RU2304145C1 - Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека - Google Patents
Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2304145C1 RU2304145C1 RU2006108329/04A RU2006108329A RU2304145C1 RU 2304145 C1 RU2304145 C1 RU 2304145C1 RU 2006108329/04 A RU2006108329/04 A RU 2006108329/04A RU 2006108329 A RU2006108329 A RU 2006108329A RU 2304145 C1 RU2304145 C1 RU 2304145C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- glycyrrhizic acid
- trinicotinates
- hiv
- virus
- reproduction
- Prior art date
Links
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 title claims abstract description 90
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 84
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 81
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 81
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 title claims abstract description 81
- VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N Licoricesaponin B2 Natural products C1C(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)CC1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 79
- 239000001685 glycyrrhizic acid Substances 0.000 title claims abstract description 79
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 title claims abstract description 19
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 21
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 abstract 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 abstract 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 27
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 26
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 25
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 24
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 23
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 21
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 20
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 19
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 17
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 16
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 7
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 7
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 7
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 6
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 6
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 238000011225 antiretroviral therapy Methods 0.000 description 4
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 4
- UHZYTMXLRWXGPK-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentachloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)(Cl)Cl UHZYTMXLRWXGPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 4
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 4
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 description 3
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 3
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 3
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000202807 Glycyrrhiza Species 0.000 description 2
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 description 2
- 239000004378 Glycyrrhizin Substances 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000003419 rna directed dna polymerase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N (2S,5R,10R,13R)-16-{[(2R,3S,4R,5R)-3-{[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}-5-(ethylamino)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-5-(4-aminobutyl)-10-carbamoyl-2,13-dimethyl-4,7,12,15-tetraoxo-3,6,11,14-tetraazaheptadecan-1-oic acid Chemical compound NCCCC[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)C(C)O[C@@H]1[C@@H](NCC)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N 0.000 description 1
- GBYYTNDVCDADIY-HCWSKCQFSA-N 1-[(2s,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-iodooxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(I)N1C(=O)NC(=O)C=C1 GBYYTNDVCDADIY-HCWSKCQFSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- MPDGHEJMBKOTSU-UHFFFAOYSA-N Glycyrrhetinsaeure Natural products C12C(=O)C=C3C4CC(C)(C(O)=O)CCC4(C)CCC3(C)C1(C)CCC1C2(C)CCC(O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001453 Glycyrrhiza echinata Nutrition 0.000 description 1
- 244000303040 Glycyrrhiza glabra Species 0.000 description 1
- 235000017382 Glycyrrhiza lepidota Nutrition 0.000 description 1
- 108010078851 HIV Reverse Transcriptase Proteins 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 101900297506 Human immunodeficiency virus type 1 group M subtype B Reverse transcriptase/ribonuclease H Proteins 0.000 description 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241001115401 Marburgvirus Species 0.000 description 1
- 206010053961 Mitochondrial toxicity Diseases 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 1
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001139 anti-pruritic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000003908 antipruritic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 229960003720 enoxolone Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000004030 hiv protease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 229940010454 licorice Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 231100000296 mitochondrial toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 102000004217 thyroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000721 thyroid hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биологически активным веществам, производным глицирризиновой кислоты, именно: ди- и/или триникотинатам глицирризиновой кислоты общей формулы:
где R - это 
или Н, причем два и/или три из названных R - это
Description
Изобретение относится к биологически активным веществам, производным глицирризиновой кислоты, и может использоваться в медицине, вирусологии, фармакологии, например в качестве ингибитора репродукции вируса иммунодефицита человека.
Известно, что глицирризиновая кислота - основной ингредиент экстракта корней солодки голой (Glycyrrhiza glabra) и солодки уральской (Gl. Uralensis), обладает высокой биологической активностью и является высокоэффективным средством в лечении различных заболеваний. Так, она применяется при лечении вирусных гепатитов, входит в перечень препаратов (который насчитывает около 50 наименований), подавляющих репродукцию вируса иммунодефицита человека in vitro. Названная кислота оказывает противовирусное, противовоспалительное, противозудное и иммуномодулирующее действие, действует на разные типы ДНК и РНК вирусов in vitro и in vivo (Varicella zoster; Herpes simplex 1 и 2 типа; различные типы вируса папилломы человека, в т.ч. онкогенные), прерывает репликацию вирусов на ранних стадиях, вызывает выход вириона из капсида, тем самым не допуская его проникновение в клетки, что связано с селективным дозозависимым ингибированием фосфорилирующей киназы Р. Глицирризиновая кислота взаимодействует со структурами вируса (возможно, с белками), изменяя различные фазы вирусного цикла, что сопровождается необратимой инактивацией вирусных частиц, находящихся в свободном состоянии вне клеток, блокирует внедрение активных вирусных частиц внутрь клетки, нарушает способность вируса к индукции синтеза новых вирусных частиц, индуцирует образование интерферона, что является одним из компонентов противовирусного действия, инактивирует указанные вирусы в нетоксичных для нормально функционирующих клеток концентрациях. Мутантные штаммы вирусов, резистентные к ацикловиру и йодоуридину, также высокочувствительны к глицирризиновой кислоте, как и немутантные штаммы. Противовоспалительная активность глицирризиновой кислоты сочетается со стимулирующим влиянием на гуморальные и клеточные факторы иммунитета.
