RU2476880C1 - Diagnostic technique for severe gestosis - Google Patents
Diagnostic technique for severe gestosis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2476880C1 RU2476880C1 RU2011135546/15A RU2011135546A RU2476880C1 RU 2476880 C1 RU2476880 C1 RU 2476880C1 RU 2011135546/15 A RU2011135546/15 A RU 2011135546/15A RU 2011135546 A RU2011135546 A RU 2011135546A RU 2476880 C1 RU2476880 C1 RU 2476880C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gestosis
- blood
- ghrelin
- concentration
- leptin
- Prior art date
Links
- 201000011461 pre-eclampsia Diseases 0.000 title claims abstract description 65
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 title 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 claims abstract description 38
- 102000012004 Ghrelin Human genes 0.000 claims abstract description 32
- 101800001586 Ghrelin Proteins 0.000 claims abstract description 32
- GNKDKYIHGQKHHM-RJKLHVOGSA-N ghrelin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)COC(=O)CCCCCCC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 GNKDKYIHGQKHHM-RJKLHVOGSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 claims abstract description 31
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 claims abstract description 31
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 31
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 31
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 claims abstract description 31
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 29
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 15
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 4
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 18
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 230000036266 weeks of gestation Effects 0.000 description 12
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 10
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 8
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 102000003908 Cathepsin D Human genes 0.000 description 7
- 108090000258 Cathepsin D Proteins 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 7
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 7
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 7
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 6
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 4
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 4
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 4
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 4
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 4
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 4
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 4
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 3
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 3
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 3
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 3
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 3
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 108010037464 Cyclooxygenase 1 Proteins 0.000 description 2
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000033892 Hyperhomocysteinemia Diseases 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000004070 NADPH Oxidase 4 Human genes 0.000 description 2
- 108010082699 NADPH Oxidase 4 Proteins 0.000 description 2
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 2
- 102100038277 Prostaglandin G/H synthase 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 2
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 239000003150 biochemical marker Substances 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 2
- 231100000562 fetal loss Toxicity 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 2
- 238000005534 hematocrit Methods 0.000 description 2
- 230000003225 hyperhomocysteinemia Effects 0.000 description 2
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000010197 meta-analysis Methods 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 2
- 210000005059 placental tissue Anatomy 0.000 description 2
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000207 pro-atherogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003244 pro-oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 2
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 2
- 201000005608 severe pre-eclampsia Diseases 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 230000008347 uteroplacental blood flow Effects 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 2
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- XUKUURHRXDUEBC-SVBPBHIXSA-N (3s,5s)-7-[2-(4-fluorophenyl)-3-phenyl-4-(phenylcarbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@H](O)C[C@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-SVBPBHIXSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 102000003966 Alpha-1-microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108700006306 Alpha-1-microglobulin Proteins 0.000 description 1
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003840 Autonomic nervous system imbalance Diseases 0.000 description 1
- GJSURZIOUXUGAL-UHFFFAOYSA-N Clonidine Chemical compound ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=NCCN1 GJSURZIOUXUGAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 101100272224 Mus musculus Bcam gene Proteins 0.000 description 1
- 101100010166 Mus musculus Dok3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010047163 Vasospasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000036523 atherogenesis Effects 0.000 description 1
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 229960002896 clonidine Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002795 fluorescence method Methods 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000001631 hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000007778 menstrual function Effects 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000028742 placenta development Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000006950 reactive oxygen species formation Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000000932 sedative agent Substances 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000000685 uterine artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000003845 vascular endothelial function Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности к исследованию биологических материалов путем физико-химического анализа крови, основанного на иммунологических испытаниях и может быть использовано для диагностики гестоза в акушерской практике.The invention relates to medicine, in particular to the study of biological materials by physico-chemical analysis of blood, based on immunological tests and can be used to diagnose gestosis in obstetric practice.
Гестоз - одно из наиболее распространенных осложнений беременности и наблюдается у 5-10% беременных женщин. Известно, что развитие гестоза протекает в два этапа:Gestosis is one of the most common complications of pregnancy and is observed in 5-10% of pregnant women. It is known that the development of gestosis proceeds in two stages:
- первый этап характеризуется нарушением инвазии трофобласта и гестационной трансформации спиральных артерий матки. Неравномерная перфузия плаценты приводит к местной ишемии и окислительному стрессу с образованием активных форм кислорода.- the first stage is characterized by a violation of trophoblast invasion and gestational transformation of the spiral uterine arteries. Uneven perfusion of the placenta leads to local ischemia and oxidative stress with the formation of reactive oxygen species.
- второй этап связан с материнским ответом на пока неизвестный плацентарный фактор и последующее повреждение функции эндотелия сосудов, в итоге затрагивающее все материнские органы и приводящее к появлению симптомов заболевания (Olsson, M.G. Increased levels of cell-free hemoglobin, oxidation markers, and the antioxidative heme scavenger alpha(l)-microglobulin in preeclampsia / M.G.Olsson, M.Centlow, S.Rutardottir [et al.] // Free Radic Biol Med. - 2010. - Vol.48, №2. - P.284-291 [1]. Borekc, B. Placental tissue cyclo-oxygenase 1 and 2 in pre-eclamptic and normal pregnancy / B.Borekc, H.Aksoy, A.Toker, A.Ozkan // International Journal of Gynecology and Obstetrics. - 2006. - №95. - P.127-131 [2]. Hung, Т.Н. Hypoxia and reoxygenation: a possible mechanism for placental oxidative stress in preeclampsia / Т.Н.Hung, G.J.Burton // Taiwan J Obstet Gynecol. - 2006. - Vol.45, №3. - P.189-200) [3]. Развитие морфологических нарушений плаценты ассоциировано с развитием биохимических и физиологических патологических явлений.- the second stage is associated with a maternal response to a still unknown placental factor and subsequent damage to vascular endothelial function, which ultimately affects all maternal organs and leads to the appearance of disease symptoms (Olsson, MG Increased levels of cell-free hemoglobin, oxidation markers, and the antioxidative heme scavenger alpha (l) -microglobulin in preeclampsia / MGOlsson, M.Centlow, S. Rutardottir [et al.] // Free Radic Biol Med. - 2010. - Vol. 48, No. 2. - P.284-291 [ 1]. Borekc, B. Placental tissue cyclo-
В настоящее время известны следующие лабораторные способы диагностики гестоза:Currently, the following laboratory methods for diagnosing gestosis are known:
- способ, основанный на определении антифосфолипидных антител в сыворотке крови (RU 2135999, МПК 6 G01N 33/53, опубликовано: 27.08.1999) [4].- a method based on the determination of antiphospholipid antibodies in serum (RU 2135999, IPC 6 G01N 33/53, published: 08/27/1999) [4].
Для ранней доклинической диагностики гестоза (в сроки 13-14 недель беременности) определяют уровни антифосфолипидных антител (аФЛ) к кардиолипиду (CL), фосфатидилсерину (PS) и фосфатидилхолину (PC) классов IgM и IgG в сыворотке периферийной крови, и повышение хотя бы одного из которых в 1,5 и более раза по отношению к нормативным показателям указывает на развитие гестоза. Это обусловлено тем, что аФЛ способны оказывать влияние на функциональное состояние эндотелиальных клеток и приводить к спазму сосудов, в результате чего возникают нарушения трофической функции плаценты, что влечет за собой развитие гестоза.For early preclinical diagnosis of preeclampsia (between 13-14 weeks of gestation), the levels of antiphospholipid antibodies (AFL) to cardiolipid (CL), phosphatidylserine (PS) and phosphatidylcholine (PC) classes of IgM and IgG in serum peripheral blood, and an increase in at least one of which 1.5 or more times in relation to normative indicators indicates the development of gestosis. This is due to the fact that AFL can affect the functional state of endothelial cells and lead to vasospasm, resulting in violations of the trophic function of the placenta, which entails the development of gestosis.
В стерильных условиях производят забор периферической венозной крови, затем в сыворотке крови определяют антифосфолипидные антитела IgM и IgG классов к: кардиолипину, фосфатидилсерину и фосфатидилхолину.In sterile conditions, peripheral venous blood is sampled, then antiphospholipid antibodies of IgM and IgG classes of k are determined in blood serum: cardiolipin, phosphatidylserine and phosphatidylcholine.
