RU2419794C2 - Method of substance antioxidant activity test - Google Patents
Method of substance antioxidant activity test Download PDFInfo
- Publication number
- RU2419794C2 RU2419794C2 RU2009121014/15A RU2009121014A RU2419794C2 RU 2419794 C2 RU2419794 C2 RU 2419794C2 RU 2009121014/15 A RU2009121014/15 A RU 2009121014/15A RU 2009121014 A RU2009121014 A RU 2009121014A RU 2419794 C2 RU2419794 C2 RU 2419794C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- content
- less
- nmol
- deviates
- exceeds
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины и фармакологии и может быть использовано для оценки антиокислительных свойств природных минеральных материалов, а также различных медицинских препаратов и пищевых продуктов.The invention relates to the field of medicine and pharmacology and can be used to evaluate the antioxidant properties of natural mineral materials, as well as various medical preparations and food products.
Известна система для испытания антиокислительной активности полимерных алкиларилполиэфирспиртов, в качестве молекулы-мишени окислителей применяют салицилат. Гидроксильный радикал реагирует с салициловой кислотой (2-оксибензойной кислотой) с образованием двух диоксибензойных кислот, в частности 2,3- и 2,5-диоксибензойной кислоты. Эти гидроксилированные продукты являются доказательством образования OH. Определение 2,3- и 2,5-диоксибензойных кислот осуществляют при помощи жидкостной хроматографии высокого разрешения с электрохимическим детектором. Для образования и обнаружения ОН используют суспензии 10 мкМ FeCl3, 1,0 мМ H2O2, 1,0 мМ аскорбата и 10,0 мкМ салициловой кислоты. Добавляют 0,1 мл нормального солевого раствора или тилоксапола (конечные концентрации от 0,0 до 10 мг/мл). Реакционные смеси выдерживают при 45°C в течение 30 мин и центрифугируют в течение 10 мин при 1200 g. Надосадочную жидкость центрифугируют (Beckman Microfuge E) через трубчатый фильтр (0,22 микрона) (PGC Scientific N 352-118) при 15000 g 100 мкл образца элюата подают в колонку ЖХВР 018 RP (250×4,7 мм. Beckman N 235329). Гидроксилированные продукты салицилата определяют количественно при помощи электрохимического детектора Coulochem (ESA модель 5100А), причем восстановительный потенциал детектора устанавливают равным 0,40 B (постоянный ток). Окислительный потенциал предохранительной ячейки (используемой в качестве экрана) устанавливают на +0,40 B (постоянный ток). Измерения проводятся дважды (RU 2147235, 10.04.2000).A known system for testing the antioxidant activity of polymer alkylaryl polyether alcohols, salicylate is used as a target molecule of oxidizing agents. The hydroxyl radical reacts with salicylic acid (2-hydroxybenzoic acid) to produce two dioxibenzoic acids, in particular 2,3- and 2,5-dioxibenzoic acid. These hydroxylated products are evidence of OH formation. The determination of 2,3- and 2,5-dioxibenzoic acids is carried out using high-performance liquid chromatography with an electrochemical detector. Suspensions of 10 μM FeCl 3 , 1.0 mM H 2 O 2 , 1.0 mM ascorbate and 10.0 μM salicylic acid are used to form and detect OH. Add 0.1 ml of normal saline or tyloxapol (final concentrations from 0.0 to 10 mg / ml). The reaction mixtures were kept at 45 ° C for 30 minutes and centrifuged for 10 minutes at 1200 g. The supernatant is centrifuged (Beckman Microfuge E) through a tube filter (0.22 microns) (PGC Scientific N 352-118) at 15,000 g 100 μl of the eluate sample is fed to an HPLC 018 RP column (250 × 4.7 mm. Beckman N 235329) . Hydroxylated salicylate products are quantified using a Coulochem electrochemical detector (ESA Model 5100A), and the recovery potential of the detector is set to 0.40 V (direct current). The oxidizing potential of the safety cell (used as a shield) is set to +0.40 V (direct current). Measurements are carried out twice (RU 2147235, 10.04.2000).
Известна также другая методика, предназначенная для анализа пептидов, состоящая в определении физического показателя пептидов, имеющих сшивки 3-гидроксипиридиния. Один из подобных физических показателей основывается на электрохимическом детектировании. Метод заключается в инъектировании аликвоты биологической жидкости, например мочи, в электрохимический детектор, основанный на окислительно-восстановительном потенциале. Рекомендовано использовать амперометрический или кулонометрический детектор. Кулонометрический детектор более чувствителен в данной системе, поскольку достигается полное окисление или восстановление анализируемой молекулы в колоночном элюенте. Отсеивающие или охранные электроды могут быть помещены в восходящем направлении от аналитического электрода с селективным окислением или восстановлением мешающих веществ, значительным улучшением в результате селективности. Для разрушения мешающих веществ устанавливают одну или несколько ячеек предварительной обработки (RU 2139541, 10.10.1999).Another technique for peptide analysis is also known, which consists in determining the physical index of peptides having crosslinked 3-hydroxypyridinium. One of these physical indicators is based on electrochemical detection. The method consists in injecting an aliquot of biological fluid, such as urine, into an electrochemical detector based on redox potential. It is recommended to use an amperometric or coulometric detector. The coulometric detector is more sensitive in this system, since complete oxidation or reduction of the analyzed molecule in the column eluent is achieved. Screening or guard electrodes can be placed in the upstream direction from the analytical electrode with selective oxidation or reduction of interfering substances, a significant improvement as a result of selectivity. To destroy the interfering substances, one or more pretreatment cells are installed (RU 2139541, 10.10.1999).
Известен количественный способ определения альфа-токоферола, являющегося антиоксидантом, в котором осуществляют электрохимическое определение токоферола методом циклической вольтамперометрии. Данный метод основывается на способности токоферолов к 1-электронному окислению и реализуется с помощью системы для электрохимических измерений, состоящей из программатора ПР-8, потенциостата ПИ-50 и прибора двухкоординатного регистрирующего ПДА-1. Измерения вели в электрохимической ячейке, сопряженной с системой для электрохимических измерений. Рабочий объем ячейки 3 мл. В качестве рабочего электрода использовали платиновый стационарный дисковый электрод (d 2 мм). Электрод сравнения хлорсеребряный с водонепроницаемой диафрагмой. Вспомогательный электрод - платиновая спираль. Так как электрохимические измерения проводились в неводных средах, предусматривалась аналоговая компенсация омических потерь с помощью потенциостата ПИ-50 (RU 2102747, 20.01.1998).A known quantitative method for determining alpha-tocopherol, which is an antioxidant, in which the electrochemical determination of tocopherol is carried out by the method of cyclic voltammetry. This method is based on the ability of tocopherols to 1-electron oxidation and is implemented using a system for electrochemical measurements, consisting of a PR-8 programmer, PI-50 potentiostat and a PDA-1 two-coordinate recording device. The measurements were carried out in an electrochemical cell coupled to a system for electrochemical measurements. The working volume of the cell is 3 ml. A platinum stationary disk electrode (d 2 mm) was used as a working electrode. Silver chloride comparison electrode with waterproof diaphragm. The auxiliary electrode is a platinum spiral. Since electrochemical measurements were carried out in non-aqueous media, analog compensation of ohmic losses was provided using a PI-50 potentiostat (RU 2102747, 01.20.1998).
Однако все вышеописанные технические решения пригодны только для анализа индивидуальных веществ.However, all of the above technical solutions are suitable only for the analysis of individual substances.
Известен также способ определения антиоксидантной активности вещества, включающий введение оцениваемого вещества в организм опытных животных, забой опытных и контрольных животных, приготовление биопрепаратов из тканей и органов обеих групп животных и выявление, и количественную оценку веществ-индикаторов обменных процессов в организме названных животных (пат. США №4615877), (пат. США №4615877). Однако известный способ построен на выявлении только одного параметра, варьирующего достаточно широко в зависимости от ряда факторов, оказывающих влияние на него, что снижает достоверность оценки антиоксидантной активности вещества, кроме того, заявленный способ не позволяет оценить антиоксидантную активность цеолитов.There is also a method for determining the antioxidant activity of a substance, which includes introducing the substance being evaluated into the body of experimental animals, slaughtering experimental and control animals, preparing biological products from the tissues and organs of both groups of animals, and identifying and quantifying metabolic indicator substances in the body of these animals (US Pat. US No. 4615877), (US Pat. US No. 4615877). However, the known method is based on the detection of only one parameter that varies quite widely depending on a number of factors influencing it, which reduces the reliability of the evaluation of the antioxidant activity of a substance, in addition, the claimed method does not allow to evaluate the antioxidant activity of zeolites.
Цеолиты - нестехиометрические соединения, их составы изменяются в широких пределах, образуя ряды твердых растворов. Известно более 40 минеральных видов природных цеолитов.Zeolites are non-stoichiometric compounds, their compositions vary over a wide range, forming rows of solid solutions. More than 40 mineral species of natural zeolites are known.
Природные цеолиты являются молекулярными ситами, т.е. микропористыми телами, способными избирательно поглощать вещества, размеры молекул которых меньше размеров микропор (для проникания в адсорбционную полость молекула адсорбата должна иметь критический диаметр меньше размера входного окна). Кристаллохимические особенности, способность к катионному обмену, потере и поглощению воды и иных молекул без разрушения структурного каркаса обусловливают и другие свойства цеолитов, которые служат также ионитами и катализаторами.Natural zeolites are molecular sieves, i.e. microporous bodies capable of selectively absorbing substances whose molecular sizes are smaller than micropore sizes (for penetration into the adsorption cavity, the adsorbate molecule must have a critical diameter smaller than the size of the inlet window). Crystal-chemical features, the ability to cation exchange, loss and absorption of water and other molecules without destroying the structural framework also determine other properties of zeolites, which also serve as ion exchangers and catalysts.
