RU2589258C1 - Agent of peptide structure, inhibiting dipeptidyl peptidase-4, and pharmaceutical composition based thereon - Google Patents
Agent of peptide structure, inhibiting dipeptidyl peptidase-4, and pharmaceutical composition based thereon Download PDFInfo
- Publication number
- RU2589258C1 RU2589258C1 RU2015135503/15A RU2015135503A RU2589258C1 RU 2589258 C1 RU2589258 C1 RU 2589258C1 RU 2015135503/15 A RU2015135503/15 A RU 2015135503/15A RU 2015135503 A RU2015135503 A RU 2015135503A RU 2589258 C1 RU2589258 C1 RU 2589258C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dpp
- arg
- trp
- glu
- myr
- Prior art date
Links
- 108010067722 Dipeptidyl Peptidase 4 Proteins 0.000 title abstract description 6
- 102000016622 Dipeptidyl Peptidase 4 Human genes 0.000 title abstract 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 8
- 125000001419 myristoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 7
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 10
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 8
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- -1 subbuccal patch Substances 0.000 claims description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 229940090044 injection Drugs 0.000 claims 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 claims 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 claims 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 claims 1
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 claims 1
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 claims 1
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 abstract description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 229940090124 dipeptidyl peptidase 4 (dpp-4) inhibitors for blood glucose lowering Drugs 0.000 description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 6
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000859 incretin Substances 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- MFFMDFFZMYYVKS-SECBINFHSA-N sitagliptin Chemical compound C([C@H](CC(=O)N1CC=2N(C(=NN=2)C(F)(F)F)CC1)N)C1=CC(F)=C(F)C=C1F MFFMDFFZMYYVKS-SECBINFHSA-N 0.000 description 6
- 102400000322 Glucagon-like peptide 1 Human genes 0.000 description 5
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003603 dipeptidyl peptidase IV inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 229960004034 sitagliptin Drugs 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000930822 Giardia intestinalis Dipeptidyl-peptidase 4 Proteins 0.000 description 4
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 4
- 101000908391 Homo sapiens Dipeptidyl peptidase 4 Proteins 0.000 description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 4
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 2-cyanobenzohydrazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=CC=C1C#N TWJNQYPJQDRXPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940124213 Dipeptidyl peptidase 4 (DPP IV) inhibitor Drugs 0.000 description 3
- LTXREWYXXSTFRX-QGZVFWFLSA-N Linagliptin Chemical compound N=1C=2N(C)C(=O)N(CC=3N=C4C=CC=CC4=C(C)N=3)C(=O)C=2N(CC#CC)C=1N1CCC[C@@H](N)C1 LTXREWYXXSTFRX-QGZVFWFLSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021360 Myristic acid Nutrition 0.000 description 3
- TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N Myristic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCC(O)=O TUNFSRHWOTWDNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000886298 Pseudoxanthomonas mexicana Dipeptidyl aminopeptidase 4 Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 108010077515 glycylproline Proteins 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N incretin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N 0.000 description 3
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 229960001254 vildagliptin Drugs 0.000 description 3
- SYOKIDBDQMKNDQ-XWTIBIIYSA-N vildagliptin Chemical compound C1C(O)(C2)CC(C3)CC1CC32NCC(=O)N1CCC[C@H]1C#N SYOKIDBDQMKNDQ-XWTIBIIYSA-N 0.000 description 3
- 101710169336 5'-deoxyadenosine deaminase Proteins 0.000 description 2
- 102000055025 Adenosine deaminases Human genes 0.000 description 2
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 2
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 2
- HSHXDCVZWHOWCS-UHFFFAOYSA-N N'-hexadecylthiophene-2-carbohydrazide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCNNC(=O)c1cccs1 HSHXDCVZWHOWCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 101710135670 Putative Xaa-Pro dipeptidyl-peptidase Proteins 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 241000258185 Strongylocentrotus droebachiensis Species 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710143531 Xaa-Pro dipeptidyl-peptidase Proteins 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 2
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- WPNGPBPCQMDAAD-WRFZDFFOSA-N glp-1 (9-36) amide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 WPNGPBPCQMDAAD-WRFZDFFOSA-N 0.000 description 2
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 2
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 2
- 108700005418 glucagon-like peptide-1 (9-36)-amide Proteins 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N glyclproline Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 229960002397 linagliptin Drugs 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 2
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 229960004937 saxagliptin Drugs 0.000 description 2
- 108010033693 saxagliptin Proteins 0.000 description 2
- QGJUIPDUBHWZPV-SGTAVMJGSA-N saxagliptin Chemical compound C1C(C2)CC(C3)CC2(O)CC13[C@H](N)C(=O)N1[C@H](C#N)C[C@@H]2C[C@@H]21 QGJUIPDUBHWZPV-SGTAVMJGSA-N 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- OTKXCALUHMPIGM-FQEVSTJZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 OTKXCALUHMPIGM-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N (2s)-5-[[amino-[(2,2,4,6,7-pentamethyl-3h-1-benzofuran-5-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)NS(=O)(=O)C1=C(C)C(C)=C2OC(C)(C)CC2=C1C HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2-[chloro(diphenyl)methyl]benzene Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C(Cl)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102100034560 Cytosol aminopeptidase Human genes 0.000 description 1
- 102000003779 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000194 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- 108010004460 Gastric Inhibitory Polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 102100039994 Gastric inhibitory polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102100031547 HLA class II histocompatibility antigen, DO alpha chain Human genes 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000886868 Homo sapiens Gastric inhibitory polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 101000866278 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DO alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 101100152799 Homo sapiens TFDP3 gene Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- 239000004368 Modified starch Substances 0.000 description 1
- 101100323420 Mycobacterium leprae (strain TN) apeB gene Proteins 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-proline Natural products NCC(=O)N1CCCC1C(O)=O KZNQNBZMBZJQJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 241000277263 Salmo Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003443 Unconsciousness Diseases 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003339 best practice Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229960000913 crospovidone Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000007907 direct compression Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 108010063245 glucagon-like peptide 1 (7-36)amide Proteins 0.000 description 1
- 230000014101 glucose homeostasis Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 102000045598 human DPP4 Human genes 0.000 description 1
- 239000008172 hydrogenated vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940090473 januvia Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229940057917 medium chain triglycerides Drugs 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 235000019426 modified starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 101150095025 pepX gene Proteins 0.000 description 1
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000013809 polyvinylpolypyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000523 polyvinylpolypyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N preproglucagon 78-108 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010656 regulation of insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000007939 sustained release tablet Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- WGRQANOPCQRCME-PMACEKPBSA-N teneligliptin Chemical compound O=C([C@H]1NC[C@H](C1)N1CCN(CC1)C1=CC(=NN1C=1C=CC=CC=1)C)N1CCSC1 WGRQANOPCQRCME-PMACEKPBSA-N 0.000 description 1
- 229950000034 teneligliptin Drugs 0.000 description 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L zinc stearate Chemical compound [Zn+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и ветеринарии, в частности к лекарственным препаратам, применяемым для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, опосредованных ферментом дипептидилпептидазой-4, т.е. заболеваний, расстройств или состояний, которые можно лечить или предупреждать путем ингибирования этого фермента.The invention relates to medicine and veterinary medicine, in particular to drugs used to prevent, slow the progression and / or treatment of conditions mediated by the enzyme dipeptidyl peptidase-4, i.e. diseases, disorders or conditions that can be treated or prevented by inhibiting this enzyme.