Указанные аФЛ могут быть определены иммуноферментным анализом и другими способами. Повышение уровней аФЛ классов IgM и IgG в 1,5 и более раз в I триместре по сравнению с показателями при физиологически протекающей беременности свидетельствуют о развитии гестоза.These AFL can be determined by enzyme immunoassay and other methods. An increase in the AFL levels of the IgM and IgG classes by 1.5 or more times in the first trimester compared with the physiological pregnancy indicates the development of gestosis.
Однако в известном способе недостаточно высокая достоверность диагностики гестоза. Это обусловлено тем, что антифосфолипидные антитела не являются специфическими маркерами диагностики при данной патологии, а также используются при диагностике сердечно-сосудистых (Sherer, Y. Antiphospholipid antibodies: are they pro-atherogenic or an epiphenomenon of atherosclerosis? / Y.Sherer, Y.Shoenfeld // Immunobiology. - 2003. - Vol.207, №1. - P.13-16 [5]. Urbanus, R.T. Antiphospholipid antibodies-we are not quite there yet / R.T.Urbanus, P.G. de Groot // Blood Rev. - 2011. - Vol.25, №2. P.97-106 [6]), аутоиммунных (Opatrny, L. Association between antiphospholipid antibodies and recurrent fetal loss in women without autoimmune disease: a meta-analysis / L.Opatrny, M.David, S.R.Kahn, E.Rey // J Rheumatol. - 2006. - Vol.33. - P.2214-2221 [7]), гинекологических (Кулаков В.И. Основные направления научных исследований по гинекологии в 90-е г. / В.И.Кулаков, В.А.Голубев // Акуш. и гинекол. - 1995. - №3. - С.3-5 [8]) и других заболеваний.However, in the known method, the reliability of gestosis diagnosis is not high enough. This is due to the fact that antiphospholipid antibodies are not specific diagnostic markers for this pathology, and are also used in the diagnosis of cardiovascular (Sherer, Y. Antiphospholipid antibodies: are they pro-atherogenic or an epiphenomenon of atherosclerosis? / Y.Sherer, Y. Shoenfeld // Immunobiology. - 2003. - Vol.207, No. 1. - P.13-16 [5]. Urbanus, RT Antiphospholipid antibodies-we are not quite there yet / RTUrbanus, PG de Groot // Blood Rev. - 2011. - Vol.25, No. 2. P.97-106 [6]), autoimmune (Opatrny, L. Association between antiphospholipid antibodies and recurrent fetal loss in women without autoimmune disease: a meta-analysis / L.Opatrny, M.David, SRKahn, E.Rey // J Rheumatol. - 2006. - Vol.33. - P.2214-2221 [7]), gynecological (Kulakov V.I. th directions of scientific research in gynecology in the 90's / V.I. Kulakov, V. A. Golubev // Akush. and Gynecol. - 1995. - No. 3. - C.3-5 [8]) and others diseases.
Другой известный способ диагностики гестоза состоит в периодическом определении концентрации порфириновых фракций (копропорфиринов и протопорфиринов) эритроцитов венозной крови спектрально-флуоресцентным методом (RU 2190848, МПК 7 G01N 33/52, G01N 33/48, опубликовано: 10.10.2002) [9].Another known method for diagnosing gestosis is to periodically determine the concentration of porphyrin fractions (coproporphyrins and protoporphyrins) of venous blood erythrocytes by the spectral-fluorescence method (RU 2190848, IPC 7 G01N 33/52, G01N 33/48, published: 10.10.2002) [9].
Начиная с 12 недель беременности с интервалом четыре недели в динамике, осуществляют забор венозной крови и измеряют концентрацию порфириновых фракций - протопорфиринов (ПП) и копропорфиринов (КП) в эритроцитах крови беременных женщин методом спектрально-флуоресцентного анализа (Гуринович Г.П., Грубина Л.А., Гуринович И.Ф., Некрашевич С.Ф. // Вопр. онкол., 1991, т.37, 2, с.158-161.1) [10]. Затем определяли отношение концентрации протопорфиринов к концентрации копропорфиринов.Starting from 12 weeks of gestation with an interval of four weeks in dynamics, venous blood is sampled and the concentration of porphyrin fractions — protoporphyrins (PP) and coproporphyrins (CP) in the blood erythrocytes of pregnant women is measured by spectral-fluorescence analysis (Gurinovich GP, Grubina L .A., Gurinovich I.F., Nekrashevich S.F. // Vopr. Onkol., 1991, v. 37, 2, p. 158-161.1) [10]. Then, the ratio of the concentration of protoporphyrins to the concentration of coproporphyrins was determined.
При этом концентрации указанных фракций эритроцитов определяются с относительной погрешностью не более 10% и высокой чувствительностью (1 мкг/л).In this case, the concentrations of these fractions of red blood cells are determined with a relative error of not more than 10% and high sensitivity (1 μg / L).
Однако необходимость динамического наблюдения беременных приводит к увеличению частоты забора крови. Отсутствует доказательство специфичности использования фракций эритроцитов для диагностики гестоза.However, the need for dynamic monitoring of pregnant women leads to an increase in the frequency of blood sampling. There is no evidence of the specificity of the use of erythrocyte fractions for the diagnosis of gestosis.
Известен способ прогнозирования гестоза, основанный на определении уровня карбонильных производных белков в ранние сроки (с 5 недель) в плазме крови беременной (RU 2249212, МПК 7 G01N33/48, опубликовано: 27.03.2005) [11], согласно которому в ранние сроки (с 5 недель) в плазме крови беременной определяют уровень карбонильных производных белков и при величине, равной 51,7 ед/г и выше прогнозируют развитие гестоза.A known method for predicting gestosis, based on determining the level of carbonyl derivatives of proteins in the early stages (from 5 weeks) in the blood plasma of a pregnant woman (RU 2249212, IPC 7 G01N33 / 48, published: 03/27/2005) [11], according to which in the early stages ( from 5 weeks) in the blood plasma of a pregnant woman determine the level of carbonyl derivatives of proteins and with a value equal to 51.7 units / g and above, the development of gestosis is predicted.
Однако в известном способе нельзя прогнозировать развитие гестоза при концентрациях карбонильных производных белков, находящихся в пограничных значениях нормы и патологии. Так, в примере 2 указано, что у пациентки Я-ко, 24 лет, уровень окислительной модификации белков находился в пределах нормы и соответствовал 51,6 ед оптической плотности/г белка, а в формуле изобретения при уровене карбонильных производных белков равном 51,7 ед оптической плотности/г белка и выше прогнозируют развитие гестоза.However, in the known method it is impossible to predict the development of gestosis at concentrations of carbonyl derivatives of proteins that are in the boundary values of normal and pathology. So, in example 2, it is indicated that in the Ya-ko patient, 24 years old, the level of oxidative modification of proteins was within normal limits and corresponded to 51.6 units of optical density / g of protein, and in the claims at the level of carbonyl derivatives of proteins equal to 51.7 units of optical density / g of protein and higher predict the development of gestosis.
Известен способ прогнозирования гестоза, основанный на определении активности катепсина D в сроке 6-13 недель гестации в периферической венозной крови (RU 2263913, МПК G01N 33/49, опубликовано: 10.11.2005) [12].A known method for predicting gestosis, based on the determination of cathepsin D activity in the period of 6-13 weeks of gestation in peripheral venous blood (RU 2263913, IPC G01N 33/49, published: 10.11.2005) [12].
В 6-13 недель гестации в периферической венозной крови беременных женщин определяют активность катепсина D и при значениях этого показателя, равных или более 0,021 Ед. акт. ф./ч (единиц активности фермента в час), прогнозируют развитие гестоза в третьем триместре беременности с точностью 80,64%, чувствительностью 84,44% и специфичностью 70,58%. Катепсин D является лизосомальным ферментом класса эндопептидаз. Активность катепсина D, как и других лизосомальных ферментов, является отражением процессов свободнорадикального окисления в организме, патологическая активация которого является одним из пусковых механизмов развития гестоза. Также доказано участие катепсина D в процессах апоптоза и плацентации. Предполагается, что изменение активности катепсина D в ранние сроки беременности отражает развитие патологических процессов, которые в дальнейшем способствуют развитию гестоза.At 6-13 weeks of gestation in the peripheral venous blood of pregnant women determine the activity of cathepsin D and with values of this indicator equal to or more than 0.021 units. Act. f./h (units of enzyme activity per hour), the development of gestosis in the third trimester of pregnancy is predicted with an accuracy of 80.64%, sensitivity of 84.44% and specificity of 70.58%. Cathepsin D is a lysosomal enzyme of the endopeptidase class. The activity of cathepsin D, like other lysosomal enzymes, is a reflection of the processes of free radical oxidation in the body, the pathological activation of which is one of the triggers for the development of gestosis. The participation of cathepsin D in the processes of apoptosis and placentation has also been proven. It is assumed that a change in cathepsin D activity in early pregnancy reflects the development of pathological processes that further contribute to the development of gestosis.
