RU2378651C2 - Method of determining anti-mycotic activity - Google Patents
Method of determining anti-mycotic activity Download PDFInfo
- Publication number
- RU2378651C2 RU2378651C2 RU2008104968/15A RU2008104968A RU2378651C2 RU 2378651 C2 RU2378651 C2 RU 2378651C2 RU 2008104968/15 A RU2008104968/15 A RU 2008104968/15A RU 2008104968 A RU2008104968 A RU 2008104968A RU 2378651 C2 RU2378651 C2 RU 2378651C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- suspension
- optical density
- substances
- mycotic activity
- incubation
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Способ относится к медицине и может быть использован в лабораторной практике для выявления антимикотической активности веществ в биологических жидкостях в процессе терапии грибковых заболеваний.The method relates to medicine and can be used in laboratory practice to detect the antimycotic activity of substances in biological fluids during the treatment of fungal diseases.
Известны способы определения концентрации антифунгальных препаратов с использованием методов высокоэффективной жидкостной хроматографии (К.В.Alton. Determination of the antifungal agent, ketoconazole, in human plasma by high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, Volume 221, Issue 2, 12 December 1980, Pages 337-344; К. К. Hosotsubo, H. Hosotsubo, М.К.Nishijima, et al. Rapid determination of serum levels of a new antifungal agent, fluconazole, by high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, Volume 529, 1990, Pages 223-228).Known methods for determining the concentration of antifungal drugs using methods of high performance liquid chromatography (K. B. Alton. Determination of the antifungal agent, ketoconazole, in human plasma by high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, Volume 221, Issue 2, 12 December 1980, Pages 337-344; K.K. Hosotsubo, H. Hosotsubo, M.K. Nishijima, et al. Rapid determination of serum levels of a new antifungal agent, fluconazole, by high-performance liquid chromatography Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, Volume 529, 1990, Pages 223-228).
Однако для реализации данных методов требуется специальное дорогостоящее оборудование, приобретение которого для решения частных исследовательских задач нецелесообразно.However, the implementation of these methods requires special expensive equipment, the acquisition of which is not practical for solving private research problems.
Биологические методы определения являются более доступными.Biological determination methods are more accessible.
Известен способ определения антимикробных свойств веществ методом диффузии в уплотненную агар-агаром питательную среду. Этот способ имеет ограниченную область применения для выявления антимикотического действия веществ, содержащихся в биологических жидкостях, из-за особых требований, предъявляемых к тестовым грибковым культурам. Так как при использовании обычных лабораторных штаммов дрожжевых грибов (например, Candida albicans) затруднена количественная регистрация получаемых результатов, в данном методе исследователи используют особый специально выведенный мутантный штамм Candida albicans, обладающий повышенной чувствительностью к антимикотикам группы азолов (Marchetti О., Majcherczyk P.A., Glauser M.P., Bille J., Moreillon P., Sanglard D. (2001). Sensitive Bioassay for Determination of Fluconazole Concentrations in Plasma Using a Candida albicans Mutant Hypersusceptible to Azoles. Antimicrob. Agents Chemother. 45: 696-700). Однако редкость, нестойкость таких штаммов, а также их узкая специфичность по отношению к группам антимикотиков существенно снижают практическую значимость данного метода.There is a method of determining the antimicrobial properties of substances by diffusion into a nutrient medium compacted with agar-agar. This method has a limited scope for detecting the antimycotic effect of substances contained in biological fluids, due to the special requirements for test fungal cultures. Since using standard laboratory yeast fungal strains (e.g., Candida albicans) makes it difficult to quantify the results obtained, in this method, researchers use a special, specially derived mutant strain of Candida albicans, which is highly sensitive to antimycotics of the azole group (Marchetti O., Majcherczyk PA, Glauser MP, Bille J., Moreillon P., Sanglard D. (2001). Sensitive Bioassay for Determination of Fluconazole Concentrations in Plasma Using a Candida albicans Mutant Hypersusceptible to Azoles. Antimicrob. Agents Chemother. 45: 696-700). However, the rarity and instability of such strains, as well as their narrow specificity with respect to antimycotic groups, significantly reduce the practical significance of this method.