Дипептидилпептидаза-4 (согласно номенклатуре ферментов IUBMB EC.3.4.14.5, далее - ДПП-4) представляет собой мембраносвязанную сериновую пептидазу, которая локализуется в ряде тканей (кишечник, печень, легкие, почки), а также на Т-лимфоцитах крови, где фермент известен как CD-26. В литературе этот фермент имеет больше количество названий, включая DPP4, DP4, DAP-IV, FAPS, белок 2, образующий комплекс с аденозиндезаминазой, белок, связывающий аденозиндезаминазу (ADAbp), дипептидиламинопептидаза IV; Xaa-Pro-дипептидиламинопептидаза; Gly-Pro-нафтиламидаза; постпролиндипептидил-аминопептидаза IV; лимфоцитарный антиген CD26; гликопротеин GP110; глицилпролинамино-пептидаза; глицилпролинаминопептидаза; Х-пролил-дипептидиламино-пептидаза; pepX; лейкоцитарный антиген CD26; глицилпролил-дипептидиламино-пептидаза; дипептидилпептидгидролаза; глицилпролиламино-пептидаза; дипептидиламинопептидаза IV; аминоацилпролилдипептидиламино-пептидаза; инициирующая Т-клетки молекула Tp103; X-PDAP.Dipeptidyl peptidase-4 (according to the IUBMB EC.3.4.14.5 enzyme nomenclature, hereinafter referred to as DPP-4) is a membrane-bound serine peptidase that is localized in a number of tissues (intestines, liver, lungs, kidneys), as well as on blood T-lymphocytes, where the enzyme is known as CD-26. In the literature, this enzyme has more names, including DPP4, DP4, DAP-IV, FAPS, protein 2, complexing with adenosine deaminase, protein binding of adenosine deaminase (ADAbp), dipeptidyl aminopeptidase IV; Xaa-Pro-dipeptidyl aminopeptidase; Gly-Pro-naphthylamidase; postprolindipeptidyl aminopeptidase IV; CD26 lymphocyte antigen; glycoprotein GP110; glycylproline-peptidase; glycyl proline aminopeptidase; X-prolyl dipeptidylamino peptidase; pepX; leukocyte antigen CD26; glycylprolyl dipeptidylamino peptidase; dipeptidyl peptide hydrolase; glycylprolylamino-peptidase; dipeptidyl aminopeptidase IV; aminoacylprolyl dipeptidylamino peptidase; T cell initiating Tp103 molecule; X-PDAP.
ДПП-4 является неклассической сериновой аминодипептидазой, которая отщепляет дипептиды Xaa-Pro с аминоконца (N-конца) полипептидов и белков. Также известно, что зависимое от ДПП-4 медленное высвобождение дипептидов типа X-Gly или X-Ser происходит в случае некоторых встречающихся в природе пептидов.DPP-4 is a non-classical serine aminodipeptidase that cleaves Xaa-Pro dipeptides from the amino terminus (N-terminus) of polypeptides and proteins. It is also known that DPP-4-dependent slow release of X-Gly or X-Ser type dipeptides occurs in the case of some naturally occurring peptides.
Ингибиторы ДПП-4 могут применяться в качестве лекарственных средств для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, опосредованных ДПП-4.DPP-4 inhibitors can be used as drugs to prevent, slow the progression and / or treatment of conditions mediated by DPP-4.
В результате исследований выявлен ряд соединений, ингибирующих ДПП-4, которые начали применяться в медицинской практике.The studies revealed a number of compounds that inhibit DPP-4, which began to be used in medical practice.
Так, например, известно применение ингибитора дипептидилпептидазы 4 (ДПП-IV) для лечения предотвращения или снижения риска смертности в результате сердечно-сосудистых заболеваний, включающее их введение страдающему субъекту. Также ингибитор вводится для предотвращения или снижения риска несмертельного инфаркта миокарда и/или несмертельного инсульта и/или сахарного диабета. В качестве такого ингибитора используется саксаглиптин, вилдаглиптин, ситаглиптин (EA 201101231 А1, 30.09.2010).For example, it is known to use a dipeptidyl peptidase 4 inhibitor (DPP-IV) for the treatment of preventing or reducing the risk of mortality due to cardiovascular diseases, including administering them to a suffering subject. An inhibitor is also administered to prevent or reduce the risk of non-fatal myocardial infarction and / or non-fatal stroke and / or diabetes mellitus. Saxagliptin, vildagliptin, sitagliptin (EA 201101231 A1, 09/30/2010) are used as such an inhibitor.
Известно, что использование ингибиторов ДПП-4 способствует восстановлению нарушенной глюкозозависимой секреции инсулина и коррекции повышенного уровня глюкагона - ключевых расстройств, которые характерны для сахарного диабета.It is known that the use of DPP-4 inhibitors helps to restore impaired glucose-dependent secretion of insulin and to correct elevated glucagon levels - key disorders that are characteristic of diabetes mellitus.
В последние годы особое внимание во всем мире уделяется изучению роли гормонов желудочно-кишечного тракта в регуляции секреции инсулина, а следовательно, и в регуляции гомеостаза глюкозы в организме человека. Главным образом, вышеперечисленные эффекты обусловлены действием глюкагонподобного пептида-1 (ГПП-1) (Green B.D., Flatt P.R. Incretin hormone mimetics and analogues in diabetes therapeutics // Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism. - 2007. - T. 21. - №. 4. - C. 497-516). Недостатком ГПП-1 является его короткий период жизни (4-5 минут) из-за быстрой инактивации ферментом ДПП-4 (Hansen L., Deacon C.F., Ørskov С. et al. Glucagon-Like Peptide-1-(7-36) Amide Is Transformed to Glucagon-Like Peptide-1-(9-36) Amide by Dipeptidyl Peptidase IV in the Capillaries Supplying the L Cells of the Porcine Intestine 1 // Endocrinology. - 1999. - T. 140. - №. 11. - C. 5356-5363.). Поэтому в клинической практике невозможно использовать ГПП-1 в качестве лекарственного препарата.In recent years, special attention has been paid all over the world to the role of the hormones of the gastrointestinal tract in the regulation of insulin secretion and, therefore, in the regulation of glucose homeostasis in the human body. Mainly, the above effects are due to the action of glucagon-like peptide-1 (GLP-1) (Green BD, Flatt PR Incretin hormone mimetics and analog in diabetes therapeutics // Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism. - 2007. - T. 21. - No. 4. - C. 497-516). The disadvantage of GLP-1 is its short lifespan (4-5 minutes) due to the rapid inactivation by the enzyme DPP-4 (Hansen L., Deacon CF, Ørskov C. et al. Glucagon-Like Peptide-1- (7-36) Amide Is Transformed to Glucagon-Like Peptide-1- (9-36) Amide by Dipeptidyl Peptidase IV in the Capillaries Supplying the L Cells of the Porcine Intestine 1 // Endocrinology. - 1999.- T. 140.- No. 11. - C. 5356-5363.). Therefore, in clinical practice it is impossible to use GLP-1 as a drug.
Ингибиторы ДПП-4 предотвращают быструю инактивацию эндогенного ГПП-1, тем самым усиливают и пролонгируют его действие. Известные ингибиторы ДПП-4 - глиптины (ситаглиптин (Янувия®), вилдаглиптин (Галвус®), саксаглиптин (Онглиза®) и линаглиптин (Тражента®)), представляют собой малые молекулы, ингибирующие каталитический сайт ДПП-4.DPP-4 inhibitors prevent the rapid inactivation of endogenous GLP-1, thereby enhancing and prolonging its action. Known DPP-4 inhibitors - gliptins (sitagliptin (Januvia ® ), vildagliptin (Galvus ® ), saxagliptin (Onglisa ® ) and linagliptin (Trazhenta ® )) are small molecules that inhibit the catalytic site of DPP-4.
