[go: up one dir, main page]

RU2430737C2 - Экстракт семейства диоскорейных (dioscoreaceae) и содержащая его композиция для профилактики или лечения периферической невропатии - Google Patents

Экстракт семейства диоскорейных (dioscoreaceae) и содержащая его композиция для профилактики или лечения периферической невропатии Download PDF

Info

Publication number
RU2430737C2
RU2430737C2 RU2008115631/15A RU2008115631A RU2430737C2 RU 2430737 C2 RU2430737 C2 RU 2430737C2 RU 2008115631/15 A RU2008115631/15 A RU 2008115631/15A RU 2008115631 A RU2008115631 A RU 2008115631A RU 2430737 C2 RU2430737 C2 RU 2430737C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
extract
dioscorea
compound
dioscoreaceae
water
Prior art date
Application number
RU2008115631/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2008115631A (ru
Inventor
Сон-Ю КИМ (KR)
Сон-Ю КИМ
Тон-Хо КАН (KR)
Тон-Хо КАН
Чи-Хо ПАК (KR)
Чи-Хо ПАК
Original Assignee
Сон-Ю КИМ
Тон-Хо КАН
Чи-Хо ПАК
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сон-Ю КИМ, Тон-Хо КАН, Чи-Хо ПАК filed Critical Сон-Ю КИМ
Publication of RU2008115631A publication Critical patent/RU2008115631A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2430737C2 publication Critical patent/RU2430737C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/894—Dioscoreaceae (Yam family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству для лечения или профилактики периферической невропатии. Экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) для профилактики или лечения периферической невропатии, полученный путем экстракции корня растения семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) первым экстракционным растворителем, выбранным из группы, состоящей из воды, спирта C1-C4 и смеси воды со спиртом C1-C4. Фармацевтическая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии. Пищевая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии. Вышеописанные средства эффективны для лечения или профилактики периферической невропатии. 3 н. и 5 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл.

