RU2568870C2 - Способ диагностики и прогнозирования исхода сепсиса - Google Patents
Способ диагностики и прогнозирования исхода сепсиса Download PDFInfo
- Publication number
- RU2568870C2 RU2568870C2 RU2014111869/15A RU2014111869A RU2568870C2 RU 2568870 C2 RU2568870 C2 RU 2568870C2 RU 2014111869/15 A RU2014111869/15 A RU 2014111869/15A RU 2014111869 A RU2014111869 A RU 2014111869A RU 2568870 C2 RU2568870 C2 RU 2568870C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sepsis
- patients
- outcome
- day
- cells
- Prior art date
Links
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 title claims abstract description 78
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 26
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 230000008859 change Effects 0.000 claims abstract description 7
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 claims abstract description 5
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 12
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 23
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 17
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 17
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 15
- 206010014940 Eosinopenia Diseases 0.000 description 13
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 10
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 10
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 8
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 8
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 8
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 7
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 6
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 6
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 6
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 6
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 108010048233 Procalcitonin Proteins 0.000 description 5
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N procalcitonin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N 0.000 description 5
- 208000028399 Critical Illness Diseases 0.000 description 4
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 4
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 3
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 206010053172 Fatal outcomes Diseases 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 1
- 102000052508 Lipopolysaccharide-binding protein Human genes 0.000 description 1
- 108010053632 Lipopolysaccharide-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 241001104043 Syringa Species 0.000 description 1
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010066451 Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000018368 Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 description 1
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 241000006770 Xenia Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000002586 coronary angiography Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 229940124446 critical care medicine Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000004141 dimensional analysis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 1
- 238000002565 electrocardiography Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 210000000222 eosinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009652 hydrodynamic focusing Methods 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 238000002356 laser light scattering Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 238000005399 mechanical ventilation Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000008383 multiple organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108010012004 proadrenomedullin Proteins 0.000 description 1
- 102000034567 proadrenomedullin Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 201000001197 subcortical band heterotopia Diseases 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Management, Administration, Business Operations System, And Electronic Commerce (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и представляет собой способ прогнозирования исхода сепсиса, включающий определение абсолютного количества эозинофилов (КЭ), отличающийся тем, что КЭ определяют также в динамике на 3-5-е сутки пребывания в отделении реанимации и интенсивной терапии, и если в динамике на 3-5-е сутки КЭ увеличивается в два и более раза по сравнению с 1-2-ми сутками, то прогнозируют благоприятный исход с уже установленным диагнозом сепсис, если существенно не изменяется, то прогнозируют летальный исход у пациентов с сепсисом, при этом заключают, что риск развития летального исхода у пациентов с сепсисом при КЭ менее 120 кл./мкл увеличивается на 62,5% по сравнению с септическими пациентами, которые имеют КЭ более 120 кл./мкл. Использование заявленного способа позволяет повысить достоверность прогнозирования исхода сепсиса. 4 табл., 4 ил.
Description
Изобретение относится к клинической медицине, а именно к области лабораторной диагностики и может быть использовано в клинической практике при анализе цельной крови для экспресс-диагностики, оценки тяжести и прогнозирования летального исхода при сепсисе.
Сепсис является одной из наиболее распространенных причин летальности в отделениях реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) [Annane D., Aegerter P., Jars-Guincestre M.C., et al. Current epidemiology of septic shock // Am J Respir Crit Care Med. - 2003. - V.168. - P.165-172].
Известно, что изменения, возникающие в организме при данном патологическом процессе, носят практически глобальный характер. Запущенный каскад гуморальных и клеточных реакций реализуется в виде системного воспаления и сопровождается отклонением от нормальных значений многих функциональных характеристик, регуляторных белков и форменных элементов крови. Неспецифичность синдрома системной воспалительной реакции (СВР) создает заметные трудности в постановке диагноза сепсиса и может влиять на время начала адекватной терапии. В этой связи крайне важным, в том числе и определяющим лечебную тактику, является проведение дифференциальной диагностики природы СВР: инфекционная или неинфекционная.
Используемая с этой целью стандартная микробиологическая диагностика требует не менее 48 часов, а в большинстве случаев и более длительного срока. Кроме того, на ее результаты могут влиять предшествующая антибактериальная терапия, трудности или дефекты забора биологического материала. Нередко у пациентов, требующих длительного пребывания в ОРИТ, при использовании инвазивных методов органно-системной поддержки, возникают проблемы, связанные с клинической интерпретацией выделенного микроорганизма - разделением процессов инфекции и колонизации. Ранняя диагностика сепсиса, до получения результатов микробиологического исследования, способствует своевременному началу целенаправленной терапии и снижению смертности [Zambon М., Ceola М., Almeida-de-Castro R. et al. Implementation of the Surviving Sepsis Campaign guidelines for severe sepsis and septic shock: we could go faster // J Crit Care. - 2008. - V.23. - P.455-460].