Производные глицерризиновой кислоты так же, как и сама кислота, обладают высокой биологической активностью. В частности, моноаммониевая соль глицирризиновой кислоты (глицирам Г) или пента-o-никотинат глицирризиновой кислоты, 3-(b-D-2,3,4-три-о-никотинилглюкуронпиранозил)1 2(a-D-3,4-ди-О-никотинилглюкуронпиранозил глицирретовой кислоты (ниглизин, НГ) используются для ингибирования репродукции вируса Марбург [Патент РФ №2088232]. Например, гликопептид глицирризиновой кислоты обладает анти-СПИД-активностью [Патент РФ №2024546]. Известны и другие производные глицирризиновой кислоты, проявляющие полезные для лечения различных заболеваний свойства, что указывает на высокую перспективность этих веществ для использования в медицине, фармакологии и биологии. По этой причине получение новых производных глицирризиновой кислоты является актуальной задачей.
В рамках решения этой задачи получено новое вещество, являющееся производным глицирризиновой кислоты, а именно ди- и/или триникотинаты глицирризиновой кислоты общей формулы:
где R - это 
или Н, причем два и/или три из названных R - это .
Синтез ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты осуществляют в соответствии со следующий схемой:
Для реализации этой схемы никотиновую кислоту растворяют в органическом апротонном растворителе при нагревании реакционной смеси с образованием суспензии, в которую добавляют также при нагревании пятихлористый фосфор, затем суспензию охлаждают. В охлажденную суспензию добавляют глицирризиновую кислоту и затем ее снова нагревают. После окончания протекания реакции и охлаждения полученной реакционной смеси в нее добавляют лед и концентрированную соляную кислоту до слабокислой реакции. Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты выпадают в виде осадка, представляющего собой их смесь. При необходимости диникотинаты могут быть отделены от триникотинатов и таким образом выделены раздельно.
На практике синтез ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты может быть осуществлен, например, в соответствии с приведенными ниже примерами 1-3.
Исследования токсичности ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты показали, что они не токсичны и могут применяться в медицине, фармакологии и биологии - оценка цитотоксичности этих соединений приведена в примерах 4-6 (таблица 1).
Исследования биологической активности ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты, проведенные в отношении вируса иммунодифицита человека, показали их высокую эффективность как ингибитора репродукции этого вируса, при том, что проблема лечения ВИЧ-инфекции остается одной из самых актуальных проблем современной медицины.
Для лечения ВИЧ-инфекции на протяжении почти 15 лет в клинической практике широко использовался препарат азидотимидин (АЗТ), являющийся эффективным ингибитором вирусной обратной транскриптазы [Машковский М.Д. «Лекарственные средства». Т.2. Изд. 14-е, М: ООО «Новая волна» - 2000]. Однако в последние годы применение этого препарата снижается в связи с быстро развивающейся в организме ВИЧ-инфицированных пациентов резистентностью к нему вируса [Larder В.A, Kemp S.D. «Multiple mutations in HIV-1 reverse transcriptase confer high-level resistance to zidovudine (AZT)». Science, 1989 - V.246, p.1155-1158], а также его высокой токсичностью, в том числе митохондриальной [Chiu D.T. & Duesberg P.H. «The toxicity of azidothymidine (AZT) on human and animal cells in culture at concentrations used for antiviral therapy». Genetica, 1995 - V.95, p.103-109 и Brinkman К., ter Hofstede J.M, Burger D.M. «Adverse effects of reverse transcriptase inhibitors: mitochondrial toxicity as common pathway». AIDS, 1998 - V.12, p.1735-1744]. Кроме того, монотерапия азидотимидином не рекомендована Всемирной Организацией Здравоохранения, поскольку приводит к появлению устойчивых к препарату мутантов вируса. В настоящее время азидотимидин применяют в основном в качестве составляющего компонента в так называемых «коктейлях» в сочетании с 2-4 другими препаратами, воздействующими на другие мишени цикла репродукции вируса [Schmit J.-C., Weber В. «Recent advances in antiretroviral therapy and HIV infection monitoring». Intervirology, 1997, V.40, №5/6, р.304-321 и Кравченко А.В. «Комбинированная антиретровирусная терапия ВИЧ-инфекции». Эпидемиология и инфекционные болезни, 2001, №1, с.59-62], как правило, ингибиторами протеазы ВИЧ, или ненуклеозидными ингибиторами обратной транскриптазы ВИЧ. Несмотря на эффективность некоторых таких «коктейлей», актуальным остается поиск новых сочетаний и комбинаций азидотимидина с препаратами другой природы и иного механизма действия, достаточно эффективными и дешевыми.
