RU2371479C1 - Complex probiotic medicine in immobilised and lyophilised form - Google Patents
Complex probiotic medicine in immobilised and lyophilised form Download PDFInfo
- Publication number
- RU2371479C1 RU2371479C1 RU2008104741/13A RU2008104741A RU2371479C1 RU 2371479 C1 RU2371479 C1 RU 2371479C1 RU 2008104741/13 A RU2008104741/13 A RU 2008104741/13A RU 2008104741 A RU2008104741 A RU 2008104741A RU 2371479 C1 RU2371479 C1 RU 2371479C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vkpm
- enterosorbent
- bifidobacteria
- ratio
- bifidobacterium
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 23
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims abstract description 48
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 31
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 13
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 40
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 36
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 33
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 claims description 14
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 claims description 14
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 claims description 13
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 claims description 13
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 9
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims description 8
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 7
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims description 6
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims description 6
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims description 6
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 claims description 5
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 claims description 5
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 3
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 2
- OQUFOZNPBIIJTN-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;sodium Chemical compound [Na].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O OQUFOZNPBIIJTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 16
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract description 15
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 12
- 238000003795 desorption Methods 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000273 veterinary drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 abstract 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 29
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 26
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 16
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 13
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 12
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 12
- 239000000463 material Substances 0.000 description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 12
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 12
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 12
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 12
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 9
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 7
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 7
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 7
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 7
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 7
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 7
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 7
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical class [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 229940069428 antacid Drugs 0.000 description 5
- 239000003159 antacid agent Substances 0.000 description 5
- 230000001458 anti-acid effect Effects 0.000 description 5
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 5
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 5
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 5
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 5
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 5
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 4
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 4
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 3
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- 101000723054 Lactobacillus casei Serine O-acetyltransferase Proteins 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 2
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010001605 Alcohol poisoning Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 206010010075 Coma hepatic Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 206010073306 Exposure to radiation Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 206010037601 Pyelonephritis chronic Diseases 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 206010048038 Wound infection Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 231100000570 acute poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 description 1
- 229940125717 barbiturate Drugs 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 201000006368 chronic pyelonephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 206010013663 drug dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 201000001059 hepatic coma Diseases 0.000 description 1
- 208000007386 hepatic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000014666 liquid concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 1
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 1
- 230000003562 morphometric effect Effects 0.000 description 1
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 1
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 150000002903 organophosphorus compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229920001558 organosilicon polymer Polymers 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 230000008855 peristalsis Effects 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 231100000046 skin rash Toxicity 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000011117 substance-related disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008359 toxicosis Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к препаратам медицинского и ветеринарного назначения и способам их получения и может быть использовано в биотехнологии, медицине и сельском хозяйстве.The invention relates to drugs for medical and veterinary use and methods for their preparation and can be used in biotechnology, medicine and agriculture.
Для профилактики и лечения многих патологических состояний, обусловленных нарушением эндоэкологии, широкое распространение получили энтеросорбенты. Это различные типы активных углей, например карбактин, карболонг, микросорб, полифепан и т.д. (Сенов П.Л. Фармацевтическая химия. - М.: Медицина, 1978, с.132-133; патент РФ N 2029546, МПК6 А61K 9/16, опубл. 27.02.95 г.), природные материалы и их аналоги (кристаллическая микроцеллюлоза, цеолиты, хитозаны, пектины и т.д.), синтетические минеральные сорбенты и другие материалы, которые используются для очищения организма от шлаков, радионуклидов, тяжелых металлов и токсинов. Энтеросорбенты снижают эффекты экзо- и эндотоксикозов.Enterosorbents are widely used for the prevention and treatment of many pathological conditions caused by a violation of endoecology. These are various types of activated carbons, for example carbactin, carbolong, microsorb, polyphepan, etc. (Senov P.L. Pharmaceutical chemistry. - M .: Medicine, 1978, p.132-133; RF patent N 2029546, IPC 6 A61K 9/16, publ. 02.27.95), natural materials and their analogues ( crystalline microcellulose, zeolites, chitosans, pectins, etc.), synthetic mineral sorbents and other materials that are used to cleanse the body of toxins, radionuclides, heavy metals and toxins. Enterosorbents reduce the effects of exo- and endotoxicoses.
Однако энтеросорбенты не устраняют причин вызывающих эффекты экзо- и эндотоксикозов, как правило, они не селективны, работают в основном на избыток субстрата, могут оказывать негативное действие из-за сорбции нужных для организма метаболитов (витаминов, гормонов) и не обеспечивают активно нормализацию микробиоценоза.However, enterosorbents do not eliminate the causes of exo- and endotoxicosis causing effects, as a rule, they are not selective, work mainly on excess substrate, can have a negative effect due to sorption of the metabolites necessary for the body (vitamins, hormones) and do not actively normalize microbiocenosis.
Функции нормальной микрофлоры в организме являются жизненно важными и очень обширными: синтезирующая, регуляторная, десенсибилизирующая, дезинтоксикационная, ферментативная, защитная и иммуностимулирующая. Для нормализации микробиоценоза широкое распространение получили препараты живых бактериальных клеток: бифидобактерий (межд. заявка (WO) N 85/03848), МКИ А23С 9/12, опубл. 12.09.85 г.), лактобактерий (заявка ЕПВ N 0154614, МКИ А23С 9/123, опубл. 11.09.85 г.) и колибактерий и т.д.The functions of normal microflora in the body are vital and very extensive: synthesizing, regulatory, desensitizing, detoxifying, enzymatic, protective and immunostimulating. To normalize microbiocenosis, drugs of live bacterial cells were widely used: bifidobacteria (international application (WO) N 85/03848), MKI A23C 9/12, publ. 09/12/85), lactobacilli (application EPO N 0154614, MKI A23C 9/123, publ. 09/11/85) and colibacteria, etc.
Недостатком этих препаратов являются довольно короткие сроки их хранения, если они находятся в жидкой форме или высокая стоимость, если они изготовлены в сухой форме, а также слабая устойчивость к инактивирующим факторам внешней среды и желудочно-кишечного тракта организма при применении.The disadvantage of these drugs is their rather short shelf life if they are in liquid form or high cost if they are made in dry form, as well as poor resistance to inactivating factors of the external environment and the gastrointestinal tract of the body when used.
Известен комплексный препарат, включающий пористый неорганический носитель и иммобилизованные на нем клетки микроорганизмов (заявка ФРГ №3410650, МКИ С12N 11/14, опубл. 03.10.85 г.). В качестве носителей применяют сталактитовые подложки с двойной структурой пор. Подложки имеют сквозные макропоры, которые делают возможным свободный обмен жидкости и газа из внутренней части носителя в окружающую среду. Размер макропор лежит в пределах величины клеток микроорганизмов.A complex preparation is known, including a porous inorganic carrier and microorganism cells immobilized on it (German application No. 3410650, MKI C12N 11/14, publ. 03.10.85). As carriers, stalactite substrates with a double pore structure are used. The substrates have through macropores, which make possible the free exchange of liquid and gas from the inside of the carrier into the environment. The size of the macropores lies within the size of the cells of microorganisms.
Недостатком данного препарата является то, что он не предназначен для использования в качестве медицинского или ветеринарного препарата в связи с отсутствием данных о влиянии сталактитового носителя с нанесенными на нем микроорганизмами на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта организма человека или животного.The disadvantage of this drug is that it is not intended for use as a medical or veterinary drug due to the lack of data on the effect of a stalactite carrier with microorganisms deposited on it on the microbiocenosis of the gastrointestinal tract of a human or animal body.
Известен комплексный фармацевтический препарат, включающий фармацевтически приемлемый носитель и иммобилизованные на нем микроорганизмы (межд. заявка (WO) №91/09608, МКИ А61K 35/74, опубл. 11.07.91 г.). Носитель не нарушает жизнеспособности микроорганизмов. В качестве микроорганизмов используют штамм L1a Streptococcus lactis. Препарат предназначен для борьбы с патогенной микрофлорой кишечника человека и животных, вызывающей диарею и другие желудочно-кишечные расстройства.A complex pharmaceutical preparation is known, including a pharmaceutically acceptable carrier and microorganisms immobilized on it (international application (WO) No. 91/09608, MKI A61K 35/74, publ. 11.07.91). The carrier does not violate the viability of microorganisms. As microorganisms, the strain L1a Streptococcus lactis is used. The drug is intended to combat pathogenic microflora of the intestines of humans and animals, causing diarrhea and other gastrointestinal disorders.