Природный цеолит в дыхательном тракте не всасывается, не попадает в кровь сам, как кристалл, а проходит транзитом, взаимодействуя только на уровне селективного ионного обмена и избирательной сорбции при контакте с кровеносными и лимфатическими сосудами, отдавая или забирая микромакроэлементы, катализируя биохимические реакции.Natural zeolite in the respiratory tract does not absorb, does not enter the blood itself, like a crystal, but passes through transit, interacting only at the level of selective ion exchange and selective sorption in contact with blood and lymph vessels, giving or taking micromacroelements, catalyzing biochemical reactions.
Задача, на решение которой направлено заявленное решение, выражается в обеспечении возможности достоверной оценки антиоксидантной активности вещества, в том числе и цеолитов.The problem to which the claimed solution is directed is expressed in providing the possibility of a reliable assessment of the antioxidant activity of a substance, including zeolites.
Технический результат, получаемый при решении поставленной задачи, выражается в обеспечении возможности получения достоверной оценки антиоксидантной активности цеолитов и других природных и синтетических материалов, при обеспечении возможности сравнительной оценки веществ по этому параметру.The technical result obtained when solving the problem is expressed in providing the possibility of obtaining a reliable estimate of the antioxidant activity of zeolites and other natural and synthetic materials, while ensuring the possibility of a comparative assessment of substances by this parameter.
Для решения поставленной задачи, способ определения антиоксидантной активности вещества, включающий введение оцениваемого вещества в организм опытных животных, забой опытных и контрольных животных, приготовление биопрепаратов из тканей и органов обеих групп животных и выявление, и количественную оценку веществ-индикаторов обменных процессов в организме названных животных, отличается тем, что введение оцениваемого вещества в организм опытных животных выполняют ингаляционным путем, при этом в обеих группах определяют содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких, в плазме крови, в эритроцитах и тромбоцитах, которые переводят в баллы, и суммируют по выражению:To solve this problem, a method for determining the antioxidant activity of a substance, including introducing the substance being evaluated into the body of experimental animals, slaughtering experimental and control animals, preparing biological products from the tissues and organs of both animal groups, and identifying and quantifying metabolic indicator substances in these animals , characterized in that the introduction of the evaluated substance into the body of experimental animals is performed by inhalation, while in both groups determine the content of Ukta of lipid peroxidation and natural antioxidants in lung tissue, in blood plasma, in red blood cells and platelets, which are converted into points, and summarized by the expression:
Паа=Л+Кп+Э+Т,Paa = L + Kn + E + T,
где Паа - показатель антиоксидантной активности вещества, балл (от 0 до 4); Л - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких, балл; Кп - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в плазме крови, балл; Э - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в эритроцитах, балл; Т - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в тромбоцитах, балл, кроме того, большее значение суммы баллов соответствует большей антиоксидантной активности вещества, при этом оценку антиоксидантной активности вещества производят относительно нормальных значений содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов (N), которые определяют как среднее арифметическое соответствующих показателей, полученных на животных контрольной группы, причем, значение показателя Л принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Церулоплазмина (Ц, мг/100 г), Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Гидроперекиси (ГП, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина Е (BE, мкг/г) в ткани легких, составляет от 3 до 6, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Л принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание церулоплазмина отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то Ц=1, если превышает значение N+10%, то Ц=2, если меньше значения N-10%, то Ц=0, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N-10%, то МД=0, при этом, если содержание гидроперекиси отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ГП=1, если превышает значение N+10%, то ГП=2, если меньше значения N-10%, то ГП=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N - 10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина E отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ВЕ=1, если превышает значение N+10%, то ВЕ=2, если меньше значения N-10%, то BE=0, причем значение показателя Кп принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Церулоплазмина (Ц, мг/100 г), Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Гидроперекиси (ГП, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина E (BE, мкг/г) в плазме крови, составляет от 3 до 6, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Кп принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание церулоплазмина отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то Ц=1, если превышает значение N+10%, то Ц=2, если меньше значения N-10%, то Ц=0, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N - 10%, то МД=0, при этом, если содержание гидроперекиси отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ГП=1, если превышает значение N+10%, то ГП=2, если меньше значения N - 10%, то ГП=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N-10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то BE=1, если превышает значение N+10%, то BE=2, если меньше значения N-10%, то BE=0, причем, значение показателя Э принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина E (BE, нмоль/мл) в эритроцитах, находится в пределах от 1 до 4, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Э принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N-10%, то МД=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N-10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то BE=1, если превышает значение N+10%, то ВЕ=2, если меньше значения N-10%, то BE=0, причем значение показателя Т принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина E (BE, нмоль/мл) в тромбоцитах, находится в пределах от 1 до 4, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Т принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N-10%, то МД=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N - 10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то BE=1, если превышает значение N+10%, то ВЕ=2, если меньше значения N - 10%, то BE=0, кроме того, ввод веществ в организм животного выполняют через его дыхательные пути.where Paa - an indicator of the antioxidant activity of the substance, score (from 0 to 4); L is an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in lung tissue, score; Kp - an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in blood plasma, score; E - an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in red blood cells, score; T is an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in platelets, a score, in addition, a higher value of the sum of points corresponds to a greater antioxidant activity of the substance, while the antioxidant activity of the substance is evaluated relative to the normal values of the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants ( N), which are defined as the arithmetic mean of the corresponding indicators obtained in animals of the control group, m, the value of the indicator L is taken equal to 1 point if the total value of the points corresponding to the contents of Ceruloplasmin (C, mg / 100 g), Malondialdehyde (MD, nmol / g), Hydroperoxide (GP, nmol / g), Diene conjugates (DC , nmol / g) and Vitamin E (BE, μg / g) in lung tissue, is from 3 to 6, and for values less than or greater than the specified limit, the value of indicator L is taken equal to 0 points, while if the content of ceruloplasmin deviates from normal values by no more than ± 10%, then C = 1, if it exceeds the value of N + 10%, then C = 2, if less n-10%, then C = 0, while if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if less N-10%, then MD = 0, while if the content of hydroperoxide deviates from normal values by no more than ± 10%, then GP = 1, if it exceeds N + 10%, then GP = 2, if less than N-10%, then GP = 0, while if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if less than the value N - 10%, then DK = 0, while if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than ± 10%, then BE = 1, if it exceeds N + 10%, then BE = 2, if it is less than N-10%, then BE = 0, moreover, the value of Kp is taken equal to 1 point if the total value of the points corresponding to the contents of Ceruloplasmin (C, mg / 100 g), Malondialdehyde (MD, nmol / g), Hydroperoxide (GP, nmol / g), Diene conjugates (DC, nmol / g) and Vitamin E (BE, μg / g) in blood plasma, is from 3 to 6, and at values less than or greater than the specified limit, the value of the parameter Kp prin be equal to 0 points, while if the content of ceruloplasmin deviates from normal values by no more than ± 10%, then C = 1, if it exceeds N + 10%, then C = 2, if it is less than N-10%, then C = 0, while if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if less than N - 10%, then MD = 0, while if the content of hydroperoxide deviates from normal values by no more than ± 10%, then GP = 1, if it exceeds N + 10%, then GP = 2, if less than N - 10%, then GP = 0, for that if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if less than N-10%, then DK = 0, when this, if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than ± 10%, then BE = 1, if it exceeds N + 10%, then BE = 2, if it is less than N-10%, then BE = 0, and , the value of indicator E is taken equal to 1 point if the total value of the points corresponding to the contents of Malonic dialdehyde (MD, nmol / g), Diene conjugates (DC, nmol / g) and Vitamin E (BE, nmol / ml) erythrocytes, is in the range from 1 to 4, and for values less than or greater than the specified limit, the value of the indicator E is taken equal to 0 points, while if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if it is less than N-10%, then MD = 0, while if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if it is less than N-10%, then DK = 0, while if the content of vitamin E is off it is not more than ± 10% from normal values, then BE = 1, if it exceeds N + 10%, then BE = 2, if it is less than N-10%, then BE = 0, and the value of T is taken to be 1 point, if the total value of points corresponding to the contents of Malonic dialdehyde (MD, nmol / g), Diene conjugates (DC, nmol / g) and Vitamin E (BE, nmol / ml) in platelets is in the range from 1 to 4, and when values are less than or greater than the specified limit, the value of the indicator T is taken equal to 0 points, while if the content of malondialdehyde deviates t of normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if less than N-10%, then MD = 0, if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if it is less than N - 10%, then DK = 0, while if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than ± 10%, then BE = 1, if it exceeds N + 10%, then BE = 2, if less than N - 10%, then BE = 0, in addition, the introduction of substances into the animal’s body perform through his airways.
Сравнение признаков заявленного решения с признаками аналогов и прототипа свидетельствует о его соответствии критерию "новизна".A comparison of the features of the claimed solution with the features of analogues and prototype indicates its compliance with the criterion of "novelty."
Признаки отличительной части формулы изобретения решают следующие функциональные задачи.The features of the characterizing part of the claims solve the following functional tasks.
