RU2317991C1 - Способ выделения и очистки макролидов - Google Patents
Способ выделения и очистки макролидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2317991C1 RU2317991C1 RU2006124034/04A RU2006124034A RU2317991C1 RU 2317991 C1 RU2317991 C1 RU 2317991C1 RU 2006124034/04 A RU2006124034/04 A RU 2006124034/04A RU 2006124034 A RU2006124034 A RU 2006124034A RU 2317991 C1 RU2317991 C1 RU 2317991C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- macrolide
- silica gel
- water
- elution
- isolation
- Prior art date
Links
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 title claims abstract description 50
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title claims abstract 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims description 8
- 229940041033 macrolides Drugs 0.000 title abstract description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 20
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 16
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 16
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 14
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 claims abstract description 11
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000004332 silver Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 7
- ZDQSOHOQTUFQEM-NURRSENYSA-N ascomycin Chemical compound C/C([C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@]2(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)[C@@H](OC)C[C@@H](C)C/C(C)=C/[C@H](C(C[C@H](O)[C@H]1C)=O)CC)=C\[C@@H]1CC[C@@H](O)[C@H](OC)C1 ZDQSOHOQTUFQEM-NURRSENYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 60
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 7
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 6
- -1 diethyl acetate Chemical compound 0.000 claims description 5
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 3
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 3
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 claims description 3
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N rapamycin Natural products COCC(O)C(=C/C(C)C(=O)CC(OC(=O)C1CCCCN1C(=O)C(=O)C2(O)OC(CC(OC)C(=CC=CC=CC(C)CC(C)C(=O)C)C)CCC2C)C(C)CC3CCC(O)C(C3)OC)C ZAHRKKWIAAJSAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N sirolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1C[C@@H](C)[C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@](O)(O2)[C@H](C)CC[C@H]2C[C@H](OC)/C(C)=C/C=C/C=C/[C@@H](C)C[C@@H](C)C(=O)[C@H](OC)[C@H](O)/C(C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1 QFJCIRLUMZQUOT-HPLJOQBZSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002930 sirolimus Drugs 0.000 claims description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N iso-butyl acetate Natural products CC(C)COC(C)=O GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M isocaproate Chemical compound CC(C)CCC([O-])=O FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid methyl ester Natural products COC(=O)CC(C)C OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDQSOHOQTUFQEM-XCXYXIJFSA-N ascomycin Natural products CC[C@H]1C=C(C)C[C@@H](C)C[C@@H](OC)[C@H]2O[C@@](O)([C@@H](C)C[C@H]2OC)C(=O)C(=O)N3CCCC[C@@H]3C(=O)O[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)CC1=O)C(=C[C@@H]4CC[C@@H](O)[C@H](C4)OC)C ZDQSOHOQTUFQEM-XCXYXIJFSA-N 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004185 countercurrent chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 125000000542 sulfonic acid group Chemical group 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D498/18—Bridged systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области органической химии, в частности к способу очистки макролидов. Описывается способ выделения макролида в очищенной форме, заключающийся в а) обработке неочищенного макролида или макролида-сырца не смешивающимся с водой растворителем, b) необязательном концентрировании смеси, с) обработке газообразным аммиаком для осаждения примесей, d) отделении примесей, е) необязательном концентрировании фазы, содержащей макролид, f) проведении хроматографии на силикагеле, необязательно обращенно-фазовой или с предварительной обработкой серебром, и элюирование макролида, g) получение макролида в существенной степени очищенной форме, h) необязательное повторение стадий f) и g) для получения макролида в существенной степени очищенной форме. Макролид предпочтительно представлен такролимусом, иммуномицином или сиролимусом. Предложенный способ позволяет по упрощенной технологии получить макролиды с высокой степенью чистоты. 7 з.п. ф-лы.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Данное изобретение относится к области органической химии и фармакологии, конкретно к новому способу очистки макролидов.
