RU2306696C1 - Method for production of cadmium ion tolerant unicotyledonous plants in vitro - Google Patents
Method for production of cadmium ion tolerant unicotyledonous plants in vitro Download PDFInfo
- Publication number
- RU2306696C1 RU2306696C1 RU2006101906/13A RU2006101906A RU2306696C1 RU 2306696 C1 RU2306696 C1 RU 2306696C1 RU 2006101906/13 A RU2006101906/13 A RU 2006101906/13A RU 2006101906 A RU2006101906 A RU 2006101906A RU 2306696 C1 RU2306696 C1 RU 2306696C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cadmium
- concentration
- carried out
- plants
- cultivation
- Prior art date
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
Description
Область примененияApplication area
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к клеточной инженерии, и может быть использовано как в городском хозяйстве, так и для фундаментальных исследований в области общей экологии, физиологии и биотехнологии растений.The invention relates to the field of biotechnology, namely to cellular engineering, and can be used both in the urban sector and for basic research in the field of general ecology, physiology and biotechnology of plants.
Уровень техникиState of the art
Известен способ выделения клеточной линии дурмана, устойчивой к хлориду кадмия, устойчивость к кадмию сохранилась у клеток дурмана после 400 генераций в неселективных условиях (Jackson P.J., Roth E.J., McClure P.R., Naranjo C.M. Selection, isolation and characterization of cadmium-resistant Datura innoria suspension culture // Plant Phys., 1984, v.75, P.914-918).There is a method of isolating a daddy cell line resistant to cadmium chloride, cadmium resistance was preserved in dope cells after 400 generations under non-selective conditions (Jackson PJ, Roth EJ, McClure PR, Naranjo CM Selection, isolation and characterization of cadmium-resistant Datura innoria suspension culture // Plant Phys., 1984, v. 75, P.914-918).
Еще в одном способе был выделен табак, растущий при содержании в среде 100 мМ CdSO4 (Domozlicka E., Opatrny Z. The effect of cadmium on tobacco cell culture and the sebction of potentially Cd-resistant cell lines. // Biol. Plant., 1989, v.31, N 1, P.19-27).In another method, tobacco was isolated growing at a content of 100 mM CdSO 4 in the medium (Domozlicka E., Opatrny Z. The effect of cadmium on tobacco cell culture and the sebction of potentially Cd-resistant cell lines. // Biol. Plant. 1989, v.31, N 1, P.19-27).
В следующем способе отселектированная линия Lycopersicon peruvianum росла при концентрациях CdSO4 1,5 мМ, устойчивость к кадмию сохранялась после 30 генераций в неселективных условиях (Benetzen J.L., Adams T.L. Selection and characterization of cadmium-resistant suspension cultures of the wild tomato Lycopersicon peruvianum // Plant Cell,1984, rep.3, P.258-264).In the following method, the selected Lycopersicon peruvianum line grew at CdSO 4 concentrations of 1.5 mM, cadmium resistance was maintained after 30 generations under non-selective conditions (Benetzen JL, Adams TL Selection and characterization of cadmium-resistant suspension cultures of the wild tomato Lycopersicon peruvianum // Plant Cell, 1984, rep. 3, P.258-264).
Из суспензии клеток культурного томата удалось выделить линию, выдерживающую 5 мМ кадмия (Huang В., Hatch E., Goldsbrough P.B. Selection abd characterization of cadmium tolerant cells in tomato // Plant Physiol, 1987, v.52, P.211-221).From a suspension of cultured tomato cells, a line withstanding 5 mM cadmium was isolated (Huang B., Hatch E., Goldsbrough PB Selection abd characterization of cadmium tolerant cells in tomato // Plant Physiol, 1987, v.52, P.211-221) .
Во всех перечисленных выше способах получить растения из линий, устойчивых к высоким концентрациям кадмия, не удавалось. Вероятно, это было связано с очень длительным культивированием (30-400 генераций).In all of the above methods, it was not possible to obtain plants from lines resistant to high cadmium concentrations. This was probably due to a very long cultivation (30-400 generations).
