RU2547568C1 - Method of postnatal diagnostics of foetal alcohol syndrome in deceased young children - Google Patents
Method of postnatal diagnostics of foetal alcohol syndrome in deceased young children Download PDFInfo
- Publication number
- RU2547568C1 RU2547568C1 RU2013157488/15A RU2013157488A RU2547568C1 RU 2547568 C1 RU2547568 C1 RU 2547568C1 RU 2013157488/15 A RU2013157488/15 A RU 2013157488/15A RU 2013157488 A RU2013157488 A RU 2013157488A RU 2547568 C1 RU2547568 C1 RU 2547568C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- brain
- substance
- deceased
- changes
- cells
- Prior art date
Links
- 206010016845 Foetal alcohol syndrome Diseases 0.000 title claims abstract description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims abstract description 76
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 34
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 claims abstract description 17
- 210000001638 cerebellum Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 claims abstract description 9
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 210000000449 purkinje cell Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 208000026934 fetal alcohol spectrum disease Diseases 0.000 claims description 41
- 201000007794 fetal alcohol syndrome Diseases 0.000 claims description 41
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 22
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 claims description 12
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 claims description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 claims 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 230000002488 pyknotic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 2
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 abstract 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 17
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 5
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 5
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 5
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 208000036632 Brain mass Diseases 0.000 description 3
- 206010066054 Dysmorphism Diseases 0.000 description 3
- SJEYSFABYSGQBG-UHFFFAOYSA-M Patent blue Chemical compound [Na+].C1=CC(N(CC)CC)=CC=C1C(C=1C(=CC(=CC=1)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=C1C=CC(=[N+](CC)CC)C=C1 SJEYSFABYSGQBG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000000980 acid dye Substances 0.000 description 3
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 3
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 3
- 208000004141 microcephaly Diseases 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 206010001605 Alcohol poisoning Diseases 0.000 description 2
- 206010012559 Developmental delay Diseases 0.000 description 2
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 2
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 2
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000000877 corpus callosum Anatomy 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- HLUCICHZHWJHLL-UHFFFAOYSA-N hematein Chemical compound C12=CC=C(O)C(O)=C2OCC2(O)C1=C1C=C(O)C(=O)C=C1C2 HLUCICHZHWJHLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 2
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 208000032170 Congenital Abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 208000012239 Developmental disease Diseases 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 238000010826 Nissl staining Methods 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- RZUBARUFLYGOGC-MTHOTQAESA-L acid fuchsin Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=C(N)C(C)=CC(C(=C\2C=C(C(=[NH2+])C=C/2)S([O-])(=O)=O)\C=2C=C(C(N)=CC=2)S([O-])(=O)=O)=C1 RZUBARUFLYGOGC-MTHOTQAESA-L 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000007698 birth defect Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001159 caudate nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 230000002650 habitual effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 231100000576 intrauterine exposure Toxicity 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001018 xanthene dye Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области судебной медицины, криминалистики и может быть использовано в этих областях при экспертном отождествлении личности умершего ребенка раннего возраста с диагнозом фетального алкогольного синдрома, а также для диагностики фетального алкогольного синдрома у умершего ребенка раннего возраста.The invention relates to the field of forensic medicine, forensics and can be used in these areas for expert identification of the identity of a deceased young child with a diagnosis of fetal alcohol syndrome, as well as for the diagnosis of fetal alcohol syndrome in a deceased young child.
Неблагополучно протекающая беременность и роды оказывают часто более пагубное воздействие на нервную систему и психику человека, чем эндо- и экзогенные факторы в постнатальном периоде. Среди факторов, нарушающих оптимальность течения беременности и закономерно влияющих на формирование разнообразных девиаций у плода и ребенка, особое место занимают токсические воздействия, в том числе употребление женщиной алкоголя во время беременности. Развернутая клиническая картина, возникающая у плода, вследствие внутриутробного воздействия алкоголя, носит название фетального алкогольного синдрома.Dysfunctional pregnancy and childbirth often have a more detrimental effect on the human nervous system and psyche than endo- and exogenous factors in the postnatal period. Among the factors that violate the optimal course of pregnancy and naturally affect the formation of various deviations in the fetus and the child, toxic effects, including the use of alcohol by a woman during pregnancy, occupy a special place. The detailed clinical picture that occurs in the fetus, due to intrauterine exposure to alcohol, is called fetal alcohol syndrome.
Фетальный алкогольный синдром (ФАС) - это устойчивый комплекс врожденных дефектов, пороков и нарушений развития плода и ребенка, возникающих во внутриутробный период под воздействием этанола при употреблении женщиной алкогольных напитков в течение беременности.Fetal alcohol syndrome (FAS) is a stable complex of birth defects, defects and developmental disorders of the fetus and child that occur during the prenatal period under the influence of ethanol when a woman consumes alcoholic beverages during pregnancy.
По клиническим проявлениям все симптомы ФАС делят на 3 основные группы: нарушения физического развития; дисморфизм лицевого черепа; отклонения со стороны ЦНС.According to the clinical manifestations, all the symptoms of FAS are divided into 3 main groups: physical development disorders; facial skull dysmorphism; deviations from the central nervous system.
Соответственно диагностика ФАС базируется на документировании трех отклонений: лицевых отклонений (сглаженный носогубный желобок, тонкая кайма верхней губы и короткие глазные щели); дефицита роста и веса; отклонений со стороны ЦНС.Accordingly, the diagnosis of FAS is based on the documentation of three deviations: facial deviations (smoothed nasolabial groove, thin border of the upper lip and short eye slits); lack of height and weight; deviations from the central nervous system.
