RU2495650C1 - Three-component complex for cell therapy in ophthalmology - Google Patents
Three-component complex for cell therapy in ophthalmology Download PDFInfo
- Publication number
- RU2495650C1 RU2495650C1 RU2012107337/14A RU2012107337A RU2495650C1 RU 2495650 C1 RU2495650 C1 RU 2495650C1 RU 2012107337/14 A RU2012107337/14 A RU 2012107337/14A RU 2012107337 A RU2012107337 A RU 2012107337A RU 2495650 C1 RU2495650 C1 RU 2495650C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- stem cells
- cell therapy
- complex
- component complex
- biological
- Prior art date
Links
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Prostheses (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а точнее к офтальмологии, и может быть использовано для клеточной терапии при различной офтальмопатологии, сопровождающейся дистрофическими, атрофическими и т.п. процессами.The invention relates to medicine, and more specifically to ophthalmology, and can be used for cell therapy in various ophthalmopathology, accompanied by dystrophic, atrophic, etc. processes.
Одним из перспективных методов лечения различной офтальмопатологии, сопровождающейся дистрофическими, атрофическими и т.п. процессами, например, возрастной макулярной дистрофии, атрофии зрительного нерва, прогрессирующей миопии и т.д., может явиться применение мезенхимальных стволовых клеток (МСК), однако, такие методы еще недостаточно разработаны.One of the promising methods of treatment of various ophthalmopathology, accompanied by dystrophic, atrophic, etc. the processes, for example, age-related macular degeneration, optic atrophy, progressive myopia, etc., may be the use of mesenchymal stem cells (MSCs), however, such methods are not yet sufficiently developed.
Стволовые клетки обладают рядом существенных достоинств: могут обеспечивать регенерацию поврежденных участков через продукцию различных факторов роста и ключевых метаболитов; способны разворачивать программы пролиферации и дифференцировки, восполняя тем самым недостаток активно работающих клеток; могут интегрироваться в патологически измененные участки сетчатки и образовывать клетки с ретинальным фенотипом. В офтальмологии терапевтический потенциал стволовых клеток изучался на животных с наследственной ретинальной патологией, близкой к пигментному ретиниту человека (Lund et al. Subretinal transplantation of genetically modified human cell lines attenuates loss of visual function in dystrophic rats // PNAS. - 2001. - V.98. - N.17. P.9942-9947; Rander et al. Light-driven retinal ganglion cell responses in blind rd mice after neuronal transplantation // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 2001. - V.42. - P.1057-1065; Woch et al., 2001; Sagdullaev et al. Retinal transplantation-induced recovery of retinotectal visual function in rodent model of retinitis pigmentosa // Invest. Ophthal. Vis. Sci - 2003. - V.44. - P.1686-1695).Stem cells have a number of significant advantages: they can provide regeneration of damaged areas through the production of various growth factors and key metabolites; able to deploy proliferation and differentiation programs, thereby filling the lack of actively working cells; can integrate into pathologically altered areas of the retina and form cells with a retinal phenotype. In ophthalmology, the therapeutic potential of stem cells has been studied in animals with hereditary retinal pathology close to human retinitis pigmentosa (Lund et al. Subretinal transplantation of genetically modified human cell lines attenuates loss of visual function in dystrophic rats // PNAS. - 2001. - V. 98. - N.17. P.9942-9947; Rander et al. Light-driven retinal ganglion cell responses in blind rd mice after neuronal transplantation // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 2001. - V.42. - P.1057-1065; Woch et al., 2001; Sagdullaev et al. Retinal transplantation-induced recovery of retinotectal visual function in rodent model of retinitis pigmentosa // Invest. Ophthal. Vis. Sci - 2003. - V.44. - P.1686-1695).
Хотя мезенхимальные стволовые клетки взрослого организма обладают более ограниченным потенциалом дифференцировки, чем эмбриональные стволовые клетки, получаемые при культивировании клеток бластоцисты, их применение более безопасно. Кроме того, с точки зрения этики, они являются более приемлемым для клинического использования материалом.Although adult mesenchymal stem cells have a more limited differentiation potential than embryonic stem cells obtained by culturing blastocyst cells, their use is safer. In addition, from an ethical point of view, they are more acceptable for clinical use.
Существенной проблемой клеточной терапии является направленная доставка стволовых клеток к патологическому очагу и удержание их в нем в течение времени, необходимого для достижения лечебного эффекта.An essential problem of cell therapy is the targeted delivery of stem cells to the pathological focus and their retention in it for the time necessary to achieve a therapeutic effect.
Задачей изобретения является создание трехкомпонентного комплекса для клеточной терапии при различной офтальмопатологии, сопровождающейся дистрофическими, атрофическими и т.п. процессами.The objective of the invention is the creation of a three-component complex for cell therapy with various ophthalmopathology, accompanied by dystrophic, atrophic, etc. processes.
Техническим результатом изобретения является возможность моделирования трехкомпонентного комплекса с приданием ему любой формы, размеров и пространственной конфигурации, пригодной для экстрасклеральной имплантации к любому участку глазного яблока или зрительного нерва и фиксации его там в течение времени, необходимого для достижения требуемого лечебного эффекта.The technical result of the invention is the ability to simulate a three-component complex giving it any shape, size and spatial configuration suitable for extrascleral implantation to any part of the eyeball or optic nerve and fixing it there for the time necessary to achieve the desired therapeutic effect.