Description

Область изобретения
Настоящее изобретение относится к экстракту семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) для профилактики или лечения периферической невропатии, а также к фармацевтической композиции или пищевой композиции, содержащим данный экстракт либо соединение, извлеченное из данного экстракта.
Уровень техники
Невропатия - это заболевание, вызванное структурными или функциональными нарушениями нервной системы. Нервная система подразделяется на центральную нервную систему, распределенную по головному и спинному мозгу и участвующую в контроле их функций, а также периферическую нервную систему, распределенную почти по всем органам, за исключением головного и спинного мозга, и участвующую в контроле функций этих органов.
Периферическая нервная система подразделяется на двигательную нервную систему, сенсорную нервную систему и вегетативную нервную систему. Периферический нерв, аксоны которого распространяются за пределы головного и спинного мозга и заканчиваются в туловище, руках и ногах, передает ощущения из рук и ног в центральную нервную систему (головной и спинной мозг), а также передает мускулам команды центральной нервной системы.
Периферический нерв может быть поврежден по разным причинам; в совокупности это явление называется периферической невропатией. Термин «мононевропатия» относится к случаю, когда поврежден один периферический нерв, а термин «множественная невропатия» - к случаю, когда в одинаковой степени повреждены многие периферические нервы. Мононевропатия обычно возникает, когда один периферический нерв аномально сжимается или травмируется на протяжении к концам рук или ног. Мононевропатию можно лечить путем оперативного вмешательства.
Множественная невропатия может быть вызвана различными причинами, такими как заболевания обмена веществ (например, диабет, почечная недостаточность, гипотиреоз), действие лекарств (например, противораковые агенты, противотуберкулезные лекарства) или отравление токсичными соединениями (например, Рb, органические растворители), нарушение питания (например, недостаток витаминов, алкоголизм), нарушения в соединительных тканях (например, ревматоидный артрит, системная красная волчанка), воспалительные заболевания (синдром Гийена-Барре) либо генетически предопределенная невропатия. Кроме того, множественная невропатия может быть вызвана раковыми заболеваниями.
До настоящего времени невропатию лечили лекарствами, используемыми при симптоматической терапии, которая действует только на симптомы; фундаментальные средства лечения для невропатии практически отсутствуют. Управлением по контролю продуктов питания и лекарственных средств США (FDA) был одобрен лишь эпалрестат (epalrestat) - ингибитор альдозоредуктазы - для лечения диабетической периферической невропатии, одной из множественных невропатии, однако эпалрестат не используется из-за слабого терапевтического действия (Foster DW., Harrison's Principles of Internal Medicine 13, p.1979, 1999; Stephen LD, Applied Therapeutics: the clinical use of drugs. 6, p.48.1-48.62, 1996).
Белок, влияющий на рост, дифференциацию и выживаемость нейронов в центральной нервной системе (ЦНС) и периферической нервной системе (ПНС), собирательно называется нейротрофическим фактором (НФ), и он является одним из факторов контроля нейронов, регулирующим рост, дифференциацию и гибель нейронов. Примерами НФ являются вырабатываемый головным мозгом нейротрофический фактор (BDNF), нейротрофин-3 (NT-3), NT-4 и NT-5. Эти НФ синтезируются разными зонами и имеют различную дифференциацию, различную экспрессию и различные участки воздействия.
Фактор роста нервов (ФРН), один из НФ, ингибирует перерождение и гибель нейронов, чтобы предотвратить уменьшение количества нейронов, защитить нейроны от повреждений и сохранить источники зрелых нейронов (Hefti F.J. Neurosci., 6(8), pp.2155-2162, 1986; Levi-Montalcini R., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 46, pp.384-391, 1960). Известно, что при нормальном развитии нервной системы около 50% нейронов в процессе роста удаляются в результате гибели клеток (Raff M.C., et al., Science, 262 (5134), pp.695-70, 1993), и что ФРН, которые выделяет клетка-мишень, определяют выживаемость нейронов. Для выживания, роста и дифференциации нейронов в нормальном состоянии обязательно требуется фактор роста типа ФРН.
Осуществимость ФРН привела к разработке рекомбинантного человеческого фактора роста нервов для лечения диабетической невропатии, являющейся одной из множественных невропатий. Однако рекомбинантный человеческий фактор роста нервов все же не является удовлетворительным с точки зрения безопасности и эффективности (Apfel SC, et al., Journal of American Medical Association 284(17), pp.2215-2221, 2000).
Раскрытие изобретения
Техническая задача
Настоящее изобретение обеспечивает травяные экстракты и выделенные из них соединения, пригодные для профилактики или лечения периферической невропатии, вызванной различными причинами.
То есть настоящее изобретение обеспечивает экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) для профилактики или лечения периферической невропатии.
Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтическую композицию или пищевую композицию, содержащие экстракт или соединение, выделенное из этого экстракта, в качестве активного компонента.
Техническое решение
Согласно одному аспекту настоящего изобретения обеспечивается экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) для профилактики или лечения периферической невропатии, причем семейство диоскорейных (Dioscoreaceae) представляет собой, по меньшей мере, один вид растений, выбранный из группы, состоящей из Dioscorea nipponica, Dioscorea septemloba, Dioscorea quinqueoloba, Dioscorea batatas, Dioscorea japonica, Dioscorea bulbifera, Dioscorea tokoro, Dioscorea tenuipes.
Согласно другому аспекту настоящего изобретения обеспечивается фармацевтическая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии, которая содержит терапевтически эффективное количество указанного экстракта, а также фармацевтически приемлемый носитель.
Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения обеспечивается пищевая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии, которая содержит указанный экстракт в качестве активного компонента.
Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения обеспечивается фармацевтическая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии, которая содержит терапевтически эффективное количество соединения формулы 1 или его соли, а также фармацевтически приемлемый носитель.
[Формула 1]
Figure 00000001
где R - атом водорода, алкильная группа C1-C4 или сахарид.
Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения обеспечивается пищевая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии, которая содержит соединение формулы 1 или его соль в качестве активного компонента.
Преимущества
Экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) и/или соединение, выделенное из указанного экстракта, стимулирует эндогенный фактора роста нервов в организме, поэтому он может использоваться в широком диапазоне приложений для профилактики или лечения периферической невропатии.
Описание графических материалов
На фиг.1 и 2 показано влияние соединения, выделенного из экстракта в соответствии с примером осуществления настоящего изобретения, на вырастание аксонов.
Фиг.3 представляет собой график, иллюстрирующий изменение уровня фактора роста нервов (ФРН) в сыворотке крови нормальной мыши в результате введения соединения, выделенного из экстракта в соответствии с примером осуществления настоящего изобретения.
Фиг.4 представляет собой график, иллюстрирующий изменение уровня ФРН в сыворотке крови мыши с индуцированным диабетом в результате введения экстракта в соответствии с примером осуществления настоящего изобретения, и соединения, выделенного из этого экстракта.
На фиг.5 и 6 показано воздействие соединения, выделенного из экстракта в соответствии с примером осуществления настоящего изобретения, на скорость передачи по двигательному нерву и сенсорному нерву в седалищном нерве мышей с индуцированным диабетом (Фиг.5: лечение с помощью DG в течение 1 месяца, Фиг.6: лечение с помощью DG в течение 2 месяцев).
Фиг.7 представляет собой график, иллюстрирующий изменение уровня ФРН в седалищном нерве мыши с индуцированным диабетом в результате введения соединения, выделенного из экстракта соответствии с примером осуществления настоящего изобретения.
Фиг.8 представляет собой график, иллюстрирующий изменение уровня сорбита в седалищном нерве мыши с индуцированным диабетом в результате введения соединения, выделенного из экстракта соответствии с примером осуществления настоящего изобретения.
На фиг.9 представлены изображения, иллюстрирующие гистологические изменения в седалищном нерве мыши с индуцированным диабетом в результате введения экстракта соответствии с примером осуществления настоящего изобретения и соединения, выделенного из этого экстракта.
ЛУЧШИЙ ВАРИАНТ
В данном описании термин «периферическая невропатия» относится к состоянию периферических нервов (двигательных нервов, сенсорных нервов и вегетативных нервов), поврежденных по той или иной причине. Периферическую невропатию можно подразделить на мононевропатию и полиневропатию (которую также называют множественной невропатией). Множественная невропатия включает любую невропатию, вызванную заболеваниями обмена веществ (например, диабетом, почечной недостаточностью, гипотиреозом), действием лекарств (например, противораковых агентов, противотуберкулезных лекарств) или отравлением токсичными соединениями (например, Pb, органическими растворителями), нарушением питания (например, недостатком витаминов, алкоголизмом), нарушениями в соединительных тканях (например, ревматоидным артритом, системной красной волчанкой), воспалительными заболеваниями (синдромом Гийена-Барре) либо генетически предопределенной невропатией. Кроме того, множественная невропатия может включать невропатию, вызванную генетическими факторами и раковыми заболеваниями.
Экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) в соответствии с примером осуществления настоящего изобретения или соединение, выделенное из указанного экстракта, вызывает вырастание аксонов и увеличивает количество вырабатываемого эндогенного фактора роста нервов, что приводит к эффективной дифференциации, защите и реиннервации периферической нервной системы. В частности, указанные экстракт и/или соединение допускают пероральное введение, что способствует соблюдению пациентами режима и схемы лечения.
Настоящее изобретение обеспечивает экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) для профилактики или лечения периферической невропатии.
Семейство диоскорейных (Dioscoreaceae) - это, по меньшей мере, один вид растений, выбранный из Dioscorea nipponica, Dioscorea septemloba, Dioscorea quinqueoloba, Dioscorea batatas, Dioscorea japonica, Dioscorea bulbifera, Dioscorea tokoro и Dioscorea tenuipes. Предпочтительно, семейство диоскорейных (Dioscoreaceae) представляет собой Dioscorea nipponica, Dioscorea quinqueoloba и/или Dioscorea tokoro. Более предпочтительно, семейство диоскорейных (Dioscoreaceae) представлено Dioscorea nipponica.
Экстракт в соответствии с настоящим изобретением может быть получен путем процесса экстракции, который включает экстрагирование цельного растения семейства диоскорейных (Dioscoreaceae), корня либо надземной части (например, лист или стебель) при помощи экстракционного растворителя (первого экстракционного растворителя), выбранного из группы, состоящей из воды, спирта С1-С4 и смеси воды со спиртом C1-C4. Например, экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) может быть получен путем экстрагирования корня семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) первым экстракционным растворителем. Первый экстракционный растворитель может представлять собой смешанный растворитель из воды и метанола либо смешанный растворитель из воды и этанола.
