RU2463073C1 - Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения - Google Patents
Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2463073C1 RU2463073C1 RU2011110618/10A RU2011110618A RU2463073C1 RU 2463073 C1 RU2463073 C1 RU 2463073C1 RU 2011110618/10 A RU2011110618/10 A RU 2011110618/10A RU 2011110618 A RU2011110618 A RU 2011110618A RU 2463073 C1 RU2463073 C1 RU 2463073C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vaccine
- sows
- transmissible gastroenteritis
- strain
- virus
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 53
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 title abstract 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 26
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims abstract description 3
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 27
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 16
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 5
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 2
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 abstract description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 8
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002649 immunization Methods 0.000 abstract description 6
- 241000711484 Transmissible gastroenteritis virus Species 0.000 abstract description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 7
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 101000633680 Homo sapiens Tetratricopeptide repeat protein 37 Proteins 0.000 description 3
- 102100029210 Tetratricopeptide repeat protein 37 Human genes 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 208000007004 trichohepatoenteric syndrome Diseases 0.000 description 3
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 241001591005 Siga Species 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 229940043517 specific immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 1
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 101150010882 S gene Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 208000019754 hemorrhagic gastroenteritis Diseases 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/20011—Coronaviridae
- C12N2770/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии и касается изготовления и применения вакцины для специфической профилактики трансмиссивного гастроэнтерита свиней. Описанная вакцина содержит вирусный материал из штамма «ВН-96» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней в титре 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл, а в качестве наполнителя - физиологический раствор. Способ применения представленной вакцины заключается в иммунизации супоросных свиноматок внутримышечно однократно за 40-45 дней до опороса в дозе 4,5-5 мл на голову, также дополнительно осуществляют иммунизацию поросят-сосунов в возрасте 23-27 дней однократно внутримышечно в дозе 3,0-3,5 мл. Представленные изобретения позволяют одновременно активизировать у свиноматок клеточный иммунитет, обеспечивающий колостральную защиту новорожденных поросят, и гуморальный иммунитета, обеспечивающий защиту свиноматок от заражения. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 9 пр.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и касается изготовления и применения вакцины для специфической профилактики трансмиссивного гастроэнтерита свиней.
Трансмиссивный гастроэнтерит свиней (ТГС) - инфекционная высококонтагинозная болезнь, главным образом поросят до 3-месячного возраста, характеризующаяся катарально-геморрагическим гастроэнтеритом, рвотой, дегидратацией организма и сопровождающаяся атрофией ворсинок верхнего отдела тонкого кишечника и высокой смертностью (часто до 100%) среди поросят до 2-недельного возраста.
Известна вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита и способ ее применения (см. патент РФ №2306951, МПК A61K 39/225, опуб. 27.09.2007), содержащая инактивированный вирулентный штамм «ТВ» вируса ТГС в титре 7,0-8,5 lg ТЦД50/мл и адъювант. Вакцины вводят основным и ремонтным свинкам внутримышечно двукратно на 75-80 и 90-100 дней супоросности.
Однако инактивированные вакцины, наряду с положительным действием, в ряде случаев могут вызывать аллергические реакции из-за добавления к ним адъювантов. Их использование трудоемко, предусматривает многократную иммунизацию животных. Кроме этого, они не обеспечивают эффективной защиты из-за отсутствия антигенной идентичности вирулентному возбудителю.
Известна живая вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней на основе штамма «Горский-95» и способ ее применения (см. патент РФ №2140982, МПК C12N 7/00, опуб. 10.11.1999). Данный штамм обозначен как штамм «Горский-95» и депонирован в коллекции штаммов микроорганизмов Государственного научного учреждения Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии (ГНУ ВНИИВВиМ) инв. №1941.
Вакцину вводят дважды супоросным свиноматкам перорально соответственно за 6-8 и 2-3 недели до опороса.
Однако эффективность вакцины невысока ввиду невысокой активности штамма, который способен накапливаться только до 105 ТЦД 50/см3, обладает не очень высокой стабильностью (до 50 пассажа), не пригоден для профилактики трансмиссивного гастроэнтерита у поросят всех возрастных групп, включая отъемышей.
