RU2565412C1 - Method of diagnostics of ruminal digestion disorder in ruminants - Google Patents
Method of diagnostics of ruminal digestion disorder in ruminants Download PDFInfo
- Publication number
- RU2565412C1 RU2565412C1 RU2014137684/15A RU2014137684A RU2565412C1 RU 2565412 C1 RU2565412 C1 RU 2565412C1 RU 2014137684/15 A RU2014137684/15 A RU 2014137684/15A RU 2014137684 A RU2014137684 A RU 2014137684A RU 2565412 C1 RU2565412 C1 RU 2565412C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cicatricial
- content
- wavelength
- units
- rumen
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 230000029087 digestion Effects 0.000 title claims abstract description 25
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 title claims description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 35
- 230000007170 pathology Effects 0.000 claims abstract description 8
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 claims description 23
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 4
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 claims description 4
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 abstract description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 2
- 230000006735 deficit Effects 0.000 abstract 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 15
- 208000010444 Acidosis Diseases 0.000 description 10
- 230000007950 acidosis Effects 0.000 description 10
- 208000026545 acidosis disease Diseases 0.000 description 10
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 9
- 208000005223 Alkalosis Diseases 0.000 description 8
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000002340 alkalosis Effects 0.000 description 8
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 8
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 8
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241000223782 Ciliophora Species 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 3
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 3
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 208000014094 Dystonic disease Diseases 0.000 description 2
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 2
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 2
- 238000002555 auscultation Methods 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000002559 palpation Methods 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 2
- 230000022676 rumination Effects 0.000 description 2
- 208000015212 rumination disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical class CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 206010021135 Hypovitaminosis Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000007976 Ketosis Diseases 0.000 description 1
- 206010023644 Lacrimation increased Diseases 0.000 description 1
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 1
- 208000031662 Noncommunicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010031240 Osteodystrophy Diseases 0.000 description 1
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004159 blood analysis Methods 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 230000001055 chewing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000003989 dielectric material Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 230000004140 ketosis Effects 0.000 description 1
- 230000004317 lacrimation Effects 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000009117 preventive therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарии и животноводству, касается метода оценки рубцового пищеварения и диагностики его нарушений у жвачных с целью принятия мер для оптимизации кормления, повышения сохранности и продуктивности животных.The invention relates to veterinary medicine and animal husbandry, relates to a method for assessing cicatricial digestion and diagnosing its disorders in ruminants in order to take measures to optimize feeding, increase the safety and productivity of animals.
Особенностью пищеварения жвачных является способность переваривать со сравнительно высокой эффективностью и в больших объемах клетчатку растительных кормов. Данная способность присуща жвачным благодаря наличию у них многокамерного желудка и жвачного процесса. Наряду с превращением составных компонентов корма в соединения, доступные для усвоения животными, в рубце образуются витамины группы В и К, в количестве, полностью обеспечивающем потребность в них организма. Продукты расщепления растительных белков, небелковых азотосодержащих веществ рациона и поступающей из крови мочевины усваиваются в рубце бактериями и инфузориями. В результате образуется микробный белок, обеспечивающий 20-30% потребности животных в протеине [Алиев А.А. Обмен веществ у жвачных животных. - М: НИЦ «Инженер». - 1997. - 564 с.; Георгиевский В.И. Физиология сельскохозяйственных животных. М.: Агропромиздат, 1990. - 511 с.; Курилов Н.В., Кроткова А.П. Физиология и биохимия пищеварения жвачных. М.: Колос. - 1971. - 432 с.]. Нарушение рубцового пищеварения сопровождается снижением активности процессов деструктуризации компонентов рациона и наращивания микробиологической массы, что негативно отражается на эффективности кормления и уровне продуктивности животных.A feature of the digestion of ruminants is the ability to digest fiber of vegetable feed with relatively high efficiency and in large volumes. This ability is inherent in ruminants due to the presence of a multi-chamber stomach and ruminant process. Along with the transformation of the components of the feed into compounds accessible for animals to assimilate, vitamins of groups B and K are formed in the rumen, in an amount that fully meets the body's need for them. The breakdown products of plant proteins, non-protein nitrogen-containing substances of the diet and urea coming from the blood are absorbed in the rumen by bacteria and ciliates. As a result, a microbial protein is formed, providing 20-30% of the animal’s protein needs [Aliev A.A. Metabolism in ruminants. - M: SIC “Engineer”. - 1997. - 564 p .; Georgievsky V.I. Physiology of farm animals. M .: Agropromizdat, 1990 .-- 511 p .; Kurilov N.V., Krotkova A.P. Physiology and biochemistry of digestion of ruminants. M .: Kolos. - 1971. - 432 p.]. Violation of cicatricial digestion is accompanied by a decrease in the activity of the processes of destructuring the components of the diet and increasing the microbiological mass, which negatively affects the feeding efficiency and the level of animal productivity.
От полноценности функций преджелудков в значительной степени зависит здоровье животных. Дисфункции рубца сравнительно широко распространены среди жвачных животных. Они являются наиболее ранними симптомами поражения органов пищеварения, заболеваемость которых составляет в пределах 40% от всех болезней [Иноземцев В.П. Профилактика незаразных болезней основа сохранности животных /Ветеринария. - 2000. - №11. - С. 9-13]. При этом наблюдаются первичное (атония и гипотония рубца, ацидоз и алкалоз рубца и т.п.) и вторичное поражение преджелудков. Вторичные дистонии преджелудков встречаются у 19,5-31,6% коров. В этиологической структуре вторичных дистоний приоритетное значение имели комплексный гипомикроэлементоз (33,8%) и гиповитаминозы А, Б, Ε (29,9%), далее следуют гепатодистрофия (11,7%), ацидоз рубца (10,8%), кетоз (8,2%) и в меньшей мере остеодистрофия (5,6%) [Хмельков Я.Т. Вторичная гипотония рубца и определяющие ее факторы / Я.Т. Хмельков, Е.Г. Яковлева// Бюлл. науч. работ/Белгородская ГСХА. - Вып.3. - Белгород, 2005. - С. 42-46].Animal health depends to a large extent on the usefulness of the functions of the pancreas. Scar dysfunctions are relatively widespread among ruminants. They are the earliest symptoms of damage to the digestive system, the incidence of which is within 40% of all diseases [Inozemtsev V.P. Prevention of non-communicable diseases basis of animal preservation / Veterinary medicine. - 2000. - No. 11. - S. 9-13]. In this case, primary (atony and hypotension of the scar, acidosis and alkalosis of the scar, etc.) and a secondary lesion of the pancreas are observed. Secondary dystonia of the pancreas occurs in 19.5-31.6% of cows. In the etiological structure of secondary dystonia, complex hypomicroelementosis (33.8%) and hypovitaminosis A, B, Ε (29.9%), hepatodystrophy (11.7%), rumen acidosis (10.8%), and ketosis (8.2%) and to a lesser degree osteodystrophy (5.6%) [Khmelkov Y.T. Secondary hypotension of the scar and its determining factors / Ya.T. Khmelkov, E.G. Yakovleva // Bull. scientific works / Belgorod State Agricultural Academy. - Issue 3. - Belgorod, 2005. - S. 42-46].