Уровень техники
Соединение 15,19-эпокси-3Н-пиридо[2,1-с][1,4] оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(4Н,23Н)-тетрон, 5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26а-гексадекагидро-5,19, дигидрокси-3-[(1Е)-2-[(1R,3R,4R)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]-1-метилэтенил]-14,16-диметокси-4,10,12,18-тетраметил-8(2-пропенил)-(3S,4R,5S,8R,9E,12S,14S,15R,16S,18R,19R,26aS), известное также как FK506, а также такролимус, описанный в патенте ЕР №184162 и патенте США №4894366, используют как иммунодепрессант.
Другое соединение, 15,19-эпокси-3Н-пиридо-[2,1-с][1,4] оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(4Н,23Н)-тетрон,8-этил-5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26а-гексадекагидро-5,19,дигидрокси-3-[(1E)-2-[(1R,3R,4R)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]-1-метилэтенил]-14,16-диметокси-4,10,12,18-тетраметил-(3S,4R,5S,8R,9E,12S,14S,15R,16S,18R,19R,26aS)-, известное также как иммуномицин, а кроме того, как FK520, раскрытое в Публикации ЕРО № 0184162, также используют как иммунодепрессант.
Многие другие производные данных соединений, а также структурные аналоги обладают свойствами иммунодепрессантов.
Патент США №5508398 раскрывает способ отделения нейтрального неполипептидного макролида от кислых, основных и неполярных нейтральных примесей, присутствующих в концентрате экстрактов ферментационных бульонов или маточных растворов, содержащих указанный нейтральный макролид, который включает в любом порядке стадию экстракции (а) и необязательно одну или обе стадии (b) и (с), причем (а) включает экстракцию водным основанием, (b) включает экстракцию водной кислотой и (с) включает обработку неароматическим углеводородным растворителем.
Патент США №5616595 раскрывает способ выделения нерастворимых в воде соединений (включая FK506, FK520 и рапамицин) из ферментационного бульона, включающий последовательные стадии концентрирования, солюбилизации и диафильтрации представляющего интерес соединения, все стадии осуществляют через одну замкнутую систему рециркуляции с целью выделения соединения для дальнейшей очистки далее по ходу процесса.
Способ отделения такролимуса от родственных примесей раскрывают в патенте США №6492513. Способ включает обработку ионообменной смолы, содержащей группу сульфоновой кислоты, ионами серебра. Такролимус, содержащий алкенильную боковую цепь, отделяют от его аналогов, содержащих алкильную боковую цепь.
Патент США №6576135 раскрывает способ аналогичного разделения. Такролимус вместе с другими примесями адсорбируют на неионной адсорбционной смоле с последующей элюцией водным растворителем, содержащим ионы серебра.
Ван-Фаном и др. представлен способ отделения такролимуса от иммуномицина с использованием центробежной противоточной хроматографии. (см. статью Wang-Fan W., Kusters E., Lohse О., Mak C., Wang Y., Journal of Chromatography A, 864, (1999), 69-76).
Раскрытие изобретения
Данное изобретение относится к новому способу очистки макролидных соединений, включающему:
a) обработку неочищенного макролида или макролида-сырца не смешивающимся с водой растворителем,
b) концентрирование смеси,
c) обработку газообразным аммиаком для осаждения примесей,
d) отделение примесей,
e) концентрирование фазы, содержащей макролид,
f) проведение хроматографии на силикагеле, необязательно обращенно-фазовой или с предварительной обработкой серебром, и элюирование макролида,
g) получение макролида в существенной степени очищенной форме,
h) необязательное повторение стадий f и g для получения макролида в существенной степени очищенной форме.
Полученный таким образом продукт имеет фармацевтически приемлемое качество.
Осуществление изобретения
Как отмечено ранее, данное изобретение относится к новому способу очистки макролидных соединений.
Новый способ, соответствующий данному изобретению, включает:
a) обработку неочищенного макролида или макролида-сырца не смешивающимся с водой растворителем,
b) концентрирование смеси,
c) обработку газообразным аммиаком для осаждения примесей,
d) отделение примесей,
e) концентрированно фазы, содержащей макролид,
f) проведение хроматографии на силикагеле, необязательно обращенно-фазовой или с предварительной обработкой серебром, и элюирование макролида,
g) получение макролида в существенной степени очищенной форме,
h) необязательное повторение стадий f и g для получения макролида в существенной степени очищенной форме.
Макролид, соответствующий настоящему изобретению, получен посредством ферментации.
