-спирамицина III, потом экстрагировали однократным этилацетатом, удаляли из экстракта этилацетат вращающим испарением для получения пастообразных проб; переплавливали полученные пробы петролейным эфиром, далее удаляли петролейный эфир вращающим испарением для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin); далее перемешивали полученный левовращающий Карримицин (Carrimycin) с вышеуказанным полученным кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III для получения левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Пример 33. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Остальные шаги те же, как Пример 32, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина III в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 10: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 9 раз больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 10 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 60 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 15°С, скорость понижения температуры 3°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 10 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III, измеренная Cu-Kα-лучами аналогична Рис.8.
Пример 34. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Остальные шаги те же, как Пример 32, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина III в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 5: 0,8;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 7,5 раза больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 6 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 40 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 10°С, скорость понижения температуры 2°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 15 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III, измеренная Cu-Kα-лучами, аналогична Рис.8.
Пример 35. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Остальные шаги те же, как Пример 32, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина III в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 2: 1;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 7,5 раза больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 8 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 45 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 12°С, скорость понижения температуры 2,5°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 20 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III, измеренная Cu-Kα-лучами, аналогична Рис.8.
Пример 36. Приготовление левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Остальные шаги те же, как Пример 32, отличаются только методом перекристаллизации, а именно:
(1) Растворяли твердые частицы левовращающего изовалерил-спирамицина III в смеси растворителей безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в примененной смеси растворителей отношение объема безводного метанола к объему абсолютного этилового спирта и к объему безводного ацетона составляло 1: 5: 0,8;
(2) Потом наливали очищенную воду с одновременным перемешиванием, объем налитой воды в 5 раз больше суммы объема безводного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона; скорость ввода очищенной воды 7 мл/мин; скорость перемешивания при наливе очищенной воды 60 р/мин;
(3) После налива очищенной воды температура снижалась до 12°С, скорость понижения температуры 1.2°С в час, при этом продолжали перемешивание скоростью 15 р/мин; таким образом, получали кристаллы левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Диаграмма порошковой рентгеновской дифракции кристаллов левовращающего изовалерил-спирамицина III, измеренная Cu-Kα-лучами, аналогична Рис.8.
Пример 37. Таблетки-ядра Левовращающий Карримицин (Carrimycin), содержащие кристалл левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Рецептура и технология приготовления те же, как Пример 12, отличаются тем, что сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) является сырым порошком левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученным по Примеру 22, изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Пример 38. Таблетки-ядра Левовращающий Карримицин (Carrimycin), содержащие кристалл левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Рецептура и технология приготовления те же, как Пример 12, отличаются тем, что сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) является сырым порошком левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученным по Примеру 27, изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Пример 39. Таблетки-ядра Левовращающий Карримицин (Carrimycin), содержащие кристалл левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Рецептура и технология приготовления те же, как Пример 12, отличаются тем, что сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) является сырым порошком левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученным по Примеру 32, изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Пример 40. Желатиновые капсулы Левовращающий Карримицин (Carrimycin), содержащие кристалл левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Рецептура и технология приготовления те же, как Пример 13, отличаются тем, что сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) является сырым порошком левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученным по Примеру 23, изовалерил-спирамицин I которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I.
Пример 41. Желатиновые капсулы Левовращающий Карримицин (Carrimycin), содержащие кристалл левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Рецептура и технология приготовления те же, как Пример 13, отличаются тем, что сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) является сырым порошком левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученным по Примеру 28, изовалерил-спирамицин II которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина II.
Пример 42. Желатиновые капсулы Левовращающий Карримицин (Carrimycin), содержащие кристалл левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Рецептура и технология приготовления те же, как Пример 13, отличаются тем, что сырой порошок левовращающего Карримицина (Carrimycin) является сырым порошком левовращающего Карримицина (Carrimycin), полученным по Примеру 33, изовалерил-спирамицин III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина III.
Аналогичны и вспомогательные материалы и способ приготовления других препаратов левовращающего Карримицина (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I, II или III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III.
Опытный пример 1. Эффективность препарата in vivo.
Метод испытания: приготовление раствора с заразными бактериями: взяли раствор с тестовыми бактериями, хранившийся в холодильнике при -80°С, оставили при комнатной температуре в течение 1 ч, взяли по 0,1 мл раствор с бактериями пневмококк, streptococcus pyogenes, энтерококк и засеяли в 2 мл раствор МН соответственно (с добавкой 10% инактивированной лошадиной сыворотки), засеяли раствор с золотистым стафилококком 0,1 мл в раствор МН 2 мл по вышеуказанному способу, положили в инкубатор 37°С и культивировали в течение 18 ч, получили основной раствор с бактериями, его растворяли 5% желудочной слизью и получили раствор с заразными бактериями, который стал летальной дозой (ЛД 100).
Предполагается пероральное применение левовращающего Карримицина (Carrimycin) в клинике, поэтому для испытания левовращающего Карримицина (Carrimycin) выбирают введение прямо в желудок. После введения в брюшную полость мышей 0,5 мл в летальной дозе животные проявляли заметное понижение двигательной активности, покой, взъерошенную шерсть и другие симптомы. После заражения ввели лекарства в дозе 0,2 мл прямо в желудок каждой мыши через 0,5-6 ч, не было никаких неблагоприятных воздействий. Наблюдали смертность особей в течение 7 дней, рассчитали среднюю эффективную дозу (ED50) лекарственных форм для зараженных мышей, используя программу Bliss, провели сравнение защитной эффективности с другими формами.