В процессе экстракции цельное растение семейства диоскорейных (Dioscoreaceae), корень либо надземную часть, предпочтительно корень семейства диоскорейных (Dioscoreaceae), разрезают на маленькие куски и затем экстрагируют первым экстракционным растворителем. На этом этапе количество первого экстракционного растворителя может быть в 1-20 раз, предпочтительно в 3-10 раз, больше, чем количество семейства диоскорейных (Dioscoreaceae). Первый экстракционный растворитель может представлять собой смешанный растворитель из воды и метанола (например, раствор метанола концентрации приблизительно 85%) либо смешанный растворитель из воды и этанола (например, раствор этанола концентрации приблизительно 85%). Экстракция не зависит от температуры и может проводиться в различных температурных диапазонах, например от 15°С до 100°С. Указанная экстракция может осуществляться методами холодной экстракции, горячей экстракции, экстракции сверхкритическим флюидом, центробежной экстракции, ультразвуковой экстракции либо экстракции с обратным холодильником. Продолжительность экстракции может варьироваться в зависимости от метода экстракции. Например, экстракция может осуществляться однократно либо многократно приблизительно в течение от 1 часа до 10 суток. Предпочтительно, экстракция может осуществляться 2 или 3 раза при комнатной температуре в течение приблизительно 2 дней с использованием первой экстракции. Экстракт, полученный путем экстрагирования первым экстракционным растворителем, может быть в виде жидкости, примеси из которой удаляют обычным методом, например путем фильтрования, либо в виде порошка, полученного путем концентрирования жидкого экстракта при пониженном давлении или его высушивания традиционным методом.
Кроме того, при необходимости процесс экстракции может дополнительно включать получение фракции, имеющей более высокое содержание активных компонентов. То есть процесс экстракции дополнительно включает диспергирование экстракта, полученного путем экстрагирования первым экстракционным растворителем, в воде, и экстрагирование полученного раствора водонасыщенным спиртом C1-C4 (второй экстракционный растворитель), что повышает содержание активных компонентов в полученном экстракте.
При диспергировании в воде экстракта, полученного путем экстрагирования первым экстракционным растворителем, в воде может быть диспергирована непосредственно жидкая форма, полученная экстрагированием первым экстракционным растворителем, либо порошковая форма, полученная путем концентрирования жидкого экстракта при пониженном давлении и/или высушивания жидкого экстракта традиционным методом.
В качестве водонасыщенного спирта C1-C4 (второй экстракционный растворитель) может быть использован водонасыщенный бутанол.
В своем объеме настоящее изобретение включает состав, состоящий из соединения, выделенного из экстракта, т.е. стероидный сапонин или стероидный сапогенин. То есть настоящее изобретение включает фармацевтическую композицию для профилактики или лечения периферической невропатии, содержащую терапевтически эффективное количество соединения формулы 1 или его соли, а также фармацевтически приемлемый носитель.
[Формула 1]
Figure 00000002
где R - атом водорода, алкильная группа C1-C4 или сахарид.
В соединении формулы 1 радикал R может представлять собой водород или метил, предпочтительно водород. Иначе говоря, соединение формулы 1 может представлять собой 3-β,25R-спирост-5-ен-3-ол.
Сахарид может представлять собой моносахарид, дисахарид или полисахарид, такой как глюкоза, фруктоза, манноза, галактоза, рибоза, целлюлоза, гликоген, сахароза, мальтоза и лактоза.
Соль соединения формулы 1 может представлять собой образованную присоединением широко распространенной неорганической и/или органической кислоты соль, полученную из соединениий стероидных сапонина или сапогенина. Примеры соли соединения формулы 1 включают соли, раскрытые в выложенной международной патентной публикации №WO 2003/082893. Эти соли могут быть получены in situ в процессе окончательного отделения и очистки соединения. В частности, соль, образованная присоединением кислоты, может быть получена путем реакции очищенного соединения в виде свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой с последующим отделением полученной соли (см. S.M.Berge, et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sci, 66: p.1-19 (1977)). Выложенная международная патентная публикация №WO 2003/082893 и статья M.Berge, et al. в журнале используются в настоящем изобретении в качестве ссылок. Соль, образованная присоединением основания, может быть получена путем реакции очищенного соединения в виде кислоты с подходящим органическим или неорганическим основанием и отделения полученной соли. Соль, образованная присоединением основания, может представлять собой фармацевтически приемлемую соль металла или амина. Соль, образованная присоединением кислоты, может представлять собой соль, полученную из одной из следующих кислот: соляная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и азотная кислота. Соль, образованная присоединением основания, может представлять собой соль, полученную из одного из следующих оснований: гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония.
Соединение формулы 1 может быть выделено из экстракта в соответствии с примером осуществления настоящего изобретения, синтезировано с использованием известного метода (см. Herbert О. House, Modern Synthetic Reactions, The Benjamin Cummings Publishing Company, 1972) либо приобретено (Sigma Co., США).
Способ выделения соединения формулы 1 из экстракта может включать процесс кислотного гидролиза и процесс перекристаллизации с использованием экстракта, полученного согласно примеру осуществления настоящего изобретения (например, экстракта, полученного с использованием первого экстракционного растворителя и второго экстракционного растворителя). Например, способ выделения соединения формулы 1 из экстракта может включать гидролиз кислотой, например 2,5 н. соляной кислотой, при температуре 50-150°С, предпочтительно приблизительно 94°С, в течение от 30 минут до 3 суток, предпочтительно приблизительно 4 часов; экстрагирование полученного продукта гидролиза (т.е. агликонового сапогенина) органическим растворителем, таким как хлороформ, ацетон, бензол или ксилол, в течение 1-60 минут, предпочтительно приблизительно 15 минут, и последующее отделение органического слоя; при необходимости - концентрирование отделенного органического слоя при температуре 10-100°С, предпочтительно 30-35°С; перекристаллизацию органического слоя или концентрированного раствора органического слоя спиртом С1-С4 или раствором спирта С1-С4 (например, 95%-ным раствором этанола); и промывку полученного осадка водой при необходимости и перекристаллизацию ацетоном.
Настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию для профилактики или лечения периферической невропатии, содержащую терапевтически эффективное количество экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1 или его соли, а также фармацевтически приемлемый носитель.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению включает фармацевтически приемлемый носитель и может быть включена в рецептуру лекарственной формы для перорального приема, лекарственной формы для наружного применения, суппозитория или стерильного раствора для инъекций, например в виде порошков, гранул, таблеток, капсул, суспензий, эмульсий, сиропов или аэрозолей. Фармацевтически приемлемый носитель может представлять собой лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, гуммиарабик, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния или минеральное масло. Фармацевтическая композиция может дополнительно включать разбавитель или заполнитель, такие как наполнитель, расширитель, связующее, увлажнитель, разрыхлитель или поверхностно-активное вещество. Твердый состав для перорального приема может представлять собой таблетку, пилюлю, порошок, гранулу или капсулу. Такие твердые составы могут включать, по меньшей мере, один заполнитель, выбранный, например, из следующих: крахмал, карбонат кальция, сахароза, лактоза и желатин. Кроме того, такие твердые составы могут дополнительно включать скользящее вещество, такое как стеарат магния или тальк. Жидкий состав для перорального приема может представлять собой суспензию, раствор, эмульсию или сироп. Кроме того, жидкий состав для перорального приема может дополнительно включать: разбавитель, такой как вода, жидкий парафин; увлажнитель; подсластитель; отдушку или консервант. Состав для парентерального введения может представлять собой стерильный водный раствор, неводный раствор, суспензию, эмульсию, лиофилизованный состав или суппозиторий. Неводными растворителями или суспендирующими агентами могут быть пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, натуральное масло, такое как оливковое масло, или инъецируемые эфиры, например этилолеат. В качестве основы для суппозиториев могут применяться витепсол, макрогол, твин 61, масло какао, лауриновое масло, глицерожелатин.
В фармацевтической композиции по настоящему изобретению дозировка экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1 может варьироваться в зависимости от состояния пациента или массы его тела, серьезности заболевания, лекарственных форм, путей введения и продолжительности введения, и может быть должным образом средним специалистом. Например, экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединение формулы 1 может применяться в дозировке 0,0001-1000 мг/кг, предпочтительно 0,001-1000 мг/кг, в сутки. Прием фармацевтической композиции может производиться один или несколько раз в сутки. Доза экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1 в фармацевтической композиции по настоящему изобретению может составлять 0,001-50 мас.% в расчете на 100 мас.% фармацевтической композиции.
Фармацевтическая композиция может вводиться млекопитающим, таким как крысы, мыши, домашний скот или люди, различными путями, например перорально, ректально, внутривенно, внутримышечно, подкожно, путем внутриматочной инъекции, инъекции через твердую оболочку головного мозга, интрацеребральной или вентрикулярной инъекции.
Настоящее изобретение включает в своем объеме пищевую композицию для профилактики или лечения периферической невропатии, содержащую в качестве активного компонента экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединение формулы 1.
Пищевая композиция в соответствии с настоящим изобретением может использоваться как оздоравливающая пища. Согласно статье 6727 Закона Республики Корея об оздоравливающей пище, термин «оздоравливающая пища» относится к пище, производимой и обрабатываемой с использованием источника или компонента, оказывающего благоприятное воздействие на тело человека.
Термин «воздействие» относится к приему внутрь с целью достижения благоприятного действия на здоровье, т.е. к контролю питательных элементов с учетом структуры и функций тела человека или его физиологии.
Пищевая композиция в соответствии с настоящим изобретением может включать обычные пищевые добавки. Соответствие «пищевой добавки» требованиям определяется, в отсутствие других нормативов, с учетом стандартов и критериев соответствующего продукта согласно общим правилам кодекса о пищевых добавках и общим испытаниям, утвержденным Управлением по контролю за продуктами и лекарствами Республики Корея.
Продукты, входящие в список «кодекса о пищевых добавках», включают вещества, синтезированные химическим путем, такие как кетон, глицин, цитрат калия, никотиновая кислота, коричная кислота; натуральные добавки, такие как пигмент хурмы, экстракт лакрицы, кристаллическая целлюлоза, пигмент каоляна, гуаровая камедь; или смешанные композиции, такие как состав с L-глютаматом натрия, щелочные добавки для лапши, консерванты, состав с пигментом дегтя.