Наиболее близким к заявляемому является способ определения минимальных ингибирующих концентраций для ферментирующих видов дрожжей методом разведения в жидкой питательной среде (Определение минимальных ингибирующих концентраций (MIC) для ферментирующих видов дрожжей методом разведения в жидкой среде. - Ж. «Проблемы медицинской микологии», СПбМАПО, 2001, т.3, №4, с.20-28).Closest to the claimed is a method for determining the minimum inhibitory concentrations for fermenting yeast species by dilution in a liquid nutrient medium (Determination of minimum inhibitory concentrations (MIC) for fermenting yeast species by dilution in a liquid medium. - J. "Problems of Medical Mycology", St. Petersburg Medical Academy of Pedagogical Sciences, 2001 , t.3, No. 4, p.20-28).
Способ предназначен для оценки действия различных концентраций антимикотических (антифунгальных) агентов на дрожжи. Способ основан на явлении торможения прироста биомассы дрожжевых клеток в жидкой питательной среде в присутствии веществ, обладающих антимикотическим (антифунгальным) действием.The method is intended to evaluate the effect of various concentrations of antimycotic (antifungal) agents on yeast. The method is based on the phenomenon of inhibition of the growth of the biomass of yeast cells in a liquid nutrient medium in the presence of substances with antimycotic (antifungal) action.
Метод включает в себя приготовление суспензии с концентрацией (0,5-2,5)·105 КОЭ/мл дрожжевых клеток в жидкой питательной среде (глюкозный агар Сабуро или пептонно-глюкозный агар), содержащей различные концентрации антимикотиков (испытуемые пробы) и не содержащей таковые (контрольная проба), инокуляцию дрожжевых клеток в питательную среду, инкубацию проб в течение 24 часов в термостате при температуре 37°С, учет результатов путем измерения оптической плотности при длине волны 530 нм и сравнения показателей контрольной и испытуемой пробы.The method involves the preparation of a suspension with a concentration of (0.5-2.5) · 10 5 CFU / ml of yeast cells in a liquid nutrient medium (Saburo glucose agar or peptone-glucose agar) containing various concentrations of antimycotics (test samples) and not containing those (control sample), inoculation of yeast cells in a nutrient medium, incubation of samples for 24 hours in an thermostat at a temperature of 37 ° C, taking into account the results by measuring the optical density at a wavelength of 530 nm and comparing the performance of the control and test samples.
Однако данный способ неприемлем при изучении активности антимикотических агентов, присутствующих в крови в процессе терапии грибковых заболеваний. Эффективное действие антимикотика обеспечивается дозой препарата, накопленной в очаге поражения, в крови же концентрация антимикотически активных веществ довольно низка, и те количества препарата, которые позволяет регистрировать обсуждаемый метод, будут содержаться только в большом объеме крови, сопоставимом со всем объемом используемой жидкой питательной среды. Однако только замена жидкой питательной среды сывороткой крови вызывает затруднения в учете результатов исследования путем измерения оптической плотности.However, this method is unacceptable when studying the activity of antimycotic agents present in the blood during the treatment of fungal diseases. The effective effect of the antimycotic is ensured by the dose of the drug accumulated in the lesion, in the blood the concentration of antimycotically active substances is quite low, and the quantities of the drug that allows the registration of the discussed method will be contained only in a large volume of blood, comparable to the entire volume of the used liquid nutrient medium. However, only replacing the liquid nutrient medium with blood serum causes difficulties in accounting for the results of the study by measuring the optical density.