Наиболее близкой к заявляемой является живая вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита и способ ее применения (см. патент РФ №2347585, МПК A61K 39/225, опуб. 27.02.2008), содержащая вирусный материал из штамма Transmissible gastroenteritis ВГНКИ №5, сахарозу, пептон, пептон ферментативный, казеин, тиомочевину, аэросил AM-1-300 и смолу КБ-4П-2. Биологическая активность препарата составляет не ниже 6,0 lg ТЦД 50/мл. Вакцину вводят супоросным свиноматкам путем скармливания с сухим кормом перед утренним кормлением в дозе 10 г на голову в течение 3-х дней подряд за 10-14 дней до опороса. На 10-14 день после опороса вакцину дают и поросятам также перед утренним кормлением в дозе 5 г на голову.
Однако данная вакцина предназначена для орального применения. Кроме этого, она требует значительных трудозатрат в изготовлении и применении, так как предусматривает использование сухого корма и трехкратное введение животным. Механизм действия направлен на активизацию только клеточного иммунитета, что обеспечивает лишь колостральную защиту новорожденных поросят и не предотвращает развитие инфекционного процесса у вакцинированных свиноматок.
Изобретение направлено на решение задачи создания авирулентной эффективной живой вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита, простого в эксплуатации способа ее применения, направленных одновременно на активизацию у свиноматок клеточного иммунитета, обеспечивающего колостральную защиту новорожденных поросят, и активизацию у свиноматок гуморального иммунитета, обеспечивающего защиту их от заражения.
Для решения поставленной задачи вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, содержащая вирусный материал и наполнитель, согласно изобретению в качестве вирусного материала содержит материал из штамма «ВН-96» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней в титре 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл, а в качестве наполнителя - физиологический раствор при следующем соотношении компонентов (мас.%):
Вирусный материал из штамма «ВН-96» - 0,09-0,1%
Физиологический раствор - остальное.
Способ применения живой вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней заключается во внутримышечной однократной иммунизации супоросных свиноматок за 40-45 дней до опороса в дозе 4,5-5 мл на голову, при этом в качестве вакцины используют вакцину, содержащую вирусный материал из штамма «ВН-96» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней в титре 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл и физиологический раствор при следующем соотношении компонентов (мас.%): вирусный материал из штамма «ВН-96» - 0,09-0,1%, физиологический раствор - остальное.
Для обеспечения дополнительной зашиты поросят в послеотъемный период осуществляют иммунизацию поросят-сосунов в возрасте 23-27 дней однократно внутримышечно в дозе 3,0-3,5 мл.
В известных авторам источниках патентной и научно-технической информации не описано живой вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и простого в эксплуатации способа ее применения, обеспечивающих эффективную профилактику заболевания за счет одновременной активизации у свиноматок клеточного и гуморального иммунитетов, что способствует колостральной защите новорожденных поросят и самих свиноматок от заражения.
Однократное введение вакцины на основе смеси вирусного материала из штамма «ВН-96» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней в титре 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл с физиологическим раствором в соотношениях (1-0,9):(999-999,1).
Известные на сегодняшний день вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней направлены, в основном, на активизацию клеточного иммунитета. Ни одна из известных вакцин не позволяет осуществлять одновременную активизацию клеточного (в большей степени) и гуморального (в меньшей степени) иммунитетов.
Сказанное позволяет сделать вывод о наличии изобретательского уровня в данном изобретении.
Штамм, предназначенный для изготовления вакцины, депонирован во Всероссийском государственном научно-исследовательском институте контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов и кормов (ВГНКИ) (справка о депонировании №1103/19 от 27 мая 2009).
Штамм «ВН-96» выделен в 1988 году из вакцины «Римс» (ГДР) путем 30-кратного пассирования в перевиваемой культуре клеток почки эмбриона свиньи и методом предельных разведений с последующим 5-кратным клонированием микробляшек исходного вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней, всего проведено 96 пассажей.
Место хранения производственного штамма «ВН-96»-ДЕП вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней - Коллекция микроорганизмов Государственного научного учреждения Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Саратовский НИВИ Россельхозакадемии).
Штамм характеризуется следующими свойствами.
Морфологические признаки
При электронно-микроскопическом исследовании вируссодержащего материала установлено, что вирус штамма «ВН-96» является оболочечным, плеоморфным, диаметром 80-150 нм, имеет один слой булавовидных отростков (пепломеров) в виде короны длиной 12-20 нм, т.е. штамм морфологически тождественен представителям рода Coronavirus семейства Coronaviridae.