Результаты теста in vivo приведены на табл.3 и табл.4:
| Табл.3 | ||||
| Сравнение терапевтической эффективности 4 видов антибиотиков у мышей, зараженных 6 штаммами Стрептококк в брюшной полости | ||||
| Испытуемые грибы | Ударная доза (CFU/0,5 мл/мышь) | Лекарственные средства | MIC (µг/мл) | ED50 (мг/кг) |
| Пневмококк3 | Карримицин (Carrimycin) | 0,12 | 10,41 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,12 | 8,99 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,12 | 8,39 | ||
| 6,4×104 | Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,12 | 8,99 | |
| Азитромицин | 0,5 | 18,29 | ||
| ацетилспирамицин | 0,5 | 66,96 | ||
| эритромицин | 1 | 85,08 | ||
| Пневмококк18 | Карримицин (Carrimycin) | 0,03 | 10,06 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,03 | 9,94 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,03 | 9,08 | ||
| 9,6×104 | Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,03 | 8,98 | |
| Азитромицин | 0,06 | 14,87 | ||
| ацетилспирамицин | 0,06 | 37,93 | ||
| эритромицин | 0,06 | 57,08 | ||
| Пневмококк57 | Карримицин (Carrimycin) | 0,12 | 16,02 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,06 | 13,60 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,06 | 13,86 | ||
| 8,8×104 | ||||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,06 | 12,81 | ||
| Азитромицин | 0,25 | 19,66 | ||
| ацетилспирамицин | 1 | 398,01 | ||
| эритромицин | 0,25 | 102,33 | ||
| Streptococcus pyogenes772 | Карримицин (Carrimycin) | 0,12 | 26,30 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,06 | 26,15 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,06 | 23,37 | ||
| 6,9×103 | Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,06 | 23,37 | |
| Азитромицин | 0,25 | 46,89 | ||
| ацетилспирамицин | 0,25 | 98,11 | ||
| эритромицин | 0,5 | 101,33 | ||
| Испытуемые грибы | Ударная доза (CFU/ 0,5 мл/мышь) | Лекарственные средства | MIC µг/мл) | ED50 (мг/кг) |
| Streptococcus pyogenes102 | Карримицин (Carrimycin) | 0,25 | 87,84 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,12 | 69,67 | ||
| 7,85×104 | Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,12 | 64,10 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,12 | 64,10 | ||
| Азитромицин | 0,5 | 159,06 | ||
| ацетилспирамицин | 0,5 | 227,07 | ||
| эритромицин | 0,5 | 361,01 | ||
| Streptococcus pyogenes119 | Карримицин (Carrimycin) | 0,25 | 68,48 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,12 | 61,87 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,12 | 59,91 | ||
| 4,9×104 | ||||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,12 | 59,91 | ||
| Азитромицин | 0,5 | 98,98 | ||
| ацетилспирамицин | 0,5 | 117,53 | ||
| эритромицин | 0,5 | 233,72 |
| Табл.4 | ||||
| Сравнение терапевтической эффективности 4 видов антибиотиков у мышей, зараженных энтерококком и золотистым стафилококком в брюшной полости | ||||
| Испытуемые грибы | Ударная доза (CFU/0,5 мл/мышь) | Лекарственные средства | MIC (µг/мл) |
ED50 (мг/кг) |
| Энтерококк32 | Карримицин (Carrimycin) | 0,5 | 89,29 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,5 | 85,15 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,25 | 68,54 | ||
| 5,4×104 | Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,25 | 68,54 | |
| Азитромицин | 1 | 146,51 | ||
| ацетилспирамицин | 1 | 130,34 | ||
| эритромицин | 2 | 175,23 | ||
| Золотистый стафилококк16 | Карримицин (Carrimycin) | 0,5 | 31,98 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,5 | 25,97 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,25 | 26,02 | ||
| 5,2×103 | ||||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,25 | 26,02 | ||
| Азитромицин | 1 | 75,80 | ||
| ацетилспирамицин | 1 | 43,58 | ||
| эритромицин | 1 | 82,36 | ||
| Испытуемые грибы | Ударная доза (CFU/0,5 мл/мышь) | Лекарственные средства | MIC (µг/мл) | ED50 (мг/кг) |
| Золотистый стафилококк76 | Карримицин (Carrimycin) | 0,5 | 31,50 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,5 | 26,50 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,25 | 25,16 | ||
| 5,8×104 | Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,25 | 25,16 | |
| Азитромицин | 1 | 58,79 | ||
| ацетилспирамицин | 1 | 66,63 | ||
| эритромицин | 1 | 64,17 | ||
| Золотистый стафилококк12 | Карримицин (Carrimycin) | 2 | 120,35 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 1 | 114,53 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 1 | 109,59 | ||
| 4,8×104 | ||||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 1 | 109,59 | ||
| Азитромицин | 4 | 217,36 | ||
| ацетилспирамицин | 2048 | >500 | ||
| эритромицин | 256 | 266,11 | ||
| Золотистый стафилококк21 | Карримицин (Carrimycin) | 1 | 59,30 | |
| Кристаллы изовалерил-спирамицина I | 0,5 | 42,67 | ||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина II | 0,5 | 47.65 | ||
| 4,2×104 | ||||
| Кристаллы изовалерил-спирамицина III | 0,5 | 47,65 | ||
| Азитромицин | 4 | 142,99 | ||
| ацетилспирамицин | 2048 | >500 | ||
| эритромицин | 4 | 213,67 |
Результаты теста in vivo показали, что терапевтическая эффективность левовращающего Карримицина (Carrimycin) при лечении мышей, зараженных 12 штаммами бактерий, приведена на табл.3 и табл.4, что показало благоприятную защитную эффективность; а левовращающий Карримицин (Carrimycin), изовалерил-спирамицин I, II или III которого является кристаллом левовращающего изовалерил-спирамицина I, II или III, проявлял более благоприятную защитную эффективность.
Левовращающий Карримицин (Carrimycin) или препараты левовращающего Карримицина (Carrimycin), приготовленные для остальных примеров изобретения, прошли одинаковые испытания и дали аналогичные результаты.
Опытный пример 2. Эффективность препарата in vitro.
Определение клинически диссоцированных бактерий:
Метод испытания: применение метода двойного разбавления в плоскодонном сосуде: налили плавленый агар в определенном количестве в плоскодонный сосуд с различной концентрацией лекарственных средств, равномерно перемешали с лекарственным раствором (добавили стрептококк и энтерококк в 5% дефибринированную кровь овцы для получения кровяной питательной среды, гемофильную палочку в 7% дефибринированную кровь овцы для получения кровяной питательной среды, питательную среду с нейссерией гонорея в 7% дефибринированную кровь овцы для получения шоколадной питательной среды), после затвердения, растворили свежий культивированный раствор с бактериями до 106 CFU/мл, засеяли многоточечным шприцем в агар плоскодонного сосуда, содержащий левовращающий Карримицин (Carrimycin), полученный по Примеру 4, и контрольный азитромицин, ацетилспирамицин и эритромицин, культивировали в течение 18 ч при 37°С; культивировали нейссерию гонорея в 5% CO2 инкубаторе в течение 24 ч; культивировали легионеллу в 5% CO2 инкубаторе в течение 48 ч; культивировали анаэробную бактерию в анаэробной банке в течение 48 ч при 37°С. Наблюдали минимальную ингибирующую концентрацию, при которой антибактериальные средства смогут ингибировать выращивание бактерий, т.е. минимальную бактериостатическую концентрацию (MIC), рассчитали MIC50 и MIC90 средства и провели сравнение с контрольными лекарственными средствами.