Недостатком препарата является то, что используемый в нем штамм L1a Streptococcus lactis влияет в основном на патогенную микрофлору кишечника человека и животных, т.е. проявляет антагонистические свойства, но слабо участвует в восстановлении микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Кроме того, отсутствуют данные об антацидных свойствах носителя, что свидетельствует о слабой защите носителем иммобилизованных клеток Streptococcus lactis при действии внутренней среды организма с низкими значениями рН.The disadvantage of the drug is that the strain L1a Streptococcus lactis used in it mainly affects the pathogenic microflora of the intestines of humans and animals, i.e. exhibits antagonistic properties, but is poorly involved in the restoration of the microflora of the gastrointestinal tract. In addition, there is no data on the antacid properties of the carrier, which indicates a weak carrier protection of immobilized Streptococcus lactis cells under the action of the internal environment of the body with low pH values.
Известен комплексный бактериальный препарат, включающий носитель и иммобилизованные на нем микробные клетки в концентрации на 1 мм2 2,1×103-1,0×105 (патент РФ №2017486, МПК6 А61K 31/00, опубл. 15.08.94 г.). В качестве носителя используют активированный уголь в виде порошка с размером частиц менее 30 мкм, а в качестве микроорганизмов используют лактобактерии и кишечные палочки.A complex bacterial preparation is known, including a carrier and microbial cells immobilized on it at a concentration of 1 mm 2 2.1 × 10 3 -1.0 × 10 5 (RF patent No. 2017486, IPC 6 A61K 31/00, publ. 15.08.94 g.). Activated carbon in the form of a powder with a particle size of less than 30 microns is used as a carrier, and lactobacilli and Escherichia coli are used as microorganisms.
Недостатком такого препарата является то, что активированный уголь, используемый в качестве носителя, является тонкопористым сорбентом с преобладанием микропор и высокой удельной поверхностью. Вследствие этого микробные клетки расположены на поверхности частиц сорбента и недостаточно защищены при неблагоприятном воздействии окружающей среды. Активированные угли активно поглощают низкомолекулярные биологически активные вещества, витамины и газы кишечника, что ухудшает работу перистальтики. Они быстро забиваются и работают преимущественно в верхних отделах желудочно-кишечного тракта. Кроме того угли не обладают антацидными свойствами, что не способствует выживаемости нанесенных на них клеток при действии сред с низкими значениями рН. Препарат не предусматривает использование одновременно нескольких штаммов микроорганизмов разных видов, например смеси бифидо- и лактобактерии, что значительно снижает эффективность действия препарата особенно при восстановлении микрофлоры желудочно-кишечного тракта.The disadvantage of this drug is that activated carbon used as a carrier is a finely porous sorbent with a predominance of micropores and a high specific surface area. As a result, microbial cells are located on the surface of the sorbent particles and are not adequately protected under adverse environmental influences. Activated carbons actively absorb low molecular weight biologically active substances, vitamins and intestinal gases, which impairs peristalsis. They quickly become clogged and work mainly in the upper parts of the gastrointestinal tract. In addition, coals do not have antacid properties, which does not contribute to the survival of cells deposited on them under the action of media with low pH values. The drug does not provide for the simultaneous use of several strains of microorganisms of different types, for example a mixture of bifidobacteria and lactobacilli, which significantly reduces the effectiveness of the drug, especially when restoring the microflora of the gastrointestinal tract.
Известен препарат-пробиотик в иммобилизованной форме, включающий носитель, представляющий собой сорбент, и клетки эубиотиков, иммобилизованные на указанном носителе, причем клетки эубиотиков используют совместно с питательной средой, а в качестве сорбента используют материал с антацидными свойствами, развитой мезо- и макропористой структурой и объемом макропор не менее 0,01 см3/г в виде порошка с размером частиц не более 0,1 мм, или в виде гранул размером (0,1-5,0) мм, или в виде таблеток при следующем количественном соотношении компонентов препарата, мас.%: клетки эубиотиков с питательной средой и титром 108-1010 КОЕ/мл - 1,0-50,0; носитель-сорбент - остальное до 100%. В качестве сорбента используют пористый материал на основе оксида алюминия с гидрофильно-гидрофобной топохимией поверхности, например энтеросорбент типа СУМС-1, модифицированный углеродом, или энтеросорбент типа СИАЛ, модифицированный кремнийорганическим полимером. В качестве эубиотиков используют бифидо- или лактобактерии или их смесь (патент РФ №2118535, МПК6 А61K 35/74, опубл. 10.09.98 г.).A known probiotic preparation in immobilized form, comprising a carrier, which is a sorbent, and eubiotics cells immobilized on the carrier, the cells of eubiotics used in conjunction with a nutrient medium, and as a sorbent use a material with antacid properties, developed meso- and macroporous structure and macropore volume of at least 0.01 cm 3 / g in the form of powder with particle size of not more than 0.1 mm, or in the form of granules of (0.1-5.0) mm or as tablets with the following quantitative ratio of components etc. . Paratov% wt./wt eubiotics cells with nutrient medium and the titer of 10 8 to 10 10 cfu / ml - 1,0-50,0; carrier sorbent - the rest is up to 100%. As the sorbent, a porous alumina-based material with hydrophilic-hydrophobic surface topochemistry is used, for example, carbon-modified SUMS-1 enterosorbent or SIAL type modified with an organosilicon polymer type enterosorbent. As eubiotics, bifidobacteria or lactobacilli or a mixture thereof are used (RF patent No. 21118535, IPC 6 A61K 35/74, publ. 09/10/98).
Однако используемые в указанном препарате сорбенты обладают недостаточной эффективностью сорбции и десорбции бактерий-эубиотиков, а также имеет низкую колонизационную активность входящих в состав препарата бактерий-эубиотиков.However, the sorbents used in this preparation have insufficient efficiency of sorption and desorption of eubiotics bacteria, and also have low colonization activity of the eubiotics bacteria that are part of the preparation.
Известен способ получения комплексного препарата бактерий- эубиотиков (патент РФ №2067114, МПК А61K 35/74, опубл. 27.09.96 г.), включающий выращивание в условиях глубинного культивирования культуры штаммов бифидобактерий и стрептококка, смешивание биомассы с защитной средой следующего состава (мас.%): сахароза 25-30; желатин 2-3; сухое молоко 3-5; глутамат натрия 0,5-1 и контактно-сорбционное обезвоживание целевого продукта, которое проводят охлажденным до минус 8-10°С сорбентом, например окисью алюминия, с остаточной влажностью менее 1% при массовом соотношении 1:10-12 соответственно, а досушивание осуществляют в течение 18-20 часов при температуре 0-5°С в замкнутом объеме.A known method of obtaining a comprehensive preparation of eubiotics bacteria (RF patent No. 2067114, IPC A61K 35/74, publ. 09/27/96), including growing in deep culture cultures of strains of bifidobacteria and streptococcus, mixing biomass with a protective medium of the following composition (wt. .%): sucrose 25-30; gelatin 2-3; milk powder 3-5; monosodium glutamate 0.5-1 and contact-sorption dehydration of the target product, which is carried out chilled to minus 8-10 ° C with a sorbent, for example aluminum oxide, with a residual moisture content of less than 1% at a mass ratio of 1: 10-12, respectively, and the drying is carried out within 18-20 hours at a temperature of 0-5 ° C in a closed volume.
Однако используемый в указанном способе сорбент обладает недостаточной эффективностью сорбции и десорбции бактерий-эубиотиков, а также имеет низкую колонизационную активность бактерий-эубиотиков.However, the sorbent used in this method has insufficient efficiency of sorption and desorption of eubiotics, and also has low colonization activity of eubiotics.