По этой причине в клинической практике для ранней диагностики сепсиса стали использовать определение в различных биологических средах ряда биомаркеров, под которыми понимают отдельные молекулярные субстанции, указывающие на развитие патологического процесса и характеризующие его тяжесть [Marshall J.С, Reinhart K. Biomarkers of sepsis // Crit. Care Med. - 2009. - 37. - P.2290-2298].
К «идеальному» биомаркеру сепсиса предъявлены следующие требования: высокая чувствительность и специфичность; доступность для практики; быстрое получение результата; высокая воспроизводимость; корреляция с тяжестью состояния и исходом; совпадение динамики содержания с клинической реакцией на проводимую терапию [Marshall J.С, Vincent J-L., Fink M. et al. Measurs, markers and mediators: toward a staging system for clinical sepsis. A report of the fifth Toronto sepsis roundtable // Ctrit. Care Med. - 2003. - Vol.31, №5. - P.1560-1567].
К настоящему времени в качестве биомаркеров сепсиса в экспериментальных условиях и в клинике рассмотрено около двухсот различных эндогенных субстанций, из которых наиболее подробно - прокальцитонин (ПКТ), С-реактивный белок (СРБ), проадреномедуллин, TREM-1, TNF, ИЛ-6, ИЛ-8, LPS-binding protein, эндотоксин. А в самое последнее время появились аргументы в пользу целесообразности определения ST-фрагмента sCD-14 рецептора моноцитов, названного пресепсином [Pierrakos С., Vincent J-L. Sepsis biomarkers: a review // Critical Care. - 2010. - V.14. - P.R15].
Однако, согласно позиции экспертов, ни один из них на сегодняшний день не может претендовать на роль общепризнанного биомаркера сепсиса. Среди проблемных моментов у отдельных из них отмечают недостаточно высокую чувствительность и специфичность (менее 90%), ограниченное количество клинических наблюдений или их труднодоступность для клинической практики [Dellinger R.P., Levy М.М., Rhodes A. et al. Surviving Sepsis Campaign: international guidelines for management of severe sepsis and septic shock: 2012 // Crit Care Med. - 2013. - V.41 (2). - P.580-637].
Снижение числа циркулирующих эозинофильных лейкоцитов при острой инфекции впервые было описано в 1893 г. J. Zappert [Zappert J. Ueber das vorkommen der eosinophilen zellen in menschlichen blute // Z Klin Med. - 1893. - V.23. - P.227-308]. Некоторые авторы считают, что нормальное количество эозинофилов (КЭ) в периферической крови составляет 150-400 клеток в мкл [Gartner L.P., Hiatt J.M. Color Textbook of Histology. - Columbus: The McGraw-Hill Companies, 3th ed. - 2006. - 592 р]. Таким образом, делать заключение об эозинопении (ЭП) можно тогда, когда абсолютное значение эозинофилов в периферической крови снижается менее 150 клеток в мкл.
Идея использовать число эозинофилов в качестве диагностического показателя, уточняющего природу СВР, принадлежит K. Abidi и его коллегам, которые показали, что ЭП могла бы быть использована в качестве диагностического критерия сепсиса [Abidi K., Khoudri I., Belayachi J. et al. Eosinopenia is a reliable marker of sepsis on admission to medical intensive care units // Critical Care. - 2008. - V.12. - P.R59]. Данное исследование принято нами в качестве ближайшего аналога. Авторы измеряли КЭ в день поступления в ОРИТ. Все пациенты были разделены на 3 группы: неинфекционная группа, пациенты с СВР неинфекционного генеза и пациенты с сепсисом. Было показано, что степень развития ЭП более выражена у пациентов с сепсисом по сравнению с пациентами, имеющими СВР неинфекционного генеза. При проведении ROC-анализа, авторы получили хорошие результаты, но сделали выводы, что КЭ является умеренным по степени достоверности диагностическим маркером при различии СВР неинфекционного генеза и инфекции у больных, поступивших в критическом состоянии.
Недостатками описанного исследования является то, что авторы измеряли КЭ только в день поступления в ОРИТ, не разделяли на подгруппы выживших и умерших, что не может показать роль динамического контроля КЭ в процессе интенсивной терапии и не позволяет обобщить данные исследования для оценки прогностической значимости ЭП и прогрессирования ЭП с тяжестью сепсиса. Исследователи измеряли КЭ у всех пациентов, находящихся в ОРИТ, а не у отдельно взятой соматической патологии, в связи с чем им было трудно определить точную причину СВР у всех пациентов, так как группы были разнородными по патологии.
