RU2545689C2 - Method for preparing injectable dosage form of high-purity drug preparation for treating degenerative diseases of locomotor apparatus - Google Patents
Method for preparing injectable dosage form of high-purity drug preparation for treating degenerative diseases of locomotor apparatus Download PDFInfo
- Publication number
- RU2545689C2 RU2545689C2 RU2013119070/15A RU2013119070A RU2545689C2 RU 2545689 C2 RU2545689 C2 RU 2545689C2 RU 2013119070/15 A RU2013119070/15 A RU 2013119070/15A RU 2013119070 A RU2013119070 A RU 2013119070A RU 2545689 C2 RU2545689 C2 RU 2545689C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- chondroitin sulfate
- solution
- cholesterol
- proline
- amino acid
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 58
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 43
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 40
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 title claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 12
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 title description 2
- 230000003137 locomotive effect Effects 0.000 title 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 40
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims abstract description 40
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 claims abstract description 34
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 claims abstract description 31
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 70
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 42
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 claims description 31
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 17
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 15
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 15
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 15
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 claims description 5
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 43
- 230000003011 chondroprotective effect Effects 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract 1
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 151
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 76
- 239000000047 product Substances 0.000 description 25
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 18
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 17
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 15
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 13
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 12
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 8
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 8
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 6
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 5
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920002567 Chondroitin Polymers 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 4
- DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N chondroitin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@H](O)C=C(C(O)=O)O1 DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000009859 Osteochondrosis Diseases 0.000 description 3
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 3
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 3
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 3
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N formaldehyde Natural products O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- NUJOXMJBOLGQSY-UHFFFAOYSA-N manganese dioxide Chemical compound O=[Mn]=O NUJOXMJBOLGQSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- JYLNVJYYQQXNEK-UHFFFAOYSA-N 3-amino-2-(4-chlorophenyl)-1-propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC(CN)C1=CC=C(Cl)C=C1 JYLNVJYYQQXNEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016284 Aggrecans Human genes 0.000 description 1
- 108010067219 Aggrecans Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241001262617 Japonica Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001136397 Lophiomus setigerus Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000055008 Matrilin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010072582 Matrilin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- 206010041591 Spinal osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005411 Van der Waals force Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003356 anti-rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001510 arthropathic effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229940023913 cation exchange resins Drugs 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 229940006423 chondroitin sulfate sodium Drugs 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 description 1
- 238000011118 depth filtration Methods 0.000 description 1
- 238000011082 depyrogenation Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWHLPLXXIDYSNW-UHFFFAOYSA-N ketorolac tromethamine Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OC(=O)C1CCN2C1=CC=C2C(=O)C1=CC=CC=C1 BWHLPLXXIDYSNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 150000002902 organometallic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000004313 potentiometry Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 1
- 208000005801 spondylosis Diseases 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002437 synoviocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 125000003508 trans-4-hydroxy-L-proline group Chemical group 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 235000013522 vodka Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения высокоочищенного лекарственного средства для лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний периферических синовиальных суставов и позвоночника.The invention relates to the pharmaceutical industry and relates to a method for producing a highly purified drug for the treatment of degenerative degenerative diseases of the peripheral synovial joints and spine.
Дегенеративные заболевания периферических синовиальных суставов (остеоартрозы) и позвоночника (межпозвонковый остеохондроз, спондилоз, спондилоартроз) составляют более 75% всех заболеваний костно-мышечной системы [1, 2, 3, 4].Degenerative diseases of the peripheral synovial joints (osteoarthritis) and the spine (intervertebral osteochondrosis, spondylosis, spondylarthrosis) account for more than 75% of all diseases of the musculoskeletal system [1, 2, 3, 4].
По данным Всемирной организации здравоохранения, остеохондрозом позвоночника страдает от 30 до 87% наиболее трудоспособного населения в возрасте от 30 до 60 лет. На долю остеохондроза позвоночника приходится от 20 до 80% случаев временной нетрудоспособности населения [4, 5]. Дегенеративно-дистрофическими поражениями периферических суставов в России страдают около 15 млн. человек, что составляет 10-12% населения, причем, по данным официальной статистики РФ, распространенность этого заболевания за последние годы возросла на 35% [1]. Высокая распространенность дегенеративных заболеваний суставов и позвоночника имеет огромное социально-экономическое значение, так как эти заболевания характеризуются большой частотой развития инвалидности, а также связанным с этим снижением качества жизни пациентов.According to the World Health Organization, osteochondrosis of the spine affects from 30 to 87% of the most able-bodied population aged 30 to 60 years. Osteochondrosis of the spine accounts for 20 to 80% of cases of temporary disability of the population [4, 5]. About 15 million people suffer from degenerative-dystrophic lesions of peripheral joints in Russia, which is 10-12% of the population, and according to official statistics of the Russian Federation, the prevalence of this disease has increased by 35% in recent years [1]. The high prevalence of degenerative diseases of the joints and spine is of great socio-economic importance, as these diseases are characterized by a high incidence of disability, as well as a related decrease in the quality of life of patients.
В связи с этим, создание качественных, эффективных и безопасных лекарственных средств, претендующих называться «структурно-модифицирующими препаратами» - одна из важных задач современной отечественной фармацевтики. В мире проводятся многоплановые исследования по разработке эффективных средств для лечения и реабилитации больных с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями опорно-двигательного аппарата, усовершенствованию методологий промышленного производства препаратов данного ряда с целью улучшения качества продукции и др.In this regard, the creation of high-quality, effective and safe medicines that claim to be called “structurally modifying drugs” is one of the important tasks of modern domestic pharmaceuticals. The world is conducting multifaceted research on the development of effective drugs for the treatment and rehabilitation of patients with degenerative-dystrophic diseases of the musculoskeletal system, improvement of methodologies for the industrial production of drugs of this series in order to improve product quality, etc.
В 2003 г. EULAR (Европейская антиревматическая лига) опубликовала рекомендации по лечению остеоартритов суставов, в которые была включена группа хондропротекторов, называемых препаратами замедленного действия (SYSADOA - symptomatic slow acting drugs for osteoarthritis) [6]. В России хондропротективные препараты также применяют для лечения воспалительных и дегенеративных заболеваний суставов и позвоночника, наряду с нестероидными противовоспалительными препаратами и глюкокортикоидами [7-11].In 2003, the EULAR (European Anti-Rheumatic League) published guidelines for the treatment of joint osteoarthritis, which included a group of chondroprotectors called delayed-action drugs (SYSADOA - symptomatic slow acting drugs for osteoarthritis) [6]. In Russia, chondroprotective drugs are also used to treat inflammatory and degenerative diseases of the joints and spine, along with non-steroidal anti-inflammatory drugs and glucocorticoids [7-11].
Любые хондропротекторы, которые применяют для лечения заболеваний опорно-двигательного аппарата, производят из вытяжек хрящевой ткани разных животных: крупного рогатого скота (КРС), свиней, куриных, акульих хрящей, хрящей других гидробионтов методами, представляющими собой многостадийные процессы гидролиза, экстракции, осаждения, высушивания.Any chondroprotectors that are used to treat diseases of the musculoskeletal system are produced from extracts of the cartilage tissue of various animals: cattle (cattle), pigs, chicken, shark cartilage, cartilage of other hydrobionts using methods that are multi-stage processes of hydrolysis, extraction, deposition, drying.
Вариабельность технологий разных производителей хондропротективных препаратов приводит к значительным различиям состава продукта, количественного содержания основного вещества, содержания примесей, эффективности и безопасности конечного продукта [12-16]. У производителей могут меняться последовательность и количество операций, концентрации используемых реагентов, фермент-субстратные соотношения, температурные режимы и др. [17-21]. Согласно НД разных производителей, в субстанциях допускается высокое содержание животного белка (до 6% в пересчете на сухое вещество), бактериальных эндотоксинов (до 0,5 ЕЭ/мг), примесей белков и нуклеотидов (только один производитель «Лаборатория Деривати Органичи C.n.A.» (Италия) регламентирует их количественное содержание по показателям оптической плотности, перерасчет которых спектрофотометрическим методом позволяет получить показатель 0,678 мкг данных примесей на 1 мг основного вещества ХС), остаточное содержание липидов в субстанциях и готовом продукте никем не контролируется (Таблица 1). Вал субстанций разного качества привел к тому, что хондропротективные препараты содержат много примесей, которые не всегда контролируются, но могут оказывать побочное действие в виде аллергических и анафилактических реакций [22, 23]. Нестандартность качества используемых субстанций хондроитин сульфата (ХС) приводит к необходимости гармонизации их качества в соответствии с требованиями зарубежных фармакопей (монографии на хондроитинсульфат включены в ведущие зарубежные фармакопеи) [24-26].The variability of technologies of different manufacturers of chondroprotective drugs leads to significant differences in the composition of the product, the quantitative content of the main substance, the content of impurities, the effectiveness and safety of the final product [12-16]. The manufacturers can change the sequence and number of operations, the concentration of reagents used, the enzyme-substrate ratio, temperature conditions, etc. [17-21]. According to the regulatory documents of different manufacturers, a high content of animal protein (up to 6% in terms of dry matter), bacterial endotoxins (up to 0.5 EU / mg), protein and nucleotide impurities (only one manufacturer is Derivati Organichi CnA Laboratory ( Italy) regulates their quantitative content according to optical density indicators, the recalculation of which by spectrophotometric method allows to obtain an indicator of 0.678 μg of these impurities per 1 mg of the main substance cholesterol), the residual lipid content in substances and Started product nobody monitored (Table 1). A shaft of substances of different quality has led to the fact that chondroprotective drugs contain many impurities that are not always controlled, but can have side effects in the form of allergic and anaphylactic reactions [22, 23]. The non-standard quality of the used substances of chondroitin sulfate (cholesterol) leads to the need to harmonize their quality in accordance with the requirements of foreign pharmacopeias (monographs on chondroitin sulfate are included in leading foreign pharmacopeias) [24-26].
При проведении поиска высококачественного препарата ХС, отвечающего критериям, предъявляемым для лекарственных средств, и планируемого для использования в крупном рандомизированном контролируемом испытании GAIT, были проанализированы 20 коммерческих препаратов ХС [23, 27, 34]. При оценке качества и безопасности продуктов было установлено, что ассортиментный ряд продукции характеризовался нестандартностью по ряду показателей: чистоте препарата, содержанию активного вещества, наличию примесей белковой и липидной природы, микроэлементов, бактериальных эндотоксинов [23].When searching for a high-quality cholesterol drug that meets the criteria for medicines and planned for use in a large randomized controlled trial of GAIT, 20 commercial cholesterol drugs were analyzed [23, 27, 34]. When assessing the quality and safety of products, it was found that the assortment of products was non-standard for a number of indicators: the purity of the drug, the content of the active substance, the presence of protein and lipid impurities, trace elements, bacterial endotoxins [23].