Технический результат достигается за счет того, что:The technical result is achieved due to the fact that:
1. Трехкомпонентный комплекс содержит МСК, меченные магнитными микрочастицами, транспонированные в биологический или синтетический мелкопористый материал, который прочно скреплен с полимерным магнитным материалом с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл, с многополюсным реверсивным намагничиванием.1. The three-component complex contains MSCs labeled with magnetic microparticles, transposed into a biological or synthetic finely porous material, which is firmly bonded to a polymer magnetic material with a constant magnetic field induction of 1.5 mT, with multi-pole reversal magnetization.
2. Транслоцирование МСК, меченных магнитными микрочастицами, в биологический или синтетический мелкопористый материал в сочетании с плотным прикреплением к полимерному магнитному материалу с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл, с многополюсным реверсивным намагничиванием обеспечивает глубокое проникновение МСК в слои биологического или синтетического мелкопористого материала, удержание и равномерное распределение МСК при экстрасклеральной имплантации трехкомпонентного комплекса к любому участку глазного яблока или зрительного нерва в течение времени, необходимого для достижения лечебного эффекта, за счет взаимодействия магнитных полей микрочастиц и магнитного материала.2. The translocation of MSCs labeled with magnetic microparticles into a biological or synthetic finely porous material in combination with tight attachment to a polymer magnetic material with the induction of a constant magnetic field of 1.5 mT, with multipolar reverse magnetization ensures deep penetration of MSCs into layers of a biological or synthetic finely porous material, retention and uniform distribution of MSCs during extrascleral implantation of a three-component complex to any part of the eyeball or viewer the whole nerve for the time necessary to achieve a therapeutic effect due to the interaction of the magnetic fields of microparticles and magnetic material.
3. Имплантация трехкомпонентного комплекса к целевому участку глазного яблока или зрительного нерва сопровождается направленной избирательной адгезией МСК в области патологического очага, что способствует активации репаративных процессов за счет приживления трансплантированных стволовых клеток в непосредственной близости от поврежденного участка.3. The implantation of a three-component complex to the target site of the eyeball or optic nerve is accompanied by targeted selective adhesion of MSCs in the area of the pathological focus, which contributes to the activation of reparative processes due to the engraftment of transplanted stem cells in the immediate vicinity of the damaged area.
Возможность подобных процессов для эмбриональных стволовых клеток и для стволовых клеток взрослого организма показана в экспериментах на животных (Lamba D.A., Karl M.O., Ware C.B., Reh T.A. Efficient generation of retinal progenitor cells from human embryonic stem cells // PNAS, 2006, v.103, n.34, pp.12769-12774. Meyer J.S., Katz M.L., Maruniak J.A., Kirk M.D. Embrionic stem cell-derived neural progenitors incorporate into degenerating retina and enhance survival of host photoreceptora // Stem Cells, 2006, v.24, n.2, pp.274-283. Fiedlander M. Fibosis and diseases of the eye // J. Clin. Invest., 2007, v.117, n.3, pp.576-586), хотя многие из механизмов реализации терапевтического эффекта изучены не до конца.The possibility of such processes for embryonic stem cells and adult stem cells has been shown in animal experiments (Lamba DA, Karl MO, Ware CB, Reh TA Efficient generation of retinal progenitor cells from human embryonic stem cells // PNAS, 2006, v. 103 , n. 34, pp. 12769-12774. Meyer JS, Katz ML, Maruniak JA, Kirk MD Embrionic stem cell-derived neural progenitors incorporate into degenerating retina and enhancement survival of host photoreceptora // Stem Cells, 2006, v.24, n.2, pp.274-283. Fiedlander M. Fibosis and diseases of the eye // J. Clin. Invest., 2007, v.117, n.3, pp.576-586), although many of the implementation mechanisms therapeutic effect is not fully understood.
Трехкомпонентный комплекс изготавливают следующим образом.The three-component complex is made as follows.
МСК выращивают в культуре клеток костного мозга, взятых у пациента во время диагностической пункции из грудины или подвздошной кости (объем - 0,5-1,0 мл). Выращивание культуры проводят в специальном боксе для клеточных культур с использованием следующего оборудования - центрифуга с одноразовыми стерильными центрифужными пробирками на 50 мл, термостат воздушный, ламинарный бокс, инвертированный и обычный микроскопы, автоматические пипетки, баллоны с углекислым газом и воздухом, камеры Горяева для подсчета концентрации клеток. Для культивирования клеток исходного костного мозга используют стерильные одноразовые пластиковые культуральные флаконы с площадью дна в 25 и 150 см2. При размножении МСК используют следующие среды и растворы: среда RPMI-1640, среда 199, антибиотики: пенициллин, амфотерицин, - раствор L-глютамина, эмбриональная телячья сыворотка. За 12-14 последовательных удвоений (в течение 25-30 суток) из исходного количества недифференцированных МСК, содержащихся в полученном пунктате костного мозга пациента и составляющем примерно 103 клеток, продуцируется примерно (1-2)×107 МСК, необходимых для проведения успешной трансплантации стволовых клеток.MSCs are grown in a culture of bone marrow cells taken from a patient during a diagnostic puncture from the sternum or ilium (volume 0.5-1.0 ml). Cultivation is carried out in a special box for cell cultures using the following equipment - a centrifuge with 50 ml disposable sterile centrifuge tubes, an air thermostat, a laminar box, inverted and conventional microscopes, automatic pipettes, carbon dioxide and air cylinders, Goryaev cameras for concentration calculation cells. For culturing the cells of the original bone marrow, sterile disposable plastic culture bottles with a bottom area of 25 and 150 cm2 are used. When reproducing MSCs, the following media and solutions are used: RPMI-1640 medium, medium 199, antibiotics: penicillin, amphotericin, L-glutamine solution, fetal calf serum. For 12-14 consecutive doublings (within 25-30 days) of the initial number of undifferentiated MSCs contained in the obtained puncture bone marrow puncture of the patient and comprising approximately 103 cells, approximately (1-2) × 107 MSCs are required for successful stem transplantation cells.