Таким образом, в литературе отсутствуют данные по сравнению степени развития ЭП у пациентов в критическом состоянии с соматической патологией, демонстрирующих развитие СВР в ответ на тканевое повреждение неинфекционного генеза, и больных сепсисом. Не определена роль и динамического контроля КЭ в процессе интенсивной терапии как прогностического маркера и показателя тяжести состояния у критически больных.
Заявляемый способ может быть использован как диагностический и прогностический маркер, как показатель оценки степени тяжести пациентов в критическом состоянии, находящихся в отделении реанимации и интенсивной терапии для дифференциальной диагностики синдрома системной воспалительной реакции неинфекционного генеза и сепсиса, а также для оценки эффективности интенсивной терапии сепсиса.
Технический результат заявляемого способа состоит в ранней диагностике сепсиса и способствует своевременному началу целенаправленной терапии и снижению смертности. Использование в качестве биомаркера сепсиса КЭ позволяет повысить достоверность постановки диагноза сепсис, отдифференцировать больных с синдромом системной воспалительной реакции неинфекционного генеза от больных сепсисом, определить тяжесть больных сепсисом и возможность развития летального исхода у больных сепсисом, оценить эффективность интенсивной терапии сепсиса. При этом определение абсолютного количества эозинофилов (КЭ) общедоступно для клиник любого уровня, так как рутинное исследование клинического анализа крови включает измерение эозинофилов и не требует дополнительного взятия крови у больного и использования дополнительного расходного материала для лаборатории, что экономически выгодно.
Указанный технический результат достигается тем, что заявляется способ лабораторной диагностики и прогнозирования исхода сепсиса путем определения абсолютного КЭ. Заявленный способ имеет общие признаки с ближайшим аналогом: измерение КЭ в день поступления в ОРИТ и разделение пациентов по генезу СВР на неинфекционный и инфекционный, т.е. сепсис. В отличие от ближайшего аналога КЭ определяют не только в течение 1-2-х суток, но и в динамике на 3-5-е сутки пребывания в ОРИТ. КЭ ниже 80 кл./мкл на 1-5-е сутки расценивают в качестве дополнительного биомаркера диагностики синдрома СВР, связанного с инфекцией, при этом заключают, что риск развития синдрома СВР инфекционного генеза увеличивается на 88,4%, в ближайшем аналоге оценивали данный критерий только при поступлении в ОРИТ; если в динамике на 3-5-е сутки КЭ увеличивается в 2 и более раза по сравнению с 1-2-ми сутками, то прогнозируют благоприятный исход сепсиса, если существенно не изменяется, то прогнозируют летальный исход сепсиса, что так же отличает заявленный способ от ближайшего аналога; КЭ ниже 120 кл./мкл в динамике на 3-5-е сутки расценивают в качестве прогностического маркера неблагоприятного исхода сепсиса, при этом риск развития летального исхода при сепсисе увеличивается на 62,5%, что является отличительным признаком заявленного способа от ближайшего аналога.
Отличительные признаки заявленного способа от ближайшего аналога позволяют оценить роль динамического контроля КЭ в процессе интенсивной терапии для оценки прогностической значимости ЭП и прогрессирования ЭП с тяжестью сепсиса.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
Методика количественного определения эозинофилов в цельной крови:
1. Взятие цельной крови и пробоподготовка
Образцы цельной крови отбираются одним из нижеприведенных способов:
- пункция периферической вены
- пункция периферической артерии, при отсутствии периферических вен
- пункция центральной вены, при отсутствии периферических вен
- из периферического или центрального венозного катетера, при его наличии
- из периферической или центральной артериальной линии, при ее наличии
Отобранную цельную кровь в объеме 2 мл помещают в вакуумные стерильные пробирки для гематологического исследования цельной крови с наполнителем - антикоагулянтом - этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА). Данный вид пробирок маркирован единым способом вне зависимости от производителя - фиолетовая или сиреневая крышка. Так как вакуумные пробирки с ЭДТА содержат строго определенное количество реагента (1,2-2,0 мг сухой ЭДТА на 1 мл крови), то пробирки должны заполняться в объеме 2 мл (в диапазоне от 1,5 до 2,5 мл) цельной крови, на данной типе пробирок имеется метка, определяющая объем заполнения пробирки в 2 мл.
Сразу после заполнения пробирки ее нужно аккуратно (не встряхивая) перевернуть 8-10 раз на 180° для смешивания пробы с наполнителем.