К факторам негативного влияния относятся:The negative impact factors include:
- высокая оптическая плотность сыворотки крови и низкая концентрация грибковой взвеси, приводящие к снижению аналитической чувствительности метода (способности выявлять наименьшие различия между двумя концентрациями исследуемого вещества);- high optical density of blood serum and low concentration of fungal suspension, leading to a decrease in the analytical sensitivity of the method (the ability to detect the smallest differences between the two concentrations of the test substance);
- наиболее доступный и часто используемый в лабораторной практике тест-микроб Candida albicans при инкубации в сыворотке крови при 37,0°С формирует ростовые трубки, что приводит к неоднородности взвешенных частиц и, как следствие, значительному разбросу результатов и низкой воспроизводимости метода;- the most affordable and often used in laboratory practice test microbe Candida albicans forms growth tubes during incubation in blood serum at 37.0 ° C, which leads to heterogeneity of suspended particles and, as a result, a significant spread in the results and low reproducibility of the method;
- при инкубации в питательной среде дрожжевые клетки, размножаясь, образуют клубки мицелия и псевдомицелия, размер которых, зависящий от присутствия в среде антимикотически активных продуктов, влияет на результаты производимого измерения, так как взвешенные частицы различной величины по-разному рассеивают свет, что существенно затрудняет проведение оценки накопления биомассы гриба и сравнительные исследования.- when incubated in a nutrient medium, the yeast cells, multiplying, form tangles of mycelium and pseudomycelia, the size of which, depending on the presence of antimycotically active products in the medium, affects the results of the measurement, since suspended particles of different sizes scatter light differently, which significantly complicates assessment of the accumulation of biomass of the fungus and comparative studies.
Задачей изобретения является разработка методики определения антимикотической активности веществ в крови в процессе терапии грибковых заболеваний.The objective of the invention is to develop a methodology for determining the antimycotic activity of substances in the blood during the treatment of fungal diseases.
Технический результат достигается тем, что в способе определения антимикотической активности веществ, включающем приготовление суспензии дрожжевых клеток в жидкой среде, инкубацию и измерение оптической плотности, суспензию готовят в сыворотке крови с концентрацией дрожжевых клеток (3-5)·105 КОЭ/мл, а инкубацию проводят при комнатной температуре. Затем клетки отмывают и восстанавливают первоначальный объем суспензии дистиллированной водой. Полученную суспензию измельчают до однородного состояния, а измерение оптической плотности проводят при длине волн 340 нм. Разницу в показателях оптической плотности между испытуемой и контрольной пробами принимают за величину антимикотической активности.The technical result is achieved by the fact that in the method for determining the antimycotic activity of substances, including the preparation of a suspension of yeast cells in a liquid medium, incubation and measurement of optical density, the suspension is prepared in blood serum with a concentration of yeast cells (3-5) · 10 5 CFU / ml, and incubation is carried out at room temperature. Then the cells are washed and the initial volume of the suspension is restored with distilled water. The resulting suspension is crushed to a homogeneous state, and the measurement of optical density is carried out at a wavelength of 340 nm. The difference in optical density between the test and control samples is taken as the value of antimycotic activity.
Сущность изобретения заключается в изменении концентрации суспензии, условий инкубации и измерения оптической плотности и введении дополнительных приемов.The invention consists in changing the concentration of the suspension, the conditions of incubation and measuring the optical density and the introduction of additional techniques.
Увеличение концентрации суспензии дрожжевых клеток до величин (3-5)·106 КОЭ/мл (вместо используемых в прототипе (0,5-2,5)·106 КОЭ/мл) повышает аналитическую чувствительность метода.The increase in the concentration of suspension of yeast cells to values (3-5) · 10 6 CFU / ml (instead of used in the prototype (0.5-2.5) · 10 6 CFU / ml) increases the analytical sensitivity of the method.