Одним из таких доступных и дешевых препаратов является глицирризиновая кислота, механизм действия которой до конца не ясен, так, некоторые авторы связывают его с ингибированием протеинкиназы, обеспечивающей фосфорилирование Т4 рецептора, необходимого для связывания вируса [Ito M., Sato A., Hirabayashi К., Tanabe P., Shigeta S., Baba M., De Clercq E., Nakashima H., Yamamoto N. «Mechanism of inhibitory effect of glycyrrhizin on replication of human immunodeficiency virus (HIV)». Antiviral Res, 1988, V.10, p.289-298], а другие - с непосредственным блокированием связывания вируса с клеткой [Fields A.P., Bednarik P.P., Hess A., May W.S. «Human immunodeficiency virus induces phosphorylation of its cell surface receptor». Nature (London), 1988, V.333, p.278-280]. Однако очевидно, что она, в отличие от азидотимидина, ингибирует репродукцию вируса на ранних стадиях инфекции [Плясунова О.А., Егоричева И.Н., Федюк Н.В. и др. «Изучение анти-ВИЧ активности β-глицирризиновой кислоты». Вопросы вирусологии, 1992, №5-6, с.235-238].
Исследования противовирусной активности целого ряда производных глицирризиновой кислоты продемонстрировали эффективность их анти-ВИЧ действия в культуре клеток [Покровский А.Г., Плясунова О.А., Ильичева Т.Н., Борисова О.А., Федюк Н.В., Петренко Н.И., Петухова В.З., Шульц Э.Э., Толстиков Г.А. «Синтез производных растительных тритерпенов и исследование их противовирусной и иммуностимулирующей активности». Химия в интересах устойчивого развития, 2001, №9, с.485-491. Патент РФ №2199547, и Патент РФ №2198177]. Например, моноаммониевая соль глицирризиновой кислоты (глицирам) не является антагонистом по отношению к азидотимидину и в сочетании с ним эффективно блокирует репродукцию ВИЧ в культуре клеток как при острой, так и при хронической инфекции при соотношении АЗТ : глицирам, равном 1:10000 [Плясунова О.А., Егоричева И.Н., Федюк Н.В. и др. «Изучение анти-ВИЧ активности β-глицирризиновой кислоты». Вопросы вирусологии, 1992, №5-6, с.235-238].
Наиболее близким аналогом предлагаемого изобретения является пента-никотинат глицирризиновой кислоты, показавший самую высокую анти-ВИЧ активность по сравнению с другими производными названной кислоты [Плясунова О.А., Егоричева И.Н., Федюк Н.В. и др. «Изучение анти-ВИЧ активности β-глицирризиновой кислоты». Вопросы вирусологии, 1992, №5-6, с.235-238]. Однако имеется потребность в ингибиторах, анти-ВИЧ активность которых превышает активность прототипа.
Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является создание ингибиторов репродукции вируса иммунодефицита человека, имеющих высокую активность.
Поставленная задача решается тем, что предлагается ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека, включающий ди- и/или триникатинаты глицирризиновой кислоты.
Общая формула ди- и/или триникатинатов глицирризиновой кислоты приведена выше.
Как уже упоминалось, названные ди- и триникатинаты глицирризиновой кислоты находятся в смеси, которую получают при их синтезе, но они могут быть выделены и отдельно.
В результате исследований выявлено, что ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты активно влияют на репродукцию ВИЧ, что подтверждается приведенными ниже примерами 7-12 (таблица 2). Активность их существенно выше, чем у других производных глицирризиновой кислоты, включая прототип.
Исследование ингибирования репродукции ВИЧ включает культивирование первично инфицированных лимфоидных клеток линии МТ-4 в присутствии названных соединений, конечные концентрации которых в культуральной среде составляют 0,0001-100 мкг/мл, на протяжении одного пассажа - в течение 4 суток. Об ингибировании репродукции ВИЧ в культуре чувствительных клеток судят по снижению накопления вирусспецифического белка р24 (по данным иммуноферментного анализа), а также по увеличению жизнеспособности клеток в присутствии препарата по сравнению с контролем, определяемому на 4-е сутки культивирования [Schmit J.-C., Weber В. «Recent advances in antiretroviral therapy and HIV infection monitoring». Intervirology, 1997, V.40, №5/6, р.304-321 и Кравченко А.В. «Комбинированная антиретровирусная терапия ВИЧ-инфекции». Эпидемиология и инфекционные болезни, 2001, №1, с.59-62] при окрашивании 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT).