Самым близким по технической сущности является способ получения устойчивых к кадмию растений льна-долгунца, состоящий из культивирования каллуса на среде Мурасиге-Скуга в течение 14 пассажей, в течение 4 пассажей на среде с кадмием -15 мг/л, затем на среде без кадмия, а с 10 пассажа вновь на среде с кадмием при концентрации - 15 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 15 мг/ л и укоренение на среде Мурасиге-Скуга при концентрации кадмия 15 мг/ л кадмия (Гончарук Е.А. Влияние кадмия на морфогенез, анатомию стебля и процесс регенерации льна-долгунца из клеточных и тканевых культур in vitro, автореферат диссертации на соискании ученой степени к.б.н. // ТСХА, 2000, 23 стр.).The closest in technical essence is the method for producing cadmium-resistant flax plants, consisting of cultivating callus on Murashige-Skoog medium for 14 passages, for 4 passages on a medium with cadmium -15 mg / l, then on a medium without cadmium, and from passage 10 again on a medium with cadmium at a concentration of 15 mg / l, then regeneration is carried out at a cadmium concentration of 15 mg / l and rooting on a Murasige-Skoog medium at a cadmium concentration of 15 mg / l cadmium (Goncharuk E.A. on morphogenesis, anatomy of the stem and the process of regeneration of l flax from cell and tissue cultures in vitro, abstract of dissertation for the degree of Ph.D. // TSHA, 2000, 23 pp.).
Недостатком данного метода являлось длительное культивирование (в течение 14 пассажей) и использование прямой селекции, которая уменьшала регенерационную способность клеток и составляла 10-13% в зависимости от сорта. Данный метод не подходит для городских растений, т.к. в городе часто фиксируются более высокие концентрации кадмия - 20 и 30 мг/л.The disadvantage of this method was a long cultivation (for 14 passages) and the use of direct selection, which reduced the regenerative capacity of cells and amounted to 10-13%, depending on the variety. This method is not suitable for urban plants, as In the city, higher cadmium concentrations are often recorded - 20 and 30 mg / l.
Задачей нашего метода было исключить вышеизложенные недостатки других методов, увеличить процент регенерации и получить устойчивые к кадмию однодольные растения.The objective of our method was to eliminate the above disadvantages of other methods, increase the percentage of regeneration and obtain monocotyledonous plants resistant to cadmium.
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Эта задача решается созданием нового способа толерантных к ионам кадмия однодольных растений in vitro, состоящего из культивирования, регенерации и укоренения на среде Мурасиге-Скуга, причем культивирование каллуса проводят в течение 2 пассажей при концентрации кадмия 5-10 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрацию кадмия 10-30 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 20-30 мг/ л кадмия.This problem is solved by creating a new method of cadmium-tolerant monocotyledonous plants in vitro, consisting of cultivation, regeneration and rooting in Murashige-Skoog medium, and the callus cultivation is carried out for 2 passages at a cadmium concentration of 5-10 mg / l, then regeneration is carried out at the concentration of cadmium is 10-30 mg / l and rooting at a concentration of cadmium of 20-30 mg / l of cadmium.
Сущность изобретенияSUMMARY OF THE INVENTION
По мнению авторов сущность нашего метода заключается в коротком периоде культивирования и использовании ступенчатой селекции, что позволяет сохранить регенерационную способность клеток.According to the authors, the essence of our method consists in a short period of cultivation and the use of stepwise selection, which allows us to maintain the regenerative ability of cells.
В данном методе была использована ступенчатая селекция, которая начиналась с адаптивных концентраций стрессового фактора (5-10 мг/л), и лишь после обогащения популяции резистентными клетками условия селекции ужесточали.In this method, stepwise selection was used, which began with adaptive concentrations of the stress factor (5-10 mg / l), and only after the population of resistant cells was enriched with selection cells, selection conditions were tightened.
Устойчивость растений к тяжелым металлам обеспечивается молекулярными и физиологическими механизмами. Описан ряд соединений, для которых предполагают участие в детоксикации ионов тяжелых металлов. Возможно, существенную роль в формировании устойчивости к кадмию играют фитохелатины, которые образуют с ионами тяжелых металлов тиолатные комплексы.Plant resistance to heavy metals is provided by molecular and physiological mechanisms. A number of compounds have been described for which they suggest the participation of heavy metal ions in detoxification. Possibly, a significant role in the formation of cadmium resistance is played by phytochelatins, which form thiolate complexes with heavy metal ions.