Культуральные признаки
Штамм «ВН-96» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней размножается в перевиваемой линии клеток почки эмбриона свиньи - СПЭВ (ГНУ ВНИИВВиМ). Допустимое количество пассажей - 10.
Инфекционная активность штамма в культуре СПЭВ составляет 5,25±0,25 lg ТЦЦ 50/см 3. После 7-го пассажа титр вируса ТГЭС штамма «ВН-96» составляет 7,0-7,2 lg ТЦЦ 50/см 3, дальнейшее пассирование к повышению титра вируса не приводит.
Антигенные свойства
Штамм «ВН-96» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней вызывает образование вируснейтрализующих и преципитирующих антител к вирусу ТГЭС в организме свиней и кроликов в титрах 4-6 log2.
Вирулентные свойства
Не вирулентен.
Патогенность для естественно-восприимчивых и лабораторных животных
Штамм «ВН-96» апатогенен для поросят всех возрастных групп при пероральном и подкожном методах введения в дозах 5,0-6,5 lg ТЦЦ 50/см 3.
Контаминация бактериями, грибами, микоплазмами и посторонними вирусами
Не контаминирован.
Молекулярно-генетическая особенность штамма
Штамм «ВН-96» является РНК-содержащим вирусом. Методом ОТ-ПЦР был амплифицирован участок генома вируса ТГЭС, включающий 800 н.о. на 5'-конце S-гена.
Вирус содержит 3 главных структурных белка: крупный поверхностный гликопротеин (S) с молекулярной массой 170-200 кДа, нуклеокапсидный белок (N) с молекулярной массой 50-62 кДа и мелкий оболочечный гликопротеин (М) с молекулярной массой 25-35 кДа.
ПЦР-анализ показал, что в треках вирусной нуклеиновой кислоты выявлена единственная характерная фракция специфического продукта ПЦР (кДНК величиной 886 пн), свидетельствующая о наличии генома вируса ТГЭС в достаточно большом количестве.
Условия хранения
Штамм «ВН-96» хранят в лиофилизированном виде в герметически закрытых ампулах при температуре минус 20-40°С в течение 5 лет. В течение срока хранения допускается снижение активности не более чем на 1,5 lg ТЦЦ 50/см 3.
Стабильность основных свойств штамма
Штамм «ВН-96» стабилен в течение 10 серийных пассажей в культуре клеток СПЭВ.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Для получения вирусного материала из штамма «ВН-96» используют культуру СПЭВ, выращенную в течение 3-х дней при температуре 37°C со сформированным монослоем клеток с посевной дозой 150 тыс./мл. Ростовую среду заменяют поддерживающей средой того же состава, но без сыворотки, и добавляют вирус в соотношении 1:10. Инфицированную культуру выдерживают в течение 3 суток при температуре 37°C, затем трехкратно замораживают и оттаивают. Полученную суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 минут. Надосадочную жидкость отбирают и титруют. Отбирают тот вирусный материал, титр которого составляет 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл.
Вирусный материал хранят при температуре минус 18-20°C.
Пример 2
Вакцину готовят следующим образом.
Берут 1 мл вирусного материала с титром 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл.
Добавляют его в 999 мл физиологического раствора. Смесь перемешивают и используют для профилактики ТГЭ.
Готовая вакцина представляет собой прозрачную жидкость, без цвета и запаха.
Пример 3
Обоснование титра вируса трансмиссивного гастроэнтерита и процентного соотношения компонентов вакцины против ТГЭ.
Эксперименты проводили в неблагополучном по ТГЭ хозяйстве. Вакцину вводили свиноматкам за 40-45 дней до опороса в разных титрах вируса. Первой группе (174 свиноматки) - в титре 6,0-6,2 lg ТЦД 50/мл, второй (195 свиноматок) - в титре 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл, третьей (270 свиноматок) - в титре 8,0-8,2 lg ТЦД 50/мл. Контрольными являлись 311 свиноматок.
Эффективность вакцинации оценивали по количеству деловых поросят, полученных на одну опоросившуюся свиноматку.
Результаты представлены в таблице 1.