Исследования противовирусной активности ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты в отношении АЗТ-резистентного мутанта ВИЧ-1, полученного в культуре клеток и характеризующегося снижением чувствительности к АЗТ в 160 раз и наличием точечных мутаций в гене pol Asp67→Asn; Lys70→Arg; Leu214→Phe, ответственных за резистентность [Покровский А.Г., Плясунова О.А., Киселева Я.Ю., Гашникова Н.М., Федюк Н.В. «Сравнительное исследование возникновения резистентности ВИЧ-1 к АЗТ и Н-фосфонату АЗТ в культуре клеток». ДАН, 2002, Т.384, №2, с.259-252] приведены в примерах 13-14 (таблица 3).
Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты показали большую эффективность в отношении АЗТ-резистентного мутанта (ID50=0,134 мкМ), чем «дикого» штамма (ID50=0,7 мкМ). Эффективность анти-ВИЧ действия ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты как в отношении «дикого» штамма, так и АЗТ-резистентного мутанта свидетельствует о перспективности использования подобных композиций для лечения ВИЧ-инфекции.
Пример 1
Синтез ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты
Двугорлую колбу емкостью 5 л, снабженную эффективной механической мешалкой, помещают в баню с глицерином с термометром. В колбу наливают 3.5 л органического апротонного растворителя (ДМФА, N-метил-пирролидон, этилендиамин), предпочтительно пиридина, засыпают 500 г никотиновой кислоты и при перемешивании нагревают реакционную смесь до 40-45°С (здесь и далее указана температура бани), затем, не прекращая перемешивания, добавляют к образовавшейся суспензии 265.5 г пятихлористого фосфора. По окончании добавления смесь нагревают до 60±3°С и перемешивают при этой температуре в течение 2 ч (примерно через 30-40 мин светлый цвет реакционной смеси становится темно-коричневым).
Далее колбу с реакционной смесью помещают в ледяную баню и перемешивают реакционную смесь в течение ~20 мин до ее остывания и добавляют при перемешивании 150 г глицирризиновой кислоты. После этого колбу с реакционной смесью помещают в баню с глицерином и нагревают до 55±5°С, не прекращая перемешивания, и выдерживают при этой температуре в течение 2 ч 50 мин. При нагревании значительная часть осадка растворяется.
По окончании реакции убирают баню и дают остыть колбе до ~30-40°С, затем полученную суспензию разливают поровну в 2 стакана емкостью 5 л и добавляют в каждый стакан по ~1.5 л измельченного льда, приготовленного из дистиллированной воды, для перенесения оставшегося на стенках колбы осадка используют дистиллированную воду. Содержимое стаканов перемешивают и добавляют в них концентрированную соляную кислоту (~1.3 л в каждый стакан) до достижения слабой кислотности (рН~6), при этом наблюдается выпадение дополнительного количества осадка. Оставляют стаканы на несколько часов для полного выпадения осадка. Выпавший в обоих стаканах коричневый осадок отфильтровывают. Объединенные с обоих стаканов осадки промывают дистиллированной водой (4×1 л) и тщательно высушивают на фильтре. В процессе сушки осадка образуются крупные конгломераты, которые измельчают для повышения эффективности осушки. Вес высушенного светло-коричневого осадка составляет ~300 г.
Смешивают 2 л хлороформа и 0.4 л метанола (хлороформ: метанол = 5:1) и растворяют в этой смеси полученный ранее осадок. Растворение протекает достаточно медленно и требует выдержки в течение 1-2 ч при интенсивном перемешивании. Полученный раствор отфильтровывают, оставшийся осадок промывают 100 мл смеси хлороформа с метанолом в соотношении 5:1 (дважды по 50 мл), осадок (~10-15 г) удаляют. К фильтрату добавляют 2.3 л диэтилового эфира, при этом наблюдается интенсивное выпадение осадка. Полученную смесь перемешивают и оставляют на 1 ч для полного формирования осадка. Выпавший осадок отфильтровывают. Осадок промывают 150 мл диэтилового эфира (трижды по 50 мл), высушивают на фильтре. Вес осадка ~165 г. К полученному осадку добавляют 150 мл этилового спирта, перемешивают, отфильтровывают, высушивают на фильтре.
Вес высушенного светло-коричневого осадка составляет ~150 г (выход ~60%). Полученная субстанция представляет собой смесь ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты в соотношении 20:80, соответственно.
Аналитический контроль качества получаемого продукта осуществляют с помощью элементного анализа, ВЭЖХ и ВЭЖХ-хроматомасс-спектрометрии.