Заявленные пределы определены следующим образом: при концентрации кадмия на стадии культивирования - более 10 мг/л более половины каллусов погибает и прирост составляет только - 28%, концентрация кадмия на стадии культивирования - менее 5 мг/л не является эффективной. При концентрации кадмия на стадии регенерации - более 30 мг/л крайне незначительная регенерационная способность (8%) и укоренение (18%). При концентрации кадмия - 60 мг/л наблюдается полная потеря регенерационной способности клеток. Использование концентраций кадмия менее 10 мг/л на стадии регенерации, менее 20 мг/л на стадии укоренения нецелесообразно для городских растений, так как в мегаполисах фиксируются более высокие концентрации кадмия. Кроме того, содержащиеся в почвах другие тяжелые металлы могут увеличивать токсичность кадмия. Культивирование каллуса полевицы побегоносной (Agrostis stolonifera) и овсяницы красной (Festuca rubra) проводят в течение 2 пассажей, при увеличении количества пассажей наблюдается гибель большинства каллусных клеток. После культивирования в течение 2 пассажей регенерационная способность составляла - 40,5%, при культивировании в течение 3 пассажей эффективность метода снижалась, т.к. регенерационная способность составляла только - 30,0%.The declared limits are defined as follows: when the cadmium concentration at the cultivation stage is more than 10 mg / l, more than half of the calluses die and the increase is only - 28%, the cadmium concentration at the cultivation stage is less than 5 mg / l is not effective. With a cadmium concentration at the regeneration stage of more than 30 mg / l, an extremely insignificant regenerative capacity (8%) and rooting (18%). At a cadmium concentration of 60 mg / l, a complete loss of the regenerative ability of cells is observed. The use of cadmium concentrations of less than 10 mg / l at the regeneration stage, less than 20 mg / l at the rooting stage is impractical for urban plants, since higher concentrations of cadmium are recorded in megacities. In addition, other heavy metals contained in soils can increase the toxicity of cadmium. The cultivation of callus of the moth (Agrostis stolonifera) and red fescue (Festuca rubra) is carried out for 2 passages, with an increase in the number of passages, the death of most callus cells is observed. After cultivation for 2 passages, the regenerative capacity was 40.5%, while culturing for 3 passages, the effectiveness of the method decreased, because regenerative ability was only - 30.0%.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами, результаты по примерам представлены в таблице.The invention is illustrated by the following examples, the results of the examples are presented in the table.
Пример 1.Example 1
Культивирование каллуса полевицы побегоносной (Agrostis stolonifera) проводят в течение 2 пассажей при концентрации кадмия - 5 мг/л. Продолжительность пассажа составляла 1 месяц. При культивировании каллуса сильно проявлялась гетерогенность культивируемых тканей. Интенсивность роста отдельных инокулюмов различалась в полтора-два раза. Часть каллусов погибала при культивировании, а некоторые сохраняли рост на уровне контроля.The cultivation of callus of the moth (Agrostis stolonifera) is carried out for 2 passages at a cadmium concentration of 5 mg / L. The passage duration was 1 month. During the cultivation of callus, heterogeneity of cultured tissues was strongly manifested. The growth rate of individual inoculums differed in one and a half to two times. Some calluses died during cultivation, and some retained growth at the control level.
Регенерацию проводят при концентрации кадмия 10 мг/л. Укоренение проводят при концентрации 20 мг/ л, укоренить удалось только половину растений.Regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 10 mg / L. Rooting is carried out at a concentration of 20 mg / l, only half of the plants were able to root.
Пример 2.Example 2
Культивирование каллуса овсяницы красной (Festuca rubra) проводят в течение 2 пассажей при концентрации кадмия - 5 мг/л. Продолжительность пассажа составляла 1 месяц. При культивировании каллуса, также как у полевицы, сильно проявлялась гетерогенность культивируемых тканей.The cultivation of callus red fescue (Festuca rubra) is carried out for 2 passages at a concentration of cadmium - 5 mg / L. The passage duration was 1 month. During the cultivation of callus, as well as in the barn, the heterogeneity of cultivated tissues was strongly manifested.