Примечания:
MIC50 - 50% минимальная ингибирующая концентрация.
MIC90 - 90% минимальная ингибирующая концентрация,
Результаты испытания приведены на таблице:
| Табл.5 | ||||
| Распространение чувствительности клинически дпссоцированных бактерий Карримицином (Carrimycin) | ||||
| Бактерии и количество | Лекарственные средства | Диапазон MIC (µг/мл) | MIC50 (µг/мл) | MIC90 (µг/мл) |
| Пневмококк (112) | Карримицин (Carrimycin) | 0,005->64 | 0,12 | 4 |
| Азитромицин | 0,005->64 | 0,25 | 8 | |
| ацетилспирамицин | 0,005->64 | 0,12 | >64 | |
| эритромицин | 0,005->64 | 0,25 | 64 | |
| Streptococcus pyogenes (93) | Карримицин (Carrimycin) | 0,06->64 | 0,25 | 64 |
| Азитромицин | 0,25->64 | 0,5 | >64 | |
| ацетилспирамицин | 0,005->64 | 0,25 | >64 | |
| эритромицин | 0,0б->64 | 0,5 | >64 | |
| Энтерококк (106) | Карримицин (Carrimycin) | 0,5->64 | 2 | 64 |
| Азитромицин | 0,25->64 | 8 | >64 | |
| ацетилспирамицин | 0,12->64 | 4 | >64 | |
| эритромицин | 0,5->64 | 4 | >64 | |
| Бактерии и количество | Лекарственные средства | Диапазон MIC (µг/мл) | MIC50 (µг/мл) | MIC90 (µг/мл) |
| Золотистый стафилококк (155) | Карримицин (Carrimycin) | 0,06->64 | 2 | 64 |
| Азитромицин | 0,5->64 | 2 | >64 | |
| ацетилспирамицин | 0,12->64 | 64 | >64 | |
| эритромицин | 0,12->64 | 1 | >64 | |
| Эпидермальный стафилококк (115) | Карримицин (Carrimycin) | 0,12->64 | 2 | >64 |
| Азитромицин | 0,12->64 | 8 | >64 | |
| ацетилспирамицин | 0,03->64 | 64 | >64 | |
| эритромицин | 0,06->64 | 8 | >64 | |
| Гемофильная палочка (37) | Карримицин (Carrimycin) | 0,03-32 | 0,12 | 1 |
| Азитромицин | 0,03->64 | 0,25 | 2 | |
| ацетилспирамицин | 0,03->64 | 0,12 | 4 | |
| эритромицин | 0,03->64 | 0,06 | 32 | |
| Нейссерия гонорея (10) | Карримицин (Carrimycin) | 0,12-16 | 2 | 8 |
| Азитромицин | 0,12-64 | 2 | 8 | |
| ацетилспирамицин | 0,12-64 | 4 | 8 | |
| эритромицин | 0,12-64 | 1 | 8 |
Левовращающий Карримицин (Carrimycin) или препараты левовращающего Карримицина (Carrimycin), приготовленные для остальных примеров изобретения, прошли одинаковые испытания и дали аналогичные результаты.
Опытный пример 3.
Определение устойчивости к трахоматозным хламидиям и хламидии пневмониз во внешней среде
Метод испытания:
1. Засевали клетки HEp-2 и McCoy на пластине для культирования клеток с 96 дырочками (Фирмы Costar), 37°C, 5% CO2 культивировали в течение 48 ч., получали однослойные клетки.
2 Растворили вакцинируемые бактерии до 10000~20000 ifu (единица, формирующая хламидийное включение)/мл, засеяли по 0,1 мл/дырочка. Засеяли серотипные B/TW-5/OT, D/UW-3/Cx трахоматозных хламидии на пластину для культирования клеток McCoy, засеяли хламидию пневмониз CWL-029 на пластину для культирования клеток HEp-2. Сначала всосали раствор для культивирования клеток из пластины с 96 дырочками, потом засеяли по 0,1 мл/дырочка. В т.ч. не засевали в 4 дырочки (A11-D11) и 2 дырочки (С12 и D12).
3. После засева центрифугировали пластину для культивирования клеток с 96 дырочками на центрифуге J-6MC производства Компании Beckman-Coulter при центробежной силе x 1500 г и 35×С в течение 60 мин.
4. После центрифугирования брали засеянные трахоматозные хламидии или хламидии пневмониз, добавляли 4 вида разбавленных антибиотиковых средств (т.е. левовращающий Карримицин (Cammycin), полученный по Примеру 4, контрольный ацетилспирамицин, эритромицин и азитромицин) по 0,1 мл/дырочка соответственно.
5. Культивировали при 37°С в 5% CO2, далее культивировали на пластине для испытания на чувствительность к трахоматозным хламидиям в течение 48 ч., культивировали на пластине для испытания на чувствительность к хламидиям пневмониз в течение 72 ч. После культивирования взяли раствор с антибиотиковыми средствами и промыли два раза PBS (0,01 M, pH 7.4), обработали 100% метанолом при комнатной температуре в течение 15 мин.
6 Идентификация непрямым иммунофлюоресцентным окрашиванием: на пластину для испытания на чувствительность к трахоматозным хламидиям и к хламидиям пневмониз налили очищенные моноклональное антитело (N54 клонирование), устойчивое к трахоматозным хламидиям, и моноклональное антитело (P33 клонирование), устойчивое к хламидиям пневмониз по 50 мкл/дырочка, культивировали во влажной камере при 37°С в течение 30 мин., потом четыре раза промыли пластину с помощью специального аппарата, далее налили Rabbit anti rat fluorescent antibody (Фирма Sigma) по 50 мкл/дырочка, культивировали и промыли пластину по тому же методу и при тех же условиях. Налили глицерин с уплотнителем по 100 мкл/дырочка, наблюдали результаты под инвертированным флюоресцентным микроскопом Nikon (Diaphot-200).