Однако определение изменения активности катепсина D проводится только в ранние сроки беременности, что не позволяет использовать известный способ после 13-й недели беременности.However, the determination of changes in the activity of cathepsin D is carried out only in the early stages of pregnancy, which does not allow using the known method after the 13th week of pregnancy.
Для раннего прогнозирования развития гестоза используют два способа, основанных на определении в периферической венозной крови относительного содержания CD3+CD16+ лимфоцитов и содержания CD5+CD20+ лимфоцитов в популяции CD20+ клеток на сроке с 6 до 12 недель гестации (RU 2265221, МПК 7 G01N 33/577, опубликовано: 27.11.2005) [13], (RU №2271541 МПК G01N 33/577 (2006.01), опубликовано: 10.03.2006) [14].For early prediction of preeclampsia, two methods are used based on the determination of the relative content of CD3 + CD16 + lymphocytes and the content of CD5 + CD20 + lymphocytes in the CD20 + cell population from 6 to 12 weeks of gestation in the peripheral venous blood (RU 2265221, IPC 7 G01N 33/577 , published: November 27, 2005) [13], (RU No. 2271541 IPC G01N 33/577 (2006.01), published: 03/10/2006) [14].
В одном способе в 6-12 недель гестации в периферической венозной крови беременных женщин определяют относительное содержание CD3+CD16+ лимфоцитов и при значениях этого показателя, равных или более 5,4%, прогнозируют развитие гестоза легкой степени тяжести в третьем триместре беременности с точностью 78,12%, чувствительностью 75% и специфичностью 87,5%. При этом повышение уровня CD3+CD16+ клеток в ранние сроки гестации отражает развитие патологических процессов при беременности с усилением цитотоксических реакций как на системном, так и на локальном уровне, что в дальнейшем приводит к развитию гестоза.In one method, at 6-12 weeks of gestation in the peripheral venous blood of pregnant women, the relative content of CD3 + CD16 + lymphocytes is determined and, with values of this indicator equal to or more than 5.4%, the development of mild gestosis in the third trimester of pregnancy is predicted with an accuracy of 78, 12%, sensitivity 75% and specificity 87.5%. Moreover, an increase in the level of CD3 + CD16 + cells in the early stages of gestation reflects the development of pathological processes during pregnancy with increased cytotoxic reactions both at the systemic and local levels, which subsequently leads to the development of gestosis.
В другом способе в 6-12 недель гестации в периферической венозной крови беременных женщин определяют содержание CD20+ и CD5+CD20+ клеток и математически вычисляют процентное содержание CD5+CD20+ лимфоцитов в общей популяции CD20+ лимфоцитов по формуле и при значениях этого показателя более 30% прогнозируют развитие гестоза с точностью. 86,67%.In another method, at 6-12 weeks of gestation in the peripheral venous blood of pregnant women, the content of CD20 + and CD5 + CD20 + cells is determined and the percentage of CD5 + CD20 + lymphocytes in the total population of CD20 + lymphocytes is mathematically calculated by the formula and with the values of this indicator more than 30% predict the development of gestosis with precision. 86.67%.
Однако определение в периферической венозной крови относительного содержания CD3+CD16+ лимфоцитов и CD20+ и CD5+CD20+ клеток проводится только на сроке с 6 до 12 недель гестации, что ограничивает диагностику в более поздние сроки гестации. Кроме того, для осуществления данных способов необходимо дорогостоящее оборудование, что также ограничивает его широкое практическое использование.However, the determination of the relative content of CD3 + CD16 + lymphocytes and CD20 + and CD5 + CD20 + cells in peripheral venous blood is carried out only for a period of 6 to 12 weeks of gestation, which limits the diagnosis at a later date of gestation. In addition, the implementation of these methods requires expensive equipment, which also limits its widespread practical use.
Наиболее близким по технической сущности к заявляемому изобретению является способ диагностики тяжелых форм гестоза на поздних сроках (в третьем триместре) беременности (RU 2259568, МПК 7 G01N 33/68, опубликовано 27.08.2005) [15], принимаемый за прототип, заключающийся в определении уровня гомоцистеина в плазме венозной крови методом иммуноферментного анализа, и при увеличении его более чем в 2,2 раза от нормы диагностируют гестоз тяжелой степени.The closest in technical essence to the claimed invention is a method for the diagnosis of severe forms of gestosis in the late stages (in the third trimester) of pregnancy (RU 2259568, IPC 7 G01N 33/68, published on 27.08.2005) [15], taken as a prototype, which consists in determining the level of homocysteine in plasma of venous blood by enzyme-linked immunosorbent assay, and with an increase of more than 2.2 times from the norm, severe gestosis is diagnosed.
Отмечается выраженное увеличение концентрации гомоцистеина в плазме по мере утяжеления течения гестоза: при легкой степени гестоза - 4,7±0,3 мкМ/л (от 2,82 мкМ/л до 6,9 мкМ/л), при средней - 5,0±0,4 мкМ/л (от 3,3 мкМ/л до 7,6 мкМ/л) и тяжелой - 7,7±0,7 мкМ/л (от 4,8 мкМ/л до 11,8 мкМ/л). У беременных с тяжелым гестозом уровень гомоцистеина был достоверно выше (р<0,01), чем у женщин с легкой и средней степенью гестоза.A marked increase in the concentration of homocysteine in plasma is noted as the gestosis course worsens: with a mild degree of gestosis - 4.7 ± 0.3 μM / L (from 2.82 μM / L to 6.9 μM / L), with an average of 5, 0 ± 0.4 μM / L (from 3.3 μM / L to 7.6 μM / L) and heavy - 7.7 ± 0.7 μM / L (from 4.8 μM / L to 11.8 μM / l). In pregnant women with severe preeclampsia, homocysteine levels were significantly higher (p <0.01) than in women with mild to moderate preeclampsia.
Однако гомоцистеин не является специфическим метаболитом беременности. Его уровень может увеличиваться и при различных патологических состояниях (Кашежева А.З., Ефимов B.C. Гипергомоцистеинемия в патогенезе заболеваний коронарных сосудов // Кардиология. Хирургия. - 2007. - №11. [16]. Сидоренко Г.И., Мойсинок А.Г. Роль гомоцистеина в тромбогенезе и атерогенезе // Кардиология. Тез.: докл. - М., 2002 - С 56-61. [17]. Frank, J. No evidence for prooxidative effects of homocysteine in vascular endothelial cells / J. Frank, S.C. Beck, A. Flaccus, H.K. Biesalski // Eur J Nutr. - 2007. - Vol.46, №5. - P.286-292. [18]. Bao, X.M. Atorvastatin inhibits homocysteine-induced oxidative stress and apoptosis in endothelial progenitor cells involving Nox4 and p38MAPK / X.M.Bao, C.F.Wu, G.P.Lu // Atherosclerosis. - 2010. - Vol.210, №1. - P.114-121. [19]).However, homocysteine is not a specific metabolite of pregnancy. Its level can also increase in various pathological conditions (Kashezhev A.Z., Efimov BC Hyperhomocysteinemia in the pathogenesis of coronary artery disease // Cardiology. Surgery. - 2007. - No. 11. [16]. Sidorenko GI, Moisinok A. G. The role of homocysteine in thrombogenesis and atherogenesis // Cardiology, Abstract: dokl. - M., 2002 - C 56-61. [17]. Frank, J. No evidence for prooxidative effects of homocysteine in vascular endothelial cells / J. Frank, SC Beck, A. Flaccus, HK Biesalski // Eur J Nutr. - 2007. - Vol. 46, No. 5. - P.286-292. [18]. Bao, XM Atorvastatin inhibits homocysteine-induced oxidative stress and apoptosis in endothelial progenitor cells involving Nox4 and p38MAPK / XMBao, CFWu, GPLu // Atherosclerosis. - 2010 .-- Vol. 210, 1. - P.114-121 [19])..
