RU2335540C1 - ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-nef(A)-hum - Google Patents
ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-nef(A)-hum Download PDFInfo
- Publication number
- RU2335540C1 RU2335540C1 RU2006145771/13A RU2006145771A RU2335540C1 RU 2335540 C1 RU2335540 C1 RU 2335540C1 RU 2006145771/13 A RU2006145771/13 A RU 2006145771/13A RU 2006145771 A RU2006145771 A RU 2006145771A RU 2335540 C1 RU2335540 C1 RU 2335540C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nef
- hum
- pbmc
- protein
- expression
- Prior art date
Links
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 title claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 9
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 8
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 101710192141 Protein Nef Proteins 0.000 abstract description 16
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 abstract description 13
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 abstract 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 abstract 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 abstract 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 abstract 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 6
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 5
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 3
- 108700010908 HIV-1 proteins Proteins 0.000 description 3
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 229940113082 thymine Drugs 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 2
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 108700004028 nef Genes Proteins 0.000 description 2
- 101150023385 nef gene Proteins 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 108010048209 Human Immunodeficiency Virus Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010084873 Human Immunodeficiency Virus nef Gene Products Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000003161 proteinsynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 230000007279 water homeostasis Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способам получения вакцинных препаратов с помощью методов генетической инженерии и иммунологии. Предложена плазмидная ДНК рВМС-nef(A)-hum для экспрессии белка Nef вируса иммунодефицита человека субтипа А, содержащая искусственный ген nef(A)-hum, кодирующий полипептид Nef(A)-hum. Изобретение может быть использовано в медицине и смежных отраслях для повышения экспрессии кодируемого геном nef белка Nef или его фрагментов в эукариотических клетках. 3 ил., 1 табл.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к технологии получения вакцинных препаратов с помощью методов генетической инженерии и иммунологии, и может быть использовано в медицине и смежных отраслях для повышения экспрессии белков, в частности белка Nef вируса иммунодефицита человека 1 типа (ВИЧ-1) субтипа А или его фрагментов и синтетических аналогов в эукариотических клетках.
Одной из глобальных проблем, стоящих перед биотехнологией, является повышение выхода веществ, продуцируемых клетками прокариот и эукариот. Для решения указанных задач, как правило, клетки подвергают воздействию различных внешних факторов: повышению температуры выше 42°С, уменьшению количества питательных веществ, например фосфатов или азота, до уровня, лежащего ниже того, который требуется для выживания микроорганизмов, токсическое воздействие - например, использование красителей, кислот или эксудатов растений, метаболическое разрушение клеток в результате изменения уровня содержания ионов, воздействующих на способность микроорганизмов к осморегуляции, или уровня содержания витаминов или кофакторов, которые способны вызвать прекращение метаболизма (RU 2179980, 2002).
Однако, т.к. воздействие вышеперечисленных факторов на выход конкретных продуцентов характеризуется высокой видоспецифичностью, то для каждого конкретного случая необходимо проведение большого объема исследований
Наиболее сложно вопросы стимулирования экспрессии решаются в случае получения вакцин против вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), для изготовления которых необходимо научиться добиваться экспрессии вирусных белков в клетках эукариот без введения вируса, что позволило бы выработать в организме необходимый иммунный ответ. Проблема связана с особенностями последовательностей генов вируса иммунодефицита человека, в частности с использованием в вирусных генах кодонов, не характерных для интенсивно экспрессирующихся генов млекопитающих, в частности человека, а также большая вариабельность вирусной популяции, выраженная в генетической дивергенции.
Одним из подходов к решению этой проблемы является использование геномов ретро-вирусов, аденовирусов, папилломавирусов и паповавирусов в качестве стимуляторов для экспрессии протективных антигенов патогенных вирусов в клетках млекопитающих.
Наиболее детально исследования проводились с использованием вируса осповакцины (ВОВ). В частности, были сконструированы рекомбинантные ВОВ, экспрессирующие отдельно индивидуальные белки ВИЧ-1: gp160, gp120. Tat и обратную транскриптазу (Moss В., and Flexner С.// Ann. Rev. Immunol, 1987, v.5, p.305; Moss В. // Seminars in Virology, 1992, v.3, p.277; Falkner F.G., et al. // Virology, 1988, v.164, p.450; Flexner C., et al. // Virology, 1988, v.166, p.339; Takahashi H, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1988, v.85, p.3105; Walker B.D., et al. // Science, 1988, v.240, p.64; Willey R.L., et al. // J.Virol, 1988, v.62, p.139). Полученные рекомбинантные BOB были использованы для иммунизации лабораторных животных и выявления белков ВИЧ-1, способных вызывать индукцию нейтрализующих вирус антител. Однако с помощью рекомбинантных ВОВ не удалось индуцировать полноценный протективный иммунный ответ против ВИЧ-инфекции. По-видимому, это обусловлено низкой иммуногенностью индивидуальных вирусных белков (RU 2194075, 2002).