Известен препарат-пробиотик в иммобилизованной и лиофилизованной форме (патент РФ №2164801, МПК А61K 35/74, опубл. 10.04.01). Препарат включает носитель, представляющий собой сорбент, и клетки пробиотиков, иммобилизованные на указанном носителе, причем клетки пробиотиков используют совместно с питательной средой, а в качестве сорбента используют материал с антацидными свойствами, развитой мезо- и макропористой структурой и объемом макропор не менее 0,01 см3/г в виде порошка с размером частиц не более 0,1 мм, или в виде гранул размером (0,1-5,0) мм, или в виде таблеток, согласно изобретению препарат дополнительно содержит защитную среду, а клетки пробиотиков с питательной средой представляют собой сухой концентрат бифидобактерий на молочной основе с титром 108-1010 КОЕ/г и содержанием аминокислот (мг/100 г сухой биомассы): глутаминовая кислота - 15,0-68,0; глутамин - 8,0-20,0; лейцин - 10,0-50,0; аргинин - 20,0-30,0; цистеин - 50,0-80,0 при следующем соотношении компонентов препарата в сухом виде, мас.%: клетки эубиотиков с питательной средой и титром 108-1010 КОЕ/г - 0,1-10,0; защитная среда - 0,1-10,0; носитель-сорбент - остальное - до 100%. В качестве защитной среды используют желатин, сахарозу, аскорбиновую кислоту и хлористый натрий при следующем содержании компонентов, мас.%: желатин - 8,5-11,5; аскорбиновая кислота - 0,8-1,2; хлористый натрий - 1,7-3,0; сахароза - остальное до 100%. В качестве сорбента используют пористый материал на основе оксида алюминия с гидрофильно-гидрофобной топохимией поверхности, например энтеросорбент типа СУМС-1, модифицированный углеродом. Препарат в качестве бактерий-пробиотиков дополнительно содержит сухую закваску вязких штаммов ацидофильных бактерий Lactobacillus acidophilus типа АВ, соотношение которых с сухим концентратом бифидобактерий составляет 1:(8-9) соответственно. В качестве бифидобактерий в сухом концентрате используют бактерии Bifidum bifidum №1, или №791, или ЛВА-3, или Bifidobacterium longum 379, или Bifidobacterium adolescentis MC-42, или смесь бактериальных клеток указанных штаммов, взятых в равных весовых долях.Known drug probiotic in immobilized and lyophilized form (RF patent No. 2164801, IPC A61K 35/74, publ. 10.04.01). The preparation includes a carrier, which is a sorbent, and probiotic cells immobilized on the indicated carrier, the probiotic cells being used in conjunction with a nutrient medium, and a material with antacid properties, a developed meso and macroporous structure and a macropore volume of at least 0.01, is used as a sorbent cm 3 / g in the form of a powder with a particle size of not more than 0.1 mm, or in the form of granules with a size of (0.1-5.0) mm, or in the form of tablets, according to the invention, the preparation additionally contains a protective medium, and the cells of probiotics with feeder second medium are dry concentrate of bifidobacteria based on milk with a titer of 10 8 to 10 10 CFU / g and the amino acid content (mg / 100 g dry biomass): glutamic acid - 15,0-68,0; glutamine - 8.0-20.0; leucine - 10.0-50.0; arginine - 20.0-30.0; cysteine - 50.0-80.0 in the following ratio of the components of the drug in dry form, wt.%: eubiotics cells with a nutrient medium and a titer of 10 8 -10 10 CFU / g - 0.1-10.0; protective environment - 0.1-10.0; carrier sorbent - the rest is up to 100%. Gelatin, sucrose, ascorbic acid and sodium chloride are used as a protective medium in the following components, wt.%: Gelatin - 8.5-11.5; ascorbic acid - 0.8-1.2; sodium chloride - 1.7-3.0; sucrose - the rest is up to 100%. As the sorbent, a porous alumina-based material with hydrophilic-hydrophobic topochemistry is used, for example, carbon-modified SUMS-1 enterosorbent. The preparation as probiotic bacteria additionally contains dry sourdough of viscous strains of acidophilic bacteria Lactobacillus acidophilus type AB, the ratio of which with a dry concentrate of bifidobacteria is 1: (8-9), respectively. The bacteria Bifidum bifidum No. 1, or No. 791, or LVA-3, or Bifidobacterium longum 379, or Bifidobacterium adolescentis MC-42, or a mixture of bacterial cells of these strains taken in equal weight fractions are used as bifidobacteria in a dry concentrate.
Однако используемые в указанном препарате сорбенты также обладают недостаточной эффективностью сорбции и десорбции бактерий-эубиотиков. Кроме того, наблюдается низкая колонизационная активность входящих в состав препарата бактерий-эубиотиков.However, the sorbents used in this preparation also have insufficient efficiency of sorption and desorption of eubiotics bacteria. In addition, there is a low colonization activity of the eubiotics bacteria that make up the preparation.
Наиболее близким техническим решением (прототипом) является препарат-пробиотик в иммобилизованной и лиофилизованной форме (заявка на патент РФ №2006100740/15, МПК А61K 35/74, опубл. 10.07.07), включающий носитель, представляющий собой пористый энтеросорбент СУМС-1 на основе оксида алюминия, модифицированный углеродом с гидрофильно-гидрофобной топохимией поверхности, и клетки бактерий-эубиотиков с питательной и защитной средами, иммобилизованные на указанном носителе-энтеросорбенте. Клетки бактерий-эубиотиков с питательной средой представляют собой лиофилизированный концентрат консорциума бифидобактерий, или лактобактерий, или их смесь с титром 108-1010 КОЕ/г, а в качестве пористого модифицированного углеродом энтеросорбента СУМС-1 он содержит энтеросорбент СУМС-1, дополнительно обработанный раствором соли металла в объемном соотношении не более 1:1, в качестве которого используют 3%-ный раствор сульфата магния, при следующем соотношении компонентов препарата в лиофилизированном виде, мас.%:The closest technical solution (prototype) is a probiotic preparation in immobilized and lyophilized form (patent application of the Russian Federation No. 2006100740/15, IPC A61K 35/74, publ. 07/10/07), including a carrier, which is a porous enterosorbent SUMS-1 on alumina-based, carbon-modified with hydrophilic-hydrophobic surface topochemistry, and cells of eubiotics bacteria with nutrient and protective media immobilized on the indicated enterosorbent carrier. Cells of eubiotics bacteria with a nutrient medium are a lyophilized concentrate of a consortium of bifidobacteria, or lactobacilli, or a mixture thereof with a titer of 10 8 -10 10 CFU / g, and as a porous carbon-modified enterosorbent SUMS-1, it contains the SUMS-1 enterosorbent, additionally processed a metal salt solution in a volume ratio of not more than 1: 1, which is used as a 3% solution of magnesium sulfate, in the following ratio of the components of the drug in lyophilized form, wt.%:
В качестве консорциума бифидобактерий он содержит штаммы бифидобактерий: Bifidobacterium bifidum 8-3, Bifidobacterium longum ДВА-13 и Bifidobacterium adolescentis ГО-13 в соотношении 8:1:1. В качестве консорциума лактобактерий он содержит штаммы лактобактерий Lactobacillus acidophilus 57S, Lactobacillus plantarum П-75, Lactobacillus casei Сб в соотношении 4: 1,0: 1,0. Смесь консорциумов бифидо- и лактобактерий имеет соотношение от 1:1 до 3:1.As a consortium of bifidobacteria, it contains strains of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum 8-3, Bifidobacterium longum TWA-13 and Bifidobacterium adolescentis GO-13 in a ratio of 8: 1: 1. As a consortium of lactobacilli, it contains strains of lactobacilli Lactobacillus acidophilus 57S, Lactobacillus plantarum P-75, Lactobacillus casei Sat in a ratio of 4: 1.0: 1.0. A mixture of bifidobacteria and lactobacilli consortia has a ratio of 1: 1 to 3: 1.
Однако используемый химически модифицированный энтерособент СУМС-1 имеет высокую стоимость: он дороже угольных сорбентов (например, СУ ГС, СКС, ВНИИТУ-2) в четыре-пять раз. Кроме того, для обеспечения десорбции бактерий в кишечнике необходимо проводить химическую модификацию поверхности энтеросорбента СУМС-1, вследствие чего значительно усложняется технологический процесс получения комплексного препарата-пробиотика в иммобилизованной форме.However, the chemically modified enterosubstance SUMS-1 used has a high cost: it is four to five times more expensive than coal sorbents (for example, SU GS, SKS, VNIITU-2). In addition, to ensure the desorption of bacteria in the intestine, it is necessary to carry out a chemical modification of the surface of the SUMS-1 enterosorbent, as a result of which the process of obtaining a complex probiotic preparation in an immobilized form is significantly complicated.
Техническим результатом заявляемого технического решения является создание более простого в изготовлении и более дешевого комплексного препарата-пробиотика в сухой иммобилизованной форме, который обеспечивал бы более высокую эффективность сорбции и десорбции клеток бактерий энтеросорбентом, определяющую его клиническую эффективность и более высокую колонизационную активность бактерий-эубиотиков.The technical result of the claimed technical solution is the creation of a simpler to manufacture and cheaper complex probiotic preparation in dry immobilized form, which would provide higher efficiency of sorption and desorption of bacterial cells by enterosorbent, which determines its clinical effectiveness and higher colonization activity of eubiotics.