На основании сравнительного анализа однокомпонентных и комбинированных хондропротективных препаратов отечественного и зарубежного производства, представленных на фармацевтическом рынке страны (Мукосат (ГУ «Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов», ОАО «Синтез», Россия), Румалон («Робафарм», Швейцария), Хондрогард («Сотекс», Россия), Артепарон («Луитпольд Верк», Германия), Мукартрин («Фармхимия», Болгария) и др., установлено, что производители лекарственных хондропротективных препаратов при изготовлении продукции не предусматривают в технологиях доочистку полупродуктов от примесей, вводят в состав препаратов различные химические вещества антибактериального действия - противомикробные консерванты в виде органических спиртов, кислот, фенола и его производных, металлоорганических и неорганических соединений и др. [28-31]. Известно, что в связи с увеличением частоты побочных реакций, регистрация некоторых ЛС, которые ранее считались «хондропротективными», была аннулирована. Так, в 1997 г. перестал применяться препарат Артепарон (Мукартрин), в 2000 г. прекращено использование препарата Румалон (гликозоаминогликан-пептидный комплекс). Причиной повсеместного прекращения использования этих инъекционных препаратов стали частые аллергические и анафилактические реакции, геморрагические осложнения вследствие их гепариноподобной структуры, болезненность инъекций и др. [23, 28, 30, 32-34]. В экспериментах на животных было показано, что препарат Артепарон в лечебных дозах обостряет течение экспериментального воспаления.Based on a comparative analysis of single-component and combined chondroprotective drugs of domestic and foreign production, presented on the pharmaceutical market of the country (Mukosat (State Institution “State Institute of Blood Substitutes and Medicines”, OJSC Sintez, Russia), Rumalon (Robafarm, Switzerland), Chondrogard (Sotex, Russia), Arteparon (Luitpold Verk, Germany), Mukartrin (Pharmhimiya, Bulgaria), etc., it was found that manufacturers of chondroprotective drugs in the manufacture of The technologies do not provide for the post-treatment of intermediate products from impurities in technologies, they introduce various chemical substances of antibacterial action — antimicrobial preservatives in the form of organic alcohols, acids, phenol and its derivatives, organometallic and inorganic compounds, etc. [28–31]. due to an increase in the frequency of adverse reactions, the registration of some drugs that were previously considered “chondroprotective” was canceled. So, in 1997, the drug Arteparon (Mukartrin) ceased to be used, in 2000, the use of the drug Rumalon (glycosaminoglycan-peptide complex) was discontinued. The reason for the widespread cessation of the use of these injectable drugs was frequent allergic and anaphylactic reactions, hemorrhagic complications due to their heparin-like structure, painful injections, etc. [23, 28, 30, 32-34]. In animal experiments, it was shown that the drug Arteparon in therapeutic doses exacerbates the course of experimental inflammation.
В связи с вышеизложенным, разработка технологии получения качественного высокоочищенного хондропротективного препарата, обладающего значительным потенциалом структурной модификации при дегенеративно-дистрофических заболеваниях опорно-двигательного аппарата, является актуальной задачей химико-фармацевтической промышленности.In connection with the foregoing, the development of a technology for the production of high-quality high-purity chondroprotective drug with significant potential for structural modification in degenerative diseases of the musculoskeletal system is an urgent task of the pharmaceutical industry.
Известно, что чаще всего технологии получения ХС включают стадии растворения хряща в щелочной среде, щелочного или ферментативного гидролиза, осаждения полисахаридных комплексов и высушивания полученного продукта [21, 35-43]. Получаемые методом щелочного и ферментативного гидролиза продукты нестандартны по составу, содержат балластные вещества и примеси различной природы [21]. Кроме того, существующие основные технологии получения ХС, предусматривающие переработку сырья методами щелочного и ферментативного гидролиза, несут следующие угрозы:It is known that most often technologies for producing cholesterol include the stages of dissolution of cartilage in an alkaline medium, alkaline or enzymatic hydrolysis, precipitation of polysaccharide complexes and drying of the resulting product [21, 35–43]. The products obtained by alkaline and enzymatic hydrolysis are non-standard in composition, contain ballast substances and impurities of various nature [21]. In addition, the existing basic technologies for the production of cholesterol, involving the processing of raw materials by alkaline and enzymatic hydrolysis, carry the following threats:
1. Повышенной цветности, которую удаляют не совсем безопасными способами за счет использования окислителей перекиси водорода или перманганата калия. Использование перекиси водорода [44] или насыщенного раствора перманганата калия [37, 45] приводит к дополнительным проблемам в виде появления продуктов перекисного окисления или остаточного содержания солей марганца (коагуляцию диоксида марганца осуществляют добавлением небезопасных реагентов - формальдегида или метанола) [46].1. High color, which is removed by not entirely safe methods through the use of oxidizing agents of hydrogen peroxide or potassium permanganate. The use of hydrogen peroxide [44] or a saturated solution of potassium permanganate [37, 45] leads to additional problems in the form of products of peroxidation or residual content of manganese salts (coagulation of manganese dioxide is carried out by adding unsafe reagents - formaldehyde or methanol) [46].
2. Пирогенности, для удаления которой используются заряженные модифицированные мембраны, имеющие положительный дзета-потенциал. Для инъекционного, в т.ч. внутрисуставного введения, требуются не стандартные 10% растворы ХС для подкожного, внутримышечного, внутривенного введения, а 15-25% растворы для внутрисуставного введения, к которым предъявляются более жесткие требования в отношении содержания эндотоксинов (менее 0,05 ЕЭ/мг основного вещества ХС). В связи с этим, для удаления пирогенов предлагается проведение пятиступенчатой фильтрации через мембраны Posidyne® производства Pall Corporation [16]. Использование других методов депирогенизации, в т.ч. фосфата кальция, не нашло практического применения для снижения уровня бактериальных эндотоксинов [47].2. Pyrogenicity, for the removal of which charged modified membranes having a positive zeta potential are used. For injection, including intraarticular administration, not standard 10% cholesterol solutions for subcutaneous, intramuscular, intravenous administration are required, but 15-25% solutions for intraarticular administration, which have more stringent requirements for the content of endotoxins (less than 0.05 EU / mg of the main substance cholesterol) . In this regard, to remove pyrogens, a five-stage filtration through Posidyne® membranes manufactured by Pall Corporation is proposed [16]. The use of other methods of depyrogenation, including calcium phosphate has not found practical application to reduce the level of bacterial endotoxins [47].
3. Высокого содержания липидов, которые приводят к увеличению частоты побочных реакций и нестабильности продукта в процессе хранения. Часть исследователей обращают внимание на возможность снижения липидов в субстанции ХС при использовании высоких температур с последующей обработкой перманганатом калия и активированным углем. Но при этом происходит довольно незначительное снижение содержания липидов (с 6-8% до 2-3%) [37]. Есть способ обезжиривания ХС ацетоном, который относится к 3 классу растворителей [48], но его содержание ограничивается требованиями контролирующих организаций, в частности Food and Drug Administration (FDA) [49].3. The high content of lipids, which lead to an increase in the frequency of adverse reactions and product instability during storage. Some researchers draw attention to the possibility of lowering lipids in the cholesterol substance when using high temperatures, followed by treatment with potassium permanganate and activated carbon. But at the same time, a rather slight decrease in the lipid content occurs (from 6-8% to 2-3%) [37]. There is a method for degreasing cholesterol with acetone, which belongs to the 3rd class of solvents [48], but its content is limited by the requirements of regulatory organizations, in particular Food and Drug Administration (FDA) [49].
Использование высоких концентраций щелочи и воздействие температуры приводят к N-деацетилированию ХС, повышению цветности, частичной потере биологической активности за счет деструкции полимерных цепей ХС [38].The use of high alkali concentrations and the effect of temperature lead to N-deacetylation of cholesterol, an increase in color, a partial loss of biological activity due to the destruction of the polymer chains of cholesterol [38].
Для решения вышеизложенных проблем предлагаются различные способы доочистки водных растворов субстанций от примесей различной природы.To solve the above problems, various methods for the purification of aqueous solutions of substances from impurities of various nature are proposed.
Известен способ извлечения ХС из акульих хрящей, в технологии которого удаление примесей осуществляется методом колоночной хроматографии [39]. Данный способ доочистки гидролизованного продукта с использованием ионного обмена достаточно эффективен, но недостатком является дороговизна, длительность элюирования, уменьшение концентрации выходящих растворов, трудности при промышленном масштабировании. Помимо этого, известно, что колоночная хроматография обычно служит для первичного фракционирования, поскольку с ее помощью удается выделить только относительно узкие фракции, содержащие несколько соединений.A known method of extracting cholesterol from shark cartilage, in the technology of which the removal of impurities is carried out by column chromatography [39]. This method of purification of the hydrolyzed product using ion exchange is quite effective, but the disadvantage is the high cost, the duration of the elution, the decrease in the concentration of the outgoing solutions, and difficulties with industrial scaling. In addition, it is known that column chromatography usually serves for primary fractionation, since it can only be used to isolate relatively narrow fractions containing several compounds.
Также известен способ очистки хондроитинсульфат натрия (ХСН) с использованием хроматографического разделения водного раствора ХСН через крупносетчатые сильнокислотные катионообменные смолы [40]. Данный метод позволяет достигнуть содержания основного вещества в пределах 99%, уменьшить содержание белка до 1%, но хроматография с использованием ионообменной смолы в промышленности требует постоянного контроля вследствие нестабильности ионогенных материалов, что является одним из недостатков ионообменной хроматографии. Уменьшение или набухание объема смол приводят к изменениям скорости потока, потерям эффективности, снижению выхода продукта, в связи с чем часто требуются использование предколонок, регенерация колонок сильными растворителями, увеличиваются трудозатраты на длительные подготовительные и эксплуатационные работы. Помимо этого, катионообменная хроматография является дорогостоящей процедурой.Also known is a method for purifying sodium chondroitin sulfate (CHF) using chromatographic separation of an aqueous solution of CHF through coarse-chain strongly acidic cation exchange resins [40]. This method allows reaching the main substance content within 99%, reducing the protein content to 1%, but chromatography using ion-exchange resins in industry requires constant monitoring due to the instability of ionic materials, which is one of the disadvantages of ion-exchange chromatography. Reducing or swelling of the volume of resins leads to changes in flow rate, loss of efficiency, lower product yield, and therefore the use of pre-columns, regeneration of columns with strong solvents is often required, and labor costs for long preparatory and operational work increase. In addition, cation exchange chromatography is an expensive procedure.
Известен способ удаления примесей из ферментированного субстрата ХС путем двойного осаждения раствора с целью освобождения от балластных белков при рН 8,8-9,0 и 4,4-4,6 [41]. Но использование в технологическом процессе стадии очистки раствора двойным осаждением при различных рН не может дать продукту нужной степени чистоты, помимо этого, процессу присуща многостадийность, а большое количество операций, связанных с осаждением белков и фильтрованием, ведет к потерям основного вещества. Помимо этого, ферментативный гидролиз не решает проблемы пирогенности, в растворе могут остаться нейтральные, кислые и щелочные протеины [16].There is a method of removing impurities from a fermented cholesterol substrate by double precipitation of the solution in order to free from ballast proteins at pH 8.8–9.0 and 4.4–4.6 [41]. But the use in the technological process of the stage of solution purification by double precipitation at different pH values cannot give the product the desired degree of purity, in addition, the process is inherent in multi-stage processes, and a large number of operations associated with protein precipitation and filtration lead to the loss of the main substance. In addition, enzymatic hydrolysis does not solve the pyrogenicity problem; neutral, acidic, and alkaline proteins may remain in solution [16].
В патенте [42] предложен способ доочистки ХС, полученного из хрящей рыб, путем переосаждения раствора трихлоруксусной кислотой (ТХУ) с целью удаления примесей белков и нуклеиновых кислот. Однако использование ядовитой трихлоруксусной кислоты для осаждения белков и нуклеиновых кислот в промышленных масштабах встречается крайне редко, так как при физико-химическом воздействии ТХУ на белки и нуклеиновые кислоты нарушаются их структура и конфигурация и, как следствие, остаточное содержание их фрагментов в продукте может служить причиной появления неспецифических реакций.In the patent [42], a method for the purification of cholesterol obtained from fish cartilage by reprecipitation of a solution with trichloroacetic acid (TCA) to remove protein and nucleic acid impurities is proposed. However, the use of toxic trichloroacetic acid for the deposition of proteins and nucleic acids on an industrial scale is extremely rare, since the physicochemical effect of TCA on proteins and nucleic acids violates their structure and configuration and, as a result, the residual content of their fragments in the product can cause the appearance of nonspecific reactions.