Известен способ постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у детей раннего возраста, в соответствии с которым выявляют морфологические изменения в головном мозге с помощью магнитно-резонансной томографии. Исследования показали, что при верифицированном ФАС происходит достоверное уменьшение объема мозга в целом на 15%, мозжечка - на 18%, хвостатого ядра - на 23%, кроме того, возможны различные формы недоразвития мозолистого тела. Только агенезия мозолистого тела встречается у 45% детей с ФАС (Mattson, S.N.; Jernigan, T.L.; and Riley, E.P. 1994. MRI and prenatal alcohol exposure: Images provide insight into FAS. Alcohol Health & Research World 18(1):49-52).There is a method of postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in young children, according to which morphological changes in the brain are detected using magnetic resonance imaging. Studies have shown that with verified FAS, there is a significant decrease in brain volume in general by 15%, cerebellum - by 18%, caudate nucleus - by 23%, in addition, various forms of underdevelopment of the corpus callosum are possible. Only corpus callosum is found in 45% of children with FAS (Mattson, SN; Jernigan, TL; and Riley, EP 1994. MRI and prenatal alcohol exposure: Images provide insight into FAS. Alcohol Health & Research World 18 (1): 49- 52).
Недостаток известного способа состоит в том, что он не позволяет диагностировать фетальный алкогольный синдром по конкретным морфологическим изменениям в мозговом веществе, поскольку выявляет наличие морфологических изменений в мозге по несоответствию норме полученных геометрических размеров как самого мозга, так и его отделов, что требует дополнительных исследований и снижает его достоверность. Кроме того, этот способ диагностики фетального алкогольного синдрома неприменим в судебно-медицинской экспертизе для диагностики умерших детей.The disadvantage of this method is that it does not allow to diagnose fetal alcohol syndrome by specific morphological changes in the brain substance, since it reveals the presence of morphological changes in the brain by the discrepancy between the norm of the obtained geometric dimensions of both the brain itself and its departments, which requires additional studies and reduces its reliability. In addition, this method for the diagnosis of fetal alcohol syndrome is not applicable in the forensic examination for the diagnosis of deceased children.
Наиболее близким к предлагаемому является способ постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у детей раннего возраста, в соответствии с которым анализируют дисморфизм лицевого черепа, а именно выявляют наличие лицевых отклонений, по сравнению с нормой: сглаженный носогубный желобок, тонкая кайма верхней губы и короткие глазные щели (Малахова Жанна Леонидовна, Екатеринбург, доктор медицинских наук, ВАК РФ 14.01.08., автореферат диссертации по медицине на тему «Клинико-патогенетические основы фетального алкогольного синдрома у детей раннего возраста»).Closest to the proposed is a method of postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in young children, according to which the facial skull dysmorphism is analyzed, namely, the presence of facial deviations is detected, compared with the norm: a smooth nasolabial groove, a thin border of the upper lip and short eye slots ( Malakhova Zhanna Leonidovna, Yekaterinburg, Doctor of Medical Sciences, Higher Attestation Commission of the Russian Federation 01/14/08., Abstract of a dissertation in medicine on the topic "Clinical and pathogenetic bases of fetal alcohol syndrome and in young children. ”)
Недостаток известного способа состоит в том, что у ребенка, погибшего в результате криминальных событий, может быть повреждено лицо, что при экспертном отождествлении личности умершего ребенка не позволяет достоверно подтвердить диагноз фетального алкогольного синдрома.The disadvantage of this method is that in a child who died as a result of criminal events, a person may be injured, which, with expert identification of the deceased child, does not allow reliable confirmation of the diagnosis of fetal alcohol syndrome.
Предлагаемое изобретение решает задачу создания способа постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у умерших детей раннего возраста, осуществление которого позволяет достичь технического результата, заключающегося в повышении достоверности и в расширении арсенала средств судебно-медицинской экспертизы для постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у умерших детей раннего возраста.The present invention solves the problem of creating a method for postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in deceased young children, the implementation of which allows to achieve a technical result, which consists in increasing the reliability and expanding the arsenal of forensic tools for postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in deceased young children.