Указанный технический результат достигается тем, что в комплексном препарате-пробиотике, включающем носитель, представляющий собой пористый энтеросорбент и клетки бактерий-эубиотиков с питательной и защитной средами, иммобилизованные на указанном энтеросорбенте, согласно изобретению клетки бактерий-эубиотиков с питательной средой представляют собой лиофилизированный концентрат консорциума бифидобактерий, или лактобактерий, или их смесь с титром 108-1010 КОЕ/г, а в качестве пористого энтеросорбента он содержит углеродный энтеросорбент ВНИИТУ-2, при следующем соотношении компонентов препарата в сухом виде, мас.%:The indicated technical result is achieved in that in a complex probiotic preparation comprising a carrier, which is a porous enterosorbent and cells of eubiotics bacteria with a nutrient and protective medium immobilized on the specified enterosorbent, according to the invention, the cells of the eubiotics bacteria with a nutrient medium are a lyophilized concentrate of the consortium bifidobacteria, or lactobacilli, or their mixture with a titer of 10 8 -10 10 CFU / g, and as a porous enterosorbent it contains carbon enterosorb NT VNIITU-2, in the following ratio of the components of the drug in dry form, wt.%:
В качестве консорциума штаммов бифидобактерий он содержит штаммы бифидобактерий: Bifidobacterium bifidum ВКПМ В-5799, Bifidobacterium longum ВКПМ В-5894, в соотношении 8:2, или Bifidobacterium bifidum 791 БАГ, Bifidobacterium bifidum ВКПМ В-5799, Bifidobacterium longum ВКПМ В-5894 в соотношении 6:3:1, или Bifidobacterium bifidum ВКПМ В-5799, Bifidobacterium longum ВКПМ AC-1252 и/или Bifidobacterium longum ВКПМ AC-1530 в соотношении 8:1:1, или Bifidobacterium bifidum ВКПМ В-5799, Bifidobacterium longum ВКПМ В-5894 и Bifidobacterium adolescentis ВКПМ В-2944 в соотношении 6:3:1 или Bifidobacterium bifidum ВКПМ В-5799, Bifidobacterium longum ВКПМ AC-1252 и Bifidobacterium adolescentis ВКПМ AC-1245 в соотношении 8:1:1.As a consortium of strains of bifidobacteria, it contains strains of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum VKPM B-5799, Bifidobacterium longum VKPM B-5894, in a ratio of 8: 2, or Bifidobacterium bifidum 791 BKH, Bifidobacterium bifobum 57 bifum Bifum 6: 3: 1 ratio, or Bifidobacterium bifidum VKPM B-5799, Bifidobacterium longum VKPM AC-1252 and / or Bifidobacterium longum VKPM AC-1530 in the ratio 8: 1: 1, or Bifidobacterium bifidum VKPM B-5799, Bifidobact VKum Bpid -5894 and Bifidobacterium adolescentis VKPM B-2944 in a ratio of 6: 3: 1 or Bifidobacterium bifidum VKPM B-5799, Bifidobacterium longum VKPM AC-1252 and Bifidobacterium adolescentis VKPM AC-1245 in a ratio of 8: 1: 1.
В качестве консорциума штаммов лактобактерий он содержит штаммы лактобактерий: Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-5863, Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-4108, Lactobacillus plantarum ВКПМ В-3962, Lactobacillus plantarum ВКПМ В-5002; Lactobacillus casei ВКПМ В-5724, Lactobacillus casei ВКПМ В-3960 в соотношении 1:1:1:1:4:4.As a consortium of strains of lactobacilli, it contains strains of lactobacilli: Lactobacillus acidophilus VKPM B-5863, Lactobacillus acidophilus VKPM B-4108, Lactobacillus plantarum VKPM B-3962, Lactobacillus plantarum VKPM B-5002; Lactobacillus casei VKPM B-5724, Lactobacillus casei VKPM B-3960 in a ratio of 1: 1: 1: 1: 4: 4.
Смесь консорциумов бифидо- и лактобактерий имеет соотношение от 1:1 до 3:1.A mixture of bifidobacteria and lactobacilli consortia has a ratio of 1: 1 to 3: 1.
Концентрат консорциума бифидобактерий, или лактобактерий, или их смесь приготовлен на питательной среде, содержащей обезжиренное молоко, нормализованное по сухому обезжиренному молочному остатку СОМО 13,5-15,0% с добавлением глюкозы и натрия лимоннокислого при следующем соотношении компонентов (мас.%):A concentrate of a consortium of bifidobacteria or lactobacilli, or a mixture thereof, is prepared on a nutrient medium containing skim milk normalized to 13.5-15.0% SOMO dry skim milk powder with the addition of glucose and sodium citrate in the following ratio of components (wt.%):
В обезжиренной молочной среде искусственно увеличивают в 1,3-1,5 раза концентрацию белков и лактозы внесением сухого молока так, чтобы сухой обезжиренный молочный остаток (СОМО) достигал 13,5-15,0%. Чем выше содержание СОМО, тем выше содержание казеина, который образует буферную систему, связывая большое количество кислых метаболитов в казеинаты. Тем самым удается сдерживать нарастание кислотности среды при росте биомассы. Чем выше содержание лактозы, тем выше ростовые свойства среды - увеличение содержания лактозы на 25-30% повышает титр бифидо- и/или лактобактерий. Для предотвращения коагуляции казеина в молочную основу вводят раствор натрия лимоннокислого, который обладает сильными стабилизирующими и буферными свойствами. Кроме того, для повышения ростовых свойств молочной питательной среды вводят глюкозу в качестве дополнительного источника энергии, который способствует значительному увеличению содержания бифидо- и лактобактерий с 109 до 1010 КОЕ/мл.In skim milk medium, the concentration of proteins and lactose is artificially increased by 1.3-1.5 times by adding powdered milk so that the dry skim milk residue (SOMO) reaches 13.5-15.0%. The higher the content of SOMO, the higher the content of casein, which forms a buffer system, linking a large number of acidic metabolites to caseinates. Thus, it is possible to restrain the increase in acidity of the medium with the growth of biomass. The higher the lactose content, the higher the growth properties of the medium - an increase in the lactose content by 25-30% increases the titer of bifidobacteria and / or lactobacilli. To prevent casein coagulation, a solution of sodium citrate is introduced into the milk base, which has strong stabilizing and buffering properties. In addition, to increase the growth properties of the milk nutrient medium, glucose is introduced as an additional energy source, which contributes to a significant increase in the content of bifidobacteria and lactobacilli from 10 9 to 10 10 CFU / ml.
В результате удается существенно увеличить титр в процессе получения биомассы концентрата консорциума бифидо- и лактобактерий и сохранить их титр в процессе лиофильной сушки готовой формы препарата в иммобилизованной форме.As a result, it is possible to significantly increase the titer in the process of obtaining biomass of a concentrate of a consortium of bifidobacteria and lactobacilli and maintain their titer in the process of freeze drying the finished form of the drug in immobilized form.
Препарат с содержанием микробной биомассы менее 0,1 мас.% имеет низкий биотитр с преобладанием прочно связанных с сорбентом клеток, т.е. действует преимущественно как энтеросорбент. Количество микробных клеток, вводимых в препарат, не превышает 15 мас.%, вследствие чего вся биомасса бактерий препарата находится в защищенном состоянии. При этом углеродный энтеросорбент ВНИИТУ- 2 в препарате сохраняет основные свои свойства, обеспечивающие связывание и выведение из кишечника токсинов, продуктов незавершенного метаболизма и патогенных микроорганизмов.A preparation with a microbial biomass content of less than 0.1 wt.% Has a low biotiter with a predominance of cells firmly bound to the sorbent, i.e. acts primarily as an enterosorbent. The number of microbial cells introduced into the preparation does not exceed 15 wt.%, As a result of which the entire biomass of the bacteria of the preparation is in a protected state. At the same time, the VNIITU-2 carbon enterosorbent in the preparation retains its main properties, which ensure the binding and elimination of toxins, products of incomplete metabolism and pathogenic microorganisms from the intestine.
Штамм бифидобактерий: Bifidobacterium bifidum 8-3 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5799. Штамм Bifidobacterium longum ДВА-13 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5894. Штамм Bifidobacterium adolescentis ГО-13 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В-2944. Штамм Bifidobacterium bifidum 791 БАГ депонирован в коллекции культур микроорганизмов ГНЦ ВБ «Вектор» №В-686. Штамм Bifidobacterium longum Я-3 депонирован в ВНИИгенетика в ВКПМ под №АС-1252. Штамм Bifidobacterium longum 17X депонирован в ВНИИгенетика в ВКПМ под №АС-1530. Штамм Bifidobacterium adolescentis ГО-4А депонирован в ВНИИгенетика в ВКПМ под № АС-1245.The strain of bifidobacteria: Bifidobacterium bifidum 8-3 is deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. B 5799. The strain Bifidobacterium longum TWA-13 is deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at No. VK 5894. The strain Bifidobacterium adolescentis at no. . The strain Bifidobacterium bifidum 791 BAG was deposited in the collection of cultures of microorganisms SSC WB "Vector" No. B-686. The strain Bifidobacterium longum I-3 was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. AC-1252. The strain Bifidobacterium longum 17X was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No.AC-1530. The strain Bifidobacterium adolescentis GO-4A was deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. AC-1245.