Из таблицы 1 следует, что наибольший выход деловых поросят на одну опоросившуюся свиноматку (6,5) получен в группе, которая подвергалась однократной иммунизации за 40-45 дней до опороса вакциной с титром вируса 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл и при соотношении компонентов 1:999. Уменьшение или увеличение титра вируса и соотношения компонентов вакцины снижали ее эффективность.
| Таблица 1 | |||||
| Результаты эффективности вакцинации свиноматок при разных титрах вируса ТГЭ и соотношениях компонентов вакцины | |||||
| Характеристика групп свиноматок | Кол-во свиноматок в группе | Титр вируса lg TЦД 50/мл | Соотношение компонентов вакцины (вес. части) | Получено деловых поросят | |
| всего | на одну свином. | ||||
| 1 опытная | 174 | 6,0-6,2 | 1:99 | 820 | 4,7 |
| 2 опытная | 195 | 7,0-7,2 | 1:999 | 1274 | 6,5 |
| 3 опытная | 270 | 8,0-8,2 | 1:9999 | 1526 | 5,7 |
| Контрольная | 311 | - | - | 1451 | 4,7 |
Пример 4
Обоснование кратности введения вакцины проводили на трех группах свиноматок (по 80 голов в каждой), одна из которых являлась контрольной, а две другие - опытными. Первую опытную группу свиноматок иммунизировали однократно, вторую - двукратно с интервалом 14 дней.
Вакцину с титром вируса 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл вводили свиноматкам внутримышечно за 40-45 дней до опороса в дозе 5 мл на голову. Эффективность вакцинации оценивали по количеству полученных поросят. За поросятами вели клинические наблюдения, регистрировали заболеваемость и падеж до отъемного возраста. Результат представлен в таблице 2.
| Таблица 2 | |||||
| Эффективность вакцинации свиноматок в зависимости от кратности введения вакцины. | |||||
| Характеристика групп свиноматок | Кол-во поросят в группе | Заболело | Пало | ||
| голов | % | голов | % | ||
| 1 Опытная (вакцинированы двукратно) | 528 | 528 | 100,0 | 327 | 61,7 |
| 2 Опытная (вакцинированы однократно) | 542 | 125 | 23,1 | 72 | 13,3 |
| Контрольная | 532 | 532 | 100,0 | 394 | 74,1 |
Из таблицы 2 следует, что все поросята от невакцинированных свиноматок заболели ТГЭ, из них пало 394 головы (74,1%).
В опытной группе свиноматок, вакцинированных двукратно, также заболели все поросята, из них пало 327 голов (61,9%). В опытной группе свиноматок, вакцинированных однократно, из 542 поросят заболело только 125 (23,1%), пало 73 (13,3%).
Таким образом, однократное введение вакцины обеспечивает наибольшую защиту поросят-сосунов от заболевания.
Пример 5
Обоснование дозы введения вакцины проводили на двух группах свиноматок (по 50 голов в каждой), при этом одной группе свиноматок вводили вакцину в дозе 4,5-5 мл на голову, а второй группе - по 6-8 мл на голову.
Эффективность вакцинации оценивали по количеству полученных поросят. За поросятами вели клинические наблюдения, регистрировали заболеваемость и падеж до отъемного возраста. Результат представлен в таблице 3.
| Таблица 3 | |||||
| Эффективность вакцинации свиноматок в зависимости от дозы введения вакцины | |||||
| Доза вакцины | Кол-во поросят в группе | Заболело | Пало | ||
| голов | % | голов | % | ||
| 4,5-5 мл | 357 | 105 | 29,4 | 57 | 16,0 |
| 6-8 мл | 363 | 295 | 81,3 | 151 | 41,6 |
Из таблицы 3 следует, что от первой группы свиноматок, которым вводили вакцину в дозе 4,5-5 мл, было получено 357 поросят, из которых 105 (29,4%) заболело и 57 (16,0%) пало. От второй группы свиноматок, которым вакцину вводили в дозе 6-8 мл, было получено 363 поросенка, из которых 295 (81,3%) заболело и 151 (41,6%) пало.
Таким образом, увеличение дозы вакцинации (более 5 мл) уменьшает защиту поросят-сосунов от трансмиссивного гастроэнтерита в неблагополучных хозяйствах. Аналогичные результаты получены при дозе, меньшей 4,5 мл.