Признаки, указывающие, что «введение оцениваемого вещества в организм опытных животных выполняют ингаляционным путем», обеспечивают возможность точного дозирования оцениваемого вещества, получаемого опытными животными.Signs indicating that "the introduction of the evaluated substance into the body of the experimental animals is performed by inhalation", provide the ability to accurately dose the evaluated substance obtained by the experimental animals.
Признаки, указывающие, что в обеих группах животных (контрольной и опытной) «определяют содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких, в плазме крови, в эритроцитах и тромбоцитах», позволяют повысить достоверность оценки, поскольку последняя производится в количественной форме, на основе учета «работы» нескольких систем организма, при учете широкого спектра естественных антиоксидантов, отражающих реакцию этих систем на воздействие испытуемым материалом, величина которой зачастую не зависит или наоборот существенно зависит от параллельно контролируемых параметров.Signs indicating that in both groups of animals (control and experimental) "determine the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in lung tissue, in blood plasma, in red blood cells and platelets", can improve the reliability of the assessment, since the latter is made in quantitative form, based on the “work” of several body systems, taking into account a wide range of natural antioxidants that reflect the response of these systems to exposure to the test material, the value of which is often not Avisit or vice versa significantly depends on parallel controlled parameters.
Признаки, указывающие, что содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких, в плазме крови, в эритроцитах и тромбоцитах «переводят в баллы, и суммируют по выражению Паа=Л+Кп+Э+Т,Signs indicating that the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in lung tissue, in blood plasma, in red blood cells and platelets "are converted into scores, and summarized by the expression Paa = L + Kp + E + T,
где Паа - показатель антиоксидантной активности вещества, балл (от 0 до 4); Л - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких, балл; Кп - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в плазме крови, балл; Э - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в эритроцитах, балл; Т - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в тромбоцитах, балл» позволяют выполнить количественную оценку антиоксидантной активности любого вещества и тем самым сравнить и ранжировать их по этому показателю.where Paa - an indicator of the antioxidant activity of the substance, score (from 0 to 4); L is an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in lung tissue, score; Kp - an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in blood plasma, score; E - an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in red blood cells, score; T is an indicator that reflects the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in platelets, a score of "allow you to quantify the antioxidant activity of any substance and thereby compare and rank them by this indicator.
Признак «большее значение суммы баллов соответствует большей антиоксидантной активности вещества» позволяет сопоставлять вещества по их антиоксидантной активности.The sign “a higher value of the sum of points corresponds to a greater antioxidant activity of a substance” allows you to compare substances by their antioxidant activity.
Признаки «оценку антиоксидантной активности вещества производят относительно нормальных значений содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов (N), которые определяют как среднее арифметическое соответствующих показателей, полученных на животных контрольной группы» позволяют сформировать базу для количественной оценки показателей содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в исследуемых тканях животного и соответствующей их оценки в баллах.The signs “the evaluation of the antioxidant activity of a substance is carried out relative to the normal values of the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants (N), which are determined as the arithmetic average of the corresponding indicators obtained in animals of the control group” allow us to form a basis for a quantitative assessment of the indicators of the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in the studied tissues of the animal and their corresponding scores.
Признаки «значение показателя Л принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Церулоплазмина (Ц, мг/100 г), Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Гидроперекиси (ГП, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина E (BE, мкг/г) в ткани легких, составляет от 3 до 6, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Л принимают равным 0 баллов» позволяют однозначно, с позиций заявленного способа, оценить в баллах параметры антиоксидантного воздействия на основе исследований тканей легких.Signs “the value of indicator L is taken equal to 1 point if the total value of points corresponding to the contents of Ceruloplasmin (C, mg / 100 g), Malondialdehyde (MD, nmol / g), Hydroperoxide (GP, nmol / g), Diene conjugates (DC , nmol / g) and Vitamin E (BE, μg / g) in lung tissue, is from 3 to 6, and for values less than or greater than the specified limit, the value of the indicator A is taken equal to 0 points "allow unambiguously, from the standpoint of the claimed method , evaluate the parameters of antioxidant effects based on tissue studies lungs.
Признаки «если содержание церулоплазмина отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то Ц=1, если превышает значение N+10%, то Ц=2, если меньше значения N-10%, то Ц=0, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N - 10%, то МД=0, при этом, если содержание гидроперекиси отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ГП=1, если превышает значение N+10%, то ГП=2, если меньше значения N-10%, то ГП=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N-10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то BE=1, если превышает значение N+10%, то BE=2, если меньше значения N-10%, то ВЕ=0» обеспечивают оценку содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов, в тканях легких и их бальную оценку в рамках определения параметра Л.Signs “if the content of ceruloplasmin deviates from normal values by no more than ± 10%, then C = 1, if it exceeds N + 10%, then C = 2, if it is less than N-10%, then C = 0, and if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if less than N - 10%, then MD = 0, while if the content of hydroperoxide deviates from normal values by no more than ± 10%, then GP = 1, if it exceeds N + 10%, then GP = 2, if less than N-10%, then GP = 0, while if the content diene conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if it is less than N-10%, then DK = 0, and if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than ± 10%, then BE = 1, if it exceeds N + 10%, then BE = 2, if it is less than N-10%, then BE = 0 ”provide an assessment of the content of peroxide products oxidation of lipids and natural antioxidants in the tissues of the lungs and their point assessment in the framework of determining the parameter L.
Признаки «значение показателя Кп принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Церулоплазмина (Ц, мг/100 г), Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Гидроперекиси (ГП, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина E (BE, мкг/г) в плазме крови, составляет от 3 до 6, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Кп принимают равным 0 баллов» позволяют однозначно, с позиций заявленного способа, оценить в баллах параметры антиоксидантного воздействия на основе исследований плазмы крови.Signs “the value of Kp is taken equal to 1 point if the total value of points corresponding to the contents of Ceruloplasmin (C, mg / 100 g), Malondialdehyde (MD, nmol / g), Hydroperoxide (GP, nmol / g), Diene conjugates (DC , nmol / g) and Vitamin E (BE, μg / g) in blood plasma, is from 3 to 6, and for values less than or greater than the specified limit, the value of the parameter Kp is taken equal to 0 points "allow unambiguously, from the standpoint of the claimed method , to evaluate in points the parameters of antioxidant effects based on plasma studies s blood.
Признаки «если содержание церулоплазмина отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то Ц=1, если превышает значение N+10%, то Ц=2, если меньше значения N-10%, то Ц=0, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N-10%, то МД=0, при этом, если содержание гидроперекиси отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ГП=1, если превышает значение N+10%, то ГП=2, если меньше значения N-10%, то ГП=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N-10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ВЕ=1, если превышает значение N+10%, то ВЕ=2, если меньше значения N -10%, то ВЕ=0» обеспечивают оценку содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов, в плазме крови и их балльную оценку в рамках определения параметра Кп.Signs “if the content of ceruloplasmin deviates from normal values by no more than ± 10%, then C = 1, if it exceeds N + 10%, then C = 2, if it is less than N-10%, then C = 0, and if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if less than N-10%, then MD = 0, while if the content of hydroperoxide deviates from normal values by no more than ± 10%, then GP = 1, if it exceeds N + 10%, then GP = 2, if less than N-10%, then GP = 0, while if the content is yen conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if it is less than N-10%, then DK = 0, while if the content vitamin E deviates from normal values by no more than ± 10%, then BE = 1, if it exceeds the value of N + 10%, then BE = 2, if it is less than the value of N -10%, then BE = 0 ”provide an assessment of the content of peroxide products oxidation of lipids and natural antioxidants in blood plasma and their score in the framework of determining the parameter Kp.
Признаки «значение показателя Э принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина Е (BE, нмоль/мл) в эритроцитах, находится в пределах от 1 до 4, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Э принимают равным 0 баллов» позволяют однозначно, с позиций заявленного способа, оценить в баллах параметры антиоксидантного воздействия на основе исследований эритроцитов.Signs “the value of the indicator E is taken equal to 1 point if the total value of the points corresponding to the contents of Malonic dialdehyde (MD, nmol / g), Diene conjugates (DC, nmol / g) and Vitamin E (BE, nmol / ml) in red blood cells is ranging from 1 to 4, and at values less than or greater than the specified limit, the value of the indicator E is taken equal to 0 points "allow us to unambiguously, from the point of view of the claimed method, evaluate the parameters of antioxidant effects on the basis of studies of red blood cells.
Признаки «если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N - 10%, то МД=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N-10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ВЕ=1, если превышает значение N+10%, то ВЕ=2, если меньше значения N-10%, то ВЕ=0» обеспечивают оценку содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов, в эритроцитах крови и их балльную оценку в рамках определения параметра Э.Signs "if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if less than N - 10%, then MD = 0, Moreover, if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if it is less than N-10%, then DK = 0, when this, if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than ± 10%, then BE = 1, if it exceeds N + 10%, then BE = 2, if it is less than N-10%, then BE = 0 ” assessment the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in blood erythrocytes and their score in the framework of determining the parameter E.
Признаки «значение показателя Т принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям Малонового диальдегида (МД, нмоль/г), Диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина Е (BE, нмоль/мл) в тромбоцитах, находится в пределах от 1 до 4, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Т принимают равным 0 баллов» позволяют однозначно, с позиций заявленного способа, оценить в баллах параметры антиоксидантного воздействия на основе исследований тромбоцитов.Signs “the value of the indicator T is taken equal to 1 point if the total value of the points corresponding to the contents of Malonic dialdehyde (MD, nmol / g), Diene conjugates (DC, nmol / g) and Vitamin E (BE, nmol / ml) in platelets is ranging from 1 to 4, and at values less than or greater than the specified limit, the value of the indicator T is taken equal to 0 points "allow us to unambiguously, from the point of view of the claimed method, evaluate the parameters of antioxidant effects based on platelet studies.