Штаммы лактобактерий депонированы: Lactobacillus acidophilus 57S депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5863; Lactobacillus acidophilus К-1-С депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 4108; Lactobacillus plantarum П-75 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 3962; Lactobacillus plantarum 337D депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 5002; Lactobacillus casei C-1 депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под №В 3960; Lactobacillus casei Сб депонирован во ВНИИгенетика в ВКПМ под № В-5724.Lactobacillus strains deposited: Lactobacillus acidophilus 57S deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics in VKPM under No. 5863; Lactobacillus acidophilus K-1-C is deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. B 4108; Lactobacillus plantarum P-75 deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. B 3962; Lactobacillus plantarum 337D deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. B 5002; Lactobacillus casei C-1 deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. B 3960; Lactobacillus casei Sat is deposited at the All-Russian Research Institute of Genetics at VKPM under No. B-5724.
Введение в препарат сухой микробной биомассы с биотитром 108-1010 КОЕ/г обеспечивает ему оптимальную биологическую активность. Если исходная микробная биомасса имеет титр меньше 108 КОЕ/г, то препарат обладает недостаточной биологической активностью и при введении в желудочно-кишечный тракт проявляет слабый лечебно-профилактический эффект. Титр сухой микробной биомассы более 1010 КОЕ/мл значительно увеличивает стоимость препарата без значительного увеличения лечебно-профилактического эффекта.Introduction to the preparation of dry microbial biomass with a biotiter of 10 8 -10 10 CFU / g provides him with optimal biological activity. If the initial microbial biomass has a titer of less than 10 8 CFU / g, the preparation has insufficient biological activity and, when introduced into the gastrointestinal tract, exhibits a weak therapeutic effect. A titer of dry microbial biomass of more than 10 10 CFU / ml significantly increases the cost of the drug without a significant increase in the therapeutic effect.
Основу жидкой бактериальной суспензии для сушки составляют клетки-эубиотики в молочной питательной среде с повышенным титром клеток (109-1010 КОЕ/мл) - жидкий концентрат бифидобактерий. Молочная питательная среда с клетками-эубиотиками содержит повышенное количество белка (не менее 13% СОМ - сухого остатка молока). Это позволяет увеличить антибиотические свойства бактерий- пробиотиков в препарате. Кроме того, повышенное количество белка увеличивает антацидные свойства препарата.The basis of the liquid bacterial suspension for drying is eubiotics cells in a milk nutrient medium with an increased titer of cells (10 9 -10 10 CFU / ml) - a liquid concentrate of bifidobacteria. Milk culture medium with eubiotics cells contains an increased amount of protein (at least 13% COM - dry milk residue). This allows you to increase the antibiotic properties of probiotic bacteria in the drug. In addition, an increased amount of protein increases the antacid properties of the drug.
Высокая концентрация клеток в жидкой бактериальной суспензии позволяет их использовать в препарате в сухом виде в концентрации 1,0-15,0% с титром 108-1010 КОЕ/мл.A high concentration of cells in a liquid bacterial suspension allows their use in the preparation in a dry form at a concentration of 1.0-15.0% with a titer of 10 8 -10 10 CFU / ml.
Носитель-сорбент представляет собой механически прочные частицы порошка, или гранулы, или таблетки, выполненные из нового углеродного энтеросорбента - ВНИИТУ-2, разработанный в Конструкторско-Технологическом Институте Технического Углерода Сибирского Отделения РАН (г.Омск). Отличительными особенностями сорбента являются: преимущественное содержание мезопор (до 80%) на поверхности сорбента при величине удельной поверхности 300-400 м2/г позволяет извлекать до 95% веществ со средней молекулярной массой - 500-5000 Да, высокая химическая чистота (содержание углерода не менее 99,5%, минеральных примесей - не более 0,15%), высокая прочность гранул, которые имеют округлую форму с гладким рельефом поверхности, а также практически полное отсутствие «углеродной пыли» на поверхности и в порах.The sorbent carrier is mechanically strong powder particles, or granules, or tablets made of a new carbon enterosorbent - VNIITU-2, developed at the Design and Engineering Institute of Technical Carbon of the Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences (Omsk). Distinctive features of the sorbent are: the predominant content of mesopores (up to 80%) on the surface of the sorbent with a specific surface area of 300-400 m 2 / g allows you to extract up to 95% of substances with an average molecular weight of 500-5000 Yes, high chemical purity (carbon content is not less than 99.5%, mineral impurities - not more than 0.15%), high strength granules that have a rounded shape with a smooth surface topography, as well as the almost complete absence of "carbon dust" on the surface and in the pores.
Хорошая гидродинамика процесса сорбционной очистки, ВНИИТУ-2 применяется:Good hydrodynamics of the sorption purification process, VNIITU-2 is used:
- для детоксикации больных с заболеваниями, сопровождающимися накоплением токсических веществ в организме;- for detoxification of patients with diseases accompanied by the accumulation of toxic substances in the body;
- при остром отравлении барбитуратами, фосфороорганическими соединениями, лекарственными препаратами, пищевыми продуктами, солями тяжелых металлов;- in acute poisoning with barbiturates, organophosphorus compounds, drugs, food products, salts of heavy metals;
- при заболеваниях печени и почек: закупорки желчных протоков, печеночной коме, циррозах, вирусном гепатите и т.д.;- for diseases of the liver and kidneys: blockage of the bile ducts, hepatic coma, cirrhosis, viral hepatitis, etc .;
- при эндотоксикозах: перитоните, панкреатите, сепсисе, раневой инфекции, ожоговой интоксикации после действия радиационного воздействия, опухолевом росте, атеросклерозе и т.д.;- with endotoxicosis: peritonitis, pancreatitis, sepsis, wound infection, burn intoxication after exposure to radiation, tumor growth, atherosclerosis, etc .;
- при аутоиммунных и психоневрологических заболеваниях: аллергии, бронхиальной астме, псориазе, красной волчанке, артритах, алкогольной интоксикации, наркомании, рассеянном склерозе.- with autoimmune and neuropsychiatric diseases: allergies, bronchial asthma, psoriasis, lupus erythematosus, arthritis, alcohol intoxication, drug addiction, multiple sclerosis.
Препарат отличают высокая химическая чистота; шлифованная поверхность гранул и однородный состав; полная инертность и нерастворимость в контакте с биологическими жидкостями; отсутствие запаха и вкуса; высокая степень извлечения токсических веществ средней и высокой молекулярной массы и полнота выведения из организма; простота применения, не требующая предварительной подготовки энтеросорбента.The drug is distinguished by high chemical purity; polished surface of granules and homogeneous composition; complete inertness and insolubility in contact with biological fluids; lack of smell and taste; a high degree of extraction of toxic substances of medium and high molecular weight and completeness of excretion from the body; ease of use, which does not require preliminary preparation of enterosorbent.
Мезо- и макропористая структура носителя-сорбента, ячейки которого заполнены микробными клетками, также способствует защите этих иммобилизованных клеток от инактивирующих факторов внешней среды. Причем микробные клетки, находящиеся в порах, и клетки, находящиеся близко к внешней поверхности носителя-сорбента, отличаются по своим десорбционным способностям, и такая неоднородность свойств клеток, обеспечивает пролонгированное действие препарата и способствует колонизации не только верхних, но и нижних отделов кишечника. Пористый носитель, являясь энтеросорбентом, снимает эффекты местного (а через него и общего) токсикоза, что способствует выживаемости бактерий препарата и микрофлоры кишечника, а также снижает нагрузку на органы детоксикации человека или животного.The meso- and macroporous structure of the sorbent carrier, the cells of which are filled with microbial cells, also contributes to the protection of these immobilized cells from inactivating environmental factors. Moreover, microbial cells located in the pores and cells located close to the outer surface of the sorbent carrier differ in their desorption abilities, and such heterogeneity of the properties of the cells provides a prolonged effect of the drug and promotes the colonization of not only the upper, but also the lower intestines. The porous carrier, as an enterosorbent, removes the effects of local (and through it general) toxicosis, which contributes to the survival of the drug bacteria and intestinal microflora, and also reduces the load on the detoxification organs of a person or animal.