Для селективной адсорбции белков и низкомолекулярных продуктов их распада, других органических примесей из водного раствора ХС используется порошковый активный уголь. При сорбционном извлечении примесей молекулы органических веществ сорбируются на поверхностях специально подготовленных сорбентов, в качестве которых наибольшее распространение имеют активные угли различного типа. С учетом того, что активный углерод имеет удельную поверхность от 1,2 до 1,6 м/г, уголь добавляют в количестве, необходимом для достижения 50-500 мас.% к субстрату [50]. Известны способы доочистки раствора ХС из трахей КРС путем добавления 30% раствора перманганата натрия, нагрева до обесцвечивания раствора с последующим добавлением активного угля при температуре 55°С [37], доочистки ХС из хрящей рыб активным углем в количестве от 0,3 до 1,0% [43]. В другом патенте приведена комбинация обработки раствора ХС в процессе его получения неорганической кислотой при рН 2,5-3,8, а затем окислителями и активным углем [35]. В данных технологиях механизм доочистки растворов субстратов от примесей состоит в сорбции примесей на образующихся хлопьях угля, имеющих большую сорбционную поверхность.For the selective adsorption of proteins and low molecular weight products of their decay, other organic impurities from an aqueous solution of cholesterol, powdered activated carbon is used. During the sorption extraction of impurities, the molecules of organic substances are sorbed on the surfaces of specially prepared sorbents, of which active carbons of various types are most common. Given that active carbon has a specific surface area of 1.2 to 1.6 m / g, carbon is added in an amount necessary to achieve 50-500 wt.% To the substrate [50]. Known methods for the purification of the cholesterol solution from cattle trachea by adding a 30% sodium permanganate solution, heating to bleach the solution, followed by the addition of activated charcoal at 55 ° C [37], the purification of cholesterol from the cartilage of fish with active charcoal in an amount of 0.3 to 1, 0% [43]. In another patent, a combination of processing a cholesterol solution in the process of obtaining it with an inorganic acid at a pH of 2.5-3.8, and then oxidizing agents and activated carbon [35]. In these technologies, the mechanism for the purification of substrate solutions from impurities consists in the sorption of impurities on the resulting flakes of coal having a large sorption surface.
Прототипом настоящего изобретения выбран способ удаления примесей из фракций гликозаминогликанов [51]. Данный способ удаления примесей, таких, как нуклеиновые кислоты, белки и железо, предусматривает обработку растворов фракций гликозаминокликанов (по химической структуре ХС - сульфатированный гликозаминогликан) порошковым активным углем при рН 5-9 и температуре 20-70°С, отделения сорбировавшихся на частицах угля балластных веществ сепарированием и дальнейшего осаждения этанолом очищенных фракций гликозаминогликанов.The prototype of the present invention selected a method of removing impurities from fractions of glycosaminoglycans [51]. This method of removing impurities, such as nucleic acids, proteins, and iron, involves processing solutions of glycosaminoclycan fractions (according to the chemical structure of cholesterol - sulfated glycosaminoglycan) with powdered activated carbon at pH 5-9 and a temperature of 20-70 ° C, separating adsorbed on coal particles ballast substances by separation and further ethanol precipitation of the purified fractions of glycosaminoglycans.
Способ доочистки раствора гликозаминокликанов позволяет получить фракции гликозаминокликанов, обладающих следующими характеристиками: содержание нуклеиновых кислот - менее 0,08 мкг на 1 мг фракции гликозаминогликанов, содержание белка - не более 0,4%, содержание железа - не более 0,07 ppm.The method of tertiary treatment of a glycosaminoclycan solution allows to obtain fractions of glycosaminoclicans having the following characteristics: nucleic acid content of less than 0.08 μg per 1 mg of glycosaminoglycan fraction, protein content of not more than 0.4%, iron content of not more than 0.07 ppm.
Недостатком известного способа удаления примесей из гликозаминогликанов, в том числе из раствора сульфатированного гликозаминогликана, является использование в технологической схеме порошкового активного угля, который, в свою очередь, необходимо подготовить к введению в реакционную смесь. Для данного способа удаления примесей характерны трудоемкость операций, связанных с извлечением угля (сепарирование, осаждение и др.), необходимость подбора угля активного с более высокими прочностными и адсорбционными характеристиками, подбора времени экспозиции реакционной смеси, необходимость ее интенсивного перемешивания, нестабильность эффективности очистки от партии к партии продукта.A disadvantage of the known method of removing impurities from glycosaminoglycans, including from a solution of sulfated glycosaminoglycan, is the use of powdered activated carbon in the technological scheme, which, in turn, must be prepared for introduction into the reaction mixture. This method of removing impurities is characterized by the complexity of operations associated with the extraction of coal (separation, precipitation, etc.), the need to select active coal with higher strength and adsorption characteristics, to select the exposure time of the reaction mixture, the need for intensive mixing, the instability of the efficiency of cleaning from batch to the batch of the product.
Активные угли обладают определенной избирательностью адсорбции: хорошо растворимые в воде и легко гидратирующиеся вещества плохо сорбируются угольными адсорбентами, гидрофобные вещества, слабо растворимые в воде, хорошо сорбируются углем. Под действием перемешивания частицы активного угля хаотично двигаются в растворе, но контакт частиц угля с балластными веществами имеет случайный характер. Для эффективного контакта всего объема приходится прибегать к длительному перемешиванию и увеличению удельного количества угля в расчете на единицу объема раствора, но чем больше угля, тем больше возникает проблем с его последующим удалением из раствора. Помимо этого, кроме физической адсорбции, вызываемой межмолекулярными, или ван-дер-ваальсовыми, силами, уголь обладает химической сорбцией, или хемосорбцией: необратимая сорбция кислорода углем приводит к образованию окислов основного характера, которые при взаимодействии с водой дают основание и влияют на качество продукта [52].Active carbons have a certain selectivity of adsorption: well soluble in water and easily hydratable substances are poorly sorbed by carbon adsorbents, hydrophobic substances, slightly soluble in water, are well sorbed by coal. Under the action of mixing, the particles of activated carbon randomly move in solution, but the contact of coal particles with ballast substances is random. For effective contact of the entire volume, it is necessary to resort to prolonged mixing and an increase in the specific amount of coal per unit volume of the solution, but the more coal, the more problems arise with its subsequent removal from the solution. In addition to this, in addition to physical adsorption caused by intermolecular or van der Waals forces, coal has chemical sorption or chemisorption: irreversible sorption of oxygen by coal leads to the formation of basic oxides, which, when reacted with water, give rise to and affect the quality of the product [52].
Проведенный анализ очистки ХС показал, что все вышеупомянутые производители извлечение органических примесей из растворов ХС осуществляли различными трудоемкими методами, в т.ч. ионообменной хроматографией, осаждением, коагуляцией, сорбцией. Однако известно, что многостадийный технологический процесс, в ходе которого неоднократно меняются характеристики исходного продукта, в данном случае животного происхождения, подвергаемого операциям жесткого щелочного или ферментативного гидролиза, экстракции, осаждения и др., приводит к возникновению в продукте многих побочных продуктов различной природы, молекулярной массы, полярности и др. В связи с различным содержанием определенного перечня органических примесей в субстанциях ХС разных производителей (Таблица 1), подбор технологических параметров доочистки водных растворов ХС для эффективного удаления примесей является актуальной задачей в области производства хондропротективных препаратов. Данная проблема актуализируется в свете увеличения частоты побочных реакций при введении ряда хондропротекторов, обусловленных, в первую очередь, тем, что в последнее время во всем мире наблюдается увеличение общего количества людей с отягощенным аллергологическим анамнезом.The analysis of the purification of cholesterol showed that all of the aforementioned manufacturers extract organic impurities from cholesterol solutions by various laborious methods, including ion exchange chromatography, precipitation, coagulation, sorption. However, it is known that a multi-stage technological process, during which the characteristics of the initial product, in this case of animal origin, subjected to hard alkaline or enzymatic hydrolysis, extraction, precipitation, etc., repeatedly change, leads to the appearance of many by-products of various nature, molecular mass, polarity, etc. In connection with the different contents of a certain list of organic impurities in substances of cholesterol from different manufacturers (Table 1), selection of technology ble parameters aftertreatment aqueous cholesterol solution to effectively remove impurities is an important task in the production hondroprotektivnoe preparations. This problem is actualized in the light of an increase in the frequency of adverse reactions with the introduction of a number of chondroprotectors, due primarily to the fact that recently there has been an increase in the total number of people with a history of allergic history all over the world.
Задачей, на решение которой направлено изобретение, является разработка технологии доочистки водного раствора ХС от органических примесей и получение жидкой и лиофилизированной лекарственных форм высокоочищенного стабилизированного хондропротективного препарата.The problem to which the invention is directed is to develop a technology for the purification of an aqueous solution of cholesterol from organic impurities and to obtain liquid and lyophilized dosage forms of a highly purified stable chondroprotective drug.
Технический результат предлагаемого изобретения заключается в разработке способа, приводящего к получению высокоочищенного раствора из субстанций ХС разных производителей, и создание стабильного лекарственного средства на основе активного действующего вещества и стабилизатора.The technical result of the invention consists in the development of a method leading to the production of a highly purified solution from substances of cholesterol from different manufacturers, and the creation of a stable drug based on the active active substance and stabilizer.
Поставленная задача решается следующим образом.The problem is solved as follows.
Для получения лекарственного препарата в водный раствор ХС добавляют аминокислоту L-пролин и фильтруют через угольные фильтры. Получают препарат ХС с чистотой не менее 99%, стабилизированный аминокислотой L-пролин, с остаточным содержанием органических примесей: белка - не более 0,2%, липидов (на 1 мг хондроитинсульфата) - не более 0,5 мкг, нуклеиновых кислот (на 1 мг хондроитинсульфата) - не более 0,05 мкг, бактериальных эндотоксинов (на 1 мг хондроитинсульфата) - не более 0,05 ЕЭ.To obtain the drug, the amino acid L-Proline is added to the aqueous solution of cholesterol and filtered through carbon filters. Get the preparation of cholesterol with a purity of not less than 99%, stabilized by the amino acid L-Proline, with a residual content of organic impurities: protein - not more than 0.2%, lipids (per 1 mg of chondroitin sulfate) - not more than 0.5 μg, nucleic acids (per 1 mg of chondroitin sulfate) - not more than 0.05 μg, bacterial endotoxins (per 1 mg of chondroitin sulfate) - not more than 0.05 EE.
В водный раствор ХС, содержащий не более 11,5% основного вещества, добавляют аминокислоту L-пролин в количестве 10-70 г/л, фильтруют раствор при температуре 20-50°C через угольные фильтры следующих марок ZetaCarbon (Cuno) -R54SLP, R51SLP, R53SLP или фильтры AKS (Pall) - AKS 1, 2, 6, 7.The aqueous solution of cholesterol containing not more than 11.5% of the basic substance is supplemented with the amino acid L-Proline in an amount of 10-70 g / l, the solution is filtered at a temperature of 20-50 ° C through carbon filters of the following brands ZetaCarbon (Cuno) -R54SLP, R51SLP, R53SLP or filters AKS (Pall) - AKS 1, 2, 6, 7.
Полученный препарат представляет собой хондроитинсульфат с чистотой не менее 99%, стабилизированный аминокислотой L-пролин, в виде жидкой формы.The resulting preparation is chondroitin sulfate with a purity of at least 99%, stabilized by the amino acid L-proline, in the form of a liquid form.
Отличительные признаки заявленного изобретения позволили получить следующие преимущества.Distinctive features of the claimed invention allowed to obtain the following advantages.