Магнитные частицы (d=2,8 мкм) вводят в цитоплазму мезенхимальных стволовых клеток по следующей методике. По достижении 80-90% конфлюентности к культуре МСК добавляют суспензию магнитных частиц. Магнитные частицы предварительно обрабатываю поверхностно-активными веществами для создания условий проникновения в цитоплазму клетки. Клетки инкубируют с частицами 24 ч в CO2-инкубаторе. После инкубации культуральную среду меняют и клетки 5-кратно отмывают от свободных магнитных частиц раствором Хенкса. Эффективность мечения МСК магнитными частицами по данной технологии составляет порядка 90%. Жизнеспособность стволовых клеток составляет 95%.Magnetic particles (d = 2.8 μm) are introduced into the cytoplasm of mesenchymal stem cells according to the following procedure. Upon reaching 80-90% confluence, a suspension of magnetic particles is added to the MSC culture. I pretreat magnetic particles with surfactants to create conditions for penetration into the cell cytoplasm. Cells are incubated with particles for 24 hours in a CO2 incubator. After incubation, the culture medium is changed and the cells are washed 5 times from free magnetic particles with Hanks solution. The efficiency of MSC labeling with magnetic particles by this technology is about 90%. Stem cell viability is 95%.
Готовый трехкомпонентный комплекс может иметь любые формы, размеры и пространственную конфигурацию, которые выбирают и моделируют в зависимости от форм, размеров и конфигурации участка глазного яблока или зрительного нерва, к которому планируют экстрасклеральную имплантацию комплекса. Для этого выполняют заготовку необходимой формы, размеров и конфигурации из полимерного магнитного материала системы самарий-кобальт или ниодим-железо-бор с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл с многополюсным реверсивным намагничиванием. Толщина магнитного материала - 0,2 мм. Намагничивание полимерного магнитного материала может быть произведено, например, как описано в патенте РФ №2187162.The finished three-component complex can have any shape, size and spatial configuration, which is selected and modeled depending on the shape, size and configuration of the eyeball or optic nerve site, to which extrascleral implantation of the complex is planned. To do this, a blank of the required shape, size and configuration is made of a polymer magnetic material of the samarium-cobalt or niobium-iron-boron system with a constant magnetic field induction of 1.5 mT with multipolar reverse magnetization. The thickness of the magnetic material is 0.2 mm. The magnetization of the polymer magnetic material can be produced, for example, as described in the patent of the Russian Federation No. 2187162.
Из биологического материала, например, твердой мозговой оболочки или склеры, или коллагена, или аллопланта, или из синтетического мелкопористого материала, например, гидрогеля или дигеля, или полиэфирного полотна, или силиконовой губки и т.п. выполняют заготовку такой формы и размеров, чтобы в последующем ее можно было прикрепить к заготовке из полимерного магнитного материала.From biological material, for example, dura mater or sclera, or collagen, or alloplant, or from synthetic finely porous material, for example, hydrogel or digel, or polyester fabric, or silicone sponge, etc. perform a workpiece of such shape and size that subsequently it can be attached to the workpiece of a polymer magnetic material.
МСК, меченные магнитными микрочастицами, наслаивают на поверхность заготовки из биологического синтетического мелкопористого материала. Затем под чашку Петри с наслоенными на материал МСК, меченными магнитными микрочастицами, подводят внешнее магнитное поле с напряженностью 30 мТл. При этом размер и форма внешнего магнита соответствует размеру и форме заготовки из биологического или синтетического материала. Таким образом, между внешним магнитом и МСК, содержащими магнитные частицы, находится биологический или синтетический мелкопористый материал. МСК, содержащие магнитные частицы, быстро и глубоко транслоцируются в слои биологического или синтетического мелкопористого материала под действием магнитного поля. Их закрепление и распластывание происходит в течение 1-1,5 часов после нанесения. Закрепленные клетки прочно удерживаются в слоях пористого материала даже в токе культуральной жидкости, что моделировалось в эксперименте с использованием перистальтического насоса. Клетки, содержащие магнитные микрочастицы, пролиферируют, полностью покрывая поверхность биологического или синтетического мелкопористого материала, что доказывает сохранение функциональных свойств МСК.MSCs, labeled with magnetic microparticles, are layered on the surface of the workpiece from a biological synthetic finely porous material. Then, an external magnetic field with a strength of 30 mT is fed under a Petri dish with MSCs labeled with magnetic microparticles. In this case, the size and shape of the external magnet corresponds to the size and shape of the workpiece from biological or synthetic material. Thus, between the external magnet and the MSC containing magnetic particles is a biological or synthetic finely porous material. MSCs containing magnetic particles quickly and deeply translocate into layers of a biological or synthetic finely porous material under the influence of a magnetic field. Their fastening and spreading occurs within 1-1.5 hours after application. The fixed cells are firmly retained in the layers of the porous material even in the flow of the culture fluid, which was modeled experimentally using a peristaltic pump. Cells containing magnetic microparticles proliferate, completely covering the surface of a biological or synthetic finely porous material, which proves the preservation of the functional properties of MSCs.