Для решения проблемы получения иммунного ответа на белки ВИЧ был создан белок TBI, который включает в свой состав несколько клеточных эпитопов ВИЧ-1. Однако при его использовании не удается получить весь спектр целевых продуктов. Кроме того, степень экспрессии получаемых белков недостаточно высока (RU 2237089, 2005).
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту к заявляемому изобретению является стимулирование экспрессии белка Nef, введением в клетку высших эукариот экспрессионной плазмидной ДНК pBMC-nef(A)m-1, содержащей модифицированный ген nef вируса иммунодефицита человека типа 1 субтипа А (RU 2229518, 2002).
Технической задачей, решаемой авторами, являлось создание экспрессионной плазмидной ДНК для экспрессии синтетического белка Nef(A)-hum, позволяющей повысить его выход и иммуногенность.
Технический результат был получен при использовании экспрессионной плазмидной ДНК pBMC-nef(A)-hum, содержащей модифицированный ген nef вируса иммунодефицита человека типа 1 субтипа А, названный nef(A)m-1, последовательность которого представлена на фиг.1.
В основу изобретения были положены представления о том, что в генах вируса имеются кодоны, в которых преобладает много аденина и тимина и редко встречаются гуанин и цитозин, не характерные для интенсивно экспрессирующихся генов человека. В результате проведенных авторами исследований было установлено, что при замене в гене nef части А и Т - богатых кодонов на синонимические G и С - богатые кодоны удается в 10-15 раз повысить выход белка Nef(A)-hum.
Недостатками указанного изобретения являются: относительно невысокий выход целевого продукта и низкая встречаемость некоторых аминокислот синтезируемого белка Nef(A)-hum в популяции ВИЧ-1, циркулирующей на территории России.
Согласно настоящему изобретению новая плазмидная ДНК pBMC-nef(A)-hum была получена по следующей методике.
Был осуществлен анализ кодонов в составе фрагмента гена nef, кодирующего белок Nef ВИЧ-1 субтипа А. Все кодоны с высоким содержанием аденина и тимина были заменены на синонимичные кодоны со сниженным содержанием аденина и тимина и соответственно более высоким содержанием гуанина и цитозина, при этом в состав гена предпочтительно включали кодоны, характерные для интенсивно экспрессирующихся генов человека. Кроме того, в последовательность гена включили последовательность Козака, инициирующий и два терминирующих трансляцию кодоны. Также были выявлены кодоны, кодирующие некоторые редко встречаемые аминокислоты в иммунологически важных областях белка Nef и заменены на кодоны аминокислот, встречающихся чаще в популяции инфицированных ВИЧ людей на территории России и стран СНГ. Кроме того, из последовательности были удалены кодоны, кодирующие первых две NH2-концевые аминокислоты белка Nef, что делает невозможным его миристелирование, нежелательное при использовании данного белка в качестве иммуногена. В результате с помощью автоматизированного химического синтеза был получен искусственный ген nef(A)-hum, кодирующий синтетический белок Nef(A)-hum, который был вставлен в вектор рВМС с получением экспрессионной плазмиды pBMC-nef(A)-hum.
Сущность изобретения поясняется чертежами, на которых представлены:
на фиг.1 - последовательность нуклеотидов гена nef(A)-hum в сравнении с последовательностью нуклеотидов генапе1(А)m-1 (прототип);
на фиг.2 - последовательность нуклеотидов гена nef(A)-hum в сравнении с последовательностью нуклеотидов природного гена nef(A);
на фиг.3 - последовательность аминокислот белка Nef(A)-hum в сравнении с последовательностью аминокислот белка Nef(A) (прототип).
Нуклеотиды и аминокислоты, одинаковые для представленных генов, отмечены в сравниваемой последовательности точкой (.), отсутствующие в последовательностях - тильдой (~), различающиеся - приведены соответствующей буквой, терминирующие кодоны обозначены (*). Ген nef(A)-hum длиной 627 нуклеотидов отличается от прототипа Nef(A)m-1 по 104 нуклеотидам и по 175 нуклеотидам отличается от природного гена nef(A). Белок Nef(A)-syn длиной 207 аминокислот отличается от прототипа Nef(A) по 9 аминокислотам.