Сущность изобретения заключается в том, что в заявленном способе постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у умерших детей раннего возраста новым является то, что берут головной мозг умершего ребенка, взвешивают и фиксируют массу головного мозга, затем выявляют морфологические изменения в головном мозге, для чего вырезают блоки мозгового вещества из конвекситальной коры сенсомоторной зоны, гипоталамической области и мозжечка, затем вырезанные блоки головного мозга фиксируют в 5% нейтральный формалин в объемном соотношении не менее 1:10, для выполнения исследования блок головного мозга вынимают из формалина, обезвоживают, заливают парафином, после чего выполняют срезы, которые окрашивают соответственно гематоксилином-эозином, по Ван Гизону, по Нисслю, затем каждый окрашенный срез исследуют светооптической микроскопией, по результатам исследований диагностируют фетальный алкогольный синдром при наличии совокупности следующих морфологических изменений головного мозга: в мозговом веществе из конвекситальной коры сенсомоторной зоны имеются участки разряжения в средних слоях, хроматолиз цитоплазмы нервных клеток и пикнотические изменения, в мозговом веществе гипоталамической области имеются хроматолиз нервных клеток в форме маргинации ниссленсской субстанции, перицеллюлярный отек, в мозговом веществе мозжечка имеются разряжение клеток, дистрофические изменения клеток Пуркинье, при этом фиксированная масса мозга ниже минимально допустимой для нормально развитого ребенка аналогичного возраста.The essence of the invention lies in the fact that in the claimed method of postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in deceased young children, the new thing is that they take the brain of a deceased child, weigh and fix the mass of the brain, then reveal morphological changes in the brain, for which blocks are cut out medulla from the convexital cortex of the sensorimotor zone, hypothalamic region and cerebellum, then the cut out brain blocks fix in 5% neutral formalin in volume ratio at least 1:10, to carry out the study, the brain block is removed from formalin, dehydrated, embedded in paraffin, and then sections are performed that are stained with hematoxylin-eosin, according to Van Gieson and Nissl, then each stained section is examined by optical microscopy, the results of the studies diagnose fetal alcohol syndrome in the presence of a combination of the following morphological changes in the brain: there are areas in the brain substance from the convexital cortex of the sensorimotor zone voltages in the middle layers, chromatolysis of the cytoplasm of nerve cells and pycnotic changes, in the brain substance of the hypothalamic region there are chromatolysis of nerve cells in the form of marginalization of Nisslens substance, pericellular edema, in the cerebral substance of the cerebellum there is a discharge of cells, dystrophic changes in Purkinje cells, while the fixed brain mass is lower minimum acceptable for a normally developed child of a similar age.
Технический результат достигается следующим образом.The technical result is achieved as follows.
Как указывалось выше, по клиническим проявлениям все симптомы ФАС делят на 3 основные группы: нарушения физического развития; дисморфизм лицевого черепа; отклонения со стороны ЦНС.As mentioned above, according to the clinical manifestations, all the symptoms of FAS are divided into 3 main groups: physical development disorders; facial skull dysmorphism; deviations from the central nervous system.
Из литературы известно, что повреждающее действие этанола на органном уровне выражается, прежде всего, отклонениями со стороны мозга. При этом одним из основных по частоте встречаемости (94%) краниоцеребральных морфологических изменений является микроцефалия (Диагностические подходы к выявлению фетального алкогольного синдрома (ФАС) и его отсроченных проявлений у детей раннего возраста (Методические рекомендации) / Шилко В.И., Малахова Ж.Л., Бубнов А.А. // Екатеринбург, 2010 - 18 с.).From the literature it is known that the damaging effect of ethanol at the organ level is expressed primarily by deviations from the brain. At the same time, one of the main craniocerebral morphological changes in frequency (94%) is microcephaly (Diagnostic approaches to detect fetal alcohol syndrome (FAS) and its delayed manifestations in young children (Methodical recommendations) / Shilko V.I., Malakhova Zh. L., Bubnov A.A. // Ekaterinburg, 2010 - 18 p.).
Размер окружности головы, косвенно характеризующий объемные размеры мозгового черепа, тесно связан с размерами головного мозга. В литературе имеются указания на четкую связь снижения интеллекта со снижением размеров окружности головы (Тиганов А.С., Снежневская А.В., Орловская Д.Д. и др. "Руководство по психиатрии", том 2, изд-во - Медицина, 1999 г., 784 с.).The size of the head circumference, which indirectly characterizes the volumetric dimensions of the brain skull, is closely related to the size of the brain. In the literature there are indications of a clear connection between a decrease in intelligence and a decrease in the size of the head circumference (Tiganov A.S., Snezhnevskaya A.V., Orlovskaya D.D. et al. "Guide to Psychiatry", Volume 2, publishing house - Medicine, 1999, 784 p.).
В заявленном способе головной мозг погибшего ребенка взвешивают и фиксируют его массу. При этом ФАС диагностируют по совокупности признаков, один из которых - это «величина фиксированной массы головного мозга ниже минимально допустимой для нормально развитого ребенка аналогичного возраста»: Таким образом, в заявленном способе опосредованно диагностируют наличие микроцефалии, что повышает достоверность заявленного способа.In the inventive method, the brain of a dead child is weighed and its mass is recorded. At the same time, FAS is diagnosed by a combination of symptoms, one of which is “the value of the fixed mass of the brain is below the minimum acceptable for a normally developed child of a similar age”: Thus, in the claimed method, the presence of microcephaly is indirectly diagnosed, which increases the reliability of the claimed method.
Кроме того, для диагностировании ФАС в заявленном способе выявляют морфологические изменения в головном мозге ребенка и, если в мозговом веществе из конвекситальной коры сенсомоторной зоны имеются участки разряжения в средних слоях, хроматолиз цитоплазмы нервных клеток и пикнотические изменения, в мозговом веществе гипоталамической области имеются хроматолиз нервных клеток в форме маргинации ниссленсской субстанции, перицеллюлярный отек, в мозговом веществе мозжечка имеются разряжение клеток, дистрофические изменения клеток Пуркинье, при этом фиксированная масса головного мозга ниже минимально допустимой для нормально развитого ребенка аналогичного возраста, то диагностируют ФАС.In addition, for the diagnosis of FAS in the claimed method, morphological changes in the brain of a child are detected and, if the brain substance from the convexital cortex of the sensorimotor zone has rarefaction areas in the middle layers, chromatolysis of the cytoplasm of nerve cells and pyknotic changes, the brain substance of the hypothalamic region contains chromatolysis of nerve cells in the form of marginalization of Nisslens substance, pericellular edema, in the cerebellar medulla there is a discharge of cells, dystrophic changes in Purki cells rd, with a fixed mass of the brain below the minimum allowable for the normal development of a child of a similar age, diagnosed with the FAS.