Пример 6
Обоснование сроков вакцинации свиноматок
Для этого было сформировано 5 групп свиноматок, из которых 4 были опытными и одна - контрольная. Все свиноматки первых четырех групп подвергались иммунизации вакциной с титром вируса 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл. Вакцину вводили внутримышечно в дозе 5 мл на голову. Первую опытную группу (48 свиноматок) иммунизировали за 9-10 дней до опороса. Вторую (46 голов) - за 22-25 дней до опороса, третью (41 голова) - за 30-32 дня до опороса, четвертую (43 головы) - за 40-45 дней до опороса.
Эффективность вакцинации оценивали по количеству полученных поросят. За поросятами вели клинические наблюдения, регистрировали заболеваемость и падеж до отъемного возраста. Результат представлен в таблице 4.
| Таблица 4 | ||||||
| Эффективность вакцинации свиноматок в зависимости от сроков введения вакцины до опороса | ||||||
| Характеристика групп свиноматок | Кол-во свиноматок | Кол-во поросят в группе | Заболело | Пало | ||
| голов | % | голов | % | |||
| 1 Опытная (вакц. за 9-10 дней до опороса) | 48 | 432 | 303 | 70,1 | 230 | 53,2 |
| 2 Опытная (вакц. за 22-25 дней до опороса) | 46 | 414 | 81 | 19,6 | 27 | 6,5 |
| 3 Опытная (вакц. за 30-32 дня до опороса) | 41 | 369 | 20 | 5,4 | 8 | 2,2 |
| 5 Опытная (вакц. за 40-45 дней до опороса) | 43 | 387 | 10 | 2,6 | 2 | 0,5 |
| Контрольная | 25 | 225 | 135 | 60,0 | 103 | 45,8 |
Из таблицы 4 следует, что наименьшее количество заболевших (2,6%) и павших (0,5%) поросят наблюдалось при вакцинации свиноматок за 40-45 дней до опороса.
Пример 7
Обоснование сроков и дозы вакцинации поросят
Экспериментальным путем доказано, что для обеспечения дополнительной защиты поросят в послеотъемный период осуществляют их иммунизацию в возрасте 23-27 дней. Данные сроки являются обоснованными, поскольку в первые 3 недели жизни у поросят превалирует естественная - колостральная защита, передающаяся им через молоко свиноматок. К 21-30-дневному возрасту происходит значительное снижение колостральной защиты, а в возрасте 35-40 дней поросята становятся незащищенными от заражения.
Доза вакцинации поросят 3-3,5 мл также была подобрана экспериментальным путем с учетом массы животных.
Пример 8
Изучение антигенной активности вакцины проводилось на первоопоросках и свиноматках, опоросившихся два и более раз. Вакцину вводили внутримышечно однократно за 40 дней до опороса в дозе 5 мл на голову. Титр антител определяли: в сыворотке крови за 1-2 дня до опороса, молозиве - в первые 12 часов после рождения, молоке - на 5-6 сутки после начала лактации.
| Таблица 5 | |||||
| Титр антител в сыворотке крови, молозиве и молоке вакцинированных и невакцинированных свиноматок | |||||
| № группы | Характеристика свиноматок | Кол-во исследов. проб | Титр антител (Ig2) в | ||
| сыворотке крови | молозиве | молоке | |||
| Первоопороски | |||||
| 1 | - вакцинированные | 12 | 4,4±0,40 | 7,5±0,56 | 5,8±0,74 |
| 2 | - контрольные | 17 | 0,9±0,29 | 4,3±0,47 | 1,3±0,24 |
| Опоросившиеся два и более раз | |||||
| 3 | - вакцинированные | 12 | 4,6±0,47 | 7,6±0,48 | 6,6±0,40 |
| 4 | - контрольные | 23 | 2,8±0,33 | 4,5±0,29 | 2,4±0,15 |
Как видно из таблицы 5, средний титр антител у вакцинированных свиноматок в сыворотке крови, молозиве, молоке достоверно выше аналогичных показателей невакцинированных животных.
А именно у вакцинированных животных происходит повышение гуморального и клеточного иммунитетов. О повышении гуморального иммунитета свидетельствует изменение титра в сыворотке крови с 0,9±0,29 до 4,4±0,40 у первоопоросок и с 2,8±0,33 до 4,6±0,47 у свиноматок, опоросившихся два и более раз. Это обеспечивает защиту вакцинированных свиноматок от заражения ТГЭ.
