RU2455990C2 - Фармацевтическое соединение - Google Patents
Фармацевтическое соединение Download PDFInfo
- Publication number
- RU2455990C2 RU2455990C2 RU2010114755/15A RU2010114755A RU2455990C2 RU 2455990 C2 RU2455990 C2 RU 2455990C2 RU 2010114755/15 A RU2010114755/15 A RU 2010114755/15A RU 2010114755 A RU2010114755 A RU 2010114755A RU 2455990 C2 RU2455990 C2 RU 2455990C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- component
- raloxifene
- compound
- blood
- saporin
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 40
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 67
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 38
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 32
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims abstract description 19
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims abstract description 19
- 229940095743 selective estrogen receptor modulator Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 239000000333 selective estrogen receptor modulator Substances 0.000 claims abstract description 18
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229960004622 raloxifene Drugs 0.000 claims description 100
- 108010084592 Saporins Proteins 0.000 claims description 71
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 32
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 32
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 19
- 108090000829 Ribosome Inactivating Proteins Proteins 0.000 claims description 16
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 15
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 15
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims description 10
- -1 raloxifene compound Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 6
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 5
- NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethylbenzidine Chemical compound C1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=CC=2)=C1 NUIURNJTPRWVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 3
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 3
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 103
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 abstract description 60
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 abstract description 60
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 18
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 abstract 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract 1
- GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N raloxifene Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 93
- 239000000306 component Substances 0.000 description 45
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 21
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 21
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 17
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 17
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 12
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 235000002374 tyrosine Nutrition 0.000 description 12
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 10
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 9
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 7
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 6
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 5
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 4
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- 231100001223 noncarcinogenic Toxicity 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 3
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 3
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 description 3
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- FCEHBMOGCRZNNI-UHFFFAOYSA-N 1-benzothiophene Chemical compound C1=CC=C2SC=CC2=C1 FCEHBMOGCRZNNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBYIRNPNPLQARY-UHFFFAOYSA-N 1H-indene Chemical compound C1=CC=C2CC=CC2=C1 YBYIRNPNPLQARY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000000254 Agrostemma githago Species 0.000 description 2
- 235000009899 Agrostemma githago Nutrition 0.000 description 2
- 244000003416 Asparagus officinalis Species 0.000 description 2
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N Furan Chemical compound C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- 244000035744 Hura crepitans Species 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 2
- 240000003946 Saponaria officinalis Species 0.000 description 2
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical compound C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N anthracene Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C=C21 MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 2
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 2
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 150000003668 tyrosines Chemical class 0.000 description 2
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 2
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005096 28S Ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000036832 Adenocarcinoma of ovary Diseases 0.000 description 1
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- 101001011741 Bos taurus Insulin Proteins 0.000 description 1
- 241000645874 Cymbopogon refractus Species 0.000 description 1
- ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N Droloxifene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=C(O)C=CC=1)\C1=CC=C(OCCN(C)C)C=C1 ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N 0.000 description 1
- 208000037162 Ductal Breast Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 1
- VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N Fulvestrant Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](CCCCCCCCCS(=O)CCCC(F)(F)C(F)(F)F)CC2=C1 VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- JJKOTMDDZAJTGQ-DQSJHHFOSA-N Idoxifene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN2CCCC2)=CC=1)/C1=CC=C(I)C=C1 JJKOTMDDZAJTGQ-DQSJHHFOSA-N 0.000 description 1
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 1
- NYOUEIGURRKNDJ-WDJZMOTQSA-N OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1.N1C(C=C2N=C(C=C3NC(=C4)C=C3)C=C2)=CC=C1C=C1C=CC4=N1 Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1.N1C(C=C2N=C(C=C3NC(=C4)C=C3)C=C2)=CC=C1C=C1C=CC4=N1 NYOUEIGURRKNDJ-WDJZMOTQSA-N 0.000 description 1
- 208000035327 Oestrogen receptor positive breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 206010061328 Ovarian epithelial cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 101710100968 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 1
- 241000219287 Saponaria Species 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 1
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- RFRXIWQYSOIBDI-UHFFFAOYSA-N benzarone Chemical compound CCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC=C(O)C=C1 RFRXIWQYSOIBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- PFYXSUNOLOJMDX-UHFFFAOYSA-N bis(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) carbonate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)ON1C(=O)CCC1=O PFYXSUNOLOJMDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N bovine insulin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000014581 breast ductal adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000001244 carboxylic acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 230000003021 clonogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 239000003398 denaturant Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 125000000664 diazo group Chemical group [N-]=[N+]=[*] 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229950004203 droloxifene Drugs 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000009261 endocrine therapy Methods 0.000 description 1
- 229940034984 endocrine therapy antineoplastic and immunomodulating agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- 201000007281 estrogen-receptor positive breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 1
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 1
- 210000005002 female reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- RMBPEFMHABBEKP-UHFFFAOYSA-N fluorene Chemical compound C1=CC=C2C3=C[CH]C=CC3=CC2=C1 RMBPEFMHABBEKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002258 fulvestrant Drugs 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229950002248 idoxifene Drugs 0.000 description 1
- 125000000879 imine group Chemical group 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 208000030776 invasive breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 description 1
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- NIHNNTQXNPWCJQ-UHFFFAOYSA-N o-biphenylenemethane Natural products C1=CC=C2CC3=CC=CC=C3C2=C1 NIHNNTQXNPWCJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 208000013371 ovarian adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006588 ovary adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000002971 oxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004031 partial agonist Substances 0.000 description 1
- 239000005426 pharmaceutical component Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 231100000760 phototoxic Toxicity 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate group Chemical group S(=O)(=O)([O-])[O-] QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009121 systemic therapy Methods 0.000 description 1
- 125000000101 thioether group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 229930192474 thiophene Natural products 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N toremifene Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 229960005026 toremifene Drugs 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
- A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/545—Heterocyclic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине и касается соединения, содержащего a) первый компонент, способный к связыванию с рецепторами клеток ER+; и в) второй компонент, где первый компонент является селективным модулятором рецептора эстрогена (SERM), и где второй компонент представляет собой токсин, инактивирующий рибосомы, и конъюгирован с первым компонентом, а также касается фармацевтической композиции, применения соединения, способа получения и способа лечения рака. Группа изобретений обеспечивает уменьшение опухоли без побочных токсических эффектов действия лекарственных средств. 6 н. и 22 з.п. ф-лы, 6 пр., 5 ил.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к лечению рака, содержащего раковые клетки, положительные в отношении эстрогеновых рецепторов (ER+), и, в частности, к лечению рака груди. Авторы предоставили конъюгат, содержащий фармацевтический компонент и компонент, который представляет собой токсин. Конъюгат имеет превосходную способность к нацеливанию на раковые клетки ER+ и к их уничтожению.
Уровень техники
Среди женщин по всему миру рак груди представляет собой наиболее распространенное раковое заболевание и наиболее распространенную причину смерти от рака. Рак груди, как предполагается, вызывается различными факторами, и одним из этих факторов является увеличение уровней эстрогенов в крови. Имеется множество исследований в области семейств эстрогеновых рецепторов и различий между эстрогеновыми рецепторами раковых клеток и эстрогеновыми рецепторами нормальных клеток. Целью таких исследований является обнаружение лекарственных средств, которые могут лечить рак груди посредством ослабления продуцирования эстрогенов в организме.
Один такой тип рака содержит клетки, несущие эстрогеновые рецепторы (клетки ER+). Они представляют собой клетки с большим количеством эстрогеновых рецепторов, как правило, примерно 200000-5000000. Нормальная неканцерогенная клетка с эстрогеновыми рецепторами будет иметь, как правило, примерно 20000-80000 эстрогеновых рецепторов. Раковые клетки увеличивают скорость деления в присутствии эстрогенов, реагируя даже на малые количества гормона, из-за большого количества эстрогеновых рецепторов.
Новые системные терапии для рака груди обсуждаются в Surgical Oncology 12 (2003) 277-287 (Soo Lo, Stephen R.D. Johnston). Они включают эндокринную терапию, такую как чистые антиэстрогены и селективные модуляторы эстрогеновых рецепторов (SERM), моноклональные антитела, нацеленные против фактора роста рецепторов, низкомолекулярные ингибиторы трансдукции сигналов, вакцины и стратегии иммунотерапии и терапии против ангиогенеза.