Некоторые примеры вакуумных пробирок: Vacuette, Greiner Bio-one, Австрия; BD Vacutainer, Becton Dickinson, США; Venosafe, Terumo Europe N.V., Бельгия; Improvacuter, Guangzhou Improve Medical Instruments Co.Ltd, Китай.
2. Гематологический анализ образцов крови
Взятые образцы крови помещаются в автоматический гематологический анализатор II или III класса без открывания крышки. Данные классы анализаторов позволяют проводить развернутый анализ крови, осуществлять полный дифференцированный подсчет лейкоцитов по 5-ти (5Diff) основным популяциям (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и лимфоциты), используя различные принципы дифференцирования клеток. Для четкой дифференцировки лейкоцитов достаточно измерить 10000 клеток образца крови. В анализаторах фирмы Bekman-Coulter, LH 500, LH750, США - используется трехмерный анализ - VCS-технология, который включает в себя одновременный компьютерный анализ клеток по объему (Volume), электропроводности (Conductivity) и дисперсии лазерного света (Scatter). В анализаторах серии Cell-Dyn применяется технология MAPSS - Multi Angle Polarized Scatter Separation - мультипараметрическая система лазерного светорассеивания - регистрация интенсивности рассеивания клетками поляризованного лазерного луча под разными углами. В приборах серии Technicon, ADVIA120, Pentra DX 120 разработан принцип жидкостной цитохимии - DHSS - Double Hydrodynamic Sequential System - измерение активности пероксидазы в лейкоцитах, который в сочетании с другими методами (кондуктометрический, гидродинамическое фокусирование, оптическая абсорбция). В анализаторах серии XT и ХЕ фирмы Sysmex применяется метод проточной цитофлюориметрии с использованием флюоресцентного красителя полиметина, который связывается с ДНК и РНК неизмененных клеток.
Некоторые примеры таких анализаторов: АВХ (HORIBA АВХ DIAGNOSTICS Ins), серия PENTRA, Франция; MINDRAY, серия ВС, Китай; ABBOTT LABORATORIES S.A., серия Cell-Dyn, США; BAYER DIAGNOSTICS (SIEMENS), серия ADVIA, Германия; DIATRON MESSTECHNIK GMBH, серия ABACUS, Австрия; DREW SCIENTIFIC LTD, серия EXCELL, Нидерланды; BECKMAN COULTER INC, серия AcT, LH, HMX, UniCell, США; BIOCODE-HYGEL, серия Xenia, Франция; SEAC (RADIM GROUP), серия HeCo, Италия; SYSMEX, серия XE, XS, Япония.
3. Интерпретация результатов анализа
КЭ ниже 80 кл./мкл на 1-5-е сутки может с приемлемой долей вероятности (чувствительность метода 80,8%, специфичность метода 95,6%) быть расценено в качестве дополнительного биомаркера диагностики синдрома СВР, связанного с инфекцией. При этом абсолютный риск развития синдрома СВР инфекционного генеза увеличивается на 88,4%. Если в динамике на 3-5-е сутки КЭ увеличивается в 2 и более раза по сравнению с 1-2-ми сутками - это прогнозирует благоприятный исход сепсиса, если существенно не изменяется, то летальный исход сепсиса. КЭ ниже 120 кл./мкл в динамике на 3-5-е сутки свидетельствует о большой вероятности летального исхода (чувствительность метода 92,3%, специфичность метода 69,2%) и может быть расценено в качестве прогностического маркера сепсиса. При этом абсолютный риск развития летального исхода при сепсисе увеличивается на 62,5%.
Было проведено про- и ретроспективное исследование с использованием специальных информационно-регистрационных карт [Савицкий А.А., Руднов В.А. Информационная значимость эозинопении в оценке генеза и течения системной воспалительной реакции // Вестник анестезиологии и реаниматологии. - 2013. - Т.10. - №6. - С.30-38]. Обследованы 143 пациента, госпитализированных в ОРИТ МО «Новая больница» г. Екатеринбурга с формированием следующих групп: исследуемой группы - пациенты с внебольничной пневмонией, осложненной сепсисом и двух контрольных групп - пациенты с острым нарушением мозгового кровообращения (ОНМК) и острым инфарктом миокарда (ОИМ).
Критерии включения: возраст старше 18 лет; подтвержденный диагноз ОНМК, ОИМ, внебольничной пневмонии, осложненной сепсисом; наличие не менее двух критериев СВР у пациентов с ОНМК и ОИМ.