Признаки «если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то МД=1, если превышает значение N+10%, то МД=2, если меньше значения N-10%, то МД=0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ДК=1, если превышает значение N+10%, то ДК=2, если меньше значения N-10%, то ДК=0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на ±10%, то ВЕ=1, если превышает значение N+10%, то ВЕ=2, если меньше значения N-10%, то ВЕ=0» обеспечивают оценку содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов, в тромбоцитах крови и их балльную оценку в рамках определения параметра Т.Signs “if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than ± 10%, then MD = 1, if it exceeds N + 10%, then MD = 2, if less than N-10%, then MD = 0, Moreover, if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than ± 10%, then DK = 1, if it exceeds N + 10%, then DK = 2, if it is less than N-10%, then DK = 0, when this, if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than ± 10%, then BE = 1, if it exceeds N + 10%, then BE = 2, if it is less than N-10%, then BE = 0 ” assessment with the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in blood platelets and their score in the definition of parameter T.
Признаки «ввод веществ в организм животного выполняют через его дыхательные пути» упрощают реализацию способа с позиций дозирования воздействия.The signs "the introduction of substances into the animal’s body is performed through its respiratory tract" simplify the implementation of the method from the standpoint of dosing the impact.
Пример конкретного исполнения.An example of a specific implementation.
Исследования проводились на белых беспородных крысах. Для экспериментальной активации перекисного окисления липидов животные облучались низкоэнергетическим лазерным излучением. Низкоэнергетическое лазерное облучение было выбрано как фактор, в определенных дозировках подавляющий функциональную активность клеток системы местного иммунитета. Для облучения применялся импульсный инфракрасный лазер «Agnis-L01» с длиной волны 850 нм, энергией импульса 3,7·10-7 Дж, частотой повторения импульса 240-1400 Гц и модуляции 8-69 Гц. Облучалась грудная клетка в 6 зонах (субаксилярной, скапулярной и субскапулярной, справа и слева) по 10 сек 1 раз в день на протяжении 15 дней.Studies were conducted on white outbred rats. For experimental activation of lipid peroxidation, animals were irradiated with low-energy laser radiation. Low-energy laser irradiation was chosen as a factor in certain doses suppressing the functional activity of cells of the local immunity system. An Agnis-L01 pulsed infrared laser with a wavelength of 850 nm, a pulse energy of 3.7 · 10 -7 J, a pulse repetition rate of 240-1400 Hz and a modulation of 8-69 Hz was used for irradiation. The chest was irradiated in 6 zones (subaxillary, scapular and subscapular, right and left) for 10 seconds 1 time per day for 15 days.
Часть животных до облучения подвергалась ингаляции с применением цеолитсодержащих (морденитовых и клиноптилолитовых) туфов из двух месторождений (Куликовское и Вангинское) Амурской области. Цеолиты измельчались с помощью ультразвукового дезинтегратора Bandelin Sonopulse 3400. Степень измельчения цеолитов составляла около 1-5 мкм. Ингаляционный ввод в легкие цеолитов выполняли ультразвуковым ингалятором УРСА-0,25П (Россия). Количество тонкодисперсного цеолита и продолжительность пребывания животного в клетке 1 принимают из расчета получения животным дозы цеолита от 100 до 1000 мг/кг веса (1 раз в день по 40 мин).Some animals were exposed to inhalation prior to irradiation using zeolite-containing (mordenite and clinoptilolite) tuffs from two deposits (Kulikovskoye and Vanginskoye) of the Amur Region. Zeolites were crushed using a Bandelin Sonopulse 3400 ultrasonic disintegrator. The degree of grinding of the zeolites was about 1-5 microns. Inhalation of zeolites into the lungs was performed using an ultrasonic inhaler URSA-0.25P (Russia). The amount of fine zeolite and the duration of the animal in cell 1 is taken based on the calculation of the animal receiving a dose of zeolite from 100 to 1000 mg / kg of body weight (1 time per day for 40 minutes).
Животные были разделены на 4 группы по 20 особей: Контроль - интактные животные; Лазер - животные, облучавшиеся низкоэнергетическим лазером; Куликовское+лазер и Вангинское+лазер - животные, которым ингаляционно вводились цеолиты Куликовского и Вангинского месторождений (соответственно) при облучении низкоэнергетическим лазером.Animals were divided into 4 groups of 20 individuals: Control - intact animals; Laser - animals irradiated with a low-energy laser; Kulikovskoye + laser and Vanginskoye + laser are animals that were inhaled with zeolites from the Kulikovskoye and Vanginsky deposits (respectively) when irradiated with a low-energy laser.
Для оценки антиоксидантных свойств цеолита определяют уровень содержания продуктов перекисного окисления липидов в плазме крови и в ткани легких крыс. При этом используют известные биохимические методы, включающие: приготовление гомогенатов легких; выделение и отмывку цельных эритроцитов для опытов in vitro; выделение и отмывку тромбоцитов для постановки опытов in vitro; экстракцию липидов из плазмы крови и гомогенатов легких; определение церулоплазмина в плазме крови, определение содержания малонового диальдегида; определение диеновых конъюгатов; определение гидроперекисей липидов; определение содержания витамина Е.To assess the antioxidant properties of zeolite, the level of lipid peroxidation products in blood plasma and lung tissue of rats is determined. In this case, well-known biochemical methods are used, including: preparation of lung homogenates; Isolation and washing of whole red blood cells for in vitro experiments; platelet isolation and washing for in vitro experiments; extraction of lipids from blood plasma and lung homogenates; determination of ceruloplasmin in blood plasma, determination of the content of malondialdehyde; determination of diene conjugates; determination of lipid hydroperoxides; determination of vitamin E.
Приготовление гомогенатов легких.Preparation of lung homogenates.
После забоя животных, вскрывали грудную и брюшную полости, легкие перфузировали 0,15 М раствором КСl, содержащим 5 мМ трис-HCl буфер, pH 7,4. Легкие измельчали ножницами, взвешивали и гомогенизировали в гомогенизаторе Даунса с тем же буфером в соотношении 1:5 в течение 1 мин. Приготовленный гомогенат использовали для определения содержания в нем продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и естественных антиоксидантов.After slaughtering the animals, the chest and abdominal cavities were opened, the lungs were perfused with a 0.15 M KCl solution containing 5 mM Tris-HCl buffer, pH 7.4. The lungs were crushed with scissors, weighed and homogenized in a Downs homogenizer with the same buffer in a ratio of 1: 5 for 1 min. The prepared homogenate was used to determine the content of lipid peroxidation products (LPO) and natural antioxidants in it.
Выделение и отмывку цельных эритроцитов для опытов in vitro проводят согласно описаниям, приведенным в книге Ашкинази И.Я. Эритроциты и внутреннее тромбопластообразование. - Л.: Наука, 1977, 155 с.Isolation and washing of whole red blood cells for in vitro experiments is carried out according to the descriptions given in I. Ya. Ashkinazi’s book. Red blood cells and internal thromboplasty. - L .: Nauka, 1977, 155 p.
Выделение и отмывку тромбоцитов для постановки опытов in vitro проводят согласно описаниям, приведенным в книге «Агрегация тромбоцитов: методы изучения и механизмы» / Самаль А.Б., Черенкевич С.Н., Хмара Н.Ф. - Мн.: Университетское, 1990. - 104 с.Platelet isolation and washing for in vitro experiments are carried out according to the descriptions given in the book “Platelet Aggregation: Methods of Study and Mechanisms” / Samal AB, Cherenkevich SN, Khmara NF - М .: Universitetskoye, 1990. - 104 p.
Экстракция липидов из плазмы крови и гомогенатов легких осуществляется по методу Блайя-Дайера (см. Кейтс М. Техника липидологии. Выделение, анализ и идентификация липидов. - М.: Мир, 1975. - 322 с.).The extraction of lipids from blood plasma and lung homogenates is carried out according to the Blaya-Dyer method (see Cates M. Technique of lipidology. Isolation, analysis and identification of lipids. - M .: Mir, 1975. - 322 p.).
Определение церулоплазмина в плазме крови. Метод основан на окислении р-фенилендиамина при участии церулоплазмина (см. Колб В.Г., Камышников B.C. Клиническая биохимия. Минск, 1976. - 312 с.).Determination of ceruloplasmin in blood plasma. The method is based on the oxidation of r-phenylenediamine with the participation of ceruloplasmin (see Kolb V.G., Kamyshnikov B.C. Clinical biochemistry. Minsk, 1976. - 312 p.).
Определение содержания малонового диальдегида. МД определяли в плазме крови и гомогенатах легких по цветной реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) (см. Бородин Е.А. Стабилизация и реактивация цитохрома Р-450 фосфатидилхолином при перекисном окислении липидов / Е.А.Бородин, А.И.Арчаков // Биологические мембраны. - 1987. - №7. - С.719-728).Determination of malondialdehyde content. MD was determined in blood plasma and lung homogenates by a color reaction with thiobarbituric acid (TBA) (see Borodin E.A. Stabilization and reactivation of cytochrome P-450 by phosphatidylcholine during lipid peroxidation / E.A. Borodin, A.I. Archakov / / Biological membranes. - 1987. - No. 7. - S.719-728).