Проведение инкубации дрожжевых клеток в сыворотке крови при комнатной температуре приводит к повышению однородности суспензии за счет снижения образования грибковыми клетками ростовых трубок, клубков мицелия и псевдомицелия.Carrying out incubation of yeast cells in blood serum at room temperature leads to an increase in the uniformity of the suspension by reducing the formation of growth tubes, mycelial tangles and pseudomycelia by the fungal cells.
Введение этапа замены жидкой фазы суспензии (в сыворотки крови на дистиллированную воду) (т.е. отмывание клеток дистиллированной водой и восстановление первоначального объема суспензии дистиллированной водой) снижает плотность жидкой фазы измеряемой суспензии и повышает аналитическую чувствительность метода, а измельчение полученной суспензии до однородного состояния позволяет уменьшить размер взвешенных частиц, что повышает оптическую плотность суспензии и обеспечивает повышение чувствительности и воспроизводимости метода.The introduction of the stage of replacing the liquid phase of the suspension (in blood serum with distilled water) (i.e., washing the cells with distilled water and restoring the original volume of the suspension with distilled water) reduces the density of the liquid phase of the measured suspension and increases the analytical sensitivity of the method, and grinding the resulting suspension to a uniform state allows to reduce the size of suspended particles, which increases the optical density of the suspension and provides increased sensitivity and reproducibility of the method.
Выбор для измерения самой короткой длины волны - 340 нм обусловлен ее оптимальностью при проведении турбидиметрических измерений.The choice for measuring the shortest wavelength - 340 nm is due to its optimality in turbidimetric measurements.
Из анализа научно-технической и патентной литературы заявляемой совокупности признаков, приводящей к возможности определения антимикотической активности веществ в сыворотке крови, авторами не выявлено, что позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого решения критериям «новизна» и «изобретательский уровень».From the analysis of scientific, technical and patent literature of the claimed combination of features, leading to the possibility of determining the antimycotic activity of substances in blood serum, the authors have not identified, which allows us to conclude that the proposed solutions meet the criteria of "novelty" and "inventive step".
Изобретение осуществляется следующим образом.The invention is as follows.
Первоначально готовят суспензию 1-2-суточной культуры Candida albicans путем смыва с агара Сабуро 2-суточной культуры Candida albicans в физиологический раствор и доведения до концентрации 3-5·106 КОЭ/мл и растворы антибиотиков - пенициллина и стрептомицина на стерильной дистиллированной воде, из расчета: пенициллин 100000 ЕД/мл, стрептомицина сульфат 0,1 г/мл. Затем к 1 мл сыворотки крови добавляют по 3 мкл раствора каждого антибиотика и 100 мкл суспензии 2-суточной культуры Candida albicans.Initially, a suspension of a 1-2-day-old Candida albicans culture is prepared by washing off a 2-day-old Candida albicans culture from Saburo agar with saline and adjusting to a concentration of 3-5 · 10 6 CFU / ml and antibiotic solutions of penicillin and streptomycin in sterile distilled water, from the calculation: penicillin 100000 U / ml, streptomycin sulfate 0.1 g / ml. Then, 3 μl of a solution of each antibiotic and 100 μl of a suspension of a 2-day-old Candida albicans culture are added to 1 ml of blood serum.
После чего полученную смесь инкубируют при комнатной температуре в течение 24 часов. После инкубации отмывают клетки дистиллированной водой 3 раза по 15-20 мин при 3000 об/мин. После отмывания восстанавливают первоначальный объем суспензии (1 мл) дистиллированной водой.Then the resulting mixture was incubated at room temperature for 24 hours. After incubation, the cells are washed with distilled water 3 times for 15-20 minutes at 3000 rpm. After washing, the initial volume of the suspension (1 ml) is restored with distilled water.
Полученную суспензию измельчают (например, путем проведения трехкратного цикла: замораживание жидким азотом (или в морозильной камере) и растирание пестиком) до однородного состояния, после чего измеряют ее оптическую плотность на фотометре при длине волны 340 нм.The resulting suspension is crushed (for example, by conducting a three-cycle: freezing with liquid nitrogen (or in the freezer) and rubbing with a pestle) until smooth, after which its optical density is measured on a photometer at a wavelength of 340 nm.