Ранее в судебно-медицинской экспертизе не диагностировали ФАС по морфологическим изменениям в головном мозге умершего ребенка. Авторами заявленного способа впервые предложена и выполнена диагностика ФАС по морфологическим изменениям в головном мозге умершего ребенка.Earlier in the forensic examination, FAS was not diagnosed by morphological changes in the brain of a deceased child. The authors of the claimed method for the first time proposed and performed the diagnosis of FAS by morphological changes in the brain of a deceased child.
Совокупность заявленных в формуле изобретения морфологических изменений головного мозга умершего ребенка, диагностирующая ФАС, является оптимальной и получена в результате набора статистических данных.The totality of the claimed in the claims morphological changes in the brain of a deceased child diagnosing FAS is optimal and is obtained as a result of a set of statistical data.
Кроме того, благодаря тому что в качестве исследуемых областей мозга берут конвекситальную кору сенсомоторной зоны, гипоталамическую область и мозжечок, обеспечивается высокая достоверность результатов исследований. Это объясняется следующим. Известно, что алкоголь больше накапливается и проявляет свое токсическое действие в тех местах организма, где лучше кровоснабжение. Исследуемые в заявленном способе области головного мозга имеют кровоснабжение, лучшее, по сравнению с остальными областями головного мозга. Это подтверждает и характер изменений в этих участках мозга, обуславливающих диагностику ФАС. Наличие в мозговом веществе из конвекситальной коры сенсомоторной зоны участков разряжения в средних слоях, хроматолиз цитоплазмы нервных клеток и пикнотические изменения, наличие в мозговом веществе гипоталамической области хроматолиза нервных клеток в форме маргинации ниссленсской субстанции, перицеллюлярного отека, наличие в мозговом веществе мозжечка разряжения клеток, дистрофические изменения клеток Пуркинье - все это в совокупности свидетельствует о гибели нейронов из-за токсического действия алкоголя. Авторами получены данные, что количество нейронов уменьшается в 2 раза.In addition, due to the fact that the convexital cortex of the sensorimotor zone, hypothalamic region and cerebellum are taken as the studied areas of the brain, high reliability of the research results is provided. This is explained by the following. It is known that alcohol accumulates more and exerts its toxic effect in those places of the body where blood supply is better. The areas of the brain studied in the claimed method have a blood supply better than other areas of the brain. This also confirms the nature of the changes in these parts of the brain that determine the diagnosis of FAS. The presence in the brain substance from the convexital cortex of the sensorimotor zone of rarefied areas in the middle layers, the chromatolysis of cytoplasm of nerve cells and pyknotic changes, the presence in the brain of the hypothalamic region of chromatolysis of nerve cells in the form of marginalization of Nisslens substance, pericellular edema, the presence of cerebellar distension in the brain, changes in Purkinje cells - all this together indicates the death of neurons due to the toxic effect of alcohol. The authors obtained data that the number of neurons decreases by 2 times.
Вырезанные блоки головного мозга фиксируют в 5% нейтральный формалин в объемном соотношении не менее 1:10.Cut brain blocks fix in 5% neutral formalin in a volume ratio of at least 1:10.
Живые ткани, извлеченные из тела, подвергаются быстрым изменениям; между тем любое самое незначительное изменение ткани ведет к искажению картины на гистологическом препарате. Поэтому очень важно сразу же после извлечения ткани из организма обеспечить ее сохранность (http://intranet.tdmu.tdu… «Лекция №2 Методы биологических (гистологических) исследований). Это достигается с помощью фиксаторов - жидкостей различного химического состава, которые очень быстро убивают клетки, не искажая детали их строения и обеспечивая сохранение ткани в этом - фиксированном - состоянии. Фиксация сохраняет структуру клеток, тканей и органов, предотвращает их бактериальное загрязнение и ферментное переваривание, стабилизирует макромолекулы путем химического их сшивания.Living tissue extracted from the body undergoes rapid changes; meanwhile, any very slight change in tissue leads to a distortion of the picture on the histological specimen. Therefore, it is very important immediately after tissue extraction from the body to ensure its safety (http: //intranet.tdmu.tdu... "Lecture No. 2 Methods of biological (histological) studies). This is achieved with the help of fixatives - liquids of various chemical composition, which kill cells very quickly, without distorting the details of their structure and ensuring tissue preservation in this - fixed - state. Fixation preserves the structure of cells, tissues and organs, prevents bacterial contamination and enzymatic digestion, and stabilizes macromolecules by chemically cross-linking them.
В заявленном способе в качестве фиксатора тканей мозга используют формалин, для чего вырезанные блоки головного мозга фиксируют в 5% нейтральный формалин в объемном соотношении не менее 1:10.In the claimed method, formalin is used as a fixative of brain tissues, for which cut out brain blocks fix neutral formalin in 5% in a volume ratio of at least 1:10.
Объемное соотношение между фиксируемой тканью головного мозга и формалином является оптимальным и получено авторами опытным путем.The volume ratio between the fixed tissue of the brain and formalin is optimal and was obtained experimentally by the authors.