Определение диеновых конъюгатов. 0,1 мл спиртового раствора липидов вносили в кювету спектрофотометра СФ-16, в которой находились 2,9 мл абсолютного спирта. Оптическую плотность измеряли при длине волны 233 нм с ходом луча 10 мм. Для пересчета использовали коэффициент мольной экстинкции 2,2·10-5 М-5 см-5 (см. Стальная Е.А. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот // Современные методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - С.63-64). Величину диеновых конъюгат выражали в нмолях на г ткани или мл крови.Determination of diene conjugates. 0.1 ml of an alcoholic lipid solution was added to the cuvette of the SF-16 spectrophotometer, in which there were 2.9 ml of absolute alcohol. The optical density was measured at a wavelength of 233 nm with a beam path of 10 mm. For recalculation, the molar extinction coefficient was 2.2 · 10 -5 M -5 cm -5 (see Steel EA Method for the determination of diene conjugation of unsaturated higher fatty acids // Modern methods in biochemistry. - M .: Medicine, 1977. - S.63-64). The value of the diene conjugate was expressed in nmoles per g of tissue or ml of blood.
Определение гидроперекисей липидов. Количество гидроперекисей липидов определяли на основе их способности окислять ионы Fe2+ с последующей реакцией на Fe3+ с тиоцианатом аммония (см. Романова Л.А. Метод определения гидроперекисей липидов с помощью тиоционата аммония / Л.А.Романова, И.Д.Стальная // Современные методы в биохимии. - М.: Медицина, 1977. - С.64-66).Determination of lipid hydroperoxides. The number of lipid hydroperoxides was determined based on their ability to oxidize Fe 2+ ions with subsequent reaction to Fe 3+ with ammonium thiocyanate (see Romanova L.A. Method for the determination of lipid hydroperoxides with ammonium thiocyanate / L.A. Romanova, I.D. Steel // Modern methods in biochemistry. - M .: Medicine, 1977. - P.64-66).
Определение содержания витамина Е. Содержание витамина Е определяли в липидных экстрактах из плазмы крови и тканей по цветной реакции с дипиридилом и FeCl3 (см. Кисилевич Р.Ж. Определение витамина Е в сыворотке крови / Р.Ж.Кисилевич, С.И.Скварко // Лаб. дело. - 1972. - №8. - С.473-475) в модификации М.А.Штарберга (см. Штарберг М.А. Антиокислительные свойства комбинированных препаратов фосфолипидов с производными малоновой и тиобарбитуровой кислот: Дисс. канд. мед. наук / М.А.Штарберг. - Благовещенск, 1996. - 178 с.).Determination of vitamin E. The content of vitamin E was determined in lipid extracts from blood plasma and tissues by color reaction with dipyridyl and FeCl 3 (see R. Kisilevich. Determination of vitamin E in blood serum / R.Zh. Kisilevich, S.I. Skvarko // Lab Deal. - 1972. - No. 8. - P.473-475) as modified by M.A. Shtarberg (see Shtarberg M.A. Antioxidant properties of combined preparations of phospholipids with derivatives of malonic and thiobarbituric acids: Diss. Candidate of Medical Sciences / M.A.Shtarberg. - Blagoveshchensk, 1996 .-- 178 p.).
Данные биохимических исследований сведены в таблицы 1 и 2.Data biochemical studies are summarized in tables 1 and 2.
ГруппаIndicator
Group
Далее, используя приведенные табличные данные, определяем по формуле Паа=Л+Кп+Э+Т величину показателя Паа.Further, using the tabulated data, we determine the value of Paa by the formula Paa = L + Kp + E + T.
Для Вангинского месторожденияFor Vanginsky field
А. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких (Л).A. Determination of lipid peroxidation products and natural antioxidants in lung tissue (L).
1) Церулоплазмин, мг/100 г. Содержание церулоплазмина 35,66±2,41 мг/100 г, что соответствует N±10% (39,02±2,54 мг/100 г), значит Ц=1.1) Ceruloplasmin, mg / 100 g. The content of ceruloplasmin 35.66 ± 2.41 mg / 100 g, which corresponds to N ± 10% (39.02 ± 2.54 mg / 100 g), means C = 1.
2) Малоновый диальдегид (МД), нмоль/г. Содержание МД 8,88±0,98 нмоль/г, что соответствует N±10% (8,84±1,22), значит МД=1.2) Malonic dialdehyde (MD), nmol / g. The MD content is 8.88 ± 0.98 nmol / g, which corresponds to N ± 10% (8.84 ± 1.22), which means that MD = 1.
3) Гидроперекиси, нмоль/г. Содержание гидроперекисей 89,4±4,8 нмоль/г, что соответствует N±10%) (90,6±4,4 нмоль/г), значит ГП=1.3) Hydroperoxides, nmol / g. The content of hydroperoxides is 89.4 ± 4.8 nmol / g, which corresponds to N ± 10%) (90.6 ± 4.4 nmol / g), which means GP = 1.
4) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 235,5±9,9 нмоль/г, что соответствует N±10%) (221,7±14,8 нмоль/г), т.е. ДК=1.4) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate is 235.5 ± 9.9 nmol / g, which corresponds to N ± 10%) (221.7 ± 14.8 nmol / g), i.e. DK = 1.
5) Витамин Е, мкг/г. Содержание витамина Е 190,1±5,5 мкг/г, что больше N±10% (205,4±7,4 мкг/г), значит ВЕ=0.5) Vitamin E, mcg / g. The vitamin E content is 190.1 ± 5.5 μg / g, which is more than N ± 10% (205.4 ± 7.4 μg / g), which means BE = 0.
Таким образом, Л=1, так как Ц(1)+МД(1)+ГП(1)+ДК(1)+ВЕ(0)=4Thus, Λ = 1, since C (1) + MD (1) + GP (1) + DK (1) + BE (0) = 4
Б. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в плазме крови (Кп).B. Determination of products of lipid peroxidation and natural antioxidants in blood plasma (Cp).
1) Церулоплазмин, мг/100 г. Содержание церулоплазмина 20,28±3,24 мг/100 г, что соответствует N±10% (21,44±1,27 мг/100 г), значит Ц=1.1) Ceruloplasmin, mg / 100 g. The content of ceruloplasmin 20.28 ± 3.24 mg / 100 g, which corresponds to N ± 10% (21.44 ± 1.27 mg / 100 g), means C = 1.
2) Малоновый диальдегид (МД), нмоль/г. Содержание МД 3,72±0,39 нмоль/г, что меньше N±10% (4,92±0,45 нмоль/г), значит МД=0.2) Malonic dialdehyde (MD), nmol / g. The MD content is 3.72 ± 0.39 nmol / g, which is less than N ± 10% (4.92 ± 0.45 nmol / g), which means that MD = 0.
3) Гидроперекиси, нмоль/г. Содержание гидроперекисей 24,58±4,52 нмоль/г, что соответствует N±10% (20,18±1,21 нмоль/г), значит ГП=1.3) Hydroperoxides, nmol / g. The content of hydroperoxides 24.58 ± 4.52 nmol / g, which corresponds to N ± 10% (20.18 ± 1.21 nmol / g), means GP = 1.
4) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 23,62±4,4 нмоль/г, что меньше N±10% (51,82±5,15 нмоль/г), значит ДК=0.4) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate 23.62 ± 4.4 nmol / g, which is less than N ± 10% (51.82 ± 5.15 nmol / g), means DK = 0.
5) Витамин Е, мкг/г. Содержание витамина Е 28,42±2,10 мкг/г, что соответствует N±10% (27,16±1,69), значит ВЕ=1.5) Vitamin E, mcg / g. The content of vitamin E is 28.42 ± 2.10 μg / g, which corresponds to N ± 10% (27.16 ± 1.69), which means BE = 1.
Таким образом, КП=1, Ц(1)+МД(0)+ГП(1)+ДК(0)+ВЕ(1)=3Thus, KP = 1, Ts (1) + MD (0) + GP (1) + DK (0) + BE (1) = 3
В. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в эритроцитах (Э).B. Determination of lipid peroxidation products and natural antioxidants in red blood cells (E).
1) Малоновый диальдегид (МД), нмоль/г. Содержание МД 4,1±0,2 нмоль/г, что меньше N±10% (5,5±0,3 нмоль/г), значит МД=0.1) Malonic dialdehyde (MD), nmol / g. The content of MD is 4.1 ± 0.2 nmol / g, which is less than N ± 10% (5.5 ± 0.3 nmol / g), then MD = 0.
2) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 43,4±2,3 нмоль/г, что меньше N±10% (56,6±3,3 нмоль/г), значит ДК=0.2) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate 43.4 ± 2.3 nmol / g, which is less than N ± 10% (56.6 ± 3.3 nmol / g), means DK = 0.
3) Витамин Е, нмоль/мл. Содержание витамина Е 4,1±0,1 мкг/г, что больше N±10% (4,1±0,1 мкг/г), значит ВЕ=2.3) Vitamin E, nmol / ml. The content of vitamin E is 4.1 ± 0.1 μg / g, which is more than N ± 10% (4.1 ± 0.1 μg / g), which means BE = 2.
Таким образом, Э=1, так как МД(0)+ДК(0)+ВЕ(2)=2Thus, E = 1, since MD (0) + DC (0) + BE (2) = 2
Г. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в тромбоцитах (Т).D. Determination of lipid peroxidation products and natural antioxidants in platelets (T).