7 Определение MIC: минимальная концентрация разбавленных антибиотиков на испытательной пластине с 96 дырочками, при которой полностью ингибировано выращивание тельца трахоматозных хламидий или хламидий пневмониз (во всех дырочках не было обнаружено включение с флюоресцентным окрашиванием).
Результаты испытания приведены ниже:
| Табл.6 | ||||
| Минимальная бактериостатическая концентрация (MIC) внетелесных воздействий 4 видов макролидных антибиотиков в отношении трахоматозных хламидий или хламидий пневмониз | ||||
| Карримицин (Carrimycin) мкг/мл | Ацетилспирамицин (AT-SPM) мкг/мл | Эритромицин (ЕМ) мкг/мл | Азитромицин (AM) мкг/мл | |
| Трахоматозные хламидии B/TW-5/OT | ||||
| 0,25 | 4 | 0,5 | 0.5 | |
| Трахоматозные хламидии D/UW-3/Cx | ||||
| 0,25 | 2 | 0,5 | 0,25 | |
| Хламидия пневмониз CWL-029 | ||||
| 0,016 | 0,5 | ≤0,016 | 0,032 | |
1. В отношении серотипных B/TW-5/OT трахоматозных хламидий, MIC Карримицина (Carrimycin) - 0,25 мкг/мл, далее идут эритромицин и азитромицин (0,5 мкг/мл), ацетилспирамицин (MIC - 4 мкг/мл) чуть хуже.
2. В отношении серотипных D/UW-3/Cx трахоматозных хламидий, Карримицин (Carrimycin), азитромицин обладают аналогичным внетелесным эффектом, MIC - 0.25 мкг/мл, относятся к чувствительным; далее идет эритромицин (0.5 мкг/мл), ацетилспирамицин (MIC - 2 мкг/мл) чуть хуже.
3. В отношении CWL-029 хламидий пневмониз, внетелесные эффекты Карримицина (Carrimycin) и эритромицина являются самыми чувствительными, MIC≤0,016 мкг/мл, азитромицин (MIC - 0,032 мкг/мл) относится к относительно чувствительному; ацетилспирамицин (MIC - 0,5 мкг/мл) чуть хуже.
4. В общем говоря, левовращающий Карримицин (Carrimycin), приготовленный согласно данному изобретению, обладает лучшим эффектом в отношении хламидий против других испытуемых лекарственных средств.
Левовращающий Карримицин (Carrimycin) или препараты левовращающего Карримицина (Carrimycin), приготовленные для остальных примеров изобретения, прошли одинаковые испытания и дали аналогичные результаты.
Опытный пример 4. Устойчивость к трахоматозным хламидиям и хламидии пневмониз во внешней среде.
1 Метод испытания: налили в дырочку стерильной пластины для культивирования клеток с 12 дырочками U-PPLO 0,8 мл (в контрольную дырочку для раствора с бактериями налили 0,9 мл, в контрольную дырочку для питательной среды налили 1,0 мл).
2 В тестовые дырочку налили 0,1 мл раствор с бактериями Uu 104CCU/мл, окончательное количество бактерий в дырочке 10 CCU3/мл (в контрольную дырочку для питательной среды не наливали раствор с бактериями).
3 Разбили на три группы (основной антибиотиковый раствор 100 мкг/мл, 10 мкг/мл, 1 мкг/мл), в экспериментальные дырочки, налили антибиотики (Левовращающий Карримицин (Carrimycin), полученный по Примеру 6, ацетилспирамицин, эритромицин и азитромицин) для испытания с помощью стерильного Tip по двукратно убывающей концентрации: 100 мкл, 50 мкл, 25 мкл, 12.5 мкл. (не наливали антибиотики в контрольные дырочки для раствора с бактериями, контрольные дырочки для питательной среды, тем временем, установили контрольные дырочки для антибиотика).
4 Равномерно перемешали вышеуказанные дырочки, уплотнили пластину клейкой лентой, положили в ингибитор для культивирования при 37°С.
5 Наблюдали и регистрировали результаты выращивания Uu в 17-24 ч. после испытания. Когда в контрольных дырочках для раствора с бактериями Uu показывает положительный рост, в этом случае под минимальной MIC данной формы понимается минимальная концентрация антибиотика, при которой можно ингибировать рост Uu, под окончательной MIC (24 ч) понимается MIC, измеренная по окончании испытания.
Четыре раза определяли MIC штаммов, устойчивых к уреаплазме уреалитикум, ниже приведены результаты определения:
Карримицин (Carrimycin): 0,025-0,125 мкг/мл,
Ацетилспирамицин: 0,5 мкг/мл,
Эритромицин: 5 мкг/мл,
Азитромицин: 0,025-0,125 мкг/мл.
Вышеприведенные результаты показали, что Карримицин (Carrimycin) обладают благоприятной устойчивостью к Uu, как азитромицин, превосходят ацетилспирамицин, в тесте данной группы эритромицин обладает наихудшей устойчивостью к Uu.
Левовращающий Карримицин (Carrimycin) или препараты Карримицина (Carrimycin), приготовленные для остальных примеров изобретения, прошли одинаковые испытания и дали аналогичные результаты.