Пищевая композиция в соответствии с настоящим изобретением может включать экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединение формулы 1 в количестве 0,01-95 мас.%, предпочтительно 1-80 мас.%, в расчете на 100 мас.% пищевой композиции, с целью профилактики и/или лечения периферической невропатии. Кроме того, с целью профилактики и/или лечения периферической невропатии пищевая композиция может выпускаться и обрабатываться для получения таблеток, капсул, порошка, гранул, жидкости или пилюль.
Например, для производства оздоравливающих пищевых продуктов в форме таблеток, смесь экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1, заполнитель, связующее, разрыхлитель и другие добавки могут быть подвергнуты гранулированию традиционным методом, а затем формованию со скользящим веществом. В качестве альтернативы смесь может быть непосредственно подвергнута формованию. Кроме того, при необходимости в состав оздоравливающих пищевых продуктов в форме таблеток могут быть включены подсластители, а при необходимости оздоравливающие пищевые продукты в форме таблеток могут быть покрыты оболочкой.
Что касается оздоравливающих пищевых продуктов в форме капсул, то композиция может производиться в жестких капсулах путем наполнения традиционных жестких капсул смесью экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1 с добавкой, такой как заполнитель, либо гранулами этой смеси, либо покрытыми гранулами этой смеси; либо состав может производиться в мягких капсулах путем наполнения желатиновой основы капсулы смесью экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1 с добавкой, такой как заполнитель. При необходимости в состав для мягких капсул может входить пластификатор, такой как глицерин или сорбит, краситель и консервант.
Оздоравливающие пищевые продукты в форме пилюль могут изготавливаться путем формования смеси экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1, заполнителя, связующего и разрыхлителя подходящим методом. При необходимости оздоравливающие пищевые продукты, изготовленные в форме пилюль, могут быть покрыты белым сахаром или другими материалами для покрытия, либо могут быть покрыты крахмалом, тальком или другими материалами.
Оздоравливающие пищевые продукты в форме гранул могут изготавливаться путем гранулирования смеси экстракта семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) или соединения формулы 1, заполнителя, связующего и разрыхлителя подходящим методом. При необходимости оздоравливающие пищевые продукты, изготовленные в форме гранул, могут включать в себя ароматизатор и подсластитель.
Заполнитель, связующее, разрыхлитель, скользящее вещество, подсластитель и ароматизатор, используемые в настоящем изобретении, могут быть определены как соответствующие материалы, имеющие такое же или аналогичное назначение и раскрытые в источниках, известных в данной области (The Korean pharmacopoeia review, Moonsungsa Publication Co., Korea Pharmaceutical University Association, Fifth edition, p.33-48, 1989).
Осуществление изобретения
Настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на приводимые далее примеры. Данные примеры предназначены только для иллюстрации и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
Пример 1: Получение экстракта
Растения Dioscorea Nipponica высушили и их корни разрезали на мелкие куски. Образец массой 500 г добавили в 10 л 85%-ного раствора метанола и затем трижды экстрагировали (каждый раз по 2 часа) при комнатной температуре. Указанный процесс экстракции повторили два раза. Полученные надосадочные жидкости объединили и сконцентрировали при пониженном давлении, получив таким образом 74 г неочищенного экстракта.
Полученные 74 г неочищенного экстракта суспендировали в 1 л дистиллированной воды и добавили туда 1 л водонасыщенного бутанола, после чего образовавшийся органический слой отделили; данную процедуру повторили 5 раз. Полученные органические слои объединили и высушили при пониженном давлении. В результате получили 17 г экстракта Dioscorea Nipponica.
Пример 2: Получение экстракта
Растения Dioscorea quinqueoloba высушили и их корни разрезали на мелкие куски. Образец массой 500 г добавили в 5 л 85%-ного раствора этанола и трижды экстрагировали (каждый раз по 2 часа) при комнатной температуре. Указанный процесс экстракции повторили два раза. Полученные надосадочные жидкости объединили и сконцентрировали при пониженном давлении, получив таким образом 90 г неочищенного экстракта.
Полученные 90 г неочищенного экстракта суспендировали в 1 л дистиллированной воды и добавили туда 1 л водонасыщенного бутанола, после чего образовавшийся органический слой отделили; данную процедуру повторили 5 раз. Полученные органические слои объединили и высушили при пониженном давлении. В результате получили 26 г экстракта Dioscorea quinqueoloba.
Пример 3: Получение экстракта
Высушили растения Dioscorea tokoro и их корни разрезали на мелкие куски. Образец массой 300 г добавили в 3 л 85%-ного раствора этанола и трижды экстрагировали (каждый раз по 2 часа) при комнатной температуре. Указанный процесс экстракции повторили 2 раза. Полученные надосадочные жидкости объединили и сконцентрировали при пониженном давлении, получив таким образом 35 г неочищенного экстракта.
Полученные 35 г неочищенного экстракта суспендировали в 0,5 л дистиллированной воды и добавили туда 0,5 л водонасыщенного бутанола после чего образовавшийся органический слой отделили; данную процедуру повторили 5 раз. Полученные органические слои объединили и высушили при пониженном давлении. В результате получили 11 г экстракта Dioscorea tokoro.
Пример 4: Отделение активного соединения
1 г экстракта Dioscorea nipponica, полученного в Примере 1, подвергли гидролизу при 94°С в течение 4 ч путем добавления 10 мл 2,5 н. HCl. После этого полученный гидролизат экстрагировали хлороформом (10 мл) в течение 15 минут. Хлороформный слой отделили, профильтровали и затем сконцентрировали при пониженном давлении и температуре 30-35°С. Полученный остаток перекристаллизовали при 4°С, используя 5 мл 95%-ного раствора этанола. Перекристаллизованный осадок отфильтровали, промыли водой, перекристаллизовали при 4°С, используя 3 мл ацетона и затем отфильтровали, получив около 100 мг осадка. Осадок был идентифицирован как 3b,25R-спирост-5-ен-3-ол, представленный формулой 2.
[Формула 2]
Figure 00000003
(1) Формула: C27H42O3
(2) Молекулярная масса: 414.62
(3) Температура плавления: 204-207°С
(4) [d]25 D - 129°
(5) Данные ЯМР: см. Таблицу 1
Таблица 1
13C Химический сдвиг (δ)а 1H Химический сдвиг (δ)а
C-1 37,6-37,7 Н-1 1,60-1,70; 0,87-0,91 (м,о)
С-2 30,3-30,4 Н-2 2,00-2,03; 1,75-1,79 (м,о)
C-3 78,1-78,7 Н-3 3,81-3,90 (м, J=4,7-5,6 Гц)
С-4 38,9-39,5 Н-4 2,57-2,29 (м, J=13-14 Гц; J=5,0; 12,0 Гц)
С-5 140,9-141,1    
С-6 121,9-122,0 Н-6 5,23 - 5,26 (д, J=4,6-5,4 Гц)
С-7 32,4-32,5 Н-7 1,77-1,82; 1,41-1,46 (м,о)
С-8 31,8-31,9 Н-8 1,44-1,48 (м,о)
С-9 50,4-50,5 Н-9 0,80-0,83 (м)
С-10 37,2-37,3    
С-11 ~21,3 Н-11 1,35-1,38 (м,о)
С-12 40,0-40,1 Н-12 1,60-1,62 (м,о)
С-13 40,6-40,7    
С-14 56,8-56,8 Н-14 1,01 (м,о)
С-15 32,4-32,5 Н-15 1,95-1,98 (м, J=5,9-6,1 Гц); 1,31-1,35 (м,о)
С-16 81,3-81,3 Н-16 4,45-4,48 (м, J=7,0-7,4 Гц)
С-17 63,0-63,1 Н-17 1,72-1,75 (м,о)
С-18 16,5-16,6 Н-18 0,73-0,76 (с)
С-19 19,6-19,6 Н-19 0,80-1,00 (с)
С-20 42,1-42,2 Н-20 1,88 (м)
С-21 15,2-15,2 Н-21 1,05-1,07 (д, J=6,8-7,2 Гц)
С-22 109,4-109,5    
С-23 32,0-32,0 Н-23 1,57-1,63 (м,о)
С-24 29,4-29,5 Н-24 1,48-1,52 (м,о)
С-25 30,8-30,8 Н-25 1,50 (м,о)
С-26 67,0-67,1 Н-26 3,50-3,40 (м, J=10,5; 3,0; 10,5 Гц)
С-27 17,5-17,5 Н-27 0,60-0,63 (д, J=4,7-5,8 Гц)
Экспериментальный пример 1: Измерение роста аксонов
В инкубаторе при условиях, включающих содержание СО2 - 5% и температура 37°С, выращивали клетки PC 12 (феохромоцитома, код АТСС (Американская коллекция культур): CRL-1721) в среде RPMI 1640 с добавкой лошадиной сыворотки (10 об.%), эмбриональной бычьей сыворотки (5 об.%) и 1% пенициллина-стрептомицина.
Для выявления влияния соединения формулы 2 на рост аксонов среды с добавлением 2% лошадиной сыворотки, 1% эмбриональной бычьей сыворотки и 1% пенициллина-стрептомицина добавляли в каждый 6-луночный планшет с нанесенным поли-d-лизином, затем в каждую лунку инокулировали по 5×104 клеток PC 12. Через 24 часа эти лунки обрабатывали 10 мкл/мл этанола, 10 мг/мл соединения формулы 2 и 50 нг/мл фактора роста нервов (R&D system, США) соответственно. Затем через 48 часов измеряли длину аксона при помощи инвертированного микроскопа с контрастным устройством (СК-2, Olympus, США) 15 (См. Фиг.1 и Фиг.2).
Согласно Фиг.1 и 2 рост аксонов не наблюдался в группе, инъецированной этанолом (контрольная группа), однако рост аксонов был простимулирован как в группе, обработанной соединением формулы 2 (DG), так и в группе, обработанной фактором роста нервов (ФРН). Соответственно было обнаружено, что соединение формулы 2 стимулировало дифференциацию клеток PC 12 за счет стимулирования роста аксонов.
Экспериментальный пример 2: Измерение уровня фактора роста нервов в мышиной сыворотке
Соединение формулы 2 растворили в 0,2 мл раствора диметилсульфоксид:этанол (3:1) и затем раствор однократно перорально ввели самцам мышей ICR (Институт исследований рака) 7-недельного возраста (n=7) в количестве 10 мг/кг. Через 24 часа количество эндогенного фактора роста нервов измерили методом ELISA. В контрольной группе мышь ICR однократно перорально ввели 0,2 мл диметилсульфоксид:этанол (3:1). Затем количество фактора роста нервов в контрольной группе измерили так же, как описано выше.
Как видно на Фиг.3, в группе, которой вводилось соединение формулы 2 (DG 10 мг/кг перорально), фактор роста нервов в сыворотке оказался в 2,5 раза выше, чем в контрольной группе. Эти результаты показывают, что соединением формулы 2 можно осуществить лечение невропатии, подавляя перерождение и гибель нейронов у мыши и тем самым предотвращая снижение количества нейронов.
Экспериментальный пример 3: Измерение уровня фактора роста нервов в сыворотке мыши с индуцированным диабетом
Подготовили мышь с аллоксан-индуцированным диабетом в качестве модели животных с диабетической невропатией, одной из множественных невропатии.
Самцов мышей ICR (Институт исследований рака) 7-недельного возраста подвергали алиментарной абстиненции в течение 18 часов, затем сделали им однократную интраперитонеальную инъекцию аллоксана, растворенного в физиологическом солевом растворе, с дозировкой 160 мг/кг для индуцирования диабета. Мыши, сохранившие содержание сахара в крови натощак 200 мг/дл или более в течение одной недели, т.е. мыши с индуцированным диабетом, были отобраны и затем разделены на контрольную группу (n=10), группу приема экстракта (n=10) и группу приема соединения (n=10). В контрольной группе применяли по 0,2 мл раствора диметилсульфоксида:этанола (3:1); в группе приема экстракта применяли экстракт, полученный в соответствии с Примером 1 и растворенный в растворе диметилсульфоксида:этанола (3:1), в количестве 100 мг/кг, а в группе приема соединения применяли соединение формулы 2, растворенное в растворе диметилсульфоксида:этанола (3:1), в количестве 10 мг/кг. Во всех группах прием осуществляли перорально три раза в неделю, причем общая продолжительность применения составила один месяц. Количество эндогенного фактора роста нервов в сыворотке измеряли методом ELISA.
Согласно фиг.4 количество эндогенного фактора роста нервов в сыворотке как группы приема экстракта (DN 100 мг/кг перорально), так и группы приема соединения (DG 10 мг/кг перорально), было в 3 и 4 раза выше соответственно, чем у контрольной группы, в которой применяли лишь наполнитель. Эти результаты показывают, что экстрактом и соединением по настоящему изобретению можно лечить диабетическую невропатию путем подавления перерождения и гибели нейронов при повреждениях нервов, вызванных диабетом, и тем самым предотвращая снижение количества нейронов.
Экспериментальный пример 4: Измерение скорости передачи по двигательному нерву и сенсорному нерву в седалищном нерве мыши с индуцированным диабетом