Для выявления дисфункций рубца наиболее часто используются физические методы исследования. Осмотром определяют форму живота и степень заполнения голодных ямок. Методом пальпации оценивают чувствительность и напряженность стенки рубца, силу, ритм и частоту его сокращений. Аускультация позволяет определить частоту и фазы сокращения преджелудков. С целью унификации и повышения информативности клинических методов исследования проводят тонометрию рубца и графическую запись его сокращений с помощью различных конструкций руминографов и тонометров [Кумский, Ш.А. Болезни органов пищеварения. - М.: Колос 2006. - 563 с.; Калюжный И.И. Ацидоз рубца. - Саратов, Приволжское книжное издательство. - 1996. - 238 с.].To identify scar dysfunctions, physical research methods are most often used. Inspection determines the shape of the abdomen and the degree of filling of hungry pits. The method of palpation assesses the sensitivity and tension of the scar wall, strength, rhythm and the frequency of its contractions. Auscultation allows you to determine the frequency and phase of contraction of the pancreas. In order to unify and increase the informational content of clinical research methods, a tonometry of the scar and a graphical recording of its abbreviations are carried out using various designs of ruminographs and tonometers [Kumsky, Sh.A. Digestive apparatus diseases. - M .: Kolos 2006. - 563 p .; Kalyuzhny I.I. Acidosis of the scar. - Saratov, Volga Book Publishing House. - 1996. - 238 p.].
Однако изменения показателей руминографии, аускультации, пальпации и тонометрии рубца уже являются симптомами болезней преджелудков, указывающие на наличие клинической стадии патологии. Они имеют сравнительно низкую диагностическую ценность на субклинической стадии патологии и ограниченную информативность при оценке механизмов развития болезни.However, changes in ruminography, auscultation, palpation and tonometry of the scar are already symptoms of diseases of the pancreas, indicating the presence of a clinical stage of pathology. They have a relatively low diagnostic value at the subclinical stage of the pathology and limited informational content in assessing the mechanisms of the development of the disease.
В клинической практике сравнительно часто проводят исследования рубцового содержимого. При этом диагностическое патофизиологическое значение исследований зависит от спектра определяемых параметров. Наиболее часто определяют цвет, запах, консистенцию, рН содержимого и скорость образования осадка в нем. Наиболее информативным является показатель рН рубцового содержимого.In clinical practice, studies of scar contents are relatively often performed. In this case, the diagnostic pathophysiological significance of studies depends on the spectrum of the determined parameters. The most commonly determined color, smell, texture, pH of the contents and the rate of formation of sediment in it. The most informative is the pH of the cicatricial content.
Известен способ дистанционного контроля рН в рубце у коров специальным устройством, которое включает в себя датчик рН, вводимый в полость рубца, внешнее оборудование, обеспечивающее рентгеноконтрастное изображение рубца [US 6694161 В2; US 10/125,319; опубликован 17.02. 2004]. Данное устройство включает в себя сложное оборудование, ограничивающее применение его в клинической практике.A known method of remote control of the pH in the rumen of cows with a special device, which includes a pH sensor inserted into the cavity of the rumen, external equipment providing an radiopaque image of the rumen [US 6694161 B2; US 10 / 125.319; published on February 17th. 2004]. This device includes sophisticated equipment that limits its use in clinical practice.
Известен способ мониторинга рН рубцового содержимого с помощью болюса из диэлектрического материала, который вводится в полость рубца. Датчик, расположенный в болюсе, определяет и передает на приемное устройство электромагнитные параметры рубцового содержимого [US 8694091 B2; PCT/SE 2011/051154; дата публ. 8.04. 2014].A known method of monitoring the pH of cicatricial content using a bolus of dielectric material, which is introduced into the cavity of the scar. A sensor located in the bolus detects and transmits to the receiver electromagnetic parameters of the cicatricial contents [US 8694091 B2; PCT / SE 2011/051154; public date 8.04. 2014].
Это способ исследования безопасен и позволяет длительное время контролировать кислотность рубцового содержимого. Однако данное устройство приемлемо в основном для проведения научных исследований, т.к. необходимость специального оборудования ограничивает его использование в клинической практике.This research method is safe and allows for a long time to control the acidity of the scar contents. However, this device is acceptable mainly for scientific research, as the need for special equipment limits its use in clinical practice.
Более широкие возможности у портативного оборудования для получения и анализа рубцовой жидкости, которое позволяет на основании общепринятых параметров выявлять субклинические стадии заболевания крупного и мелкого рогатого скота в полевых условиях. Оборудование включает в себя зевник, набор желудочных зондов, рН-метр и реактивы для настройки его [US 6241688 В1; US 09/142,064; дата публ. 5.06. 2001]. Данное оборудование упрощает процесс отбора проб рубцового содержимого и определения рН, но диагностические возможности его ограничены выявлением только ацидоза или алкалоза рубца.The portable equipment for obtaining and analyzing cicatricial fluid has wider capabilities, which allows, based on generally accepted parameters, to identify subclinical stages of the disease in cattle and small cattle in the field. The equipment includes a yawner, a set of gastric tubes, a pH meter and reagents for setting it [US 6241688 B1; US09 / 142.064; public date 5.06. 2001]. This equipment simplifies the process of sampling cicatricial content and determining pH, but its diagnostic capabilities are limited to detecting only acidosis or alkalosis of the scar.
Способ оценки деструкции волокон корма позволяет оценить функциональные возможности рубцового пищеварения. Данный способ включает в себя этапы отбора проб рубцового содержимого, внесение в него субстрата углеводов и инкубации в герметичном контейнере [US 20090272889 A1; US 12/405,650; опубл. 5.11.2009]. Данный способ значительно расширяет информативность получаемых результатов, позволяющих выявлять ранние стадии нарушения пищеварения в рубце и механизмы их развития. Однако этот способ применим только при проведении научных исследований, т.к. требует наличия специального оборудования и приемлем только при обследовании отдельных животных.A method for assessing the degradation of feed fibers makes it possible to evaluate the functionality of cicatricial digestion. This method includes the steps of sampling cicatricial content, introducing into it a substrate of carbohydrates and incubating in an airtight container [US 20090272889 A1; US 12 / 405,650; publ. November 5, 2009]. This method significantly expands the information content of the results, allowing to identify the early stages of digestive disorders in the rumen and the mechanisms of their development. However, this method is applicable only when conducting scientific research, because requires special equipment and is acceptable only when examining individual animals.