Claims (18)
1. Левокарримицин для лечения и профилактики инфекционных заболеваний, отличающийся тем, что указанный левокарримицин представляет смесь изовалерилспирамицина III, II и I в качестве основных компонентов и содержит один из следующих компонентов: изобутирилспирамицин III и II, бутирилспирамицин III и II, пропионилспирамицин III и II, а также ацетилспирамицин III и II, при этом содержание изовалерилспирамицина III не менее 30% по массе, суммарное содержание изовалерилспирамицина III, II и I не менее 60% по массе, а содержание ацилспирамицина от 80 до 98% по массе, и указанный левокарримицин также содержит спирамицин III и другие компоненты, среди которых содержание спирамицина III не превышает 1,0%, а суммарное содержание других компонентов составляет от 2,0 до 19% по массе, при этом
угол оптического вращения указанного левокарримицина [α]D = -52° ~ -57° при растворении в хлороформе при температуре 25°С и концентрации 0,02 г/мл; и
указанный изовалерилспирамицин III является кристаллическим соединением левоизовалерилспирамицина III, дифракция рентгеновских лучей на порошке которого, измеренная с применением излучения Cu-Kα, имеет характерные пики при 2θ=8,0°, 10,0°, 11,2°, 11,7°, 16,4°, 19,1°, 19,6°, 20,0°, 21,4°, 22,9°, 23,6° и 29,4°;
изовалерилспирамицин II является кристаллическим соединением левоизовалерилспирамицина II, дифракция рентгеновских лучей на порошке которого, измеренная с применением излучения Cu-Kα, имеет характерные пики при 2θ=10,0°, 11,6°, 16,4°, 17,3°, 19,1°, 21,2°, 22,1°, 22,7°, 26,4°, 26,9°, 27,5° и 31,5°;
изовалерилспирамицин I является кристаллическим соединением левоизовалерилспирамицина I, дифракциия рентгеновских лучей на порошке которого, измеренная с применением излучения Cu-Kα, имеет характерные пики при 2θ=7,6°, 8,0°, 10,0°, 11,4°, 16,4°, 17,0°, 17,5°, 17,9°, 19,5°, 22,7°, 23,7° и 24,4°,
причем указанный левокарримицин получен способом, включающим культивирование клонированного штамма WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4″-изовалерилтрансферазы, 8~15 суток при 28~38°С на наклонной питательной среде, содержащей муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, СаСО3 0,5%, NaCl 0,4% и агар 2%, затем культивирование 40~80 часов при 25~30°С на питательной среде семени, где указанная среда семени содержит муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3%, NaCl 0,4%, СаСО3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%, далее засев на питательную ферментационную среду, которая содержит глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO3 0,6%, NaCl 1,0%, СаСО3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%, и проведение процесса сбраживания при рН 6,0~9,0 при 26-30°С в течение 72~120 часов, после чего осуществляют экстрагирование обработкой сбраживаемой жидкости сернокислым алюминием для получения фильтрата, стабилизируют уровень рН фильтрата до 8,5~9,0, экстрагируют бутилацетатом, промывают бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4, экстрагируют водой при рН 2,0~2,5 для получения водосодержащего экстракта, стабилизируют рН на уровне 4,5~5,5, удаляют остаточный бутилацетат с получением водного экстракта, который фильтруют и стабилизируют рН на уровне 8,5~9,0, после чего проводят осаждение осадка, промывают осадок и сушат для получения сырого левокарримицина; далее проводят
a) сепарирование и очищение левокарримицина с получением левоизовалерилспирамицина I, II или III, включающие очистку левокарримицина, полученного после предварительного выделения с применением препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке ODS с градиентным элюированием с помощью ацетонитрила и сбором целевого пика состава левоизовалерилспирамицина I, II или III;
b) перекристаллизация левоизовалерилспирамицина I, II или III с получением указанных кристаллического левоизовалерилспирамицина I, II или III;
причем кристаллы левоизовалерилспирамицина I получают растворением левоизовалерилспирамицина I в смешанном растворителе абсолютного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в котором объемное соотношение метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона в смешанном растворителе составляет 1:0,1~10:0,5~1, с добавлением дистиллированной воды и охлаждением до 5°С~15°С;
кристаллы левоизовалерилспирамицина II получают растворением левоизовалерилспирамицина II в смешанном растворителе абсолютного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в котором объемное соотношение метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона в смешанном растворителе составляет 1:0,1~10:0,5~1, с добавлением дистиллированной воды и охлаждением до 5°С~15°С;
кристаллы левоизовалерилспирамицина III получают растворением левоизовалерилспирамицина III в смешанном растворителе абсолютного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в котором объемное соотношение метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона в смешанном растворителе составляет 1:0,1~10:0,5~1, с добавлением дистиллированной воды и охлаждением до 5°С~15°С;
c) удаление ацетонитрила из левокарримицина, полученного на этапе а), роторным испарением с последующим экстрагированием этилацетатом и устранение этилацетата из экстракта роторным испарением с получением пастообразной пробы, растворением такой пробы петролейным эфиром и удаление петролейного эфира роторным испарением;
d) смешивание кристаллического соединения левоизовалерилспирамицина I, II или III, полученного на этапе b), с левокарримицином, полученным на этапе с).
угол оптического вращения указанного левокарримицина [α]D = -52° ~ -57° при растворении в хлороформе при температуре 25°С и концентрации 0,02 г/мл; и
указанный изовалерилспирамицин III является кристаллическим соединением левоизовалерилспирамицина III, дифракция рентгеновских лучей на порошке которого, измеренная с применением излучения Cu-Kα, имеет характерные пики при 2θ=8,0°, 10,0°, 11,2°, 11,7°, 16,4°, 19,1°, 19,6°, 20,0°, 21,4°, 22,9°, 23,6° и 29,4°;
изовалерилспирамицин II является кристаллическим соединением левоизовалерилспирамицина II, дифракция рентгеновских лучей на порошке которого, измеренная с применением излучения Cu-Kα, имеет характерные пики при 2θ=10,0°, 11,6°, 16,4°, 17,3°, 19,1°, 21,2°, 22,1°, 22,7°, 26,4°, 26,9°, 27,5° и 31,5°;