В заявленном способе для выполнения исследования блок головного мозга вынимают из формалина и заливают парафином. Это необходимая операция, предваряющая приготовление срезов. Заливка парафином делает исследуемую ткань прочной, предотвращает ее раздавливание и сминание при резании, дает возможность получить тонкие срезы стандартной толщины (http://intranet.tdmu.tdu… «Лекция №2 Методы биологических (гистологических) исследований). Это, в свою очередь, обеспечивает осуществимость заявленного способа и повышает достоверность результатов исследований.In the claimed method for carrying out the study, the brain block is removed from formalin and embedded in paraffin. This is a necessary operation, preceding the preparation of slices. Paraffin filling makes the test tissue strong, prevents crushing and creasing during cutting, and makes it possible to obtain thin sections of standard thickness (http: //intranet.tdmu.tdu ... "Lecture No. 2 Methods of biological (histological) studies). This, in turn, ensures the feasibility of the claimed method and increases the reliability of the research results.
Обезвоживание исследуемой ткани перед заливкой формалином готовит фиксированную ткань к проникновению в нее среды для заливки, в нашем случае - парафина, что впоследствии улучшает качество среза.Dehydration of the test tissue before pouring formalin prepares the fixed tissue for penetration of the medium for pouring into it, in our case, paraffin, which subsequently improves the quality of the cut.
В заявленном способе каждый окрашенный срез головного мозга исследуют светооптической микроскопией.In the claimed method, each stained section of the brain is examined by light-optical microscopy.
Светооптическая микроскопия - это исследование с помощью микроскопа, оптического прибора, позволяющего наблюдать мелкие объекты. Увеличение изображения достигается системой линз объектива и окуляра. Зеркало, конденсор и диафрагма направляют световой поток и регулируют освещение объекта. Использование в заявленном способе для диагностики ФАС светооптической микроскопии обеспечивает осуществимость заявленного способа, а следовательно, обеспечивает достижение заявленного технического результата.Light-optical microscopy is a study using a microscope, an optical device that allows you to observe small objects. Image magnification is achieved by the lens system of the lens and eyepiece. A mirror, a condenser and a diaphragm direct the light flux and regulate the illumination of the object. The use of the claimed method for the diagnosis of FAS light-optical microscopy ensures the feasibility of the claimed method, and therefore, ensures the achievement of the claimed technical result.
Окрашивание исследуемых срезов тканей мозга обеспечивает более отчетливое выявление различных компонентов клеток и тканей. В заявленном способе при выполнении светооптической микроскопии используют стандартную смесь щелочного и кислотного красителей: гематоксилин и эозин. (http://intranet.tdmu.tdu… «Лекция №2 Методы биологических (гистологических) исследований»; «Общие принципы и методы окрашивания гистологических препаратов» (Микроскопическая техника: Руководство / Под редакцией Д.С. Саркисова и Ю.Л. Перова. - М.: Медицина, 1996. ISBN 5-225-02-820-9).Staining of the studied sections of brain tissue provides a more distinct identification of various components of cells and tissues. In the inventive method, when performing light optical microscopy, a standard mixture of alkaline and acid dyes is used: hematoxylin and eosin. (http: //intranet.tdmu.tdu... "Lecture No. 2 Methods of biological (histological) studies"; "General principles and methods of staining of histological preparations" (Microscopic technique: Manual / Edited by D.S. Sarkisov and Yu.L. Perova. - M.: Medicine, 1996. ISBN 5-225-02-820-9).
Щелочные красители, в нашем случае гематоксилин, связываются с базофильными (кислыми) компонентами ткани (например, нуклеиновые кислоты ядра и рибосом).Alkaline dyes, in our case hematoxylin, bind to the basophilic (acidic) components of the tissue (for example, nucleic acids of the nucleus and ribosomes).
Гематоксилин имеет растительное происхождение: его получают из эфирного экстракта кампешевого дерева. Гематоксилин хорошо растворяется в спирте и плохо в воде. Красящими свойствами обладает продукт окисления гематоксилина - гематеин.Hematoxylin is of plant origin: it is obtained from the ether extract of the campus tree. Hematoxylin is highly soluble in alcohol and poorly in water. The hematoxylin oxidation product hematein has coloring properties.
Кислотные красители, в нашем случае - эозин, связываются со структурами или веществами, имеющими щелочную реакцию. Это ацидофильные (основные) компоненты ткани. С помощью кислотных красителей выявляют вещества и структуры основной природы (цитоплазматические структуры клеток, эритроциты и т.д.).Acid dyes, in our case, eosin, bind to structures or substances that have an alkaline reaction. These are acidophilic (main) tissue components. Using acid dyes, substances and structures of a basic nature are revealed (cytoplasmic cell structures, red blood cells, etc.).
Эозин - ксантеновый краситель, растворимый в воде, получают действием брома на флуоресцеин. Интенсивно-розового цвета. Имеет широкое применение в гистологии и цитологии как контрастирующий цитоплазматический краситель. Чаще всего в сочетании с ядерными красителями, например эозин-гематоксилин. Окраска гематоксилин-эозином является основной обзорной окраской гистологических и цитологических препаратов (ИНТЕРНЕТ. ВИКИПЕДИЯ).Eosin, a water-soluble xanthene dye, is produced by the action of bromine on fluorescein. Intense pink color. It is widely used in histology and cytology as a contrasting cytoplasmic dye. Most often in combination with nuclear dyes, such as eosin-hematoxylin. Hematoxylin-eosin staining is the main observational staining of histological and cytological preparations (INTERNET. WIKIPEDIA).