Показатели испытуемой пробы (содержащей антимикотически активные вещества) сравнивают с показателями контрольной пробы (до приема антимикотического препарата), и за величину антимикотической активности сыворотки принимают разницу в их оптической плотности.The performance of the test sample (containing antimycotically active substances) is compared with the performance of the control sample (before taking the antimycotic drug), and the difference in their optical density is taken as the value of the antimycotic activity of the serum.
Данный способ применен при исследовании содержания антимикотически активных веществ в крови в процессе терапии грибковых заболеваний (вульвовагинальный кандидоз (ВВК), онихомикоз) у 21 пациента. Терапия проводилась препаратами итраконазола, флуконазола, тербинафина. В трех случаях (14,3%) профиль изменения антимикотической активности крови не соответствовал описанным в литературе фармакокинетическим кривым концентраций применяемых препаратов, заключающимся в непрерывном увеличении содержания препарата с пиками максимальной концентрации после приема очередной дозы для итраконазола и тербинафина и сохранении постоянной терапевтической концентрации препарата до приема следующей дозы для флуконазола. Анализ отдаленных результатов лечения выявил раннее возникновение рецидива заболевания у данных пациентов.This method is used to study the content of antimycotically active substances in the blood during the treatment of fungal diseases (vulvovaginal candidiasis (VVC), onychomycosis) in 21 patients. Therapy was carried out with itraconazole, fluconazole, terbinafine. In three cases (14.3%), the profile of changes in the antimycotic activity of the blood did not correspond to the pharmacokinetic concentration curves of the drugs used described in the literature, which consisted in a continuous increase in the drug content with maximum concentration peaks after taking the next dose for itraconazole and terbinafine and maintaining a constant therapeutic concentration of the drug taking the next dose for fluconazole. An analysis of the long-term results of treatment revealed an early occurrence of relapse in these patients.
Примеры конкретного выполнения способа.Examples of specific performance of the method.
Пример 1. Пациентка К., 26 лет: длительность заболевания вульвовагинальным кандидозом (ВВК) - 3 года, клинические признаки кандидоза не исчезали после лечения, наступало лишь временное улучшение, часто случались обострения на фоне умеренной клинической картины. Ранее пациентка лечилась нистатином, итраконазолом малыми дозами с временным эффектом. Ей был прописан 7-дневный курс итраконазола. Антимикотическая активность сыворотки после приема первой дозы равнялась 0,163 у.е., а по завершении 7-дневного курса наблюдали существенное ее нарастание - до 0,268 у.е. При контрольном обследовании Candida не была обнаружена, клинические проявления отсутствовали.Example 1. Patient K., 26 years old: the duration of the disease with vulvovaginal candidiasis (VVC) was 3 years, the clinical signs of candidiasis did not disappear after treatment, only a temporary improvement came, and exacerbations often occurred against the background of a moderate clinical picture. Previously, the patient was treated with nystatin, itraconazole in small doses with a temporary effect. She was prescribed a 7-day course of itraconazole. The antimycotic activity of serum after taking the first dose was 0.163 cu, and at the end of the 7-day course, its significant increase was observed - up to 0.268 cu During the follow-up examination, Candida was not detected, clinical manifestations were absent.