О повышении клеточного иммунитета свидетельствует изменение титра в молозиве и молоке также у всех свиноматок. К примеру, у первоопоросок титр повышается с 4,3±0,47 до 7,5±0,56. Это обеспечивает защиту новорожденных поросят от заражения ТГЭ.
Пример 9
Изучение иммуногенной активности вакцины проводилось на свиноматках, которым вводили вакцину внутримышечно однократно за 45 дней до опороса в дозе 5 мл на голову.
Определяли титры специфических иммуноглобулинов различных классов в молозиве всех свиноматок в первые сутки после опороса. Титры иммуноглобулинов определяли путем постановки реакции непрямой иммунофлуоресценции с использованием специфического эритроцитарного дагностикума против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и специфических антител к определенным классам иммуноглобулинов. Результаты представлены в таблице 6.
| Таблица 6 | ||||
| Титры специфических иммуноглобулинов различных классов в молозиве свиноматок к вирусу ТГЭ | ||||
| Характеристика свиноматок | Титр иммуноглобулинов (Ig2) в реакции иммунофлуоресценции | |||
| IgA | SIgA | IgG | IgM | |
| Опытные | 1,44±0,60 | 5,33±0,76 | 6,11±0,65 | 3,78±0,30 |
| Контрольные | 1,56±0,58 | 2,60±0,76 | 7,89±0,48 | 0,78±0,40 |
Из таблицы 6 следует, что после вакцинации свиноматок в первые сутки после опороса наблюдается активизация секреторных иммуноглобулинов SIgA (с 2,60±0,76 до 5,33±0,76) и иммуноглобулинов IgM (с 0,78±0,40 до 3,78±0,30). Достоверное увеличение данных показателей свидетельствует об усилении колостральной защиты новорожденных поросят.
Таким образом, заявляемая живая вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней эффективна, проста в эксплуатации, позволяет одновременно активизировать у свиноматок клеточный и гуморальный иммунитета, при этом клеточный иммунитет обеспечивает колостральную защиту новорожденных поросят, а гуморальный - защиту самих свиноматок от заражения трансмиссивным гастроэнтеритом.
Claims (3)
1. Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней, содержащая вирусный материал и наполнитель, отличающаяся тем, что в качестве вирусного материала она содержит материал из штамма «ВН-96» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней в титре 7,0-7,2 lg ТЦД 50/мл, а в качестве наполнителя - физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Вирусный материал из штамма «ВН-96» 0,09-0,1
Физиологический раствор Остальное
2. Способ применения вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней по п.1, заключающийся в иммунизации супоросных свиноматок, внутримышечно однократно за 40-45 дней до опороса в дозе 4,5-5 мл на голову.
3. Способ применения вакцины по п.2, отличающийся тем, что дополнительно осуществляют иммунизацию поросят-сосунов в возрасте 23-27 дней однократно внутримышечно в дозе 3,0-3,5 мл.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011110618/10A RU2463073C1 (ru) | 2011-03-21 | 2011-03-21 | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения |
| PCT/RU2012/000177 WO2012128667A2 (ru) | 2011-03-21 | 2012-03-15 | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ её применения |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011110618/10A RU2463073C1 (ru) | 2011-03-21 | 2011-03-21 | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2463073C1 true RU2463073C1 (ru) | 2012-10-10 |
Family
ID=46879942
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011110618/10A RU2463073C1 (ru) | 2011-03-21 | 2011-03-21 | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2463073C1 (ru) |
| WO (1) | WO2012128667A2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019216791A1 (ru) * | 2018-05-07 | 2019-11-14 | Laskavy Vladislav Nikolaevich | Средство для профилактики вирусных инфекций |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3519710A (en) * | 1967-08-10 | 1970-07-07 | Edmund P Bass | Direct active modified live virus vaccine immunization against transmissible gastroenteritis in swine piglets at birth |
| RU2347585C1 (ru) * | 2007-11-22 | 2009-02-27 | Федеральное государственное учреждение "Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГУ "ВГНКИ") | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