Критерии исключения: длительность пребывания в ОРИТ менее суток; беременность и лактация. Диагноз внебольничной пневмонии устанавливали на основании клинико-лабораторных, рентгенологических и микробиологических исследований; о развитии сепсиса судили согласно критериям ACCP/SCCM, 1992 г. [Bone R.C., Balk R.A., Cerra F.B. et al. American College of Chest Physicians / Society of Critical Care Medicine Consensus Conference: definition for sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative therapies in sepsis // Chest. - 1992. - V.101. - P.1644-1655]. Диагноз ОНМК формулировали по клиническим данным и результатам магнитно-резонансной томографии. Диагностику ОИМ осуществляли по сочетанию клинических данных, результатов лабораторных (маркеры ОИМ - Troponin Т, КФК, МВ-КФК) и инструментальных исследований (ЭКГ, эхокардиографии, коронароангиографии).
Каждую из групп в зависимости от исхода разделили на подгруппы выживших и умерших.
Общую тяжесть состояния определяли по шкале АРАСНЕ-II [Knaus W.A., Draper Е.А., Wagner D.P., et al. APACHE II: a severity of disease classification system // Crit Care Med. - 1985. - V.13. - P.818-829], а наличие и тяжесть органной дисфункции - по шкале SOFA [Vincent J-L., Mendonca A., Cantraine F. et al. Use of the SOFA score to assess the incidence of organ dysfunction/failure in intensive care units: results of a multicenter, prospective study // Crit Care Med. - 1998. - 26. - P.1793-1800]. Образцы цельной крови в объеме 2 мл отбирали в вакуумные пробирки с ЭДТА для гематологического анализа (Vacuette, Greiner Bio-one, Австрия) в течение 1-2-х суток и в динамике на 3-5-е сутки пребывания в ОРИТ. Взятые образцы крови помещали в гематологический анализатор (Pentra АВХ-60 С Plus, HORIBA АВХ DIAGNOSTICS Ins, Франция). После получения результатов развернутого клинического анализа крови с 5-ю популяциями лейкоцитов интерпретировали данные абсолютного КЭ. Для всех категорий пациентов определяли 28-суточную летальность от любых причин.
Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью пакета прикладных программ MedCalc® 12-й версии. Результаты приведены в виде медианы (Me), нижнего (Q25) и верхнего (Q75) квартилей. Для сравнения количественных показателей двух выборок применяли непараметрический критерий Манна - Уитни (U-тест). Для сравнения качественных показателей двух выборок использовали критерий χ2, при необходимости применяли поправку Йетса и точный критерий Фишера. Для сравнения нескольких групп больных использовали ранговый анализ вариаций по тесту Крускала-Уолиса с критерием Данна. Для сравнения количественных показателей одной выборки в динамике применяли непараметрический критерий Уилкоксона, для оценки прогностической значимости КЭ - ROC-анализ. При проведении ROC-анализа рассчитывали площадь под ROC-кривой с указанием 95%-ного доверительного интервала (95% ДИ), порога отсечения, чувствительности и специфичности с указанием 95% ДИ. Для создания кривых выживаемости (времени до наступления события) использовали метод Каплана - Мейера. Корреляционный анализ взаимосвязи показателей проводили с использованием коэффициента корреляции Спирмена (r). Статистически значимыми считали различия при p<0,05.
Изобретение поясняется следующими иллюстрациями.
На Фиг.1 приведена ROC-кривая (от англ. Receiver Operating Characteristic curve, кривая зависимости количества верно классифицированных положительных примеров от количества неверно классифицированных отрицательных примеров). Информативная ценность КЭ в определении генеза СВР.
На Фиг.2 приведена динамика КЭ у пациентов с СВР различного генеза. Вершина столбцов - Me, нижний хвост - Q25, верхний хвост - Q75; * - р<0,05 при различии показателей между группами; # - р<0,05 при различии показателей в группе по сравнению с первыми сутками.
На Фиг.3 приведено сравнение ROC-кривых. Сравнение информативной ценности КЭ пациентов в прогнозе исхода при сепсисе, ОНМК и ОИМ (а - при поступлении; б - в динамике).
На Фиг.4 представлена кривая Каплана - Майера. Госпитальная выживаемость у пациентов с сепсисом в зависимости от КЭ.
Реализацию поставленной цели исследования проводили с позиций определения соответствия избранного критерия ЭП требованиям к «идеальному» биомаркеру сепсиса.
1. Диагностика природы СВР.
При сравнении исходных характеристик пациентов с сепсисом, ОНМК и ОИМ не получили статистических различий по таким показателям, как возраст, пол, общая тяжесть состояния по шкале APACHE-II, тяжесть органной дисфункции по шкале SOFA. Во всех случаях присутствовал синдром СВР в сочетании с органно-системной недостаточностью той или иной степени выраженности. Отражением сравнимой тяжести состояния при поступлении в ОРИТ служила и сопоставимая летальность (табл.1).