Кроме того, в заявленном способе используют окраску по Ван Гизону - метод окраски микропрепаратов в гистологии, предназначенный для изучения структуры соединительной ткани. Красителем служит смесь кислого фуксина и пикриновой кислоты, причем первый компонент окрашивает коллагеновые волокна в ярко-красный цвет, а второй придает прочим структурам ткани желтую окраску. Окраска разработана американским психоневрологом и патологом Айрой Ван Гизоном в 1889 году (ИНТЕРНЕТ, ВИКИПЕДИЯ).In addition, the claimed method uses Van Gieson staining - a method of staining micropreparations in histology, designed to study the structure of connective tissue. A dye is a mixture of acid fuchsin and picric acid, the first component dyes collagen fibers in a bright red color, and the second gives other tissue structures a yellow color. The coloring was developed by American psychoneurologist and pathologist Ira Van Gieson in 1889 (INTERNET, WIKIPEDIA).
Окраска по методу Ниссля является общеизвестной нейрогистологической методикой, позволяющей выявлять ядра нервных и глиальных клеток, а также хроматофильную субстанцию (субстанцию Ниссля, тигроидное вещество) в цитоплазме нейронов (http://www.histomix.ru/product_15.html).Nissl staining is a well-known neurohistological technique that allows the detection of nuclei of nerve and glial cells, as well as a chromatophilic substance (Nissl substance, tigroid substance) in the cytoplasm of neurons (http://www.histomix.ru/product_15.html).
Из вышеизложенного следует, что в заявленном способе исследуемые срезы каждого из блоков головного мозга окрашивают гематоксилином-эозином, по Ван Гизону, по Нисслю. При этом на конкретное окрашивание реагируют конкретные составляющие исследуемой ткани, а именно базофильные компоненты ткани, ацидофильные компоненты ткани, ядра нервных и глиальных клеток, а также хроматофильная субстанция (субстанцию Ниссля, тигроидное вещество) в цитоплазме нейронов, структура соединительной ткани. В результате посредством выполнения светооптической микроскопии каждого соответственно окрашенного среза исследуемого блока мозга обеспечивается возможность получения широкого спектра информации и с высокой достоверностью о состоянии тканей мозга, а именно состояния мозгового вещества из конвекситальной коры сенсомоторной зоны, гипоталамической области и мозжечка. Это позволяет достоверно выявить наличие морфологических изменений в исследуемых областях головного мозга и достоверно их охарактеризовать, что повышает достоверность диагностики ФАС.From the foregoing, it follows that in the claimed method, the studied sections of each of the brain blocks are stained with hematoxylin-eosin, according to Van Gieson, according to Nissl. In this case, specific components of the tissue under study react to specific staining, namely basophilic tissue components, acidophilic tissue components, nuclei of nerve and glial cells, as well as a chromatophilic substance (Nissl substance, tigroid substance) in the cytoplasm of neurons, the structure of connective tissue. As a result, by performing light-optical microscopy of each correspondingly stained section of the studied brain block, it is possible to obtain a wide range of information and with high reliability about the state of brain tissue, namely, the state of the brain substance from the convexital cortex of the sensorimotor zone, hypothalamic region and cerebellum. This allows you to reliably identify the presence of morphological changes in the studied areas of the brain and reliably characterize them, which increases the reliability of the diagnosis of FAS.
Таким образом, из вышеизложенного следует, что заявленный способ постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у умерших детей раннего возраста при осуществлении обеспечивает достижение технического результата, заключающегося в повышении достоверности и в расширении арсенала средств судебно-медицинской экспертизы для постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у умерших детей раннего возраста.Thus, from the foregoing, it follows that the claimed method of postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in deceased young children during implementation provides a technical result consisting in increasing the reliability and expanding the arsenal of forensic medical examination tools for postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in deceased early children age.
На фиг.1 изображен срез конвекситальной коры сенсомоторной зоны головного мозга; на фиг.2 - срез гипоталамической области головного мозга; на фиг.3 - срез мозжечка.Figure 1 shows a section of the convexital cortex of the sensorimotor zone of the brain; figure 2 is a slice of the hypothalamic region of the brain; figure 3 is a section of the cerebellum.