С целью изучения состояния пищеварения в рубце также определяют в его содержимом число бактерий и инфузорий, концентрацию аммиака, общее количество летучих жирных кислот, уксусной, пропионовой и масляной кислот [Профилактика нарушений обмена веществ у сельскохозяйственных животных /Под ред. А.А. Алиева. - М: Агропромиздат, 1986. - 384 с.; Шевелев Н.С., Грушкин А.Г., Тараканов Б.В. Физиологическая роль микробиоты в рубцовом пищеварении /Сельскохозяйственная биология, 2005, №6, С. 9-13]. Определяемые при этом показатели расширяют возможность выявления ранних стадий патологии, механизмов нарушения функций преджелудков и вторичных поражений других органов. Однако необходимость повышения информативности диагностических тестов и углубление знаний патогенеза нарушений рубцового пищеварения определяют потребность в новых методах исследования. Основным направлением поиска новых тестов является отражение процессов, предшествующих изменению рН, активности ферментов и числа микрофлоры.In order to study the state of digestion in the rumen, the number of bacteria and ciliates, the concentration of ammonia, the total amount of volatile fatty acids, acetic, propionic and butyric acids are also determined in its content [Prevention of metabolic disorders in farm animals / Ed. A.A. Aliyev. - M: Agropromizdat, 1986. - 384 p .; Shevelev N.S., Grushkin A.G., Tarakanov B.V. The physiological role of microbiota in cicatricial digestion / Agricultural Biology, 2005, No. 6, S. 9-13]. The indicators determined at the same time expand the possibility of identifying the early stages of pathology, mechanisms of dysfunction of the pancreas and secondary lesions of other organs. However, the need to increase the informative value of diagnostic tests and deepen knowledge of the pathogenesis of cicatricial digestion disorders determine the need for new research methods. The main direction of the search for new tests is the reflection of processes preceding changes in pH, enzyme activity and the number of microflora.
Известен способ определения в рубцовом содержимом лейкоцитов и/или цитокинов с помощью специфических антител, что позволяет оценивать активность воспаления, проницаемость сосудов стенки рубца и риск развития вторичных поражений, а также выявлять аллергические свойства у кормов и кормовых добавок [WO 2011154924 A1; PCT/IB 2011/052540; дата публ. 15.12.2011]. Однако показатели количества лейкоцитов и активности цитокинов не отражает основные механизмы нарушения рубцового пищеварения, в частности механизма дефаунизации полостей преджелудков. Основной причиной гибели бактерий, дрожжей и инфузорий являются неблагоприятные условия существования или наличие веществ, обладающих цитотоксическим действием. При этом если об изменении среды в рубце можно судить по уровню рН, то тестов оценки токсичности рубцового содержимого в клинической практике нет.A known method for determining the cicatricial content of leukocytes and / or cytokines using specific antibodies, which allows to evaluate the activity of inflammation, the permeability of blood vessels of the rumen wall and the risk of secondary lesions, as well as to identify allergic properties in feed and feed additives [WO 2011154924 A1; PCT / IB 2011/052540; public date 12/15/2011]. However, the indicators of the number of leukocytes and the activity of cytokines do not reflect the main mechanisms of impaired cicatricial digestion, in particular the mechanism of defaunization of the cavities of the pancreas. The main reason for the death of bacteria, yeast and ciliates is the adverse living conditions or the presence of substances with a cytotoxic effect. Moreover, if the change in the environment in the rumen can be judged by the pH level, then there are no tests to assess the toxicity of cicatricial content in clinical practice.
Таким образом, теоретическим обоснованием предлагаемого способа является предположение, что причиной снижения количества бактерий, дрожжей и инфузорий в рубце может быть наличие токсических веществ в рубцовом содержимом. Учитывая, что дефаунизация рубца является постоянным компонентом патогенеза большинства болезней преджелудков, оценка токсичности рубцового содержимого позволит не только уточнить патогенез, но и определить направление лечебных манипуляций.Thus, the theoretical justification of the proposed method is the assumption that the cause of the decrease in the number of bacteria, yeast and ciliates in the rumen may be the presence of toxic substances in the rumen contents. Given that scar defaunization is a constant component of the pathogenesis of most diseases of the pancreas, an assessment of the toxicity of cicatricial content will not only clarify the pathogenesis, but also determine the direction of medical manipulations.
В качестве прототипа выбран метод определения содержания в крови веществ с молекулярной массой от 500 до 5000 D, условно названной «средней», т.к. молекулярная масса большинства токсинов эндогенного происхождения находится в этом весовом диапазоне. Принцип метода заключается в осаждении высокомолекулярных (>5000 D) соединений раствором кислоты с последующим определением оптической плотности, показатели которой в определенных областях спектра пропорциональны содержанию фракций «средних» молекул [Алехин, Ю.Н. Эндогенные интоксикации у животных и их диагностика (методические рекомендации) / Ю.Н. Алехин - Воронеж, 2000. - 12 с.].As a prototype, a method for determining the blood content of substances with a molecular weight of from 500 to 5000 D, conventionally called "average", was chosen, because the molecular weight of most toxins of endogenous origin is in this weight range. The principle of the method is the precipitation of high molecular weight (> 5000 D) compounds with an acid solution, followed by determination of optical density, the parameters of which in certain spectral regions are proportional to the content of fractions of “medium” molecules [Alekhin, Yu.N. Endogenous intoxication in animals and their diagnosis (guidelines) / Yu.N. Alekhine - Voronezh, 2000. - 12 p.].
Однако прототип направлен на определение содержания «средних» молекул в крови и не отражает их количество в содержимом рубца, что исключает возможность оценивать токсичность содержимого рубца и выявлять патологии рубцового пищеварения. Помимо этого метод, указанный в прототипе, адаптирован для анализа крови и неизвестно, приемлем ли он для исследования рубцового содержимого.However, the prototype is aimed at determining the content of "average" molecules in the blood and does not reflect their number in the content of the scar, which excludes the possibility of evaluating the toxicity of the contents of the scar and identifying the pathology of cicatricial digestion. In addition, the method indicated in the prototype is adapted for blood analysis and it is not known whether it is acceptable for the study of cicatricial contents.
Изобретение решает задачу разработки способа диагностики нарушений рубцового пищеварения у жвачных животных с достижением технического результата - оценка содержания токсических веществ в рубцовом содержимом.The invention solves the problem of developing a method for diagnosing disorders of cicatricial digestion in ruminants with the achievement of a technical result - an assessment of the content of toxic substances in cicatricial content.