Регенерацию проводят при концентрации кадмия 20 мг/л. Укоренение проводят при концентрации 20 мг/л, укоренить удалось только половину растений.Regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 20 mg / L. Rooting is carried out at a concentration of 20 mg / l, only half of the plants were able to root.
Пример 3.Example 3
Проводят аналогично примеру 1, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводят при концентрации кадмия 5 мг/ л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 20 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 30 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 1, with the only difference that the cultivation of callus is carried out at a concentration of cadmium of 5 mg / l, then regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 20 mg / l and rooting at a concentration of cadmium of 30 mg / l of cadmium.
Пример 4.Example 4
Проводят аналогично примеру 2, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводят при концентрации кадмия 5 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 30 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 30 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 2, with the only difference that the cultivation of callus is carried out at a cadmium concentration of 5 mg / l, then regeneration is carried out at a cadmium concentration of 30 mg / l and rooting at a cadmium concentration of 30 mg / l cadmium.
Пример 5.Example 5
Проводят аналогично примеру 2, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводят при концентрации кадмия 7 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 10 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 20 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 2, with the only difference that the cultivation of callus is carried out at a concentration of cadmium of 7 mg / l, then regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 10 mg / l and rooting at a concentration of cadmium of 20 mg / l of cadmium.
Пример 6.Example 6
Проводят аналогично примеру 1, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводят при концентрации кадмия 7 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 20 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 25 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 1, with the only difference that the cultivation of callus is carried out at a concentration of cadmium of 7 mg / l, then regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 20 mg / l and rooting at a concentration of cadmium of 25 mg / l of cadmium.
Пример 7.Example 7
Проводят аналогично примеру 1, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводят при концентрации кадмия 7 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 20 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 30 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 1, with the only difference that the cultivation of callus is carried out at a concentration of cadmium of 7 mg / l, then regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 20 mg / l and rooting at a concentration of cadmium of 30 mg / l of cadmium.
Пример 8.Example 8
Проводят аналогично примеру 1, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводят при концентрации кадмия 7 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 30 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 30 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 1, with the only difference that the cultivation of callus is carried out at a concentration of cadmium of 7 mg / l, then regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 30 mg / l and rooting at a concentration of cadmium of 30 mg / l of cadmium.
Пример 9.Example 9
Проводят аналогично примеру 2, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводят при концентрации кадмия 10 мг/л, затем проводят регенерацию при концентрации кадмия 10 мг/л и укоренение при концентрации кадмия 20 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 2, with the only difference that the cultivation of callus is carried out at a concentration of cadmium of 10 mg / l, then regeneration is carried out at a concentration of cadmium of 10 mg / l and rooting at a concentration of cadmium of 20 mg / l of cadmium.
Пример 10.Example 10
Проводят аналогично примеру 1, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводили при концентрации кадмия - 10 мг/л, затем проводили регенерацию, увеличивая концентрацию кадмия до 20 мг/ л и укоренение на среде Мурасиге-Скуга при концентрации кадмия 25 мг/ л кадмия.Carried out analogously to example 1, with the only difference that the cultivation of callus was carried out at a cadmium concentration of 10 mg / l, then regeneration was carried out, increasing the cadmium concentration to 20 mg / l and rooting on the Murashige-Skoog medium at a cadmium concentration of 25 mg / l cadmium .
Пример 11.Example 11
Проводят аналогично примеру 1, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводили при концентрации кадмия - 10 мг/л, затем проводили регенерацию, увеличивая концентрацию кадмия до 20 мг/л и укоренение на среде Мурасиге-Скуга при концентрации кадмия 30 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 1, with the only difference that callus cultivation was carried out at a cadmium concentration of 10 mg / l, then regeneration was carried out, increasing the cadmium concentration to 20 mg / l and rooting on the Murashige-Skoog medium at a cadmium concentration of 30 mg / l cadmium .
Пример 12.Example 12
Проводят аналогично примеру 1, с той лишь разницей, что культивирование каллуса проводили при концентрации кадмия - 10 мг/л, затем проводили регенерацию, увеличивая концентрацию кадмия до 30 мг/л и укоренение на среде Мурасиге-Скуга при концентрации кадмия 30 мг/л кадмия.Carried out analogously to example 1, with the only difference that callus cultivation was carried out at a cadmium concentration of 10 mg / l, then regeneration was carried out, increasing the cadmium concentration to 30 mg / l and rooting on the Murashige-Skoog medium at a cadmium concentration of 30 mg / l cadmium .