Пример 2
Синтез ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты
Двугорлую колбу емкостью 5 л, снабженную эффективной механической мешалкой, помещают в баню с глицерином с термометром. В колбу наливают 3.5 л органического апротонного растворителя (ДМФА, N-метил-пирролидон, этилендиамин), предпочтительно пиридина, засыпают 500 г никотиновой кислоты и при перемешивании нагревают полученную реакционную смесь до 40-45°С (здесь и далее указана температура бани), затем, не прекращая перемешивания, добавляют к образовавшейся суспензии 265.5 г пятихлористого фосфора. После этого смесь нагревают до 50±3°С и перемешивают при этой температуре в течение 1.5 ч (примерно через 40-50 мин цвет реакционной смеси из светлого становится темно-коричневым).
Убирают баню, а колбу с реакционной смесью помещают в ледяную баню, перемешивают реакционную смесь в течение ~20 мин до остывания и добавляют при перемешивании 120 г глицирризиновой кислоты. Убирают охлаждающую баню, а колбу с реакционной смесью помещают в баню с глицерином и нагревают до 50±5°С, не прекращая перемешивания, и выдерживают при этой температуре в течение 2 ч. При нагревании значительная часть осадка растворяется.
Дальнейшую обработку реакционной смеси проводят так же, как в примере 1. Вес высушенного светло-коричневого осадка составляет ~160 г (выход ~65%). Полученная субстанция представляет собой смесь ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты в соотношениии 50:50, соответственно.
Аналитический контроль качества получаемого продукта осуществляют с помощью элементного анализа, ВЭЖХ и ВЭЖХ-хроматомасс-спектрометрии.
Пример 3
Синтез ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты
Двугорлую колбу емкостью 5 л, снабженную эффективной механической мешалкой, помещают в баню с глицерином с термометром. В колбу наливают 3.5 л органического апротонного растворителя (ДМФА, N-метил-пирролидон, этилендиамин), предпочтительно пиридина, засыпают 400 г никотиновой кислоты и при перемешивании нагревают реакционную смесь до 40-45°С (здесь и далее указана температура бани), затем, не прекращая перемешивания, добавляют к образовавшейся суспензии 205 г пятихлористого фосфора. После этого смесь нагревают до 40±3°С и перемешивают при этой температуре в течение 2.5 ч (примерно через 50-55 мин цвет реакционной смеси из светлого становится темно-коричневым).
Убирают баню, а колбу с реакционной смесью помещают в ледяную баню, и перемешивают реакционную смесь в течение ~ 20 мин до остывания и добавляют при перемешивании 100 г глицирризиновой кислоты. Убирают охлаждающую баню, а колбу с реакционной смесью помещают в баню с глицерином и нагревают до 40±5°С, не прекращая перемешивания, и выдерживают при этой температуре в течение 3 ч 50 мин. При нагревании часть осадка растворяется.
Дальнейшую обработку реакционной смеси проводят так же, как в примере 1. Вес высушенного светло-коричневого осадка составляет ~120 г (выход ~45%). Полученная субстанция представляет собой смесь ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты в соотношениии 70:30 соответственно.
Аналитический контроль качества получаемого продукта осуществляют с помощью элементного анализа, ВЭЖХ и ВЭЖХ-хроматомасс-спектрометрии.
Пример 4
Оценка цитотоксичности ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты
Цитотоксичность ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 20/80 оценивают путем добавления его разведении в бессывороточной среде RPMI-1640 к клеточной суспензии МТ-4, помещенной в лунки 96-луночного планшета ("Cel-Cult", England), до конечных концентраций 0,001-100 мкг/мл (по три лунки на каждую дозу) с последующим культивированием при 37°С в течение 4 суток [Ito M., Sato A., Hirabayashi К., Tanabe F., Shigeta S., Baba M., De Clercq E., Nakashima H., Yamamoto N. «Mechanism of inhibitory effect of glycyrrhizin on replication of human immunodeficiency virus (HIV)». Antiviral Res., 1988, V.10, p.289-298]. Посевная концентрация составляет 0,5×106 клеточных частиц в миллилитре. Контролем служат клетки без добавления препарата, вместо которого вносят такое же количество бессывороточной среды. Жизнеспособность клеток подсчитывают на 4 сутки культивирования, пользуясь формазановым методом (прижизненным окрашиванием клеток 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). Токсичность различных доз препарата определяют по жизнеспособности клеток относительно контрольных, а по полученным результатам строят дозозависимую кривую и определяют концентрацию, на 50% снижающую жизнеспособность клеток (CD50).
Показатель токсичности исследуемого препарата CD50 - 2600 мкг/мл.
Пример 5
Оценка цитотоксичности ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты
То же, что в примере 4, но оценку проводят ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты в соотношении 50/50.
Показатель токсичности исследуемого препарата CD50 - 2100 мкг/мл.