В завершении полученную структуру «МСК - биологический или синтетический мелкопористый материал» прочно скрепляют, например, при помощи шовной фиксации или биологического клея с заготовкой из полимерного магнитного материала.In conclusion, the resulting structure “MSC - biological or synthetic finely porous material” is firmly fastened, for example, by suture fixation or biological glue with a workpiece made of a polymer magnetic material.
Применение трехкомпонентного комплекса для клеточной терапии в лечении различной офтальмопатологии, сопровождающейся дистрофическими, атрофическими и т.п. процессами иллюстрируется следующими данными.The use of a three-component complex for cell therapy in the treatment of various ophthalmopathology, accompanied by dystrophic, atrophic, etc. The processes are illustrated by the following data.
Применение трехкомпонентного комплекса для хирургического лечения прогрессирующей и осложненной миопии.The use of a three-component complex for the surgical treatment of progressive and complicated myopia.
Используют трехкомпонентный комплекс в виде плоской лопатки длиной 16 мм и толщиной 0,8-1,0 мм, с полотном, имеющим структуру «МСК - биологический или синтетический мелкопористый материал», длиной 13 мм и площадью 50-65 мм2, предназначенным для имплантации к заднему полюсу глаза, и ножкой, лишенной структуры «МСК - биологический или синтетический мелкопористый материал», шириной до 2 мм и длиной 3 мм, предназначенной для подшивания имплантата к склере. Полотно комплекса может иметь овальную, или прямоугольную, или форму трапеции, например, равнобедренной. Прямоугольное и трапециевидное полотно может быть выполнено со скругленными углами для удобства имплантации. Ножка может иметь, например, полуовальную или прямоугольную форму. Прямоугольная ножка может быть выполнена со скругленными углами.A three-component complex is used in the form of a flat blade 16 mm long and 0.8-1.0 mm thick, with a web having the structure "MSC - biological or synthetic finely porous material", 13 mm long and an area of 50-65 mm 2 intended for implantation to the posterior pole of the eye, and the leg, deprived of the structure "MSC - biological or synthetic finely porous material", up to 2 mm wide and 3 mm long, designed for stitching the implant to the sclera. The canvas of the complex may have an oval, or rectangular, or trapezoid shape, for example, isosceles. A rectangular and trapezoidal web can be made with rounded corners for easy implantation. The leg may have, for example, a semi-oval or rectangular shape. The rectangular leg can be made with rounded corners.
Склеропластическую операцию с использованием трехкомпонентного комплекса выполняют следующим образом. В нижне- и верхненаружном квадранте, отступя от лимба на 6 мм, производят разрезы конъюнктивы и теноновой оболочки длиной 8-9 мм, с помощью шпателя формируют два тоннеля по направлению к заднему полюсу глаза с таким расчетом, чтобы в каждый из них свободно поместился трехкомпонентный комплекс. Каждый трехкомпонентный комплекс погружается под теноновой оболочкой дистальной частью к заднему полюсу глаза и фиксируется к склере в 10 мм от лимба за ножку. Операцию заканчивают наложением швов на конъюнктиву и введением под нее антибиотика.Scleroplastic surgery using a three-component complex is performed as follows. In the lower and upper outer quadrants, departing from the limb by 6 mm, the conjunctiva and tenon shell are cut 8-9 mm long, using the spatula, two tunnels are formed in the direction of the posterior pole of the eye so that the three-component fits freely in each of them complex. Each three-component complex is immersed under the tenon membrane with the distal part to the posterior pole of the eye and fixed to the sclera 10 mm from the limbus by the leg. The operation is completed by suturing the conjunctiva and the introduction of an antibiotic under it.
Клинический пример. Пациентка З., 14 лет. Диагноз: прогрессирующая миопия высокой степени OU. Обратилась с жалобами на постепенное снижение зрения, начиная с 8 лет. Значительное ухудшение зрения отмечает за последний год.Clinical example. Patient Z., 14 years old. Diagnosis: progressive myopia of a high degree of OU. She complained of a gradual decrease in vision, starting from 8 years old. Significant visual impairment notes over the past year.
Острота зрения OD 0.04 sph -7.0=0.8Visual acuity OD 0.04 sph -7.0 = 0.8
OS 0.05 sph -6.5=0.8OS 0.05 sph -6.5 = 0.8
ПЗО OD 26.2 ммPZO OD 26.2 mm
OS 26.0 ммOS 26.0 mm
Акустическая плотность склеры в области заднего полюса OU=40,25 Дб.The acoustic density of the sclera in the posterior region is OU = 40.25 dB.
Показатели электроретинограммы на белый свет демонстрируют снижение значений амплитуды «а» и «в» волн: волна «а»=41 мкВ; волна «в»=69 мкВ.Indices of electroretinograms for white light show a decrease in the amplitude values “a” and “b” of the waves: wave “a” = 41 μV; wave "in" = 69 μV.
При осмотре периферических отделов глазного дна выявлены участки решетчатой дистрофии сетчатки OD в верхнем секторе, OS - в наружном секторе.Examination of the peripheral fundus revealed areas of lattice dystrophy of the retina OD in the upper sector, OS in the external sector.