Кроме того, при использовании в препарате в качестве микробных клеток консорциума бифидобактерий, или консорциума лактобактерий, или смеси консорциумов бифидо- и лактобактерий обеспечивается не только вытеснение из желудочно-кишечного тракта патогенных микроорганизмов (за счет антагонистических свойств указанных бактерий), но и восстановление сильно сокращенной микрофлоры кишечника при дисбактериозе и других заболеваниях.In addition, when using a consortium of bifidobacteria or a consortium of lactobacilli, or a mixture of consortia of bifidobacteria and lactobacilli as microbial cells in the preparation, not only displacement of pathogenic microorganisms from the gastrointestinal tract is ensured (due to the antagonistic properties of these bacteria), but also the restoration of greatly reduced intestinal microflora with dysbiosis and other diseases.
Используемый консорциум штаммов бифидобактерий усиливает как клиническую эффективность готовых форм биопрепаратов, так и технологические преимущества при наработке биомассы бифидобактерий:The consortium of strains of bifidobacteria used enhances both the clinical efficacy of finished biologics and the technological advantages in producing biomass of bifidobacteria:
- расширяется спектр антагонистической активности консорциума по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам;- the spectrum of antagonistic activity of the consortium with respect to pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms is expanding;
- усиливается ферментативная и синтетическая активность бактерий за счет эффекта синергизма, что позволяет активнее колонизировать слизистые кишечника;- the enzymatic and synthetic activity of bacteria is enhanced due to the synergistic effect, which allows more active colonization of intestinal mucosa;
- возрастает стимулирующее воздействие различных штаммов бифидобактерий на иммунокомпетентные клетки желудочно-кишечного тракта и иммунную систему человека в целом;- the stimulating effect of various strains of bifidobacteria on the immunocompetent cells of the gastrointestinal tract and the human immune system as a whole increases;
- значительно повышается выживаемость бактерий консорциума в условиях желудочно-кишечного тракта;- significantly increases the survival of bacteria of the consortium in the gastrointestinal tract;
- возрастает скорость накопления биомассы в условиях технологического процесса за счет взаимовыгодного усиления ферментативной активности и повышения эффективности использования питательных сред.- the biomass accumulation rate increases under the conditions of the technological process due to the mutually beneficial enhancement of enzymatic activity and increase the efficiency of the use of nutrient media.
Использование нескольких штаммов лактобактерий в составе консорциума усиливает эффект благоприятного их воздействия на организм человека, что обусловливается следующими его свойствами:The use of several strains of lactobacilli as part of the consortium enhances the effect of their beneficial effect on the human body, which is due to its following properties:
- высокой антагонистической активностью по отношению к широкому спектру патогенных и условно-патогенных микроорганизмов;- high antagonistic activity against a wide range of pathogenic and opportunistic microorganisms;
- выраженным воздействием на ферментативную и синтетическую активность бактерий нормальной кишечной микрофлоры;- a pronounced effect on the enzymatic and synthetic activity of bacteria of normal intestinal microflora;
- стимуляцией иммунной системы человека;- stimulation of the human immune system;
- способностью к выживанию и развитию в условиях микрофлоры желудочно-кишечного тракта.- the ability to survive and develop in conditions of microflora of the gastrointestinal tract.
Ниже приведены примеры составов предлагаемого комплексного препарата бактерий-эубиотиков в иммобилизованной и лиофилизированной форме.The following are examples of formulations of the proposed complex preparation of eubiotics bacteria in immobilized and lyophilized form.
Пример 1. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде порошка с размером частиц (40-100) мкм (мас.%):Example 1. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of a powder with a particle size (40-100) microns (wt.%):
Пример 2. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде порошка с размером частиц (40-100) мкм (мас.%):Example 2. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of a powder with a particle size (40-100) microns (wt.%):
Пример 3. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде гранул размером (0,5-5,0) мм (мас.%):Example 3. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of granules with a size of (0.5-5.0) mm (wt.%):
Пример 4. Препарат-пробиотик "Экофлор" в виде гранул размером (0,5-5,0) мм (мас.%):Example 4. The probiotic preparation "Ecoflor" in the form of granules with a size of (0.5-5.0) mm (wt.%):
Пример 5. Технология получения готовых форм препарата "Экофлор"Example 5. The technology of obtaining the finished form of the drug "Ecoflor"
По специальной технологии готовят исходные сорбенты типа ВНИИТУ-2 (патент РФ №2211727, МПК B01J 20/20, С01В 31/08, опубл. 10.09.2003 г.). Способ обработки гранул углеродного пористого материала для энтеросорбции включает промывание слоя материала водой и контактирование его с газообразным окислителем путем его обработки воздушно-водяной смесью в фонтанирующем слое, который создают путем подачи воздушно-водяной струи снизу вверх под слой материала со скоростью 50-150 м/с. Обработку ведут в течение 1-36 ч до достижения величины рН 6,0-7,0 и полного обеспыливания материала. Под воздействием струи воздушно-водяной смеси происходит образование фонтанирующего слоя, обеспечивающее интенсивное перемешивание гранул в воде, при котором разрушаются слабые, обеспыливаются и шлифуются прочные гранулы. При этом подача смеси воздуха с водой под нижний фильтрующий элемент предотвращает забивание фильтрующего элемента частицами обрабатываемого материала. Верхний фильтрующий элемент препятствует уносу материала из реактора, но не препятствует удалению из реактора пыли и частиц менее 0,5 мм. Интенсивность механического воздействия на гранулы материала растет по высоте слоя сверху вниз и зависит от скорости подачи воздушно-водяной смеси. В процессе обработки гранул углеродного сорбента отделившаяся пыль, адсорбируя воздух, приобретает плавучесть и восходящим потоком воды и воздуха выносится из рабочей зоны реактора в его верхнюю часть и через сливной патрубок удаляется из реактора. Кроме того, воздух является окислителем, воздействие которого на сорбент осуществляется в фонтанирующем слое до достижения рН продукта 6,0-7,0. Этим достигается хорошая инертность сорбента к процессам, протекающим в желудочно-кишечном тракте человека и животных.Initial sorbents of the VNIITU-2 type are prepared using special technology (RF patent No. 2211727, IPC B01J 20/20, СВВ 31/08, publ. September 10, 2003). A method of processing granules of a carbon porous material for enterosorption involves washing a layer of material with water and contacting it with a gaseous oxidizing agent by treating it with an air-water mixture in a gushing layer, which is created by applying an air-water jet from bottom to top under a layer of material at a speed of 50-150 m / from. Processing is carried out for 1-36 hours to achieve a pH of 6.0-7.0 and complete dedusting of the material. Under the influence of a jet of air-water mixture, a gushing layer forms, which provides intensive mixing of the granules in water, in which weak granules are destroyed, dust-proof granules are dusted and ground. In this case, the supply of a mixture of air and water under the lower filter element prevents clogging of the filter element by particles of the processed material. The upper filter element prevents the entrainment of material from the reactor, but does not prevent the removal of dust and particles of less than 0.5 mm from the reactor. The intensity of the mechanical effect on the granules of the material increases along the height of the layer from top to bottom and depends on the feed rate of the air-water mixture. During the processing of carbon sorbent granules, the separated dust, adsorbing air, acquires buoyancy and is carried upward from the working zone of the reactor to its upper part by the upward flow of water and air and is removed from the reactor through a drain pipe. In addition, air is an oxidizing agent, the effect of which on the sorbent is carried out in the gushing layer until the product pH reaches 6.0-7.0. This achieves a good inertness of the sorbent to the processes occurring in the gastrointestinal tract of humans and animals.
Стерилизацию сорбента перед применением ведут сухим жаром в сушильном шкафу россыпью слоем не более 1,5-2,0 см при температуре (160±2)°С в течение 2 часов. Контроль стерильности ВНИИТУ-2 определяют микробиологически.Sterilization of the sorbent before use is carried out by dry heat in an oven in bulk with a layer of not more than 1.5-2.0 cm at a temperature of (160 ± 2) ° C for 2 hours. Sterility control VNIITU-2 is determined microbiologically.
Получение консорциума бактерий-эубиотиков. Для получения консорциума штаммов бифидо- и/или лактобактерий производят механическое смешивание лабораторных заквасок в указанных соотношениях.Obtaining a consortium of eubiotics bacteria. To obtain a consortium of strains of bifidobacteria and / or lactobacilli, laboratory starter cultures are mechanically mixed in the indicated proportions.