Промышленная применимость заявляемого стимулятора синтеза белка и синтетического белка иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Получение плазмидной ДНК, обеспечивающий экспрессию синтетического белка Nef(A)-hum с использованием искусственного гена nef(A)-hum.
Искусственный ген nef(A)-hum, последовательность которого представлена на фиг.1, получали при помощи химического синтеза перекрывающихся фрагментов с последующим отжигом и лигированием. Собранный ген вставляли известным способом в плазмидный вектор рВМС с получением экспрессионной плазмиды pBMC-nef(A)-hum. Полученной плазмидой pBMC-nef(A)-hum трансформировали клетки Escherichia coli для ее последующей наработки.
Пример 2. Изучение синтеза синтетического белка Nef(A)-hum в эукариотических клетках.
Культуру клеток человека линии 293 трансформировали ДНК рекомбинантной плазмиды pBMC-nef(A)-hum. В качестве контроля параллельную культуру клеток 293 трансформировали равным количеством ДНК плазмиды pBMC-nef(A)m-1. Трансформированные культуры клеток инкубировали в питательной среде в течение 48 часов при температуре +37°С и содержании СО2 в воздухе, равном 5%, лизировали и анализировали белки клеточных лизатов с помощью электрофореза в ПААГ с последующим иммуноблоттингом с сывороткой пациента, инфицированного ВИЧ-1 субтипа А. Интенсивность окраски полос, соответствующих белку Nef, анализировали с помощью компьютизированной видеосистемы. Установлено, что в культуре клеток, трансформированных плазмидной ДНК pBMC-nef(A)-hum, уровень синтеза белка Nef(A)-hum не менее чем 6-8 раз выше, чем синтез белка Nef(A) в клетках, трансформированных контрольной плазмидой pBMC-nef(A)m-1.
Пример 3. Использование плазмидной ДНК pBMC-nef(A)-hum для иммунизации.
Лабораторным мышам линии BALB/c вводили внутримышечно трехкратно по 10 микрограмм плазмидной ДНК pBMC-nef(A)-hum, контрольной группе мышей вводили аналогичную дозу pBMC-nef(A)m-1. Через 6 недель в сыворотках крови животных определяли титры антител к природному белку Nef известным способом. Результаты приведены в таблице.
| Таблица | |
| Титры антител в сыворотках крови мышей, иммунизированных плазмидными ДНК pBMC-RT(A)-hum и pBMC-RT(A)m-1 | |
| Титры антител при введении ДНК плазмиды pBMC-nef(A)-hum | 1:2048 |
| Титры антител при введении ДНК плазмиды pBMC-nef(A)m-1 | 1:512 |
Использование заявляемого стимулятора позволяет в 4-5 раз повысить выход синтетического белка Nef по сравнению с прототипом.
Claims (1)
- Экспрессионная плазмидная ДНК pBMC-nef(A)-hum для экспрессии синтетического белка Nef(A)-hum в клетках эукариот, содержащая экспрессионную плазмидную ДНК, отличающаяся тем, что она содержит искусственный ген nef(A)-hum, имеющий последовательность нуклеотидов, представленную на фиг.1, и кодирующий полипептид, последовательность аминокислот которого представлена на фиг.3.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006145771/13A RU2335540C1 (ru) | 2006-12-25 | 2006-12-25 | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-nef(A)-hum |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006145771/13A RU2335540C1 (ru) | 2006-12-25 | 2006-12-25 | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-nef(A)-hum |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2006145771A RU2006145771A (ru) | 2008-06-27 |
| RU2335540C1 true RU2335540C1 (ru) | 2008-10-10 |
Family
ID=39679755
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006145771/13A RU2335540C1 (ru) | 2006-12-25 | 2006-12-25 | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-nef(A)-hum |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2335540C1 (ru) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2232815C2 (ru) * | 1998-02-27 | 2004-07-20 | Ой Финниш Иммунотекнолоджи Лтд. | Самореплицирующийся рекомбинантный вектор, экспрессирующий регуляторные белки вич, способ его получения, вакцина для иммунизации против вич на основе днк, содержащая указанный вектор, способ лечения или профилактики вич |
-
2006