Следовательно, способ-прототип не позволяет достоверно диагностировать гестоз, так как содержание гомоцистеина может меняться в зависимости от наличия соматической патологии и употребляемой пищи.Therefore, the prototype method does not allow to reliably diagnose gestosis, since the content of homocysteine can vary depending on the presence of somatic pathology and the food consumed.
Техническим результатом настоящего изобретения является повышение достоверности диагностики гестоза тяжелой степени для определения тактики ведения беременности и своевременного проведения необходимого комплекса лечебно-профилактических мероприятий.The technical result of the present invention is to increase the reliability of the diagnosis of severe gestosis to determine the tactics of pregnancy and the timely implementation of the necessary complex of therapeutic and preventive measures.
Сущность изобретения заключается в том, что в известном способе диагностики гестоза тяжелой степени на поздних сроках (в третьем триместре) беременности, заключающемся в заборе в венозной крови с последующим ее исследованием на содержание специфических биохимических маркеров обмена веществ, согласно изобретению, в качестве биохимических маркеров обмена веществ используют гормоны лептин и грелин, при этом при увеличении концентрации лептина в сыворотке крови более 37,89 нг/мл и одновременном снижении концентрации грелина в плазме крови менее 0,26 нг/мл диагностируют гестоз тяжелой степени.The essence of the invention lies in the fact that in the known method for the diagnosis of severe gestosis in late terms (in the third trimester) of pregnancy, which consists in taking venous blood with its subsequent study for the content of specific biochemical markers of metabolism, according to the invention, as biochemical markers of metabolism substances use the hormones leptin and ghrelin, while with an increase in the concentration of leptin in blood serum more than 37.89 ng / ml and a simultaneous decrease in the concentration of ghrelin in blood plasma enee 0.26 ng / ml diagnosed severe preeclampsia.
Другие отличия состоят в том, что концентрацию лептина определяют в сыворотке венозной крови, а концентрацию грелина в плазме венозной крови.Other differences are that the concentration of leptin is determined in the serum of venous blood, and the concentration of ghrelin in the plasma of venous blood.
Использование гормонов лептина и грелина в качестве биохимических маркеров энергетического обмена для диагностики гестоза тяжелой степени не известно из уровня техники.The use of the hormones leptin and ghrelin as biochemical markers of energy metabolism for the diagnosis of severe gestosis is not known from the prior art.
В таблице 1 приведена динамика гормонов энергетического обмена в крови у женщин с физиологическим течением беременности и с гестозом тяжелой степени.Table 1 shows the dynamics of the hormones of energy metabolism in the blood of women with physiological pregnancy and severe gestosis.
В таблице 2 приведены пороговые значения гормонов энергетического обмена в крови у женщин с гестозом тяжелой степени, полученные в результате анализа ROC-кривых (Receiver Operating Characteristics - кривая операционных характеристик приемника).Table 2 shows the threshold values of the hormones of energy metabolism in the blood of women with severe gestosis, obtained as a result of the analysis of ROC-curves (Receiver Operating Characteristics - receiver operating characteristics curve).
На фиг.1 приведен калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации в калибровочных образцах грелина, в нг/мл.Figure 1 shows a calibration graph of the dependence of the optical density on the concentration in the calibration samples of ghrelin, in ng / ml
На фиг.2 приведен калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации в калибровочных образцах лептина в нг/мл.Figure 2 shows a calibration graph of the dependence of optical density on the concentration in the calibration samples of leptin in ng / ml
На фиг.3 приведены результаты описательного статистического анализа концентраций гормонов энергетического обмена у женщин с гестозом тяжелой степени.Figure 3 shows the results of a descriptive statistical analysis of hormone concentrations of energy metabolism in women with severe gestosis.
На фиг.4 приведены результаты описательного статистического анализа концентраций гормонов энергетического обмена у женщин с физиологическим течением беременности.Figure 4 shows the results of a descriptive statistical analysis of hormone concentrations of energy metabolism in women with physiological pregnancy.
На фиг.5 приведена ROC-кривая лептина как биохимического маркера энергетического обмена.Figure 5 shows the ROC curve of leptin as a biochemical marker of energy metabolism.
На фиг.6 приведены координаты и результаты статистического анализа ROC-кривой лептина.Figure 6 shows the coordinates and results of a statistical analysis of the ROC curve of leptin.
На фиг.7 приведена ROC-кривая грелина как биохимического маркера энергетического обмена.Figure 7 shows the ROC curve of ghrelin as a biochemical marker of energy metabolism.
На фиг.8 приведены координаты и результаты статистического анализа ROC-кривой грелина.On Fig shows the coordinates and results of statistical analysis of the ROC curve of ghrelin.
Определение концентрации лептина основано на иммуноферментном анализе с использованием двухшагового сэндвич-анализа. Использовались высокоспецифичные моноклональные антитела: моноклональные антитела специфичные к лептину иммобилизованы в лунках микропланшета и другие моноклональные антитела специфичные к другому эпитопу лептина конъюгированы с биотином. Во время первого этапа лептин, присутствующий в образцах и стандартах, связывается с иммобилизованными антителами и с биотинилированными антителами, образуя сэндвич-комплекс. Избыток и несвязавшиеся биотинилированные антитела удаляют на этапе промывки. На втором этапе вносят конъюгат стрептавидин-пероксидаза хрена, который специфически связывается с биотинилированными антителами. Затем несвязавшийся конъюгат удаляют при промывке. После этого вносят субстрат тетраметилбензидина, который в результате ферментативной реакции образует продукт голубого цвета, при этом окраска прямо пропорциональна количеству присутствующего лептина. Ферментативную реакцию останавливают добавлением стоп-реагента, в результате голубая окраска превращается в желтую. Абсорбция при 450 нм измеряется с помощью микропланшетного спектрофотометра. Для построения калибровочной кривой используется набор стандартов. Концентрацию лептина в исследуемых образцах рассчитывают непосредственно из калибровочной кривой.Determination of leptin concentration is based on an enzyme-linked immunosorbent assay using a two-step sandwich assay. Highly specific monoclonal antibodies were used: leptin-specific monoclonal antibodies were immobilized in the wells of the microplate and other monoclonal antibodies specific for another leptin epitope were conjugated to biotin. During the first stage, leptin, which is present in the samples and standards, binds to immobilized antibodies and biotinylated antibodies, forming a sandwich complex. Excess and unbound biotinylated antibodies are removed in the washing step. At the second stage, the horseradish streptavidin peroxidase conjugate is introduced, which specifically binds to biotinylated antibodies. The unbound conjugate is then removed by washing. After that, a substrate of tetramethylbenzidine is introduced, which, as a result of the enzymatic reaction, forms a blue product, while the color is directly proportional to the amount of leptin present. The enzymatic reaction is stopped by adding a stop reagent, as a result, the blue color turns into yellow. Absorption at 450 nm is measured using a microplate spectrophotometer. A set of standards is used to construct the calibration curve. The concentration of leptin in the test samples is calculated directly from the calibration curve.
При определении содержания грелина использован иммунопланшет, предварительно сорбированный вторыми антителами и обработанный реагентом, блокирующим неспецифические сайты связывания. Вторые антитела могут связываться с Fc-фрагментом первичных антител, чей Fab-фрагмент конкурирует за связывание как биотинилированного грелина, так и грелина образцов и стандартов. Биотинилированный грелин связывается с пероксидазой хрена, конъюгированной со стрептавидином, которая катализирует реакцию раствора, содержащего тетраметилбензидин и перекись водорода, с развитием голубой окраски. Фермент-субстратная реакция останавливается добавлением соляной кислоты в качестве стоп-раствора. Раствор меняет цвет на желтый. Интенсивность развивающейся окраски пропорциональна количеству биотинилированного грелина, связавшегося с иммобилизованными в планшете антителами и обратно пропорциональна концентрации грелина в образце. Концентрацию грелина в неизвестном образце определяют по стандартной кривой.When determining the content of ghrelin, an immunoplate was used, preliminarily sorbed by second antibodies and treated with a reagent blocking non-specific binding sites. Second antibodies can bind to the Fc fragment of primary antibodies, whose Fab fragment competes for the binding of both biotinylated ghrelin and ghrelin samples and standards. Biotinylated ghrelin binds to horseradish peroxidase conjugated with streptavidin, which catalyzes the reaction of a solution containing tetramethylbenzidine and hydrogen peroxide with the development of a blue color. The enzyme-substrate reaction is stopped by the addition of hydrochloric acid as a stop solution. The solution changes color to yellow. The intensity of developing color is proportional to the amount of biotinylated ghrelin bound to antibodies immobilized in the plate and inversely proportional to the concentration of ghrelin in the sample. The concentration of ghrelin in an unknown sample is determined by a standard curve.