Для решения поставленной задачи и достижения технического результата в способе диагностики нарушений рубцового пищеварения у жвачных путем фотометрического определения содержания уровня «средних» молекул (ССМ) в организме животного на волнах 237, 254 и 280 нм согласно изобретению ССМ определяют в рубцовом содержимом, оценивают содержание токсических веществ и при наличии ССМ на волне 237 нм более 2,0 усл. ед., на волне 254 нм - более 1,0 усл. ед. и на волне 280 нм - более 1,0 усл. ед. диагностируют возникновение патологии рубцового пищеварения, учитывая, что у клинически здоровых животных данный показатель находится при определении его на волне 237 нм <2,0 усл. ед., на волне 254 нм <1,0 усл. ед., на волне 280 нм <1,0 усл. ед.To solve the problem and achieve a technical result in a method for diagnosing cicatricial digestion disorders in ruminants by photometric determination of the level of “average” molecules (CCM) in the animal’s body at 237, 254 and 280 nm according to the invention, CCM is determined in the cicatricial content, toxic content is evaluated substances and in the presence of SSM at a wave of 237 nm more than 2.0 conv. units, at a wavelength of 254 nm - more than 1.0 srvc. units and at a wavelength of 280 nm - more than 1.0 srvc. units diagnose the occurrence of pathology of cicatricial digestion, given that in clinically healthy animals this indicator is when determining it at a wavelength of 237 nm <2.0 conv. units, at a wavelength of 254 nm <1.0 srvc. units, at a wavelength of 280 nm <1.0 srvc. units
Способ позволяет оценить содержание токсических веществ в рубцовом содержимом. Увеличение ССМ используется для ранней диагностики нарушений рубцового пищеварения и наблюдается до появления традиционных симптомов (рН, количество микрофлоры и т.п.), а выраженность изменений ССМ у больных отражает степень тяжести нарушения рубцового пищеварения.The method allows to evaluate the content of toxic substances in cicatricial content. An increase in CCM is used for early diagnosis of cicatricial digestive disorders and is observed before the onset of traditional symptoms (pH, microflora, etc.), and the severity of CCM changes in patients reflects the severity of cicatricial disturbance.
Сущность способа поясняется примерами.The essence of the method is illustrated by examples.
Пример 1. Определение оптимального варианта исследуемого материала и концентрации трихлоруксусной кислоты при исследовании содержания «средних» молекул в рубцовом содержимом.Example 1. Determination of the optimal variant of the studied material and the concentration of trichloroacetic acid in the study of the content of "medium" molecules in the cicatricial content.
Объектом исследования были 30 клинически здоровых телят в возрасте 5-6 месяцев, которые содержались в типовом помещении с оптимальными параметрами микроклимата. Животные получали рацион, разработанный в соответствии с нормами кормления, в состав которого входили сено разнотравное 2,0 кг, зерносенаж ячменный 8,0 кг, комбикорм (П63-1) 2,3 кг, патока свекловичная 0,4 кг.The object of the study was 30 clinically healthy calves aged 5-6 months, which were kept in a typical room with optimal microclimate parameters. The animals received a diet developed in accordance with the norms of feeding, which included mixed grass hay 2.0 kg, grain barley 8.0 kg, compound feed (P63-1) 2.3 kg, beet molasses 0.4 kg.
Отбор проб рубцового содержимого проводили с помощью ротопищеводного зонда через 3 часа после очередного кормления. Полученные пробы рубцового содержимого исследовали в течение 2 часов после отбора. Пробу от каждого животного фильтровали через 4 слоя марли и делили на 9 равных частей. №№1, 4 и 7 перед исследованием разбавляли дистиллированной водой в 2 раза, №№2, 5 и 8 разбавляли в 4 раза, №№3, 6 и 9 не разбавляли (исследовали нативный материал). При исследовании проб №№1 и 2 для осаждения белков использовали 9%-ный раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ), для проб №№3 и 4-10%-ный раствор ТХУ, а для №№5 и 6-11%-ный раствор ТХУ. При определении содержания «средних» молекул (ССМ) к 1 мл рубцового содержимого добавляли 0,5 мл раствора трихлоруксусной кислоты. Через 2 минуты содержимое центрифугировали 15 минут при 3000 об/мин. К 0,5 мл супернатанту добавляли 4,5 мл дистиллированной воды и фотометрировали раствор при длине волны 254 нм против раствора сравнения (1 мл 10% трихлоруксусной кислоты и 29 мл дистиллированной воды).Sampling of cicatricial contents was carried out using a mouth-esophageal probe 3 hours after the next feeding. Samples of cicatricial content obtained were examined within 2 hours after collection. A sample from each animal was filtered through 4 layers of gauze and divided into 9 equal parts. No. 1, 4 and 7 were diluted 2 times with distilled water before the study, No. 2, 5 and 8 were diluted 4 times, No. 3, 6 and 9 were not diluted (native material was examined). In the study of samples No. 1 and 2, for the precipitation of proteins used a 9% solution of trichloroacetic acid (TCA), for samples No. 3 and a 4-10% solution of TCA, and for No. 5 and 6-11% TCA solution. When determining the content of “medium” molecules (CCM), 0.5 ml of trichloroacetic acid solution was added to 1 ml of cicatricial content. After 2 minutes, the contents were centrifuged for 15 minutes at 3000 rpm. 4.5 ml of distilled water was added to 0.5 ml of the supernatant, and the solution was photographed at a wavelength of 254 nm against a comparison solution (1 ml of 10% trichloroacetic acid and 29 ml of distilled water).
Полученные результаты представлены в таблице №1, из данных которой видно, что разбавление рубцового содержимого сопровождается снижением ССМ при использовании 9%-ного раствора ТХУ на 44,8%, 10%-ного раствора ТХУ - на 50,0% и в пробе с 11%-ным раствором ТХУ - на 43,4%. Разбавление в 4 раза привело к снижению ССМ в 2,28; 3,58 и 2,52 раза соответственно.The results are presented in table No. 1, from the data of which it is seen that the dilution of the scar content is accompanied by a decrease in CCM when using a 9% solution of TCA by 44.8%, a 10% solution of TCA by 50.0% and in the sample with 11% TCA solution - 43.4%. A 4-fold dilution resulted in a decrease in SSM of 2.28; 3.58 and 2.52 times, respectively.
Таким образом, разбавление рубцового содержимого приводит к снижению показателей ССМ, но выраженность этого снижения не соответствует степени разбавления. Поэтому более объективные данные получаются при использовании неразбавленного рубцового содержимого.Thus, dilution of cicatricial content leads to a decrease in CCM, but the severity of this decrease does not correspond to the degree of dilution. Therefore, more objective data is obtained using undiluted cicatricial content.
Изменение концентрации ТХУ также оказывает влияние на определяемый показатель (см. Табл. 1). Так при исследовании неразбавленных проб коэффициент вариации минимальным оказался при использовании 10%-ного раствора ТХУ, в то время как он возрастал на 1,7 и 1,3% при использовании 9 и 11%-ного раствора соответственно.A change in the concentration of TCA also affects the determined indicator (see Table 1). Thus, in the study of undiluted samples, the coefficient of variation was minimal when using a 10% solution of TCA, while it increased by 1.7 and 1.3% when using a 9 and 11% solution, respectively.