Бульон, полученный при ферментации, или водную фазу, содержащую макролид, можно непосредственно экстрагировать не смешивающимся с водой растворителем.
Любой материал сырца в твердой, полутвердой или жидкой форме, полученный из бульона может быть обработан не смешивающимся с водой растворителем для осуществления солюбилизации макролида в не смешивающимся с водой растворителе. Не смешивающийся с водой растворитель, содержащий макролид, можно частично концентрировать. Концентрирование можно осуществить известными способами, например выпариванием растворителя. Выпаривание растворителя может быть проведено нагреванием без или с пониженным давлением. Полученную таким образом смесь можно обработать газообразным аммиаком. Примеси можно отделить известными в основном способами, например фильтрацией, центрифугированием или любым подходящим способом разделения твердого вещества и жидкости. Фаза, содержащая макролид, может быть подвергнута очистке с использованием активированного угля. Фаза, содержащая макролид, может быть сконцентрирована способом, обсуждавшимся ранее. Фаза, содержащая макролид, может быть подвергнута хроматографии на силикагеле. Хроматография на силикагеле может быть обращенно-фазовой. Силикагель можно предварительно обработать серебром. Элюат, полученный при хроматографировании, можно смешать с не смешивающимся с водой растворителем. Не смешивающийся с водой растворитель может быть выбран из группы, включающей углеводороды, гетероциклические соединения, простые или сложные эфиры. Предпочтительно, когда растворитель выбран из углеводородов или простых эфиров. Макролид может быть получен путем кристаллизации или осаждения. Макролид может быть получен из одного или смеси растворителей, выбранных из этилацетата, диэтилацетата, ацетонитрила и гексана.
Следующие примеры дополнительно иллюстрируют изобретение, причем следует иметь в виду, что не предусматривается ограничивать изобретение деталями, описанными в данном контексте.
Примеры
Пример 1
Ферментационный бульон (11 кг), содержащий 1,2 г такролимуса, экстрагируют 11 л этилацетата. Этилацетатный экстракт частично концентрируют до 1,2 л. Концентрат охлаждают до 4°С и через концентрат пропускают аммиак в течение 30 минут. Раствор фильтруют с использованием целита в качестве фильтра с целью отделения осажденных примесей. Фильтрат концентрируют для получения 28 г маслянистого остатка. Остаток наносят на колонку с силикагелем. Колонку промывают тройным объемом колонки 25% этилацетата в гексане и тройным объемом колонки 50% этилацетата в гексане. Продукт элюируют 75% этилацетатом в гексане. Фракции, содержащие продукт, объединяют и концентрируют для получения 2,8 г маслянистого остатка. Остаток растворяют в 100 мл этилацетата. К нему добавляют 3 г активированного угля. Смесь перемешивают в течение 20 минут, а затем фильтруют. Фильтрат концентрируют, получая 2,7 г маслянистого остатка. К остатку добавляют 2,5 мл этилацетата. Неочищенный продукт кристаллизуют при 4°С путем медленного добавления гексана. Неочищенный продукт фильтруют и сушат.
Неочищенный продукт наносят на колонку с силикагелем. Силикагель (230-400 меш) сначала обрабатывают нитратом серебра. Колонку элюируют 75% этилацетатом и 25% гексаном. Фракции, содержащие продукт, объединяют и концентрируют. Продукт кристаллизуют, как указано выше, из этилацетата и гексана. Кристаллы фильтруют и сушат. Хроматографическая чистота превышает 99%.
Пример 2
Ферментационный бульон (29 кг), содержащий 3,1 г такролимуса, экстрагируют 29 л этилацетата. Этилацетатный экстракт частично концентрируют до 2 л. Концентрат охлаждают до 4°С и через концентрат пропускают аммиак в течение 20 минут. Раствор фильтруют с использованием целита в качестве фильтра с целью отделения осажденных примесей. Фильтрат концентрируют для получения 51 г маслянистого остатка. Остаток наносят на колонку с силикагелем. Колонку промывают тройным объемом колонки 25% этилацетата в гексане и тройным объемом колонки 50% этилацетата в гексане. Продукт элюируют 75% этилацетатом в гексане. Фракции, содержащие продукт, объединяют и концентрируют, получая 6 г маслянистого остатка. Остаток растворяют в 200 мл этилацетата. К нему добавляют 6 г активированного угля. Смесь перемешивают в течение 20 минут, а затем фильтруют. Фильтрат концентрируют, получая 5 г маслянистого остатка. К остатку добавляют 5 мл этилацетата. Неочищенный продукт кристаллизуют при 4°С путем медленного добавления гексана. Неочищенный продукт фильтруют и сушат.