Обсуждение результатовThe discussion of the results
Техническим результатом изобретения является прирост каллусной ткани, составляющий от 50,2% до 70,3%; регенерационная способность от 10,5% до 43,5%;укоренение 33,5-60,5%. Результаты изобретения показывают высокую эффективность данного метода, который позволил получить не только устойчивые клетки, но и высокий процент регенерации растений.The technical result of the invention is the growth of callus tissue, comprising from 50.2% to 70.3%; regenerative ability from 10.5% to 43.5%; rooting 33.5-60.5%. The results of the invention show the high efficiency of this method, which allowed to obtain not only resistant cells, but also a high percentage of plant regeneration.
Всего в селективных условиях было получено 50 регенерантов полевицы. Большинство регенерантов полевицы имели нормальную морфологию и хороший рост и не отличались от обычных растений.In total, under selective conditions, 50 regenerates of the field were obtained. Most of the birch bark regenerants had normal morphology and good growth and did not differ from ordinary plants.
Для проверки устойчивости к высоким концентрациям кадмия регенеранты полевицы были высажены в почву со 50 и 100 мг/кг кадмия. 90% растений, полученных из кадмийустойчивых клеточных линий, росли при концентрации 50 мг/кг соли так же, как растения в почве без токсиканта.To test the resistance to high cadmium concentrations, the bentwood regenerants were planted in the soil with 50 and 100 mg / kg cadmium. 90% of plants obtained from cadmium-resistant cell lines grew at a concentration of 50 mg / kg of salt in the same way as plants in soil without a toxicant.
Из 10 растений, растущих при концентрации соли кадмия 100 мг/ кг почвы, 8 имели рост и декоративные качества на уровне контроля, одно растение значительно отставало в росте и наблюдались обильные пожелтения, одно - погибло. Т.о. 80% росли при концентрации соли кадмия 100 мг/ кг почвы, также как и контрольные.Of the 10 plants growing at a concentration of cadmium salt of 100 mg / kg of soil, 8 had growth and decorative qualities at the control level, one plant significantly lagged in growth and abundant yellowing was observed, one died. T.O. 80% grew at a concentration of cadmium salt of 100 mg / kg of soil, as well as the control.
Таким образом, заявленный способ позволяет получить однодольные растения, устойчивые к высоким концентрациям кадмия.Thus, the claimed method allows to obtain monocotyledonous plants resistant to high concentrations of cadmium.
Кроме того, неожиданным образом было получено, что 80% растений, полученных после селекции с кадмием, росли при концентрации нитрата свинца (0,4%) также хорошо, как и контрольные растения, растущие без токсиканта. При данной концентрации обычные растения не всходят, а у целых растений наблюдается очень значительное замедление роста (40% от контроля), некоторые растения погибают (20%).In addition, it was unexpectedly found that 80% of the plants obtained after selection with cadmium grew at a concentration of lead nitrate (0.4%) as well as control plants growing without a toxicant. At this concentration, ordinary plants do not germinate, and in whole plants there is a very significant growth retardation (40% of the control), some plants die (20%).