Для увеличения эффективности очистки раствора от органических примесей, ухудшающих качество продукта, и увеличения выхода целевого продукта водный раствор ХС до фильтрации стабилизируется подобранным количеством аминокислоты L-пролин, которая была выбрана из ряда других гидрофобных аминокислот (Alanine, Isoleucine, Leucine, Phenylalanine, Valine) в связи с ее известными биологическими и стабилизирующими свойствами. Теоретические предпосылки дают основание предполагать наличие синергизма у ХС и аминокислоты L-пролин в плане хондропротективного эффекта. Он заключается в стимулировании метаболизма хондроцитов и синовиоцитов, ингибировании активности ферментов, способствующих деградации матрикса хряща, улучшении микроциркуляции сосудистого русла периартрикулярных тканей (гепариноподобный эффект ХС). Полианионная молекула ХС является неотъемлемой частью аггрекановой структуры и ответственна за ячеистые и физико-химические свойства хряща, а аминокислота L-пролин служит основой для синтеза коллагена, одного из основных фибриллярных белков соединительной ткани, где чередующиеся остатки пролина и гидроксипролина способствуют созданию стабильной, придающей молекуле прочность трехспиральной структуры коллагена. Коллагеновое волокно, в свою очередь, несет стабилизирующую опорную функцию для соединительной ткани организма.To increase the efficiency of purification of the solution from organic impurities that worsen the quality of the product, and increase the yield of the target product, the aqueous solution of cholesterol is stabilized by a selected amount of the amino acid L-Proline, which was selected from a number of other hydrophobic amino acids (Alanine, Isoleucine, Leucine, Phenylalanine, Valine) in connection with its well-known biological and stabilizing properties. Theoretical assumptions suggest the presence of synergism in cholesterol and the amino acid L-proline in terms of chondroprotective effect. It consists in stimulating the metabolism of chondrocytes and synoviocytes, inhibiting the activity of enzymes that contribute to the degradation of the cartilage matrix, improving the microcirculation of the vascular bed of periarthricular tissues (heparin-like effect of cholesterol). The polyanionic cholesterol molecule is an integral part of the aggrecan structure and is responsible for the cellular and physicochemical properties of cartilage, and the amino acid L-proline serves as the basis for the synthesis of collagen, one of the main fibrillar proteins of the connective tissue, where alternating proline and hydroxyproline residues contribute to the creation of a stable, attached molecule the strength of the three-helix structure of collagen. Collagen fiber, in turn, has a stabilizing support function for the connective tissue of the body.
Растворение субстанции ХС и амфифильного стабилизатора L-пролина до фильтрации позволяет сократить потери ХС на глубинных фильтрах. Возможно, это вызвано тем, что при добавлении подобранного количества амфифильного стабилизатора в раствор, в котором идет явление полиэлектролитного набухания ХС, меняются ионная сила раствора и соответственно гидродинамический радиус макромолекулы [53]. Известно, что максимальный гидродинамический радиус молекул ХС наблюдается в дистиллированной воде, что, в свою очередь, препятствует сорбции в окнах пор активного вещества, растворенного в стерильной инъекционной воде. Помимо этого, амфифильный стабилизатор пролин содержит внутри молекулы гидрофильную (полярную) область и гидрофобную (неполярную) область, и при взаимодействии с ХС увеличивает его растворимость за счет гидрофильной (полярной) области.Dissolution of the cholesterol substance and the amphiphilic stabilizer of L-proline before filtration reduces the loss of cholesterol in the depth filters. Perhaps this is due to the fact that when a selected amount of an amphiphilic stabilizer is added to a solution in which the phenomenon of polyelectrolyte swelling of cholesterol occurs, the ionic strength of the solution and, accordingly, the hydrodynamic radius of the macromolecule change [53]. It is known that the maximum hydrodynamic radius of cholesterol molecules is observed in distilled water, which, in turn, prevents sorption in the windows of the pores of the active substance dissolved in sterile injection water. In addition, the amphiphilic stabilizer proline contains a hydrophilic (polar) region and a hydrophobic (nonpolar) region inside the molecule, and when interacting with cholesterol increases its solubility due to the hydrophilic (polar) region.
В результате вышеизложенного, водный раствор ХС, стабилизированный аминокислотой L-пролином, при подобранных соотношениях компонентов и условиях фильтрации беспрепятственно фильтруется через глубинный угольный фильтр, не проникая в поры глубинного угольного фильтра, и вследствие увеличения гидрофильности макромолекулы не сорбируется на поверхностных сайтах адгезии угля. В материале фильтра уголь зафиксирован, но очищаемый раствор обязательно проконтактирует с углем, т.к. фильтр работает подобно угольной колонне. Это увеличивает время контакта загрязнений с активными сайтами угля, таким образом повышая эффективность очистки по сравнению с насыпным углем, и значительно уменьшает время производственного процесса, которое минимизируется за счет отсутствия необходимости подготовки угля, извлечения угля из реакционной смеси и т.д.As a result of the above, an aqueous solution of cholesterol stabilized by the amino acid L-proline, under selected component ratios and filtering conditions, is freely filtered through a deep carbon filter without penetrating the pores of a deep carbon filter, and due to an increase in hydrophilicity, the macromolecule is not adsorbed on the surface sites of coal adhesion. Coal is fixed in the filter material, but the solution to be cleaned will necessarily come in contact with coal, as the filter works like a coal column. This increases the contact time of contaminants with the active sites of coal, thereby increasing the cleaning efficiency compared to bulk coal, and significantly reduces the time of the production process, which is minimized by the absence of the need for coal preparation, coal extraction from the reaction mixture, etc.
В качестве фильтров могут быть использованы угольные фильтры с наиболее высокой сорбционной активностью по отношению к органическим примесям (белкам, нуклеиновым кислотам, липидам, бактериальным эндотоксинам), например, фильтры ZetaCarbon фирмы Cuno (R54SLP, R51SLP, R53SLP) или фильтры Pall (AKS 1, 2, 6, 7), или аналогичные фильтры других производителей.Carbon filters with the highest sorption activity with respect to organic impurities (proteins, nucleic acids, lipids, bacterial endotoxins) can be used as filters, for example, ZetaCarbon filters from Cuno (R54SLP, R51SLP, R53SLP) or Pall filters (AKS 1, 2, 6, 7), or similar filters from other manufacturers.
Фильтрация стабилизированного 20 г/л аминокислоты L-пролин водного раствора ХС через глубинный фильтр ZetaCarbon марки R54SLP позволила в 6 раз снизить показатель цветности раствора, в 8-9 раз уменьшить содержание белка (по Лоури, в % в пересчете на сухое вещество), в 6-7 раз содержание нуклеиновых кислот, в 3-4 раза содержание невидимых частиц размером 5 мкм и более, в 20 раз содержание бактериальных эндотоксинов, а содержание липидов и невидимых частиц размером 25 мкм и более довести практически до нуля. Выход ХС и аминокислоты L-пролин составил 100%, т.е. использование фильтра данной марки позволило сохранить количественное содержание основного активного действующего вещества и стабилизатора в пределах исходных параметров.Filtration of a stabilized 20 g / l amino acid L-Proline cholesterol aqueous solution through a R54SLP ZetaCarbon depth filter allowed a 6-fold decrease in the color index of the solution, an 8–9-fold decrease in protein content (according to Lowry, in%, calculated on the dry matter), 6-7 times the content of nucleic acids, 3-4 times the content of invisible particles of 5 microns or more, 20 times the content of bacterial endotoxins, and bring the content of lipids and invisible particles of 25 microns or more to almost zero. The yield of cholesterol and amino acids L-proline was 100%, i.e. the use of a filter of this brand allowed preserving the quantitative content of the main active active substance and stabilizer within the initial parameters.
Доочистка полупродукта с использованием фильтров ZetaCarbon других марок (R51SLP и R53SLP) и фильтров фирмы Pall (AKS 1, 2, 6, 7) позволила получить сопоставимые результаты (Таблица 2).Tertiary treatment of the intermediate product using other brands of ZetaCarbon filters (R51SLP and R53SLP) and Pall filters (AKS 1, 2, 6, 7) yielded comparable results (Table 2).
Полученный продукт с заданной степенью очистки без добавления антимикробного консерванта (в отличие от ряда инъекционных хондропротективных препаратов, содержащих в своем составе различные консерванты в виде органических (спиртов, кислот, фенола и его производных), металлоорганических (тиомерсал) и неорганических соединений) [28-31], сохраняет стабильность физико-химических свойств в течение длительного срока хранения (3 года) (Таблица 3). Стабильность препарата обеспечивается минимальным содержанием остаточных органических примесей белка, нуклеиновых кислот, липидов, бактериальных эндотоксинов, т.к. известно, что на стабильность лекарственных средств в процессе хранения большое влияние оказывают как физические факторы, так и побочные химические реакции, в которые могут вступать различные примесные соединения.The resulting product with a given degree of purification without the addition of an antimicrobial preservative (unlike a number of injectable chondroprotective preparations containing various preservatives in the form of organic (alcohols, acids, phenol and its derivatives), organometallic (thiomersal) and inorganic compounds) [28- 31], maintains the stability of physico-chemical properties over a long shelf life (3 years) (Table 3). The stability of the drug is ensured by the minimum content of residual organic impurities of protein, nucleic acids, lipids, bacterial endotoxins, because It is known that the stability of drugs during storage is greatly influenced by both physical factors and adverse chemical reactions into which various impurity compounds can enter.
Таким образом, совокупность отличительных признаков заявляемого способа позволяет получить оптимальный выход целевого продукта, обладающего улучшенными и стабильными качественными характеристиками, с высоким терапевтическим эффектом. Заявляемая технология обеспечивает высокую степень очистки водного раствора ХС, достигаемой путем последовательного проведения технологических операций, направленных на стабилизацию активного вещества в водном растворе ХС за счет добавления аминокислоты L-пролин в количестве, обеспечивающем синергидный терапевтический эффект активного действующего вещества и стабилизатора и фильтрацию полученного продукта через угольный фильтр.Thus, the set of distinctive features of the proposed method allows to obtain the optimal yield of the target product with improved and stable quality characteristics, with a high therapeutic effect. The inventive technology provides a high degree of purification of an aqueous solution of cholesterol, achieved by sequentially carrying out technological operations aimed at stabilizing the active substance in an aqueous solution of cholesterol by adding the amino acid L-Proline in an amount that provides a synergistic therapeutic effect of the active active substance and stabilizer and filtering the resulting product through carbon filter.
Полупродукт на промежуточных этапах производства контролируют по следующим методикам.The intermediate product at the intermediate stages of production is controlled by the following methods.