3 г неочищенного продукта наносят на колонку для ВЭЖХ (высокоэффективной жидкостной хроматографии) с обращенной фазой (гелевая колонка размером d (диаметр) ~50 мм х Н (высота) - 200 мм). Продукт элюируют системой н-бутанол: ацетонитрил: буфер в соотношении 9,75:12,5:77,75. Буфер содержит 1,36 г/л дигидрофосфата калия, 1 мл/л триэтиламина и 1 мл/л фосфорной кислоты. Фракции, содержащие продукт, объединяют и экстрагируют равным объемом этилацетата. Слой этилацетата сушат безводным сульфатом натрия и концентрируют. Продукт кристаллизуют, как указано выше, из этилацетата и гексана. Кристаллы (1,6 г) отфильтровывают и сушат. Хроматографическая чистота превышает 99%.
Новый способ имеет ряд преимуществ, таких как:
1. Возможность промышленного масштабирования.
2. Получение продукта высокой чистоты.
3. Простота процесса.
4. Уменьшение числа стадий.
5. Экономичность.
Claims (8)
1. Способ выделения и очистки макролида, характеризующийся тем, что неочищенный макролид или макролид-сырец, полученный ферментацией, обрабатывают не смешивающимся с водой растворителем, осуществляют концентрирование полученной смеси, которую обрабатывают газообразным аммиаком для осаждения примесей, отделяют примеси от фазы, содержащей макролид, концентрируют эту фазу, проводят ее хроматографирование на силикагеле, необязательно обращенно-фазовое или с предварительной обработкой силикагеля серебром, элюируют макролид с силикагеля и выделяют существенно очищенный макролид, при необходимости повторяют стадии хроматографирования, элюирования и выделения макролида с существенной степенью очистки.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что макролид выбран из такролимуса, иммуномицина или сиролимуса.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что не смешивающийся с водой растворитель выбран из группы, включающей углеводороды, гетероциклические соединения, простые или сложные эфиры.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что не смешивающийся с водой растворитель выбран из группы, включающей бензол, толуол, гексан, этилацетат, изобутилацетат или бутилацетат.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что очищенный макролид выделяют кристаллизацией или осаждением.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что кристаллизацию осуществляют с использованием растворителей, выбранных из этилацетата, диэтилацетата, ацетонитрила и гексана.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что после первого хроматографирования макролида из содержащей его фазы и элюции с силикагеля проводят концентрирование элюата, смешивание его с не смешивающимся с водой растворителем, выделение макролида в более чистой форме, после чего осуществляют его повторное хроматографирование на силикагеле, предварительно обработанном серебром, и элюирование с последующим выделением целевого продукта с существенной степенью очистки.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что после первого хроматографирования макролида из содержащей его фазы и элюции с силикагеля проводят концентрирование элюата, смешивание его с не смешивающимся с водой растворителем, выделение макролида в более чистой форме, после чего осуществляют его повторное хроматографирование на силикагеле с обращенной фазой и элюирование с последующим выделением целевого продукта с существенной степенью очистки.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006124034/04A RU2317991C1 (ru) | 2003-12-05 | 2003-12-05 | Способ выделения и очистки макролидов |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/IN2003/000383 WO2005054253A1 (en) | 2003-12-05 | 2003-12-05 | Process for the purification of macrolides |