Примечание к табл.1: Данные представлены в виде Me (Q25; Q75); p1 - при сравнении группы пациентов с сепсисом и ОИМ; p2 - при сравнении группы пациентов с сепсисом и ОНМК; p3 - при сравнении группы пациентов с ОНМК и ОИМ.
Вместе с тем установлено, что на момент поступления в стационар среднее КЭ у пациентов с сепсисом составляло 75 кл./мкл и оказалось статистически значимо ниже, чем у пациентов с ОНМК и ОИМ (табл.1).
При проведении ROC-анализа с расчетом чувствительности и специфичности программа в качестве оптимальной диагностической точки разделения (cut off) с высоким уровнем достоверности определила значение менее 80 кл./мкл. Площадь под ROC-кривой (AUC) составила 0,939 (95% ДИ 0,870-0,978), чувствительность - 80,8% (95% ДИ 60,6-93,4), а специфичность - 95,6% (95% ДИ 87,6-99,0), p<0,0001 (Фиг.1).
При КЭ ≤80 кл./мкл сепсис развился у 93,3% (14 из 15 пациентов), в группе пациентов с КЭ>80 кл./мкл сепсис развился у 22,6% (12 из 53 пациентов), среди всех групп исследования. Абсолютный риск развития синдрома СВР инфекционного генеза увеличивается на 88,4%.
Таким образом, КЭ ниже 80 кл./мкл может с приемлемой долей вероятности быть расценено в качестве маркера синдрома СВР, связанного с инфекцией. Вместе с тем они показывают, что ее наибольшая выраженность и скорость развития наблюдаются при тяжелых бактериальных инфекциях, в частности при пневмонии, осложненной сепсисом. По-видимому, это связано с активным участием эозинофилов в реализации реакции системного воспаления инфекционной природы.
При динамическом исследовании на 3-5-е сутки на фоне проводимой интенсивной терапии КЭ в группах лиц с сепсисом увеличивалось, в то время как при ОНМК и ОИМ не изменялось (Фиг.2). Однако различие в КЭ между группами на данном этапе терялось. Эта динамика в общей популяции была связана со значимым ростом КЭ у выживших пациентов, в то время как среди умерших - существенно не изменялось. По этой причине отличить инфекционный генез СВР от неинфекционного по КЭ на фоне уже проводимого лечения не представляется возможным.
2. Взаимосвязь ЭП с тяжестью состояния и исходом пациентов с сепсисом.
С клинических позиций представлялось также важным определение взаимосвязи КЭ с тяжестью состояния и органной дисфункции. При проведении корреляционного анализа между КЭ, индексами тяжести состояния, характеристиками синдрома СВР и рядом других клинических и биохимических параметров обнаружили следующие закономерности (табл.2).
Во-первых, установлена принципиальная схожесть характера корреляционных взаимосвязей КЭ с рядом важных гомеостатических показателей. Отрицательная взаимосвязь КЭ как маркера системного воспаления показала, что изменение КЭ может также отражать направленность СВР. Это же заключение подтверждало существование корреляционных взаимоотношений и с ее составляющими - температурой тела и ЧСС.
Снижение КЭ ассоциировалось с тяжестью общего состояния и полиорганной дисфункцией, потребностью в искусственной вентиляции легких и длительностью проведения респираторной поддержки.
В целом отмеченные факты, демонстрирующие взаимосвязь между выраженностью СВР, степенью органно-системной дисфункции и КЭ, позволяют рассматривать их количественное значение в качестве критерия, отражающего тяжесть состояния пациента с сепсисом.
При анализе результатов исследования выявили достоверное различие в КЭ у пациентов с сепсисом в зависимости от исхода. Так, на 1-2-е сутки от момента поступления среднее КЭ среди выживших пациентов составило 100 кл./мкл, а среди умерших - 50 кл./мкл. У больных с ОНМК и ОИМ различия в КЭ между выжившими и умершими не отличались. Динамика КЭ в зависимости от исхода при сепсисе, ОНМК и ОИМ представлена в табл.3.
Наиболее демонстративным прирост КЭ выглядел у больных сепсисом, ответивших на проводимую терапию, - со 100 до 240 мкл/мл (p=0,0003). Однако на 3-5-е сутки пребывания в ОРИТ при всех изучаемых нозологиях различия в КЭ между выжившими и умершими уже носили статистически значимый характер за счет увеличения у пациентов с позитивным прогнозом - со 120 до 150 кл./мкл при ОНМК и со 145 до 195 кл./мкл при ОИМ (табл.3).
Примечание к табл.3: Данные представлены в виде Me (Q25; Q75);
Необходимо подчеркнуть, что при сепсисе, в отличие от пациентов с ОНМК и ОИМ, различие в КЭ между пациентами с благоприятным и неблагоприятным исходом регистрировалось уже с момента госпитализации.