Внешний вид (описание) контролируют визуально. Подлинность раствора на содержание ХС - качественной реакцией на уроновые кислоты по ФСП 42-0504144206 и на содержание L-пролина - методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) по ГФ XI, ч.2, стр.110. Прозрачность контролируют по ГФ XII, ч.1, с.98; цветность - по ГФ XII, ч.1, с.93 и по USP31-NF26, Р.921 спектрофотометрическим методом при длине волны 420 нм. Контроль рН - потенциометрическим методом по ГФ XII, ч.1, с.85. Потерю в массе при высушивании контролируют по ГФ XI, вып.1, с.176. Механические включения определяют визуально и счетно-фотометрическим методом по РД 42-501-98. Специфические примеси (белок) контролируют качественной реакцией с 20% раствором трихлоруксусной кислоты по ФСП 42-0504144206; количественное содержание специфических примесей (белка) - методом Лоури (метод А) по ГФ XII, ч.1, с.105. Нуклеиновые кислоты контролируют спектрофотометрическим методом по методу Спирина по МУК 4.1/4.2.588-96, стр.79. Общие липиды - колориметрическим методом (фосфованилин) в присутствии раствора серной кислоты (Набор для определения общих липидов. Код: 1001270. Spinreact.). Аномальную токсичность контролируют по ГФ XII, ч.1, с.124; пирогенность - по ГФ XII, ч.1, с.125; бактериальные эндотоксины - по ГФ XII, ч.1, с.128. Стерильность методом прямого посева контролируют по ГФ XII, ч.1, с.150. Количественное определение хондроитинсульфата в 1 мл - спектрофотометрическим методом по ФСП 42-0504144206, L-пролина - методом ВЭЖХ по ГФ XI, ч.2, стр.110. Тест на ускоренное старение осуществляется выдерживанием препарата в термостате при температуре 60°С - 3,5 сут, 50°С - 10,9 сут, 37°С - 47,6 сут и является аналогом условий хранения в течение 3 лет. Тест проводят согласно Временной инструкции по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода "Ускоренного старения" при повышенной температуре: И-42-2-82 [Утв. Министерством мед. промышленности, Министерством Здравоохранения СССР в 1982 г.). Стабильность препарата контролируют согласно ОФС 42-0029-07 Сроки годности лекарственных средств.Appearance (description) is controlled visually. The authenticity of the solution for the content of cholesterol is a qualitative reaction to uronic acids according to FSP 42-0504144206 and to the content of L-proline by high performance liquid chromatography (HPLC) according to GP XI, part 2, p. 110. Transparency is controlled by GF XII, part 1, p. 98; color - according to GF XII, part 1, p.93 and according to USP31-NF26, P.921 by spectrophotometric method at a wavelength of 420 nm. PH control - by potentiometric method according to GF XII, part 1, p. 85. The loss in mass during drying is controlled according to GF XI, issue 1, p. 176. Mechanical inclusions are determined visually and by counting-photometric method according to RD 42-501-98. Specific impurities (protein) are controlled by a qualitative reaction with a 20% trichloroacetic acid solution according to FSP 42-0504144206; quantitative content of specific impurities (protein) - by the Lowry method (method A) according to State Pharmacopoeia XII, part 1, p.105. Nucleic acids are controlled by spectrophotometric method according to the Spirin method according to MUK 4.1 / 4.2.588-96, p. 79. Total lipids - colorimetric method (phosphovaniline) in the presence of a solution of sulfuric acid (Kit for the determination of total lipids. Code: 1001270. Spinreact.). Abnormal toxicity is controlled by GF XII, part 1, p.124; pyrogenicity - according to GF XII, part 1, p.125; bacterial endotoxins - according to GF XII, part 1, p.128. Sterility by direct seeding is monitored according to Global Fund XII, part 1, p. 150. Quantitative determination of chondroitin sulfate in 1 ml by spectrophotometric method according to FSP 42-0504144206, L-proline by HPLC method according to GF XI, part 2, p. 110. The accelerated aging test is carried out by keeping the drug in a thermostat at a temperature of 60 ° C for 3.5 days, 50 ° C for 10.9 days, 37 ° C for 47.6 days and is an analog of storage conditions for 3 years. The test is carried out according to the Interim Instructions for the work to determine the shelf life of drugs based on the method of "Accelerated aging" at elevated temperatures: I-42-2-82 [Approved. Ministry of honey. industry, the Ministry of Health of the USSR in 1982). The stability of the drug is controlled according to the General Pharmacopoeia Monograph 42-0029-07 Shelf life of drugs.
Примеры конкретного выполнения.Examples of specific performance.
Пример 1. В качестве исходного сырья используют субстанцию ХС («SYNTEX S.A.», Аргентина), представляющую собой гигроскопичный белый с желтоватым оттенком порошок, с количественным содержанием основного вещества 98,2%, показателем характеристической вязкости - 0,38, показателем рН 10% раствора - 6,1, цветностью и прозрачностью 10% раствора - не интенсивнее эталонных растворов №1 и №66, содержанием специфических примесей (белка) - при проведении качественной реакции помутнения раствора не наблюдается.Example 1. As a feedstock, the substance cholesterol (SYNTEX SA, Argentina) is used, which is a hygroscopic white powder with a yellowish tint, with a quantitative content of the main substance of 98.2%, an intrinsic viscosity index of 0.38, a pH of 10% a solution of 6.1, the color and transparency of a 10% solution is not more intense than the standard solutions No. 1 and No. 66, the content of specific impurities (protein) - when conducting a qualitative reaction turbidity of the solution is not observed.
3,3 кг субстанции ХС растворяют в 32 л стерильной воды для инъекций температуры 40°С и рН 5,4 при постоянном перемешивании в течение 20 мин. В полученный раствор ХС добавляют навеску аминокислоты L-пролин в количестве 660 г (20 г/л водного раствора ХС), перемешивают в течение 10 мин и доводят конечный объем до 33 л. Получают 10% водный раствор ХС, стабилизированный аминокислотой L-пролин.3.3 kg of cholesterol substance is dissolved in 32 l of sterile water for injection at a temperature of 40 ° C and a pH of 5.4 with constant stirring for 20 minutes. 660 g of amino acid L-proline is added to the resulting cholesterol solution in an amount of 660 g (20 g / l of an aqueous cholesterol solution), stirred for 10 min and the final volume is adjusted to 33 l. Get 10% aqueous solution of cholesterol stabilized by the amino acid L-proline.
Раствор представляет собой прозрачную со слегка желтоватым оттенком жидкость, со следующими показателями:The solution is a liquid, transparent with a slightly yellowish tint, with the following indicators:
- Подлинность - раствор окрашивается в розово-фиолетовый цвет (качественная реакция на уроновые кислоты), время удерживания пика пролина в растворе совпадает со временем удерживания пролина в стандартном образце.- Authenticity - the solution turns pink-violet (a qualitative reaction to uronic acids), the retention time of the proline peak in the solution coincides with the retention time of proline in the standard sample.
- Прозрачность 10% раствора - менее эталона I.- The transparency of 10% solution is less than standard I.
- Цветность 10% раствора - менее эталона Y5; 5% раствора при длине волны 420 нм - 0,301.- Color 10% solution - less than the standard Y 5 ; 5% solution at a wavelength of 420 nm - 0.301.
- рН - 5,9.- pH 5.9.
- Механические включения. Невидимые частицы размером 5 мкм и более - 4650 частиц в одной пробе; размером 25 мкм и более - 753 частиц в одной пробе.- Mechanical inclusions. Invisible particles with a size of 5 microns and more - 4650 particles in one sample; with a size of 25 microns and more - 753 particles in one sample.
- Механические включения визуально - отсутствуют видимые механические включения.- Mechanical inclusions visually - there are no visible mechanical inclusions.
- Специфические примеси (белок) - помутнения нет; в пересчете на сухое вещество 1,16%.- Specific impurities (protein) - no turbidity; in terms of dry matter 1.16%.
- Примеси нуклеиновых кислот - 0,322 мкг/мг основного вещества ХС.- Impurities of nucleic acids - 0.322 μg / mg of the main substance cholesterol.
- Общие липиды - 16,1 мкг/мг основного вещества ХС.- Total lipids - 16.1 μg / mg of the main substance cholesterol.
- Аномальная токсичность - нетоксичен.- Abnormal toxicity - non-toxic.
- Пирогенность - апирогенен.- Pyrogenicity - pyrogen-free.
- Бактериальные эндотоксины - не более 0,5 ЕЭ/мг основного вещества ХС.- Bacterial endotoxins - not more than 0.5 EU / mg of the main substance cholesterol.
- Количественное определение ХС - 98,2% ХС (в пересчете на сухое вещество).- Quantitative determination of cholesterol - 98.2% cholesterol (in terms of dry matter).
- Количественное определение L-пролина - 20,15 мг/мл.- Quantitative determination of L-proline - 20.15 mg / ml.
Полученный раствор подвергают доочистке методом глубинной фильтрации через фильтр ZetaCarbon марки R54SLP 293 мм (3 М Фильтрующие системы, Россия). Фильтрацию (скорость потока через глубинный фильтр 2,8 л/мин) осуществляют при температуре раствора 20°С.The resulting solution is subjected to post-treatment by in-depth filtration through a ZetaCarbon filter of the brand R54SLP 293 mm (3 M Filter systems, Russia). Filtration (flow rate through a depth filter of 2.8 l / min) is carried out at a solution temperature of 20 ° C.
Далее раствор подвергают стерилизующей фильтрации через микрофильтрационную мембрану с размером с размером пор 0,22 мкм (Pall).The solution is then subjected to sterilizing filtration through a microfiltration membrane with a pore size of 0.22 μm (Pall).
Разливают по 1 мл в ампулы стеклянные ШП-В-2.Pour 1 ml into glass ampoules ШП-В-2.
После доочистки водного раствора ХС с аминокислотой L-пролином через глубинный фильтр ZetaCarbon марки R54SLP стерилизующей фильтрации и розлива повторно контролируют образцы продукции по вышеперечисленным показателям.After purification of the aqueous solution of cholesterol with amino acid L-proline through a ZetaCarbon depth filter of the R54SLP brand of sterilizing filtration and bottling, the product samples are re-checked according to the above indicators.
Получают раствор, представляющий собой прозрачную бесцветную жидкость, со следующими показателями:Get a solution, which is a clear, colorless liquid, with the following indicators:
- Подлинность - раствор окрашивается в розово-фиолетовый цвет (качественная реакция на уроновые кислоты), время удерживания пика пролина в растворе совпадает со временем удерживания пролина в стандартном образце.- Authenticity - the solution turns pink-violet (a qualitative reaction to uronic acids), the retention time of the proline peak in the solution coincides with the retention time of proline in the standard sample.
- Прозрачность 10% раствора - менее эталона I.- The transparency of 10% solution is less than standard I.
- Цветность 10% раствора - менее эталона Y5; 5% раствора при длине волны 420 нм - 0,050.- Color 10% solution - less than the standard Y 5 ; 5% solution at a wavelength of 420 nm - 0.050.
- рН - 5,9.- pH 5.9.
- Механические включения. Невидимые частицы размером 5 мкм и более - 1240 частиц в ампуле; размером 25 мкм и более - 3 частицы в ампуле. Соответствует требованиям РД 42-501-98.- Mechanical inclusion. Invisible particles with a size of 5 microns and more - 1240 particles in an ampoule; 25 microns or more in size - 3 particles in an ampoule. Conforms to the requirements of RD 42-501-98.
- Механические включения визуально - соответствует требованиям РД 42-501-98.- Mechanical inclusions visually - meets the requirements of RD 42-501-98.
- Специфические примеси (белок) - помутнения нет; в пересчете на сухое вещество - 0,13%.- Specific impurities (protein) - no turbidity; in terms of dry matter - 0.13%.
- Примеси нуклеиновых кислот - 0,047 мкг/мг основного вещества ХС.- Impurities of nucleic acids - 0.047 mcg / mg of the main substance cholesterol.
- Общие липиды - 0,1 мкг/мг основного вещества ХС.- Total lipids - 0.1 μg / mg of the main substance cholesterol.
- Аномальная токсичность - нетоксичен.- Abnormal toxicity - non-toxic.
- Пирогенность - апирогенен.- Pyrogenicity - pyrogen-free.
- Бактериальные эндотоксины - не более 0,025 ЕЭ/мг основного вещества ХС.- Bacterial endotoxins - not more than 0.025 EU / mg of the main substance cholesterol.
- Количественное определение ХС - 99,8% ХС (в пересчете на сухое вещество).- Quantitative determination of cholesterol - 99.8% cholesterol (in terms of dry matter).
- Количественное определение L-пролина - 20,13 мг/мл.- Quantitative determination of L-Proline - 20.13 mg / ml.