Одно из лекарственных средств, которое, как показано, должно быть эффективным при лечении рака, положительного по эстрогеновым рецепторам, представляет собой тамоксифен. Тамоксифен представляет собой пример селективного модулятора эстрогеновых рецепторов (SERM), действующего в качестве антагониста на канцерогенные клетки, положительные по эстрогеновым рецепторам, посредством связывания с эстрогеновыми рецепторами на поверхности клеток и предотвращения связывания эстрогенов на клетках и ингибирования, таким образом, деления клеток. Даже если он является антагонистом в тканях груди, он действует в качестве частичного агониста на эндометрий и связан с эндометриальным раком у некоторых женщин. По этой причине среди побочных воздействий тамоксифена находятся эндометриальные изменения, включая рак.
Предполагается также, что конъюгат тамоксифена и порфирина мог бы быть эффективным при фотодинамическом лечении раковых клеток, при этом порфирин демонстрирует фототоксическую активность при экспонировании для красного света и имеет более сильное уничтожение клеток для клеток рака груди MCF-7 по сравнению с неконъюгированным порфирином. Конъюгаты эстрадиол-порфирин, которые селективно локализуются в клетках рака груди, положительных в отношении эстрогеновых рецепторов, в течение фотодинамической терапии рака груди, описываются также в Bioinorganic & medicinal Chemistry 10 (2002) 3237-3243 (Swamy, James, Mohr, Hanson and Ray).
Другие конъюгаты, которые исследовались на их эффективность при лечении рака, включают конъюгаты антитело-токсин. British Journal of Haemotology 2000, 110, 351-361 (Bolognesi, Polito et al.) описывают связывание рибосом-инактивирующих белков, таких как сапорин, с моноклональными антителами для лечения лимфомы Ходжкина. Однако к настоящему времени нет такого продукта, который успешно прошел через испытания на людях и стал лицензированным продуктом.
Хотя современные лекарственные средства и терапии для лечения рака и, в частности, рака груди, имеющиеся на рынке, замедляют деление этих раковых клеток, через несколько лет клетки мутируют так, что лекарственное средство на них больше не действует, и лекарственное средство становится непригодным, при этом пациенты не реагируют на лечение.
По этой причине задачей настоящего изобретения является создание нового лечения для раковых заболеваний ER+, включая, в частности, такие раковые заболевания груди, для которых упоминаемые выше проблемы решаются посредством разрушения раковых клеток ER+ вместо простого уменьшения скорости деления клеток, подобно тому, как делают другие SERM и другие виды лечения.
Упоминаемые выше проблемы решаются с помощью аспектов и вариантов осуществления настоящего изобретения, изложенного ниже.
Сущность изобретения
Соответственно, настоящее изобретение предусматривает соединение, содержащее
(a) первый компонент, способный к связыванию с рецепторами клеток ER+; и
(b) второй компонент;
где второй компонент представляет собой токсин, инактивирующий рибосомы, и конъюгирован с первым компонентом.
Первый компонент является способным к связыванию с клетками, содержащими эстрогеновые рецепторы, - так называемыми клетками ER+, или, другими словами, способным к связыванию с рецепторами клеток ER+ или с клеточными эстрогеновыми рецепторами. Как упоминается выше, в данном контексте, рецепторы клеток ER+ представляют собой рецепторы клеток, положительных по эстрогеновым рецепторам (ER+). Они могут присутствовать на многих типах клеток, и настоящее изобретение распространяется на компоненты, способные к связыванию со всеми рецепторами ER+, независимо от типа клеток. Однако, как правило, клетки, представляющие интерес для настоящего изобретения, представляют собой канцерогенные клетки, которые, в целом, имеют большое количество эстрогеновых рецепторов, как правило, примерно 200000-5000000. Все типы клеток рака груди представляют особенный интерес для настоящего изобретения. В противоположность этому, нормальные не канцерогенные клетки с эстрогеновыми рецепторами будут иметь, как правило, примерно 20000-80000 эстрогеновых рецепторов.
Конкретная идентификация первого компонента не является как-либо ограниченной, при условии, что он соответствует указанным выше критериям. Однако в предпочтительном варианте осуществления первый компонент представляет собой селективный модулятор эстрогеновых рецепторов (SERM), такой как соединение ралоксифена.
Как правило, в настоящем изобретении, токсин, инактивирующий рибосомы, представляет собой белок (белковый токсин, ингибирующий рибосомы, называется токсин RIP), а предпочтительно, RIP представляет собой RIP типа I. Как правило, такие белки действуют посредством необратимого блокирования синтеза белка и вызывают гибель клетки. Конкретная идентификация токсина не является как-либо ограниченной при условии, что он соответствует указанным выше критериям. В предпочтительном варианте осуществления токсин представляет собой сапорин.
В предпочтительном варианте осуществления соединение имеет стехиометрическое отношение первого компонента ко второму компоненту в пределах от 0,5:1 до N:1, где N представляет собой общее количество сайтов связывания для первого компонента во втором компоненте. Сайты связывания не являются как-либо ограниченными, за исключением того, что они должны быть способны к связыванию первого компонента со вторым компонентом. Как правило, но не исключительно, сайт связывания представляет собой тирозин или лизин. В сапорине имеется до 14 тирозиновых сайтов связывания и до 23 лизиновых сайтов связывания, каждый из них независимо способен служить в качестве сайта связывания для первого компонента (т.е. N=14, N=23 или N=37, в зависимости от того, используются ли точки присоединения только тирозина, только лизина или как тирозина, так и лизина). Таким образом, предпочтительные диапазоны составляют от 0,5:1 до 37:1, предпочтительно от 0,5:1 до 23:1, более предпочтительно от 0,5:1 до 14:1. Однако, в зависимости от того, какие точки присоединения используются, могут использоваться любые отношения в этих диапазонах.
Кроме того, в особенно предпочтительных вариантах осуществления стехиометрическое отношение первого компонента ко второму компоненту находится в пределах от 0,5:1 до 8:1 (предпочтительно, от 0,5:1 до менее чем 8:1), а более предпочтительно от 0,5:1 до 2,5:1. Стехиометрия от 0,5:1 до 7:1, от 0,5:1 до 6:1, от 0,5:1 до 5:1, от 0,5:1 до 4:1, от 0,5:1 до 3:1 и от 0,5:1 до 2:1 также является предпочтительной.
В этом отношении, стехиометрическое отношение может относиться как к средней стехиометрии, так и к молекулярной стехиометрии. Например, смесь, содержащая как конъюгат с молекулярным стехиометрическим отношением 1:1 (т.е. одна молекула первого компонента конъюгируется с каждой молекулой второго компонента), так и конъюгат с молекулярной стехиометрией 3:1 (т.е. три молекулы первого компонента конъюгируются с каждой молекулой второго компонента), будут иметь в равной пропорции среднюю стехиометрию 2:1. Таким образом, являются возможными стехиометрии, не выражающиеся целыми числами.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую любое из соединений, как описано выше.
В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает использование любых соединений и композиций, как описано выше, в медицине.
Дополнительный аспект настоящего изобретения предусматривает использование любого из упоминаемых выше соединений или композиций для получения лекарственного средства для лечения рака, содержащего клетки ER+. Тип раковых клеток ER+ не является как-либо ограниченным, но является особенно предпочтительным, чтобы рак представлял собой рак груди. Лекарственное средство является пригодным для лечения любого млекопитающего, и, в частности, субъекты-люди являются предпочтительными. Способ введения не является как-либо ограниченным, но является предпочтительным, что лекарственное средство является пригодным для инъекции или вливания (внутривенного или другим путем) или для перорального введения субъекту.
Дозировка, используемая в лекарственном средстве, не является как-либо ограниченной, при условии, что создается достаточная доза для удовлетворения требований относительно эффективности и токсичности. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения лекарственное средство является пригодным для инъекции субъекту для достижения пиковой концентрации конъюгата в крови, эквивалентной 1-500% от клинической пиковой концентрации в крови первого компонента, когда он используется в неконъюгированной форме.
В дополнительном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения лекарственное средство является пригодным для инъекции субъекту для достижения 80-140% от клинической пиковой концентрации в крови первого компонента, когда его используют в неконъюгированной форме.
В этом отношении целевые концентрации ралоксифена в крови основываются на стандартной терапевтической пиковой концентрации ралоксифена в крови человека (т.е. 0,5 нг/мл).
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ получения любого из соединений, как описано выше, посредством взаимодействия первого компонента со вторым компонентом для конъюгирования первого компонента со вторым компонентом.
Настоящее изобретение дополнительно предусматривает способ лечения рака, содержащего клетки ER+, и, в частности, рака груди, этот способ включает введение лекарственного средства субъекту, где лекарственное средство содержит любое соединение или композицию, как определяется выше.