| RU2006124034/04A RU2317991C1 (ru) | 2003-12-05 | 2003-12-05 | Способ выделения и очистки макролидов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2317991C1 true RU2317991C1 (ru) | 2008-02-27 |
Family
ID=34640326
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006124034/04A RU2317991C1 (ru) | 2003-12-05 | 2003-12-05 | Способ выделения и очистки макролидов |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7473366B2 (ru) |
| EP (1) | EP1697383B1 (ru) |
| AU (1) | AU2003286417A1 (ru) |
| CA (1) | CA2548297C (ru) |
| ES (1) | ES2494797T3 (ru) |
| RU (1) | RU2317991C1 (ru) |
| SI (1) | SI1697383T1 (ru) |
| WO (1) | WO2005054253A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2495937C1 (ru) * | 2012-04-02 | 2013-10-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Фарминс"/Pharmins Ltd. (ООО "Фарминс"/Pharmins Ltd.) | Способ получения такролимуса методом микробиологического синтеза |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101031654A (zh) * | 2004-09-10 | 2007-09-05 | 伊瓦克斯制药有限公司 | 结晶他克莫司的分离方法 |
| CA2580127A1 (en) * | 2004-09-10 | 2006-03-23 | Ivax Pharmaceuticals S.R.O. | Process for isolation of crystalline tacrolimus |
| ITMI20042098A1 (it) * | 2004-11-03 | 2005-02-03 | Antibioticos Spa | Processo per la purificazione di tacrolimus |
| WO2007013017A1 (en) * | 2005-07-29 | 2007-02-01 | Ranbaxy Laboratories Limited | A process for purification of macrolides |
| ITMI20051549A1 (it) * | 2005-08-05 | 2007-02-06 | Antibioticos Spa | Purificazione del tacrolimus su supporti dimorigine vegetale |
| KR100910165B1 (ko) | 2008-09-18 | 2009-07-30 | (주) 제노텍 | 은 이온 용액 추출을 이용한 불포화 알킬기를 가진 락톤 화합물 정제방법 |
| US20110318277A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | APT Pharmaceuticals, Inc. University of Maryland, Baltimore | Tacrolimus compositions for aerosol administration |
| WO2014145780A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Biosensors International Group, Ltd. | Purification of rapamycin derivatives |
| CN103554133B (zh) * | 2013-10-31 | 2015-06-24 | 国药集团川抗制药有限公司 | 一种制备高纯度他克莫司的工艺 |
| CN104844620B (zh) * | 2015-04-10 | 2018-06-19 | 鲁南新时代生物技术有限公司 | 一种雷帕霉素的分离纯化方法 |
| CN106008553B (zh) * | 2016-06-24 | 2018-02-13 | 福建省微生物研究所 | 子囊霉素的纯化方法 |
| CN108929335B (zh) * | 2018-08-31 | 2021-07-20 | 福建省微生物研究所 | 一种他克莫司粗晶的制备方法 |
| CN114516884B (zh) * | 2022-01-05 | 2024-03-19 | 福建省微生物研究所 | 一种高纯度他克莫司的提纯方法 |
| KR102645011B1 (ko) | 2023-10-17 | 2024-03-07 | 주식회사 라이프슈티컬 | 고상 추출법을 이용한 타크롤리무스의 정제방법 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5508398A (en) * | 1993-11-05 | 1996-04-16 | American Home Products Corporation | New extractive process for the recovery of naturally occurring macrolides |
| US6492513B1 (en) * | 1999-05-25 | 2002-12-10 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for separating analogous organic compounds |
| US6576135B1 (en) * | 1999-09-08 | 2003-06-10 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for separating lactone-containing high-molecular weight compounds |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4894366A (en) | 1984-12-03 | 1990-01-16 | Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. | Tricyclo compounds, a process for their production and a pharmaceutical composition containing the same |
| JPH0639480B2 (ja) * | 1985-07-16 | 1994-05-25 | 麒麟麦酒株式会社 | 新規マクロライド系抗生物質ｍ１１９ |
| US5616595A (en) * | 1995-06-07 | 1997-04-01 | Abbott Laboratories | Process for recovering water insoluble compounds from a fermentation broth |
| US6423233B1 (en) * | 2000-08-15 | 2002-07-23 | Biogal Gyogyszergyar Rt. | Purification process |
| DE60037687D1 (de) * | 1999-11-30 | 2008-02-14 | Biogal Gyogyszergyar | Verfahren zur Rückgewinnung von Statinverbindungen aus einer Fermentationsbrühe |