Пример 2.Example 2
В качестве исходного сырья используют субстанцию ХС (Bioiberica S.A., Барселона, Испания), представляющую собой гигроскопичный белый, со слегка желтоватым оттенком порошок, с количественным содержанием основного вещества 98,8%, показателем характеристической вязкости - 0,05 м3/кг, показателем рН 10% раствора - 5,5, прозрачностью 2,5% раствора - не интенсивнее эталонного раствора I, цветностью 5% раствора - не интенсивнее эталонного раствора Y4, содержанием белка - 0,7%, содержанием бактериальных эндотоксинов - 0,1 ЕЭ/мг.The raw material used is the substance cholesterol (Bioiberica SA, Barcelona, Spain), which is a hygroscopic white powder with a slightly yellowish tint, with a quantitative content of the main substance of 98.8%, an intrinsic viscosity index of 0.05 m 3 / kg, an indicator the pH of a 10% solution is 5.5, the transparency of a 2.5% solution is not more intense than the reference solution I, the color of the 5% solution is not more intense than the standard solution Y 4 , the protein content is 0.7%, the content of bacterial endotoxins is 0.1 EE / mg
3,3 кг субстанции ХС растворяют до 32 л стерильной воды для инъекций температуры 45°С, рН 5,2 и при постоянном перемешивании в течение 20 мин. В полученный раствор ХС добавляют навеску аминокислоты L-пролина в количестве 330 г (10 г/л водного раствора ХС), перемешивают в течение 10 мин. Получают 10% водный раствор ХС, стабилизированный аминокислотой L-пролином.3.3 kg of the substance cholesterol is dissolved up to 32 l of sterile water for injection at a temperature of 45 ° C, pH 5.2 and with constant stirring for 20 minutes To the resulting cholesterol solution add a portion of the amino acid L-proline in an amount of 330 g (10 g / l of an aqueous solution of cholesterol), mix for 10 minutes. Get 10% aqueous solution of cholesterol stabilized by the amino acid L-proline.
Раствор представляет собой прозрачную, со слегка желтоватым оттенком жидкость, со следующими показателями:The solution is a transparent, slightly yellowish liquid, with the following indicators:
- Подлинность - раствор окрашивается в розово-фиолетовый цвет (качественная реакция на уроновые кислоты), время удерживания пика пролина в растворе совпадает со временем удерживания пролина в стандартном образце.- Authenticity - the solution turns pink-violet (a qualitative reaction to uronic acids), the retention time of the proline peak in the solution coincides with the retention time of proline in the standard sample.
- Прозрачность 10% раствора - менее эталона I.- The transparency of 10% solution is less than standard I.
- Цветность 10% раствора - менее эталона Y5; 5% раствора при длине волны 420 нм - 0,280.- Color 10% solution - less than the standard Y 5 ; 5% solution at a wavelength of 420 nm - 0.280.
- рН - 5,7.- pH 5.7.
- Механические включения. Невидимые частицы размером 5 мкм и более - 4845 частиц в одной пробе; размером 25 мкм и более - 647 частиц в одной пробе.- Mechanical inclusions. Invisible particles with a size of 5 microns and more - 4845 particles in one sample; size of 25 microns or more - 647 particles in one sample.
- Механические включения визуально - отсутствуют видимые механические включения.- Mechanical inclusions visually - there are no visible mechanical inclusions.
- Специфические примеси (белок) - помутнения нет; в пересчете на сухое вещество - 0,7%.- Specific impurities (protein) - no turbidity; in terms of dry matter - 0.7%.
- Примеси нуклеиновых кислот - 0,434 мкг/мг основного вещества ХС.- Impurities of nucleic acids - 0.434 μg / mg of the main substance cholesterol.
- Общие липиды - 1,8 мкг/мг основного вещества ХС.- Total lipids - 1.8 μg / mg of the main substance cholesterol.
- Аномальная токсичность - нетоксичен.- Abnormal toxicity - non-toxic.
- Пирогенность - апирогенен.- Pyrogenicity - pyrogen-free.
- Бактериальные эндотоксины - не более 0,1 ЕЭ/мг основного вещества ХС.- Bacterial endotoxins - not more than 0.1 EU / mg of the main substance cholesterol.
- Количественное определение ХС - 98,8% ХС (в пересчете на сухое вещество).- Quantitative determination of cholesterol - 98.8% cholesterol (in terms of dry matter).
- Количественное определение L-пролина - 10,12 мг/мл.- Quantification of L-Proline - 10.12 mg / ml.
Полученный раствор подвергают доочистке методом глубинной фильтрации через фильтр ZetaCarbon марки R51SLP 293 мм (3 М Фильтрующие системы, Россия). Фильтрацию (скорость потока через глубинный фильтр 2,8 л/мин) осуществляют при температуре раствора 35°С.The resulting solution is subjected to further purification by the method of deep filtration through a ZetaCarbon filter brand R51SLP 293 mm (3 M Filter systems, Russia). Filtration (flow rate through a depth filter of 2.8 l / min) is carried out at a solution temperature of 35 ° C.
Далее раствор подвергают стерилизующей фильтрации через микрофильтрационную мембрану с размером с размером пор 0,22 мкм (Pall).The solution is then subjected to sterilizing filtration through a microfiltration membrane with a pore size of 0.22 μm (Pall).
Разливают по 1 мл в ампулы стеклянные ШП-В-2, помещают кассеты с препаратом в сублимационную камеру, где замораживают не менее 10 ч, включая выдержку препарата при температуре минус 30°С и ниже не менее 4-х ч. Затем камеру вакуумируют, при стабилизации остаточного давления начинают процесс сублимационного высушивания, температуру медленно поднимают до конечного значения (22±4)°С к (40±7) ч и поддерживают на этом уровне до конца высушивания.Pour 1 ml into glass ampoules ШП-В-2, place the cartridges with the drug in a sublimation chamber, where they are frozen for at least 10 hours, including holding the drug at a temperature of minus 30 ° С and below at least 4 hours. Then the chamber is evacuated, when the residual pressure is stabilized, the process of freeze-drying is started, the temperature is slowly raised to a final value of (22 ± 4) ° С to (40 ± 7) h and maintained at this level until the end of drying.
После доочистки водного раствора ХС, стабилизированного аминокислотой L-пролин, через глубинный фильтр ZetaCarbon марки R51SLP стерилизующей фильтрации, розлива и лиофильного высушивания контролируют образцы продукции по вышеперечисленным показателям.After purification of the aqueous solution of cholesterol stabilized with the amino acid L-Proline through the ZetaCarbon R51SLP depth filter with sterilizing filtration, bottling and freeze drying, product samples are controlled according to the above indicators.
Получают раствор, представляющий собой прозрачную бесцветную жидкость, со следующими показателями:Get a solution, which is a clear, colorless liquid, with the following indicators:
- Подлинность качественной реакцией на уроновые кислоты - окрашивается в розово-фиолетовый цвет; качественной реакцией на L-пролин - время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого препарата совпадает со временем удерживания пика пролина на хроматограмме стандартного раствора.- Authenticity with a qualitative reaction to uronic acids - it is painted in pink-violet color; a qualitative reaction to L-proline - the retention time of the main peak in the chromatogram of the test drug coincides with the retention time of the proline peak in the chromatogram of the standard solution.
- Прозрачность 10% раствора - менее эталона I.- The transparency of 10% solution is less than standard I.
- Цветность 10% раствора - менее эталона Y5; 5% раствора при длине волны 420 нм - 0,067.- Color 10% solution - less than the standard Y 5 ; 5% solution at a wavelength of 420 nm - 0.067.
- рН - 5,8.- pH - 5.8.
Потеря в массе при высушивании - 2%.The loss in mass upon drying is 2%.
- Механические включения. Невидимые частицы размером 5 мкм и более - 1186 частиц в ампуле; размером 25 мкм и более - 2 частицы в ампуле. Соответствует требованиям РД 42-501-98.- Mechanical inclusions. Invisible particles with a size of 5 microns and more - 1186 particles in an ampoule; 25 microns or more in size - 2 particles in an ampoule. Conforms to the requirements of RD 42-501-98.
- Механические включения визуально - соответствует требованиям РД 42-501-98.- Mechanical inclusions visually - meets the requirements of RD 42-501-98.
- Специфические примеси (белок) - помутнения нет; в пересчете на сухое вещество - 0,17%.- Specific impurities (protein) - no turbidity; in terms of dry matter - 0.17%.
- Примеси нуклеиновых кислот - 0,028 мкг/мг основного вещества ХС.- Impurities of nucleic acids - 0.028 μg / mg of the main substance cholesterol.
- Общие липиды - 0,2 мкг/мг основного вещества ХС.- Total lipids - 0.2 μg / mg of the main substance cholesterol.
- Аномальная токсичность - нетоксичен.- Abnormal toxicity - non-toxic.
- Пирогенность - апирогенен.- Pyrogenicity - pyrogen-free.
- Бактериальные эндотоксины - не более 0,025 ЕЭ/мг основного вещества ХС.- Bacterial endotoxins - not more than 0.025 EU / mg of the main substance cholesterol.
- Количественное определение ХС - 99,9% ХС (в пересчете на сухое вещество).- Quantitative determination of cholesterol - 99.9% of cholesterol (in terms of dry matter).
- Количественное определение L-пролина - 10,10 мг/мл.- Quantification of L-Proline - 10.10 mg / ml.
ЛитератураLiterature
1. Фоломеева О.М., Амирджанова В.Н., Якушева Е.О. и др. Анализ структуры XIII класса болезней. Рос. Ревматол. 1998; 1: 2-7.1. Folomeeva O.M., Amirjanova V.N., Yakusheva E.O. et al. Analysis of the structure of the XIII class of diseases. Grew up. Rheumatol. 1998; 1: 2-7.
2. Фоломеева О.М., Дубинина Т.В., Логинова Е.Ю. и др. Заболеваемость населения России ревматическими заболеваниями в начале нового столетия. Терапевтический архив. 2003; 75(5): 5-9.2. Folomeeva O.M., Dubinina T.V., Loginova E.Yu. et al. The incidence of the Russian population with rheumatic diseases at the beginning of the new century. Therapeutic Archive. 2003; 75 (5): 5-9.
3. Фоломеева О.М., Эрдес Ш. Ревматические заболевания у взрослого населения в федеральных округах Российской Федерации. Научно-практическая ревматология. 2006(2): 4-10.3. Folomeeva OM, Erdes Sh. Rheumatic diseases in the adult population in the federal districts of the Russian Federation. Scientific and practical rheumatology. 2006 (2): 4-10.
4. Поздеева Н.А., Сороковиков В.А. Дегенеративно-дистрофические изменения пояснично-крестцового отдела позвоночника (распространенность, клиника, профилактика). Бюллетень ВСНЦ СО РАМН, 2006, №4 (50).4. Pozdeeva N.A., Sorokovikov V.A. Degenerative-dystrophic changes in the lumbosacral spine (prevalence, clinical features, prevention). Bulletin of the VSSC SB RAMS, 2006, No. 4 (50).
5. Епифанов В.А., Ролик И.С., Епифанов А.В. Остеохондроз позвоночника. -М.: Медицина, 2000. - 344 с.5. Epifanov V.A., Roller I.S., Epifanov A.V. Osteocondritis of the spine. -M .: Medicine, 2000 .-- 344 p.
6. EULAR Recommendations 2003: an evidence based approach to the management of knee osteoarthritis: Report or a Task Force of Stending Committee for International Clinical Studies Including Therapeutic Trials (ESCISIT). Ann Rheum Dis 2003, 62: 1145-1155.6. EULAR Recommendations 2003: an evidence based approach to the management of knee osteoarthritis: Report or a Task Force of Stending Committee for International Clinical Studies Including Therapeutic Trials (ESCISIT). Ann Rheum Dis 2003, 62: 1145-1155.
7. Федеральное руководство для врачей по использованию лекарственных средств (формулярная система): Выпуск 1. - М.: ГЭОТАР Медицина, 2000, стр.444.7. Federal guidelines for doctors on the use of medicines (formulary system): Issue 1. - M .: GEOTAR Medicine, 2000, p. 444.