С помощью ROC-анализа и расчета чувствительности и специфичности предприняли попытку установить конкретное значение КЭ, указывающее на высокий риск развития неблагоприятного исхода у пациентов с сепсисом на 1-2-е и 3-5-е сутки (табл.4).
При этом обнаружено, что статистически значимое разграничение между умершими и выжившими через cut off на всех сроках наблюдения имело место лишь у септических больных. У пациентов с ОИМ и ОНМК значимое различие устанавливалось только на 3-5-е сутки пребывания в ОРИТ. Таким образом, принципиальным моментом является то, что количественное значение cut off зависело от нозологии и времени от развития критического состояния. Так, при сепсисе ее величина у погибших больных снижалась к 3-м суткам с 220 до 120 кл./мкл (табл.4, Фиг.3).
Примечание к табл.4: AUC - от англ. Area under the ROC curve (площадь под ROC-кривой); 95% ДИ - 95%-ный доверительный интервал; cut off - порог отсечения; EOS - эозинофилы.
В группе пациентов с сепсисом при КЭ ≤120 кл./мкл госпитальная летальность составила 87,5% (умерли 14 из 16 пациентов), в группе пациентов с КЭ>120 кл./мкл летальность - 25% (умерли 6 из 24 пациентов), р=0,0034 (Фиг.4). Абсолютный риск развития летального исхода при сепсисе увеличивается на 62,5%.
3. Доступность определения КЭ.
Определение абсолютного КЭ общедоступно для клиник любого уровня, так как рутинное исследование клинического анализа крови включает измерение эозинофилов и не требует дополнительного взятия крови у больного и использования дополнительного расходного материала для лаборатории, что экономически выгодно. Определение абсолютного КЭ может быть выполнено на гематологических анализаторах, которые измеряют лейкоциты в 5 субпопуляциях. Существует достаточно обширный спектр таких анализаторов. Несмотря на то, что исследование абсолютного КЭ не исключает измерения других показателей, входящих в развернутый клинический анализ крови, стоимость данного анализа ниже, чем измерение C-реактивного белка или прокальцитонина. Стоимость общего клинического анализа крови в нашей клинике без учета трудозатрат составляет 35 руб., СРБ - 140 руб. и ПКТ - 1580 руб. Прямое количественное определение СРБ и ПКТ нельзя отнести к рутинным анализам, для их выполнения требуются специальное оборудование и наборы реактивов.
4. Время получения и воспроизводства результата.
Время, необходимое для выполнения клинического анализа крови на современных гематологических анализаторах, составляет в среднем от 1 до 3 мин, что намного быстрее, чем при определении C-реактивного белка и прокальцитонина. Длительность получения результата по ним определяется используемой аппаратурой и может составлять от 30 до 60 мин.
Claims (1)
- Способ прогнозирования исхода сепсиса, включающий определение абсолютного количества эозинофилов (КЭ), отличающийся тем, что КЭ определяют также в динамике на 3-5-е сутки пребывания в отделении реанимации и интенсивной терапии, и если в динамике на 3-5-е сутки КЭ увеличивается в два и более раза по сравнению с 1-2-ми сутками, то прогнозируют благоприятный исход с уже установленным диагнозом сепсис, если существенно не изменяется, то прогнозируют летальный исход у пациентов с сепсисом, при этом заключают, что риск развития летального исхода у пациентов с сепсисом при КЭ менее 120 кл./мкл увеличивается на 62,5% по сравнению с септическими пациентами, которые имеют КЭ более 120 кл./мкл.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014111869/15A RU2568870C2 (ru) | 2014-03-20 | 2014-03-20 | Способ диагностики и прогнозирования исхода сепсиса |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014111869/15A RU2568870C2 (ru) | 2014-03-20 | 2014-03-20 | Способ диагностики и прогнозирования исхода сепсиса |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014111869A RU2014111869A (ru) | 2015-10-27 |
| RU2568870C2 true RU2568870C2 (ru) | 2015-11-20 |
Family
ID=54362518
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014111869/15A RU2568870C2 (ru) | 2014-03-20 | 2014-03-20 | Способ диагностики и прогнозирования исхода сепсиса |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2568870C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2670198C1 (ru) * | 2017-04-24 | 2018-10-19 | Государственное учреждение высшего профессионального образования "Белорусско-Российский университет" | Способ прогнозирования летального исхода у пациентов с полиорганной дисфункцией |