Заявленный способ постнатальной диагностики фетального алкогольного синдрома у умерших детей раннего возраста выполняют следующим образом. Берут головной мозг умершего ребенка, взвешивают и фиксируют массу головного мозга. Затем выявляют морфологические изменения в головном мозге. Для этого вырезают блоки мозгового вещества из конвекситальной коры сенсомоторной зоны, гипоталамической области и мозжечка. Вырезанные блоки головного мозга фиксируют в 5% нейтральный формалин в объемном соотношении не менее 1:10. Для выполнения исследования блок головного мозга вынимают из формалина, обезвоживают, заливают парафином, после чего выполняют несколько срезов. Срезы окрашивают соответственно гематоксилином-эозином, по Ван Гизону, по Нисслю. Каждый соответственно окрашенный срез исследуют светооптической микроскопией. По результатам исследований диагностируют фетальный алкогольный синдром при наличии совокупности следующих морфологических изменений головного мозга: в мозговом веществе из конвекситальной коры сенсомоторной зоны имеются участки разряжения в средних слоях, хроматолиз цитоплазмы нервных клеток и пикнотические изменения, в мозговом веществе гипоталамической области имеются хроматолиз нервных клеток в форме маргинации ниссленсской субстанции, перицеллюлярный отек, в мозговом веществе мозжечка имеются разряжение клеток, дистрофические изменения клеток Пуркинье, при этом фиксированная масса головного мозга ниже минимально допустимой для нормально развитого ребенка аналогичного возраста.The claimed method of postnatal diagnosis of fetal alcohol syndrome in deceased young children is as follows. Take the brain of a deceased child, weigh and fix the mass of the brain. Morphological changes in the brain are then revealed. For this, blocks of brain matter are cut out from the convexital cortex of the sensorimotor zone, hypothalamic region and cerebellum. Cut brain blocks fix in 5% neutral formalin in a volume ratio of at least 1:10. To perform the study, the brain block is removed from formalin, dehydrated, embedded in paraffin, and then several sections are performed. Sections are stained with hematoxylin-eosin respectively, according to Van Gieson, according to Nissl. Each correspondingly stained section is examined by light-optical microscopy. According to the results of studies, fetal alcohol syndrome is diagnosed in the presence of a combination of the following morphological changes in the brain: in the brain substance from the convexital cortex of the sensorimotor zone there are discharge sections in the middle layers, chromatolysis of the cytoplasm of nerve cells and pyknotic changes, in the brain substance of the hypothalamic region there are chromatolysis of nerve cells in the form marginalization of Nisslens substance, pericellular edema, in the medulla of the cerebellum there is a discharge of cells, dystrophic Kie changes in Purkinje cells, with fixed brain mass below the minimum allowable for the normal development of a child of similar age.
Количество срезов мозгового вещества с каждого блока соответствует количеству используемых окрашиваемых веществ. В нашем случае - не менее трех срезов с каждого блока. Срезы парафиновых блоков с заключенной в них тканью помещают на предметное стекло. Далее удаляют парафин, помещая стекла со срезами в ксилол. Затем выполняют световую микроскопию http://intranet.tdmu.tdu… «Лекция №2 Методы биологических (гистологических) исследований).The number of sections of the brain substance from each block corresponds to the number of stained substances used. In our case, at least three slices from each block. Slices of paraffin blocks with the tissue enclosed in them are placed on a glass slide. Next, paraffin is removed by placing sliced glass in xylene. Then perform light microscopy http: //intranet.tdmu.tdu... "Lecture No. 2 Methods of biological (histological) studies).
Для выполнения заявленного способа использовали электронный микроскоп ШМ-200СХ при ускоряющем напряжении 80 киловольт.To perform the claimed method used an electron microscope ШМ-200СХ with an accelerating voltage of 80 kilovolts.
Пример. Клинико-паталогоанатомический случай (ГБУЗ СО ГО Судебно-медицинской экспертизы летального случая ребенка с ФАС; Акт судебно-медицинского исследования №5479 от 19.09.2011 г, рис.5.10-5.12).Example. Clinical and pathoanatomical case (GBUZ SB GO Forensic medical examination of a fatal case of a child with FAS; Act of the forensic medical study No. 5447 of 09/19/2011, Fig. 5.10-5.12).
Ребенок П., дата рождения - 20.07.2011; возраст 2 месяца; ребенок от V беременности, протекавшей на фоне угрозы прерывания, гестоза, привычной алкогольной интоксикации. Роды II срочные, самостоятельные.Child P., date of birth - 07.20.2011; age 2 months; a child from V pregnancy, proceeding against the background of the threat of termination, gestosis, habitual alcohol intoxication. Childbirth II urgent, independent.
На момент смерти: масса ребенка - 4216 г, масса мозга - 481 г. Масса здорового ребенка в 2 месяца должна составлять 5052 г, т.е. у погибшего ребенка гипотрофия.At the time of death: the mass of the child is 4216 g, the mass of the brain is 481 g. The mass of a healthy child in 2 months should be 5052 g, i.e. the deceased child has malnutrition.
Вес мозга у детей в 2 месяца должен составлять 1/8-1/9 от веса ребенка, т.е. для здорового ребенка от 561,3 до 631,5 г.The brain weight in children at 2 months should be 1 / 8-1 / 9 of the weight of the child, i.e. for a healthy child from 561.3 to 631.5 g.
У погибшего ребенка верхняя граница массы мозга составляет 527 г, что значительно ниже нормы. Это же подтверждает и размер окружности головы, косвенно характеризующий объемные размеры мозгового черепа, поскольку у ребенка имеется внешний признак ФАС-микроцефалия. Описание снимков мозга погибшего ребенка: фиг.1, фиг.2, фиг.3.In a dead child, the upper limit of brain mass is 527 g, which is significantly lower than normal. This is also confirmed by the size of the head circumference, which indirectly characterizes the volumetric dimensions of the brain skull, since the child has an external sign of FAS-microcephaly. Description of brain images of the deceased child: figure 1, figure 2, figure 3.