Пример 2. Пациентка Г., 28 лет: длительность заболевания ВВК 11 лет, с постоянными клиническими признаками кандидоза, усиливающимися перед mensis. Предыдущая терапия включала клотримазол, орунгал №2 ч/з 6 мес., солкотриховак. Пациентке был назначен итраконазол в дозе 200 мг 1 раз в день в течение 7 дней. Значение антимикотической активности сыворотки после приема первой дозы составило 0,151 у.е., а при завершении курса наблюдали некоторое снижение показателя - 0,139 у.е. При проведении контроля терапии через 3 месяца у пациентки наблюдали рецидив кандидоза с умеренной клинической картиной.Example 2. Patient G., 28 years: the duration of the IHC disease is 11 years, with constant clinical signs of candidiasis, aggravating before mensis. Previous therapy included clotrimazole, Orungal No. 2, c / o for 6 months, solkotrikhovak. The patient was prescribed itraconazole at a dose of 200 mg once a day for 7 days. The value of the antimycotic activity of serum after taking the first dose was 0.151.e., and at the end of the course, a slight decrease in the indicator was observed - 0.139.e. When monitoring therapy after 3 months, the patient experienced a relapse of candidiasis with a moderate clinical picture.
Пример 3. Пациентка Л., 22 года: в течение 4 лет рецидивы вульвовагинального кандидоза наблюдались 3 раза в год, последние полгода клинические проявления приобрели постоянный характер. Предыдущее лечение осуществлялось нистатином, бороглицерином, флуконазолом малыми дозами. Пациентке был проведен курс лечения флуканазолом по схеме 150 мг в 3 дня, №5. После приема первой дозы антимикотическая активность сыворотки крови равнялась 0,170 у.е. и сохранялась на уровне 0,153-0,162 у.е. перед приемами следующих доз. При последующих контрольных исследованиях клинических и лабораторных признаков грибковой инфекции не наблюдалось.Example 3. Patient L., 22 years old: for 4 years, recurrences of vulvovaginal candidiasis were observed 3 times a year, for the last six months, clinical manifestations have become permanent. Previous treatment was carried out with nystatin, boroglycerin, fluconazole in small doses. The patient underwent a course of treatment with flucanazole according to the scheme of 150 mg in 3 days, No. 5. After taking the first dose, the antimycotic activity of blood serum was 0.170 cu and remained at the level of 0.153-0.162 c.u. before taking the following doses. Subsequent follow-up studies of clinical and laboratory signs of fungal infection were not observed.
Пример 4. Пациентка Г., 26 лет: болеет ВВК 5 лет, умеренные клинические проявления кандидоза имеют постоянный характер, усиливаются перед mensis. Ранее лечение не проводилось. Терапия проводилась препаратом флуконазола в режиме 150 мг в 3 дня, №5. Антимикотическая активность сыворотки крови после приема первой дозы составила лишь 0,076 у.е., а перед приемом следующей дозы практически отсутствовала - 0,003 у.е. По окончании терапии у данной пациентки сохранялись значительные творожистые выделения, и при обследовании через полгода в посеве вновь обнаружена С.albicans.Example 4. Patient G., 26 years old: suffers from IHC for 5 years, moderate clinical manifestations of candidiasis are permanent, amplified before mensis. Previously, no treatment has been performed. Therapy was carried out with a fluconazole preparation in a regimen of 150 mg in 3 days, No. 5. The antimycotic activity of blood serum after taking the first dose was only 0.076 cu, and before taking the next dose it was practically absent - 0.003 cu At the end of therapy, this patient retained significant curdled discharge, and after examination six months later, C. albicans was again found in the crop.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008104968/15A RU2378651C2 (en) | 2008-02-11 | 2008-02-11 | Method of determining anti-mycotic activity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008104968/15A RU2378651C2 (en) | 2008-02-11 | 2008-02-11 | Method of determining anti-mycotic activity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008104968A RU2008104968A (en) | 2009-08-20 |
| RU2378651C2 true RU2378651C2 (en) | 2010-01-10 |
Family
ID=41150593