Проведена склеропластическая операция. В ходе операции к заднему полюсу глаза имплантировали два трехкомпопентных комплекса, содержащих МСК, меченные магнитными микрочастицами, транслоцированные в гидрогель, который был прочно скреплен при помощи шовной фиксации с полимерным магнитным материалом системы самарий-кобальт с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл, с многополюсным реверсивным намагничиванием. Комплексы имели вид плоской лопатки длиной 16 мм и толщиной 0,8 мм, с овальным полотном длиной 13 мм и площадью 65 мм2 и прямоугольной ножкой шириной 2 мм и длиной 3 мм.Scleroplastic surgery was performed. During the operation, two three-component complexes containing MSCs labeled with magnetic microparticles, translocated into a hydrogel, which was firmly bonded using suture fixation with polymer magnetic material of the samarium-cobalt system with the induction of a constant magnetic field of 1.5 mT, s were implanted to the posterior pole of the eye multi-pole reverse magnetization. The complexes had the form of a flat blade 16 mm long and 0.8 mm thick, with an oval blade 13 mm long and an area of 65 mm 2 and a rectangular foot 2 mm wide and 3 mm long.
Через 1.5 года после операции:1.5 years after surgery:
Острота зрения OD 0.05 sph -7.0=0.9Visual acuity OD 0.05 sph -7.0 = 0.9
OS 0.05 sph -6.0=1.0OS 0.05 sph -6.0 = 1.0
ПЗО OD 26.2 ммPZO OD 26.2 mm
OS 26.0 ммOS 26.0 mm
Акустическая плотность склеры в области заднего полюса OU=45,4 Дб.The acoustic density of the sclera in the posterior region is OU = 45.4 dB.
Показатели электроретинограммы на белый свет демонстрируют увеличение значений амплитуды «а» и «в» волн: волна «а»=43 мкВ; волна «в»=74 мкВ. При осмотре периферических отделов глазного дна состояние сетчатки стабильное, без увеличения дистрофических изменений.Indices of electroretinograms for white light show an increase in the values of the amplitude “a” and “b” of the waves: wave “a” = 43 μV; wave "in" = 74 μV. When examining the peripheral parts of the fundus, the state of the retina is stable, without an increase in dystrophic changes.
Склеропластические операции с имплантацией к заднему полюсу глаза трехкомпонентных комплексов выполнены у 7 пациентов (10 глаз) с прогрессирующей и осложненной миопией.Scleroplastic surgery with implantation to the posterior pole of the eye of the three-component complexes was performed in 7 patients (10 eyes) with progressive and complicated myopia.
Использовали трехкомпонентные комплексы, содержащие МСК, меченные магнитными микрочастицами, транслоцированные в биологический материал: твердую мозговую оболочку или склеру, или коллаген, или аллоплант, - или синтетический мелкопористый материал: гидрогель или дигель, или полиэфирное полотно, или силиконовую губку, - который был прочно скреплен при помощи шовной фиксации или биологического клея с полимерным магнитным материалом системы самарий-кобальт или ниодим-железо-бор с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл, с многополюсным реверсивным намагничиванием. Комплексы имели вид плоской лопатки длиной 16 мм и толщиной 0,8-1,0 мм, с овальным, или прямоугольным, или трапециевидным полотном длиной 13 мм и площадью от 50 до 65 мм2 и полуовальной или прямоугольной ножкой шириной до 2 мм и длиной 3 мм. В каждом случае имплантировали по два трехкомпонентных комплекса.We used three-component complexes containing MSCs, labeled with magnetic microparticles, translocated into biological material: dura mater or sclera, or collagen, or alloplant, or synthetic finely porous material: hydrogel or digel, or polyester fabric, or silicone sponge, which was firmly fastened with suture fixation or biological glue with polymer magnetic material of the samarium-cobalt or niode-iron-boron system with a constant magnetic field induction of 1.5 mT, with multipolar m reversible magnetization. The complexes had the form of a flat blade 16 mm long and 0.8-1.0 mm thick, with an oval or rectangular or trapezoidal cloth 13 mm long and an area of 50 to 65 mm 2 and a semi-oval or rectangular leg up to 2 mm wide and length 3 mm. In each case, two ternary complexes were implanted.
Сроки наблюдения - до 2-х лет. Во всех случаях отмечена стабилизация зрительных функций и параметров ПЗО, увеличение акустической плотности склеры в области заднего полюса с 41,1±0,3 до операции до 45,3±0,5 через 2 года после операции, отсутствие признаков дистрофических изменений на периферии сетчатки или их прогрессирования.Duration of observation - up to 2 years. In all cases, stabilization of visual functions and PZO parameters, an increase in the acoustic density of the sclera in the posterior pole from 41.1 ± 0.3 before surgery to 45.3 ± 0.5 2 years after surgery, and no signs of degenerative changes on the periphery of the retina were noted or their progression.
Применение трехкомпонентного комплекса для лечения атрофии зрительного нерва различной этиологии.The use of a three-component complex for the treatment of optic atrophy of various etiologies.
Используют трехкомпонентный комплекс в виде двух полуцилиндров. Высота каждого полуцилиндра - 4 мм, внутренний радиус основания - 4 мм.A three-component complex in the form of two half-cylinders is used. The height of each half cylinder is 4 mm, the inner radius of the base is 4 mm.
Трехкомпонентный комплекс имплантируют следующим образом. В нижне-внутреннем и верхне-наружном квадрантах, отступя от лимба 5 мм, выполняют два разреза конъюнктивы и тепоновой оболочки на протяжении 7-8 мм, после чего тупым путем формируют два тоннеля к заднему полюсу глазного яблока навстречу друг к другу, затем в тоннели вводят и размещают трехкомпонентный комплекс, состоящий из двух полуцилиндров, которыми охватывают зрительный нерв, задние короткие цилиарные артерии и часть ретробульбарной клетчатки, не смыкая их. Операцию заканчивают наложением шва на конъюнктиву.The three-component complex is implanted as follows. In the lower-inner and upper-outer quadrants, departing from the limb of 5 mm, two cuts of the conjunctiva and thermon shell are performed over 7-8 mm, after which two tunnels are bluntly formed towards the posterior pole of the eyeball towards each other, then into the tunnels enter and place a three-component complex, consisting of two half-cylinders, which cover the optic nerve, the posterior short ciliary arteries and part of the retrobulbar tissue, without closing them. The operation is completed by suturing the conjunctiva.