Терапевтическое действие соединения по настоящему изобретению на диабетическую невропатию, одну из множественных невропатий, определяли путем измерения воздействия соединения по настоящему изобретению на скорость передачи по двигательному нерву и сенсорному нерву в седалищном нерве.
Самцов мышей ICR (Институт исследований рака) 7-недельного возраста подвергали алиментарной абстиненции в течение 18 часов, затем сделали им однократную интраперитонеальную инъекцию аллоксана, растворенного в физиологическом солевом растворе, с дозировкой 160 мг/кг для индуцирования диабета. Мыши, сохранившие содержание сахара в крови натощак 200 мг/дл или более в течение одной недели, т.е. мыши с индуцированным диабетом, были отобраны и затем разделены на контрольную группу (n=7) и группу приема соединения (n=7). В контрольной группе применяли по 0,2 мл раствора диметилсульфоксида:этанола (3:1), а в группе приема соединения применяли соединение формулы 2, растворенное в растворе диметилсульфоксида:этанола (3:1), в количестве 10 мг/кг. Самцов мышей ICR 7-недельного возраста, у которых диабет не был индуцирован, были объединены в нормальную группу (n=7), и в нормальной группе применяли по 0,2 мл раствора диметилсульфоксида:этанола (3:1). Во всех группах прием осуществляли перорально три раза в неделю, причем общая продолжительность применения составила 2 месяца. По завершении применения мышей умертвили путем смещения шейных позвонков и затем быстро удалили кожу и мышцы в бедренной области. После этого отделили соответственно левый и правый седалищные нервы длиной 20 мм или более и сохранили их в физиологическом солевом растворе, через который пропускали воздух. Отделенные седалищные нервы поместили на 20-миллиметровую круглую измерительную пластину. После этого к соответствующим концам нервов подключили датчик и возбуждающий зонд и измерили электропроводность при помощи цифрового осциллографа с памятью для определения скорости передачи по нерву (см. Фиг.5 и 6).
В общем случае миелин представляет собой фосфолипидную мембрану, несколько слоев которой окружает аксоны; ее также называют миелиновой оболочкой. Подобно пластиковому покрытию электропровода миелин благодаря белому липидному материалу предотвращает утечку и рассеяние электрических сигналов, передаваемых нейронами. Миелин равномерно распределен между узлами Ранвье (часть, формирующая узлы миелина), в которых миелин не образуется, и окружает аксоны. Электрический сигнал передается по пространству, импульсы быстро передаются по нейронам, а миелин повышает скорость прохождения электрических импульсов. Соответственно при разрушении миелина из-за повреждения нервов в результате невропатии, вызванной диабетом, аксоны прекращают функционировать и скорость передачи по нервам снижается.
В течение одного месяца периода с индуцированным диабетом группа приема соединения (DM-DG) показала скорость передачи по сенсорному нерву на 25% выше, чем контрольная группа с индуцированным диабетом (DM), в которой применяли только наполнитель (см. Фиг.5). В течение двух месяцев периода с индуцированным диабетом группа приема соединения (DM-DG) показала скорость передачи по сенсорному нерву на 45% выше, чем контрольная группа с индуцированным диабетом, а также скорость передачи сигнала по двигательному нерву на 40% выше, чем контрольная группа (см. Фиг.6). Таким образом, обнаружено, что соединение по настоящему изобретению оказывает терапевтическое действие на повреждение нервов, вызванное диабетической невропатией, за счет повышения скорости передачи по сенсорному и двигательному нервам у мыши с индуцированным диабетом.
Экспериментальный пример 5: Измерение уровня фактора роста нервов в седалищном нерве мыши с индуцированным диабетом
Самцов мышей ICR (Институт исследований рака) 7-недельного возраста подвергали алиментарной абстиненции в течение 18 часов, затем сделали им однократную интраперитонеальную инъекцию аллоксана, растворенного в физиологическом солевом растворе, с дозировкой 160 мг/кг для индуцирования диабета. Мыши, сохранившие содержание сахара в крови натощак 200 мг/дл или более в течение одной недели, т.е. мыши с индуцированным диабетом, были отобраны и затем разделены на контрольную группу (n=5) и группу приема соединения (n=5). В контрольной группе применяли по 0,2 мл раствора диметилсульфоксида:этанола (3:1); а в группе приема соединения применяли соединение формулы 2, растворенное в растворе диметилсульфоксида:этанола (3:1), в количестве 10 мг/кг. Во всех группах прием осуществляли перорально три раза в неделю, причем общая продолжительность применения составила один месяц. Количество эндогенного фактора роста нервов в седалищном нерве измеряли методом ELISA (см. фиг.7).
Согласно Фиг.7 было обнаружено, что фактор роста нервов в седалищном нерве группы приема соединения (DM-DG 10 мг/кг перорально) был приблизительно на 30% выше, чем в контрольной группе, которой вводили только наполнитель. Таким образом, сделан вывод, что результаты, показанные на Фиг.5 и 6, являются следствием защитного действия фактора роста нервов.
Экспериментальный пример 6: Измерение изменения содержания сорбита в седалищном нерве мыши с индуцированным диабетом
Терапевтический эффект соединения по настоящему изобретению на невропатию определялся путем измерения изменений содержания сорбита в седалищном нерве.
Самцов мышей ICR (Институт исследований рака) 7-недельного возраста подвергали алиментарной абстиненции в течение 18 часов, затем сделали им однократную интраперитонеальную инъекцию аллоксана, растворенного в физиологическом солевом растворе, с дозировкой 160 мг/кг для индуцирования диабета. Мыши, сохранившие содержание сахара в крови натощак 200 мг/дл или более в течение одной недели, т.е. мыши с индуцированным диабетом, были отобраны и затем разделены на контрольную группу (n=3) и группу приема соединения (n=3). В контрольной группе применяли по 0,2 мл раствора диметилсульфоксида:этанола (3:1), а в группе приема соединения применяли соединение формулы 2, растворенное в растворе диметилсульфоксида:этанола (3:1), в количестве 10 мг/кг. Самцов мышей ICR (Институт исследований рака) 7-недельного возраста, у которых диабет не был индуцирован, объединили в нормальную группу (n=3) и в нормальной группе применяли по 0,2 мл раствора диметилсульфоксида:этанола (3:1). В нормальной группе, контрольной группе и группе приема соединения прием осуществляли перорально три раза в неделю, причем общая продолжительность применения составила две недели. По завершении применения мышей умертвили путем смещения шейных позвонков и затем измерили содержание сорбита в седалищном нерве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (см. Фиг.8).
Полиоловый путь - это процесс, при котором глюкоза преобразуется в сорбит под действием альдозоредуктазы, а сорбит преобразуется в фруктозу под действием сорбитдегидрогеназы. При гипергликемическом состоянии, таком как диабет, избыточная глюкоза попадает в клетки, а сорбит образуется и накапливается по полиоловому пути. На этом этапе нервы могут повреждаться за счет осмотического эффекта, вызывающего засасывание воды в клетки. Таким образом, в результате измерения влияния соединения по настоящему изобретению на накопление сорбита в седалищном нерве мыши с индуцированным диабетом, как показано на Фиг.8, было обнаружено, что содержание сорбита в седалищном нерве у контрольной группы с индуцированным диабетом (DM-CON) было примерно на 40% выше, чем у нормальной группы, но содержание сорбита в седалищном нерве у группы приема соединения (DM-DG), было на 10% ниже, чем у контрольной группы с индуцированным диабетом (DM-CON). Эти результаты показывают, что соединение по настоящему изобретению может частично снижать агрессивные факторы, вызывающие повреждение нервов.
Экспериментальный пример 7: Гистологическое сравнение седалищного нерва мыши с индуцированным диабетом
Терапевтический эффект соединения по настоящему изобретению на невропатию определялся путем измерения гистологических изменений в седалищном нерве.
Самцов мышей ICR (Институт исследований рака) 7-недельного возраста подвергали алиментарной абстиненции в течение 18 часов, затем сделали им однократную интраперитонеальную инъекцию аллоксана, растворенного в физиологическом солевом растворе, с дозировкой 160 мг/кг для индуцирования диабета. Мыши, сохранившие содержание сахара в крови натощак 200 мг/дл или более в течение одной недели, т.е. мыши с индуцированным диабетом, были отобраны и затем разделены на контрольную группу (n=5), группу приема экстракта (n=5) и группу приема соединения (n=3). В контрольной группе применяли по 0,2 мл раствора диметилсульфоксида:этанола (3:1), в группе приема экстракта применяли экстракт, полученный в соответствии с Примером 1, растворенный в растворе диметилсульфоксида:этанола (3:1), а в группе приема соединения применяли соединение формулы 2, растворенное в растворе диметилсульфоксида:этанола (3:1), в количестве 10 мг/кг. Во всех группах прием осуществляли перорально три раза в неделю, причем общая продолжительность применения составила два месяца. По завершении применения мышей умертвили путем смещения шейных позвонков и затем седалищный нерв отделили, окрасили согласно указанным ниже условиям и визуально исследовали под конфокальным микроскопом при увеличениях 600× и 1200×.
(1) префиксация: 2.5% глутаральдегид, 12 часов или более
(2) промывка: pH 7,4; 0,1 М фосфатный буферный раствор, 2 раза по 15 минут
(3) постфиксация: 1% тетраоксид осмия OsO4, 60 минут
(4) промывка: pH 7,4; 0,1 М фосфатный буферный раствор, 2 раза по 5 минут
(5) обезвоживание:
50, 70, 80, 90% спирт: по 10 минут в каждом растворе
100%-ный спирт: 2 раза по 15 минут
(6) замещение: пропиленоксид, 2 раза по 15 минут
(7) пропитка: пропиленоксид (1), ЕРОК 812 (2), 12 часов или более
(8) заключение: очищенный ЕРОК 812 (полимеризация при 80°С): 12 часов или более
(9) секционирование: секция средней толщины, 35-95 мкм
(10) контрастирование: 1% толуидиновый синий
Фиг.9А и 9В показывают результаты, полученные при 600-кратном (9А) и 1200-кратном увеличении (9В) соответственно. В группе с индуцированным диабетом (DM) аксон и миелин в центральной части седалищного нерва были в значительной степени разрушены. Однако в группе приема соединения (DM-DG) и в группе приема экстракта (DM-DN) аксон и миелин в центральной части седалищного нерва были четко видны. Полученные результаты показывают, что экстракт или соединение в соответствии с настоящим изобретением могут защищать и лечить нервы, поврежденные из-за невропатии.
Из соединения по настоящему изобретению были приготовлены составы, описанные ниже. Однако данные примеры составов предназначены только для иллюстрации и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.
Пример состава 1: Состав таблеток
Соединение формулы 2 200 мг
Лактоза 100 мг
Крахмал 100 мг
Стеарат магния по потребности
Указанные соединения смешали и спрессовали в таблетки обычным методом изготовления таблеток.
Пример состава 2: Жидкий состав
Соединение формулы 2 1000 мг
КМЦ-Na 20 г
Изомеризованный сахар 20 г
Лимонный ароматизатор по потребности
Добавили очищенную воду до общего объема раствора 1000 мл. Указанные компоненты перемешали в соответствии с обычным методом приготовления жидких составов, залили в коричневую бутыль и простерилизовали, получив таким образом жидкий состав.
Пример состава 3: Состав капсул
Соединение формулы 2 300 мг
Кристаллическая целлюлоза 3 мг
Лактоза 14,8 мг
Стеарат магния 0.2 мг
Указанные компоненты перемешали в соответствии с обычным методом приготовления составов для капсул и заполнили этой смесью желатиновые капсулы, получив таким образом состав для капсул.
Пример состава 4: Состав для инъекций
Соединение формулы 2 300 мг
Маннит 180 мг
Стерильная дистиллированная вода для инъекций 2974 мг
Na2HPO412H2O 26 мг
Инъекцию, содержащую компоненты в указанных выше количествах в расчете на одну ампулу (2 мл), приготовили обычным способом изготовления инъекций.