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что конъюгаты соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением обеспечивают эффективное лечение раковых клеток ER+, их использование приводит к значительному начальному уменьшению ежедневного увеличения объема опухоли, а также к увеличенному и постоянному уменьшению скорости роста опухоли, в то же время не влияя значительно на неканцерогенные клетки ER+.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение предусматривает соединение, содержащее первый компонент, способный к связыванию с рецепторами клеток ER+, и второй компонент, где второй компонент представляет собой, как правило, класс токсинов RIP типа I и конъюгирован с первым компонентом.
Первый компонент для настоящего изобретения является способным к связыванию с рецепторами клеток ER+ и при условии, что его функциональность поддерживается, первый компонент не является как-либо ограниченным. Однако, как упоминается выше, обнаружено, что любое соединение - селективный модулятор эстрогеновых рецепторов (SERM) является особенно пригодным для использования. Тип SERM не является как-либо ограниченным, но может включать любое соединение из фулвестранта, тамоксифена, ралоксифена, торемифена, дролоксифена, идоксифена и лазофоксифена. В частности, соединение ралоксифена является особенно пригодным для использования.
Второй компонент представляет собой токсин, инактивирующий рибосомы. Как объяснялось, он предпочтительно представляет собой белок (токсин RIP), а более предпочтительно, RIP типа I. Является особенно предпочтительным, чтобы токсин не мог сам по себе попадать в клетки и действовал только на внутреннюю работу клеток.
Ралоксифен представляет собой селективный модулятор эстрогеновых рецепторов (SERM) с массой 510 Да, используемый при предотвращении остеопороза у женщин в период после менопаузы. Последние клинические испытания (Vogel VG; Costantino JP; et. al; for the National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project (NSABP). Effects of Tamoxifen vs Raloxifene on the Risk of Developing Invasive Breast Cancer and Other Disease Outcomes: The NSABP Study of Tamoxifen and Raloxifene (STAR) P-2 Trial. JAMA. 2006; 295: 2727-2741) показали, что ралоксифен является настолько же эффективным, как и тамоксифен, при уменьшении заболеваемости раком груди, положительным в отношении экстрогеновых рецепторов. Однако пациенты, принимающие ралоксифен ежедневно, имеют на 36 процентов меньше раковых заболеваний матки и на 29 процентов меньше тромбов, чем женщины, принимающие ежедневно тамоксифен. Раковые заболевания матки, в особенности эндометриальные раковые заболевания, представляют собой серьезное побочное воздействие тамоксифена.
Соединение ралоксифена может принимать следующую структуру:
В указанной выше структуре любой один или несколько атомов водорода, соединенных с атомами углерода, могут замещаться заместителями.
Заместители для ралоксифена не являются конкретно ограниченными и могут содержать любую органическую группу и/или один или несколько атомов любой из групп IIIA, IVA, VA, VIA или VIIA Периодической таблицы, таких как атомы B, Si, N, P, O или S, или атом галогена (например, F, Cl, Br или I).
Когда заместитель содержит органическую группу, органическая группа предпочтительно содержит углеводородную группу. Углеводородная группа может включать группу с прямой цепью, с разветвленной цепью или циклическую группу. Независимо, углеводородная группа может содержать алифатическую или ароматическую группу. Также независимо, углеводородная группа может содержать насыщенную или ненасыщенную группу.
Когда углеводород содержит ненасыщенную группу, она может включать одну или несколько алкеновых функциональных групп и/или одну или несколько алкиновых функциональных групп. Когда углеводород содержит группу с прямой цепью или разветвленной цепью, она может включать одну или несколько первичных, вторичных и/или третичных алкильных групп. Когда углеводород содержит циклическую группу, она может включать производные этих групп с ароматическим кольцом, алифатическим кольцом, с гетероциклической группой и/или с конденсированным кольцом. Циклическая группа может таким образом включать бензольную, нафталиновую, антраценовую, инденовую, флуореновую, пиридиновую, хинолиновую, тиофеновую, бензотиофеновую, фурановую, бензофурановую, пиррольную, индольную, имидазольную, тиазольную и/или оксазольную группу, а также региоизомеры указанных выше групп.
Количество атомов углерода в углеводородной группе не является как-либо ограниченным, но предпочтительно углеводородная группа содержит от 1 до 40 атомов C. Углеводородная группа может таким образом представлять собой низший углеводород (1-6 атомов C) или высший углеводород (7 атомов C или более, например, от 7 до 40 атомов C). Количество атомов в кольце циклической группы не является как-либо ограниченным, но предпочтительно кольцо циклической группы содержит от 3 до 10 атомов, например 3, 4, 5, 6 или 7 атомов.
Группы, содержащие гетероатомы, описанные выше, а также любые другие группы, определенные выше, могут содержать один или несколько гетероатомов любой из групп IIIA, IVA, VA, VIA или VIIA Периодической таблицы, таких как атом B, Si, N, P, O или S, или атом галогена (например, F, Cl, Br или I). Таким образом, заместитель может включать одну или несколько любых функциональных групп из групп, распространенных в органической химии, таких как гидроксильные группы, группы карбоновой кислоты, группы сложных эфиров, группы простых эфиров, альдегидные группы, кетоновые группы, аминовые группы, амидные группы, иминовые группы, тиольные группы, тиоэфирные группы, сульфатные группы, группы сульфоновой кислоты и фосфатные группы, и тому подобное. Заместитель может также включать производные этих групп, такие как ангидриды карбоновой кислоты и галогениды карбоновой кислоты.
В дополнение к этому, любой заместитель может включать сочетание двух или более заместителей и/или функциональных групп, определенных выше.
Когда второй компонент для настоящего изобретения представляет собой токсин класса RIP типа I, он не является как-либо ограниченным. Он может представлять собой любой токсин из сапорина, MOM, PAP-S, буганина и геланина, и среди них, в частности, сапорин является пригодным для использования в качестве токсина как часть соединения и фармацевтической композиции по настоящему изобретению.
Сапорин представляет собой белок, инактивирующий рибосомы (RIP), типа I, массой 30 кДа, полученный из семян растения мыльная трава (Saponaria officinalis). N-гликозидазная активность сапорина депуринирует конкретный нуклеотид в рибосомальной РНК 28S, таким образом, необратимо блокируя синтез белка и вызывая гибель клетки. Сапорин может также быть получен рекомбинантно, и не только из семян.
Тип сапорина не является как-либо ограниченным, но предпочтительной формой сапорина является та, которая известна как SO-6. Эта форма сапорина является необычной в том отношении, что она очень стабильна по отношению к денатурантам, протеазам и к теплу. Кроме того, в противоположность к MP типа II (например, к рицину), сапорин не имеет собственного механизма связывания с клетками и интернализации и, следовательно, он считается безопасным при нормальных условиях (Stirpe F, Gasper-Campani A, Barbieri L, Falasca A, Abbondanza A, Stevens WA (1983) Ribosome-inactivating proteins from the seeds of Saponaria officinalis L. (soapwort) of Agrostemma githago L. (corncockle) and of Asparagus officinalis (asparagus) and from the latex of Hura crepitans L. (sandbox tree). Biochem J 216: 617-625).
Конъюгирование первого компонента и второго компонента не является как-либо ограниченным, но обнаружено, что является эффективным ковалентное конъюгирование с использованием химического линкера, такого как бис-диазо-(о-толидин) [BDT]. Опять же, использование линкера и соединение, используемое как линкер, не являются как-либо ограниченными, но те конкретные примеры, которые описаны выше, как показано, действуют эффективно.
Стехиометрическое отношение первого компонента ко второму компоненту в соединениях в соответствии с настоящим изобретением не является как-либо ограниченным и может находиться в пределах от 0,5:1 до N:1, где N представляет собой общее количество сайтов связывания для первого компонента во втором компоненте. Из тех конъюгатов, которые имеют стехиометрическое отношение первого компонента ко второму компоненту в пределах от 0,5:1 до 14:1, без какого-либо ограничения, конъюгаты в пределах от 0,5:1 до 8:1, и предпочтительно, от 0,5:1 до 2,5:1, могут быть эффективными при лечении раковых клеток ER+. Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что отношение ралоксифена:сапорина приблизительно 2:1 приводит к получению наиболее эффективного конъюгата для лечения клеток рака груди, использование которого приводит к значительному начальному уменьшению ежедневного увеличения объема опухоли, а также к увеличенному и постоянному уменьшению скорости роста опухоли. Однако любой конъюгат для настоящего изобретения в пределах от 0,5:1 до менее чем 8:1 может быть эффективным в той же степени.
Фармацевтическая композиция, содержащая любое соединение по настоящему изобретению, хотя и не является как-либо ограниченной, может также содержать фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель и/или вспомогательное вещество.