На фиг.1 (конвекситальная кора сенсомоторной зоны) отмечаются участки разряжения в средних слоях, хроматолиз цитоплазмы нервных клеток и пикнотические изменения. На фиг.2 (гипоталамическая область) отмечается хроматолиз нервных клеток в форме маргинации ниссленсской субстанции. Перицеллюлярный отек. На фиг.3 (мозжечок) отмечается разряжение клеток, дистрофические изменения клеток Пуркинье.In Fig. 1 (convexital cortex of the sensorimotor zone), rarefaction areas in the middle layers, chromatolysis of the cytoplasm of nerve cells and pyknotic changes are noted. Figure 2 (hypothalamic region) shows chromatolysis of nerve cells in the form of marginalization of Nisslens substance. Pericellular edema. In Fig.3 (cerebellum) there is a discharge of cells, degenerative changes in Purkinje cells.
Авторами было выполнено сравнение морфологии головного мозга погибшего ребенка и детей, умерших от пневмонии, почечной недостаточности и т.п., но без диагноза ФАС. Совпадающих морфологических изменений в головном мозге детей без диагноза ФАС не обнаружено.The authors compared the morphology of the brain of the deceased child and children who died from pneumonia, renal failure, etc., but without a diagnosis of FAS. Concurrent morphological changes in the brain of children without a diagnosis of FAS were not detected.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013157488/15A RU2547568C1 (en) | 2013-12-24 | 2013-12-24 | Method of postnatal diagnostics of foetal alcohol syndrome in deceased young children |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013157488/15A RU2547568C1 (en) | 2013-12-24 | 2013-12-24 | Method of postnatal diagnostics of foetal alcohol syndrome in deceased young children |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2547568C1 true RU2547568C1 (en) | 2015-04-10 |
Family
ID=53296390
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013157488/15A RU2547568C1 (en) | 2013-12-24 | 2013-12-24 | Method of postnatal diagnostics of foetal alcohol syndrome in deceased young children |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2547568C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050048660A1 (en) * | 2003-09-02 | 2005-03-03 | Case Western Reserve University | Biomarker of maternal alcohol use during pregnancy |
| US20060084134A1 (en) * | 2004-06-10 | 2006-04-20 | Wurst Friedrich M | Direct ethanol metabolite ethyl sulfate as an useful diagnostic and therapeutic marker of alcohol consumption |
-
2013
- 2013-12-24 RU RU2013157488/15A patent/RU2547568C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050048660A1 (en) * | 2003-09-02 | 2005-03-03 | Case Western Reserve University | Biomarker of maternal alcohol use during pregnancy |
| US20060084134A1 (en) * | 2004-06-10 | 2006-04-20 | Wurst Friedrich M | Direct ethanol metabolite ethyl sulfate as an useful diagnostic and therapeutic marker of alcohol consumption |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| МАЛАХОВА Ж.Л., "Клинико-патогенетические основы фетального алкогольного синдрома у детей раннего возраста" автореферат диссертации " докт. мед. наук, Екатеринбург, 2012, c.6. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI753448B (en) | Method for analyzing tissue specimens | |
| EP3292406B1 (en) | Interferometric system and method for use with biological cells and organisms including sperm | |
| US20160077007A1 (en) | System and method for controlling depth of imaging in tissues using fluorescence microscopy under ultraviolet excitation following staining with fluorescing agents | |
| Najari et al. | Pilot study of the correlation of multiphoton tomography of ex vivo human testis with histology | |
| WO2005080944A1 (en) | Analysis of cell morphology and motility | |
| Wurbs et al. | A human ex vivo skin model breaking boundaries | |
| RU2623141C1 (en) | Method for determination of biological age of dead body | |
| Wang et al. | Optical visualization of cerebral cortex by label-free multiphoton microscopy | |
| Klapczynski et al. | Computer-assisted imaging algorithms facilitate histomorphometric quantification of kidney damage in rodent renal failure models | |
| RU2547568C1 (en) | Method of postnatal diagnostics of foetal alcohol syndrome in deceased young children | |
| Tan et al. | Research Techniques Made Simple: Optical Clearing and Three-Dimensional Volumetric Imaging of Skin Biopsies | |
| Liang et al. | CUBIC protocol visualizes protein expression at single cell resolution in whole mount skin preparations | |
| Kiseleva et al. | Time-related ex vivo changes in the optical properties of normal brain tissues | |
| Cunquero et al. | Hippocampal neuronal cultures to detect and study new pathogenic antibodies involved in autoimmune encephalitis | |
| JP7395636B2 (en) | Skin sagging improving agent and its screening method | |
| Geuna et al. | Morpho-quantitative stereological analysis of peripheral and optic nerve fibers | |
| Fung et al. | Label-Free Optical Biopsy Reveals Biomolecular and Morphological Features of Diabetic Kidney Tissue in 2D and 3D | |
| Swiderska-Chadaj et al. | Automatic quantification of vessels in hemorrhoids whole slide images | |
| US12152969B2 (en) | Method for preparation of tissue sections | |
| RU2801049C1 (en) | Method of establishing the age of an unknown person during a forensic medical examination | |
| Lin et al. | Light-sheet microscopy for quantitative ovarian folliculometry | |
| Keegan et al. | Validating the measurement of red blood cell diameter in fresh capillary blood by darkfield microscopy: A pilot study | |
| RU2645201C2 (en) | Method for postmortal determination of life period availability after initiation of myocardial infarction that lead to death, in persons of senior age | |
| Reuss et al. | aDISCO: A Broadly Applicable Method for 3D Microscopy of Archival Paraffin-Embedded Human Tissues | |
| Elfer et al. | Comparison of Monochrome versus Dual-Color Images in Fluorescence Histology on Prostate and Kidney Specimens |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20151225 |