Способ осуществляли следующим образом.The method was carried out as follows.
I. Производили забор крови из локтевой вены утром натощак у беременной в третьем триместре. В сыворотке крови определяли содержание лептина и в плазме содержание грелина методом иммуноферментного анализа.I. Blood was taken from the ulnar vein in the morning on an empty stomach in a pregnant woman in the third trimester. In the blood serum, the leptin content was determined and in the plasma the ghrelin content was determined by enzyme immunoassay.
II. Определение лептина проводили с помощью тест-систем производства Diagnostics Biochem Canada Inc (Canada):II. Leptin was determined using test systems manufactured by Diagnostics Biochem Canada Inc (Canada):
1. Приготовили рабочие растворы стрептавидин/HRP и промывочного буфера.1. Prepared streptavidin / HRP working solutions and wash buffer.
2. Внесли по 20 мкл каждого стандарта (0, 1, 5, 10, 20, 50, 100 нг/мл) контроля и образца в дублях в соответствующим образом помеченные ячейки.2.
3. Внесли по 80 мкл раствора моноклональных антител к лептину, конъюгированных с биотином, во все ячейки.3. 80 μl of a solution of monoclonal antibodies to leptin conjugated with biotin were added to all wells.
4. Инкубировали 1 час при комнатной температуре на шейкере BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 при 200 об/мин.4. Incubated for 1 hour at room temperature on a BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 shaker at 200 rpm.
5. Промыли ячейки 3 раза, используя по 300 мкл разведенного буфера для промывок на ячейку, а затем постучали микропланшетом по фильтровальной бумаге, убедились, что ячейки сухие.5. The cells were washed 3 times using 300 μl of diluted wash buffer per well, and then we tapped the filter paper with a microplate, making sure that the cells were dry.
6. Внесли по 100 мкл раствора стрептавидин/HRP в каждую ячейку.6.
7. Инкубировали на шейкере BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 в течение 30 минут при комнатной температуре при 200 об/мин.7. Incubated on a BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 shaker for 30 minutes at room temperature at 200 rpm.
8. Промыли ячейки, как указано в п.5.8. The cells were washed as indicated in paragraph 5.
9. Внесли по 100 мкл субстрата ТМБ в каждую ячейку.9. 100 μl of TMB substrate was added to each well.
10. Инкубировали на шейкере BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 в течение 10-15 минут при комнатной температуре.10. Incubated on a BioSan Thermoshaker PST-60HL-4 shaker for 10-15 minutes at room temperature.
11. Внесли по 50 мкл стоп-раствора во все ячейки.11. Add 50 μl of stop solution to all wells.
12. Определили оптическую плотность ячеек при длине волны 450 нм на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Alisei».12. The optical density of the cells was determined at a wavelength of 450 nm on an Alisei automated enzyme-linked immunosorbent analyzer.
Определение грелина проводили с помощью тест-систем производства Peninsula Laboratories (USA):The determination of ghrelin was carried out using test systems manufactured by Peninsula Laboratories (USA):
1. Приготовили рабочий буфер: развели концентрат рабочего буфера до 1000 мл деионизированной водой и тщательно перемешали. Полученный раствор использовали для растворения всех других компонентов набора и разведения образцов.1. Prepared working buffer: diluted the working buffer concentrate to 1000 ml with deionized water and mixed thoroughly. The resulting solution was used to dissolve all other components of the kit and dilute the samples.
2. Разведение лиофилизированного стандарта: добавили 1 мл Рабочего буфера во флакон с лиофилизированным стандартом и тщательно перемешали, избегая вспенивания.2. Dilution of the lyophilized standard: 1 ml of Working buffer was added to the vial with the lyophilized standard and mixed thoroughly, avoiding foaming.
3. Разведение исходного стандарта: приготовили 6 пробирок 12×75 мм. В каждую пробирку добавили Рабочий буфер. В пробирку #1 внесли исходный раствор стандарта (1000 нг/мл). Перенесли 100 мкл полученного раствора из пробирки #1 в пробирку #2, тщательно перемешали на вортексе BioSan microspin FV-2400. Выполнили разведения в 4 раза до концентрации 0,02 нг/мл.3. Dilution of the original standard: prepared 6 tubes 12 × 75 mm A work buffer was added to each tube.
4. Разведение лиофилизированных первичных кроличьих антител к грелину IgG: добавили 5 мл Рабочего буфера и тщательно перемешали.4. Dilution of lyophilized primary rabbit antibodies to IgG ghrelin: 5 ml of Working buffer was added and mixed thoroughly.
5. Разведение биотинилированного аналита: добавили 5 мл рабочего буфера и тщательно перемешали.5. Dilution of biotinylated analyte: 5 ml of working buffer was added and mixed thoroughly.
6. Внесли в каждую ячейку, исключая ячейку «бланк», по 25 мкл раствора первичных антител.6. Contributed to each cell, excluding the blank cell, 25 μl of a solution of primary antibodies.
7. Внесли в ячейку «бланк» 25 мкл Рабочего буфера.7. Add 25 μl of Work buffer to the blank.
8. Закрыли планшет пленкой.8. Closed the tablet with a film.
9. Инкубировали планшет 1 час при комнатной температуре.9. The plate was incubated for 1 hour at room temperature.
10. Внесли по 50 мкл каждого приготовленного стандарта в соответствующие ячейки.10. Add 50 μl of each prepared standard to the appropriate wells.
11. Внесли по 50 мкл исследуемых образцов в соответствующие ячейки.11. 50 μl of test samples were added to the appropriate wells.
12. Внесли 50 мкл разбавителя в ячейку «бланк».12. Add 50 μl of diluent to the blank cell.
13. Закрыли планшет пленкой.13. Closed the tablet with a film.
14. Инкубировали планшет 2 часа при комнатной температуре.14. The plate was incubated for 2 hours at room temperature.
15. Внесли в каждую ячейку по 25 мкл раствора биотинилированного аналита.15.
16. Инкубировали планшет в течение ночи при температуре 4°С.16. The plate was incubated overnight at 4 ° C.
17. Удалили содержимое ячеек перед первой промывкой, резко стряхнув планшет.17. Removed the contents of the cells before the first washing by sharply shaking off the tablet.
18. Промыли планшет 5 раз 300 мкл рабочего буфера, каждый раз промокая планшет фильтровальной бумагой.18. The plate was washed 5 times with 300 μl of working buffer, each time wetting the tablet with filter paper.
19. Процентрифугировали флакон с конъюгатом стрептавидина и пероксидазы хрена на центрифуге Eppendorf Centrifuge 5702R в течение 15 секунд при 4°С и режиме центрифугирования 500-1000 об/мин. Внесли 12 мл рабочего буфера в пробирку. Добавили 60 мкл конъюгата стрептавидина и пероксидазы хрена в 12 мл Рабочего буфера и тщательно перемешали на вортексе BioSan microspin FV-2400.19. The vial with the conjugate of streptavidin and horseradish peroxidase was centrifuged on an Eppendorf Centrifuge 5702R centrifuge for 15 seconds at 4 ° C and a centrifugation mode of 500-1000 rpm. 12 ml of the working buffer were added to the tube. 60 μl conjugate of streptavidin and horseradish peroxidase in 12 ml of Working buffer were added and thoroughly mixed on a BioSan microspin FV-2400 vortex.
20. Внесли в каждую ячейку по 100 мкл рабочего раствора конъюгата стрептавидина и пероксидазы хрена.20. In each cell, 100 μl of a working solution of streptavidin conjugate and horseradish peroxidase were added.
21. Инкубировали планшет 1 час при комнатной температуре.21. The plate was incubated for 1 hour at room temperature.
22. Удалили содержимое ячеек перед первой промывкой, резко стряхнув планшет.22. The contents of the cells were removed before the first washing by sharply shaking off the tablet.
23. Промыли планшет 5 раз 300 мкл рабочего буфера, каждый раз промокая планшет фильтровальной бумагой.23. Wash the plate 5 times with 300 μl of working buffer, each time wetting the plate with filter paper.