Т.о. большинство растений-регенерантов, полученных из устойчивых к кадмию клеточных линий, обладало повышенной толерантностью к кадмию и свинцу. Следовательно, данный метод можно рекомендовать для получения однодольных растений, устойчивых к кадмию и свинцу.T.O. most regenerated plants obtained from cadmium-resistant cell lines had increased tolerance to cadmium and lead. Therefore, this method can be recommended for obtaining monocotyledonous plants resistant to cadmium and lead.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006101906/13A RU2306696C1 (en) | 2006-01-25 | 2006-01-25 | Method for production of cadmium ion tolerant unicotyledonous plants in vitro |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006101906/13A RU2306696C1 (en) | 2006-01-25 | 2006-01-25 | Method for production of cadmium ion tolerant unicotyledonous plants in vitro |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2306696C1 true RU2306696C1 (en) | 2007-09-27 |
Family
ID=38953885
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006101906/13A RU2306696C1 (en) | 2006-01-25 | 2006-01-25 | Method for production of cadmium ion tolerant unicotyledonous plants in vitro |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2306696C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2019960C1 (en) * | 1991-06-04 | 1994-09-30 | Научно-производственное объединение "Элита Поволжья" | Method for production of salt-resistant alfalfa-regenerant plants |
| US6005165A (en) * | 1997-06-13 | 1999-12-21 | Agripro Seeds, Inc. | Salt tolerant alfalfa |
| RU2260936C1 (en) * | 2004-02-12 | 2005-09-27 | Институт Физиологии растений им. К.А. Тимирязева Российской Академии Наук | Method for in vitro preparing lawn grass with tolerance to salinization |
-
2006
- 2006-01-25 RU RU2006101906/13A patent/RU2306696C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2019960C1 (en) * | 1991-06-04 | 1994-09-30 | Научно-производственное объединение "Элита Поволжья" | Method for production of salt-resistant alfalfa-regenerant plants |
| US6005165A (en) * | 1997-06-13 | 1999-12-21 | Agripro Seeds, Inc. | Salt tolerant alfalfa |
| RU2260936C1 (en) * | 2004-02-12 | 2005-09-27 | Институт Физиологии растений им. К.А. Тимирязева Российской Академии Наук | Method for in vitro preparing lawn grass with tolerance to salinization |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Litz et al. | In vitro somatic embryogenesis and plant regeneration from Carica papaya L. ovular callus | |
| Jain et al. | Stimulatory effect of water stress on plant regeneration in aromatic indica rice varieties | |
| Batukaev et al. | Use of growth regulators in grapes grinding by in vitro method | |
| Ahmad et al. | Biotechnological interventions in bamboo plants | |
| Tilkat et al. | Micropropagation of mature male pistachio Pistacia vera L. | |
| Restanto et al. | The application of chitosan for protocorm like bodies (PLB) induction of orchid (Dendrobium sp) in vitro | |
| Lebrun et al. | Selection in vitro for NaCI-tolerance in Vitis rupestris Scheele | |
| Johansson | Increased induction of embryogenesis and regeneration in anther cultures of Solanum tuberosum L. | |
| Nin et al. | Effects of environmental factors on seed germination and seedling establishment in bilberry (Vaccinium myrtillus L.) | |
| Bellarosa et al. | The influence of auxin and cytokinin on proliferation and morphology of somatic embryos of Picea abies (L.) Karst | |
| KR20180008289A (en) | Culturing Method for cultured root of Leguminous plants comprising high-content of coumestrol | |
| RU2306696C1 (en) | Method for production of cadmium ion tolerant unicotyledonous plants in vitro | |
| Fatima et al. | Morphological anomalies in somatic embryo structure in Catharanthus roseus: improving embryo germination by amending plant growth regulators, activated charcoal and sucrose level | |
| CN106688895B (en) | A method of the generation of hybridized Chinese tuliptree body embryo is carried out using salicylic acid | |
| Piagnani et al. | Factors affecting the proliferation and rooting of chestnut in vitro | |
| Decruse et al. | A protocol for shoot multiplication from foliar meristem of Vanda spathulata (L.) Spreng | |
| US6673608B1 (en) | Somatic embryogenic regeneration of Acacia mangium | |
| Marino et al. | In vitro leaf-shoot regeneration and somaclone selection for sodium chloride tolerance in quince and pear | |
| Kishor et al. | Sodium, potassium, sugar alcohol and proline mediated somatic embryogenesis and plant | |
| KR101681062B1 (en) | Optimal medium composition for tissue culture of Chrysanthemum morifolium 'Baekma' and tissue culture method using the same | |
| Sliva et al. | MICROPROPAGATION AND MORPHOGENESIS OF ARRACACHA (ARRACACIA | |
| RU2311021C1 (en) | Method for in-vitro producing of monocotyledon plants tolerant to complex effects of heavy metals | |
| Marino et al. | The effect of the type of closure on the gas composition of the headspace and the growth of GF 677 peach× almond rootstock cell suspension cultures | |
| Bogunia et al. | Effect of carbohydrates on callus induction and regeneration ability in Brassica napus L. | |
| Malabadi et al. | Large scale production and storability of encapsulated somatic embryos of mothbean (Vigna aconitifolia Jacq) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080126 |