| RU2399668C1 (ru) * | 2009-06-23 | 2010-09-20 | Государственное научное учреждение Саратовская научно-исследовательская ветеринарная станция Российской академии сельскохозяйственных наук | Штамм "вн-96" вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней, используемый для производства диагностических и вакцинных препаратов |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE50254B1 (en) * | 1979-11-13 | 1986-03-05 | Univ Iowa State Res Found Inc | Vaccine and process for its preparation |
-
2011
- 2011-03-21 RU RU2011110618/10A patent/RU2463073C1/ru active
-
2012
- 2012-03-15 WO PCT/RU2012/000177 patent/WO2012128667A2/ru not_active Ceased
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3519710A (en) * | 1967-08-10 | 1970-07-07 | Edmund P Bass | Direct active modified live virus vaccine immunization against transmissible gastroenteritis in swine piglets at birth |
| RU2347585C1 (ru) * | 2007-11-22 | 2009-02-27 | Федеральное государственное учреждение "Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов" (ФГУ "ВГНКИ") | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней |
| RU2399668C1 (ru) * | 2009-06-23 | 2010-09-20 | Государственное научное учреждение Саратовская научно-исследовательская ветеринарная станция Российской академии сельскохозяйственных наук | Штамм "вн-96" вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней, используемый для производства диагностических и вакцинных препаратов |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019216791A1 (ru) * | 2018-05-07 | 2019-11-14 | Laskavy Vladislav Nikolaevich | Средство для профилактики вирусных инфекций |
| US20210308251A1 (en) * | 2018-05-07 | 2021-10-07 | Artem Alexsandrovich NICHIPORUK | Agent for the prevention of viral infections |
| US12076389B2 (en) * | 2018-05-07 | 2024-09-03 | Sergei Ivanovich Ivanenko | Agent for the prevention of viral infections |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2012128667A3 (ru) | 2012-11-15 |
| WO2012128667A2 (ru) | 2012-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Francis | Recent advances in vaccine technologies | |
| TWI781962B (zh) | 抗豬小病毒疫苗 | |
| JP2022538673A (ja) | アフリカ豚熱ワクチン | |
| TW201828982A (zh) | 抗豬小病毒及豬生殖與呼吸道症候群病毒之疫苗及其製造方法 | |
| US20120276139A1 (en) | Use of newcastle disease virus-based vector for inducing an immune response in mammals | |
| JP2001504496A (ja) | 幼仔の免疫化 | |
| ES2632429T3 (es) | Vacunas subunitarias de rotavirus y procedimientos para la fabricación y utilización de las mismas | |
| JP2021501757A (ja) | 狂犬病ウイルスワクチン | |
| US9968672B2 (en) | IDNA vaccines and methods for using the same | |
| RU2593718C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типов а, о, азия-1 | |
| WO2020147015A1 (zh) | 口蹄疫病毒样颗粒抗原、及其疫苗组合物、制备方法和应用 | |
| RU2603003C1 (ru) | Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типов а, о, азия-1 | |
| RU2451745C2 (ru) | ШТАММ А 2045/КИРГИЗИЯ/2007 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА А ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ПРОТИВОЯЩУРНЫХ ВАКЦИН И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА А | |
| JP2013545735A (ja) | インフルエンザウィルスの組換えヘマグルチニン蛋白質及びそれを含むワクチン | |
| RU2463073C1 (ru) | Вакцина против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ ее применения | |
| KR102785395B1 (ko) | 구제역 바이러스 유사 입자를 생산하기 위한 백신 플랫폼 | |
| RU2665849C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типа О | |
| RU2563522C1 (ru) | ШТАММ О №2102/Забайкальский/2010 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА О ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ПРОТИВОЯЩУРНЫХ ВАКЦИН И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА О | |
| RU2682876C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типа О | |
| WO2017097875A1 (en) | Kit-of-parts for use in a prime-boost vaccination strategy to protect cloven-footed animals against foot-and-mouth disease virus infection | |
| RU2835906C1 (ru) | Вакцина против ящура генотипа SAT-2/XIV из штамма «SAT-2/XIV/2023» культуральная инактивированная сорбированная | |
| Orta et al. | Vaccines used in Echtyma disease and alternative treatment methods | |
| RU2825899C1 (ru) | Вакцина против репродуктивно-респираторного синдрома свиней живая культуральная сухая и способ изготовления вакцины | |
| RU2504400C1 (ru) | Вакцина ассоциированная против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
| RU2348690C2 (ru) | Штамм "амурский" № 1987 вируса ящура типа азия-1 для контроля антигенной и иммуногенной активности вакцин и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа азия-1 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20170413 |