- 2006-12-25 RU RU2006145771/13A patent/RU2335540C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2232815C2 (ru) * | 1998-02-27 | 2004-07-20 | Ой Финниш Иммунотекнолоджи Лтд. | Самореплицирующийся рекомбинантный вектор, экспрессирующий регуляторные белки вич, способ его получения, вакцина для иммунизации против вич на основе днк, содержащая указанный вектор, способ лечения или профилактики вич |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| AZAD A.A. Novel drugs and vaccines based on the structure and function of HIV pathogenic proteins including Nef. Ann N Y Acad Sci. 2005 Nov; 1056:279-92. TOLSTRUP M, LAURSEN A.L, GERSTOFT J, PEDERSEN F.S, OSTERGAARD L, DUCH M.Cysteine 138 mutation in HIV-1 Nef from patients with delayed disease progression. Sex Health. 2006 Dec; 3(4):281-6. GILBERT P.B. NOVITSKY V, ESSEX M.Covariability of selected amino acid positions for HIV type 1 subtypes С and B. AIDS Res Hum Retroviruses. 2005 Dec; 21(12):1016-30. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2006145771A (ru) | 2008-06-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7993651B2 (en) | Chimeric human immunodeficiency virus (HIV) immunogens comprising GAG P24-P17 fused to multiple cytotoxic T lymphocyte (CTL) epitopes | |
| Sathaliyawala et al. | Assembly of human immunodeficiency virus (HIV) antigens on bacteriophage T4: a novel in vitro approach to construct multicomponent HIV vaccines | |
| Sánchez-Sampedro et al. | The evolution of poxvirus vaccines | |
| RU2280075C2 (ru) | Измененный штамм модифицированного вируса коровьей оспы ankara (mva) | |
| Gherardi et al. | Interleukin-12 (IL-12) enhancement of the cellular immune response against human immunodeficiency virus type 1 env antigen in a DNA prime/vaccinia virus boost vaccine regimen is time and dose dependent: suppressive effects of IL-12 boost are mediated by nitric oxide | |
| CN101563463B (zh) | 修饰的安卡拉（mva）痘苗病毒基因的基因组中保守基因之间的基因间位点 | |
| ES2253675T3 (es) | Proteina de fusion de proteinas reguladoras/accesorias de hiv. | |
| RU98101904A (ru) | Рекомбинантный вирус mva и его использование | |
| UA76731C2 (ru) | Штамм mva-bn модифицированного вируса коровьей оспы ankara, фармацевтическая композиция, вакцина, применение mva-bn для приготовления лекарственного препарата и для приготовления вакцины, способ введения гомологичной и/или гетерологичной последовательности нуклеиновой кислоты в клетки-мишени in vitro, способ получения пептида или белка, способ получения mva-bn, клетки, набор для основной/бустерной иммунизации | |
| Wilmschen et al. | Viral vectors for the induction of broadly neutralizing antibodies against HIV | |
| US8685407B2 (en) | Genetic constructs and compositions comprising RRE and CTE and uses thereof | |
| RU2335540C1 (ru) | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-nef(A)-hum | |
| CN116904489B (zh) | 一种鸭坦布苏病毒核酸疫苗及应用 | |
| Alharbi et al. | Deletion of fifteen open reading frames from modified vaccinia virus Ankara fails to improve immunogenicity | |
| RU2355764C2 (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-RT(А)-hum ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ БЕЛКА ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПТАЗЫ ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА | |
| RU2346044C2 (ru) | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBMC-gp140(A)-hum | |
| RU2345138C2 (ru) | ЭКСПРЕССИОННАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК р-ВМС-gag(A)-hum ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ БЕЛКА р55 ВИЧ-1 В КЛЕТКАХ ЭУКАРИОТ | |
| JP2021508496A (ja) | 一価及び多価サブユニット予防ワクチン製造のために最適化した、酵母クルイベロマイセス・ラクティスベースの宿主／ベクターシステム | |
| CN114560917A (zh) | SARS-CoV-2编码蛋白来源的T细胞表位多肽TFKVSIWNL及其应用 | |
| RU2238977C1 (ru) | Рекомбинантная плазмидная днк рвмс-rt(a)m-1, используемая для экспрессии обратной транскриптазы (rt) вируса иммунодефицита человека в клетках высших эукариот | |
| RU2241752C1 (ru) | Рекомбинантная плазмидная днк pbmc-gag(a)mod для экспрессии белка gag вируса иммунодефицита человека в эукариотических клетках | |
| Kebabçıoğlu et al. | Next Generation Vaccines | |
| Kharisma et al. | A bioinformatics approach to design a novel epitope-based vaccine against Simian Immunodeficiency Virus (Retroviridae: Lentivirus) | |
| McKee et al. | Durable cytotoxic immune responses against gp120 elicited by recombinant SV40 vectors encoding HIV-1 gp120±IL-15 | |
| Liew Oi Leng et al. | Vaccines for contagious diseases |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191226 |