Под наблюдением находились 8 пациентов (8 глаз) в возрасте от 40 до 65 лет с атрофиями зрительного нерва различной этиологии. Острота зрения до лечения у пациентов варьировала от 0,05 до 0,125.Under observation were 8 patients (8 eyes) aged 40 to 65 years with atrophy of the optic nerve of various etiologies. Visual acuity before treatment in patients ranged from 0.05 to 0.125.
Во всех случаях использовали трехкомпонентный комплекс в форме двух полуцилиндров, каждый высотой 4 мм, внутренний радиус основания - 4 мм, содержащий МСК, меченные магнитными микрочастицами, транслоцированные в биологический или синтетический мелкопористый материал, например, твердую мозговую оболочку или склеру, или коллаген, или аллоплант, или синтетический мелкопористый материал, например, гидрогель или дигель, или полиэфирное полотно, или силиконовую губку, который скреплен с полимерным магнитным материалом системы самарий-кобальт или ниодим-железо-бор с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл, с многополюсным реверсивным намагничиванием.In all cases, a three-component complex was used in the form of two half-cylinders, each 4 mm high, the inner radius of the base was 4 mm, containing MSCs labeled with magnetic microparticles, translocated into biological or synthetic fine-porous material, for example, dura mater or sclera, or collagen, or alloplant, or synthetic finely porous material, for example, a hydrogel or digel, or a polyester web, or a silicone sponge that is bonded to the polymer magnetic material of the samarium-cobalt system or niodeim-iron-boron with the induction of a constant magnetic field of 1.5 mT, with multi-pole reverse magnetization.
В нижне-внутреннем и верхне-наружном квадрантах, отступя от лимба 5 мм, выполняли два разреза конъюнктивы и теноновой оболочки на протяжении 7-8 мм, после чего тупым путем формировали два тоннеля к заднему полюсу глазного яблока навстречу друг к другу, затем в тоннели вводили и размещали трехкомпонентный комплекс, состоящий из двух полуцилиндров, которыми охватывали зрительный нерв, задние короткие цилиарные артерии и часть ретробульбарной клетчатки, не смыкая их. Операцию заканчивали наложением обвивного непрерывного кетгутового шва на конъюнктиву.In the lower-inner and upper-outer quadrants, departing from the limb of 5 mm, two sections of the conjunctiva and tenon membrane were made over 7-8 mm, after which two tunnels were bluntly formed towards the posterior pole of the eyeball towards each other, then into the tunnels a three-component complex was introduced and placed, consisting of two half-cylinders, which covered the optic nerve, the posterior short ciliary arteries and part of the retrobulbar fiber, without closing them. The operation was completed by overlaying a continuous continuous catgut suture on the conjunctiva.
Через 12 месяцев после лечения отмечено повышение остроты зрения во всех случаях от 0,05 до 0,1. У всех пациентов выявлено расширение границ поля зрения от 10 до 30 градусов, а также улучшение по данным ЭЛ и ПЭЧ. Линейная скорость кровотока в центральной артерии сетчатки во всех случаях увеличилась и составила в среднем 6,1±0,04 см/сек по сравнению с исходной 4,6±0,02 см/сек.12 months after treatment, an increase in visual acuity was noted in all cases from 0.05 to 0.1. All patients showed an extension of the boundaries of the field of view from 10 to 30 degrees, as well as an improvement according to EL and PEC. The linear blood flow velocity in the central retinal artery in all cases increased and averaged 6.1 ± 0.04 cm / sec compared to the initial 4.6 ± 0.02 cm / sec.
Применение трехкомпонентного комплекса для лечения «сухой» формы возрастной макулярной дегенерации.The use of a three-component complex for the treatment of “dry” forms of age-related macular degeneration.
Используют трехкомпонентный комплекс в форме круга диаметром 6 мм, содержащий МСК, меченные магнитными микрочастицами, транслоцированные в биологический или синтетический мелкопористый материал, который прочно скреплен с полимерным магнитным материалом с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл, с многополюсным реверсивным намагничиванием.A ternary complex in the form of a circle with a diameter of 6 mm is used, containing MSCs labeled with magnetic microparticles, translocated into a biological or synthetic finely porous material, which is firmly bonded to a polymer magnetic material with a constant magnetic field induction of 1.5 mT, with multi-pole reverse magnetization.
Трехкомпонентный комплекс имплантируют экстрасклерально в проекции макулярной зоны. В верхненаружном квадранте в 4 мм от лимба выполняют разрез конъюнктивы длиной 6 мм концентрично лимбу и с помощью шпателя формируют туннель в субтеноновом пространстве по направлению к заднему полюсу глаза. В туннель вводят трехкомпонентный комплекс, при этом с помощью шпателя производят склерокомпрессию для локализации положения комплекса при постоянном контроле с помощью бинокулярного офтальмоскопа. По завершении имплантации конъюнктиву ушивают непрерывным швом.The ternary complex is implanted extrasclerally in the projection of the macular zone. In the upper outer quadrant 4 mm from the limbus, the conjunctiva is cut 6 mm in length concentrically to the limbus and with the help of a spatula form a tunnel in the subtenon space towards the posterior pole of the eye. A three-component complex is introduced into the tunnel, with the help of a spatula, sclerocompression is performed to localize the position of the complex with constant monitoring using a binocular ophthalmoscope. At the end of implantation, the conjunctiva is sutured with a continuous suture.