Claims (8)

1. Экстракт семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) для профилактики или лечения периферической невропатии, причем семейство диоскорейных (Dioscoreaceae) представляет собой, по меньшей мере, один вид растений, выбранный из группы, состоящей из Dioscorea nipponica, Dioscorea septemloba, Dioscorea quinqueoloba, Dioscorea batatas, Dioscorea japonica, Dioscorea bulbifera, Dioscorea tokoro, Dioscorea tenuipes, при этом указанный экстракт получен путем экстракции корня растения семейства диоскорейных (Dioscoreaceae) первым экстракционным растворителем, выбранным из группы, состоящей из воды, спирта C1-C4 и смеси воды со спиртом C1-C4.
2. Экстракт по п.1, в котором семейство диоскорейных (Dioscoreaceae) представляет собой Dioscorea nipponica, Dioscorea quinqueoloba или Dioscorea tokoro.
3. Экстракт по п.1, в котором периферическая невропатия представляет собой множественную невропатию.
4. Экстракт по п.1, в котором первый экстракционный растворитель представляет собой смесь воды и метанола либо смесь воды и этанола.
5. Экстракт по п.1, в котором процесс экстракции дополнительно содержит диспергирование экстракта, полученного экстракцией первым экстракционным растворителем, в воде, и экстрагирование водонасыщенным спиртом C1-C4 (второй экстракционный растворитель).
6. Экстракт по п.5, в котором второй экстракционный растворитель представляет собой водонасыщенный бутанол.
7. Фармацевтическая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии, содержащая терапевтически эффективное количество экстракта по любому из пп.1-6 и фармацевтически приемлемый носитель.
8. Пищевая композиция для профилактики или лечения периферической невропатии, содержащая экстракт по любому из пп.1-6 в качестве активного компонента.
RU2008115631/15A 2005-10-28 2006-10-27 Экстракт семейства диоскорейных (dioscoreaceae) и содержащая его композиция для профилактики или лечения периферической невропатии RU2430737C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2005-0102450 2005-10-28
KR20050102450 2005-10-28