Пример 6
Оценка цитотоксичности ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты
То же, что в примере 4, но оценку проводят ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты в соотношении 80/20.
Показатель токсичности исследуемого препарата CD50 - 1500 мкг/мл.
Таким образом, ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты не оказывают токсического воздействия на клетки МТ-4 в эффективных концентрациях: 50% токсичные дозы на 5-6 порядков превышают эффективные в отношении ВИЧ-1 дозы.
Пример 7
Определение влияния ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты на репродукцию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4
Исследование противовирусной активности соединений в отношении ВИЧ-1 проводят на перевиваемой линии чувствительных клеток МТ-4. Для заражения используют супернатант инфицированных клеток, хранящийся в жидком азоте, множественность заражения составляет 0,2-0,5 инфекционных единиц на клетку.
Суспензию клеток МТ-4 с концентрацией 2,0×106 клеточных частиц в миллилитре и жизнеспособностью не менее 90% помещают в лунки 96-луночного планшета ("Orange") непосредственно после внесения вируссодержащего материала и добавляют ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 20/80, разведенные в среде RPMI-1640 без сыворотки, до конечных концентраций 0,0001-100 мкг/мл (по три лунки на каждую дозу). Контролями служат инфицированные ВИЧ-1 клетки МТ-4 без добавления препарата (вместо препарата вносят такое же количество среды RPMI-1640 без добавок) и неинфицированные клетки.
Планшет инкубируют в течение часа при 37°С для адсорбции вируса, затем клетки разводят до посевной концентрации (0,5×106 в миллилитре) питательной средой RPMI-1640 с добавлением 10% фетальной сыворотки КРС, предварительно инактивированной прогреванием при 56°С в течение 30 минут, 300 мг/мл L-глютамина и 100 мкг/мл гентамицина. Затем планшет помещают в термостат на 37°С в атмосфере 5% CO2. На 4-е сутки культивирования подсчитывают концентрацию и жизнеспособность клеток формазановым методом. По полученным данным строят графики зависимости прироста жизнеспособности клеток относительно контроля под действием возрастающих доз препаратов, т.е. определяют способность препаратов защищать инфицированные клетки от цитопатогенного действия вируса.
Оценку анти-ВИЧ активности соединений проводят с использованием количественного определения вирусспецифического белка р24 методом прямого иммуноферментного анализа, как описано в работе Fields A.P., Bednarik P.P., Hess A., May W.S. «Human immunodeficiency virus induces phosphorylation of its cell surface receptor». Nature (London), 1988, V.333, p.278-280, и строят дозозависимые кривые, по которым рассчитывают концентрации, на 50 и 90% подавляющие прирост вирусного антигена (ID50 и ID90). Терапевтический индекс, или индекс селективности (IS) считают как отношение 50%-ной токсической концентрации соединения к его 50%-ной эффективной дозе.
Полученные результаты: CD50 - 2600 мкМ, ID50 - 1.2 мкМ, IS - 2166/.7
Пример 8
Определение влияния ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты на репродукцию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4
То же, что в примере 7, но в лунки 96-луночного планшета («Orange») непосредственно после внесения вируссодержащего материала добавляют ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 50/50.
Полученные результаты: CD50 - 2100 мкМ, ID50 - 2.2 мкМ, IS - 954.54.
Пример 9
Определение влияния ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты на репродукцию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4
То же, что в примере 7, но в лунки 96-луночного планшета («Orange») непосредственно после внесения вируссодержащего материала добавляют ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 80/20.
Полученные результаты: CD50 - 1500 мкМ, ID50 - 4.1 мкМ, IS - 365.9.
Пример 10
Определение влияния глицирризиновой кислоты на репродукцию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4
То же, что в примере 7, но в лунки 96-луночного планшета («Orange») непосредственно после внесения вируссодержащего материала добавляют глицирризиновую кислоту.
Полученные результаты: CD50 - 2040 мкМ, ID50 - 212.5 мкМ, IS - 9.6.
Пример 11
Определение влияния моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты на репродукцию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4
То же, что в примере 7, но в лунки 96-луночного планшета («Orange») непосредственно после внесения вируссодержащего материала добавляют моноаммонийную соль глицирризиновой кислоты.
Полученные результаты: CD50 - 2065 мкМ, ID50 - 46.3 мкМ, IS - 44.6.
Пример 12
Определение влияния пента-никотината глицирризиновой кислоты на репродукцию ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4
То же, что в примере 7, но в лунки 96-луночного планшета («Orange») непосредственно после внесения вируссодержащего материала добавляют пента-никотинат глицирризиновой кислоты.
Полученные результаты: CD50 - 863 мкМ, ID50 - 15.1 мкМ, IS - 57.0.