8. Насонов Е.Л. Клинические рекомендации и алгоритмы для практикующих врачей. Ревматология, М.: Волга Медиа, 2004. - 111 с.8. Nasonov E.L. Clinical guidelines and algorithms for practitioners. Rheumatology, Moscow: Volga Media, 2004 .-- 111 p.
9. Алексеева Л.И. Перспективы хондропротективной терапии остеоартроза. Научно-практическая ревматология. 2003; (4): 83-6.9. Alekseeva L.I. Prospects for chondroprotective therapy of osteoarthrosis. Scientific and practical rheumatology. 2003; (4): 83-6.
10. Руденко В.Г. Хондропротекторы - основа конструктивной терапии заболеваний суставов. Медицинская газета «Здоровье Украины», 11.2003. №83.10. Rudenko V.G. Chondroprotectors are the basis of constructive therapy for joint diseases. Medical newspaper "Health of Ukraine", 11.2003. No. 83.
11. Клинические рекомендации для практических врачей, основанные на доказательной медицине. М., 2001. С.606-611.11. Clinical recommendations for practitioners based on evidence-based medicine. M., 2001.S.606-611.
12. Adebowale АО, Сох DS, Liang Z, Eddington ND. Analysis of glucosamine and chondroitin sulfate content in marketed products and the Caco-2 permaebility of chondroitin sulfate raw materials. // J Am Nutraceutical Assoc 2000; 3: 37-44.12. Adebowale AO, Cox DS, Liang Z, Eddington ND. Analysis of glucosamine and chondroitin sulfate content in marketed products and the Caco-2 permaebility of chondroitin sulfate raw materials. // J Am Nutraceutical Assoc 2000; 3: 37-44.
13. Foley CM, Kratz AM. Nutraceuticals - challenges and opportunities for the new millennium that affect consumers and healthcare professionals who use and recommend nutraceuticals. // J Am Nutraceutical Assoc. 1999; 2: 6-10.13. Foley CM, Kratz AM. Nutraceuticals - challenges and opportunities for the new millennium that affect consumers and healthcare professionals who use and recommend nutraceuticals. // J Am Nutraceutical Assoc. 1999; 2: 6-10.
14. McCoy М. Stiff competition in arthritis salve. // Chem Eng News. 2000 (Apr 3): 20-21.14. McCoy M. Stiff competition in arthritis salve. // Chem Eng News. 2000 (Apr 3): 20-21.
15. Epub 2010 Jan 28. Calamia V, Fernandez-Puente P, Mateos J. et al Pharmacoproteomic Study of Three Different Chondroitin Sulfate Compounds on Intracellular and Extracellular Human Chondrocyte Proteomes. Mol Cell Proteomics. 2012 Jun; 11(6): M111.013417. Epub 2011 Dec 27.15. Epub 2010 Jan 28. Calamia V, Fernandez-Puente P, Mateos J. et al Pharmacoproteomic Study of Three Different Chondroitin Sulfate Compounds on Intracellular and Extracellular Human Chondrocyte Proteomes. Mol Cell Proteomics. 2012 Jun; 11 (6): M111.013417. Epub 2011 Dec 27.
16. WO 9309766 (A1) Hartung Glen. Method for treatment of acute and chronic painful arthropathic conditions in human and other mammals, опубл. 27.05.1993 г.16. WO 9309766 (A1) Hartung Glen. Method for treatment of acute and chronic painful arthropathic conditions in human and other mammals, publ. May 27, 1993
17. US 2003162744, Takai М., Kono H. Salmon-origin chondroitin-sulfate. заявл.02.03.2002 г., опубл. 28.08.2003 г.17. US 2003162744, Takai M., Kono H. Salmon-origin chondroitin-sulfate. Dec. 02.03.2002, publ. 08/28/2003 g.
18. WO 2004039994, Tadashi E. Sodium chondroitin sulfate, chondroitin-sulfate-containing material fnd processes for producingthe same.; заявл. 01.11.2002 г., опубл. 13.05.2004 г.18. WO 2004039994, Tadashi E. Sodium chondroitin sulfate, chondroitin-sulfate-containing material fnd processes for producingthe same .; declared November 1, 2002, publ. May 13, 2004
19. US 20040146993 Khare A., Houliston S., Black Т. Isolating chondroitin sulfate. заявл. 13.11.2002 г., опубл. 29.07.2004 г.19. US 20040146993 Khare A., Houliston S., Black T. Isolating chondroitin sulfate. declared November 13, 2002, publ. 07/29/2004
20. Tat S.K., Pelletier J.P., Mineau F., Duval N., Martel-Pelletier J. Variable effects of 3 different chondroitin sulfate compounds on human osteoarthritic cartilage/chondrocytes: relevance of purity and production process. J Rheumatol. 2010 Mar; 37(3): 656-64.20. Tat S.K., Pelletier J.P., Mineau F., Duval N., Martel-Pelletier J. Variable effects of 3 different chondroitin sulfate compounds on human osteoarthritic cartilage / chondrocytes: relevance of purity and production process. J Rheumatol. 2010 Mar; 37 (3): 656-64.
21. Lignot B, Lahogue V, Bourseau P. 2003. Enzymatic extraction of chondroitin sulfate from skate cartilage and concentration-desalting by ultrafiltration. J Biotechnol 103: (281-284).21. Lignot B, Lahogue V, Bourseau P. 2003. Enzymatic extraction of chondroitin sulfate from skate cartilage and concentration-desalting by ultrafiltration. J Biotechnol 103: (281-284).
22. Nakashima A. Removal of Pyrogen from Commercial Chondroitin Sulfate. Bulletin of Fukuoka Women's Junior College №9. 1975-03-31. P.1-6.22. Nakashima A. Removal of Pyrogen from Commercial Chondroitin Sulfate. Bulletin of Fukuoka Women's Junior College No. 9. 1975-03-31. P.1-6.
23. Barnhill JG, Fye CL, Williams DW, Reda DJ, Harris CL, Clegg DO. Chondroitin product selection for the glucosamine/chondroitin arthritis intervention trial. // J Am Pharm Assoc (2003). 2006 Jan-Feb; 46(1): 14-24.23. Barnhill JG, Fye CL, Williams DW, Reda DJ, Harris CL, Clegg DO. Chondroitin product selection for the glucosamine / chondroitin arthritis intervention trial. // J Am Pharm Assoc (2003). 2006 Jan-Feb; 46 (1): 14-24.
24. Chondroitin Sulfate. Monography №2064. European Pharmacopoeia 6.0. P.1525-1527.24. Chondroitin Sulfate. Monography No. 2064. European Pharmacopoeia 6.0. P.1525-1527.
25. Dietary Supplements: Chondroitin Sulfate Sodium. USP31-NF26. P.921.25. Dietary Supplements: Chondroitin Sulfate Sodium. USP31-NF26. P.921.
26. Official monography «Sodium Chondroitin Sulphate». №04805. Japanese «Japonica» (JSPI 1991).26. Official monography "Sodium Chondroitin Sulfate". No. 04805. Japanese "Japonica" (JSPI 1991).
27. Clegg DO, Reda DJ, Harris CL, et al. Glucosamine, chondroitin sulfate, and the two in combination for painful knee osteoarthritis. // N Engl J Med. 2006 Feb 23; 354(8): 795-808.27. Clegg DO, Reda DJ, Harris CL, et al. Glucosamine, chondroitin sulfate, and the two in combination for painful knee osteoarthritis. // N Engl J Med. 2006 Feb 23; 354 (8): 795-808.
28. Патент RU 2200018 C1. Хлябич Г.Н.; Пак М.Ф.; Бондарева Л.Н.; Пак Т.В.; Персанова Л.В.; Колдышев А.Е.; Кондратьев B.C. Способ приготовления инъекционной формы препарата хондроитинсульфата. Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов, опубл. 10.03.2003 г.28. Patent RU 2200018 C1. Khlyabich G.N .; Pak M.F .; Bondareva L.N .; Pak T.V .; Persanova L.V .; Koldyshev A.E .; Kondratiev B.C. A method of preparing an injection form of a chondroitin sulfate preparation. State Institute of Blood Substitutes and Medicines, publ. 03/10/2003
29. Патент RU 282437 C1. Васюков С.Е., Нестерова Е.И., Александрова Т.Ю., Маслова О.Ю., Есенкова Н.Е. Средство для лечения болезней суставов. Нижегородский химико-фармацевтический завод, опубл. 27.08.2006 г.29. Patent RU 282437 C1. Vasyukov S.E., Nesterova E.I., Alexandrova T.Yu., Maslova O.Yu., Esenkova N.E. Means for the treatment of joint diseases. Nizhny Novgorod Chemical-Pharmaceutical Plant, publ. August 27, 2006
30. Патент RU 2021812 C1. Коростин В.И.; Меркишева З.А.; Белова В.В.; Кирьянов Н.А.; Васюков С.Е.; Фиалкова М.А.; Новохатский А.С., Хлябич Г.Н. Средство для лечения артрологических заболеваний. Всесоюзный научно-исследовательский институт технологии кровезаменителей и гормональных препаратов, опубл. 30.10.1994 г.30. Patent RU 2021812 C1. Korostin V.I .; Merkisheva Z.A .; Belova V.V .; Kiryanov N.A .; Vasyukov S.E .; Fialkova M.A .; Novokhatsky A.S., Khlyabich G.N. Means for the treatment of arthrological diseases. All-Union Scientific Research Institute of the technology of blood substitutes and hormonal preparations, publ. 10/30/1994 g.
31. Патент RU 275190 C1. Васюков С.Е., Нестерова Е.И., Александрова Т.Ю., Маслова О.Ю., Моругина Л.В. Средство для лечения болезней суставов. Нижегородский химико-фармацевтический завод, опубл. 27.04.2006 г.31. Patent RU 275190 C1. Vasyukov S.E., Nesterova E.I., Alexandrova T.Yu., Maslova O.Yu., Morugina L.V. Means for the treatment of joint diseases. Nizhny Novgorod Chemical-Pharmaceutical Plant, publ. 04/27/2006
32. Brandt K.D. Management of Osteoarthritis. In: Kelley's Textbook of Rheumatology, 6th ed., 2001, 1419-32.32. Brandt K.D. Management of Osteoarthritis. In: Kelley's Textbook of Rheumatology, 6th ed., 2001, 1419-32.
33. Pavelka К., Gatterova J., Gollerova V. et al. A 5-year randomized controlled, doubleblind study of glycosaminoglycan polysulphuric acid complex (Rumalon) as a structure modifying therapy in osteoarthritis of the hip and knee. Osteoarthritis Cartilage 2000; 8(5): 335-42.33. Pavelka K., Gatterova J., Gollerova V. et al. A 5-year randomized controlled, doubleblind study of glycosaminoglycan polysulphuric acid complex (Rumalon) as a structure modifying therapy in osteoarthritis of the hip and knee. Osteoarthritis Cartilage 2000; 8 (5): 335-42.
34. Голубев Г.Ш., Кригштейн О.С. Оценка доказательств эффективности средств, претендующих называться «структурно-модифицирующими препаратами», 2000-2007 гг. Клиническая фармакология и фармакоэкономика. 2008; 1: 55-88.34. Golubev G.Sh., Krigshtein O.S. Evaluation of evidence of the effectiveness of funds claiming to be called "structurally modifying drugs", 2000-2007. Clinical pharmacology and pharmacoeconomics. 2008; 1: 55-88.