24. Внесли по 100 мкл раствора хромогенного субстрата ТМБ в каждую ячейку, включая «бланк».24. 100 μl of TMB chromogenic substrate solution was added to each well, including a blank.
25. Накрыли планшет пленкой.25. They covered the tablet with a film.
26. Инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре.26. Incubated for 1 hour at room temperature.
27. Внесли по 100 мкл 2 н НСl в каждую ячейку, включая «бланк».27.
28. Удалили пленку, закрывающую планшет, и поместили планшет в микропланшетный ридер.28. Remove the film covering the tablet and place the tablet in a microplate reader.
29. Считали оптическую плотность при длине волны 450 нм на автоматическом иммуноферментном анализаторе «Alisei».29. The optical density at a wavelength of 450 nm was counted on an Alisei automated enzyme-linked immunosorbent analyzer.
Результаты исследования содержания лептина и грелина в крови у женщин с физиологическим течением беременности и с гестозом тяжелой степени представлены в таблицах 1, 2.The results of the study of the content of leptin and ghrelin in the blood of women with physiological pregnancy and severe gestosis are presented in tables 1, 2.
Полученные результаты исследования свидетельствуют о том, что в сыворотке и плазме беременных женщин с гестозом тяжелой степени достоверно увеличено содержание лептина и снижено содержание грелина. Среднее значение концентрации лептина у женщин с физиологическим течением беременности составило 26,6±2,32 нг/мл, у женщин с гестозом тяжелой степени 42,4±2,93 нг/мл. Среднее значение уровня грелина у женщин с физиологическим течением беременности составило 0,3±0,02 нг/мл, у женщин с гестозом тяжелой степени - 0,2±0,02 нг/мл.The results of the study indicate that in the serum and plasma of pregnant women with severe gestosis, the content of leptin was significantly increased and the content of ghrelin was reduced. The average leptin concentration in women with physiological pregnancy was 26.6 ± 2.32 ng / ml, in women with severe gestosis, 42.4 ± 2.93 ng / ml. The average ghrelin level in women with physiological pregnancy was 0.3 ± 0.02 ng / ml, in women with severe gestosis - 0.2 ± 0.02 ng / ml.
Были рассчитаны пороговые значения гормонов как биохимических маркеров энергетического обмена в крови у женщин с гестозом тяжелой степени при анализе ROC-кривых. Так, при увеличении концентрации гормона лептина в сыворотке крови более значения 37,89 нг/мл и одновременном снижении концентрации гормона грелина в плазме крови ниже значения 0,26 нг/мл диагностировали гестоз тяжелой степени.The threshold values of hormones were calculated as biochemical markers of energy metabolism in the blood of women with severe gestosis in the analysis of ROC curves. So, with an increase in the concentration of the hormone leptin in the blood serum more than the value of 37.89 ng / ml and a simultaneous decrease in the concentration of the hormone ghrelin in the blood plasma below the value of 0.26 ng / ml, severe gestosis was diagnosed.
Пример 1.Example 1
Пациентка П., 22 лет, диагноз при поступлении: беременность 39-40 недель, отягощенный акушерский анамнез. Тазовое предлежание плода. Гестоз легкой степени второй половины беременности. Наследственность не отягощена. Из перенесенных заболеваний отмечает детские инфекции. Менструации без особенностей. Гинекологические заболевания - эрозия шейки матки (пролеченная). Данная беременность I, протекала в I триместре без особенностей. В III триместре с 38 недель беременности появилась пастозность нижних конечностей, АД в пределах нормы. Прибавка в весе за беременность 8 кг. В общем анализе мочи белка нет. По данным допплерометрии нарушений фето-плацентарного кровотока не выявлено, нарушения маточно-плацентарного кровотока нет. В биохимическом анализе крови белок - 69 г/л, Билирубин общий - 8 мкмоль/л, прямой - 0, непрямой - 8, глюкоза 5,0 ммоль/л, мочевина 3,8 ммоль/л. Тромботест V ст., время рекальцификации 110'', гепариновое время 40'', толерантность плазмы к гепарину 10', количество фибриногена 3,5 г/л. В клиническом анализе крови - тромбоциты 286×109, гематокрит - 0,35, эритроциты - 3,7×1012 /л, гемоглобин - 135 г/л, лейкоциты -7,9×109 /л, сегментоядерные 67%, палочкоядерные - 1%, лимфоциты - 21%, моноциты - 10%, СОЭ - 27 мм/ч.Patient P., 22 years old, diagnosis at admission: pregnancy 39–40 weeks, burdened obstetric history. Pelvic presentation of the fetus. Mild gestosis of the second half of pregnancy. Heredity is not burdened. Of the illnesses noted, childhood infections. Menstruation without features. Gynecological diseases - cervical erosion (treated). This pregnancy I, proceeded in the first trimester without features. In the third trimester, after 38 weeks of gestation, pastility of the lower extremities and blood pressure appeared within the normal range. Weight gain for pregnancy 8 kg. In the general analysis of urine, there is no protein. According to Dopplerometry, there were no violations of the fetoplacental blood flow, there were no violations of the uteroplacental blood flow. In the biochemical analysis of blood, protein is 69 g / l, total bilirubin is 8 μmol / l, direct is 0, indirect is 8, glucose is 5.0 mmol / l, urea is 3.8 mmol / l. Thrombotest V century, recalcification time 110``, heparin time 40 '', plasma tolerance to heparin 10 ', the amount of fibrinogen 3.5 g / l. In the clinical analysis of blood - platelets 286 × 109, hematocrit - 0.35, red blood cells - 3.7 × 10 12 / l, hemoglobin - 135 g / l, white blood cells -7.9 × 10 9 / l, segmented 67%, stab - 1%, lymphocytes - 21%, monocytes - 10%, ESR - 27 mm / h.
В 40 недель гестации, учитывая тазовое предлежание плода, в плановом порядке произведено поперечное надлобковое чревосечение, кесарево сечение в нижнем маточном сегменте поперечным разрезом. Извлечен живой доношенный мальчик, масса - 3800,0, длина - 55 см. Оценка по шкале Апгар 7/8 баллов. Кровопотеря во время операции составила 600,0. Послеоперационный период протекал без осложнений. Ребенок здоров. Выписана в удовлетворительном состоянии на 6 сутки. Уровень лептина в сыворотке крови составил 28,35нг/мл, уровень грелина в плазме - 0,27 нг/мл.At 40 weeks of gestation, taking into account the pelvic presentation of the fetus, a transverse suprapubic ventropathy, a cesarean section in the lower uterine segment with a transverse incision was made as planned. A live full-term boy was removed, weight - 3800.0, length - 55 cm. Apgar score 7/8 points. Blood loss during surgery was 600.0. The postoperative period was uneventful. The baby is healthy. Discharged in satisfactory condition on the 6th day. The level of leptin in blood serum was 28.35ng / ml, the level of ghrelin in plasma was 0.27 ng / ml.