1) Малоновый диальдегид (МД), нмоль/г. Содержание МД 5,1±0,2 нмоль/г, что меньше N±10% (6,1±0,5 нмоль/г), значит МД=0.1) Malonic dialdehyde (MD), nmol / g. The MD content is 5.1 ± 0.2 nmol / g, which is less than N ± 10% (6.1 ± 0.5 nmol / g), then MD = 0.
2) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 54,0±1,4 нмоль/г, что меньше N±10% (61,6±3,5), значит ДК=0.2) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate 54.0 ± 1.4 nmol / g, which is less than N ± 10% (61.6 ± 3.5), then DK = 0.
3) Витамин Е, нмоль/мл. Содержание витамина Е 5,6±0,1 мкг/г, что соответствует N±10% (5,1±1,0), значит ВЕ=1.3) Vitamin E, nmol / ml. The content of vitamin E is 5.6 ± 0.1 μg / g, which corresponds to N ± 10% (5.1 ± 1.0), which means BE = 1.
Таким образом, Т=1, так как МД(0)+ДК(0)+ВЕ(1)=1Thus, T = 1, since MD (0) + DC (0) + BE (1) = 1
ИТОГО: Величина показателя Паа для Вангинского месторожденияTOTAL: The value of Paa for the Vanginsky field
Паа=Л+Кп+Э+Т=1+1+1+1=4Paa = L + Kn + E + T = 1 + 1 + 1 + 1 = 4
Для Куликовского месторожденияFor Kulikovsky field
А. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких (Л).A. Determination of lipid peroxidation products and natural antioxidants in lung tissue (L).
1) Церулоплазмин, мг/100 г. Содержание церулоплазмина 32,27±1,0 мг/100 г, что меньше N±10% (39,02±2,54 мг/100 г), значит Ц=0.1) Ceruloplasmin, mg / 100 g. The content of ceruloplasmin 32.27 ± 1.0 mg / 100 g, which is less than N ± 10% (39.02 ± 2.54 mg / 100 g), then C = 0.
2) Малоновый диальдегид (МДА), нмоль/г. Содержание МД 10,56±0,92 нмоль/г, что больше N±10% (8,84±1,22), значит МД=2.2) Malonic dialdehyde (MDA), nmol / g. The MD content is 10.56 ± 0.92 nmol / g, which is greater than N ± 10% (8.84 ± 1.22), which means MD = 2.
3) Гидроперекиси, нмоль/г. Содержание гидроперекисей 110,6±10,9 нмоль/г, что больше N±10% (90,6±4,4 нмоль/г), значит ГП=2.3) Hydroperoxides, nmol / g. The content of hydroperoxides 110.6 ± 10.9 nmol / g, which is more than N ± 10% (90.6 ± 4.4 nmol / g), means GP = 2.
4) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 261,6±13 нмоль/г, что больше N±10% (221,7±14,8 нмоль/г), значит ДК=2.4) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate 261.6 ± 13 nmol / g, which is more than N ± 10% (221.7 ± 14.8 nmol / g), means DK = 2.
5) Витамин Е, мкг/г. Содержание витамина Е 189,4±4,2 мкг/г, что меньше N±10% (205,4±7,4 мкг/г), значит ВЕ=0.5) Vitamin E, mcg / g. The content of vitamin E is 189.4 ± 4.2 μg / g, which is less than N ± 10% (205.4 ± 7.4 μg / g), which means BE = 0.
Таким образом, Л=1, так как Ц(0)+МД(2)+ГП(2)+ДК(2)+ВЕ(0)=6Thus, Λ = 1, since C (0) + MD (2) + GP (2) + DK (2) + BE (0) = 6
Б. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в плазме крови (Кп).B. Determination of products of lipid peroxidation and natural antioxidants in blood plasma (Cp).
1) Церулоплазмин, мг/100 г. Содержание церулоплазмина 19,25±1,43 мг/100 г, что соответствует N±10% (21,44±1,27 мг/100 г), значит Ц=1.1) Ceruloplasmin, mg / 100 g. The content of ceruloplasmin 19.25 ± 1.43 mg / 100 g, which corresponds to N ± 10% (21.44 ± 1.27 mg / 100 g), means C = 1.
2) Малоновый диальдегид (МДА), нмоль/г. Содержание МДА 7,15±0,63 нмоль/г, что больше N±10% (4,92±0,45 нмоль/г), значит МД=2.2) Malonic dialdehyde (MDA), nmol / g. The MDA content is 7.15 ± 0.63 nmol / g, which is greater than N ± 10% (4.92 ± 0.45 nmol / g), which means MD = 2.
3) Гидроперекиси, нмоль/г. Содержание гидроперекисей 29,47±1,92 нмоль/г, что больше N±10% (20,18±1,21 нмоль/г), значит ГП=2.3) Hydroperoxides, nmol / g. The content of hydroperoxides 29.47 ± 1.92 nmol / g, which is more than N ± 10% (20.18 ± 1.21 nmol / g), means GP = 2.
4) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 59,85±5,63 нмоль/г, что больше N±10% (51,82±5,15 нмоль/г), значит ДК=2.4) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate 59.85 ± 5.63 nmol / g, which is more than N ± 10% (51.82 ± 5.15 nmol / g), means DK = 2.
5) Витамин Е, мкг/г. Содержание витамина Е 24,33±1,88 мкг/г, что меньше N±10% (27,16±1,69), значит ВЕ=0.5) Vitamin E, mcg / g. The content of vitamin E is 24.33 ± 1.88 μg / g, which is less than N ± 10% (27.16 ± 1.69), which means BE = 0.
Таким образом, КП=0, Ц(1)+МД(2)+ГП(2)+ДК(2)+ВЕ(0)=7Thus, KP = 0, C (1) + MD (2) + GP (2) + DK (2) + BE (0) = 7
В. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в эритроцитах (Э)B. Determination of lipid peroxidation products and natural antioxidants in red blood cells (E)
1) Малоновый диальдегид (МДА), нмоль/г. Содержание МДА 4,3±0,2 нмоль/г, что меньше N±10% (5,5±0,3 нмоль/г), значит МД=0.1) Malonic dialdehyde (MDA), nmol / g. The MDA content is 4.3 ± 0.2 nmol / g, which is less than N ± 10% (5.5 ± 0.3 nmol / g), then MD = 0.
2) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 47,8±2,5 нмоль/г, что меньше N±10% (56,6±3,3 нмоль/г), значит ДК=0.2) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate 47.8 ± 2.5 nmol / g, which is less than N ± 10% (56.6 ± 3.3 nmol / g), then DK = 0.
3) Витамин Е, нмоль/мл. Содержание витамина Е 3,7±0,1 мкг/г, что меньше N±10%) (4,1±0,1 мкг/г), значит ВЕ=0.3) Vitamin E, nmol / ml. The content of vitamin E is 3.7 ± 0.1 μg / g, which is less than N ± 10%) (4.1 ± 0.1 μg / g), which means BE = 0.
Таким образом, Э=0, так как Мд(0)+ДК(0)+ВЕ(0)=0Thus, E = 0, since Md (0) + DK (0) + BE (0) = 0
Г. Определение продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в тромбоцитах (Т).D. Determination of lipid peroxidation products and natural antioxidants in platelets (T).
1) Малоновый диальдегид (МДА), нмоль/г. Содержание МДА 5,3±0,3 нмоль/г, что меньше N±10% (6,1±0,5 нмоль/г), значит МД=0.1) Malonic dialdehyde (MDA), nmol / g. The MDA content is 5.3 ± 0.3 nmol / g, which is less than N ± 10% (6.1 ± 0.5 nmol / g), then MD = 0.
2) Диеновые конъюгаты (ДК), нмоль/г. Содержание диеновых конъюгат 56,2±2,0 нмоль/г, что меньше N±10% (61,6±3,5), значит ДК=0.2) Diene conjugates (DC), nmol / g. The content of diene conjugate 56.2 ± 2.0 nmol / g, which is less than N ± 10% (61.6 ± 3.5), means DK = 0.
3) Витамин Е, нмоль/мл. Содержание витамина Е 5,3±0,3 мкг/г, что соответствует N±10% (5,1±1,0), значит ВЕ=1.3) Vitamin E, nmol / ml. The content of vitamin E is 5.3 ± 0.3 μg / g, which corresponds to N ± 10% (5.1 ± 1.0), which means BE = 1.
Таким образом, Т=1, так как МД(0)+ДК(0)+ВЕ(1)=1Thus, T = 1, since MD (0) + DC (0) + BE (1) = 1
ИТОГО: Величина показателя Паа для Куликовского месторожденияTOTAL: The value of Paa for Kulikovskoye field
Паа=Л+Кп+Э+Т=1+0+0+1=2Paa = L + Kn + E + T = 1 + 0 + 0 + 1 = 2
Низкоэнергетическое лазерное излучение в использованной дозировке обладает прооксидантным действием. Как следует из данных таблиц 1, 2 в группе Куликовское+лазер, по сравнению с группой «Контроль» в ткани легких и в плазме крови было выявлено достоверное повышение содержания диеновых конъюгат и МД в гомогенате легких, увеличение содержания гидроперекисей, снижение концентрации церулоплазмина и витамина Е. Это говорит о функциональном снижении активности антиоксидантной системы при ингаляции цеолитов Куликовского месторождения в сочетании с низкоэнергетическим лазерным излучением. Это может быть обусловлено небольшим повреждением легочной ткани цеолитом Куликовского месторождения и стимуляцией воспаления лазерным излучением. Результаты в группе Вангинское+цеолит были следующие: обнаружено повышения МД в гомогенате легких и снижение церулоплазмина, повышение гидроперекисей и МД в плазме крови. С другой стороны наблюдается статистически достоверное снижение диеновых конъюгатов и статистически значимое увеличение концентрации витамина Е в плазме крови.The low-energy laser radiation used in the dosage has a prooxidant effect. As follows from the data in tables 1, 2 in the Kulikovskoye + laser group, a significant increase in the content of diene conjugates and MD in the lung homogenate, an increase in the content of hydroperoxides, and a decrease in the concentration of ceruloplasmin and vitamin were revealed in the Kulikovskoye + laser group in comparison with the Control group in lung tissue and plasma E. This indicates a functional decrease in the activity of the antioxidant system during inhalation of zeolites of the Kulikovskoye deposit in combination with low-energy laser radiation. This may be due to slight damage to the lung tissue by the zeolite of the Kulikovo deposit and stimulation of inflammation by laser radiation. The results in the Vanginskoye + zeolite group were as follows: there was an increase in MD in the lung homogenate and a decrease in ceruloplasmin, an increase in hydroperoxides and MD in blood plasma. On the other hand, there is a statistically significant decrease in diene conjugates and a statistically significant increase in the concentration of vitamin E in blood plasma.
Таким образом, при лазерном излучении, индуцирующем перекисное окисление липидов (ПОЛ), цеолиты Вангинского месторождения проявляют себя как вещества с выраженными антиоксидантными свойствами (Паа=4). Цеолиты Куликовского месторождения, являясь по типу кристаллической решетки преимущественно морденитом (игольчатая структура), наоборот частично стимулируют ПОЛ, что приводит к снижению показателя Паа (Паа=2), до уровня существенно меньшего аналогичного показателя для цеолитов Вангинского месторождения.Thus, with laser radiation inducing lipid peroxidation (LP), the zeolites of the Vanginsky deposit manifest themselves as substances with pronounced antioxidant properties (Paa = 4). Zeolites of the Kulikovskoye deposit, being predominantly mordenite by the type of crystal lattice (needle structure), on the contrary, partially stimulate LPO, which leads to a decrease in the Paa index (Paa = 2), to a level significantly lower than that for zeolites of the Vanginsky deposit.
Claims (1)
Паа=Л+Кп+Э+Т,
где Паа - показатель антиоксидантной активности цеолита, балл (от 0 до 4);
Л - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в ткани легких, балл;
Кп - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в плазме крови, балл;
Э - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в эритроцитах, балл;
Т - показатель, отражающий содержание продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов в тромбоцитах, балл,
при этом оценку антиоксидантной активности цеолита производят относительно нормальных значений содержания продуктов перекисного окисления липидов и естественных антиоксидантов (N), которые определяют как среднее арифметическое соответствующих показателей, полученных на животных контрольной группы, причем значение показателя Л принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям церулоплазмина (Ц, мг/100 г), малонового диальдегида (МД, нмоль/г), гидроперекиси (ГП, нмоль/г), диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и витамина Е (BE, мкг/г) в ткани легких, составляет от 3 до 6, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Л принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание церулоплазмина отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то Ц равно 1, если превышает значение N на 10%, то Ц равно 2, если меньше значения N на 10%, то Ц равно 0, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то МД равно 1, если превышает значение N на 10%, то МД равно 2, если меньше значения N на 10%, то МД равно 0, при этом, если содержание гидроперекиси отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то ГП равно 1, если превышает значение N на 10%, то ГП равно 2, если меньше значения N на 10%, то ГП равно 0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то ДК равно 1, если превышает значение N на 10%, то ДК равно 2, если меньше значения N на 10%, то ДК равно 0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то BE равно 1, если превышает значение N на 10%, то BE равно 2, если меньше значения N на 10%, то BE равно 0, причем значение показателя Кп принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям церулоплазмина (Ц, мг/100 г), малонового диальдегида (МД, нмоль/г), гидроперекиси (ГП, нмоль/г), диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и Витамина Е (BE, мкг/г) в плазме крови, составляет от 3 до 6, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Кп принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание церулоплазмина отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то Ц равно 1, если превышает значение N на 10%, то Ц равно 2, если меньше значения N на 10%, то Ц равно 0, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то МД равно 1, если превышает значение N на 10%, то МД равно 2, если меньше значения N на 10%, то МД равно 0, при этом, если содержание гидроперекиси отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то ГП равно 1, если превышает значение N на 10%, то ГП равно 2, если меньше значения N на 10%, то ГП равно 0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то ДК равно 1, если превышает значение N на 10%, то ДК равно 2, если меньше значения N на 10%, то ДК равно 0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то BE равно 1, если превышает значение N на 10%, то BE равно 2, если меньше значения N на 10%, то BE равно 0, причем значение показателя Э принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям малонового диальдегида (МД, нмоль/г), диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и витамина Е (BE, нмоль/мл) в эритроцитах, находится в пределах от 1 до 4, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Э принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то МД равно 1, если превышает значение N на 10%, то МД равно 2, если меньше значения N на 10%, то МД равно 0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то ДК равно 1, если превышает значение N на 10%, то ДК равно 2, если меньше значения N на 10%, то ДК равно 0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то BE равно 1, если превышает значение N на 10%, то BE равно 2, если меньше значения N на 10%, то BE равно 0, причем значение показателя Т принимают равным 1 баллу, если суммарное значение баллов, соответствующих содержаниям малонового диальдегида (МД, нмоль/г), диеновых конъюгатов (ДК, нмоль/г) и витамина Е (BE, нмоль/мл) в тромбоцитах, находится в пределах от 1 до 4, а при значениях, меньших или больших названного предела, значение показателя Т принимают равным 0 баллов, при этом, если содержание малонового диальдегида отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то МД равно 1, если превышает значение N на 10%, то МД равно 2, если меньше значения N на 10%, то МД равно 0, при этом, если содержание диеновых конъюгатов отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то ДК равно 1, если превышает значение N на 10%, то ДК равно 2, если меньше значения N на 10%, то ДК равно 0, при этом, если содержание витамина Е отклоняется от нормальных значений не более чем на 10%, то BE равно 1, если превышает значение N на 10%, то BE равно 2, если меньше значения N на 10%, то BE равно 0. A method for determining the antioxidant activity of zeolites, including their introduction into the body of experimental animals, slaughter of experimental and control animals, preparation of biological products from the tissues and organs of both groups of animals, the identification and quantification of substances that are indicators of metabolic processes in the body of these animals, and they affect animals suppresses the functional activity of the cells of the local lung immunity system; for this, the chest of animals is irradiated in the subaxillary, scapular and subscapular areas on the right and left, by means of a pulsed infrared laser with a wavelength of 850 nm, a pulse energy of 3.7 · 10 -7 J, a pulse repetition rate of 240-1400 Hz and a modulation of 8-69 Hz, while the evaluated zeolite is introduced into the body of experimental animals by inhalation, moreover, in both groups the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in the lung tissue, in blood plasma, in red blood cells and platelets, which are converted into points, is determined and summed by the expression:
Paa = L + Kn + E + T,
where Paa - an indicator of the antioxidant activity of the zeolite, score (from 0 to 4);
L is an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in lung tissue, score;
Kp - an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in blood plasma, score;
E - an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in red blood cells, score;
T is an indicator reflecting the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants in platelets, score,
in this case, the antioxidant activity of the zeolite is estimated relative to the normal values of the content of lipid peroxidation products and natural antioxidants (N), which are determined as the arithmetic average of the corresponding indicators obtained in animals of the control group, and the value of indicator L is equal to 1 point, if the total score, corresponding to the contents of ceruloplasmin (C, mg / 100 g), malondialdehyde (MD, nmol / g), hydroperoxide (GP, nmol / g), diene conjugates (DC, nmol / g) vitamin E (BE, μg / g) in lung tissue is from 3 to 6, and at values less than or greater than the specified limit, the value of the indicator L is taken equal to 0 points, while if the content of ceruloplasmin deviates from normal values no more than by 10%, then C is 1, if it exceeds N by 10%, then C is 2, if it is less than N by 10%, then C is 0, and if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than 10%, then the MD is 1, if it exceeds the value of N by 10%, then the MD is 2, if it is less than the value of N by 10%, then the MD is equal to 0, while if the content of hydroperoxide deviates from normal values by no more than 10%, then GP is equal to 1, if it exceeds N by 10%, then GP is 2, if less than N by 10%, then GP is 0 in this case, if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than 10%, then DK is 1, if it exceeds N by 10%, then DK is 2, if less than N by 10%, then DK is 0, at the same time, if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than 10%, then BE is 1, if it exceeds N by 10%, then BE is 2, e if the value of N is less by 10%, then BE is 0, and the value of Kp is assumed to be 1 point if the total score corresponding to the contents of ceruloplasmin (C, mg / 100 g), malondialdehyde (MD, nmol / g), hydroperoxide (GP, nmol / g), diene conjugates (DK, nmol / g) and Vitamin E (BE, μg / g) in blood plasma, is from 3 to 6, and for values smaller or larger than the specified limit, the value of the indicator taken equal to 0 points, while if the content of ceruloplasmin deviates from normal values by no more than 10%, then C is equal to o 1, if it exceeds N by 10%, then C is 2, if it is less than N by 10%, then C is 0, and if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than 10%, then MD is 1, if it exceeds N by 10%, then MD is 2, if it is less than N by 10%, then MD is 0, and if the content of hydroperoxide deviates from normal values by no more than 10%, then GP is 1, if it exceeds N by 10%, then GP is equal to 2; if it is less than N by 10%, then GP is 0, and if the content of diene conjugates deviates from the norm of the maximum values by no more than 10%, then DC is 1, if it exceeds N by 10%, then DC is 2, if it is less than N by 10%, then DC is 0, while if the content of vitamin E deviates from normal values by no more than 10%, then BE is 1, if it exceeds N by 10%, then BE is 2, if it is less than N by 10%, then BE is 0, and the value of indicator E is taken to be 1 point, if the total the value of the points corresponding to the contents of malondialdehyde (MD, nmol / g), diene conjugates (DC, nmol / g) and vitamin E (BE, nmol / ml) in red blood cells, n ranges from 1 to 4, and for values less than or greater than the specified limit, the value of the indicator E is taken equal to 0 points, while if the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than 10%, then the MD is 1, if exceeds N by 10%, then MD is 2, if less than N by 10%, then MD is 0, while if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than 10%, then DC is 1, if it exceeds the value of N is 10%, then the DC is 2, if it is less than the value of N by 10%, then the DC is 0, while and the content of vitamin E deviates from normal values by no more than 10%, then BE is 1, if it exceeds N by 10%, then BE is 2, if it is less than N by 10%, then BE is 0, and the value of T take 1 point if the total score corresponding to the contents of malondialdehyde (MD, nmol / g), diene conjugates (DC, nmol / g) and vitamin E (BE, nmol / ml) in platelets is in the range from 1 to 4, and at values less than or greater than the named limit, the value of the indicator T is taken equal to 0 points, while, if and the content of malondialdehyde deviates from normal values by no more than 10%, then the MD is 1, if it exceeds N by 10%, then the MD is 2, if less than N by 10%, then the MD is 0, while if the content of diene conjugates deviates from normal values by no more than 10%, then DK is 1, if it exceeds N by 10%, then DK is 2, if it is less than N by 10%, then DK is 0, and if the content vitamin E deviates from normal values by no more than 10%, then BE is 1, if it exceeds N by 10%, then BE is 2, if less values of N by 10%, then BE is 0.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009121014/15A RU2419794C2 (en) | 2009-06-02 | 2009-06-02 | Method of substance antioxidant activity test |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009121014/15A RU2419794C2 (en) | 2009-06-02 | 2009-06-02 | Method of substance antioxidant activity test |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009121014A RU2009121014A (en) | 2010-12-10 |
| RU2419794C2 true RU2419794C2 (en) | 2011-05-27 |
Family
ID=44735038
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009121014/15A RU2419794C2 (en) | 2009-06-02 | 2009-06-02 | Method of substance antioxidant activity test |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2419794C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2821319C1 (en) * | 2023-10-02 | 2024-06-20 | Павел Вадимович Логинов | Method for evaluating antioxidant activity of natural compounds |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4615877A (en) * | 1984-02-27 | 1986-10-07 | Savapa S.R.L. | Method of determining the oxidizing activity of a biological liquid, and a corresponding reagent |
| SU1532869A1 (en) * | 1987-07-07 | 1989-12-30 | Челябинский государственный медицинский институт | Method of determining antioxidant activity of chemical compounds |
| RU2144674C1 (en) * | 1999-02-24 | 2000-01-20 | Сирота Татьяна Валерияновна | Method of assessing antioxidant activity of superoxidedismutase and chemical compounds |
| RU2163021C2 (en) * | 1998-11-19 | 2001-02-10 | Научно-исследовательский институт физико-химической медицины Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of assay of antioxidant activity of substances |
| RU2235998C2 (en) * | 2002-11-14 | 2004-09-10 | Уральский государственный экономический университет | Method of determination of oxidant/anti-oxidant activity of solutions |
| RU2238554C1 (en) * | 2003-07-25 | 2004-10-20 | Закрытое акционерное общество "АП Химавтоматика" | Method for determining total antioxidation activity of biologically active substances |
| RU2282851C2 (en) * | 2004-12-27 | 2006-08-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный университет (КубГУ) | Method for determination of total antioxidant activity |
| WO2009036120A1 (en) * | 2007-09-11 | 2009-03-19 | Cornell Research Foundation, Inc. | Cellular antioxidant activity (caa) assay |
-
2009
- 2009-06-02 RU RU2009121014/15A patent/RU2419794C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4615877A (en) * | 1984-02-27 | 1986-10-07 | Savapa S.R.L. | Method of determining the oxidizing activity of a biological liquid, and a corresponding reagent |
| SU1532869A1 (en) * | 1987-07-07 | 1989-12-30 | Челябинский государственный медицинский институт | Method of determining antioxidant activity of chemical compounds |
| RU2163021C2 (en) * | 1998-11-19 | 2001-02-10 | Научно-исследовательский институт физико-химической медицины Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of assay of antioxidant activity of substances |
| RU2144674C1 (en) * | 1999-02-24 | 2000-01-20 | Сирота Татьяна Валерияновна | Method of assessing antioxidant activity of superoxidedismutase and chemical compounds |
| RU2235998C2 (en) * | 2002-11-14 | 2004-09-10 | Уральский государственный экономический университет | Method of determination of oxidant/anti-oxidant activity of solutions |
| RU2238554C1 (en) * | 2003-07-25 | 2004-10-20 | Закрытое акционерное общество "АП Химавтоматика" | Method for determining total antioxidation activity of biologically active substances |
| RU2282851C2 (en) * | 2004-12-27 | 2006-08-27 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный университет (КубГУ) | Method for determination of total antioxidant activity |
| WO2009036120A1 (en) * | 2007-09-11 | 2009-03-19 | Cornell Research Foundation, Inc. | Cellular antioxidant activity (caa) assay |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ГОЛОХВАСТ К.С. и др. Антиоксидантные и иммуномодулирующие свойства природных цеолитов // Тихоокеанский медицинский журнал, 2009, №3, с.68-70. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2821319C1 (en) * | 2023-10-02 | 2024-06-20 | Павел Вадимович Логинов | Method for evaluating antioxidant activity of natural compounds |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2009121014A (en) | 2010-12-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tarpey et al. | Methods for detection of reactive metabolites of oxygen and nitrogen: in vitro and in vivo considerations | |
| Tan et al. | Luteolin exerts neuroprotection via modulation of the p62/Keap1/Nrf2 pathway in intracerebral hemorrhage | |
| Ohsawa et al. | Hydrogen acts as a therapeutic antioxidant by selectively reducing cytotoxic oxygen radicals | |
| Liu et al. | The roles of free radicals in amyotrophic lateral sclerosis: reactive oxygen species and elevated oxidation of protein, DNA, and membrane phospholipids | |
| Gutteridge et al. | Superoxide-dependent formation of hydroxyl radicals and lipid peroxidation in the presence of iron salts. Detection of ‘catalytic’iron and anti-oxidant activity in extracellular fluids | |
| Goldstein et al. | Ozone and lipid peroxidation | |
| Chintagari et al. | Oxidized ferric and ferryl forms of hemoglobin trigger mitochondrial dysfunction and injury in alveolar type I cells | |
| Morihara et al. | Aged garlic extract scavenges superoxide radicals | |
| Ranguelova et al. | Sulfite-mediated oxidation of myeloperoxidase to a free radical: immuno-spin trapping detection in human neutrophils | |
| Abod et al. | Evaluation of total oxidant status and antioxidant capacity in sera of acute-and chronic-renal failure patients | |
| Manickam et al. | Recurrent exposure to ferric oxide nanoparticles alters myocardial oxidative stress, apoptosis and necrotic markers in male mice | |
| Page et al. | Immunopharmacology of free radical species | |
| Pincemail et al. | Oxidative stress in clinical situations–fact or fiction? | |
| Ota et al. | Metformin prevents methylglyoxal-induced apoptosis of mouse Schwann cells | |
| Cho et al. | Melatonin alleviates asphyxial cardiac arrest-induced cerebellar Purkinje cell death by attenuation of oxidative stress | |
| Sawicka et al. | The effects of coenzyme Q10 and baicalin in cisplatin-induced lipid peroxidation and nitrosative stress | |
| Jana et al. | Antimicrobial 405 nm violet-blue light treatment of ex vivo human platelets leads to mitochondrial metabolic reprogramming and potential alteration of Phospho-proteome | |
| Kim et al. | Phloroglucinol exerts protective effects against oxidative stress–induced cell damage in SH-SY5Y cells | |
| Zhang et al. | A macrocyclic molecule with multiple antioxidative activities protects the lens from oxidative damage | |
| Dahiya et al. | Antioxidant status in neonatal jaundice before and after phototherapy | |
| RU2419794C2 (en) | Method of substance antioxidant activity test | |
| Kondo et al. | Phosphoenolpyruvic acid, an intermediary metabolite of glycolysis, as a potential cytoprotectant and anti-oxidant in HeLa cells | |
| Salomez-Ihl et al. | Hydrogen inhalation: in vivo rat genotoxicity tests | |
| Pieniazek et al. | Structural component changes of erythrocytes caused by oxidative stress generated by indoxyl sulfate | |
| Cyboran-Mikołajczyk et al. | Allium ursinum L. leaves components modified the physico-chemical properties of red blood cells protecting them from the effects of oxidative stress |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110603 |