Глиптины, ингибируя ДПП-4, повышают, в частности, концентрацию 2-х известных гормонов семейства инкретинов: ГПП-1 и глюкозозависимого инсулинотропного полипептида. Использование ингибиторов ДПП-4 способствует восстановлению нарушенной глюкозозависимой секреции инсулина и коррекции повышенного уровня глюкагона - ключевых расстройств, которые характерны для сахарного диабета.Glyptins, inhibiting DPP-4, increase, in particular, the concentration of 2 known hormones of the incretin family: GLP-1 and glucose-dependent insulinotropic polypeptide. The use of DPP-4 inhibitors helps restore impaired glucose-dependent secretion of insulin and corrects elevated glucagon levels, key disorders that are characteristic of diabetes mellitus.
Глиптины приводят более чем к 90% ингибированию фермента (Fukuda-Tsuru S. et al. 2012) и, как следствие, значительно снижают образование метаболита ГПП-1 (9-36)амида, за счет которого потенцируется действие основного гормона ГПП-1 (7-36)амида.Gliptins lead to more than 90% inhibition of the enzyme (Fukuda-Tsuru S. et al. 2012) and, as a result, significantly reduce the formation of the metabolite GLP-1 (9-36) amide, which potentiates the action of the main hormone GLP-1 ( 7-36) amide.
Перспективным с точки зрения соотношения безопасности применения и эффективности являются пептидные ингибиторы ДПП-4. Так, для трипептидов, содержащих Trp-Arg-Xaa, IC50 в отношении ингибирования ДПП-4 составляет менее 500 µМ (Lan, Ito, Ito, & Kawarasaki. (2014). Trp-Arg-Xaa tripeptides act as uncompetitive-type inhibitors of human dipeptidyl peptidase IV. Peptides, 54, 166-170). Пептиды, содержащие Trp-Arg-Xaa, проявляют конкурентный тип ингибирования ДПП-4. У конкурентных ингибиторов, чей эффект связан с взаимодействием с субстратом, происходит специфическое ингибирование ДПП-4, что позволяет снизить потенциальные токсические эффекты (Eckhardt, Langkopf, Mark et al. (2007). 8-(3-(R)-Aminopiperidin-1-yl)-7-but-2-ynyl-3-methyl-1-(4-methyl-quinazolin-2-ylmethyl)-3, 7-dihydropurine-2, 6-dione (BI 1356), a highly potent, selective, long-acting, and orally bioavailable dpp-4 inhibitor for the treatment of type 2 diabetes. Journal of medicinal chemistry, 50(26), 6450-6453).Peptide inhibitors of DPP-4 are promising from the point of view of the relationship between safety and efficacy. Thus, for tripeptides containing Trp-Arg-Xaa, the IC50 for inhibiting DPP-4 is less than 500 μM (Lan, Ito, Ito, & Kawarasaki. (2014). Trp-Arg-Xaa tripeptides act as uncompetitive-type inhibitors of human dipeptidyl peptidase IV. Peptides, 54, 166-170). Peptides containing Trp-Arg-Xaa exhibit a competitive type of inhibition of DPP-4. In competitive inhibitors, whose effect is associated with interaction with the substrate, specific inhibition of DPP-4 occurs, which reduces potential toxic effects (Eckhardt, Langkopf, Mark et al. (2007) .8- (3- (R) -Aminopiperidin-1 -yl) -7-but-2-ynyl-3-methyl-1- (4-methyl-quinazolin-2-ylmethyl) -3, 7-dihydropurine-2, 6-dione (BI 1356), a highly potent, selective, long-acting, and orally bioavailable dpp-4 inhibitor for the treatment of type 2 diabetes. Journal of medicinal chemistry, 50 (26), 6450-6453).
Таким образом, существует высокая потребность в новых ингибиторах ДПП-4.Thus, there is a high demand for new DPP-4 inhibitors.
Задача настоящего изобретения заключается в разработке средства с ингибирующим ДПП-4 действием и создание на его основе средства для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, в патогенез которых вовлечен фермент ДПП-4.The objective of the present invention is to develop means with inhibitory DPP-4 action and the creation on its basis of a means to prevent, slow the progression and / or treatment of conditions in the pathogenesis of which the enzyme DPP-4 is involved.
Технический результат, обеспечиваемый изобретением, заключается в расширении спектра биологически активных веществ, применяемых для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, опосредованных ферментом дипептидилпептидазой-4, т.е. заболеваний, расстройств или состояний, которые можно лечить или предупреждать путем ингибирования этого фермента.The technical result provided by the invention is to expand the spectrum of biologically active substances used to prevent, slow the progression and / or treatment of conditions mediated by the enzyme dipeptidyl peptidase-4, i.e. diseases, disorders or conditions that can be treated or prevented by inhibiting this enzyme.
Для решения поставленной задачи предлагается средство для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний, в патогенез которых вовлечен фермент ДПП-4, содержащее действующее вещество и фармацевтически приемлемый носитель или носители, которое в качестве действующего начала включает миристоил-трипептид или его гидраты, сольваты или соли следующей структуры:To solve this problem, a tool is proposed for preventing, slowing the progression and / or treatment of conditions in the pathogenesis of which the DPP-4 enzyme is involved, containing the active substance and a pharmaceutically acceptable carrier or carriers, which as an active principle includes myristoyl tripeptide or its hydrates, solvates or salts of the following structure:
Myr-Trp-Arg-Glu-OHMyr-Trp-Arg-Glu-OH
Для структурных аналогов заявляемого соединения было показано наличие специфической ингибирующей активности в отношении ДПП-4 (Lan et al. 2014). Образование конъюгатов пептидов с жирными кислотами улучшает фармакокинетический профиль и может приводить к улучшению биодоступности при пероральном приеме (Novakovic, Anderson, Grasso. (2014). Myristic acid conjugation of [D-Leu-4]-OB3, a biologically active leptin-related synthetic peptide amide, significantly improves its pharmacokinetic profile and efficacy. Peptides. 62. 176-182). Природные объекты, такие как лосось, мясо крупного рогатого скота и пр., могут также служить источником выделения пептидов, оказывающих ингибирующее действие на ДПП-4 (Li-Chan, Hunag, Jao, Ho, & Hsu. (2012). Peptides derived from Atlantic salmon skin gelatin as dipeptidyl-peptidase IV inhibitors. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 60, 973-978; WO 2006068480 A3, Priority date 23.12.2004). Ранее было показано, что комплекс биологически активных веществ, выделенный из гонад морских ежей Strongylocentrotus droebachiensis, содержащий в том числе пептиды, аминокислоты и жирные кислоты, обладает антидиабетическим действием (Пат RU №2520695, С1, приоритет 04.02.2013). Дальнейшее разделение и очистка позволила установить, что липофильный пептид гонад морских ежей S.droebachiensis обладает ингибирующей активностью в отношении ДПП-4. Однако при хранении наблюдалась его деструкция. Для обеспечения стабильности была предпринята попытка синтезировать аналог природного пептида.For structural analogues of the claimed compounds, the presence of specific inhibitory activity against DPP-4 was shown (Lan et al. 2014). The formation of peptide conjugates with fatty acids improves the pharmacokinetic profile and can lead to improved oral bioavailability (Novakovic, Anderson, Grasso. (2014). Myristic acid conjugation of [D-Leu-4] -OB3, a biologically active leptin-related synthetic peptide amide, significantly improves its pharmacokinetic profile and efficacy. Peptides. 62. 176-182). Natural objects, such as salmon, cattle meat, etc., can also serve as a source of isolation of peptides that have an inhibitory effect on DPP-4 (Li-Chan, Hunag, Jao, Ho, & Hsu. (2012). Peptides derived from Atlantic salmon skin gelatin as dipeptidyl-peptidase IV inhibitors. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 60, 973-978; WO 2006068480 A3, Priority date 12/23/2004). It was previously shown that a complex of biologically active substances isolated from the gonads of sea urchins Strongylocentrotus droebachiensis, including peptides, amino acids and fatty acids, has an antidiabetic effect (Pat RU No. 2520695, C1, priority 04.02.2013). Further separation and purification revealed that the lipophilic gonad peptide of sea urchins S.droebachiensis has inhibitory activity against DPP-4. However, during storage, its destruction was observed. To ensure stability, an attempt was made to synthesize an analog of a natural peptide.