Пример 2.Example 2
Пациентка А., 38 лет, диагноз при поступлении: беременность 37-38 недель, отягощенный акушерско-гинекологический анамнез. Рубец на матке. Сочетанный гестоз II п/б. Нейроциркуляторная дистония по гипертоническому типу. Наследственность не отягощена. Из перенесенных заболеваний отмечает детские инфекции, НЦД по гипертоническому типу. Менструальная функция без особенностей. Гинекологические заболевания - эрозия шейки матки (пролеченная). Данная беременность IV. В анамнезе: 2001 м/аб; 2004 роды 3500 (тазовое предлежание) кесарево сечение; 2007 с/аб; 2010 - настоящая беременность. Данная беременность протекала в I триместре без особенностей. В III триместре с 34 недель беременности появилась пастозность нижних конечностей, повышение АД до 130/90 мм рт.ст. Угроза по невынашиванию. Находилась на стационарном лечении в ОПБ роддома №5 с 17.11.10 по 24.11.10. В сроке 37-38 недель беременности пастозность нижних конечностей, повышение АД до 160/100. Прибавка в весе за беременность 14 кг. В общем анализе мочи белок 0, 033 г/л. По данным допплерометрии нарушений фето-плацентарного кровотока не выявлено, нарушения маточно-плацентарного кровотока IA степени. В биохимическом анализе крови белок - 54 г/л, билирубин общий - 8 мкмоль/л, прямой - 0, непрямой - 8, глюкоза 6,0 ммоль/л, мочевина 4,0 ммоль/л. Тромботест V ст., время рекальцификации 110'', гепариновое время 40'', толерантность плазмы к гепарину 10', количество фибриногена 3,5 г/л. В клиническом анализе крови - тромбоциты 222×109, гематокрит - 0,35, эритроциты - 3,7×1012/ л, гемоглобин - 123 г/л, лейкоциты -11,9×109 л, сегментоядерные 67%, палочкоядерные - 1%, лимфоциты - 21%, моноциты - 10%, СОЭ - 27 мм/ч.Patient A., 38 years old, diagnosis at admission: pregnancy 37-38 weeks, burdened obstetric and gynecological history. Scar on the uterus. Combined gestosis II p / b. Hypertensive neurocirculatory dystonia. Heredity is not burdened. Of the past diseases, childhood infections are noted, NDC is of a hypertonic type. Menstrual function without features. Gynecological diseases - cervical erosion (treated). This pregnancy IV. In the anamnesis: 2001 m / ab; 2004 childbirth 3500 (pelvic presentation) cesarean section; 2007 s / ab; 2010 is a real pregnancy. This pregnancy proceeded in the first trimester without features. In the third trimester, from 34 weeks of gestation, pastility of the lower extremities appeared, an increase in blood pressure to 130/90 mm Hg. The threat of miscarriage. I was hospitalized in the hospital of the maternity hospital No. 5 from 11/17/10 to 11/24/10. In the period of 37-38 weeks of pregnancy, pastility of the lower extremities, increased blood pressure to 160/100. Weight gain for pregnancy 14 kg. In the general analysis of urine, the protein is 0, 033 g / l. According to Dopplerometry, there were no violations of fetoplacental blood flow, violations of utero-placental blood flow of the IA degree. In the biochemical analysis of blood, protein is 54 g / l, total bilirubin is 8 μmol / l, direct - 0, indirect - 8, glucose 6.0 mmol / l, urea 4.0 mmol / l. Thrombotest V century, recalcification time 110``, heparin time 40 '', plasma tolerance to heparin 10 ', the amount of fibrinogen 3.5 g / l. In the clinical analysis of blood - platelets 222 × 109, hematocrit - 0.35, red blood cells - 3.7 × 1012 / l, hemoglobin - 123 g / l, white blood cells - 11.9 × 109 l, segmented 67%, stab - 1% lymphocytes - 21%, monocytes - 10%, ESR - 27 mm / h.
Развился гестоз тяжелой степени тяжести. Проводилась антигипертензивная терапия (клофелин 0,01% - 1,0 в\м, сульфат магния в/в капельно), метаболическая седативная терапия. Уровень лептина в сыворотке крови составил 45,55 нг/мл, уровень грелина в плазме - 0,19 нг/мл.Severe gestosis developed. Antihypertensive therapy was performed (clonidine 0.01% - 1.0 v / m, intravenous magnesium sulfate drip), metabolic sedative therapy. The serum leptin level was 45.55 ng / ml, the plasma ghrelin level was 0.19 ng / ml.
В 37 недель гестации, учитывая рубец на матке после операции кесарево сечение, осложненное течение данной беременности (гестоз тяжелой степени), тазовое предлежание плода в плановом порядке произведено поперечное надлобковое чревосечение, кесарево сечение в нижнем маточном сегменте поперечным разрезом. Извлечен живой доношенный мальчик, масса - 3100,0, длина - 50 см. Оценка по шкале Апгар 7/8 баллов. Кровопотеря во время операции составила 800,0. Послеоперационный период протекал без осложнений. Ребенок здоров. Выписана в удовлетворительном состоянии на 6 сутки.At 37 weeks of gestation, taking into account the scar on the uterus after the operation, cesarean section, complicated course of the pregnancy (severe gestosis), pelvic presentation of the fetus in a planned manner, transverse suprapubic lanoplasm was performed, cesarean section in the lower uterine segment was transversely cut. A live full-term boy was removed, weight - 3100.0, length - 50 cm. Apgar score 7/8 points. Blood loss during surgery was 800.0. The postoperative period was uneventful. The baby is healthy. Discharged in satisfactory condition on the 6th day.
Источники информацииInformation sources
1. Olsson, M.G. Increased levels of cell-free hemoglobin, oxidation markers, and the antioxidative heme scavenger alpha(1)-microglobulin in preeclampsia / M.G.Olsson, M.Centlow, S.Rutardottir [et al.] // Free Radic Biol Med. - 2010. - Vol.48, №2. - P.284-291.1. Olsson, M.G. Increased levels of cell-free hemoglobin, oxidation markers, and the antioxidative heme scavenger alpha (1) -microglobulin in preeclampsia / M.G. Olsson, M. Kentlow, S. Rutardottir [et al.] // Free Radic Biol Med. - 2010. - Vol. 48, No. 2. - P.284-291.
2. Borekc, B. Placental tissue cyclo-oxygenase 1 and 2 in pre-eclamptic and normal pregnancy / B.Borekc, H.Aksoy, A.Toker, A.Ozkan // International Journal of Gynecology and Obstetrics. - 2006. - №95. - P.127-131.2. Borekc, B. Placental tissue cyclo-
3. Hung, Т.Н. Hypoxia and reoxygenation: a possible mechanism for placental oxidative stress in preeclampsia / Т.Н.Hung, G.J.Burton // Taiwan J Obstet Gynecol. - 2006. - Vol.45, №3. - P.189-200.3. Hung, T.N. Hypoxia and reoxygenation: a possible mechanism for placental oxidative stress in preeclampsia / T.N. Hung, G.J. Burton // Taiwan J Obstet Gynecol. - 2006. - Vol. 45, No. 3. - P.189-200.
4. Способ доклинической диагностики гестоза RU 2135999, МПК 6 G01N 33/53, опубликовано: 27.08.19994. Method for preclinical diagnosis of gestosis RU 2135999, IPC 6 G01N 33/53, published: 08/27/1999
5. Sherer, Y. Antiphospholipid antibodies: are they pro-atherogenic or an epiphenomenon of atherosclerosis? / Y.Sherer, Y.Shoenfeld // Immunobiology. - 2003. - Vol.207, №1. - P.13-16.5. Sherer, Y. Antiphospholipid antibodies: are they pro-atherogenic or an epiphenomenon of atherosclerosis? / Y.Sherer, Y.Shoenfeld // Immunobiology. - 2003. - Vol.207, No. 1. - P.13-16.
6. Urbanus, R.T. Antiphospholipid antibodies~we are not quite there yet / R.T.Urbanus, P.G. de Groot // Blood Rev. - 2011. - Vol.25, №2. P.97-106.6. Urbanus, R.T. Antiphospholipid antibodies ~ we are not quite there yet / R.T. Urbanus, P.G. de Groot // Blood Rev. - 2011. - Vol.25, No. 2. P.97-106.
7. Opatrny, L. Association between antiphospholipid antibodies and recurrent fetal loss in women without autoimmune disease: a meta-analysis / L.Opatrny, M.David, S.R.Kahn, E.Rey // J Rheumatol. - 2006. - Vol.33. - P.2214-2221.7. Opatrny, L. Association between antiphospholipid antibodies and recurrent fetal loss in women without autoimmune disease: a meta-analysis / L.Opatrny, M.David, S.R. Kahn, E.Rey // J Rheumatol. - 2006 .-- Vol.33. - P.2214-2221.
8. Кулаков В.И. Основные направления научных исследований по гинекологии в 90-е г. / В.И.Кулаков, В.А.Голубев // Акуш. и гинекол. - 1995. - №3. - С.3-5.8. Kulakov V.I. The main directions of scientific research in gynecology in the 90s / V.I. Kulakov, V.A. Golubev // Akush. and gynecol. - 1995. - No. 3. - C.3-5.
9. Способ ранней диагностики гестоза беременных RU 2190848, МПК 7 G01N 33/52, G01N 33/48, опубликовано: 10.10.2002.9. A method for the early diagnosis of gestosis of pregnant women RU 2190848, IPC 7 G01N 33/52, G01N 33/48, published: 10.10.2002.
10. Гуринович Г.П., Грубина Л.А., Гуринович И.Ф., Некрашевич С.Ф. // Вопр. онкол., 1991, т.37, 2, с.158-161.1.10. Gurinovich G.P., Grubina L.A., Gurinovich I.F., Nekrashevich S.F. // Q. Onkol., 1991, v. 37, 2, pp. 158-161.1.