изовалерилспирамицин I является кристаллическим соединением левоизовалерилспирамицина I, дифракциия рентгеновских лучей на порошке которого, измеренная с применением излучения Cu-Kα, имеет характерные пики при 2θ=7,6°, 8,0°, 10,0°, 11,4°, 16,4°, 17,0°, 17,5°, 17,9°, 19,5°, 22,7°, 23,7° и 24,4°,
причем указанный левокарримицин получен способом, включающим культивирование клонированного штамма WSJ-195 бактерий, продуцирующих спирамицин, с содержанием гена 4″-изовалерилтрансферазы, 8~15 суток при 28~38°С на наклонной питательной среде, содержащей муку из бобового жмыха 2%, глюкозу 1%, крахмал 3%, СаСО3 0,5%, NaCl 0,4% и агар 2%, затем культивирование 40~80 часов при 25~30°С на питательной среде семени, где указанная среда семени содержит муку из бобового жмыха 1,5%, крахмал 3%, NaCl 0,4%, СаСО3 0,5%, пептон 0,3% и KH2PO4 0,05%, далее засев на питательную ферментационную среду, которая содержит глюкозу 0,5%, крахмал 6,0%, сухие дрожжи 0,5%, рыбную муку 2,0%, NH4NO3 0,6%, NaCl 1,0%, СаСО3 0,5%, KH2PO4 0,05%, MgSO4 0,1%, бобовое масло 0,5% и противовспениватель 0,02%, и проведение процесса сбраживания при рН 6,0~9,0 при 26-30°С в течение 72~120 часов, после чего осуществляют экстрагирование обработкой сбраживаемой жидкости сернокислым алюминием для получения фильтрата, стабилизируют уровень рН фильтрата до 8,5~9,0, экстрагируют бутилацетатом, промывают бутилацетатный экстракт обессоленной водой и 1% NaH2PO4, экстрагируют водой при рН 2,0~2,5 для получения водосодержащего экстракта, стабилизируют рН на уровне 4,5~5,5, удаляют остаточный бутилацетат с получением водного экстракта, который фильтруют и стабилизируют рН на уровне 8,5~9,0, после чего проводят осаждение осадка, промывают осадок и сушат для получения сырого левокарримицина; далее проводят
a) сепарирование и очищение левокарримицина с получением левоизовалерилспирамицина I, II или III, включающие очистку левокарримицина, полученного после предварительного выделения с применением препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке ODS с градиентным элюированием с помощью ацетонитрила и сбором целевого пика состава левоизовалерилспирамицина I, II или III;
b) перекристаллизация левоизовалерилспирамицина I, II или III с получением указанных кристаллического левоизовалерилспирамицина I, II или III;
причем кристаллы левоизовалерилспирамицина I получают растворением левоизовалерилспирамицина I в смешанном растворителе абсолютного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в котором объемное соотношение метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона в смешанном растворителе составляет 1:0,1~10:0,5~1, с добавлением дистиллированной воды и охлаждением до 5°С~15°С;
кристаллы левоизовалерилспирамицина II получают растворением левоизовалерилспирамицина II в смешанном растворителе абсолютного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в котором объемное соотношение метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона в смешанном растворителе составляет 1:0,1~10:0,5~1, с добавлением дистиллированной воды и охлаждением до 5°С~15°С;
кристаллы левоизовалерилспирамицина III получают растворением левоизовалерилспирамицина III в смешанном растворителе абсолютного метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона, в котором объемное соотношение метанола, абсолютного этилового спирта и безводного ацетона в смешанном растворителе составляет 1:0,1~10:0,5~1, с добавлением дистиллированной воды и охлаждением до 5°С~15°С;
c) удаление ацетонитрила из левокарримицина, полученного на этапе а), роторным испарением с последующим экстрагированием этилацетатом и устранение этилацетата из экстракта роторным испарением с получением пастообразной пробы, растворением такой пробы петролейным эфиром и удаление петролейного эфира роторным испарением;
d) смешивание кристаллического соединения левоизовалерилспирамицина I, II или III, полученного на этапе b), с левокарримицином, полученным на этапе с).
2. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что температура плавления указанного левокарримицина составляет от 112 до 122°С.
3. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что содержание ацилспирамицина составляет от 85 до 98% по массе.
4. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что содержание ацилспирамицина составляет от 90 до 98% по массе.
5. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что содержание ацилспирамицина составляет от 95 до 98% по массе.
6. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что угол оптического вращения указанного левокарримицина составляет -54°~-56°.
7. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что суммарное содержание других компонентов составляет 2,0~14,0% по массе.
8. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что суммарное содержание других компонентов составляет 2,0~9,0% по массе.
9. Левокарримицин по п. 1, отличающийся тем, что суммарное содержание других компонентов составляет 2,0~4,0% по массе.
10. Левокарримицин по п. 2, отличающийся тем, что температура плавления указанного левокарримицина составляет 114~120°С.
11. Левокарримицин по п. 2, отличающийся тем, что температура плавления указанного левокарримицина составляет 116~118°С.
12. Фармацевтическая композиция левокарримицина для лечения и профилактики инфекционных заболеваний, отличающаяся тем, что содержит левокарримицин по любому из пп. 1-11 и фармацевтически приемлемый носитель.
13. Композиция по п. 12, отличающаяся тем, что содержание указанного левокарримицина составляет 10~90% по массе фармацевтической композиции.
14. Композиция по п. 13, отличающаяся тем, что содержание указанного левокарримицина составляет 25~75% по массе фармацевтической композиции.
15. Композиция по п. 13, отличающаяся тем, что содержание указанного левокарримицина составляет 40~60% по массе фармацевтической композиции.
16. Применение указанного левокарримицина по любому из пп. 1-11 или указанной фармацевтической композиции левокарримицина по любому из пп. 12-15 для изготовления лекарственного средства для лечения и профилактики инфекционных заболеваний.
17. Применение по п. 16, отличающееся тем, что указанные инфекционные заболевания представляют заболевания, вызванные заражением грамположительными бактериями, золотистыми стафилококками, стрептококками пневмонии, микоплазмами пневмонии, хламидиями пневмонии, уреаплазмами уреалитикум, хламидиями трахоматис, пиогенными стрептококками, катаральными микрококками, гонококками, гриппозными бациллами, легионеллами или анаэробами.