Данное средство, обладающее ингибирующим ДПП-4 действием, содержит Myr-Trp-Arg-Glu-OH и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. Предпочтительно оно предназначено для нормализации уровня инкретинов в крови и/или нормализации функции эндотелиальных клеток.This agent with an inhibitory effect of DPP-4 contains Myr-Trp-Arg-Glu-OH and pharmaceutically acceptable excipients. Preferably, it is intended to normalize the level of incretins in the blood and / or normalize the function of endothelial cells.
Предлагаемое средство выполняют в виде различных лекарственных форм, предпочтительно твердых лекарственных форм - таблеток, таблеток с замедленным/пролонгированным высвобождением, капсул, гранул, порошков. В качестве вспомогательных веществ могут быть использованы вещества, обычно применяемые в фармацевтической промышленности для производства твердых лекарственных форм, например крахмал, сахара, целлюлоза и ее производные, желатин, поливинилпирролидон, полиэтиленоксид, фосфат кальция, лубрикант, смачивающий агент, как натрийлаурилсульфат, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирных кислот (твины), сложные эфиры сорбитана и жирных кислот (спаны), предпочтительно крахмал, в том числе модифицированный, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза, натрийкроскарбоксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, вспомогательные вещества - ингибиторы высвобождения, лубрикант. Примерами последнего являются стеариновая кислота и/или ее соли - стеарат кальция, стеарат магния, стеарат цинка, тальк, коллоидная двуокись кремния, полиэтиленгликоль, гидрогенизованное растительное масло, жидкий парафин. Новая композиция может также содержать ароматизаторы, красители и/или вкусовые добавки.The proposed tool is performed in the form of various dosage forms, preferably solid dosage forms — tablets, sustained-release tablets, capsules, granules, and powders. As auxiliary substances, substances commonly used in the pharmaceutical industry for the production of solid dosage forms can be used, for example, starch, sugar, cellulose and its derivatives, gelatin, polyvinylpyrrolidone, polyethylene oxide, calcium phosphate, a lubricant, a wetting agent such as sodium lauryl sulfate, polyoxyethylene sorbitan esters and fatty acids (twins), esters of sorbitan and fatty acids (spana), preferably starch, including modified starch, lactose, microcrystalline cellulose lulose, croscarboxymethyl cellulose sodium, polyvinylpyrrolidone, excipients - release inhibitors, lubricant. Examples of the latter are stearic acid and / or its salts — calcium stearate, magnesium stearate, zinc stearate, talc, colloidal silicon dioxide, polyethylene glycol, hydrogenated vegetable oil, liquid paraffin. The new composition may also contain flavors, colorants and / or flavors.
Предпочтительно препарат изготавливают в форме таблетки, которая может иметь оболочку. Наличие последней улучшает внешний вид, органолептические свойства лекарственной формы, защищает ее от механических повреждений.Preferably, the preparation is made in the form of a tablet, which may be coated. The presence of the latter improves the appearance, organoleptic properties of the dosage form, protects it from mechanical damage.
Предпочтительное количество действующего начала (Myr-Trp-Arg-Glu-ОН) в единичной дозе составляет: от 1 мг до 50 мг, более предпочтительно 5 мг. В рамках настоящего изобретения термин Myr-Trp-Arg-Glu-OH подразумевает также гидраты, сольваты и соли Myr-Trp-Arg-Glu-OH, например гидрохлорид.A preferred amount of active principle (Myr-Trp-Arg-Glu-OH) in a single dose is from 1 mg to 50 mg, more preferably 5 mg. As used herein, the term Myr-Trp-Arg-Glu-OH also includes hydrates, solvates and salts of Myr-Trp-Arg-Glu-OH, for example, hydrochloride.
Получение заявляемой лекарственной формы может быть осуществлено в соответствии с известными способами изготовления твердых лекарственных форм. Все способы включают стадию объединения активного ингредиента с носителем, который состоит из одного или более вспомогательных ингредиентов. В общем случае заявляемую фармацевтическую композицию получают путем унифицированного и однородного объединения Myr-Trp-Arg-Glu-OH с жидким или тонкоизмельченным твердым носителем, или с тем и другим, и затем, в случае необходимости, придают продукту требуемую форму, например, методом влажной грануляции с последующим добавлением к сухим гранулам лубриканта, формованием окончательной смеси ингредиентов с образованием лекарственной формы заданной конфигурации и размера, и, при необходимости, нанесением оболочки, или методом прямого прессования с последующим нанесением оболочки.Obtaining the claimed dosage form can be carried out in accordance with known methods for the manufacture of solid dosage forms. All methods include the step of combining the active ingredient with a carrier, which consists of one or more accessory ingredients. In the General case, the claimed pharmaceutical composition is obtained by unifying and uniformly combining Myr-Trp-Arg-Glu-OH with a liquid or finely divided solid carrier, or both, and then, if necessary, give the product the desired shape, for example, by the wet method granulation, followed by the addition of a lubricant to the dry granules, molding the final mixture of ingredients to form a dosage form of a given configuration and size, and, if necessary, by coating, or by direct compression followed by the application shell.
В основе изобретения лежит неожиданно обнаруженное авторами свойство ранее не описанного соединения Myr-Trp-Arg-Glu-OH в отношении ключевого фермента метаболизма ДПП-4. В результате проведенных исследований Myr-Trp-Arg-Glu-OH был выявлен как средство для ингибирования фермента ДПП-4.The basis of the invention lies unexpectedly discovered by the authors of the property of the previously not described compound Myr-Trp-Arg-Glu-OH in relation to the key enzyme of DPP-4 metabolism. As a result of studies, Myr-Trp-Arg-Glu-OH was identified as a tool for inhibiting the enzyme DPP-4.
В качестве иллюстративных материалов к описанию приложены результаты масс спектрометрического анализа и хроматографическая чистота (Рисунки 1 и 2).The results of mass spectrometric analysis and chromatographic purity are attached to the description as illustrative materials (Figures 1 and 2).
На рисунке 1 показан масс спектрометрический анализ, подтверждающий структуру миристоил-трипептида (Myr-Trp-Arg-Glu-OH).Figure 1 shows a mass spectrometric analysis confirming the structure of myristoyl tripeptide (Myr-Trp-Arg-Glu-OH).