Содержание пробиотических микроорганизмов в полученной биомассе консорциума ассоциации составляет lg 10 в 1 мл. Приготовление биомассы консорциума ведется термостатным способом в стеклянных стерильных бутылях вместимостью 15 л. Вначале приготавливают в асептических условиях молочную питательную среду на основе обрата молока, нормализованного по сухому остатку СОМО до 13,5-15,0%. В указанную молочную среду дополнительно вводят глюкозу и натрий лимоннокислый в следующем количественном соотношении (мас.%):The content of probiotic microorganisms in the obtained biomass of the association consortium is lg 10 in 1 ml. The biomass of the consortium is prepared in a thermostatic way in sterile glass bottles with a capacity of 15 liters. First, a milk nutrient medium is prepared under aseptic conditions on the basis of a milk back, normalized by dry solids of SOMO to 13.5-15.0%. Glucose and sodium citrate are additionally introduced into the indicated milk medium in the following quantitative ratio (wt.%):
В асептических условиях в стеклянную бутыль, содержащую 9,5 л нормализованной молочной питательной среды, вносят готовую производственную закваску консорциума бифидо- и/или лактобактерий в количестве 0,5 л. Микробную смесь осторожно перемешивают круговым вращением бутыли в течение (1-2) минут. Помещают в термостат типа ТС-80М на (4-5) часов при температуре (39-40)°С. Заквашенную смесь оставляют без перемешивания до образования сгустка и достижения кислотности не менее 90°Т. После образования сгустка бутыли с продуктом захолаживают до температуры (4±2)°С в холодильниках. Для стабилизации и упрочения сгустка захолаживание продукта производят в течение (8-10) ч для последующей иммобилизации на энтеросорбент.Under aseptic conditions, a ready-made production sourdough of a consortium of bifidobacteria and / or lactobacilli in an amount of 0.5 l is introduced into a glass bottle containing 9.5 l of normalized milk nutrient medium. The microbial mixture is carefully mixed in a circular rotation of the bottle for (1-2) minutes. They are placed in a thermostat type TC-80M for (4-5) hours at a temperature of (39-40) ° С. The fermented mixture is left without stirring until a clot forms and an acidity of at least 90 ° T is achieved. After the formation of a clot, the bottles with the product are chilled to a temperature of (4 ± 2) ° C in refrigerators. To stabilize and strengthen the clot, the product is cooled down for (8-10) hours for subsequent immobilization on the enterosorbent.
Процесс иммобилизации ВНИИТУ-2 проводят в асептических условиях. Для иммобилизации берут равные по объему (1:1) количества энтеросорбента ВНИИТУ-2 и биомассу концентрата консорциумов микроорганизмов. Для иммобилизации используют консорциум бифидобактерий (с титром не менее 1010 КОЕ/мл), или консорциум лактобактерий (с титром не менее 108 КОЕ/мл), или их смесь в объемном соотношении от 1:1 до 3:1 соответственно в соответствии с примерами 1-3.The process of immobilization of VNIITU-2 is carried out under aseptic conditions. For immobilization take equal in volume (1: 1) the amount of enterosorbent VNIITU-2 and the biomass of the concentrate of consortia of microorganisms. For immobilization use a consortium of bifidobacteria (with a titer of at least 10 10 CFU / ml), or a consortium of lactobacilli (with a titer of at least 10 8 CFU / ml), or their mixture in a volume ratio of 1: 1 to 3: 1, respectively, in accordance with examples 1-3.
Смесь энтеросорбента ВНИИТУ-2 с клетками бактерий-эубиотиков тщательно перемешивают в течение 5 мин и помещают на шейкер на 1 час при интенсивности 100 колебаний в минуту при температуре 6±2°С. Процесс иммобилизации возможно вести в стеклянной посуде на роллерной установке. Для определения качества иммобилизации из исходного титра бифидобактерий и лактобактерий в концентрате бифидо- и лактобактерий вычитают полученный результат биотитрования. Процесс считается завершенным, если в растворе осталось не более 50% от исходного количества бифидо- и лактобактерий.The mixture of enterosorbent VNIITU-2 with the cells of the bacteria-eubiotics is thoroughly mixed for 5 minutes and placed on a shaker for 1 hour at an intensity of 100 vibrations per minute at a temperature of 6 ± 2 ° C. The process of immobilization can be carried out in glassware on a roller installation. To determine the quality of immobilization from the initial titer of bifidobacteria and lactobacilli in the concentrate of bifidobacteria and lactobacilli, the obtained biotitration result is subtracted. The process is considered completed if no more than 50% of the initial amount of bifidobacteria and lactobacilli remains in the solution.
Далее продукт однократно промывают в изотоническом растворе NaCl. Мутный раствор стерильно сливают, отбирают пробы и проводят контроль полноты процесса иммобилизации по МУК 4.2.577-96 (Методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов, п.7.1 и п.7.10). Процесс считается завершенным, если в растворе осталось не более 50% от исходного количества бифидо- и лактобактерий.Next, the product is washed once in an isotonic NaCl solution. The turbid solution is sterilely drained, samples are taken and the completeness of the immobilization process is monitored according to MUK 4.2.577-96 (Methods of microbiological control of baby food, medical nutrition and their components, clauses 7.1 and clause 7.10). The process is considered completed if no more than 50% of the initial amount of bifidobacteria and lactobacilli remains in the solution.
Отмытый продукт замораживают в низкотемпературном холодильнике типа "Кельвинатор" при температуре минус (40-45)°С в течение (24-48) часов. Кассеты с предварительно замороженным препаратом перегружают в сушильную камеру при достижении температуры плит минус (20-30)°С и камеру вакуумируют. Готовый препарат "Экофлор" в сухой иммобилизованной форме фасуют во флаконы и герметично закрывают пробками. Массовая доля влаги составляет не более 3,0 мас.%.The washed product is frozen in a Kelvinator type low-temperature refrigerator at a temperature of minus (40-45) ° С for (24-48) hours. Cassettes with pre-frozen preparation are loaded into the drying chamber when the temperature of the plates reaches minus (20-30) ° C and the chamber is evacuated. The finished preparation "Ecoflor" in dry immobilized form is Packed in bottles and hermetically closed with corks. Mass fraction of moisture is not more than 3.0 wt.%.
В таблице 1 приведены адсорбционные емкости СУМС-1 (прототип) и ВНИИТУ 2 на основе измерения адсорбции метиленового синего согласно ФС 42-3283-96.Table 1 shows the adsorption capacities of SUMS-1 (prototype) and VNIITU 2 based on measuring the adsorption of methylene blue according to FS 42-3283-96.
Кроме того, энтеросорбенты ВНИИТУ 2 оценивались в биологических тестах по:In addition, VNIITU 2 enterosorbents were evaluated in biological tests by:
1) эффективности биосорбции (отношение количества сорбированных клеток к общему количеству бактерий в исходной суспензии),1) the effectiveness of biosorption (the ratio of the number of adsorbed cells to the total number of bacteria in the initial suspension),
2) эффекивности биодесорбции (отношение количества бактерий, десорбированных с поверхности ВНИИТУ-2, к количеству сорбированных бактерий). Эффективность биодесорбции является важным показателем, во многом определяющим клиническую эффективность энтеросорбента. Результаты биологических тестов приведены в таблице 2.2) the effectiveness of biodesorption (the ratio of the number of bacteria desorbed from the surface of VNIITU-2 to the number of sorbed bacteria). The effectiveness of biodesorption is an important indicator that largely determines the clinical effectiveness of enterosorbent. The results of biological tests are shown in table 2.
Таким образом, по результатам исследований энтеросорбентов ВНИИТУ-2 (таблица 1), адсорбционная емкость которых превышает СУМС-1. Эффективность биодесорбции (таблица 2), определяющая клинический эффект от действия комплексного препарата (отношение количества бактерий, десорбированных с поверхности ВНИИТУ-2 к количеству сорбированных на нем бактерий), равна 1, что показывает, что практически все бактерии могут десорбироваться в желудочно-кишечном тракте.Thus, according to the results of studies of enterosorbents VNIITU-2 (table 1), the adsorption capacity of which exceeds SUMS-1. The biodesorption efficiency (table 2), which determines the clinical effect of the complex preparation (the ratio of the number of bacteria desorbed from the surface of VNIITU-2 to the number of bacteria adsorbed on it), is 1, which shows that almost all bacteria can be desorbed in the gastrointestinal tract .