18. Применение указанного левокарримицина по любому из пп. 1-11 или указанной фармацевтической композиции левокарримицина по любому из пп. 12-15 для изготовления бактерицидного лекарственного средства против указанных бактерий, включающих стрептококки пневмонии, стрептококки группы А, пиогенные стрептококки, энтерококки, золотистые стафилококки, эпидермальные стафилококки, катаральные кокки, гонококки, гриппозные бациллы, кишечные палочки, энтеротоксигенные кишечные палочки, энтеропатогенные кишечные палочки, энтероинвазивные кишечные палочки, синегнойные палочки, палочки Фридлиндера, вульгарный протей, брюшнотифозные палочки, ацинетобактерии, нитробактерии, серрации, шигеллы Зонне, шигеллы Флекснера, грибок Tritirachium album; легионеллы, такие как легионелла pneumophila, легионелла gormanii, легионелла bozemanii, легионелла dumoffii, легионелла jordanis и легионелла micdadei; анаэробы, такие как бактероиды фрагилис, бактероиды thetaiotaomicron, бактероиды vulgatus, бактероиды bacteroides, бактероиды prevotella, превотелла asaccharolyticus, превотелла oralis, палочка Плаута, фузобактерии russell, бифидобактерии, лактобациллы, пептострептококки, пропионовые бактерии акне, клостридии перфрингенс и дрожжеподобные грибки.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201010182027 | 2010-05-25 | ||
| CN201010182027.9 | 2010-05-25 | ||
| PCT/CN2011/074658 WO2011147316A1 (zh) | 2010-05-25 | 2011-05-25 | 左旋可利霉素、其药物组合物、制备方法及应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012156419A RU2012156419A (ru) | 2014-06-27 |
| RU2593499C2 true RU2593499C2 (ru) | 2016-08-10 |
Family
ID=44975203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012156419/04A RU2593499C2 (ru) | 2010-05-25 | 2011-05-25 | Лекарственная форма левокарримицина, способ его получения и использования |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9089586B2 (ru) |
| EP (1) | EP2578596B1 (ru) |
| JP (1) | JP5866737B2 (ru) |
| KR (2) | KR101706519B1 (ru) |
| CN (1) | CN102247396B (ru) |
| BR (1) | BR112012029905B1 (ru) |
| CA (1) | CA2800019C (ru) |
| DK (1) | DK2578596T3 (ru) |
| ES (1) | ES2633737T3 (ru) |
| IN (1) | IN2012MN02623A (ru) |
| MX (1) | MX346873B (ru) |
| MY (1) | MY164230A (ru) |
| PH (1) | PH12012502329A1 (ru) |
| PL (1) | PL2578596T3 (ru) |
| RU (1) | RU2593499C2 (ru) |
| WO (1) | WO2011147316A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201209739B (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2746047C1 (ru) * | 2017-04-06 | 2021-04-06 | Шенянг Фуянг Фармасьютекал Технолоджи Ко., Лтд. | Применение карримицина и его фармацевтически приемлемой соли для производства медикаментов для лечения и/или профилактики опухоли |
| RU2768583C2 (ru) * | 2018-01-19 | 2022-03-24 | Шенянг Фуянг Фармасьютекал Технолоджи Ко., Лтд. | Ингибитор мишени рапамицина в клетках млекопитающих, фармацевтическая композиция и их применение |
| RU2771046C2 (ru) * | 2018-01-19 | 2022-04-25 | Шенянг Фуянг Фармасьютекал Технолоджи Ко., Лтд. | Применение карримицина или его активных ингредиентов |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3210991B1 (en) * | 2010-05-25 | 2019-08-07 | Shenyang Fuyang Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | Crystalline form of levoisovalerylspiramycin ii and preparations, preparation methods and uses thereof |
| US9945611B2 (en) | 2010-08-04 | 2018-04-17 | Ima Life North America Inc. | Bulk freeze drying using spray freezing and agitated drying |
| DK2601466T3 (en) * | 2010-08-04 | 2018-01-02 | Ima Life North America Inc | BULK FREEZING DURING USING SPRAY FREEZING AND DRYING UNDER STIRRING |
| CN103694295B (zh) * | 2014-01-08 | 2016-01-20 | 华东理工大学 | 一种优化可利霉素组分的方法 |
| CN105497053B (zh) * | 2015-12-31 | 2018-02-13 | 沈阳福洋医药科技有限公司 | 可利霉素在抗结核分枝杆菌感染中的应用 |
| ES2912734T3 (es) * | 2017-07-04 | 2022-05-27 | Shenyang Fuyang Pharmaceutical Tech Co Ltd | Uso de isovaleril espiramicina I o III en la preparación de fármaco para tratar y/o prevenir el tumor y fármaco |
| EP3782627A4 (en) * | 2018-04-17 | 2021-07-07 | Shanghai Tonglian Pharmaceutical Co., Ltd. | MEDICINAL PRODUCT USED TO PREVENT AND / OR TREAT PAIN AND / OR FEVER, A COMBINATION PRODUCT, AND USE OF THEM |
| CN110384802B (zh) * | 2018-04-17 | 2021-09-17 | 沈阳福洋医药科技有限公司 | 一种用于预防和/或治疗发热的药物、组合产品及其应用 |
| CN110384710B (zh) * | 2018-04-17 | 2023-01-10 | 沈阳福洋医药科技有限公司 | 一种用于预防和/或治疗疼痛的药物、组合产品及其应用 |
| CN108992416A (zh) * | 2018-09-27 | 2018-12-14 | 上海同联制药有限公司 | 一种可利霉素肠溶片及其制备方法 |
| AU2020274548A1 (en) * | 2019-05-16 | 2022-01-06 | Shenyang Fuyang Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | Drug and combination product used for prevention, alleviation and/or treatment of fibrosis, and use thereof |
| CN112239483B (zh) * | 2019-07-18 | 2023-10-27 | 沈阳福洋医药科技有限公司 | 一种化合物及药物组合物 |
| CN111450066B (zh) * | 2020-04-24 | 2022-06-21 | 沈阳信达泰康医药科技有限公司 | 一种可利霉素冻干粉针制剂及其制备方法 |
| WO2021219112A1 (zh) * | 2020-04-30 | 2021-11-04 | 沈阳福洋医药科技有限公司 | 异戊酰螺旋霉素类化合物或其组合物在制备治疗脓毒症疾病药物中的应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1405299A (zh) * | 2002-11-19 | 2003-03-26 | 中国医学科学院医药生物技术研究所 | 必特螺旋霉素的基因工程菌株螺旋霉素链霉菌wsj－195 |
| CN1554355A (zh) * | 2003-12-23 | 2004-12-15 | 沈阳同联集团有限公司 | 必特螺旋霉素及其在抗感染性疾病中的应用 |