| EP1265884A4 (en) * | 2000-03-03 | 2003-05-21 | Plus Chemical S A | PROCESS FOR THE PURIFICATION OF LOVASTATIN AND SIMVASTATIN FOR REDUCING THE CONTENT OF DIMER IMPURITIES |
| CA2475383C (en) * | 2002-02-13 | 2009-12-22 | Biogal Gyogyszergyar Rt. | Method for extracting a macrolide from biomatter |
| WO2005010015A1 (en) * | 2003-07-24 | 2005-02-03 | Teva Gyogyszergyar Reszvenytarsasag | Method of purifying macrolides |
| TW200815458A (en) * | 2006-03-15 | 2008-04-01 | Teva Gyogyszergyar Zartkoruen Mukodo Reszvenytarsasag | Process for purifying Tacrolimus |
-
2003
- 2003-12-05 WO PCT/IN2003/000383 patent/WO2005054253A1/en not_active Ceased
- 2003-12-05 EP EP03777162.3A patent/EP1697383B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-12-05 ES ES03777162.3T patent/ES2494797T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-12-05 SI SI200332368T patent/SI1697383T1/sl unknown
- 2003-12-05 AU AU2003286417A patent/AU2003286417A1/en not_active Abandoned
- 2003-12-05 US US10/596,227 patent/US7473366B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-12-05 CA CA2548297A patent/CA2548297C/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-12-05 RU RU2006124034/04A patent/RU2317991C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5508398A (en) * | 1993-11-05 | 1996-04-16 | American Home Products Corporation | New extractive process for the recovery of naturally occurring macrolides |
| RU2152998C2 (ru) * | 1993-11-05 | 2000-07-20 | Американ Хоум Продактс Корпорейшн | Способ отделения рапамицина от примесей |
| US6492513B1 (en) * | 1999-05-25 | 2002-12-10 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for separating analogous organic compounds |
| US6576135B1 (en) * | 1999-09-08 | 2003-06-10 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for separating lactone-containing high-molecular weight compounds |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2495937C1 (ru) * | 2012-04-02 | 2013-10-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Фарминс"/Pharmins Ltd. (ООО "Фарминс"/Pharmins Ltd.) | Способ получения такролимуса методом микробиологического синтеза |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1697383A1 (en) | 2006-09-06 |
| AU2003286417A1 (en) | 2005-06-24 |
| WO2005054253A1 (en) | 2005-06-16 |
| EP1697383A4 (en) | 2008-01-16 |
| US20070173642A1 (en) | 2007-07-26 |
| EP1697383B1 (en) | 2014-04-23 |
| CA2548297C (en) | 2011-06-14 |
| CA2548297A1 (en) | 2005-06-16 |
| US7473366B2 (en) | 2009-01-06 |
| SI1697383T1 (sl) | 2014-09-30 |
| ES2494797T3 (es) | 2014-09-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2317991C1 (ru) | Способ выделения и очистки макролидов | |
| CA2134844C (en) | New extractive process for the recovery of naturally occurring macrolides | |
| EP1558622B1 (en) | Method of purifying macrolides | |
| JP2010509317A (ja) | 純粋な形態のラパマイシンならびにこの回収方法および精製方法 | |
| WO2005019226A1 (en) | A process for the recovery of substantially pure tricyclic macrolide | |
| JP2008518984A (ja) | タクロリムスの精製方法 | |
| WO2007013017A1 (en) | A process for purification of macrolides | |
| JP5483127B2 (ja) | 銀イオン溶液抽出を利用した不飽和アルキル基を有するラクトン化合物の精製方法 | |
| EP1896488B1 (en) | Process for purifying tacrolimus | |
| US20080161555A1 (en) | Purification of Tacrolimus on Supports of Vegetable Origin | |
| US20050261493A1 (en) | Methods for the isolation and purification of ansamitocins | |
| WO2018202733A1 (en) | Process to convert crude ascomycin into purified pimecrolimus | |
| CN101031653A (zh) | 大环内酯化合物的分离方法 | |
| KR20050085876A (ko) | 밀베마이신류의 정제법 | |
| KR20090124511A (ko) | 고순도 타크로리무스의 회수방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20151206 |