На рисунке 2 - ВЭЖХ-хроматограмма заявляемого миристоил-трипептида. Условия анализа: хроматограф Shimadzu (Япония) с колонкой Luna С18 (2) 4,6×150 мм (размер частиц сорбента 5 мкм) и предколонкой (3 мм), заполненной тем же сорбентом (Phenomenex, США) в градиентном режиме элюирования смесью 0,03% раствора трифторуксусной кислоты (фаза А) и ацетонитрила (фаза Б), скорость подачи элюента 1,0 мл/мин, объем проб 20 мкл, длины волн детектирования 210 нм).Figure 2 - HPLC chromatogram of the inventive myristoyl tripeptide. Analysis conditions: a Shimadzu chromatograph (Japan) with a Luna C 18 (2) column of 4.6 × 150 mm (particle size of the sorbent 5 μm) and a pre-column (3 mm) filled with the same sorbent (Phenomenex, USA) in the gradient mode of elution with the mixture 0.03% solution of trifluoroacetic acid (phase A) and acetonitrile (phase B), eluent feed rate 1.0 ml / min,
На рисунке 3 - ингибирующая активность исследуемых препаратов.Figure 3 - inhibitory activity of the studied drugs.
Фармакологические свойства и способ получения заявляемого в настоящем изобретении миристоил-трипептида (Myr-Trp-Arg-Glu-OH) в литературе не описаны.Pharmacological properties and the method of obtaining claimed in the present invention myristoyl tripeptide (Myr-Trp-Arg-Glu-OH) are not described in the literature.
Синтез заявляемого миристоил-трипептида осуществляли по нижеследующей методике. Список использованных сокращений представлен в таблице 1.The synthesis of the claimed myristoyl tripeptide was carried out according to the following procedure. The list of abbreviations used is presented in table 1.
В реакторе для твердофазного синтеза суспендировали 6.0 г 2-хлортритильной смолы (емкость 1.5 ммоль/г) в 45 мл DCM, выдерживали в течение 5 мин, смолу отфильтровывали, промывали 2×30 мл DCM. К смоле добавляли раствор 4.25 г (10.0 ммоль) Fmoc-Glu(OtBu)-OH и 6 мл (36 ммоль) DIPEA в 30 мл DCM, перемешивали в течение 60 мин при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 2×30 мл DCM, обрабатывали 2×30 мл смеси DCM/метанол/DIPEA (17:2:1) в течение 10 мин, промывали 2×30 мл DCM и 3×30 мл DMF. В реактор загружали 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, перемешивали в течение 5 мин, отфильтровывали, промывали 3×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, выдерживали в течение 20 мин, отфильтровывали, промывали 5×30 мл DMF.6.0 g of 2-chlorotrityl resin (1.5 mmol / g capacity) in 45 ml of DCM was suspended in a solid-phase synthesis reactor, kept for 5 min, the resin was filtered off, washed with 2 × 30 ml of DCM. A solution of 4.25 g (10.0 mmol) of Fmoc-Glu (OtBu) -OH and 6 ml (36 mmol) of DIPEA in 30 ml of DCM was added to the resin, stirred for 60 min at room temperature. The resin was filtered off, washed with 2 × 30 ml of DCM, treated with 2 × 30 ml of a mixture of DCM / methanol / DIPEA (17: 2: 1) for 10 min, washed with 2 × 30 ml of DCM and 3 × 30 ml of DMF. 30 ml of a 20% solution of diethylamine in DMF were loaded into the reactor, stirred for 5 min, filtered, washed with 3 × 30 ml of DMF, 30 ml of a 20% solution of diethylamine in DMF was added, kept for 20 min, filtered, washed with 5 × 30 ml DMF
В реактор загружали охлажденный (4°C) раствор 12.98 г (20.0 ммоль) Fmoc-Arg(Pbf)-OH, 2.98 г (22.0 ммоль) HOBt и 3.42 мл (22.0 ммоль) DIC в 30 мл DMF, перемешивали в течение 2 час при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 6×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, перемешивали в течение 5 мин, отфильтровывали, промывали 3×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, выдерживали в течение 20 мин, отфильтровывали, промывали 5×30 мл DMF.A cooled (4 ° C) solution of 12.98 g (20.0 mmol) of Fmoc-Arg (Pbf) -OH, 2.98 g (22.0 mmol) of HOBt and 3.42 ml (22.0 mmol) of DIC in 30 ml of DMF was loaded into the reactor, stirred for 2 hours at room temperature. The resin was filtered, washed with 6 × 30 ml of DMF, 30 ml of a 20% diethylamine in DMF solution was added, stirred for 5 min, filtered, washed with 3 × 30 ml of DMF, 30 ml of a 20% diethylamine in DMF solution was added, kept for 20 min , filtered, washed with 5 × 30 ml of DMF.
В реактор загружали охлажденный (4°C) раствор 10.53 г (20.0 ммоль) Nα-Fmoc-N(in)-Boc-L-Trp-OH, 2.98 г (22.0 ммоль) HOBt и 3.42 мл (22.0 ммоль) DIC в 30 мл DMF, перемешивали в течение 2 час при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 6×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, перемешивали в течение 5 мин, отфильтровывали, промывали 3×30 мл DMF, добавляли 30 мл 20% раствора диэтиламина в DMF, выдерживали в течение 20 мин, отфильтровывали, промывали 5×30 мл DMF.A cooled (4 ° C) solution of 10.53 g (20.0 mmol) of Nα-Fmoc-N (in) -Boc-L-Trp-OH, 2.98 g (22.0 mmol) of HOBt and 3.42 ml (22.0 mmol) of DIC in 30 were charged into the reactor ml of DMF was stirred for 2 hours at room temperature. The resin was filtered, washed with 6 × 30 ml of DMF, 30 ml of a 20% diethylamine in DMF solution was added, stirred for 5 min, filtered, washed with 3 × 30 ml of DMF, 30 ml of a 20% diethylamine in DMF solution was added, kept for 20 min , filtered, washed with 5 × 30 ml of DMF.
В реактор загружали охлажденный (4°C) раствор 4.57 г (20.0 ммоль) миристиновой кислоты (MA), 2.98 г (22.0 ммоль) HOBt и 3.42 мл (22.0 ммоль) DIC в 30 мл DMF, перемешивали в течение 2 час при комнатной температуре. Смолу отфильтровывали, промывали 6×30 мл DMF, 4×30 мл DCM, сушили, добавляли 30 мл смеси TFA/TIS/EDT/H2O (37:1:1:1), выдерживали в течение 4 час при комнатной температуре, отфильтровывали, промывали 3×20 мл трифторуксусной кислотой, объединенные фильтраты упаривали до объема ~20 мл, к остатку добавляли 60 мл сухого эфира. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали на фильтре эфиром, сушили. Полученный продукт растворяли в 50 мл воды, раствор замораживали и лиофилизовали. Лиофилизат растворяли в 30 мл воды и наносили на колонку с ионообменной смолой Amberlite IRA-400 (Cl- форма). Колонку промывали водой, фракции, содержащие продукт, объединяли, упаривали до объема ~40 мл и наносили на обращеннофазную колонку Waters X-Bridge С18, 10 мкм, 127 Å, 50×250 мм. Элюирование проводили при скорости потока элюента 50 мл/мин. Фаза А: 0,1% HCl/H2O, B: /ацетонитрил. Градиент: 0% (В)-70% (В) за 70 минут. Фракции, содержащие основной продукт, объединяли, упаривали до объема ~50 мл, замораживали и лиофилизовали. Получено 5.2 г (74%) продукта с чистотой (ВЭЖХ) 95.3%. Масс спектр: вычислено М+ 700.88, получено М+ 700.44. Аминокислотный анализ: аргинин 1.00 (1), глутаминовая кислота 0.95 (1), триптофан 1.00 (1).A cooled (4 ° C) solution of 4.57 g (20.0 mmol) of myristic acid (MA), 2.98 g (22.0 mmol) of HOBt and 3.42 ml (22.0 mmol) of DIC in 30 ml of DMF was loaded into the reactor, stirred for 2 hours at room temperature . The resin was filtered off, washed with 6 × 30 ml of DMF, 4 × 30 ml of DCM, dried, 30 ml of a mixture of TFA / TIS / EDT / H 2 O (37: 1: 1: 1) was added, kept for 4 hours at room temperature, filtered off, washed with 3 × 20 ml trifluoroacetic acid, the combined filtrates were evaporated to a volume of ~ 20 ml, 60 ml of dry ether was added to the residue. The precipitate was filtered off, washed on the filter with ether, and dried. The resulting product was dissolved in 50 ml of water, the solution was frozen and lyophilized. The lyophilisate was dissolved in 30 ml of water and applied to an Amberlite IRA-400 ion exchange resin column (Cl - form). The column was washed with water, the fractions containing the product were combined, evaporated to a volume of ~ 40 ml and applied to a Waters X-Bridge C18 reverse phase column, 10 μm, 127 Å, 50 × 250 mm. Elution was carried out at an eluent flow rate of 50 ml / min. Phase A: 0.1% HCl / H 2 O, B: / acetonitrile. Gradient: 0% (B) -70% (B) in 70 minutes. Fractions containing the main product were combined, evaporated to a volume of ~ 50 ml, frozen and lyophilized. Received 5.2 g (74%) of product with a purity (HPLC) of 95.3%. Mass spectrum: calculated M + 700.88, obtained M + 700.44. Amino acid analysis: arginine 1.00 (1), glutamic acid 0.95 (1), tryptophan 1.00 (1).
Нижеследующие примеры фармакологических исследований подтверждают возможность применения заявленного Myr-Trp-Arg-Glu-OH в качестве средства с ингибирующим ДПП-4 действием.The following examples of pharmacological studies confirm the possibility of using the claimed Myr-Trp-Arg-Glu-OH as an agent with an inhibitory effect of DPP-4.
Пример 1. Определение активности ДПП-4 in vitro с использованием рекомбинантного человеческого фермента и фермента, содержащегося в плазме крови крысExample 1. Determination of the activity of DPP-4 in vitro using a recombinant human enzyme and an enzyme contained in rat plasma
Определение активности фермента ДПП-4 проводили с использованием в качестве хромогенного субстрата глицил-L-пролин-п-нитроанилида, из которого под действием ДПП-4 образуются дипептид глицил-L-пролин (Гли-Про) и п-нитроанилин. В присутствии ингибиторов ДПП-4 концентрация продуктов реакции снижается. Для определения использовали раствор субстрата с концентрацией 1 ммоль/л (глицил-L-пролин-п-нитроанилида), в 0,1 М Трис-буферном растворе pH=8.0 (рабочий буфер).The activity of the DPP-4 enzyme was determined using glycyl-L-proline-p-nitroanilide as a chromogenic substrate, from which glycyl-L-proline dipeptide (Gly-Pro) and p-nitroaniline are formed under the action of DPP-4. In the presence of DPP-4 inhibitors, the concentration of reaction products decreases. For determination, we used a substrate solution with a concentration of 1 mmol / L (glycyl-L-proline-p-nitroanilide), in 0.1 M Tris-buffer solution, pH = 8.0 (working buffer).
Аналитическую часть исследования проводили в 96-луночных планшетах. В ряды лунок вносили 20 мкл плазмы крови крыс или раствора фермента (0,025 МЕ/мл) и 40 мкл рабочего буферного раствора. Затем во все лунки добавляли 40 мкл раствора субстрата для начала реакции, после чего планшет инкубировали 30 мин при 37°C. В течение этого времени измеряли на планшетном спектрофотометре xMark™ Microplate Spectrophotometer (Bio-Rad, USA) оптическую плотность реакционной смеси при 405 нм каждые 5 минут.The analytical part of the study was carried out in 96-well plates. 20 μl of rat plasma or enzyme solution (0.025 IU / ml) and 40 μl of working buffer solution were added to the rows of wells. Then, 40 μl of substrate solution was added to all wells to start the reaction, after which the plate was incubated for 30 min at 37 ° C. During this time, the optical density of the reaction mixture at 405 nm every 5 minutes was measured on an xMark ™ Microplate Spectrophotometer (Bio-Rad, USA).
После инкубации строили зависимость изменения оптической плотности при 405 нм от времени ферментной реакции D=f (t, мин) для каждого образца. Определяли линейную область изменения оптической плотности и строили линейное уравнение y=а×x+b с коэффициентом регрессии не менее 0,99. Для дальнейших расчетов использовали значение тангенса угла наклона линейной зависимости (tgα, равное значению коэффициента «а»).After incubation, the dependence of the change in optical density at 405 nm on the time of the enzyme reaction D = f (t, min) for each sample was built. The linear region of variation of the optical density was determined and the linear equation y = a × x + b was constructed with a regression coefficient of at least 0.99. For further calculations, we used the value of the slope of the linear dependence (tanα, equal to the value of coefficient “a”).
Рассчитывали % ингибирующей активности по формуле:The% inhibitory activity was calculated by the formula:
ИА (%)=(tgαконтроль-tgαпроба)∗100/tgαконтроль,IA (%) = (tgα control -tgα test ) ∗ 100 / tgα control ,
где tgαконтроль - тангенс угла наклона линейной зависимости, полученной для положительного контроля (100% активности фермента); tgαпроба - тангенс угла наклона линейной зависимости, полученной для испытуемых проб (пробы с испытуемыми препаратами и специфическим ингибитором).where tgα control is the slope of the linear dependence obtained for the positive control (100% enzyme activity); tgα sample - the slope of the linear dependence obtained for the tested samples (samples with tested drugs and a specific inhibitor).
По результатам анализа серии растворов исследуемых препаратов с различными концентрациями, для которых значения ИА (%) находятся в диапазоне от 10 до 90% строили зависимость ИА от концентрации препарата (мг/мл). По уравнению регрессии полученной зависимости определяли IC50 - концентрацию исследуемого вещества (мг/мл), вызывающую 50% ингибирование активности ДПП-4.According to the analysis of a series of solutions of the studied drugs with different concentrations, for which the IA values (%) are in the range from 10 to 90%, the dependence of IA on the drug concentration (mg / ml) was built. By the obtained regression equation determined depending IC 50 - the concentration of the substance (mg / ml) causing 50% inhibition of DPP-4.
Для определения использовали плазму крови, полученную от аутбредных крыс-самцов возраста 10-12 недель с массой тела 200-250 г. Кровь забирали постмортально. Эвтаназия осуществлялась с помощью CO2-камеры. Животные находились там до полной потери сознания, затем животное извлекалось, вскрывалась грудная полость, и осуществлялось полное стерильное обескровливание шприцем из полостей сердца.For determination, we used blood plasma obtained from outbred male rats aged 10-12 weeks with a body weight of 200-250 g. Blood was taken postmortally. Euthanasia was performed using a CO 2 camera. The animals were there until complete loss of consciousness, then the animal was removed, the chest cavity was opened, and complete sterile bleeding with a syringe from the heart cavities was carried out.
Кровь забирали в пробирки, в качестве антикоагулянта использовали гепарин. Отобранные пробы крови центрифугировали при 1800 g в течение 20 мин для получения плазмы при температуре +4°C. Замороженную плазму хранили до анализа при -20°C.Blood was collected in test tubes, heparin was used as an anticoagulant. Blood samples were centrifuged at 1800 g for 20 min to obtain plasma at a temperature of + 4 ° C. Frozen plasma was stored until analysis at -20 ° C.
Перед началом количественного определения активности ДПП-4 образцы размораживали. В качестве препаратов сравнения использовали ситаглиптин и специфический ингибитор ДПП-4 - S-ЭПК. Ингибирующая активность в зависимости от дозы исследуемых препаратов представлена в таблице 2.Before the quantitative determination of the activity of DPP-4, the samples were thawed. Sitagliptin and a specific inhibitor of DPP-4, S-EPA, were used as reference preparations. Inhibitory activity depending on the dose of the studied drugs are presented in table 2.
Ингибирующая активность исследуемой субстанции в отношении ДПП-4 плазмы крови человека и лабораторных животных представлена в таблице 3.The inhibitory activity of the test substance against DPP-4 of human blood plasma and laboratory animals is presented in table 3.
Для определения типа ингибирования и расчета константы Михаэлиса Кm применяли графический способ, используя двойные обратные координаты Лайнуивера-Бэрка, т.е. строили зависимости 1/v от 1/[S]. По характеру зависимостей делали вывод о типе ингибирования.To determine the type of inhibition and Michaelis constants for calculating K m was used graphical method using double reverse coordinates Lineweaver-Burk, i.e. built dependencies 1 / v from 1 / [S]. By the nature of the dependencies, a conclusion was drawn about the type of inhibition.
Установили, что Myr-Trp-Arg-Glu-OH проявляет свойства конкурентного ингибитора ДПП-4, при этом расчетное значение Кm на фоне использования Myr-Trp-Arg-Glu-OH составило 0,842, против 0,486 в контрольном эксперименте.It was found that Myr-Trp-Arg-Glu-OH exhibits the properties of a competitive inhibitor of DPP-4, while the calculated value of K m against the background of the use of Myr-Trp-Arg-Glu-OH was 0.842, against 0.486 in the control experiment.
Пример 2. Определение ингибирующей активности Myr-Trp-Arg-Glu-OH in vivoExample 2. Determination of the inhibitory activity of Myr-Trp-Arg-Glu-OH in vivo
Исследование ингибирующей активности проводили при внутрижелудочном введении аутбредным крысам-самцам. Было сформировано 7 групп животных по 10 штук в каждой. Myr-Trp-Arg-Glu-OH вводили в трех дозах: 0,1 мг/кг, 1,0 мг/кг и 10 мг/кг. Препарат сравнения ситаглиптин вводили в дозе 100 мг/кг (Fukuda-Tsuru, Anabuki, Abe et al. (2012). A novel, potent, and long-lasting dipeptidyl peptidase-4 inhibitor, teneligliptin, improves postprandial hyperglycemia and dyslipidemia after single and repeated administrations. European journal of pharmacology, 696(1), 194-202) и дополнительно в дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг. Активность ДПП-4 оценивали до введения, через 1, 6 и 24 часа после введения объектов. Кровь для анализа отбирали из хвостовой вены в объеме 0,5 мл в гепаринизированные пробирки. Затем центрифугировали в течение 15 минут (1800 g, 4°C). Полученную плазму крови до анализа хранили при температуре -20°C. Аналитическую часть исследования и расчет ингибирующей активности проводили аналогично примеру 1. Результаты определения представлены на рисунке 3.The study of inhibitory activity was carried out with intragastric administration to outbred male rats. 7 groups of animals were formed, 10 pieces each. Myr-Trp-Arg-Glu-OH was administered in three doses: 0.1 mg / kg, 1.0 mg / kg and 10 mg / kg. Comparison drug sitagliptin was administered at a dose of 100 mg / kg (Fukuda-Tsuru, Anabuki, Abe et al. (2012). A novel, potent, and long-lasting dipeptidyl peptidase-4 inhibitor, teneligliptin, improves postprandial hyperglycemia and dyslipidemia after single and repeated administrations. European journal of pharmacology, 696 (1), 194-202) and additionally at doses of 1 mg / kg and 10 mg / kg. The activity of DPP-4 was evaluated before administration, 1, 6, and 24 hours after administration of the objects. Blood for analysis was taken from the tail vein in a volume of 0.5 ml in heparinized tubes. Then centrifuged for 15 minutes (1800 g, 4 ° C). The obtained blood plasma was stored at -20 ° C until analysis. The analytical part of the study and the calculation of inhibitory activity was carried out analogously to example 1. The results of the determination are presented in Figure 3.
Введение ситаглиптина в дозе 100 мг/кг приводило к 90% ингибированию через 1 час и 6 часов и уменьшалось до 20% через 24 часа после введения, что согласуются с литературными данными. Однократное введение Myr-Trp-Arg-Glu-OH в дозе 0,1 мг/кг не оказало влияния на активность фермента ДПП-4. Введение Myr-Trp-Arg-Glu-OH в дозе 1 мг/кг оказало ингибирующее действий (17%) через 6 ч. При введении Myr-Trp-Arg-Glu-OH в дозе 10 мг/кг активность фермента была снижена в среднем на 34% и была выраженной в течение суток наблюдения.The introduction of sitagliptin at a dose of 100 mg / kg led to 90% inhibition after 1 hour and 6 hours and decreased to 20% after 24 hours after administration, which is consistent with published data. A single injection of Myr-Trp-Arg-Glu-OH at a dose of 0.1 mg / kg did not affect the activity of the enzyme DPP-4. The introduction of Myr-Trp-Arg-Glu-OH at a dose of 1 mg / kg had an inhibitory effect (17%) after 6 hours. With the introduction of Myr-Trp-Arg-Glu-OH at a dose of 10 mg / kg, the enzyme activity was reduced on average 34% and was expressed during the day of observation.
Пример 3 Получение таблеток, покрытых оболочкойExample 3 Preparation of Coated Tablets
Просеянные порошки Myr-Trp-Arg-Glu-OH в количестве 20 г, 162 г микрокристаллической целлюлозы и 6 г кросповидона перемешивают до однородности и увлажняют 40% раствором поливинилпирролидона низкомолекулярного, массу гранулируют, гранулят сушат при 45-55°C до остаточной влаги 2,0-3,0%. Сухое вещество вновь гранулируют, к грануляту добавляют 2 г стеарата магния и таблетируют на таблеточном прессе, получая таблетки-ядра, которые содержат 10 мг Myr-Trp-Arg-Glu-OH.The sifted powders of Myr-Trp-Arg-Glu-OH in an amount of 20 g, 162 g of microcrystalline cellulose and 6 g of crospovidone are mixed until homogeneous and moistened with a 40% low molecular weight polyvinylpyrrolidone solution, the mass is granulated, the granulate is dried at 45-55 ° C to a residual moisture of 2 , 0-3.0%. The dry substance was granulated again, 2 g of magnesium stearate was added to the granulate and tabletted on a tablet press to obtain tablet cores that contained 10 mg of Myr-Trp-Arg-Glu-OH.
Состав для желудочно-растворимого покрытия готовят следующим образом. 6,5 г гидроксипропилметилцеллюлозы при перемешивании всыпают в 69,5 г воды и оставляют для набухания при перемешивании. Отдельно готовят раствор полиэтиленгликоля из 3 г, 1 г полисорбата и 12,5 г воды, добавляют в него 4,5 г талька и 3 г титана двуокиси, перемешивают, полученную суспензию добавляют в раствор гидроксипропилметилцеллюлозы. Смесь перемешивают до однородности и используют для нанесения покрытия на таблетки-ядра до получения равномерного покрытия со средним увеличением веса таблетки приблизительно на 2,5-3%.The composition for the gastro-soluble coating is prepared as follows. 6.5 g of hydroxypropyl methylcellulose are added to 69.5 g of water with stirring with stirring and allowed to swell with stirring. Separately, a solution of polyethylene glycol is prepared from 3 g, 1 g of polysorbate and 12.5 g of water, 4.5 g of talc and 3 g of titanium dioxide are added to it, mixed, the resulting suspension is added to a solution of hydroxypropyl methylcellulose. The mixture is mixed until uniform and used to coat the core tablets until a uniform coating is obtained with an average tablet weight increase of about 2.5-3%.
Пример 4 Мягкие капсулы с кишечнорастворимой оболочкой.Example 4 Softgels with enteric coating.
Myr-Trp-Arg-Glu-OH в количестве 333 г растворяют при перемешивании в 1667 г среднецепочечных триглицеридов. Отдельно готовят раствор полисахарида агар-агара и получают мягкие капсулы по 0,3 г с кишечнорастворимым покрытием в соответствии с заявкой 2014142863 (от 23.10.2014).333 g of Myr-Trp-Arg-Glu-OH are dissolved with stirring in 1667 g of medium chain triglycerides. Separately, a solution of agar-agar polysaccharide is prepared and 0.3 g soft capsules with enteric coating are prepared in accordance with the application 2014142863 (dated 23.10.2014).
Таким образом, снижение активности ДПП-4 приводит к стабилизации поступившего извне инкретина, т.е применением Myr-Trp-Arg-Glu-OH можно контролировать расщепление инкретина в крови, чем достигается нормализация уровня инкретинов. Из этого следует возможность применения Myr-Trp-Arg-Glu-OH для предотвращения, замедления прогрессирования и/или лечения состояний/заболеваний, опосредованных ферментом дипептидилпептидазой IV, предпочтительно для нормализации уровня инкретинов в крови и/или нормализации функции эндотелиальных клеток.Thus, a decrease in the activity of DPP-4 leads to the stabilization of incretin received from the outside, i.e., by using Myr-Trp-Arg-Glu-OH, the splitting of incretin in the blood can be controlled, thereby normalizing the level of incretins. This implies the possibility of using Myr-Trp-Arg-Glu-OH to prevent, slow the progression and / or treatment of conditions / diseases mediated by the enzyme dipeptidyl peptidase IV, preferably to normalize the level of incretins in the blood and / or normalize the function of endothelial cells.
Claims (5)
Myr-Trp-Arg-Glu-OH1. Means for preventing, slowing the progression and / or treatment of conditions in the pathogenesis of which the DPP-4 enzyme is involved, containing the active substance and a pharmaceutically acceptable carrier or carriers, which as an active principle includes myristoyl tripeptide or its hydrates, solvates or salts of the following structure:
Myr-Trp-Arg-Glu-OH
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015135503/15A RU2589258C1 (en) | 2015-08-20 | 2015-08-20 | Agent of peptide structure, inhibiting dipeptidyl peptidase-4, and pharmaceutical composition based thereon |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015135503/15A RU2589258C1 (en) | 2015-08-20 | 2015-08-20 | Agent of peptide structure, inhibiting dipeptidyl peptidase-4, and pharmaceutical composition based thereon |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2589258C1 true RU2589258C1 (en) | 2016-07-10 |
Family
ID=56371104
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015135503/15A RU2589258C1 (en) | 2015-08-20 | 2015-08-20 | Agent of peptide structure, inhibiting dipeptidyl peptidase-4, and pharmaceutical composition based thereon |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2589258C1 (en) |
-
2015
- 2015-08-20 RU RU2015135503/15A patent/RU2589258C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| LAN VT., et al., Trp-Arg-Xaa tripeptides act as uncompetitive-type inhibitors of human dipeptidyl peptidase IV.Peptides. 2014 Apr;54:166-70. doi: 10.1016/j.peptides.2014.01.027. Epub 2014 Feb 7. SCHON E., et al., Dipeptidyl peptidase IV in the immune system. Effects of specific enzyme inhibitors on activity of dipeptidyl peptidase IV and proliferation of human lymphocytes.Biol Chem Hoppe Seyler. 1991 May;372(5):305-11. HU CX., et al., A new screening method based on yeast-expressed human dipeptidyl peptidase IV and discovery of novel inhibitors.Biotechnol Lett. 2009 Jul;31(7):979-84. doi: 10.1007/s10529-009-9963-y. Epub 2009 Mar 8. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5176964B2 (en) | Dipeptidyl peptidase IV inhibitor | |
| JP2021138740A (en) | GIP agonist compounds and methods | |
| US9364449B2 (en) | Peptoid and synthetic oligomers, pharmaceutical compositions and methods of using same | |
| EP3046573B1 (en) | Amylin analogues | |
| KR20170073638A (en) | Co-agonists of the glucagon and glp-1 receptors | |
| CZ2004973A3 (en) | Glutaminyl based DPIV inhibitors | |
| TW201538520A (en) | IAP BIR domain binding compounds | |
| KR20150032912A (en) | Glucagon analogues | |
| EP3121195B1 (en) | Novel exenatide analogue and use thereof | |
| US20190142905A1 (en) | Peptide-oligourea foldamer compounds and methods of their use | |
| US11267861B2 (en) | Peptide-oligourea foldamer compounds and methods of their use | |
| EP4545086A1 (en) | Incretin analog and use thereof | |
| EP4079757A1 (en) | Acylated oxyntomodulin peptide analog | |
| CN104650217A (en) | Exendin-4 modified by Evans blue or derivatives of Evans blue and preparation method and application of Exendin-4 | |
| AU2006287562B2 (en) | Stabilized GLP-1 analogs | |
| EP4164624A1 (en) | Methods for treating or preventing chronic kidney disease | |
| RU2589258C1 (en) | Agent of peptide structure, inhibiting dipeptidyl peptidase-4, and pharmaceutical composition based thereon | |
| US20210269482A1 (en) | Peptoid-peptide macrocycles, pharmaceutical compositions and methods of using the same | |
| EP4317171A1 (en) | Composition for preventing or treating inflammatory bowel disease containing novel compound | |
| JP7499533B2 (en) | Novel adrenomedullin analogues, their production method and medical uses | |
| CN107365375B (en) | A kind of pair of GLP-1 receptor has the polypeptide compound and its preparation method and application of high-affinity | |
| JP7046990B2 (en) | Prodrug peptide with improved medicinal properties | |
| RU2628573C2 (en) | Dipeptidyl peptidase-4 inhibitor for treatment of type 2 diabetes | |
| RU2600810C1 (en) | Hypoglycemic agent of peptide structure inhibiting dipeptidyl peptidase-4 | |
| WO2020108830A1 (en) | Peptide-oligourea foldamer compounds and methods of their use |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20220419 |