Таким образом, полученные количественные показатели ингибирования подтверждают высокую степень подавления репликации ВИЧ-1 в культуре клеток МТ-4 ди- и триникотинатами глицирризиновой кислоты, превышающую, например, тот же показатель у прототипа - пента-никотината глицирризиновой кислоты в 5-15 раз.
Из приведенных примеров видно, что ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты, не оказывая токсического действия на клетки в эффективных концентрациях (50%-е токсические дозы на 5-6 порядков превышают 50%-е ингибирующие дозы), помимо способности защищать клетки от гибели в результате цитопатогенного действия вируса (>50% в дозах 0,1-1,5 мкг/мл), в высокой степени подавляют репродукцию вируса иммунодефицита 1-го типа в культуре клеток МТ-4. Терапевтические индексы ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты (IS) в 10-100 раз больше, чем для других производных глицирризиновой кислоты.
Пример 13
Определение влияния ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты на репродукцию мутанта ВИЧ-1, устойчивого к действию АЗТ в культуре клеток МТ-4.
То же, что в примере 7, но вместо суспензии клеток МТ-4 используют суспензию клеток мутанта ВИЧ-1, устойчивого к действию АЗТ в культуре клеток МТ-4.
Полученные результаты: Для АЗТ-резистентного мутанта ID50 - 0,15 мкг/мл, а для исходного штамм вируса ID50 - 1.2 мкг/мл.
Пример 14
Определение влияния пента-никотината глицирризиновой кислоты на репродукцию мутанта ВИЧ-1, устойчивого к действию АЗТ в культуре клеток МТ-4
То же, что в примере 12, но вместо суспензии клеток МТ-4 используют суспензию клеток мутанта ВИЧ-1, устойчивого к действию АЗТ в культуре клеток МТ-4.
Полученные результаты: Для АЗТ-резистентного мутанта ID50 - 0,11 мкг/мл, а для исходного штамм вируса ID50 - 15.1 мкг/мл.
Таким образом, новые химические соединения - ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты имеют высокую биологическую активность, которая проявляется по меньшей мере в том, что они являются высокоактивными ингибиторами репродукции вируса иммунодефицита человека и могут использоваться в чистом виде или в качестве основы новых высокоэффективных лекарственных форм для лечения СПИДа.
| Таблица 1. | |||||
| Цитотоксичность ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты | |||||
| № примера | Препарат | CD50, мкг/мл | |||
| 4 | ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 20/80 | 2600,0 | |||
| 5 | ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 50/50 | 2100,0 | |||
| 6 | ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 80/20 | 1500,0 | |||
| Таблица 2. | |||||
| Анти-ВИЧ активность ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты | |||||
| № примера | Соединение | CD50, мкМ | ID50, МКМ | IS | |
| 7 | ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 20/80 | 2600 | 1,2 | 2166,7 | |
| 8 | ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 50/50 | 2100 | 2,2 | 954,54 | |
| 9 | ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 80/20 | 1500 | 4,1 | 365,9 | |
| 10 | Глицирризиновая кислота | 2040 | 212,5 | 9,6 | |
| 11 | Моноаммонийная соль глицирризиновой кислоты | 2065 | 46,3 | 44,6 | |
| 12 | Пента-никотинат глицирризиновой кислоты | 863 | 15,1 | 57,0 | |
| Таблица 3. | |||
| Количественные характеристики ингибирования АЗТ-резистентного мутанта ВИЧ-1 ди- и триникотинатами глицирризиновой кислоты | |||
| Препарат | ID50, мкг/мл | ||
| АЗТ-резистентный мутант | Исходный штамм вируса | ||
| АЗТ | 1,12 | 0,007 | |
| 13 | ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты в соотношении 20/80 | 0,15 | 1,2 |
| 14 | пента-никотинат глицирризиновой кислоты | 0,11 | 15,1 |
Claims (2)
1. Ди- и/или триникотинаты глицирризиновой кислоты общей формулы
где R - 
или Н, причем два и/или три из названных R - .
2. Ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека, включающий соединение глицирризиновой кислоты, отличающийся тем, что названое соединение является ди- и/или триникотинатом глицирризиновой кислоты.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006108329/04A RU2304145C1 (ru) | 2006-03-17 | 2006-03-17 | Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006108329/04A RU2304145C1 (ru) | 2006-03-17 | 2006-03-17 | Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2304145C1 true RU2304145C1 (ru) | 2007-08-10 |
Family
ID=38510831
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006108329/04A RU2304145C1 (ru) | 2006-03-17 | 2006-03-17 | Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2304145C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008140345A1 (fr) * | 2007-05-16 | 2008-11-20 | Zakritoe Aktsionernoe Obschestvo 'sibpharmakon' | Di- et/ou trinicotinates d'acide glycyrrhizique et inhibiteur de propagation du virus de l'immunodéficience humaine |
| RU2376312C1 (ru) * | 2008-06-09 | 2009-12-20 | Закрытое акционерное общество "Сибфармакон" | Соли ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека на их основе |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2088232C1 (ru) * | 1995-02-14 | 1997-08-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Ингибитор репродукции вируса марбург |
| RU2254861C1 (ru) * | 2003-12-01 | 2005-06-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Индуктор гамма-интерферона |
-
2006
- 2006-03-17 RU RU2006108329/04A patent/RU2304145C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2088232C1 (ru) * | 1995-02-14 | 1997-08-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Ингибитор репродукции вируса марбург |
| RU2254861C1 (ru) * | 2003-12-01 | 2005-06-27 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Индуктор гамма-интерферона |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008140345A1 (fr) * | 2007-05-16 | 2008-11-20 | Zakritoe Aktsionernoe Obschestvo 'sibpharmakon' | Di- et/ou trinicotinates d'acide glycyrrhizique et inhibiteur de propagation du virus de l'immunodéficience humaine |
| RU2376312C1 (ru) * | 2008-06-09 | 2009-12-20 | Закрытое акционерное общество "Сибфармакон" | Соли ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека на их основе |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69412251T2 (de) | Aromatische nitro verbindungen und deren metabolite verwendbar als anti-virus-und anti-tumormittel | |
| CN103232490B (zh) | 具有抑制hiv-1/hbv病毒复制活性的核苷类化合物、制备方法及抗病毒方面的应用 | |
| EP3278795B1 (en) | Uses of hydroxybenzophenone in preparation of antiviral and antitumor drugs | |
| CN101121698B (zh) | 二芳基嘧啶类衍生物及其制备方法和用途 | |
| CN102286047A (zh) | 2’-脱氧-2’-氟-4’-三氮唑取代-β-D胞苷类似物、其制备方法及其应用 | |
| RU2211843C1 (ru) | N'-{n-[3-оксо-20(29)-лупен-28-оил]-9-аминононаноил}-3-амино-3-фенилпропио новая кислота, обладающая иммуностимулирующей и противовирусной активностью | |
| RU2174982C2 (ru) | 3,28-ди-о-никотинат бетулина, проявляющий гепатопротекторную и анти-вич активность | |
| RU2304145C1 (ru) | Ди- и триникотинаты глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека | |
| CN109369623A (zh) | 一种取代1,2,3三氮唑类二芳基嘧啶衍生物及其制备方法与应用 | |
| KR102783770B1 (ko) | 디시클로플라틴을 함유하는 복합 산물, 이의 제조 및 용도 | |
| EP2851368B1 (en) | Complex compounds of germanium, methods for producing same, and drugs | |
| RU2376312C1 (ru) | Соли ди- и триникотинатов глицирризиновой кислоты и ингибитор репродукции вируса иммунодефицита человека на их основе | |
| TWI754260B (zh) | 魚針草內酯抗新型冠狀病毒之用途 | |
| WO2008140345A1 (fr) | Di- et/ou trinicotinates d'acide glycyrrhizique et inhibiteur de propagation du virus de l'immunodéficience humaine | |
| RU2199547C2 (ru) | Амид глицирризиновой кислоты с 5-аминоурацилом, проявляющий анти-вич активность | |
| Behbahani | Anti-viral activity of the methanolic leaf extract of an Iranian medicinal plant “Hyssopus officinalis” against herpes simplex virus | |
| WO1998043982A1 (en) | Tetracyclical derivatives from pyrimidine | |
| RU2366419C2 (ru) | 4-нитро-6-трифторметил-1,2,3-бензотритиол-1-оксид в качестве ингибитора репродукции вируса иммунодефицита человека | |
| US7999099B2 (en) | Modified 5′-phosphonate azidothymidine—potential anti-viral preparations | |
| DE69323998T2 (de) | Pharmazeutisch aktive flavilium verbindungen | |
| JP2988937B2 (ja) | 海洋源由来の新規の抗腫瘍性及び抗ウイルス性組成物 | |
| Kondratenko et al. | Synthesis of new hetero-and carbocyclic aromatic amides of glycyrrhizic acid as potential anti-HIV agents | |
| RU2831765C2 (ru) | Применение N'-бензилиденгидразида 3β-О-ацетил-11-оксо-18βН-олеан-12-ен-30-овой кислоты в качестве средства, ингибирующего вирус Зика | |
| RU2315058C1 (ru) | Гликопептид глицирризиновой кислоты с глицил-l-фенилаланином, проявляющий анти-вич-1 активность | |
| EP1367044B1 (en) | Calixarene-derivatives having anti-viral activity |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080318 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Effective date: 20100603 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110318 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20130327 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160318 |