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008104968/15A RU2378651C2 (en) | 2008-02-11 | 2008-02-11 | Method of determining anti-mycotic activity |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2378651C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1158930A1 (en) * | 1983-04-28 | 1985-05-30 | Ордена Трудового Красного Знамени Институт Медицинской Паразитологии И Тропической Медицины Им.Е.И.Марциновского | Method of determining antimycotic activity of medicinal preparation |
| EP0972847A2 (en) * | 1998-04-24 | 2000-01-19 | Hoechst Marion Roussel | Method for screening antimycotic substances |
| US6537767B1 (en) * | 1997-04-02 | 2003-03-25 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Method for screening antimycotically active substances |
-
2008
- 2008-02-11 RU RU2008104968/15A patent/RU2378651C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1158930A1 (en) * | 1983-04-28 | 1985-05-30 | Ордена Трудового Красного Знамени Институт Медицинской Паразитологии И Тропической Медицины Им.Е.И.Марциновского | Method of determining antimycotic activity of medicinal preparation |
| US6537767B1 (en) * | 1997-04-02 | 2003-03-25 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Method for screening antimycotically active substances |
| EP0972847A2 (en) * | 1998-04-24 | 2000-01-19 | Hoechst Marion Roussel | Method for screening antimycotic substances |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008104968A (en) | 2009-08-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rad et al. | The epidemiology of Candida species associated with vulvovaginal candidiasis in an Iranian patient population | |
| Zhu et al. | Time course analysis of Candida albicans metabolites during biofilm development | |
| Indira | In vitro antifungal susceptibility testing of 5 antifungal agents against dermatophytic species by CLSI (M38-A) micro dilution method | |
| CN115802888A (en) | IRAK degrader and its use | |
| EP2177621B1 (en) | Methods of modulating cell surface receptors to prevent or reduce inflammation | |
| Heuer et al. | Antifungal susceptibility testing of Aspergillus niger on silicon microwells by intensity-based reflectometric interference spectroscopy | |
| Gerges et al. | Biofilm Formation and Aspartyl Proteinase Activity and Their Association with Azole Resistance Among Candida albicans Causing Vulvovaginal Candidiasis, Egypt | |
| Soares et al. | Quantification methods of Candida albicans are independent irrespective of fungal morphology | |
| Zhang et al. | The newly nonsporulated characterization of an Aspergillus fumigatus isolate from an immunocompetent patient and its clinic indication | |
| RU2378651C2 (en) | Method of determining anti-mycotic activity | |
| Lamsal et al. | Antifungal susceptibility and biofilm formation of Candida albicans isolated from different clinical specimens | |
| Lepesqueur et al. | Oral prevalence and antifungal susceptibility of Candida species in cystic fibrosis patients | |
| Wain et al. | A re-evaluation of the effect of cysteine on Candida albicans | |
| CN113981036B (en) | Kit for detecting tigecycline drug sensitivity and method for detecting tigecycline drug sensitivity by using kit | |
| Majima et al. | A novel mycological analysis valuable for evaluating therapeutic efficacy of antimycotics against experimental dermatophytosis in guinea pigs | |
| Al-Aryan et al. | Epidemiology of dermatophytes related infections in Kuwait: a retrospective study | |
| RU2796767C1 (en) | Method of trichoscopy using artificial neural networks for the diagnosis of hair damaged by dermatophyte spores in cats | |
| Sugandhi et al. | Prevalence of yeast in diabetic foot infections | |
| Perkhofer et al. | In vitro susceptibility testing in fungi: what is its role in clinical practice? | |
| Majoros et al. | Distribution and susceptibility of Candida species isolated in the Medical University of Debrecen | |
| Salem et al. | Isolation, identification, and antifungal resistance of Candida species from various samples | |
| Kurnatowska et al. | Minimal inhibitory concentration (MIC) of caspofungin and itraconazole inhibiting growth of Candida strains calculated from the linear regression equation | |
| Nichita et al. | Sensitivity to antifungal substances of some Microsporum canis strains. | |
| Popa et al. | Microsporum Canis strains sensitivity to antifungal drugs. | |
| Cafarchia et al. | New insights into the Diagnosis and the Pathogenicity of Malassezia Yeasts |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100212 |