11. Способ прогнозирования гестоза RU 2249212, МПК 7 G01N 33/48, опубликовано: 27.03.2005.11. A method for predicting gestosis RU 2249212, IPC 7 G01N 33/48, published: 03/27/2005.
12. Способ прогнозирования гестоза RU 2263913, МПК G01N 33/49, опубликовано: 10.11.2005.12. A method for predicting gestosis RU 2263913, IPC G01N 33/49, published: 11/10/2005.
13. Способ прогнозирования гестоза легкой степени тяжести с ранних сроков беременности RU 2265221, МПК 7 G01N 33/577, опубликовано: 27.11.2005).13. A method for predicting mild gestosis from early pregnancy RU 2265221, IPC 7 G01N 33/577, published: 11.27.2005).
14. Способ раннего прогнозирования гестоза RU №2271541 МПК G01N 33/577 (2006.01), опубликовано: 10.03.2006.14. A method for early prediction of gestosis RU No. 2271541 IPC G01N 33/577 (2006.01), published: 03/10/2006.
15. Способ диагностики тяжелых форм гестоза RU 2259568, МПК 7 G01N 33/68, опубликовано 27.08.2005.15. A method for the diagnosis of severe forms of gestosis RU 2259568, IPC 7 G01N 33/68, published on 08.27.2005.
16. Кашежева А.З., Ефимов B.C. Гипергомоцистеинемия в патогенезе заболеваний коронарных сосудов // Кардиология. Хирургия. - 2007. - №11.16. Kashezhev A.Z., Efimov B.C. Hyperhomocysteinemia in the pathogenesis of coronary artery disease // Cardiology. Surgery. - 2007. - No. 11.
17. Сидоренко Г.И., Мойсинок А.Г. Роль гомоцистеина в тромбогенезе и атерогенезе // Кардиология. Тез.: докл. - М., 2002 - С 56-61.17. Sidorenko G.I., Moisinok A.G. The role of homocysteine in thrombogenesis and atherogenesis // Cardiology. Abstract: doc. - M., 2002 - C 56-61.
18. Frank, J. No evidence for prooxidative effects of homocysteine in vascular endothelial cells / J.Frank, S.C.Beck, A.Flaccus, H.K.Biesalski // Eur J Nutr. - 2007. - Vol.46, №5. - P.286-292.18. Frank, J. No evidence for prooxidative effects of homocysteine in vascular endothelial cells / J. Frank, S.C. Beck, A.Flaccus, H.K.Biesalski // Eur J Nutr. - 2007. - Vol. 46, No. 5. - P.286-292.
19. Bao, X.M. Atorvastatin inhibits homocysteine-induced oxidative stress and apoptosis in endothelial progenitor cells involving Nox4 and p38MAPK / X.M.Bao, C.F.Wu, G.P.Lu // Atherosclerosis. - 2010. - Vol.210, №1. - P.114-121.19. Bao, X.M. Atorvastatin inhibits homocysteine-induced oxidative stress and apoptosis in endothelial progenitor cells involving Nox4 and p38 MAPK / X.M. Bao, C.F. Wu, G.P. Lu, // Atherosclerosis. - 2010. - Vol. 210, No. 1. - P.114-121.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011135546/15A RU2476880C1 (en) | 2011-08-25 | 2011-08-25 | Diagnostic technique for severe gestosis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011135546/15A RU2476880C1 (en) | 2011-08-25 | 2011-08-25 | Diagnostic technique for severe gestosis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2476880C1 true RU2476880C1 (en) | 2013-02-27 |
Family
ID=49121596
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011135546/15A RU2476880C1 (en) | 2011-08-25 | 2011-08-25 | Diagnostic technique for severe gestosis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2476880C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2561060C1 (en) * | 2014-06-24 | 2015-08-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Diagnostic technique for preeclampsia in pregnant women suffering chronic arterial hypertension |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2259568C2 (en) * | 2003-06-06 | 2005-08-27 | Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН | Method for diagnosing severe gestosis forms |
| US20100119478A1 (en) * | 2008-08-20 | 2010-05-13 | Probiodrug Ag | ANTIBODIES DIRECTED AGAINST PYROGLUTAMATE MONOCYTE CHEMOATTRACTANT PROTEIN-1 (MCP-1 N1pE) |
-
2011
- 2011-08-25 RU RU2011135546/15A patent/RU2476880C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2259568C2 (en) * | 2003-06-06 | 2005-08-27 | Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН | Method for diagnosing severe gestosis forms |
| US20100119478A1 (en) * | 2008-08-20 | 2010-05-13 | Probiodrug Ag | ANTIBODIES DIRECTED AGAINST PYROGLUTAMATE MONOCYTE CHEMOATTRACTANT PROTEIN-1 (MCP-1 N1pE) |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| STRITTMATTER H.J. et al. Secretion and regulation of cytokines during pregnancy and gestosis // Z Geburtshilfe Neonatol. 2007 Apr; 211(2):69-75. * |
| СИДОРОВА И.С. Гестоз. - М.: Медицина, 2003, с.44-84. * |
| СИДОРОВА И.С. Гестоз. - М.: Медицина, 2003, с.44-84. STRITTMATTER H.J. et al. Secretion and regulation of cytokines during pregnancy and gestosis // Z Geburtshilfe Neonatol. 2007 Apr; 211(2):69-75. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2561060C1 (en) * | 2014-06-24 | 2015-08-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства имени В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Diagnostic technique for preeclampsia in pregnant women suffering chronic arterial hypertension |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Savvidou et al. | Levels of C-reactive protein in pregnant women who subsequently develop pre-eclampsia | |
| Espinoza et al. | Identification of patients at risk for early onset and/or severe preeclampsia with the use of uterine artery Doppler velocimetry and placental growth factor | |
| Cui et al. | Serum protein marker panel for predicting preeclampsia | |
| RU2521367C2 (en) | Method for prediction of developing placental insufficiency | |
| US20220113322A1 (en) | Rapid measurement of total vitamin d in blood | |
| Gul et al. | Maternal serum levels of zinc, copper, and thiols in preeclampsia patients: a case-control study | |
| EP2883060A1 (en) | NT-proCNP AS A BIOMARKER OF VASCULAR DISORDERS AND PREGNANCY COMPLICATION | |
| Ramiro-Cortijo et al. | First trimester elevations of hematocrit, lipid peroxidation and nitrates in women with twin pregnancies who develop preeclampsia | |
| Paternoster et al. | Predictive markers of pre-eclampsia in hypertensive disorders of pregnancy | |
| Fineschi et al. | An immunohistochemical study in a fatality due to ovarian hyperstimulation syndrome | |
| Ibanoglu et al. | Comparison of the Kisspeptin levels in early onset preeclampsia and late-onset preeclampsia | |
| RU2476880C1 (en) | Diagnostic technique for severe gestosis | |
| RU2483311C1 (en) | Diagnostic technique of preeclampsia in pregnant women with chronic arterial hypertension | |
| Sert | The role of serum netrin-1 level in the detection of early-onset preeclampsia | |
| JP3897117B2 (en) | Method for determining and predicting the severity of pregnancy toxemia, and for evaluating fetal / placental function in pregnancy toxemia | |
| CN103267851B (en) | A kind of kit detecting premature rupture of fetal membranes and preparation method thereof | |
| RU2309412C1 (en) | Method for evaluating the degree of gestosis severity | |
| CN114755426A (en) | Pregnancy preeclampsia diagnostic biomarker and application and kit | |
| Katsura et al. | Amniotic fluid neutrophil gelatinase‐associated lipocalin and L‐type fatty acid‐binding protein in predicting fetal inflammatory response syndrome | |
| RU2304783C1 (en) | Method for predicting the development of gestosis | |
| RU2830335C1 (en) | Method for predicting risk of developing chronic placental insufficiency at 6-8 weeks of pregnancy in women with aplas circulation and a burdened obstetric anamnesis | |
| RU2795090C1 (en) | Method for predicting the recurrence of early preeclampsia by markers of endothelial dysfunction | |
| RU2249212C1 (en) | Method for predicting gestosis | |
| Romanidou et al. | Estimation of Natural Autoantibodies in Preeclampsia by ELI-P Complex | |
| KR101075100B1 (en) | Methods and kits for providing useful information for diagnosing preeclampsia |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20170914 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180826 |