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011102693/15A Division RU2453327C1 (ru) 2005-10-28 2006-10-27 Композиция для профилактики или лечения периферической невропатии

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2008115631A RU2008115631A (ru) 2009-12-10
RU2430737C2 true RU2430737C2 (ru) 2011-10-10

Family

ID=37968005

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008115631/15A RU2430737C2 (ru) 2005-10-28 2006-10-27 Экстракт семейства диоскорейных (dioscoreaceae) и содержащая его композиция для профилактики или лечения периферической невропатии
RU2011102693/15A RU2453327C1 (ru) 2005-10-28 2006-10-27 Композиция для профилактики или лечения периферической невропатии

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011102693/15A RU2453327C1 (ru) 2005-10-28 2006-10-27 Композиция для профилактики или лечения периферической невропатии

Country Status (14)

Country Link
US (2) US20090041865A1 (ru)
EP (1) EP1942920B1 (ru)
JP (1) JP5166272B2 (ru)
KR (1) KR100854621B1 (ru)
CN (2) CN101296703B (ru)
BR (1) BRPI0617443A2 (ru)
CA (1) CA2623838A1 (ru)
ES (1) ES2634227T3 (ru)
HU (1) HUE035328T2 (ru)
PL (1) PL1942920T3 (ru)
PT (1) PT1942920T (ru)
RU (2) RU2430737C2 (ru)
TR (1) TR201708352T4 (ru)
WO (1) WO2007049932A1 (ru)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100811683B1 (ko) * 2006-11-21 2008-03-11 영남대학교 산학협력단 마 추출물을 유효성분으로 포함하는 장 기능 개선용 조성물및 이를 함유하는 기능성 건강식품
KR101341693B1 (ko) * 2011-03-16 2013-12-16 동아에스티 주식회사 생약추출물을 함유하는 퇴행성 신경질환의 치료 및 예방을 위한 조성물
KR101341692B1 (ko) * 2011-03-16 2013-12-20 동아에스티 주식회사 복합생약추출물을 함유하는 당뇨병성 말초 신경병증의 치료 및 예방을 위한 조성물
CN104119420A (zh) * 2013-04-25 2014-10-29 四川大学华西医院 薯蓣皂苷糖基化衍生物及其制备方法和用途
KR101689514B1 (ko) * 2015-03-27 2016-12-27 한국 한의학 연구원 천산룡 약재의 감별방법
KR101695207B1 (ko) * 2015-07-31 2017-01-11 한국 한의학 연구원 상륙 추출물을 유효성분으로 함유하는 항암제 유발 말초신경병증 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR101732483B1 (ko) * 2016-07-06 2017-05-24 한국 한의학 연구원 연교 추출물을 유효성분으로 함유하는 말초신경병증 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR102298839B1 (ko) * 2019-01-04 2021-09-07 주식회사 디네이쳐 천연물질의 선택적 추출 방법
WO2025143141A1 (ja) * 2023-12-26 2025-07-03 江崎グリコ株式会社 オートファジー活性化剤
KR102715184B1 (ko) * 2024-04-12 2024-10-11 (주)마이크로 사이언스 테크 하늘마 추출물 및 식물 유래 엑소좀을 포함하는 기능성 조성물