| RU2720824C1 (ru) * | 2019-05-16 | 2020-05-13 | Юрий Леонидович Кецко | Способ оценки ближайшего прогноза заболевания и коррекции белково-энергетической недостаточности у пациентов при воспалительном синдроме бактериального генеза |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2296331C1 (ru) * | 2005-11-02 | 2007-03-27 | Государственное учреждение Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт скорой помощи им. И.И. Джанелидзе | Способ прогнозирования сепсиса у пострадавших с механической травмой |
-
2014
- 2014-03-20 RU RU2014111869/15A patent/RU2568870C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2296331C1 (ru) * | 2005-11-02 | 2007-03-27 | Государственное учреждение Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт скорой помощи им. И.И. Джанелидзе | Способ прогнозирования сепсиса у пострадавших с механической травмой |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Hamid Shaaban MD et al / Eosinopenia: Is it a good marker of sepsis in comparison to procalcitonin and C-reactive protein levels for patients admitted to a critical care unit in an urban hospital? / Journal of Critical Care / 2010, Vol.25, pages 570-575. Roser Terradas et al / Eosinophil Count and Neutrophil-Lymphocyte Count Ratio as Prognostic Markers in Patients with Bacteremia: A Retrospective Cohort Study / PLoS ONE / 2012, Vol.7, Issue 8, e42860. Alex Smithson et al / Is eosinopenia a reliable marker of sepsis? / Critical Care / 2009, Vol.13, No.3 : 409. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2670198C1 (ru) * | 2017-04-24 | 2018-10-19 | Государственное учреждение высшего профессионального образования "Белорусско-Российский университет" | Способ прогнозирования летального исхода у пациентов с полиорганной дисфункцией |
| RU2720824C1 (ru) * | 2019-05-16 | 2020-05-13 | Юрий Леонидович Кецко | Способ оценки ближайшего прогноза заболевания и коррекции белково-энергетической недостаточности у пациентов при воспалительном синдроме бактериального генеза |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2014111869A (ru) | 2015-10-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Keating et al. | Inflammatory and cardiac biomarkers are differentially expressed in clinical stages of Chagas disease | |
| Maged et al. | Comparative study between different biomarkers for early prediction of gestational diabetes mellitus | |
| JP5571657B2 (ja) | 生着不全および死に関するマーカー | |
| Ali et al. | Presepsin is an early monitoring biomarker for predicting clinical outcome in patients with sepsis | |
| Huang et al. | Immature granulocytes: a novel biomarker of acute respiratory distress syndrome in patients with acute pancreatitis | |
| US11041864B2 (en) | Method for prediction of prognosis of sepsis | |
| Kim et al. | Plasma neutrophil gelatinase-associated lipocalin: a marker of acute pyelonephritis in children | |
| CN108700596A (zh) | 用于心血管疾病和事件的诊断和预后方法 | |
| Wang et al. | Differences of inflammatory and non-inflammatory indicators in Coronavirus disease-19 (COVID-19) with different severity | |
| JP2019531467A (ja) | 有害事象を示すマーカーとしてのヒストンおよび／またはｐｒｏＡＤＭ | |
| JP2021518903A (ja) | 患者の評価方法 | |
| US20230030564A1 (en) | Sepsis management | |
| Hu et al. | Establishment of reference intervals for procalcitonin in healthy pregnant women of Chinese population | |
| US20140120174A1 (en) | Methods of prognosis and diagnosis of sepsis | |
| Ge et al. | Monitoring of intestinal inflammation and prediction of recurrence in ulcerative colitis | |
| Velissaris et al. | Soluble urokinase plasminogen activator receptor (suPAR) in the emergency department: An update | |
| Chandel et al. | Procalcitonin as the biomarker of inflammation in diagnosis of appendicitis in pediatric patients and prevention of unnecessary appendectomies | |
| RU2568870C2 (ru) | Способ диагностики и прогнозирования исхода сепсиса | |
| Lin et al. | The predictive value of procalcitonin for early detection of infection in elderly type 2 diabetes mellitus | |
| Kumar et al. | Dynamic alteration in the vaginal secretory proteome across the early and mid-trimesters of pregnancy | |
| RU2587333C1 (ru) | Способ прогнозирования наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов | |
| Muharam et al. | Correlation of calprotectin serum levels with degrees of endometriosis: A cross-sectional study | |
| RU2641028C1 (ru) | Способ прогнозирования послеродового эндометрита с помощью показателя детоксикационной эффективности альбумина | |
| CN116413443A (zh) | 血清睾酮作为标志物在制备脓毒症心肌功能障碍诊断及其预后预测的试剂盒中的应用 | |
| Jitpean et al. | Decreased plasma Chromogranin A361-372 (Catestatin) but not Chromogranin A17-38 (Vasostatin) in female dogs with bacterial uterine infection (pyometra) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170321 |