Таким образом, изменение концентрации рабочего раствора ТХУ оказывает недостоверное изменение коэффициента вариации ССМ, однако наиболее низкая вариабельность отмечена при использовании 10%-ного раствора ТХУ.Thus, a change in the concentration of the working solution of TCA has an unreliable change in the coefficient of variation of CCM, however, the lowest variability was noted when using a 10% solution of TCA.
Полученные результаты показали, что наиболее стабильные и объективные показатели ССМ получают при исследовании неразбавленного рубцового содержимого, используя для осаждения белков 10%-ный раствор ТХУ.The results showed that the most stable and objective indicators of CCM are obtained in the study of undiluted cicatricial content using 10% TCA solution for protein precipitation.
Пример 2. Унификация метода определения ССМ и изучение его диагностической информативности.Example 2. Unification of the method for determining SSM and the study of its diagnostic information content.
Используя метод моделирования с помощью специальных рационов, воспроизвели наиболее распространенные варианты нарушения рубцового пищеварения у коров - ацидоз и алкалоз.Using the modeling method with the help of special diets, we reproduced the most common variants of cicatricial indigestion in cows - acidosis and alkalosis.
Объектом исследования были клинически здоровые коровы красно-пестрой и голштино-фризской породы, из числа которых на 40-50 день лактации были сформированы три группы. Все животные, задействованные в опыте, содержались на привязи в индивидуальных станках. Для каждой группы были разработаны рационы, идентичные по содержанию питательных веществ, витаминов и минералов, но отличающиеся уровнем протеина и углеводов. Животные из группы №1 (контроль, n=100) получали базовый рацион, соответствующий рекомендуемым нормам. Коровам группы №2 (n=30) дополнительно к базовому рациону давали 4 кг свекловичной патоки, а группы №3 (n=30) - 250 г мочевины марки А. Приучение к высокой дозе мочевины осуществляли в течение 15 суток.The object of the study was clinically healthy cows of the red-motley and Holstein-Friesian breed, of which three groups were formed on the 40-50th day of lactation. All animals involved in the experiment were kept on a leash in individual machines. For each group, diets were developed that are identical in content of nutrients, vitamins and minerals, but differ in the level of protein and carbohydrates. Animals from group No. 1 (control, n = 100) received a basic diet corresponding to the recommended norms. In addition to the basic diet, cows of group No. 2 (n = 30) were given 4 kg of beet molasses, and group No. 3 (n = 30) were given 250 g of brand A urea. They were accustomed to a high dose of urea for 15 days.
В первый день опыта, а также на 7 и 25 день, проводили детальное обследование коров с отбором проб крови и рубцового содержимого. Пробы отбирали через 3 часа после первого (утреннего) кормления. Большую часть проб рубцового содержимого исследовали в нативном виде в течение 2-х часов после отбора, но по 10 образцов из каждой группы консервировали 10%-ным раствором формалина (4 капли на 10 мл содержимого).On the first day of the experiment, as well as on days 7 and 25, a detailed examination of the cows was carried out with the sampling of blood and cicatricial contents. Samples were taken 3 hours after the first (morning) feeding. Most of the cicatricial samples were examined in their native form within 2 hours after collection, but 10 samples from each group were preserved with 10% formalin solution (4 drops per 10 ml of contents).
Результаты наблюдения за коровами из группы контроля показали, что их клиническое состояние в течение опыта существенно не изменялось. У животных из группы №2 изменения клинического статуса были отмечены только на 25 день опыта, когда у большинства (93,3%) из них отмечали снижение продуктивности на 8,7% (группа №1 - 19,4 кг, №2 - 17,7 кг) и содержания жира в молоке на 19,0% (35,9 и 29,1 г/л). Кроме того, у этих коров наблюдалось снижение аппетита, скрежет зубами и слезотечение. В группе №3 у отдельных животных (10%) в течение первых 7 дней опыта наблюдались поносы и временное снижение аппетита. На 25 день опыта отмечалось снижение продуктивности на 5,1%, а у 16,7% (5 голов) животных наблюдалась мышечная дрожь. У большинства коров имело место учащение пульса (110-160/мин) и дыхания (28-34/мин).The results of monitoring cows from the control group showed that their clinical condition did not change significantly during the experiment. In animals from group No. 2, changes in clinical status were observed only on the 25th day of the experiment, when the majority (93.3%) of them showed a decrease in productivity by 8.7% (group No. 1 - 19.4 kg, No. 2 - 17 , 7 kg) and the fat content in milk by 19.0% (35.9 and 29.1 g / l). In addition, these cows showed a decrease in appetite, gnashing of teeth and lacrimation. In group No. 3, in individual animals (10%), diarrhea and a temporary decrease in appetite were observed during the first 7 days of the experiment. On the 25th day of the experiment, a decrease in productivity by 5.1% was noted, and muscle tremble was observed in 16.7% (5 animals) of animals. Most cows experienced increased heart rate (110-160 / min) and respiration (28-34 / min).
Из данных таблиц №№2 и 3 видно, что в начале опыта у всех задействованных в опыте животных показатели рубцового пищеварения были в пределах нормы.From the data in Tables Nos. 2 and 3, it can be seen that at the beginning of the experiment, all the animals involved in the experiment had cicatricial digestion within the normal range.
Животные из группы №1 (Табл. 2 и 3) оставались здоровыми в течение всего опыта, а наблюдаемые изменения показателей рубцового содержимого и крови были обусловлены функциональной нагрузкой на организм коров в период раздоя.Animals from group No. 1 (Tables 2 and 3) remained healthy throughout the entire experiment, and the observed changes in the indices of cicatricial content and blood were caused by the functional load on the body of cows during milking.
У коров из группы №2 в сравнении с исходным уровнем не отмечены достоверные изменения руминации и состава рубцового содержимого в течение первых 7-ми дней опыта. На 25-й день показатель рН снизился на 1,7 ед., в цвете содержимого усилились оттенки серого (молочного), а запах стал кислым. В сравнении с исходным уровнем возросла скорость седиментации на 90,0%, снизилось количество простейших на 62,1%, а число сокращений рубца в 4 раза.In cows from group No. 2, in comparison with the initial level, there were no significant changes in the rumination and composition of the scar content during the first 7 days of the experiment. On the 25th day, the pH decreased by 1.7%, the shades of gray (milk) intensified in the color of the contents, and the smell became acidic. In comparison with the initial level, the sedimentation rate increased by 90.0%, the number of protozoa decreased by 62.1%, and the number of scar reductions by 4 times.
У животных группы №3 достоверные изменения показателей рубцового пищеварения были отмечены только на 25-й день опыта, когда в сравнении с исходным уровнем рН возросла на 0,9 ед., время седиментации уменьшилось в 2,8 раза, а количество инфузорий - на 39,0%. Цвет содержимого стал более темный, а запах вначале аммиачный, а затем появились гнилостные оттенки. Число жвачных движений во время пережевывания одной жвачки уменьшилось на 27,6%, а руминация ослабла в 2 раза.In animals of group No. 3, significant changes in the indices of cicatricial digestion were noted only on the 25th day of the experiment, when, in comparison with the initial level, the pH increased by 0.9 units, the sedimentation time decreased by 2.8 times, and the number of infusoria by 39 , 0%. The color of the contents became darker, and the smell was initially ammonia, and then putrefactive shades appeared. The number of ruminant movements during chewing one gum decreased by 27.6%, and rumination weakened by 2 times.
Таким образом, используя метод моделирования, были сформированы ацидоз рубца у коров из группы №2 и алкалоз рубца - в группе №3. Характерные для каждого метаболического профиля изменения моторики рубца и свойств его содержимого появлялись в период с 7 по 25 день действия неблагоприятных факторов кормления.Thus, using the modeling method, rumen acidosis was formed in cows from group No. 2 and rumen alkalosis in group No. 3. Changes in the motility of the scar and the properties of its contents, characteristic of each metabolic profile, appeared during the period from the 7th to the 25th day of the action of adverse feeding factors.
Используя базовый вариант метода определения ССМ (см. Пример 1) на 25-й день опыта, провели оценку динамики ССМ в диапазоне от 200 до 300 нм. Анализ полученных результатов показал, что в интервале от 200 до 233,0±0,28 нм наблюдается высокая вариабельность показателей. Так коэффициент вариабельности (С) у здоровых животных составил 37,2%, у коров с ацидозом рубца - 29,5%, а при алкалозе - 26,8%. Затем у здоровых животных диаграмма формирует относительно стабильные интервалы от 233,7±0,32 до 245,2±0,5 нм (С=10,14%) и от 250,2±0,5 до 285,0±0,025 нм (С=8,07%). У больных с ацидозом и алкалозом имеется только один относительно стабильный интервал (С=6,8%) в диапазоне от 234,9±0,45 до 266,0±0,6 нм.Using the basic version of the method for determining SSM (see Example 1) on the 25th day of the experiment, we evaluated the dynamics of SSM in the range from 200 to 300 nm. An analysis of the results showed that in the range from 200 to 233.0 ± 0.28 nm, a high variability of indicators is observed. So the coefficient of variability (C) in healthy animals was 37.2%, in cows with rumen acidosis - 29.5%, and in alkalosis - 26.8%. Then, in healthy animals, the diagram forms relatively stable intervals from 233.7 ± 0.32 to 245.2 ± 0.5 nm (C = 10.14%) and from 250.2 ± 0.5 to 285.0 ± 0.025 nm (C = 8.07%). In patients with acidosis and alkalosis, there is only one relatively stable interval (C = 6.8%) in the range from 234.9 ± 0.45 to 266.0 ± 0.6 nm.
Таким образом, при исследовании рубцового содержимого наиболее приемлемы замеры ССМ в диапазонах 235-245 и 250-285 нм. Учитывая это, а также для сохранения возможности сравнения показателей крови с рубцовым содержимым следует определять ССМ на длинах волны 237; 254 и 280 нм.Thus, in the study of cicatricial content, the most acceptable measurements are SSM in the ranges of 235-245 and 250-285 nm. Given this, and also to preserve the possibility of comparing blood indices with cicatricial content, it is necessary to determine CCM at wavelengths of 237; 254 and 280 nm.
Полученные результаты позволили сформировать оптимальный вариант метода определения ССМ в рубцовом содержимом.The results obtained made it possible to form an optimal variant of the method for determining SSM in cicatricial content.
Реактивы: 1) рабочий раствор: 10%-ный раствор трихлоруксусной кислоты; 2) раствор сравнения: смешать 1 мл рабочего раствора и 29 мл дистиллированной воды.Reagents: 1) working solution: 10% solution of trichloroacetic acid; 2) comparison solution: mix 1 ml of working solution and 29 ml of distilled water.
Материалы для исследования: рубцовое содержимое, которое перед исследованием фильтруют через 4 слоя марли. При отсутствии возможности исследовать в течение 2 часов после отбора, пробы консервируют 10%-ным раствором формалина, добавляя 4 капли на 10 мл профильтрованного содержимого.Materials for the study: scar content, which before the study is filtered through 4 layers of gauze. If it is not possible to investigate within 2 hours after collection, the samples are preserved with a 10% formalin solution, adding 4 drops per 10 ml of filtered contents.
Оборудование: центрифуга, спектрофотометр.Equipment: centrifuge, spectrophotometer.
Ход определения. В центрифужную пробирку вносят 1 мл рубцового содержимого и 0,5 мл рабочего раствора, перемешивают стеклянной палочкой. Через 2 минуты центрифугируют 15 минут при 3000 об/мин. В чистую пробирку вносят 0,5 мл супернатанта и 4,5 мл дистиллированной воды, перемешивают и фотометрируют. Измеряют экстинцию на длинных волн 237, 254 и 280 нм в кювете с толщиной слоя 1 см против раствора сравнения.The course of determination. Into a centrifuge tube make 1 ml of scar contents and 0.5 ml of working solution, mix with a glass rod. After 2 minutes, centrifuged for 15 minutes at 3000 rpm. Add 0.5 ml of the supernatant and 4.5 ml of distilled water to a clean tube, mix and photometer. Measure the extinction at long wavelengths of 237, 254 and 280 nm in a cuvette with a layer thickness of 1 cm against the comparison solution.
Результаты исследования ССМ в сыворотки крови и рубцовом содержимом представлены в таблице №3, из данных которой видно, что у контрольных животных в течение опыта достоверных отклонений ССМ в крови и рубцовом содержимом не было.The results of the study of CCM in serum and cicatricial content are presented in table No. 3, from the data of which it can be seen that in the control animals during the experiment there were no significant deviations of the CCM in blood and cicatricial content.
У коров из группы №2 ССМ в рубцовом содержимом на длине волны 237 нм увеличилось на 7 день опыта в 2,7 раза, а на 25 день - в 3,0 раза. На длине волны 254 нм в указанные дни опыта рост показателей составил 46,8 и 82,4%, а на 280 нм - 21,0 и 34,8%. В группе №3 при анализе на длине волны 237 нм ССМ у животных возросло через 7 дней в 3,9 раза, а через 25 день - в 4,1 раза. При определении показателя на длине волны 254 нм, он увеличился на 43,6% и в 1,6 раза, а на 280 нм - на 43,5 и 64,6%.In cows from group No. 2, the SMS in the cicatricial content at a wavelength of 237 nm increased 2.7 times on day 7 of the experiment, and 3.0 times on day 25. At the wavelength of 254 nm on the indicated days of the experiment, the growth of indicators was 46.8 and 82.4%, and at 280 nm - 21.0 and 34.8%. In group No. 3, when analyzed at a wavelength of 237 nm, the CCM in animals increased 3.9 times after 7 days, and 4.1 times after 25 days. When determining the indicator at a wavelength of 254 nm, it increased by 43.6% and 1.6 times, and at 280 nm - by 43.5 and 64.6%.