Соединения и композиции в соответствии с настоящим изобретением, хотя не являются как-либо ограниченными при использовании, как правило, используются для получения лекарственного средства для лечения раковых заболеваний, содержащих клетки ER+, и являются особенно пригодными для использования при лечении рака груди, яичников, шейки матки, среди других раковых заболеваний с клетками ER+.
Использование соединений и композиций по настоящему изобретению является пригодным для всех млекопитающих и, в частности, для человека.
Дополнительно, может существовать использование, где лекарственное средство является пригодным для инъекции или вливания и, без какого-либо ограничения, в частности внутривенно, подкожно или с помощью любых других средств, включая пероральное введение.
Кроме того, использование является пригодным для инъекции субъекту для достижения пиковой концентрации в крови где-нибудь между 1% и 500% от клинической пиковой концентрации в крови первого компонента, когда он используется в неконъюгированной форме. В частности, использование может, кроме того, быть пригодным для инъекции для достижения от 1% до 400% от клинической пиковой концентрации в крови или, кроме того, от 1% до 300%, или, более конкретно, для достижения от 1% до 200%, а предпочтительно концентрации в пределах между 80% и 140%. Авторы неожиданно обнаружили, что лечение для достижения 80% и 140% с помощью конъюгата ралоксифена:сапорина, 2:1, приводит к значительному начальному уменьшению ежедневного увеличения объема опухоли по сравнению с контрольными результатами, а также к увеличенному и постоянному уменьшению скорости роста опухоли без значительного воздействия на неканцерогенные клетки ER+.
В отличие от современных лекарственных средств против рака, которые действуют в качестве антагонистов-конкурентов эстрогенов (т.е. они уменьшают скорость деления клеток), соединение, фармацевтическая композиция и лечение по настоящему изобретению имеют летальное воздействие на клетки, несущие большие количества рецепторов ER (т.е. на раковые клетки), но не на другие клетки ER+. Разрушение раковых клеток, вызываемое кратковременным лечением, сужает рамки для фенотипических изменений, как правило, наблюдаемых у раковых клеток при долговременном экспонировании для антагонистов-конкурентов, приводя к потере восприимчивости целевых клеток к конкурентам. На данном продукте отразился бы факт мутации раковой клетки из ER+ в ER-. Этот продукт имеет два преимущества по сравнению с герцептином (гуманизированное моноклональное антитело, которое действует на рецепторы HER2/neu и используется при лечении рака груди); во-первых, он нацелен на раковые клетки ER+, являются ли они положительными по Her2/neu или нет, в то время как герцептин нацеливается в основном на раковые клетки, положительные по Her2/neu, а во-вторых, скорее разрушает раковые клетки, чем просто замедляет их репликацию. Продукт по настоящему изобретению не имеет недостатков, ассоциирующихся с фотодинамической терапией, поскольку он может нацеливаться на раковые клетки, даже если никакой источник света не может фокусироваться на рассматриваемых раковых клетках. Этот продукт является также превосходным по отношению к иммунотоксинам (т.е. к моноклональным антителам, связанным с токсинами) в том, что он должен иметь более низкий риск синдрома экстровозации и нефротоксичности из-за образования иммунного комплекса.
В дополнение к этому, независимо от того, разделяются ли SERM (носитель) и RIP типа I (токсин), посредством воздействия внутриклеточной протеазы на линкер после входа конъюгата в целевую клетку или нет, эффективность продукта оставалась бы неизменной, поскольку она была бы независимой от связывания SERM с его рецептором или от любого клеточного механизма, активируемого под действием такого связывания. Т.е., когда он попадает в клетку, RIP типа I оказывает прямое необратимое отрицательное воздействие на рибосомы и, следовательно, на трансляцию всех mРНК, либо продуцируемых генами домашнего хозяйства, индуцируемыми в результате действия стимуляторных сигналов, возникающих при связывании и активировании любых других клеточных рецепторов (например, подобных тем, которые вызываются связыванием носителя SERM с клеточным рецептором), либо любым другим связанным с окружающей средой или внутренним механизмом и/или стимулом.
Описание чертежей
Настоящее изобретение будет теперь описываться более подробно в качестве только лишь примера, со ссылками на следующее далее обсуждение и на прилагаемые чертежи, в которых
фиг.1 показывает выживаемость монослоев клеток MCF-7, HCC-1143 и OVCAR-3, экспонируемых для уменьшающихся концентраций различных конъюгатов сапорина:ралоксифена (S:R). Выживаемость клеток (%) для каждой линии клеток вычисляют в соответствии со стандартным анализом высвобождения лактатдегидрогеназы (LDH), где минимальное высвобождение (0% выживаемости) соответствует клеткам, обработанным 50 мкг/мл митомицина C, а максимум высвобождения (100% выживаемости) соответствует клеткам, обработанным только полной средой.
Фиг.2 показывает выживаемость монослоев клеток MCF-7, HCC-1143 и OVCAR-3, экспонируемых либо для 500 нМ конъюгата ралоксифена:сапорина, 2:1 (конъюгат S:R, 1:2), либо для эквивалентной молярной концентрации сапорина (500 нМ), ралоксифена (1000 нМ) и смеси (т.е. неконъюгированной смеси) сапорина (500 нМ) и ралоксифена (1000 нМ). Выживаемость клеток (%) для каждой линии клеток вычисляют в соответствии со стандартным анализом высвобождения лактатдегидрогеназы (LDH), где минимальное высвобождение (0% выживаемости) соответствует клеткам, обработанным 50 мкг/мл митомицина C, а максимальное высвобождение (100% выживаемость) соответствует клеткам, обработанным только полной средой.
Фиг.3 показывает профиль роста опухолей MCF-7, установившихся у самок голых мышей, после лечения либо фосфатным буферным солевым раствором (PBS), 4 нг/мл ралоксифена, либо 0,4 нМ конъюгата ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R, 1:2). Животные получают внутривенное лечение ретроорбитальным путем в дни 36 и 43 после введения вещества.
Фиг.4 показывает процент изменения объема опухоли для лечения конъюгатом по сравнению с контролем и неконъюгированным продуктом.
Фиг.5 показывает процент изменения массы тела для лечения конъюгатом по сравнению с контролем и неконъюгированным продуктом.
Примеры
Пример 1 - Конъюгирование ралоксифена с сапорином
Ралоксифен (Sigma) конъюгируют с сапорином (Sigma) с использованием бис-диазо-(o-толидина) [BDT] как линкера (этот линкер является пригодным для использования для связывания через тирозин). Линкер является достаточно стабильным в кислом растворе, но взаимодействует чрезвычайно быстро с тирозином и другими ароматическими фенолами, когда pH повышают до 7. По этой причине реакцию трудно контролировать. Если не контролировать ее адекватно, линкер будет поперечно сшивать сапорин через четырнадцать тирозинов в своей последовательности и разрушит его целостность. Следовательно, используемые условия являются критическими.
Конъюгаты приготавливают при отношении ралоксифена к сапорину 14:1, 8 (приблизительно):1 и 2:1.
Ниже приводится протокол для конъюгирования 2:1 (ралоксифен:сапорин).
Для осуществления конъюгирования используют десятикратный молярный избыток BDT на один тирозин (в сапорине) и реакции позволяют происходить в пределах между 30 секундами и более чем 50 секундами при -20°C. После повышения pH от 2 до 5 посредством добавления соответствующего объема молярного раствора гидроксида натрия в воде (M.NaOH водный) реакцию останавливают посредством добавления молярного раствора хлористоводородной кислоты (M.HCl). Анализ с помощью УФ-спектроскопии показывает, что это приводит, в среднем, к получению двух молекул BDT, взаимодействующих с каждой молекулой сапорина, в течение реакции за время 30 секунд. Увеличение времени инкубирования дает в среднем восемь и 14 молекул BDT, взаимодействующих с каждой молекулой сапорина. Избыток BDT используют для увеличения вероятности того, что каждая из этих молекул BDT будет иметь взаимодействие только с одним тирозином. Это означает, что вторая диазогруппа в каждой из этих двух молекул BDT остается непрореагировавшей, и по этой причине доступной для реакции с ралоксифеном, который имеет три фенольных группы в своей структуре.
После гель-фильтрации смеси в M.HCl для удаления избытка BDT конъюгаты BDT-сапорин взаимодействуют с большим избытком ралоксифена в 50% метаноле посредством повышения pH до 7. Раствор немедленно повторно подкисляют, поскольку ралоксифен стабилен в кислотном растворе, но не в щелочном растворе. С помощью использования большого избытка ралоксифена обеспечивают, чтобы он был связан через BDT с сапорином только через одну из своих фенольных групп, при этом он химически модифицируется только до минимально возможной степени и, следовательно, сохраняет свою целостность настолько, насколько это возможно.
Реакция с ралоксифеном дает коричневый раствор, и этот цвет устраняют посредством экстрагирования раствора хлороформом. Бледно-соломенный водный слой выпаривают до малого объема при 40°C в вакууме и центрифугируют при 13000 об/мин для удаления твердого вещества. Бледно-желтый раствор, который получают, очищают с помощью гель-фильтрации в M.HCl с получением бесцветного раствора конъюгата ралоксифен-BDT-сапорин.
Пример 2 - Линии клеток
Линию клеток MCF-7 (ECACC, номер по каталогу 86012803) выделяют из аденокарциномы груди у женщины возрастом 69 лет, и она экпрессирует эстрогеновые рецепторы. Линию клеток поддерживают в минимальной эссенциальной среде (Sigma), дополненной 2 мМ L-Gln (Sigma), 1% неэссенциальных аминокислот (Sigma), 100 МЕ пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma) и, в качестве полной среды, 10% фетальной сывороткой теленка (FCS) (Sigma).
Линию клеток HCC-1143 (ATTC, номер по каталогу CRL-2321) выделяют из первичной дуктальной карциномы груди у женщины в возрасте 52 лет, и они не экспрессируют эстрогеновых рецепторов. Линию клеток поддерживают в RPMI-1640 (Sigma), дополненной 2 мМ L-Gln (Sigma), 10 мМ HEPES (Sigma), 1 мМ Na-Pyr (Sigma), 100 МЕ пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma) и, в качестве полной среды, 10% FCS (Sigma).
Наконец, клетки NIH:OVCAR-3 (ATTC, каталог no. HT13-161) выделяют из аденокарциномы яичников у женщины в возрасте 60 лет, и они экспрессируют эстрогеновые рецепторы. Линию клеток поддерживают в RPMI-1640 (Sigma), дополненной 2 мМ L-Gln (Sigma), 10 мМ HEPES (Sigma), 1 мМ Na-Pyr (Sigma), 0,01 мг/мл бычьего инсулина (Sigma), 100 МЕ пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma) и, в качестве полной среды, 20% FCS (Sigma).
Пример 3 - Клоногенный анализ
Культуры MCF-7, HCC-1143 и OVCAR-3 харвестируют приблизительно при 80% конфлюентности посредством трипсинизации и после однократной промывки в среде, не содержащей сыворотки, используют для высевания в плоскодонный 96-луночный планшет (Nunc) при 5×103 клеток на лунку в 200 мкл полной среды.
После 48 часов инкубирования при 37°C среду удаляют и заменяют на 100 мкл/лунка нескольких разбавлений исследуемых (конъюгаты ралоксифена:сапорина в PBS) или контрольных веществ (сапорин, ралоксифен, PBS (Sigma) и, наконец, на митомицин C (Sigma), как положительный контроль), в полной среде по четыре раза.
После 18 часов инкубирования при 37°C исследуемые соединения удаляют и добавляют в каждую лунку по 200 мкл/лунка полной среды.
После 96 часов инкубирования при 37°C среду удаляют и по 100 мкл/лунка 0,9% Triton X-100 (Sigma) в PBS при RT (при комнатной температуре) добавляют во все лунки. После 2 часов инкубирования при 37°C по 50 мкл раствора PBS-Triton переносят из всех лунок в новый плоскодонный 96-луночный планшет.
Реагент для детектирования из набора для нерадиоактивного анализа цитотоксичности CytoTox 96® (Promega) приготавливают согласно инструкциям производителя и по 50 мкл/лунка реагента детектирования добавляют во все лунки. После 30 минут инкубирования в темноте при комнатной температуре реакцию останавливают посредством добавления 50 мкл/лунка стоп-раствора во все лунки и устанавливают поглощение каждой лунки при 490 нм.
Пример 4 - Антиопухолевая активность in vivo
Тридцать (30) самок голых мышей (nu/nu) возрастом 6-8 недель провоцируют подкожно с помощью 2×107 клеток MCF-7, доставляемых в сочетании с Matrigel (Becton Dickinson) (общий объем 200 мкл). Потерю массы и рост опухоли (вычисленные с помощью осуществления двух перпендикулярных измерений и применения формулы [Π·((min измерение)/2)2· (max измерение)]) отслеживают ежедневно до окончания исследования.
Когда установленные опухоли достигают объема 0,3 см3 (день 36 после введения провоцирующего вещества), животных делят на группы из трех (3) животных и каждой группе дозируют внутривенно (ретроорбитальным путем) одни препарат из
- 100 мкл конъюгата ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R, 1:2), в PBS с тем, чтобы получить пиковые концентрации конъюгата R:S, 2:1, в крови 0,4, 0,2 и 0,1 нМ, которые являются эквивалентами 0,4, 0,2 и 0,1 нг/мл ралоксифена, соответственно (т.е. три группы: A, B и C соответственно)
- 100 мкл ралоксифена в PBS, также, чтобы получить пиковые концентрации конъюгата в крови 0,4, 0,2 и 0,1 нг/мл ралоксифена (т.е. три группы: D, E и F соответственно)
- 100 мкл PBS, (т.е. одна группа: G).
Целевые концентрации ралоксифена в крови основываются на стандартной терапевтической пиковой концентрации ралоксифена в крови человека (т.е. 0,5 нг/мл). Индивидуальные дозы для мышей, для достижения этой концентрации ралоксифена в крови, доставляемого либо как конъюгат, либо как чистый продукт, вычисляют с помощью умножения индивидуальной массы каждой мыши (г) на 0,08 (т.е. объем крови мыши в мл составляет в среднем 8% от ее массы) и по желаемой концентрации ралоксифена в крови (т.е. 0,4, 0,2 и 0,1 нг/мл).
Через семь дней после первой дозы (день 43 после введения вещества) животные получают вторую дозу конъюгата, чистого ралоксифена или PBS для достижения одинаковой конечной концентрации ралоксифена в крови (т.е. 0,4, 0,2 и 0,1 нг/мл).
Статистический анализ
Статистические различия вычисляются с использованием непараметрического анализа Манна-Уитни и считаются значимыми, если p<0,05.
Результаты
Исследования имеют целью установление того, может ли конъюгат сапорина и ралоксифена селективно убивать клетки груди, положительные по эстрогеновым рецепторам (ER), в то же время не убивая ER-положительные клетки полового тракта самок или другие не ER-положительные клетки. Для этой цели сапорин конъюгируют с ралоксифеном при молярных отношениях (R:S) 14:1, 8:1 и 2:1 и исследуют воздействие увеличения дозы этих конъюгатов на монослои клеток MCF-7 (ER-положительная линия клеток рака груди), HCC-1143 (ER-отрицательная линия клеток рака груди) и OVCAR-3 (ER-положительная линия клеток рака груди).
Как показано на фиг.1, конъюгат ралоксифен:сапорин, 14:1 (S:R 1:14), имеет ограниченное воздействие на любые линии клеток и определенно не оказывает селективного летального воздействия против клеток MCF-7 по сравнению либо с HCC-1143, либо с OVCAR-3. В противоположность этому конъюгат ралоксифен:сапорин, 8:1 (S:R 1:8), как показано, является летальным для всех линий клеток при концентрации конъюгата, равной или большей чем 500 нМ. Только при концентрации 250 нМ может наблюдаться малое увеличение селективного летального воздействия против клеток MCF-7 (выживаемость MCF-7 33,6±2% по сравнению с выживаемостью 70,8±5% HCC-1143 и 61,2±5,6% для OVCAR-3).
Подобно конъюгату ралоксифен:сапорин, 8:1 (S:R 1:8), конъюгат ралоксифен:сапорин, 2:1 (S:R 1:2), убивает все клетки, независимо от их ER статуса при самой высокой исследуемой концентрации конъюгата. Однако при низких дозах конъюгат ралоксифен:сапорин, 2:1, имеет наиболее значительное селективное воздействие из всех трех исследуемых конъюгатов. При концентрации конъюгата 500 нМ конъюгат ралоксифен:сапорин, 2:1, убивает большинство клеток MCF-7 (выживаемость 4,9±4,3%), при этом оказывая только ограниченное воздействие на HCC-1143 (выживаемость 62,8±10,7%) и OVCAR-3 (выживаемость 65,2±3,5%).
Ввиду этих результатов конъюгат ралоксифен:сапорин, 2:1, выбирают для дополнительного подробного анализа in vitro. Для этой цели монослои клеток MCF-7, HCC-1143 и OVCAR-3 лечат с помощью ралоксифена:сапорина, 2:1, при 500 нМ, а также с помощью эквивалентной молярной концентрации сапорина (500 нМ), ралоксифена (1000 нМ) и смеси (т.е. неконъюгированных) сапорина (500 нМ) и ралоксифена (1000 нМ).
Как показано на фиг.2, которая представляет среднее значение для двух независимых экспериментов, ралоксифен имеет селективное значимое (p<0,05) воздействие против ER-положительной линии клеток рака груди MCF-7, но не против ER-отрицательной линии клеток HCC-1143 или ER-положительной линии клеток яичников OVCAR-3. Подобным же образом смесь сапорина и ралоксифена имеет селективное воздействие на клетки MCF-7, которые могут быть с наибольшей вероятностью соотнесены с активностью ралоксифена, поскольку никакого значимого (p>0,05) летального воздействия не может быть приписано сапорину самому по себе. Конъюгат ралоксифена с сапорином при молярном отношении 2:1, по сравнению с простой смесью обоих соединений, вызывает значимое увеличение (p,0,05) летального воздействия соединений против MCF-7 (выживаемость 16,0±6,3% по сравнению с 51,6±3,2% для MCF-7), но имеет только ограниченное увеличение для летального воздействия против клеток HCC-1143 (выживаемость 72,4±5,7% по сравнению с 84,3±8,5% для HCC-1143) и OVCAR-3 (выживаемость 77,7±4,9% по сравнению с 104,4±2,5% в OVCAR-3).
Для исследования эффективности конъюгата ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R 1:2), при контроле роста опухоли in vivo, самки голых мышей (nu/nu) провоцируются подкожно с помощью клеток MCF-7. После установления опухолей (день 36), мышей лечат с помощью внутривенной инъекции болюса ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R 1:2), ретроорбитальным путем для достижения пиковой концентрации ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R 1:2), в крови 0,4, 0,2 и 0,1 нМ. Эти концентрации эквивалентны концентрациям, необходимым для достижения пиковой концентрации ралоксифена в крови 0,4, 0,2 и 0,1 нг/мл, которые составляют 80%, 40% и 20%, соответственно, от целевой пиковой клинической концентрации ралоксифена в крови у людей. Контрольные животные получают либо PBS, либо такие же дозы ралоксифена таким же путем. В день 43 животные получают вторую дозу либо ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R 1:2), PBS, либо ралоксифена.
Из-за природной восприимчивости клеток MCF-7 к продуцированию эстрогенов, ежедневное изменение объема опухоли у используемой модели голых мышей следует синусоидальному распределению с периодом приблизительно 4/5 дней (см. фиг.3). Продолжительность этого периода коррелирует с продолжительностью цикла эструса у мышей (т.е. 4/5 дней). В результате, и для облегчения экспериментального анализа, Фиг.3 представляет изменения объема опухоли для каждой экспериментальной группы, и как ежедневные изменения, и как подвижные средние (т.е. линию тренда) для перекрывающихся 5-дневных периодов (т.е. перекрывание представляет собой 4 дня на точку).
Группа, обработанная PBS, следует синусоидальному распределению роста опухоли, описанному выше. Это распределение характеризуется естественным трендом увеличения максимального объема опухоли, получаемым в каждом цикле, приводящим, в итоге, к летальному размеру опухоли. Лечение с помощью 0,2 и 0,1 нг/мл ралоксифена не приводит к каким-либо изменениям по сравнению с контрольной группой с PBS. Только группа с 0,4 нг/мл ралоксифена показывает естественный тренд поддержания или небольшого уменьшения размера опухоли со временем, который представляет собой характеристику его способа воздействия в клинике как селективного модулятора эстрогеновых рецепторов.
Лечение обработкой пиковыми концентрациями ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R 1:2), в крови 0,2 и 0,1 нМ также не может индуцировать каких-либо изменений в росте опухоли по сравнению с контрольной группой с PBS. Однако лечение обработкой 0,4 нМ ралоксифена:сапорина, 2:1 (S:R 1:2), приводит к значительному начальному уменьшению ежедневного увеличения объема опухоли по сравнению с группами с 0,4 нг/мл ралоксифена и с PBS (см. фиг.3, ежедневное изменение объема опухоли в течение дней 37 и 38), а также к увеличенному и постоянному уменьшению скорости роста опухоли по сравнению с тем, которое достигается в группе с 0,4 нг/мл ралоксифена (см. фиг.3, линия подвижного среднего тренда для исследования).
Пример 5 - Активность конъюгата in vitro
Целью этого исследования является оценка воздействий конъюгата на динамику роста подкожной ZR-75-1, положительной по эстрогеновым рецепторам линии клеток карциномы груди человека, имплантов у голых мышей.
Для этого исследования, и поскольку рост ZR-75-1 зависит от эстрогенов, не менее 40 нормальных самок атимических голых мышей (nu/nu) в возрасте 4-6 недель получают ежедневно инъекцию с 5 мг/кг эстрадиола, начиная с 3 дней перед провоцированием с помощью опухолевых клеток. После лечения эстрадиолом всем животным инокулируют подкожно по 25×106 клеток ZR-75-1 (получают от ATCC) в Matrigel (Becton-Dickinson) с использованием иглы и шприца 21G.
Массы тела и объемы опухоли отслеживают каждые 48-72 часа в течение 36 дней после первого введения исследуемых веществ. Объемы опухоли устанавливают с использованием формулы: Объем опухоли=(a2×b/2), где 'a' представляет собой наименьший диаметр и 'b' представляет собой наибольший диаметр.
После того как установленные опухоли достигают приблизительно 75-150 мм3 (индивидуальные объемы опухолей могут находиться в пределах от 100 до 250 мг), мышей распределяют на три обработанные группы (n=12 для каждой группы), так что средние объемы опухолей среди семи групп находятся в пределах 10% от средней массы опухоли для контрольной группы. В тот же день (день 1) животным делают внутривенную инъекцию 0,1 мл либо (a) конъюгата сапорина-ралоксифена, (b) либо смеси неконъюгированных сапорина и ралоксифена, либо (c) только ралоксифена. Это лечение повторяют каждые 72 часа в целом пять раз (дни 1, 3, 6, 9 и 12).
Общее количество ралоксифена, вводимое в виде инъекции одному животному, во всех трех группах является одинаковым, и оно подбирается для получения пиковой концентрации ралоксифена в крови 0,7 нг/мл, которая находится в пределах концентрации ралоксифена в крови в клинике. Те животные, которым также делают инъекцию сапорина, либо свободного, либо конъюгированного с ралоксифеном, получают одинаковое количество сапорина, вычисленное по молярному отношению сапорина:ралоксифена 1:2.
Дозирование эстрадиола возобновляют через 15 дней после имплантации для облегчения нормального роста подкожной опухоли.
Мышей подвергают эвтаназии (посредством асфиксии с помощью CO2), если животное обнаружили агонизирующим или если масса тела уменьшается ниже 14 г. Эвтаназию также осуществляют, если индивидуальный объем опухоли достигает 3000 мм3 или если опухоль становится изъязвленной. Во время исследования одно животное из группы B (неконъюгированные сапорин и ралоксифен) должно было быть удалено из исследования.
Результаты этого исследования говорят, что введение конъюгата сапорина-ралоксифена приводит к значительному (p<0,05, Манн-Уитни) уменьшению достигаемого пикового объема опухоли (день 5) по сравнению с введением либо одного только ралоксифена, либо неконъюгированных ралоксифена и сапорина.
Кроме того, в конце лечения (день 12) и вплоть до дня 36, животные, дозируемые конъюгатом сапорина-ралоксифена, в целом показывают согласованное уменьшение объемов опухоли по сравнению с другими двумя экспериментальными группами (см. фиг.4).
Показатель общего состояния здоровья животного может быть получен посредством наблюдения за массой тела животных в ходе исследования. По этой причине мышей из каждой группы взвешивают каждые 48-72 часа в течение всего исследования. Результаты ясно показывают, что животные, дозируемые конъюгатом сапорина-ралоксифена, имеют значимо (p<0,05, Манн-Уитни) лучший профиль набора массы тела, чем те, которым дозируют либо один ралоксифен, либо неконъюгированные ралоксифен и сапорин (см. фиг.5).
Пример 6 - Дополнительное конъюгирование ралоксифена с сапорином
Эксперимент A
Ралоксифен (Sigma) конъюгируют с сапорином (Sigma) с использованием бис-диазо-(o-толидина) [BDT] в качестве линкера. Это линкер является совершенно стабильным в кислом растворе, но взаимодействует чрезвычайно быстро с тирозином и другими ароматическими фенолами, когда pH повышается до 7. По этой причине реакцию сложно контролировать. Если нет адекватного контроля, линкер будет поперечно сшивать сапорин через четырнадцать тирозинов в его последовательности и разрушит его целостность. Следовательно, используемые условия являются важными.
Конъюгаты приготавливают при отношении ралоксифена к сапорину 2:1.
Протокол для конъюгирования (ралоксифена:сапорина) 2:1 приводится ниже: слегка сонифицируют.
Для осуществления конъюгирования 1,2 мг лиофилизированного сапорина (Sigma) растворяют в 0,6 мл воды. К этому раствору добавляют 0,4 мл ДМСО (Sigma) и 0,01 мл 1M HCl и перемешивают. После небольшой сонификации полученного раствора белка к раствору добавляют 0,4-1 мг ралоксифена, а затем молярный избыток BDT на каждый тирозин (в сапорине). pH полученного раствора повышают до 6,5 посредством добавления соответствующего объема молярного раствора гидроксида натрия в воде (M.NaOH водный) и реакции позволяют происходить в пределах между 22 и 34 минутами при комнатной температуре. В конце реакции к раствору добавляют фосфорную кислоту до конечной концентрации приблизительно 9 и перемешивают. Избыток BDT удаляют из сырого раствора конъюгата посредством элюирования через колонку Biogel P2 (BioRad) с использованием раствора 30,4% ДМСО и 9,1% фосфорной кислоты в воде в качестве элюента. Фракции, содержащие сапорин и ралоксифен, определяют с помощью УФ-спектрофотометрии и диализуют в воду перед использованием.
Эксперимент B
Ралоксифен-HCl и DSC (ди-(N-сукцинимидил)карбонат) - этот линкер является пригодным для использования при связывании через лизин) растворяют при массовом отношении 2:1 (ралоксифена:DSC) в 0,2 мл ДМФ (диметилформамид). К пиридину (0,13 мл) добавляют триэтиламин (0,01 мл) и аликвоты (0,01 мл) этого препарата добавляют последовательно к смеси ралоксифена/DSC в течение периода в 15 минут. Этот процесс осуществляют при 21°C и при постоянном перемешивании. Раствор сапорина (0,6 мг/мл) приготавливают в смеси 40% ДМФ в 15 мМ натрий-фосфатного буфера, pH 7,4 и добавленного раствора ралоксифена/DSC, 0,01 мл. Полученный препарат сначала смешивают посредством встряхивания, а затем сонифицируют до тех пор, пока он не приобретет коллоидный вид, перед тем как реакции конъюгирования позволяют происходить в течение 30 минут при 21°C. Полученные продукты центрифугируют при 13000 об/мин в течение 3 мин и осветленный супернатант либо используют непосредственно, либо пропускают через колонку Sephadex G10 в 0,1 HCl, сушат вымораживанием и повторно суспендируют в PBS до использования.
Эксперимент C
Сапорин растворяют в 10 мМ фосфатного буфера, pH 6,0, содержащего 2 мг/мл глюкозы, и к полученному раствору добавляют 0,1 мл молярной HCl при постоянном перемешивании, с тем, чтобы уменьшить pH до 3,7. К этому препарату добавляют 1 мл раствора ралоксифена-HCl в ДМСО (3 мг/мл) при постоянном перемешивании при 21°C, а затем 0,005 мл реагента BDT. Малые аликвоты (0,01 мл) 0,1 M NaOH последовательно добавляют к непрерывно перемешиваемому препарату сапорина-ралоксифена-BDT для доведения pH до 6,8, в этот момент реакции позволяют происходить дальше в течение 60 минут. Полученный продукт диализируют в течение ночи, сначала в воду, а затем в PBS, содержащий 2 мг/мл глюкозы. Коричневый преципитат, который появляется во время процесса, собирают и повторно растворяют в воде с помощью обработки ультрасонификацией и продолжительного встряхивания. После осветления с помощью центрифугирования супернатант аликвотируют в готовом для использования виде.
Claims (28)
1. Соединение, содержащее
(a) первый компонент, способный к связыванию с рецепторами клеток ER+; и
(b) второй компонент;
где первый компонент является селективным модулятором рецептора эстрогена (SERM), и
где второй компонент представляет собой токсин, инактивирующий рибосомы, и конъюгирован с первым компонентом.
(a) первый компонент, способный к связыванию с рецепторами клеток ER+; и
(b) второй компонент;
где первый компонент является селективным модулятором рецептора эстрогена (SERM), и
где второй компонент представляет собой токсин, инактивирующий рибосомы, и конъюгирован с первым компонентом.
2. Соединение по п.1, в котором токсин представляет собой любое соединение из сапорина, MOM, PAP-S, буганина и геланина.
3. Соединение по любому из предыдущих пунктов, в котором токсин представляет собой сапорин.
4. Соединение по п.1, в котором первый компонент представляет собой соединение ралоксифена.
5. Соединение по п.3, в котором первый компонент представляет собой соединение ралоксифена.
6. Соединение по п.1, в котором первый компонент ковалентно конъюгирован со вторым компонентом.
7. Соединение по п.6, в котором первый компонент конъюгирован со вторым компонентом с помощью химического линкера.
8. Соединение по п.7, в котором линкер представляет собой бис-диазо-(о-толидин) [BDT].
9. Соединение по п.1, в котором стехиометрическое отношение первого компонента ко второму компоненту находится в пределах от 0,5:1 до N:1, где N представляет собой общее количество возможных точек связывания для первого компонента во втором компоненте.
10. Соединение по п.9, в котором стехиометрическое отношение первого компонента ко второму компоненту находится в пределах от 0,5:1 до 2,5:1.
11. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из предыдущих пунктов и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель и/или вспомогательное вещество.
12. Применение соединения или композиции по любому из предыдущих пунктов в медицине, для лечения рака.
13. Применение соединения или композиции по любому из пп.1-11 для получения лекарственного средства для лечения рака, содержащего раковые клетки ER+.
14. Применение по п.13, в котором рак представляет собой рак груди, яичников, шейки матки или другие ER+ раковые заболевания.
15. Применение по любому из пп.13 и 14, в котором лекарственное средство является пригодным для лечения млекопитающих.
16. Применение по п.15, в котором млекопитающее представляет собой человека.
17. Применение по п.13, в котором лекарственное средство является пригодным для инъекции или вливания (внутривенного или другим путем) субъекту или перорального введения субъекту.
18. Применение по п.17, в котором лекарственное средство является пригодным для инъекции субъекту для достижения пиковой концентрации конъюгата в крови, эквивалентной 1-500% от клинической пиковой концентрации первого компонента в крови, когда его используют в неконъюгированной форме.
19. Применение по п.18, в котором лекарственное средство является пригодным для инъекции субъекту для достижения пиковой концентрации конъюгата в крови, эквивалентной 80-140% от клинической пиковой концентрации первого компонента в крови, когда он используется в неконъюгированной форме.
20. Способ получения соединения по любому из пп.1-10, где способ включает взаимодействие первого и второго компонентов для конъюгирования первого компонента со вторым компонентом.
21. Способ по п.20, где способ включает контроль pH первого и второго компонентов во время конъюгирования.
22. Способ лечения рака, содержащего клетки ER+, где способ включает введение лекарственного средства субъекту, где лекарственное средство содержит соединение или композицию по любому из пп.1-11.
23. Способ лечения по п.22, в котором рак представляет собой рак груди, яичников, шейки матки или другие ER+ раковые заболевания.
24. Способ лечения по любому из пп.22 и 23, в котором субъект представляет собой млекопитающее.
25. Способ лечения по п.24, в котором млекопитающее представляет собой человека.
26. Способ лечения по п.22, где лекарственное средство вводится посредством инъекции или вливается субъекту внутривенно или другим путем, или вводится субъекту перорально.
27. Способ лечения по п.26, в котором лекарственное средство вводится посредством инъекции или вливается субъекту для достижения пиковой концентрации конъюгата в крови, эквивалентной 1-500% от клинической пиковой концентрации первого компонента в крови, когда он используется в неконъюгированной форме.
28. Способ лечения по п.27, в котором лекарственное средство вводится посредством инъекции или вливается субъекту для достижения пиковой концентрации конъюгата в крови, эквивалентной 80-140% от клинической пиковой концентрации первого компонента в крови, когда его используют в неконъюгированной форме.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB0718045.8A GB0718045D0 (en) | 2007-09-14 | 2007-09-14 | Pharmaceutical compound |
| GB0718045.8 | 2007-09-14 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010114755A RU2010114755A (ru) | 2011-10-20 |
| RU2455990C2 true RU2455990C2 (ru) | 2012-07-20 |
Family
ID=38659041
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010114755/15A RU2455990C2 (ru) | 2007-09-14 | 2008-09-11 | Фармацевтическое соединение |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9056140B2 (ru) |
| EP (1) | EP2185204B1 (ru) |
| JP (1) | JP5478492B2 (ru) |
| CN (1) | CN101795712A (ru) |
| AU (1) | AU2008297129B2 (ru) |
| CA (1) | CA2699488C (ru) |
| ES (1) | ES2550937T3 (ru) |
| GB (1) | GB0718045D0 (ru) |
| NZ (1) | NZ583160A (ru) |
| RU (1) | RU2455990C2 (ru) |
| WO (1) | WO2009034136A2 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2391358A1 (en) | 2009-01-27 | 2011-12-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Therapeutic treatment of cancer and dysplasia of the cervix or vagina using estrogen antagonists |
| EP2961409A1 (en) * | 2013-02-26 | 2016-01-06 | Senex Biotechnology, Inc. | Inhibitors of cdk8/19 for use in treating estrogen receptor positive breast cancer |
| US20190375732A1 (en) | 2018-05-14 | 2019-12-12 | David Hung | Anti-cancer nuclear hormone receptor-targeting compounds |
| KR20220008869A (ko) | 2019-05-14 | 2022-01-21 | 누베이션 바이오 인크. | 항암 핵 호르몬 수용체-표적화 화합물 |
| TW202131930A (zh) | 2019-11-13 | 2021-09-01 | 美商諾維雪碧歐公司 | 抗癌核荷爾蒙受體標靶化合物 |
| BR112023019420A2 (pt) | 2021-03-23 | 2023-10-24 | Nuvation Bio Inc | Compostos de direcionamento ao receptor de hormônio nuclear anticâncer |
| EP4334314A1 (en) | 2021-05-03 | 2024-03-13 | Nuvation Bio Inc. | Anti-cancer nuclear hormone receptor-targeting compounds |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20040166167A1 (en) * | 2002-12-31 | 2004-08-26 | Industrial Technology Research Institute | Drug delivery system targeting to estrogen receptor over-expressed cells |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE62463B1 (en) * | 1988-07-07 | 1995-02-08 | Res Dev Foundation | Immunoconjugates for cancer diagnosis and therapy |
| US5478804A (en) | 1990-09-19 | 1995-12-26 | The Salk Institute For Biological Studies | Treatment of tumorigenic pathophysiological conditions with FGF-cytoxic conjugates |
| WO1994021813A1 (en) | 1993-03-17 | 1994-09-29 | The Whittier Institute For Diabetes And Endocrinology | Monoclonal antibodies specific for fibroblast growth factor receptors, immunotoxins, and use thereof |
| AU3724495A (en) | 1994-09-13 | 1996-03-29 | Prizm Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates of heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor with targeted agents |
| US20010051348A1 (en) * | 2000-01-28 | 2001-12-13 | Lee Chee Wee | Novel ligands and methods for preparing same |
| JP2006506964A (ja) | 2002-06-12 | 2006-03-02 | リサーチ ディベロップメント ファンデーション | 治療剤としての免疫毒素及びその利用 |
| US7166691B2 (en) * | 2002-12-20 | 2007-01-23 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Saposin C and receptors as targets for treatment of benign and malignant disorders |
| PL1766017T3 (pl) * | 2004-06-10 | 2015-08-31 | Viventia Bio Inc | Przeciwciało specyficzne wobec nowotworu |
| CA2595904A1 (en) * | 2005-02-01 | 2006-08-10 | Research Development Foundation | Blys fusion proteins for targeting blys receptor and methods for treatment of b-cell proliferative disorders |
-
2007
- 2007-09-14 GB GBGB0718045.8A patent/GB0718045D0/en not_active Ceased
-
2008
- 2008-09-11 NZ NZ583160A patent/NZ583160A/xx not_active IP Right Cessation
- 2008-09-11 JP JP2010524488A patent/JP5478492B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-09-11 RU RU2010114755/15A patent/RU2455990C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-09-11 ES ES08804036.5T patent/ES2550937T3/es active Active
- 2008-09-11 AU AU2008297129A patent/AU2008297129B2/en not_active Ceased
- 2008-09-11 EP EP08804036.5A patent/EP2185204B1/en not_active Not-in-force
- 2008-09-11 CA CA2699488A patent/CA2699488C/en active Active
- 2008-09-11 US US12/677,701 patent/US9056140B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-09-11 CN CN200880105602A patent/CN101795712A/zh active Pending
- 2008-09-11 WO PCT/EP2008/062071 patent/WO2009034136A2/en not_active Ceased
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20040166167A1 (en) * | 2002-12-31 | 2004-08-26 | Industrial Technology Research Institute | Drug delivery system targeting to estrogen receptor over-expressed cells |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| NARASIMHA SWAMY et al. An estradiol-porphyrin conjugate selectively localizes into estrogen receptor-positive breast cancer cells. bioorganic&Medicinal Chemistry, 10, p.3237-3243, 2002. R. TECCE et al. Characterization of cytotoxic activity of saporin anti-GP185/HER-2 immunotoxins. Int. J. Cancer, v.55, pp.122-127, 1993. VICTOR G.VOGEL. Effects of tamoxifen and raloxifene on the risk of developing invasive breast cancer and other disease outcomes. American Medical Assotiation, v.295, N23, pp.2727-2741, 2006. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2699488A1 (en) | 2009-03-19 |
| NZ583160A (en) | 2012-09-28 |
| GB0718045D0 (en) | 2007-10-24 |
| EP2185204B1 (en) | 2015-08-05 |
| JP2010539134A (ja) | 2010-12-16 |
| AU2008297129B2 (en) | 2012-10-11 |
| ES2550937T3 (es) | 2015-11-13 |
| CA2699488C (en) | 2013-06-18 |
| HK1143744A1 (en) | 2011-01-14 |
| CN101795712A (zh) | 2010-08-04 |
| WO2009034136A2 (en) | 2009-03-19 |
| RU2010114755A (ru) | 2011-10-20 |
| JP5478492B2 (ja) | 2014-04-23 |
| AU2008297129A1 (en) | 2009-03-19 |
| US20100286062A1 (en) | 2010-11-11 |
| EP2185204A2 (en) | 2010-05-19 |
| US9056140B2 (en) | 2015-06-16 |
| WO2009034136A3 (en) | 2009-09-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2455990C2 (ru) | Фармацевтическое соединение | |
| Aboud-Pirak et al. | Inhibition of human tumor growth in nude mice by a conjugate of doxorubicin with monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor. | |
| US20130259882A1 (en) | Conjugate of Folate and Antibody Preparation Method and Use Thereof | |
| US7271160B2 (en) | Methods and compositions for degradation and/or inhibition of HER-family tyrosine kinases | |
| US11458120B2 (en) | Aptamer-drug conjugate and use thereof | |
| WO2001079302A1 (fr) | Combinaison d'acide folique et de polysaccharide, son procede de preparation et composition pharmaceutique contenant cette combinaison agissant comme principe actif | |
| CA2775266C (en) | Anti-cancer tamoxifen-melatonin hybrid ligand | |
| US12152089B2 (en) | LHRH-platinum conjugates for treating reproductive cancers | |
| DE69730747T2 (de) | CHIMÄRE TOXINE ENTHALTEND GnRH ZUR ZIELGERICHTETEN THERAPIE | |
| AU2002362210B9 (en) | Polypeptide, the conjugate thereof containing doxorubicine and a pharmaceutical composition based thereon | |
| Davol et al. | Targeting human prostatic carcinoma through basic fibroblast growth factor receptors in an animal model: characterizing and circumventing mechanisms of tumor resistance | |
| CN111803489B (zh) | 含笑内酯及其衍生物在垂体腺瘤治疗中的应用 | |
| CN110958998B (zh) | 毛兰素衍生物和使用毛兰素衍生物的方法 | |
| HK1143744B (en) | Conjugate comprising a selective estrogen receptor modulator and a ribosome inactivating toxin | |
| CN108727459B (zh) | 雷公藤红素适配子偶合物及其制备方法和应用 | |
| Ding et al. | Preparation and anti-tumor ability evaluation of anti-PD-L1 conjugated curcumin in colon cancer | |
| CA2342162A1 (en) | Drug targeting | |
| US20240082409A1 (en) | Modified peptide ligands for stable delivery of highly potent payloads to tumors: Method of making and using same | |
| Smirnova et al. | Dependence of antitumor effect of hormonal cytostatic cortifen on expression of glucocorticoid receptors in brain tumor cells | |
| CN101897979A (zh) | 治疗前列腺疾病的靶向药物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160912 |