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6083941A (en) * 1995-07-24 2000-07-04 Trustees Of Boston University Inhibition of NMDA receptor activity by pregnenolone sulfate derivatives
US6593301B1 (en) * 1997-09-26 2003-07-15 Institute Of Radiation Medicine Use of steroidal saponins for the prophylaxis or treatment of dementia, and novel steroidal saponin compounds

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61106516A (ja) * 1984-10-29 1986-05-24 Osaka Chem Lab 血糖降下剤
JP2911057B2 (ja) * 1991-01-18 1999-06-23 高砂香料工業株式会社 感染防御剤及び感染防御効果を有する機能性食品
US5252729A (en) * 1991-10-23 1993-10-12 Schering Corporation Extraction of compounds from plant materials using supercritical fluids
KR19990000201A (ko) * 1997-06-03 1999-01-15 유현식 농업용 필름의 안개방지성능 평가장치
KR20000008809A (ko) * 1998-07-16 2000-02-15 피영준 한방녹심원의 제조방법
KR20030020585A (ko) * 2001-09-03 2003-03-10 박재형 중추신경세포의 뉴로제네시스를 촉진하고 아폽토시스를억제하는 생약 조성물
NZ547344A (en) 2002-03-27 2007-11-30 Phytopharm Plc Therapeutic methods and uses of sapogenins and their derivatives
KR100543342B1 (ko) * 2002-06-28 2006-01-20 한국 한의학 연구원 뇌신경세포의 손상을 치료하기 위한 한약재 조성물
CN1228344C (zh) * 2002-10-21 2005-11-23 吉林天药科技股份有限公司 薯蓣皂苷的制备方法、药物制剂及其医药新用途
CN1416816A (zh) * 2002-11-08 2003-05-14 吉林天药科技股份有限公司 薯蓣皂苷的抗肿瘤作用及其药物制剂
CN1202830C (zh) * 2002-12-31 2005-05-25 中日友好临床医学研究所 穿山龙及其薯蓣总皂苷在治疗慢性肾小球肾炎中的新用途
US20040126447A1 (en) * 2002-12-31 2004-07-01 Rong-Tsun Wu Extract of Dioscorea sp. and the medical uses thereof
US20050019435A1 (en) * 2003-07-21 2005-01-27 Jeffrey Young Method of treating non-insulin dependent diabetes mellitus and related complications
CN1560061A (zh) * 2004-03-10 2005-01-05 上海大学 怀山药提取物怀山药皂甙的提取方法
KR100842052B1 (ko) * 2004-05-19 2008-06-30 한국 한의학 연구원 뇌혈관 질환 예방 및 치료용 조성물
CN101244066B (zh) * 2007-02-14 2011-05-11 成都地奥制药集团有限公司 甾体总皂苷提取物的新用途

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6083941A (en) * 1995-07-24 2000-07-04 Trustees Of Boston University Inhibition of NMDA receptor activity by pregnenolone sulfate derivatives
US6593301B1 (en) * 1997-09-26 2003-07-15 Institute Of Radiation Medicine Use of steroidal saponins for the prophylaxis or treatment of dementia, and novel steroidal saponin compounds

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
van Dam PS. Oxidative stress and diabetic neuropathy: pathophysiological mechanism and treatment perspectives // Diabetes Metab Res Rev. 2002 May-Jun, 18(3):176-84. *
Ма С et al. Neuroprotective and antioxidant activity of compounds from the aerial parts of Dioscorea opposite // J. Nat. Prod. 2005 Aug., 68(8): 1259-61. *

Also Published As

Publication number Publication date
ES2634227T3 (es) 2017-09-27
CN101296703B (zh) 2011-07-27
CN102145105B (zh) 2013-07-03
US20090041865A1 (en) 2009-02-12
TR201708352T4 (tr) 2018-11-21
KR100854621B1 (ko) 2008-08-27
CA2623838A1 (en) 2007-05-03
JP2009513626A (ja) 2009-04-02
HUE035328T2 (en) 2018-05-02
EP1942920A4 (en) 2011-10-19
RU2453327C1 (ru) 2012-06-20
KR20070045988A (ko) 2007-05-02
CN101296703A (zh) 2008-10-29
RU2008115631A (ru) 2009-12-10
EP1942920A1 (en) 2008-07-16
EP1942920B1 (en) 2017-04-26
PL1942920T3 (pl) 2017-11-30
JP5166272B2 (ja) 2013-03-21
CN102145105A (zh) 2011-08-10
US20100159043A1 (en) 2010-06-24
WO2007049932A1 (en) 2007-05-03
PT1942920T (pt) 2017-07-25
BRPI0617443A2 (pt) 2011-07-26
US8202554B2 (en) 2012-06-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8202554B2 (en) Extract of the family dioscoreaceae and composition for preventing or treating peripheral neuropathy comprising the same
KR102257023B1 (ko) 겹달맞이꽃 추출물을 함유하는 근위축증 또는 근감소증 예방, 치료 또는 개선용 조성물
BR112019022392A2 (pt) método para preparar um extrato, extrato de uma planta e composição
KR20150021465A (ko) 모노아세틸디아실글리세롤 화합물을 유효성분으로 함유하는 류마티스 관절염의 예방 또는 치료용 조성물
EP3560506A1 (en) Pharmaceutical composition comprising indigo pulverata levis extract or fraction thereof as effective ingredient for preventing or treating inflammatory bowel disease
KR20170055626A (ko) 특발성 폐섬유증의 치료 또는 예방을 위한 약학적 조성물
CN101588810B (zh) 用于治疗和预防炎性疾病的包括络石藤和日本鹿蹄草提取物的组合物
DE60216118T2 (de) Sesquiterpenoid-derivate mit adipozytendifferenzierungshemmender wirkung
JP7385325B2 (ja) ロコモティブシンドローム改善用組成物
JP6165380B1 (ja) 神経回路網の再構築・賦活剤
WO2023195644A1 (ko) 털야광나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 천식의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20200021738A (ko) 장수만리화 추출물을 포함하는 호흡기 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20130024942A (ko) 진세노사이드 Ｒｂ１ 및 Ｒｇ３，Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｋ，또는 인삼유래 사포닌 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경병증성 통증 예방 및 치료용 조성물
WO2005074961A1 (ja) 体脂肪調整剤
WO2021246200A1 (ja) 筋萎縮抑制剤
CN109700797B (zh) 一种减肥的药物组合物及其制备方法与用途
KR20160090662A (ko) 쥐눈이콩 추출물을 포함하는 망막질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR102693539B1 (ko) 어수리 추출물을 포함하는 골다공증 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20200021434A (ko) 더덕 추출물을 유효성분으로 함유하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
KR20200021739A (ko) 분꽃나무 추출물을 포함하는 호흡기 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20190083071A (ko) 모과나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20170023055A (ko) 쥐눈이콩 추출물을 포함하는 망막질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR101751393B1 (ko) 리놀레산 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 근육손실 예방 및 치료용 약학적 조성물
MX2008005256A (en) Extract of the family dioscoreaceae and composition for preventing or treating peripheral neuropathy comprising the same
KR20230149568A (ko) 고량강 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 호흡기 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20160203

QB4A Licence on use of patent

Free format text: LICENCE

Effective date: 20170203