Под наблюдением находилось 7 пациентов (7 глаз) с «сухой» формой ВМД в возрасте от 60 до 68 лет. Острота зрения до лечения у пациентов варьировала от 0,08 до 0,12.Under observation were 7 patients (7 eyes) with a "dry" form of AMD at the age of 60 to 68 years. Visual acuity before treatment in patients ranged from 0.08 to 0.12.
Во всех случаях использовали трехкомпонентные комплексы в форме круга диаметром 6 мм, содержащие МСК, меченные магнитными микрочастицами, транслоцированные в биологический материал: твердую мозговую оболочку или склеру, или коллаген, или аллоплант, - или синтетический мелкопористый материал: гидрогель или дигель, или полиэфирное полотно, или силиконовую губку, - который был прочно скреплен при помощи шовной фиксации или биологического клея с полимерным магнитным материалом системы самарий-кобальт или ниодим-железо-бор с индукцией постоянного магнитного поля 1,5 мТл, с многополюсным реверсивным намагничиванием.In all cases, ternary complexes in the form of a circle with a diameter of 6 mm were used, containing MSCs labeled with magnetic microparticles, translocated into biological material: dura mater or sclera, or collagen, or alloplant, or synthetic finely porous material: hydrogel or digel, or polyester fabric , or a silicone sponge, which was firmly bonded using suture fixation or biological glue with polymer magnetic material of the samarium-cobalt system or niodim-iron-boron with constant induction static magnetic field of 1.5 mT with multi reversible magnetization.
Комплексы имплантировали экстрасклерально в проекции макулярной зоны. В верхненаружном квадранте в 4 мм от лимба выполняли разрез конъюнктивы длиной 6 мм концентрично лимбу и с помощью шпателя формировали туннель в субтеноновом пространстве по направлению к заднему полюсу глаза. В туннель вводили трехкомпонентный комплекс, при этом с помощью шпателя производили склерокомпрессию для локализации его положения при постоянном контроле с помощью бинокулярного офтальмоскопа. По завершении имплантации конъюнктиву ушивали непрерывным швом.The complexes were implanted extrasclerally in the projection of the macular zone. In the upper outer quadrant 4 mm from the limbus, the conjunctiva was cut 6 mm in length concentrically to the limbus and, using a spatula, a tunnel was formed in the subthenon space towards the posterior pole of the eye. A three-component complex was introduced into the tunnel, with the help of a spatula, sclerocompression was performed to localize its position under constant monitoring using a binocular ophthalmoscope. At the end of implantation, the conjunctiva was sutured with a continuous suture.
Через 12 месяцев после проведенного лечения во всех случаях острота зрения повысилась на 0,1-0,35, отмечено повышение фовеальной светочувствительности сетчатки по данным компьютерной периметрии, а также увеличение амплитуды а-волны и б-волны по данным макулярной электроретинограммы, которое свидетельствовало о повышении функциональной активности сетчатки. При исследовании гемодинамики у всех пациентов отмечалось увеличение средней скорости кровотока в глазничной артерии, центральной артерии сетчатки и в задних коротких цилиарных артериях. Полученные результаты оставались стабильными в течение всего периода наблюдения. Сроки наблюдения составили от 12 до 36 месяцев.12 months after the treatment, in all cases, visual acuity increased by 0.1-0.35, an increase in retinal foveal photosensitivity according to computer perimetry, as well as an increase in the amplitude of the a-wave and b-wave according to the macular electroretinogram, which indicated increase the functional activity of the retina. In the study of hemodynamics in all patients, an increase in the average blood flow velocity in the orbital artery, central retinal artery and in the posterior short ciliary arteries was noted. The results remained stable throughout the observation period. The observation period ranged from 12 to 36 months.
Таким образом, предложенное изобретение обеспечивает возможность моделирования трехкомпонентного комплекса с приданием ему любой формы, размеров и пространственной конфигурации, пригодной для экстрасклеральной имплантации к любому участку глазного яблока или зрительного нерва и фиксации его там в течение времени, необходимого для достижения требуемого лечебного эффекта.Thus, the proposed invention provides the possibility of modeling a three-component complex with giving it any shape, size and spatial configuration suitable for extrascleral implantation to any part of the eyeball or optic nerve and fixing it there for the time necessary to achieve the desired therapeutic effect.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012107337/14A RU2495650C1 (en) | 2012-02-29 | 2012-02-29 | Three-component complex for cell therapy in ophthalmology |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012107337/14A RU2495650C1 (en) | 2012-02-29 | 2012-02-29 | Three-component complex for cell therapy in ophthalmology |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012107337A RU2012107337A (en) | 2013-09-10 |
| RU2495650C1 true RU2495650C1 (en) | 2013-10-20 |
Family
ID=49164456
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012107337/14A RU2495650C1 (en) | 2012-02-29 | 2012-02-29 | Three-component complex for cell therapy in ophthalmology |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2495650C1 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2266724C2 (en) * | 2004-01-27 | 2005-12-27 | Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца Минздрава РФ | Method for treating patients for progressing myopia |