35. Заявка RU 2004104617. Полунина Е.Е; Знаменский Ю.В; Касаткин С.А. Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей. ОАО «Биосинтез», опубл. 27.07.2005 г.35. Application RU 2004104617. Polunina E.E; Znamensky Yu.V; Kasatkin S.A. The method of separation of chondroitin sulfate from animal tissues. OJSC "Biosynthesis", publ. 07/27/2005
36. US 524066 WOLF KARL H [DE]. Process for the preparation of injectable chondroitin polysulfate. заяв. 11.05.1981 г. опубл. 18.06.1985 г.36. US 524066 WOLF KARL H [DE]. Process for the preparation of injectable chondroitin polysulfate. application 05/11/1981 publ. 06/18/1985
37. Патент RU 2061485 Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей. Васюков С.Е., Кирьянов И.А., Лукина И.В., опубл. 10.06.1996 г.37. Patent RU 2061485 A method for the isolation of chondroitin sulfate from animal tissues. Vasyukov S.E., Kiryanov I.A., Lukina I.V., publ. 06/10/1996
38. S. Harano, Yo Akimoto, and M. Ishigami, Carbohydr. Res. ~ 41, 323 (1975), Methods of synthesis and technology of production of drugs production, properties and use of chondroitin sulfate.38. S. Harano, Yo Akimoto, and M. Ishigami, Carbohydr. Res. ~ 41, 323 (1975), Methods of synthesis and technology of production of drugs production, properties and use of chondroitin sulfate.
39. CN 101358220. Qingrong Wang, Yinghua Fu, Cheng Luo, Minghu Yang. Method for extracting calcium chondroitin sulfate in shark cartilage, заявл. 25.09.2008 г., опубл. 04.02.2009 г.39. CN 101358220. Qingrong Wang, Yinghua Fu, Cheng Luo, Minghu Yang. Method for extracting calcium chondroitin sulfate in shark cartilage, claimed September 25, 2008, publ. 02/04/2009
40. CN 101215339 Zhang Guozhi. Method for purifying sodium chondroitin sulfate. заявл. 11.01.2008 г. опубл. 09.07.2008 г.40. CN 101215339 Zhang Guozhi. Method for purifying sodium chondroitin sulfate. declared January 11, 2008 publ. 07/09/2008
41. CN 101348814 Huang, Wentano Yu, Tan, Yuanyuan Long. Method for improving chondroitin sulfate quality by protein isoelectric point, заявл. 03.09.2008 г., опубл. 21.01.2009 г.41. CN 101348814 Huang, Wentano Yu, Tan, Yuanyuan Long. Method for improving chondroitin sulfate quality by protein isoelectric point, claimed September 3, 2008, publ. 01/21/2009
42. KR 20080010201. Extract of lophiomus setigerus or chondroitin sulfate isolated, preparation method and cartilage articulation protection composition containing thereof. Kim Yeong Shik, Sim Jun Coo, Im Rang. опубл. 30.01.2008 г.42. KR 20080010201. Extract of lophiomus setigerus or chondroitin sulfate isolated, preparation method and cartilage articulation protection composition containing it. Kim Yeong Shik, Sim Jun Coo, Im Rang. publ. 01/30/2008
43. US 2006/0014256. ETO TADASHI [JP]. Sodium chondroitin sulfate, chondroitin-sulfate-containing material and processes for producing the same, опубл. 19.01.2006 г.43. US 2006/0014256. ETO TADASHI [JP]. Sodium chondroitin sulfate, chondroitin-sulfate-containing material and processes for producing the same, publ. 01/19/2006
44. BE 893097. WOLF K.H. Injectable chondroitin polysulfate. Опубл. 30.08.1982 г.44. BE 893097. WOLF K.H. Injectable chondroitin polysulfate. Publ. 08/30/1982
45. Federal Republic of Germany Patent No. 2037942, 1970; Chem. Abstr., 7-6, No. 37423 (1972)45. Federal Republic of Germany Patent No. 2037942, 1970; Chem. Abstr., 7-6, No. 37,423 (1972)
46. Иванкин А.Н., Васюков С.Е., Панов В.П. Получение, свойства и применение хондроитинсульфатов. Химико-фармацевтический журнал, 1985, т.19 №3 с.192-202.46. Ivankin A.N., Vasyukov S.E., Panov V.P. Obtaining, properties and application of chondroitin sulfates. Chemical Pharmaceuticals Journal, 1985, Vol. 19 No. 3, pp. 192-202.
47. Nakashima A. Removal of Pyrogen from Commercial Chondroitin Sulfate. Bulletin of Fukuoka Women's Junior College №9. 1975-03-31. P.1-6.47. Nakashima A. Removal of Pyrogen from Commercial Chondroitin Sulfate. Bulletin of Fukuoka Women's Junior College No. 9. 1975-03-31. P.1-6.
48. J. Einbinder and M. Schubert, Separation of chondroitin sulfate from cartilage. J Biol Chem., 1950 Aug; 185(2): 725-730.48. J. Einbinder and M. Schubert, Separation of chondroitin sulfate from cartilage. J Biol Chem., 1950 Aug; 185 (2): 725-730.
49 Guidance for Industry. Q3C Impurities: Residual Solvents. FDA. CDER. CBER. ICH. 1997. P.1-16.49 Guidance for Industry. Q3C Impurities: Residual Solvents. FDA CDER CBER. ICH. 1997. P. 1-16.
50. JP 2005336352 (A) TOCUYAMA CORP. Method for producing Chondroitin sulfate. опубл. 08.12.2005 г.50. JP 2005336352 (A) TOCUYAMA CORP. Method for producing Chondroitin sulfate. publ. 12/08/2005
51. JP 2006104461 (A) Koyama Hiroshi, Imamura Kimihiro, Koshinbo Akira, Onuki Edzy. Method for removing impurity in glycosaminoglycan fraction, опубл 20.04.2006 г.51. JP 2006104461 (A) Koyama Hiroshi, Imamura Kimihiro, Koshinbo Akira, Onuki Edzy. Method for removing impurity in glycosaminoglycan fraction, publ. 04/20/2006
52. Бачурин П.Я., Смирнов В.А. Физико-химические основы обработки водочной сортировки активным углем. -M.: Пищевая промышленность, 1975.52. Bachurin P.Ya., Smirnov V.A. Physicochemical principles of processing of vodka sorting by activated carbon. -M.: Food Industry, 1975.
53. Порцель М.Н. Разработка технологии получения хондроитинсульфата из гидробионтов Баренцева моря и изучение его физико-химических свойств. Автореф. диссертации на соискание ученой степени кандидата техн. наук. Мурманск, 2011 г.53. Porcel M.N. Development of technology for producing chondroitin sulfate from hydrobionts of the Barents Sea and the study of its physicochemical properties. Abstract. dissertations for the degree of candidate of technical. sciences. Murmansk, 2011
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013119070/15A RU2545689C2 (en) | 2013-04-09 | 2013-04-09 | Method for preparing injectable dosage form of high-purity drug preparation for treating degenerative diseases of locomotor apparatus |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013119070/15A RU2545689C2 (en) | 2013-04-09 | 2013-04-09 | Method for preparing injectable dosage form of high-purity drug preparation for treating degenerative diseases of locomotor apparatus |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013119070A RU2013119070A (en) | 2014-10-20 |
| RU2545689C2 true RU2545689C2 (en) | 2015-04-10 |
Family
ID=53296656
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013119070/15A RU2545689C2 (en) | 2013-04-09 | 2013-04-09 | Method for preparing injectable dosage form of high-purity drug preparation for treating degenerative diseases of locomotor apparatus |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2545689C2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2612014C1 (en) * | 2015-10-19 | 2017-03-01 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕД-фарма" | Agent for treatment of arthrologic diseases |
| RU2743274C2 (en) * | 2015-11-10 | 2021-02-16 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕД-фарма" | Pharmaceutical preparation for treatment of arthrological diseases |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2200018C1 (en) * | 2001-12-26 | 2003-03-10 | Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов | Method of preparing injection form of preparation chondroitin sulfate |
| RU2343932C1 (en) * | 2007-03-28 | 2009-01-20 | Институт нефтехимии и катализа РАН | Production method of low-water-soluble hard materials based on carboxyl-containing polysaccharides modified with aminosalicylic acid |
-
2013
- 2013-04-09 RU RU2013119070/15A patent/RU2545689C2/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2200018C1 (en) * | 2001-12-26 | 2003-03-10 | Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов | Method of preparing injection form of preparation chondroitin sulfate |
| RU2343932C1 (en) * | 2007-03-28 | 2009-01-20 | Институт нефтехимии и катализа РАН | Production method of low-water-soluble hard materials based on carboxyl-containing polysaccharides modified with aminosalicylic acid |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2612014C1 (en) * | 2015-10-19 | 2017-03-01 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕД-фарма" | Agent for treatment of arthrologic diseases |
| WO2017069660A1 (en) * | 2015-10-19 | 2017-04-27 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕД-фарма" | Agent for treating arthrological diseases |
| EA031260B1 (en) * | 2015-10-19 | 2018-12-28 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕД-фарма" | Agent for treating arthrological diseases |
| RU2743274C2 (en) * | 2015-11-10 | 2021-02-16 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕД-фарма" | Pharmaceutical preparation for treatment of arthrological diseases |
| RU2743274C9 (en) * | 2015-11-10 | 2021-04-08 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕД-фарма" | Pharmaceutical preparation for treatment of arthrological diseases |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013119070A (en) | 2014-10-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2501811C2 (en) | Method for sterilisation by filtration of diluted viscoelastic biopolymers (versions) | |
| KR102391110B1 (en) | Process for the preparation and purification of sodium salt of hyaluronic acid | |
| CA2846598C (en) | Treatment of degenerative joint disease | |
| RU2686088C2 (en) | Method for treating seaweed extract, extract, pharmaceutical composition, bio-material, treatment method, use of extract and composition | |
| RU2545689C2 (en) | Method for preparing injectable dosage form of high-purity drug preparation for treating degenerative diseases of locomotor apparatus | |
| ES2254645T3 (en) | HIGHLY SULFATED K5 POLISACARIDO DERIVATIVES AND THEIR PREPARATION | |
| AU2011369262B2 (en) | Shark-like chondroitin sulphate and process for the preparation thereof | |
| RU2132688C1 (en) | Method of preparing biologically active preparations from embryonal tissues | |
| EP3718571A1 (en) | Compositions | |
| US11179414B2 (en) | Method for producing protease degradation composition | |
| RU99124561A (en) | METHOD OF PREVENTION AND TREATMENT OF OSTEOARTHROSIS, MEANS FOR ITS IMPLEMENTATION AND METHOD OF OBTAINING MEANS FOR THE TREATMENT OF OSTEOARTHROSIS | |
| EP1921091B1 (en) | Process for the preparation of esters of the diacerein with hyaluronic acid and pharmaceutical preparations containing them | |
| JP5016830B2 (en) | Method for producing purified peptide | |
| JP4528898B2 (en) | Chemokine receptor CCR10 expression inducer | |
| KR101627014B1 (en) | Hyaluronic acid purification method | |
| JP6198867B2 (en) | Wound treatment | |
| WO2014048406A1 (en) | Enzyme hyaluronan-lyase, method of production thereof, use thereof and method of preparation of low-molecular hyaluronan | |
| RU2559522C2 (en) | Inhalation drug form of polysialylated human doexyribonuclease i and method of obtaining thereof | |
| CN1939533A (en) | Injection sarcosine peptide aglycone powdery injection and its making method | |
| RU2302868C1 (en) | Agent normalizing kidney function and method for its preparing | |
| JP2003335682A (en) | Nutrition supplementary agent for promoting production of chondrocyte proteoglycan | |
| ITMI20082015A1 (en) | HYALURONIC ACID WITH LOW ENDOTOSSINE CONTENT AND HIGH CAPACITY OF WATER ABSORPTION. | |
| HK40001751B (en) | Process for the preparation and purification of the sodium salt of hyaluronic acid | |
| Brykova et al. | Development of the downstream process in the production of the recombinant histone H1. 3 variant | |
| HK40001751A (en) | Process for the preparation and purification of the sodium salt of hyaluronic acid |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180716 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |