RU2499002C1 - Conjugates of gossypol and sodium-carboxymethyl cellulose, their production methods and antiviral agents on their basis - Google Patents
Conjugates of gossypol and sodium-carboxymethyl cellulose, their production methods and antiviral agents on their basis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2499002C1 RU2499002C1 RU2012124911/04A RU2012124911A RU2499002C1 RU 2499002 C1 RU2499002 C1 RU 2499002C1 RU 2012124911/04 A RU2012124911/04 A RU 2012124911/04A RU 2012124911 A RU2012124911 A RU 2012124911A RU 2499002 C1 RU2499002 C1 RU 2499002C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gossypol
- carboxymethyl cellulose
- sodium carboxymethyl
- molecular weight
- conjugate
- Prior art date
Links
- QBKSWRVVCFFDOT-UHFFFAOYSA-N gossypol Chemical compound CC(C)C1=C(O)C(O)=C(C=O)C2=C(O)C(C=3C(O)=C4C(C=O)=C(O)C(O)=C(C4=CC=3C)C(C)C)=C(C)C=C21 QBKSWRVVCFFDOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 183
- QHOPXUFELLHKAS-UHFFFAOYSA-N Thespesin Natural products CC(C)c1c(O)c(O)c2C(O)Oc3c(c(C)cc1c23)-c1c2OC(O)c3c(O)c(O)c(C(C)C)c(cc1C)c23 QHOPXUFELLHKAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 92
- 229930000755 gossypol Natural products 0.000 title claims abstract description 92
- 229950005277 gossypol Drugs 0.000 title claims abstract description 92
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 91
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 title claims abstract description 82
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 title claims abstract description 81
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 title claims abstract description 79
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 23
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- QFWPJPIVLCBXFJ-UHFFFAOYSA-N glymidine Chemical compound N1=CC(OCCOC)=CN=C1NS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 QFWPJPIVLCBXFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims description 10
- ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N Dialdehyde 11678 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1[C@H](C[C@H](/C(=C/O)C(=O)OC)[C@@H](C=C)C=O)NCC2 ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N 0.000 claims description 9
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 claims description 8
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 claims description 7
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 5
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- GBFLZEXEOZUWRN-VKHMYHEASA-N S-carboxymethyl-L-cysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CSCC(O)=O GBFLZEXEOZUWRN-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 6
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 5
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 150000004548 gossypol derivatives Chemical class 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- LJKDPUCDUDLUOM-UHFFFAOYSA-N [3,8-diacetyloxy-1-formyl-6-methyl-4-propan-2-yl-7-(1,6,7-triacetyloxy-8-formyl-3-methyl-5-propan-2-ylnaphthalen-2-yl)naphthalen-2-yl] acetate Chemical compound CC(C)C1=C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)=C(C=O)C2=C(OC(C)=O)C(C=3C(OC(C)=O)=C4C(C=O)=C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)=C(C4=CC=3C)C(C)C)=C(C)C=C21 LJKDPUCDUDLUOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 3
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 3
- 229940105329 carboxymethylcellulose Drugs 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 3
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- IIRJCUDCUZICFH-UHFFFAOYSA-N 5-[[2,3,8-trihydroxy-6-methyl-4-propan-2-yl-7-[1,6,7-trihydroxy-3-methyl-5-propan-2-yl-8-[(2,4,6-trioxo-1,3-diazinan-5-ylidene)methyl]naphthalen-2-yl]naphthalen-1-yl]methylidene]-1,3-diazinane-2,4,6-trione Chemical compound C12=C(O)C(C=3C(=C4C(C=C5C(NC(=O)NC5=O)=O)=C(O)C(O)=C(C(C)C)C4=CC=3C)O)=C(C)C=C2C(C(C)C)=C(O)C(O)=C1C=C1C(=O)NC(=O)NC1=O IIRJCUDCUZICFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSVLPVUVIUVCRA-KPKNDVKVSA-N Alpha-lactose monohydrate Chemical compound O.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WSVLPVUVIUVCRA-KPKNDVKVSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000867607 Chlorocebus sabaeus Species 0.000 description 1
- 229910021555 Chromium Chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001358 anti-chlamydial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003602 anti-herpes Effects 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 229960000913 crospovidone Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- VYBIEVCNCDKLPV-MROCHPEUSA-L disodium;2-[[(z)-[7-[(8z)-1,6-dihydroxy-3-methyl-7-oxo-5-propan-2-yl-8-[(2-sulfonatoethylamino)methylidene]naphthalen-2-yl]-3,8-dihydroxy-6-methyl-2-oxo-4-propan-2-ylnaphthalen-1-ylidene]methyl]amino]ethanesulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].CC(C)C1=C(O)C(=O)\C(=C/NCCS([O-])(=O)=O)C2=C(O)C(C=3C(O)=C4C(=C/NCCS([O-])(=O)=O)/C(=O)C(O)=C(C4=CC=3C)C(C)C)=C(C)C=C21 VYBIEVCNCDKLPV-MROCHPEUSA-L 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 208000010710 hepatitis C virus infection Diseases 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000002799 interferon inducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960001021 lactose monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 235000013809 polyvinylpolypyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000523 polyvinylpolypyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229940069328 povidone Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается новых конъюгатов госсипола и натрийкарбоксиметилцеллюлозы, способов их получения и противовирусных средств на их основе.The invention relates to the field of pharmaceuticals and medicine and relates to new conjugates of gossypol and sodium carboxymethyl cellulose, methods for their preparation and antiviral agents based on them.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИBACKGROUND OF THE INVENTION
Известно, что низкомолекулярный полифенол - госсипол стимулирует синтез интерферона в организме животных и обладает противовирусной активностью [АС СССР No.721103].It is known that low molecular weight polyphenol - gossypol stimulates the synthesis of interferon in animals and has antiviral activity [AS USSR No.721103].
Сам госсипол имеет ряд недостатков - плохая растворимость в воде, высокая токсичность и сравнительно низкая противовирусная активность, и, как следствие, невысокий химико-терапевтический индекс (ХТП).Gossypol itself has a number of drawbacks - poor solubility in water, high toxicity and relatively low antiviral activity, and, as a consequence, a low chemical-therapeutic index (CTP).
Поэтому исследования специалистов были направлены на разработку новых производных госсипола, сохраняющих его полезные свойства индуктора интерферона и лишенные недостатков, присущих самому госсиполу.Therefore, the studies of specialists were aimed at developing new derivatives of gossypol, preserving its useful properties of the interferon inducer and devoid of the disadvantages inherent in gossypol itself.
На основе госсипола и его производных были созданы и внедрены в практику различные препараты противовирусного (линимент госсипола), антигерпетического (мазь мегосина), иммуносупрессивного (таблетки батридена), антихламидийного (таблетки гозалидона) и интеферониндуцирующего действия.On the basis of gossypol and its derivatives, various antiviral (gossypol liniment), antiherpetic (megosin ointment), immunosuppressive (batriden tablets), antichlamydial (gosalidone tablets) and interferon-inducing effects were created and put into practice.
В качестве одного из направлений модификации госсипола было выбрано создание его коньюгатов с полимерной матрицей. Данный выбор был обусловлен тем, что свободный госсипол токсичен, а госсипол в связанной с белками форме, образующейся в процессе технологической обработки семян хлопчатника, для организма млекопитающих нетоксичен.The creation of its conjugates with a polymer matrix was chosen as one of the directions for the modification of gossypol. This choice was due to the fact that free gossypol is toxic, and gossypol in the form associated with proteins formed during the technological processing of cotton seeds is not toxic to mammals.
В фармацевтической практике остается потребность в разработке препаратов на основе госсипола, которые при сохранении и усилении полезных свойств госсипола не обладали бы токсичностью и были бы удобны в применении для различных терапевтических и профилактических целей.In pharmaceutical practice, there remains a need to develop preparations based on gossypol, which, while maintaining and enhancing the beneficial properties of gossypol, would not have toxicity and would be convenient to use for various therapeutic and prophylactic purposes.
Известно производное госсипола и натрийкарбоксиметицеллюлозы, обладающее интерферониндуцирующим и противовирусным действием, представляющее собой гетероцепной полимер с характеристической вязкостью 0,06-0,1, полученный окислением натрийкарбоксиметицеллюлозы с последующим взаимодействием с госсиполом (RU 2002755). Защитное действие препарата подтверждено в исследованиях на мышах, зараженных инфекциями вируса энцефаломиокардита, гриппа и гепатита.A derivative of gossypol and sodium carboxymethyl cellulose is known to have an interferon-inducing and antiviral effect, which is a hetero-polymer with a characteristic viscosity of 0.06-0.1, obtained by oxidation of sodium carboxymethyl cellulose with subsequent interaction with gossypol (RU 2002755). The protective effect of the drug is confirmed in studies on mice infected with infections of the virus of encephalomyocarditis, influenza and hepatitis.
Известно также производное госсипола, представляющее собой натриевую соль сополимера производного госсипола (госсиполята натрийкарбоксиметилцеллюлозы) и карбоксиметилцеллюлозы с молекулярной массой 120000-130000 Да и степенью замещения 0,35-0,80, обладающее противовирусным действием в отношении вирусов ОРВИ, гриппа и герпеса (RU 2270708).A gossypol derivative is also known, which is the sodium salt of a copolymer of gossypol derivative (gossypolate of sodium carboxymethyl cellulose) and carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 120,000-130,000 Yes and a degree of substitution of 0.35-0.80, which has an antiviral effect against ARVI, influenza and herpes viruses (22 )
Задачей изобретения является расширение ассортимента противовирусных средств, обладающих высоким уровнем терапевтической эффективности.The objective of the invention is to expand the range of antiviral agents with a high level of therapeutic efficacy.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯSUMMARY OF THE INVENTION
Настоящее изобретение относится к конъюгату госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой, обладающему противовирусным действием, охарактеризованному молекулярной массой 780-180000 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (1-5):(99-85)% масс. и содержащему не более 20% масс. низкомолекулярной фракции с молекулярной массой от 780 до 1500 Да и не более 80% масс. высокомолекулярной фракции с молекулярной массой от 1500 до 180000 Да.The present invention relates to a conjugate of gossypol with sodium carboxymethyl cellulose, having an antiviral effect, characterized by a molecular weight of 780-180000 Yes at a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (1-5) :( 99-85)% wt. and containing not more than 20% of the mass. low molecular weight fraction with a molecular weight of from 780 to 1500 Yes and not more than 80% of the mass. high molecular weight fraction with a molecular weight of from 1500 to 180,000 Yes.
Настоящее изобретение также относится к конъюгату госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой, обладающему противовирусным действием и охарактеризованному молекулярной массой от 780 до 1500Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,35-1,76):(99,65-98,24)% масс., а также к конъюгату госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой, обладающему противовирусным действием и охарактеризованному молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,65-3,23):(99,35-96,77)% масс.The present invention also relates to a gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose having an antiviral effect and a molecular weight of 780 to 1,500 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.35-1.76) :( 99.65-98.24% wt., And also to the gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose, which has an antiviral effect and is characterized by a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.65-3.23) :( 99.35-96.77)% wt.
Конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой, характеризующийся молекулярной массой 780-180000Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (1-5):(99-85)% масс. и содержащий не более 20% масс. низкомолекулярной фракции с молекулярной массой от 780 до 1500 Да и не более 80% масс. высокомолекулярной фракции с молекулярной массой от 1500 до 180000 Да, может быть получен способом, включающим взаимодействие водного раствора натрийкарбоксиметилцеллюлозы со степенью замещения (0,35-0,8) с водным раствором иодной кислоты при массовом соотношении натрийкарбоксиметилцеллюлозы и иодной кислоты (25-35):(0,5-5) с последующими стадиями осаждения диальдегида натрийкарбоксиметилцеллюлозы путем обработки реакционной смеси смесью подкисленного водного раствора иодистого натрия и ацетона, выделения и обработки полученного диальдегида натрийкарбоксиметилцеллюлозы госсиполоуксусной кислотой в смеси водного раствора щелочи и ацетона с получением целевого продукта. При этом на первой стадии в результате реакции окисления происходит раскрытие глюкопиранозного цикла NaКМЦ с образованием диальдегида КМЦ. Поскольку легче окисляются незамещенные циклы NaКМЦ, то количество образовавшихся диальдегидных групп в них будет больше, чем в замещенных. Поэтому на второй стадии присоединения госсипола к диальдегиду КМЦ незамещенные циклы будут содержать больше госсипола, чем замещенные.The gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose, characterized by a molecular weight of 780-180000 Yes, with the ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (1-5) :( 99-85)% wt. and containing not more than 20% of the mass. low molecular weight fraction with a molecular weight of from 780 to 1500 Yes and not more than 80% of the mass. high molecular weight fraction with a molecular weight of from 1500 to 180,000 Yes, can be obtained by a method involving the interaction of an aqueous solution of sodium carboxymethyl cellulose with a degree of substitution (0.35-0.8) with an aqueous solution of iodic acid with a mass ratio of sodium carboxymethyl cellulose and iodic acid (25-35) : (0.5-5) with subsequent steps of precipitating sodium carboxymethyl cellulose dialdehyde by treating the reaction mixture with a mixture of an acidified aqueous solution of sodium iodide and acetone, isolating and treating the obtained dialdehyde n triykarboksimetiltsellyulozy gossipolouksusnoy acid in aqueous alkali-acetone mixture to obtain the desired product. Moreover, at the first stage, as a result of the oxidation reaction, the glucopyranose cycle of NaKMC opens with the formation of CMC dialdehyde. Since unsubstituted NaKMC cycles are more easily oxidized, the number of formed dialdehyde groups in them will be greater than in substituted ones. Therefore, in the second stage of addition of gossypol to CMC dialdehyde, unsubstituted cycles will contain more gossypol than substituted ones.
Конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой, охарактеризованный молекулярной массой от 780 до 1500Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,35-1,76): (99,65-98,24)% масс., может быть получен способом, включающим разделение описанного выше конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой молекулярной массой 780-180000 Да методом эксклюзионной хроматографии и выделение фракции с молекулярной массой от 780 Да до 1500 Да.The gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose, characterized by a molecular weight of from 780 to 1500 Da, with the ratio gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.35-1.76): (99.65-98.24)% by weight, can be obtained by a method involving the separation of the conjugate described above gossypol with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 780-180000 Da by size exclusion chromatography and isolation of a fraction with a molecular weight of from 780 Da to 1500 Da.
Конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой, охарактеризованный молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,65-3,23):(99,35-96,77)% масс., может быть получен способом, включающим разделение описанного выше конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой молекулярной массой 780-180000 Да методом эксклюзионной хроматографии и выделение фракции с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да соответственно.The gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose, characterized by a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.65-3.23) :( 99.35-96.77)% by weight, can be obtained by a method involving the separation of the described above the conjugate of gossypol with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 780-180000 Yes by size exclusion chromatography and the separation of fractions with a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Yes, respectively.
Все описанные выше способы являются объектами настоящего изобретения.All of the above methods are objects of the present invention.
Кроме того, еще одним объектом настоящего изобретения является противовирусное средство, представляющее собой конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой 780-180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (1-5):(99-85)% масс., содержащий не более 20% масс. низкомолекулярной фракции с молекулярной массой от 780 Да до 1500 Да и не более 80% масс. высокомолекулярной фракции с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да.In addition, another object of the present invention is an antiviral agent, which is a gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 780-180000 Yes at a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (1-5) :( 99-85)% wt., Containing not more than 20% mass low molecular weight fraction with a molecular weight of from 780 Da to 1500 Yes and not more than 80% of the mass. high molecular weight fraction with a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Da.
Еще одним другим объектом настоящего изобретения является противовирусное средство, представляющее собой конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 780 до 1500 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,35-1,76):(99,65-98,24)% масс.Another other object of the present invention is an antiviral agent, which is a gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of from 780 to 1500 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.35-1.76) :( 99.65-98.24)% mass .
Еще одним другим объектом настоящего изобретения является противовирусное средство, представляющее собой конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,65-3,23):(99,35-96,77)% масс.Another object of the present invention is an antiviral agent, which is a gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.65-3.23) :( 99.35-96.77)% mass
Предложенные в настоящем изобретении противовирусные средства предназначены для применения в терапии больных вирусными заболеваниями, в том числе, гриппом или гепатитом С. Так, в частности, противовирусные средства согласно настоящему изобретению можно применять в комплексной терапии больных гепатитом С и гриппом. Наиболее предпочтительно применять противовирусные средства на основе конъюгатов, которые получены способами согласно настоящему изобретению.The antiviral agents proposed in the present invention are intended for use in the treatment of patients with viral diseases, including influenza or hepatitis C. Thus, in particular, the antiviral agents according to the present invention can be used in the complex treatment of patients with hepatitis C and influenza. It is most preferable to use conjugate antiviral agents that are prepared by the methods of the present invention.
Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, обладающая противовирусным действием, включающая в качестве активного компонента терапевтически эффективное количество конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой 780-180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (1-5): (99-85)% масс., содержащего не более 20% масс. низкомолекулярной фракции с молекулярной массой от 780 Да до 1500 Да и не более 80% масс. высокомолекулярной фракции с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да, и фармацевтически приемлемые добавки.Another object of the present invention is a pharmaceutical composition having an antiviral effect, comprising as the active component a therapeutically effective amount of gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 780-180000 Yes with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (1-5): (99-85)% by weight. containing not more than 20% of the mass. low molecular weight fraction with a molecular weight of from 780 Da to 1500 Yes and not more than 80% of the mass. high molecular weight fractions with a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Yes, and pharmaceutically acceptable additives.
Еще одним другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, обладающая противовирусным действием, включающая в качестве активного компонента терапевтически эффективное количество конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 780 до 1500 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,35-1,76):(99,65-98,24)% масс.Another object of the present invention is a pharmaceutical composition having an antiviral effect, comprising as the active component a therapeutically effective amount of gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of from 780 to 1500 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.35-1.76) :( 99.65-98.24)% of the mass.
Еще одним другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, обладающая противовирусным действием, включающая в качестве активного компонента терапевтически эффективное количество конъюгата госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,65-3,23):(99,35-96,77) масс.%.Another other object of the present invention is a pharmaceutical composition having an antiviral effect, comprising as the active component a therapeutically effective amount of gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.65-3.23): (99.35-96.77) wt.%.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению предназначены для применения в терапии больных вирусными заболеваниями, в частности, гриппом или гепатитом С.The pharmaceutical compositions of the present invention are intended for use in the treatment of patients with viral diseases, in particular influenza or hepatitis C.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Авторы настоящего изобретения разработали способ, который обеспечивает получение конъюгата госсипола и натрийкарбоксиметилцеллюлозы с широким диапазоном молекулярных масс, что неожиданно привело к обеспечению высокого уровня противовирусной активности конъюгата, в особенности его низмолекулярной фракции.The inventors of the present invention have developed a method that provides the preparation of a gossypol conjugate and sodium carboxymethyl cellulose with a wide range of molecular weights, which unexpectedly led to a high level of antiviral activity of the conjugate, especially its low molecular weight fraction.
Получение предложенного в настоящем изобретении конъюгата госсипола и натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (ГКМЦ), характеризующегося молекулярной массой 780-180000 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (1-5):(99-85)% масс. и содержащему не более 20% масс. низкомолекулярной фракции с молекулярной массой от 780 до 1500 Да и не более 80% масс. высокомолекулярной фракции с молекулярной массой от 1500 до 180000 Да, осуществляют следующим образом.Obtaining the present invention, the conjugate of gossypol and sodium salt of carboxymethyl cellulose (HCMC), characterized by a molecular weight of 780-180000 Yes at a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (1-5) :( 99-85)% wt. and containing not more than 20% of the mass. low molecular weight fraction with a molecular weight of from 780 to 1500 Yes and not more than 80% of the mass. high molecular weight fraction with a molecular weight of from 1500 to 180,000 Yes, as follows.
Водный раствор иодной кислоты (предпочтительно с концентрацией 1-25% масс.) добавляют к сильно разбавленному водному раствору натрийкарбоксиметилцеллюлозы (NaКМЦ), предпочтительно с концентрацией 7-10% масс., в массовом соотношении (0,5-5):(25-35) и проводят взаимодействие при перемешивании, предпочтительно в течение 3-4 часов. Полученную реакционную смесь обрабатывают смесью подкисленного водного раствора иодистого натрия и ацетона с последующим осаждением полученного диальдегида натрийкарбоксиметилцеллюлозы (ДАКМЦ). В этом случае предпочтительно использовать смесь (60-67)%-ного раствора NaI, (32-38)%-ного раствора HCl и ацетона в массовом соотношении (2:1:26). Полученный осадок ДАКМЦ отфильтровывают и многократно промывают водно-ацетоновой смесью, взятой в массовом соотношении от 1:4 до 3:7 и, в заключении, чистым ацетоном. Затем ДАКМЦ растворяют в водно-щелочном растворе и добавляют приготовленный заранее раствор госсиполуксусной кислоты (ГУК). Для приготовления раствора ГУК предпочтительно использовать смесь (30-36)%-ного водного раствора NaOH, ацетона и воды, взятые в массовом соотношении (1:100:4). Реакцию можно проводить при комнатной температуре, но более предпочтительно осуществлять взаимодействие при нагревании до 25-38°С, в течение 5-30 мин. Затем, добавляют дополнительную порцию ацетона, перемешивают еще 1-2 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и доводят рН до значения 12. Полученный продукт промывают большим количеством ацетона, отфильтровывают и высушивают.An aqueous solution of iodic acid (preferably with a concentration of 1-25% by weight) is added to a highly dilute aqueous solution of sodium carboxymethyl cellulose (NaKMTS), preferably with a concentration of 7-10% by weight, in a weight ratio of (0.5-5) :( 25- 35) and carry out the interaction with stirring, preferably for 3-4 hours. The resulting reaction mixture was treated with a mixture of an acidified aqueous solution of sodium iodide and acetone, followed by precipitation of the obtained sodium carboxymethyl cellulose dialdehyde (DACMC). In this case, it is preferable to use a mixture of a (60-67)% solution of NaI, (32-38)% solution of HCl and acetone in a weight ratio of (2: 1: 26). The obtained DACMC precipitate was filtered off and washed repeatedly with an aqueous-acetone mixture taken in a mass ratio of 1: 4 to 3: 7 and, finally, with pure acetone. Then, DACMC is dissolved in an aqueous alkaline solution, and a solution of gossypolacetic acid (HAC) prepared in advance is added. To prepare a solution of HUA, it is preferable to use a mixture of (30-36)% aqueous solution of NaOH, acetone and water, taken in a mass ratio (1: 100: 4). The reaction can be carried out at room temperature, but it is more preferable to carry out the reaction by heating to 25-38 ° C for 5-30 minutes. Then, an additional portion of acetone was added, stirred for another 1-2 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and adjusted to pH 12. The resulting product was washed with a large amount of acetone, filtered and dried.
Авторы настоящего изобретения полагают, что предложенные в настоящем изобретении условия обработки водного раствора натрийкарбоксиметилцеллюлозы водным раствором иодной кислоты (массовое соотношение натрийкарбоксиметилцеллюлозы и иодной кислоты (25-35):(0,5-5)) в сочетании с проведением стадии осаждения и выделения диальдегида натрийкарбоксиметилцеллюлозы и особыми условиями его взаимодействия с госсиполом (обработка госсипол уксусной кислотой в смеси водного раствора щелочи и ацетона) позволяют получить конъюгат госсипола и натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы с широким диапазоном молекулярных масс от 780-180000 Да что, в свою очередь, как это будет показано ниже, обеспечивает высокую терапевтическую эффективность целевого продукта (для сравнения продукт, описанный в RU 2270708, имеет существенно более узкий диапазон молекулярных масс 120000-130000 Да). Кроме того, в отличие от известного способа получения натриевой соли производного госсипола и карбоксиметилцеллюлозы (RU 2270708) предложенный в настоящем изобретении способ получения ГКМЦ позволяет избежать использования в качестве растворителя изопропилового спирта, примеси которого являются трудно удаляемыми и загрязняют целевой продукт.The authors of the present invention believe that the conditions proposed in the present invention for the treatment of an aqueous solution of sodium carboxymethyl cellulose with an aqueous solution of iodic acid (mass ratio of sodium carboxymethyl cellulose and iodic acid (25-35) :( 0.5-5)) in combination with the precipitation and isolation stage of sodium carboxymethyl cellulose dialdehyde and the special conditions of its interaction with gossypol (treatment of gossypol with acetic acid in a mixture of an aqueous solution of alkali and acetone) make it possible to obtain gossypol and sodium conjugate th salt of carboxymethyl cellulose with a wide range of molecular weights from 780-180000 Yes, which, in turn, as will be shown below, provides high therapeutic efficacy of the target product (for comparison, the product described in RU 2270708 has a significantly narrower molecular weight range of 120,000 130,000 Yes). In addition, in contrast to the known method for producing the sodium salt of a gossypol derivative and carboxymethyl cellulose (RU 2270708), the inventive method for producing HCMC avoids the use of isopropyl alcohol as a solvent, the impurities of which are difficult to remove and contaminate the target product.
Получение предложенного в настоящем изобретении конъюгата госсипола и натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (конъюгат НМ), охарактеризованного молекулярной массой от 780 до 1500 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,35-1,76): (99,65-98,24)% масс., проводят путем разделения ГКМЦ методом эксклюзионной хроматографии и выделения фракции с молекулярной массой от 780 Да до 1500 Да.Obtaining the gossypol conjugate and the carboxymethyl cellulose sodium salt (HM conjugate) proposed in the present invention, characterized by a molecular weight of from 780 to 1500 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.35-1.76): (99.65-98.24)% mass ., is carried out by separating HCMC by size exclusion chromatography and isolating a fraction with a molecular weight of from 780 Da to 1500 Da.
Получение предложенного в настоящем изобретении конъюгата госсипола и натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы (конъюгат ВМ), охарактеризованного молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,65-3,23):(99,35-96,77)% масс., проводят путем разделения ГКМЦ методом эксклюзионной хроматографии и выделения фракции с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да.Obtaining the gossypol conjugate and the carboxymethyl cellulose sodium salt (BM conjugate) proposed in the present invention, characterized by a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.65-3.23) :( 99.35-96.77)% mass., carried out by separation GKMTS method of size exclusion chromatography and separation of fractions with a molecular weight of from 1500 Yes to 180,000 Yes.
Предложенные в настоящем изобретении фармацевтические композиции могут быть получены с использованием стандартных методик объединения активного компонента и фармацевтически приемлемых добавок и представлены в виде различных лекарственных форм в зависимости от выбранного способа их применения. Для перорального приема фармацевтическую композицию можно использовать в виде таблеток, капсул или суспензий. Кроме того, для ректального приема можно использовать суппозитории. Количество активного компонента в фармацевтической композиции может варьировать в широком диапазоне в зависимости от различных факторов, хорошо известных специалистам в области фармацевтики. В качестве фармацевтически приемлемых добавок можно использовать обычно применяемые для вышеуказанных лекарственных форм вещества. Например, в таблетках в качестве наполнителя можно использовать крахмал, например, картофельный крахмал, стеарат кальция или магния, сахар молочный и другие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества.The pharmaceutical compositions of the present invention can be prepared using standard techniques for combining the active component and pharmaceutically acceptable additives and are presented in different dosage forms depending on the chosen method of their use. For oral administration, the pharmaceutical composition can be used in the form of tablets, capsules or suspensions. In addition, for rectal administration, suppositories can be used. The amount of active ingredient in a pharmaceutical composition can vary over a wide range depending on various factors well known to those skilled in the pharmaceutical art. As pharmaceutically acceptable additives, substances commonly used for the above dosage forms can be used. For example, in tablets, starch can be used as filler, for example, potato starch, calcium or magnesium stearate, milk sugar and other pharmaceutically acceptable excipients.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению предназначены для применения в терапии больных вирусными заболеваниями, в частности, гриппом или гепатитом С. Схема лечения (режим и доза введения препарата) выбирается специалистом, исходя из тяжести заболевания, состояния и возраста пациента. Например, для лечения гриппа назначают по 2 таблетки три раза в день (9 час., 14 час. и 20 час.) в течение первых 2-х дней, затем по 1 таблетке 3 раза в день в течение последующих 2-х дней. Суммарная доза препарата на 1 пациента за 4 дня составляет 18 таблеток.The pharmaceutical compositions according to the present invention are intended for use in the treatment of patients with viral diseases, in particular, influenza or hepatitis C. The treatment regimen (regimen and dose of the drug) is chosen by a specialist based on the severity of the disease, condition and age of the patient. For example, for the treatment of influenza, 2 tablets are prescribed three times a day (9 hours, 14 hours and 20 hours) for the first 2 days, then 1
Например, для лечения гепатита С назначают по 2 таблетки три раза в день (9 час., 14 час. и 20 час.) в течение 5 дней. Суммарная доза препарата на 1 пациента составляет 30 таблеток.For example, for the treatment of hepatitis C, 2 tablets are prescribed three times a day (9 hours, 14 hours and 20 hours) for 5 days. The total dose of the drug per 1 patient is 30 tablets.
В предпочтительно варианте предложенная фармацевтическая композиция может иметь следующий состав, в % масс.:In a preferred embodiment, the proposed pharmaceutical composition may have the following composition, in% by weight:
Далее представлены примеры получения предложенных конъюгатов госсипола и натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы, физико-химические характеристики полученных продуктов и результаты изучения их биологической активности.The following are examples of the preparation of the proposed conjugates of gossypol and sodium salt of carboxymethyl cellulose, physicochemical characteristics of the obtained products, and results of a study of their biological activity.
ПРИМЕРЫ ПОЛУЧЕНИЯ ГКМЦEXAMPLES OF OBTAINING SCMC
Образцы ГКМЦ получали следующим образом. Водный раствор иодной кислоты (1-25% масс.) добавляли к сильно разбавленному водному раствору NaКМЦ (7-10% масс.) в массовом соотношении (0,5-5):(25-35) при перемешивании в течение 3-4 ч. В полученную реакционную смесь добавляли смесь водного раствора NaI (концентрация 64,9% масс.), 36%-ного водного раствора HCl и ацетона в массовом соотношении (2:1:26) и проводили осаждение полученного диальдегида натрийкарбоксиметилцеллюлозы (ДАКМЦ). Осадок отфильтровывали и многократно промывали водно-ацетоновой смесью взятой в массовом соотношении от 1:4 до 3:7 и, в заключении, чистым ацетоном. Полученный ДАКМЦ растворяли в водно-щелочном растворе и добавляли приготовленный заранее раствор госсиполуксусной кислоты (ГУК) (34%-ный водный раствор NaOH, ацетон и вода, взятые в массовом соотношении 1:100:4). Реакцию проводили при температуре 25-38°С в течение 5-30 мин. Затем добавляли дополнительную порцию ацетона и перемешивали в течение 1-2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и доводили рН до значения 12. Полученный продукт промывали большим количеством ацетона, отфильтровывали и высушивали. Получали порошок светло-коричневого цвета, представляющий собой конъюгат госсипола и натрийкарбоксиметилцеллюлозы с молекулярной массой 780-180000 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (1-5): (99-85) масс.%, содержащий не более 20% низкомолекулярной фракции с молекулярной массой от 780 Да до 1500 Да и не более 80% высокомолекулярной фракции с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да. Выход продукта составил 60% в пересчете на исходную NaКМЦ. Физико-химические показатели промежуточного (ДАКМЦ) и целевого (ГКМЦ) продуктов приведены в таблицах 1 и 2 соответственно. GCMC samples were prepared as follows. An aqueous solution of iodic acid (1-25% wt.) Was added to a highly diluted aqueous solution of NaKMTS (7-10% wt.) In a mass ratio of (0.5-5) :( 25-35) with stirring for 3-4 h. A mixture of an aqueous NaI solution (concentration of 64.9% by weight), a 36% aqueous solution of HCl and acetone in a mass ratio (2: 1: 26) was added to the resulting reaction mixture, and the obtained dialdehyde sodium carboxymethyl cellulose (DACMC) was precipitated. The precipitate was filtered off and washed repeatedly with a water-acetone mixture taken in a mass ratio of 1: 4 to 3: 7 and, finally, with pure acetone. The obtained DACMC was dissolved in an aqueous alkaline solution, and a solution of gossypolacetic acid (HAC) prepared in advance (34% aqueous NaOH solution, acetone and water taken in a mass ratio of 1: 100: 4) was added. The reaction was carried out at a temperature of 25-38 ° C for 5-30 minutes. Then an additional portion of acetone was added and stirred for 1-2 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and the pH was adjusted to 12. The resulting product was washed with a large amount of acetone, filtered and dried. A light brown powder was obtained, which is a conjugate of gossypol and sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 780-180000 Yes at a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (1-5): (99-85) wt.%, Containing not more than 20% low molecular weight fraction with a molecular weight from 780 Da to 1500 Yes and not more than 80% of high molecular weight fraction with a molecular weight of from 1500 Da to 180,000 Da. The product yield was 60% in terms of the initial NaKMTS. Physico-chemical characteristics of the intermediate (DACMC) and target (GCMC) products are shown in tables 1 and 2, respectively.
Физико-химические показатели ДАКМЦTable 1
Physico-chemical indicators DAKMTS
min - 235max - 289
min - 235
min - 235max - 291
min - 235
min - 234max - 291
min - 234
Физико-химические показатели ГКМЦtable 2
Physico-chemical indicators GKMTS
min - 226, 267, 318max - 244, 285, 376
min - 226, 267, 318
min - 226, 268, 318max - 244, 285, 375
min - 226, 268, 318
min - 227, 267, 319max - 243, 284, 376
min - 227, 267, 319
Сравнение представленных в таблицах 1 и 2 физико-химических показателей промежуточного продукта ДАКМЦ и целевого продукта ГКМЦ показывает практически полное конъюгирование ароматической (госсипол) и полимерной (натрийкарбоксиметилцеллюлоза) частей. Об этом свидетельствует изменение значений max и min поглощения в дифференциальных изоконцентрационных УФ спектрах, характерных для ДАКМЦ и ГКМЦ снятых на спектрофотомерте в кювете толщиной слоя в 10 мм в области от 220 до 700 нм, а также полная растворимость ГКМЦ в воде, в то время как ДАКМЦ в воде практически не растворим.A comparison of the physicochemical parameters of the intermediate product DACMC and the target product GCMC shown in tables 1 and 2 shows an almost complete conjugation of the aromatic (gossypol) and polymer (sodium carboxymethyl cellulose) parts. This is evidenced by a change in the values of max and min absorption in the differential isoconcentration UV spectra characteristic of DACMC and GCMC recorded on a spectrophotometer in a cuvette with a layer thickness of 10 mm in the range from 220 to 700 nm, as well as the complete solubility of GCMC in water, while DACMC is practically insoluble in water.
С помощью метода гельпроникающей хроматографии (ГПХ) было установлено, что молекулярная масса (ММ) ГКМЦ варьирует в пределах 780-180000 Да. Анализ ММ ГКМЦ проводили на хроматографе фирмы Waters, снабженном дифференциальным рефрактометрическим детектором “Waters 2414” и спектрофотометрическим детектором с диодной матрицей “PDA 996”. Использовали набор из двух колонок “Ultrahydrogel 250” и “Ultrahydrogel 1000”, в качестве элюента - водный 0,25 N аммиачно-ацетатный буферный раствор (pH~9), скорость элюирования 0,6 мл/мин. Регистрацию спектров проводили в интервале длин волн от 220 нм (нижний предел прозрачности буферного раствора) до 600 нм. Результаты приведены на Фиг. 1Using gel permeation chromatography (GPC), it was found that the molecular weight (MM) of HCMC varies between 780-180000 Da. The analysis of MMHMCM was carried out on a Waters chromatograph equipped with a Waters 2414 differential refractometric detector and a PDA 996 diode array spectrophotometric detector. A set of two columns “Ultrahydrogel 250” and “Ultrahydrogel 1000” was used, aqueous 0.25 N ammonia-acetate buffer solution (pH ~ 9), elution rate 0.6 ml / min. Spectra were recorded in the wavelength range from 220 nm (lower limit of transparency of the buffer solution) to 600 nm. The results are shown in FIG. one
На Фиг. 2 приведен график зависимости содержания госсипола ((D300/Iref)103) от молекулярной массы ГКМЦ (LgM) для пяти полученных образцов. По соотношению интенсивности поглощения в УФ-области спектра и интенсивности сигнала рефрактометрического детектора установлено, что звенья, содержащие госсипол в образцах ГКМЦ распределены по цепи неравномерно, а именно, концентрация этих звеньев возрастает при уменьшении молекулярной массы.In FIG. Figure 2 shows a graph of the dependence of the gossypol content ((D300 / Iref) 103) on the molecular weight of HCMC (LgM) for the five samples obtained. By the ratio of the absorption intensity in the UV region of the spectrum and the signal intensity of the refractometric detector, it was found that the units containing gossypol in the HCMC samples are distributed unevenly along the chain, namely, the concentration of these units increases with decreasing molecular weight.
Образец ГКМЦ условно разделяли на фракции по молекулярным массам, как это показано на Фиг.3 и для каждой фракции определяли относительное содержание госсипола. Результаты представлены в Таблице 3.The HCMC sample was conventionally divided into fractions by molecular weights, as shown in Fig. 3, and the relative content of gossypol was determined for each fraction. The results are presented in Table 3.
Распределение госсипола во фракциях ГКМЦ с различной молекулярной массойTable 3
Distribution of gossypol in HCMC fractions with different molecular weights
Из Таблицы 3 видно, что почти половина звеньев, содержащих госсипол сосредоточена в 30% от всего образца (в низкомолекулярной части с ММ<9000), причем, почти треть - в самой низкомолекулярной фракции (ММ~1000 и меньше), доля которой составляет всего 10%.From Table 3 it is seen that almost half of the units containing gossypol are concentrated in 30% of the entire sample (in the low molecular weight part with MM <9000), and almost a third in the lowest molecular weight fraction (MM ~ 1000 or less), whose share is only 10%.
ПРИМЕРЫ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТОВ НМ и ВМEXAMPLES OF OBTAINING CONJUGATES OF NM and VM
Препаративное разделение ГКМЦ на низкомолекулярную (от 780 Да до 1500 Да) и высокомолекулярную (от 1500 Да до 180000 Да) фракции проводили методом эксклюзионной хроматографии, используя в качестве носителя Bio-Gel P-2 (предел эксклюзии 1,6 кДа). Колонку 1,5×35 см с носителем уравновешивали водой MQ. Для калибровки колонки использовали цитохром С (свободный объем колонки) и шестиводный хлорид хрома (полный объем колонки). Навеску ГКМЦ 150-170 мг растворяли в 0,6 мл воды MQ и центрифугировали при 13400 об/мин в течение 5 мин. Полученный раствор ГКМЦ наносили на колонку и проводили изократическую элюцию водой MQ со скоростью 1 мл/мин, собирая фракции по 2 мл. Выход фракций из колонки оценивали визуально (желто-коричневое окрашивание) и по оптической плотности фракций при 254 нм. Фракцию, выходящую в начале свободного объема (высокомолекулярную), представляющую собой конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 1500 Да до 180000 Да при соотношении госсипол: натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,65-3,23):(99,35-96,77)% масс. (конъюгат ВМ), и фракцию, выходящую в конце полного объема (низкомолекулярную), представляющую собой конъюгат госсипола с натрийкарбоксиметилцеллюлозой с молекулярной массой от 780 до 1500 Да при соотношении госсипол:натрийкарбоксиметилцеллюлоза (0,35-1,76):(99,65-98,24)% масс. (конъюгат НМ), собирали и использовали для дальнейшего тестирования биологической активности.The preparative separation of HCMC into low molecular weight (from 780 Da to 1500 Da) and high molecular weight (from 1500 Da to 180,000 Da) fractions was carried out by size exclusion chromatography using Bio-Gel P-2 as a carrier (1.6 kDa exclusion limit). A 1.5 × 35 cm column with support was equilibrated with MQ water. To calibrate the column, cytochrome C (free column volume) and six-water chromium chloride (total column volume) were used. A weighed portion of HCMC of 150-170 mg was dissolved in 0.6 ml of MQ water and centrifuged at 13400 rpm for 5 minutes. The resulting HCMC solution was applied to a column and isocratic elution with MQ water was performed at a rate of 1 ml / min, collecting 2 ml fractions. The yield of fractions from the column was evaluated visually (tan) and by the optical density of the fractions at 254 nm. The fraction leaving the beginning of the free volume (high molecular weight), which is a gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 1500 Da to 180,000 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.65-3.23) :( 99.35-96.77) % of the mass. (VM conjugate), and the fraction leaving the end of the full volume (low molecular weight), which is a gossypol conjugate with sodium carboxymethyl cellulose with a molecular weight of 780 to 1,500 Da with a ratio of gossypol: sodium carboxymethyl cellulose (0.35-1.76) :( 99.65 -98.24)% of the mass. (HM conjugate) were collected and used for further testing of biological activity.
ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ КОНЪЮГАТОВSTUDYING THE BIOLOGICAL ACTIVITY OF CONJUGATES
Противовирусную активность ГКМЦ и его фракций (конъюгаты НМ и ВМ) в отношении вируса гепатита С изучали на экспериментальной модели инфекции, вызванной вирусом гепатита С. Использовали высоко-патогенный штамм вируса гепатита С (ВГС), выделенный из крови ВГС инфицированного пациента, страдающего гепатоклеточной карциномой, в сыворотке крови которого были обнаружены антитела к ВГС и РНК ВГС. Исследования конъюгатов согласно настоящему изобретению проводили в культурах клеток почки зеленой мартышки (Vero), выращенных в виде однодневного монослоя в 48-луночных панелях. Культуры клеток Vero обрабатывали различными концентрациями конъюгатов сразу после адсорбции вируса.The antiviral activity of HCMC and its fractions (HM and BM conjugates) against hepatitis C virus was studied in an experimental model of hepatitis C virus infection. A highly pathogenic strain of hepatitis C virus (HCV) was used, isolated from the blood of the HCV of an infected patient suffering from hepatocytic carcinoma , in the blood serum of which antibodies to HCV and HCV RNA were detected. Studies of the conjugates of the present invention were carried out in green monkey kidney cell cultures (Vero) grown as a one-day monolayer in 48-well panels. Vero cell cultures were treated with various concentrations of conjugates immediately after virus adsorption.
Результаты экспериментов учитывали способность конъюгатов защищать инфицированные клетки от цитопатогенного действия ВГС; в этом случае результаты учитывали на 6-й, 7-й дни, когда в контрольных, инфицированных ВГС без добавления конъюгата культурах развивались максимальные цитопатические изменения. В этом случае подсчитывали % жизнеспособных клеток в монослое, обработанном и необработанном конъюгатом. Полученные результаты представлены в таблице 4.The experimental results took into account the ability of conjugates to protect infected cells from the cytopathogenic effect of HCV; in this case, the results were taken into account on the 6th, 7th days, when the maximum cytopathic changes developed in the control infected with HCV without the addition of conjugate cultures. In this case,% viable cells were counted in a monolayer treated and untreated conjugate. The results are presented in table 4.
Способность ГКМЦ и его фракций (конъюгаты НМ и ВМ) защищать культуры клеток Vero от цитопатического действия вируса гепатита СTable 4
The ability of HCMC and its fractions (NM and BM conjugates) to protect Vero cell cultures from the cytopathic effect of hepatitis C virus
НМ**- фракция с ММ от 780 Да до 1500 ДаVM * - fraction with MM from 1500 Yes to 180,000 Yes,
NM ** - fraction with MM from 780 Yes to 1500 Yes
Таким образом, изучение противовирусного действия фракции с ММ от 780 Да до 1500 Да (конъюгат НМ) показало, что при использовании конъюгата в дозе 0,25 и 0,12 мг приводит к 100%-ной защите клеток Vero от литического действия вируса гепатита С. Защита клеток от вируса гепатита С фракцией с ММ от 1500 Да до 180000 Да (конъюгат ВМ) проявляется значительно хуже и наблюдается зависимость от используемой дозы конъюгата.Thus, the study of the antiviral effect of the fraction with MM from 780 Da to 1,500 Da (NM conjugate) showed that when using the conjugate at a dose of 0.25 and 0.12 mg, the Vero cells are 100% protected from the lytic effect of hepatitis C virus The protection of cells from hepatitis C virus with a fraction with an MM from 1500 Da to 180,000 Da (BM conjugate) is much worse and there is a dependence on the used dose of the conjugate.
Исследование противовирусной активности препарата ГКМЦ и его фракций (конъюгаты НМ и ВМ) в отношении гриппозной инфекции А/H5N1 также проводили на модели клеточной культуры Vero. В предварительных исследованиях было показано, что максимальная активность изучаемых конъюгатов наблюдается при введении их в культуру за 24 часа до заражения клеток. Учет результатов проводили на пятый день после инфицирования клеток. Результаты представлены в таблице 5.A study of the antiviral activity of the HCMC preparation and its fractions (NM and BM conjugates) against influenza A / H5N1 infection was also carried out on a Vero cell culture model. In preliminary studies, it was shown that the maximum activity of the studied conjugates is observed when they are introduced into the
Влияние ГКМЦ и его фракций (конъюгаты НМ и ВМ) на жизнеспособность клеток Vero, инфицированных вирусом гриппа А/H5N1Table 5
The effect of HCMC and its fractions (conjugates of NM and BM) on the viability of Vero cells infected with influenza A / H5N1 virus
НМ**- фракция с ММ от 780 Да до 1500 ДаVM * - fraction with MM from 1500 Da to 180,000 Yes,
NM ** - fraction with MM from 780 Yes to 1500 Yes
Как видно из приведенных данных, НМ защищает клетки лучше, чем ГКМЦ, в то время как ВМ обладает наименее выраженной активностью.As can be seen from the above data, NM protects cells better than HCMC, while BM has the least pronounced activity.
Таким образом, эффективное противовирусное действие ГКМЦ обеспечивается за счет расширения диапазона ММ продукта, что, в свою очередь, позволяет получить и выделить низкомолекулярную фракцию с высоким содержанием госсипола в составе коньюгата, которая обладает очень высокой противовирусной активностью.Thus, the effective antiviral effect of HCMC is ensured by expanding the range of the MM product, which, in turn, allows one to obtain and isolate a low molecular weight fraction with a high gossypol content in the conjugate, which has a very high antiviral activity.
Claims (21)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012124911/04A RU2499002C1 (en) | 2012-06-14 | 2012-06-14 | Conjugates of gossypol and sodium-carboxymethyl cellulose, their production methods and antiviral agents on their basis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012124911/04A RU2499002C1 (en) | 2012-06-14 | 2012-06-14 | Conjugates of gossypol and sodium-carboxymethyl cellulose, their production methods and antiviral agents on their basis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2499002C1 true RU2499002C1 (en) | 2013-11-20 |
Family
ID=49710111
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012124911/04A RU2499002C1 (en) | 2012-06-14 | 2012-06-14 | Conjugates of gossypol and sodium-carboxymethyl cellulose, their production methods and antiviral agents on their basis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2499002C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015194993A1 (en) | 2014-06-17 | 2015-12-23 | Limited Liability Company "Nearmedic Plus" | Gossypol polymer derivatives, process for preparing and pharmaceutical compositions thereof |
| WO2019221642A1 (en) * | 2018-05-18 | 2019-11-21 | Limited Liability Company “Nearmedic Plus” | Antimicrobial composition based on polyphenols and polysaccharides, method for preparing thereof and use of the same |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2002755C1 (en) * | 1991-02-04 | 1993-11-15 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи РАМН | Cellulose and gossypol derivative showing interferon-inducing and anti-viral action |
| RU2238122C1 (en) * | 2003-01-20 | 2004-10-20 | Ооо "Ниармедик Плюс" | Anti-infectious pharmaceutical preparation |
| RU2270708C1 (en) * | 2004-05-26 | 2006-02-27 | Ооо "Ниармедик Плюс" | Carboxymethylcellulose copolymer and gossypol sodium salt, pharmaceutical composition and method for prophylaxis or treatment of viral disease |
| RU2010141697A (en) * | 2010-10-11 | 2012-04-20 | Общество с ограниченной ответственностью "НИАРМЕДИК ПЛЮС" (RU) | METHOD FOR OBTAINING SODIUM CARBOXYMETHYL CELLULOSE AND GOSSYPOL COPOLYMER AND ITS APPLICATION IN COMPLEX THERAPY OF PATIENTS WITH AUTISTIC DISORDERS AND COGNITIVE DISORDERS |
-
2012
- 2012-06-14 RU RU2012124911/04A patent/RU2499002C1/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2002755C1 (en) * | 1991-02-04 | 1993-11-15 | Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи РАМН | Cellulose and gossypol derivative showing interferon-inducing and anti-viral action |
| RU2238122C1 (en) * | 2003-01-20 | 2004-10-20 | Ооо "Ниармедик Плюс" | Anti-infectious pharmaceutical preparation |
| RU2270708C1 (en) * | 2004-05-26 | 2006-02-27 | Ооо "Ниармедик Плюс" | Carboxymethylcellulose copolymer and gossypol sodium salt, pharmaceutical composition and method for prophylaxis or treatment of viral disease |
| RU2010141697A (en) * | 2010-10-11 | 2012-04-20 | Общество с ограниченной ответственностью "НИАРМЕДИК ПЛЮС" (RU) | METHOD FOR OBTAINING SODIUM CARBOXYMETHYL CELLULOSE AND GOSSYPOL COPOLYMER AND ITS APPLICATION IN COMPLEX THERAPY OF PATIENTS WITH AUTISTIC DISORDERS AND COGNITIVE DISORDERS |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2015194993A1 (en) | 2014-06-17 | 2015-12-23 | Limited Liability Company "Nearmedic Plus" | Gossypol polymer derivatives, process for preparing and pharmaceutical compositions thereof |
| RU2577539C2 (en) * | 2014-06-17 | 2016-03-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Ниармедик Плюс" | Gossypol polymer derivatives, methods for production thereof and pharmaceutical composition based thereon |
| WO2019221642A1 (en) * | 2018-05-18 | 2019-11-21 | Limited Liability Company “Nearmedic Plus” | Antimicrobial composition based on polyphenols and polysaccharides, method for preparing thereof and use of the same |
| CN112804876A (en) * | 2018-05-18 | 2021-05-14 | 尼尔梅迪茨国际有限公司 | Antimicrobial compositions based on polyphenols and polysaccharides, method for preparing same and use thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US12269838B2 (en) | Composition of mannuronic diacid | |
| RU2124361C1 (en) | Method of isolation of resin tragacanth polysaccharide fraction from plant of genus astragal, composition based on polysaccharide fraction, method of inhibition of cancer tumor growth, method of inhibition of viral infections | |
| CN115894731A (en) | Anoectochilus roxburghii homogeneous polysaccharide and preparation method and application thereof | |
| KR20060017887A (en) | Substances that inhibit membrane virus proliferation, methods for their preparation, pharmaceutical compositions and methods for inhibiting viral infection | |
| EP0374888A3 (en) | Sulfated tannins and theirs salts | |
| RU2499002C1 (en) | Conjugates of gossypol and sodium-carboxymethyl cellulose, their production methods and antiviral agents on their basis | |
| JPH0539305A (en) | Immuno suppressive polysaccharide extracted from astragalus membranaceous and pharma- ceutical composition containing same | |
| JPH037236A (en) | Agent for inhibiting absorption of herpes virus | |
| CN113262229A (en) | Application of orychophragmine D in preparation of anti-radiation injury medicine | |
| US20220265697A1 (en) | ß-GLUCAN COMPOSITION AND USE THEREFOR | |
| CN112979640A (en) | Alkaloid dimer compound and application thereof in preparation of PD-1/PD-L1 pathway inhibitor | |
| AU737861B2 (en) | Remedies for AIDS | |
| RU2028303C1 (en) | POLYSACCHARIDE GAMMA-PLANT (γ-PL) SHOWING ANTIINFECTION ACTION WITHOUT HEMAGGLUTINATING EFFECT | |
| US11406652B2 (en) | Use of mannuronic diacid composition in treatment of diabetes | |
| WO2014173056A1 (en) | Trametes robiniophila polysaccharide protein, preparation method therefor, and application thereof | |
| US11406659B2 (en) | Use of mannuronic diacid composition in treatment of inflammation | |
| US11406654B2 (en) | Use of mannuronic diacid composition in treatment of Parkinson's disease | |
| JP2001517715A (en) | Composition for the treatment of herpes and related viral infections, and pharmaceutical formulations containing the composition | |
| WO2014173058A1 (en) | Trametes robiniophila polysaccharide protein, preparation method therefor, and application thereof | |
| Klöcking et al. | Interaction of humic acids and humic-acid-like polymers with herpes simplex virus type 1 | |
| JP2005515266A (en) | Plant extracts that are active as immunostimulants | |
| JP2020510104A (en) | Oligosaccharides inhibiting endogenous tenase complex, methods for their production and use | |
| CN105535045A (en) | Orixine hydrochloride as well as preparation method and medical application thereof | |
| US20250049869A1 (en) | Use of auricularia auricula total polysaccharide or monomeric polysaccharide in preparation of pd-l1 inhibitor | |
| CN108926571B (en) | Application of sulfated mannose glucuronic acid oligosaccharide in the preparation of anticancer drugs or anticancer health products |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: PLEDGE FORMERLY AGREED ON 20210209 Effective date: 20210209 |
|
| QC41 | Official registration of the termination of the licence agreement or other agreements on the disposal of an exclusive right |
Free format text: PLEDGE FORMERLY AGREED ON 20210209 Effective date: 20220228 |