| US20080269318A1 (en) * | 2007-04-30 | 2008-10-30 | Carmelo Romano | Treatment of age-related macular degeneration using inhibitors of complement factor d |
| RU2375016C1 (en) * | 2008-07-08 | 2009-12-10 | Федеральное государственное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" им. академика С.Н. Федорова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Method of treating "dry" form of age macular degeneration |
| RU2389497C2 (en) * | 2003-05-02 | 2010-05-20 | Дзе Скриппс Рисерч Инститьют | Haematopoietic stem cells and methods of treating neovascular ophthalmopathies with using thereof |
| US20100316731A1 (en) * | 2007-05-31 | 2010-12-16 | Joseph Weinstock | Treatment of age-related macular degeneration |
-
2012
- 2012-02-29 RU RU2012107337/14A patent/RU2495650C1/en active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2389497C2 (en) * | 2003-05-02 | 2010-05-20 | Дзе Скриппс Рисерч Инститьют | Haematopoietic stem cells and methods of treating neovascular ophthalmopathies with using thereof |
| RU2266724C2 (en) * | 2004-01-27 | 2005-12-27 | Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца Минздрава РФ | Method for treating patients for progressing myopia |
| US20080269318A1 (en) * | 2007-04-30 | 2008-10-30 | Carmelo Romano | Treatment of age-related macular degeneration using inhibitors of complement factor d |
| US20100316731A1 (en) * | 2007-05-31 | 2010-12-16 | Joseph Weinstock | Treatment of age-related macular degeneration |
| RU2375016C1 (en) * | 2008-07-08 | 2009-12-10 | Федеральное государственное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" им. академика С.Н. Федорова Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи" | Method of treating "dry" form of age macular degeneration |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| SIQUEIRA RC. Autologous transplantation of retinal pigment epithelium in age related macular degeneration Arq Bras Oftalmol. 2009 Jan-Feb; 72(1): 123-30. * |
| Новый подход к восстановлению сетчатки VisionCorrection.ru© 2007, Найдено в Интернет 24.10.2012 http://visioncorrection.ru/ophnews/. Магнит поможет стволовым клеткам добраться до точки назначения, 17.01.2012 Найдено в Интернет 24.10.2012 http:/www.rusarticles.com/zabolevaniya-statya/magnit-pomozhet-stvolovym-kletkam-dobratsya-do-tochki-naznacheniya-5579343.html. * |
| Новый подход к восстановлению сетчатки VisionCorrection.ru© 2007, Найдено в Интернет 24.10.2012 http://visioncorrection.ru/ophnews/. Магнит поможет стволовым клеткам добраться до точки назначения, 17.01.2012 Найдено в Интернет 24.10.2012 http:/www.rusarticles.com/zabolevaniya-statya/magnit-pomozhet-stvolovym-kletkam-dobratsya-do-tochki-naznacheniya-5579343.html. ЧЕНЦОВА Е.В. Фундаментально-прикладные аспекты применения стволовых клеток в офтальмологии. Федоровские чтения, 2009, с.550-552. SIQUEIRA RC. Autologous transplantation of retinal pigment epithelium in age related macular degeneration Arq Bras Oftalmol. 2009 Jan-Feb; 72(1): 123-30. * |
| ЧЕНЦОВА Е.В. Фундаментально-прикладные аспекты применения стволовых клеток в офтальмологии. Федоровские чтения, 2009, с.550-552. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012107337A (en) | 2013-09-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7336885B2 (en) | Biocompatible substrates and methods of implanting same that promote interconnection between stem cells and target tissues | |
| ES2546734T3 (en) | Rapid preparation and use of tissues and structures obtained by tissue engineering as individual implants | |
| ES2727041T3 (en) | Preparation method of regenerated hair follicle germ for transplantation in which hair color is controlled | |
| RU2375016C1 (en) | Method of treating "dry" form of age macular degeneration | |
| RU2495650C1 (en) | Three-component complex for cell therapy in ophthalmology | |
| RU2333737C1 (en) | Method to treat "dry" form of age macular degeneration | |
| JP5227223B2 (en) | Cell culture support | |
| RU2494711C1 (en) | Method of surgical treatment of progressing and complicated myopia | |
| RU2485922C1 (en) | Method of treating "dry" form of age-related macular degeneration | |
| RU2470619C1 (en) | Method of treating "dry" form of age-specific macular degeneration | |
| JPWO2004045666A1 (en) | How to regenerate an organ | |
| RU2494712C1 (en) | Method of treating optic nerve atrophy of different etiology | |
| RU2471458C1 (en) | Method of treating "dry" form of age-related macular degeneration | |
| RU2242190C2 (en) | Method for treating corneal diseases | |
| Zhou et al. | Effect and mechanism of different ways of transplanting bone marrow mesenchymal stem cells in cardiopulmonary resuscitation in rats | |
| RU2444340C1 (en) | Method for keratoprosthesis of vascular complicated leukomas with using biokeratoprosthetic complex | |
| RU2482823C2 (en) | Method of treating optic nerve atrophy of different etiology | |
| RU2623646C1 (en) | Method for treatment of glaucomous optic neuropathy by means of transplantation of 3d cellular culture of multipotent mesenchimal scleral sulcus stem cells | |
| Khristov et al. | Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Autologous Cell Therapy for Age-Related Macular Degeneration | |
| RU66666U1 (en) | IMPLANT FOR SURGICAL TREATMENT OF PROGRESSING MYOPIA | |
| CN106046340B (en) | Polymer, hydrogel containing polymer and application of hydrogel | |
| CN106540325A (en) | The method and cell transplantation composite and its application of cell culture and transplanting | |
| JP5264799B2 (en) | Anterior segment-related cell sheet, three-dimensional structure, and production method thereof | |
| Li et al. | A multi-channels axon-stretch device for mechanical stress study | |
| CN120789103A (en) | Application of M2 microglial exosomes |