В сыворотке крови достоверное увеличение ССМ на 7 день опыта были отмечены только на длине волны 254 нм. На 25 день у коров из группы №2 ССМ увеличилось на длине волны 237 нм в 2,2 раза, 254 нм - на 43,4% и 280 нм - на 23,7%. У животных из группы №3 аналогичные показатели возросли в 2,3 раза, на 40,5 и 30,9% соответственно.In serum, a significant increase in CCM on the 7th day of the experiment was observed only at a wavelength of 254 nm. On day 25, in cows from group No. 2, the CCM increased at a wavelength of 237 nm by 2.2 times, 254 nm by 43.4% and 280 nm by 23.7%. In animals from group No. 3, similar indicators increased 2.3 times, by 40.5 and 30.9%, respectively.
Сравнительные исследования нативного и консервированного рубцового содержимого показали, что внесение раствора формалина не оказывает достоверного влияния на определяемые показатели. Исключение составляет ССМ, которое в консервированной пробе в среднем увеличивается на 0,08±0,011 (-0,05÷0,22) усл. ед. При этом наиболее выраженное влияние консерванта отмечено при использовании длины волны 237 и 280 нм. Однако отмеченное влияние формалина близко к диапазону индивидуальной вариации ССМ у животных (5-12% или 0,08-0,150 усл. ед.), что дает основание игнорировать влияние консерванта на данный показатель.Comparative studies of native and canned cicatricial contents showed that the introduction of a formalin solution does not have a significant effect on the determined parameters. The exception is SSM, which in a canned sample increases on average by 0.08 ± 0.011 (-0.05 ÷ 0.22) srvc. units In this case, the most pronounced effect of the preservative was noted when using wavelengths of 237 and 280 nm. However, the observed effect of formalin is close to the range of individual variation of CCM in animals (5-12% or 0.08-0.150 conv. Units), which gives reason to ignore the effect of preservative on this indicator.
Расчет референсного интервала ССМ в рубцовом содержимом у здоровых животных проводились с использованием программы Reference Value Advisor на базе Microsoft Excel [Geffre A., Concordet D., Braun J.P., Trumel C. Reference Value Advisor: a new freeware set of macro instructions to calculate reference intervals with Microsoft Excel, Vet Clin Pathol. 2011 40(1) 107-112]. Полученные результаты показали, что референсный интервал здоровых животных (n=100) ССМ при определении на длине волны 237 нм составляет 0,5-2,0 усл. ед., 254 нм 0,3-1,0 усл. ед. и 280 нм 0,25-1,0 усл. ед.Calculation of the CCM reference interval in cicatricial content in healthy animals was performed using the Reference Value Advisor program based on Microsoft Excel [Geffre A., Concordet D., Braun JP, Trumel C. Reference Value Advisor: a new freeware set of macro instructions to calculate reference intervals with Microsoft Excel, Vet Clin Pathol. 2011 40 (1) 107-112]. The results showed that the reference interval of healthy animals (n = 100) SSM when determined at a wavelength of 237 nm is 0.5-2.0 srvc. units, 254 nm 0.3-1.0 conv. units and 280 nm 0.25-1.0 conv. units
Таким образом, нормальными величинами ССМ в рубцовом содержимом следует считать: при длине волны 237 нм - <2,0; при 254 и 280 нм - <1,0 усл. ед. (условные единицы оптической плотности).Thus, the normal values of CCM in the cicatricial content should be considered: at a wavelength of 237 nm - <2.0; at 254 and 280 nm - <1.0 srvc. units (conventional units of optical density).
Степень связи показателя ССМ в рубцовом содержимом с нарушением метаболического профиля в рубце оценивали на основании показателя достоверности связи методом хи-квадрат (χ2) [Хамитов Г.П., Ведерникова Т.И. Вероятности и статистика, Иркутск: БГУЭП, 2006. - 272 с.]. Информативность показателей ССМ как теста ранней диагностики оценивали результатами сопоставления его уровня на 7 день опыта и частотой нарушений рубцового пищеварения в конце опыта (Табл. 4). Полученные при этом результаты показали, что на ранних этапах развития ацидоза и алкалоза (7 день опыта), когда отсутствуют достоверные отклонения традиционных показателей рубцового пищеварения, уже имеются достоверные отклонения ССМ. Так значения χ2 на длине волны 237 нм составил 124,8, а коэффициент детерминации (rd) - 0,77 (Ρ0,001). При определении ССМ на 254 нм указанные параметры составили 90,0 и 0,49, а на 280 нм - 65,7 и 0,4 (Р0,001).The degree of connection of the CCM indicator in the cicatricial content with metabolic profile disorder in the rumen was evaluated on the basis of the chi-square (χ 2 ) connection reliability indicator [Khamitov GP, Vedernikova TI Probabilities and statistics, Irkutsk: BSUEP, 2006. - 272 p.]. The information content of CCM indicators as an early diagnosis test was evaluated by comparing its level on the 7th day of the experiment and the frequency of cicatricial digestion disorders at the end of the experiment (Table 4). The results obtained from this showed that in the early stages of acidosis and alkalosis (day 7 of the experiment), when there are no significant deviations of traditional indices of cicatricial digestion, there are already significant deviations of CCM. So, the χ 2 value at a wavelength of 237 nm was 124.8, and the determination coefficient (r d ) was 0.77 (Ρ0.001). When determining the SSM at 254 nm, these parameters were 90.0 and 0.49, and at 280 nm - 65.7 and 0.4 (P0.001).
Это указывает на то, что между уровнем СММ в рубцовом содержимом у жвачных животных и нарушениями метаболического профиля в рубце имеется достоверная корреляционная связь при использовании длины волны 237 нм сильной, а при 254 и 280 нм - средней степени выраженности. Доля влияния увеличения ССМ на длине волны 237 нм (выше 2,0 усл. ед.), 254 нм (выше 1,0 усл. ед.) и 280 нм (выше 1,0 усл. ед.) на нарушение рубцового пищеварения составляет соответственно 77,0; 49,0 и 40,0%, что позволяет расценивать его как достоверный показатель ранней диагностики с высоким уровнем прогностического значения.This indicates that there is a reliable correlation between the level of SMM in cicatricial content in ruminants and metabolic disturbances in the rumen when using a strong wavelength of 237 nm, and a moderate degree at 254 and 280 nm. The share of the effect of increasing CCM at a wavelength of 237 nm (above 2.0 srvc), 254 nm (above 1.0 srvc) and 280 nm (above 1.0 srvc) on cicatricial digestion respectively 77.0; 49.0 and 40.0%, which allows us to regard it as a reliable indicator of early diagnosis with a high level of prognostic value.
ССМ, определяемое на длине волны 237 нм, превышает норму у 94,0% животных с выраженными симптомами ацидоза и алкалоза (25 день опыта), а коэффициент корреляции (r) с изменениями рН составил 0,88. На длине волны 254 нм эти показатели составили при 254 нм - 85,0% и 0,5, а на 280 нм - 72,5% и 0,46.SSM, determined at a wavelength of 237 nm, exceeds the norm in 94.0% of animals with severe symptoms of acidosis and alkalosis (day 25 of the experiment), and the correlation coefficient (r) with changes in pH was 0.88. At a wavelength of 254 nm, these indicators were at 254 nm - 85.0% and 0.5, and at 280 nm - 72.5% and 0.46.
Таким образом, новый способ диагностики нарушений рубцового пищеварения у жвачных животных характеризуется сравнительно высокой прогностической и диагностической информативностью. Его применение позволяет выявлять нарушения рубцового пищеварения на ранних стадиях их развития, что является основанием для проведения корректировки рациона кормления или превентивной терапии, которая является более эффективной и экономически менее затратной. Применение данного теста также позволяет оценивать тяжесть метаболических нарушений в рубце, что является основанием для определения тактики лечения и оценки ее эффективности.Thus, a new method for the diagnosis of cicatricial digestion disorders in ruminants is characterized by a relatively high prognostic and diagnostic information content. Its use allows you to identify violations of cicatricial digestion in the early stages of their development, which is the basis for adjusting the diet or preventive therapy, which is more effective and less costly. The use of this test also allows you to assess the severity of metabolic disorders in the rumen, which is the basis for determining treatment tactics and evaluating its effectiveness.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014137684/15A RU2565412C1 (en) | 2014-09-17 | 2014-09-17 | Method of diagnostics of ruminal digestion disorder in ruminants |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014137684/15A RU2565412C1 (en) | 2014-09-17 | 2014-09-17 | Method of diagnostics of ruminal digestion disorder in ruminants |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2565412C1 true RU2565412C1 (en) | 2015-10-20 |
Family
ID=54327191
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014137684/15A RU2565412C1 (en) | 2014-09-17 | 2014-09-17 | Method of diagnostics of ruminal digestion disorder in ruminants |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2565412C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6694161B2 (en) * | 2001-04-20 | 2004-02-17 | Monsanto Technology Llc | Apparatus and method for monitoring rumen pH |
| RU2400237C2 (en) * | 2008-10-20 | 2010-09-27 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральская государственная академия ветеринарной медицины" | Method of treating osteodystrophia in milk cows in conditions of technogenic province with excess of nickel and lead |
-
2014
- 2014-09-17 RU RU2014137684/15A patent/RU2565412C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6694161B2 (en) * | 2001-04-20 | 2004-02-17 | Monsanto Technology Llc | Apparatus and method for monitoring rumen pH |
| RU2400237C2 (en) * | 2008-10-20 | 2010-09-27 | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральская государственная академия ветеринарной медицины" | Method of treating osteodystrophia in milk cows in conditions of technogenic province with excess of nickel and lead |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| НАЗАРЕНКО Г.И. и др, Клиническая оценка результатов лабораторных исследований, Гематологические исследования, 29.07.2013, с. 38 онлайн [найдено 14.05.2015], найдено из Интернет http://uchebilka.ru/himiya/120645/index.html. ГРУШКИН А.Г. и др, О морфофункциональных особенностях микробиоты рубца жвачных животных и роли целлюлозолитических бактерий в рубцовом пищеварении., журнал Сельскохозяйственная биология, 2008, N 2, с. 12-19, онлайн [найдено 14.05.2015], найдено из Интернет http://www.agrobiology.ru/articles/grushkin_2_2008.html * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Dorsch et al. | Feline lower urinary tract disease in a German cat population | |
| Solomon | Urea and creatinine of Clarias gariepinus in three different commercial ponds | |
| Sato et al. | Diagnosis of subacute ruminal acidosis (SARA) by continuous reticular pH measurements in cows | |
| Kirbas et al. | Evaluation of serum cardiac troponin I concentration in sheep with acute ruminal lactic acidosis. | |
| Hubner et al. | Characterization of metabolic profile, health, milk production, and reproductive outcomes of dairy cows diagnosed with concurrent hyperketonemia and hypoglycemia | |
| Rees et al. | Udder firmness as a possible indicator for clinical mastitis | |
| Atkinson | Prevalence of subacute ruminal acidosis (SARA) on UK dairy farms | |
| Rutgers et al. | Intestinal permeability testing in dogs with diet‐responsive intestinal disease | |
| Villot et al. | Combinations of non-invasive indicators to detect dairy cows submitted to high-starch-diet challenge | |
| RU2565412C1 (en) | Method of diagnostics of ruminal digestion disorder in ruminants | |
| Coombe et al. | The effects on ruminal pH and serum haptoglobin after feeding a grain-based supplement to grazing dairy cows as a partial mixed ration or during milking | |
| Randell et al. | Intestinal permeability testing using lactulose and rhamnose: a comparison between clinically normal cats and dogs and between dogs of different breeds | |
| Glamazdin et al. | Physiological response of productively significant parameters of cows to invasion by Fasciola hepatica | |
| Hanuš et al. | Analyse of relationships between some milk indicators of cow energy metabolism and ketosis state. | |
| Stefańska et al. | Relationship between pH of ruminal fluid during subacute ruminal acidosis and physiological response of the Polish Holstein-Friesian dairy cows | |
| Pato et al. | Validation of the fCAL turbo immunoturbidimetric assay for measurement of calprotectin in porcine and bovine fecal samples | |
| Guess et al. | Longitudinal Evaluation of Serum Symmetric Dimethylarginine (SDMA) and Serum Creatinine in Dogs Developing Chronic Kidney Disease. | |
| Schären-Bannert et al. | Evaluation of multifactorial digestive disorders in a dairy herd at different stages of lactation | |
| Sani et al. | Feed intake, rumen metabolite and some blood parameters of yearling Bunaji bulls fed graded levels of palm kernel cake | |
| RU2798226C1 (en) | Method of diagnosing latent mastitis in cows | |
| Хаитов et al. | RESULTS OF DETERMINING THE PREVALENCE OF RUMINANT ACIDOSIS IN COWS USING DISPENSING AIDS | |
| van Proosdij et al. | Preliminary Notes on Equine Tissue Transglutaminase Serology and A Case of Equine Gluten-Sensitive Enteropathy and Dermatitis in an 11-Year-Old Dutch Warmblood Horse | |
| Constantin et al. | Can Wheat Germination Test Be Used to Predict Pregnancy in Ewes? | |
| Stein | Determination of subclinical metabolic disorders in transition dairy cows | |
| Lessire et al. | Evaluation of the ruminal function of Belgian dairy cows suspected of subacute ruminal acidosis. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170918 |