| RU2007108544A (ru) * | 2004-08-12 | 2008-09-20 | Глаксосмитклайн Истраживацки Центар Загреб Д.О.О.(Hr) | Применение клеточно-специфических конъюгатов для лечения воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5334788A (en) * | 1976-09-11 | 1978-03-31 | Sanraku Inc | Antibiotics spiramycin derivatives |
| KR100662363B1 (ko) * | 2004-10-19 | 2007-01-02 | 엘지전자 주식회사 | 디스플레이 기기의 인스톨 장치 및 방법 |
| CN101054553A (zh) * | 2007-04-09 | 2007-10-17 | 中国医学科学院医药生物技术研究所 | 异戊酰螺旋霉素i基因工程菌株的构建 |
| CN101649325B (zh) * | 2009-07-03 | 2011-09-07 | 中国医学科学院医药生物技术研究所 | 一种提高基因工程异戊酰螺旋霉素主组分含量的基因串连技术 |
| EP3210991B1 (en) * | 2010-05-25 | 2019-08-07 | Shenyang Fuyang Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | Crystalline form of levoisovalerylspiramycin ii and preparations, preparation methods and uses thereof |
-
2011
- 2011-05-25 KR KR1020167002375A patent/KR101706519B1/ko active Active
- 2011-05-25 MY MYPI2012700968A patent/MY164230A/en unknown
- 2011-05-25 RU RU2012156419/04A patent/RU2593499C2/ru active IP Right Revival
- 2011-05-25 US US13/699,358 patent/US9089586B2/en active Active
- 2011-05-25 KR KR1020127033722A patent/KR101625262B1/ko active Active
- 2011-05-25 CA CA2800019A patent/CA2800019C/en active Active
- 2011-05-25 ES ES11786088.2T patent/ES2633737T3/es active Active
- 2011-05-25 DK DK11786088.2T patent/DK2578596T3/en active
- 2011-05-25 IN IN2623MUN2012 patent/IN2012MN02623A/en unknown
- 2011-05-25 PL PL11786088T patent/PL2578596T3/pl unknown
- 2011-05-25 CN CN201110136228.XA patent/CN102247396B/zh active Active
- 2011-05-25 EP EP11786088.2A patent/EP2578596B1/en active Active
- 2011-05-25 WO PCT/CN2011/074658 patent/WO2011147316A1/zh not_active Ceased
- 2011-05-25 BR BR112012029905-0A patent/BR112012029905B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2011-05-25 MX MX2012013469A patent/MX346873B/es active IP Right Grant
- 2011-05-25 PH PH1/2012/502329A patent/PH12012502329A1/en unknown
- 2011-05-25 JP JP2013511525A patent/JP5866737B2/ja active Active
-
2012
- 2012-12-21 ZA ZA2012/09739A patent/ZA201209739B/en unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1405299A (zh) * | 2002-11-19 | 2003-03-26 | 中国医学科学院医药生物技术研究所 | 必特螺旋霉素的基因工程菌株螺旋霉素链霉菌wsj－195 |
| CN1554355A (zh) * | 2003-12-23 | 2004-12-15 | 沈阳同联集团有限公司 | 必特螺旋霉素及其在抗感染性疾病中的应用 |
| RU2007108544A (ru) * | 2004-08-12 | 2008-09-20 | Глаксосмитклайн Истраживацки Центар Загреб Д.О.О.(Hr) | Применение клеточно-специфических конъюгатов для лечения воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Yang Ya-li et al, HPLC, 2009, 44(10), 1183-1186. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2746047C1 (ru) * | 2017-04-06 | 2021-04-06 | Шенянг Фуянг Фармасьютекал Технолоджи Ко., Лтд. | Применение карримицина и его фармацевтически приемлемой соли для производства медикаментов для лечения и/или профилактики опухоли |
| US11077126B2 (en) | 2017-04-06 | 2021-08-03 | Shenyang Fuyang Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | Use of carrimycin and pharmaceutically acceptable salts of carrimycin in manufacturing medicament for treating and/or preventing tumor |
| RU2768583C2 (ru) * | 2018-01-19 | 2022-03-24 | Шенянг Фуянг Фармасьютекал Технолоджи Ко., Лтд. | Ингибитор мишени рапамицина в клетках млекопитающих, фармацевтическая композиция и их применение |
| RU2771046C2 (ru) * | 2018-01-19 | 2022-04-25 | Шенянг Фуянг Фармасьютекал Технолоджи Ко., Лтд. | Применение карримицина или его активных ингредиентов |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20160019970A (ko) | 2016-02-22 |
| BR112012029905B1 (pt) | 2022-01-11 |
| KR20130020906A (ko) | 2013-03-04 |
| CN102247396A (zh) | 2011-11-23 |
| CA2800019A1 (en) | 2011-12-01 |
| EP2578596A1 (en) | 2013-04-10 |
| RU2012156419A (ru) | 2014-06-27 |
| ZA201209739B (en) | 2014-03-26 |
| US20130150316A1 (en) | 2013-06-13 |
| JP5866737B2 (ja) | 2016-02-17 |
| PH12012502329A1 (en) | 2013-02-11 |
| DK2578596T3 (en) | 2017-07-17 |
| KR101706519B1 (ko) | 2017-02-14 |
| JP2013528167A (ja) | 2013-07-08 |
| IN2012MN02623A (ru) | 2015-06-12 |
| ES2633737T3 (es) | 2017-09-25 |
| MX2012013469A (es) | 2013-04-03 |
| EP2578596A4 (en) | 2013-11-06 |
| KR101625262B1 (ko) | 2016-05-27 |
| MY164230A (en) | 2017-11-30 |
| BR112012029905A2 (pt) | 2019-08-06 |
| US9089586B2 (en) | 2015-07-28 |
| CA2800019C (en) | 2015-05-26 |
| MX346873B (es) | 2017-03-30 |
| CN102247396B (zh) | 2014-05-28 |
| EP2578596B1 (en) | 2017-04-19 |
| WO2011147316A1 (zh) | 2011-12-01 |
| PL2578596T3 (pl) | 2017-09-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2593499C2 (ru) | Лекарственная форма левокарримицина, способ его получения и использования | |
| RU2647236C1 (ru) | Левоизовалерилспирамицин ii, препараты, способ приготовления и употребления | |
| CN102229634B (zh) | 左旋异戊酰螺旋霉素i、其制剂、制备方法及应用 | |
| CN102260308B (zh) | 左旋异戊酰螺旋霉素iii、其制剂、制备方法及应用 | |
| WO2011110084A1 (zh) | 异戊酰螺旋霉素ⅰ、ⅱ或ⅲ的分离制备方法、及含有它们的药用组合物及其应用 | |
| CN102311471B (zh) | 左旋异戊酰螺旋霉素ii、其制剂、制备方法及应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20170413 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200526 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20210623 |