Результаты доклинических исследованийPreclinical Studies
Проведенные исследования подтвердили, что комплексный препарат «Экофлор» нетоксичен для лабораторных животных, восстанавливает нормобиоценоз кишечника, элиминирует условно-патогенную и патогенную микрофлору, не вызывает побочных и непредвиденных нежелательных реакций, стимулирует процессы адаптации организма к неблагоприятным факторам внешней среды. Основные результаты исследования:Studies have confirmed that the complex preparation "Ecoflor" is non-toxic for laboratory animals, restores intestinal normobiocenosis, eliminates opportunistic and pathogenic microflora, does not cause adverse and unforeseen adverse reactions, stimulates the body's adaptation to adverse environmental factors. The main results of the study:
1) морфометрические показатели животных в экспериментальных группах нарастали в соответствии с популяционным стандартом;1) the morphometric indicators of animals in the experimental groups increased in accordance with the population standard;
2) лабораторные анализы крови оставались в пределах физиологической нормы;2) laboratory blood tests remained within the physiological norm;
3) гистологические исследования органов показали отсутствие токсического воздействия;3) histological examination of organs showed the absence of toxic effects;
4) подтверждено отсутствие повреждающего действия на структуру кишечного эпителия со стороны препарата;4) confirmed the absence of a damaging effect on the structure of the intestinal epithelium from the side of the drug;
5) патолого-анатомическое вскрытие подтвердило состояние органов в норме. Полученные результаты свидетельствуют о том, что комплексный препарат «Экофлор» успешно прошел доклинические испытания.5) pathological anatomical autopsy confirmed the condition of the organs is normal. The results obtained indicate that the complex preparation "Ecoflor" successfully passed preclinical trials.
Результаты клинических исследований препарата "Экофлор"The results of clinical studies of the drug "Ecoflor"
Все пациенты (45 человек - экспериментальная группа и 25 человек - группа сравнения) имели хроническую патологию: атопический дерматит - в 44,4% случаев; острый аллергоз - в 11,1% случаев; вторичный хронический пиелонефрит - в 22,2% случаев; сахарный диабет - в 11,1% случаев; бронхиальная астма - в 11,1% случаев.All patients (45 people - the experimental group and 25 people - the comparison group) had a chronic pathology: atopic dermatitis - in 44.4% of cases; acute allergosis - in 11.1% of cases; secondary chronic pyelonephritis - in 22.2% of cases; diabetes mellitus - in 11.1% of cases; bronchial asthma - in 11.1% of cases.
После проведенного экспериментального курса лечения комплексным препаратом «Экофлор» были получены следующие результаты:After the experimental course of treatment with the complex drug Ecoflor, the following results were obtained:
1) препарат «Экофлор» способствует уменьшению абдоминального болевого синдрома, проявлений диспепсического синдрома, нормализации моторной функции кишечника, регрессу кожных высыпаний;1) the drug "Ecoflor" helps to reduce abdominal pain, manifestations of dyspeptic syndrome, normalization of intestinal motor function, regression of skin rashes;
2) применение «Экофлора» способствует уменьшению субъективных клинических (недомогание, слабость нарушение аппетита) и объективных лабораторных критериев (нормализация лейкоцитарного индекса интоксикации и гематологического показателя интоксикации, купирование синдрома цитолиза и нормализация общего белка сыворотки крови, а также уменьшение выраженности мочевого синдрома), отражающих синдром эндогенной интоксикации;2) the use of "Ecoflora" helps to reduce subjective clinical (malaise, weakness, loss of appetite) and objective laboratory criteria (normalization of the leukocyte intoxication index and hematological index of intoxication, relief of cytolysis syndrome and normalization of total serum protein, as well as a decrease in the severity of urinary syndrome), reflecting endogenous intoxication syndrome;
3) при использовании препарата «Экофлор» в 62,2% наблюдается полное восстановление функций переваривания и всасывания в кишечнике, у остальных больных - тенденция к нормализации показателей;3) when using the Ecoflor drug in 62.2%, a complete restoration of the functions of digestion and absorption in the intestine is observed, in the remaining patients there is a tendency to normalization of indicators;
4) препарат «Эклофлор» способствует восстановлению кишечной микрофлоры: кишечной палочки, бифидофлоры; снижению кокковых форм, кишечной палочки со слабо выраженными ферментными свойствами, лактозонегативных энтеробактерий;4) the drug "Ecloflor" helps to restore intestinal microflora: E. coli, bifidoflora; decrease in coccal forms, E. coli with weak enzyme properties, lactose-negative enterobacteria;
5) при приеме препарата не выявлены побочные эффекты и осложнения.5) when taking the drug, no side effects and complications were detected.
Таким образом, препарат успешно прошел клинические испытания, является безвредным и высокоэффективным средством в отношении восстановления нормобиоценоза кишечника и купирования синдрома эндогенной интоксикации.Thus, the drug has successfully passed clinical trials, is a harmless and highly effective tool for restoring intestinal normobiocenosis and stopping endogenous intoxication syndrome.
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008104741/13A RU2371479C1 (en) | 2008-02-12 | 2008-02-12 | Complex probiotic medicine in immobilised and lyophilised form |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008104741/13A RU2371479C1 (en) | 2008-02-12 | 2008-02-12 | Complex probiotic medicine in immobilised and lyophilised form |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008104741A RU2008104741A (en) | 2009-08-20 |
| RU2371479C1 true RU2371479C1 (en) | 2009-10-27 |
Family
ID=41150541
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008104741/13A RU2371479C1 (en) | 2008-02-12 | 2008-02-12 | Complex probiotic medicine in immobilised and lyophilised form |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2371479C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2530174C2 (en) * | 2012-09-14 | 2014-10-10 | Закрытое Акционерное Общество "Производственная Фармацевтическая Компания Обновление" | Bacterial system for normalising microbiocenosis of human and animal organism |
| RU2586486C1 (en) * | 2015-08-26 | 2016-06-10 | Алексей Владимирович Шабалин | Method for production of fermented milk beverage |
| RU2599422C2 (en) * | 2010-07-05 | 2016-10-10 | Бифинов | Macromolecular complex of bacterial origin and use thereof for preventing or treating rheumatoid arthritis |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2118535C1 (en) * | 1997-03-20 | 1998-09-10 | Институт клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН | Complex bacterial preparation |
| RU2164801C1 (en) * | 1999-12-06 | 2001-04-10 | Дочернее государственное унитарное экспериментально-производственное предприятие "Вектор-Биальгам" | Preparation-probiotic as dry immobilized form |
| RU2006100740A (en) * | 2006-01-10 | 2007-07-20 | Закрытое акционерное общество "Вектор-БиАльгам" (RU) | INTEGRATED PROBIOTIC DRUG IN IMMOBILIZED AND LYOPHILIZED FORM AND METHOD FOR ITS PRODUCTION |
-
2008
- 2008-02-12 RU RU2008104741/13A patent/RU2371479C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2118535C1 (en) * | 1997-03-20 | 1998-09-10 | Институт клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН | Complex bacterial preparation |
| RU2164801C1 (en) * | 1999-12-06 | 2001-04-10 | Дочернее государственное унитарное экспериментально-производственное предприятие "Вектор-Биальгам" | Preparation-probiotic as dry immobilized form |
| RU2006100740A (en) * | 2006-01-10 | 2007-07-20 | Закрытое акционерное общество "Вектор-БиАльгам" (RU) | INTEGRATED PROBIOTIC DRUG IN IMMOBILIZED AND LYOPHILIZED FORM AND METHOD FOR ITS PRODUCTION |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Отчет ограниченных клинических испытаний безопасности и эффективности биологически активной добавки "ЭКОФЛОР". Министерство здравоохранения России. Новосибирск, 2004. ЛИХОЛОБОВ В. Технический углерод с разных точек зрения. Наука в Сибири. Еженедельная газета Сибирского отделения Российской академии наук. №35(2331), сентябрь 2001 г. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2599422C2 (en) * | 2010-07-05 | 2016-10-10 | Бифинов | Macromolecular complex of bacterial origin and use thereof for preventing or treating rheumatoid arthritis |
| RU2530174C2 (en) * | 2012-09-14 | 2014-10-10 | Закрытое Акционерное Общество "Производственная Фармацевтическая Компания Обновление" | Bacterial system for normalising microbiocenosis of human and animal organism |
| RU2586486C1 (en) * | 2015-08-26 | 2016-06-10 | Алексей Владимирович Шабалин | Method for production of fermented milk beverage |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008104741A (en) | 2009-08-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102171329B (en) | Lactic acid bacterium having high oxalic acid decomposition ability | |
| CN101919879B (en) | Method for preparing probiotics preparation by taking attapulgite as carrier | |
| JP5409623B2 (en) | Zinc-enriched biomass, its preparation method, and probiotic products, cosmetics, dietary products and nutritional supplements containing the same | |
| KR100899615B1 (en) | Process for producing 1,4-dihydroxy-2-naphthoic acid | |
| US20120009167A1 (en) | Solid composition containing bacillus-type non-pathogenic bacterial spores | |
| CN1272791A (en) | Pharmaceutical preparation comprising lactobacillus casei phamnosus | |
| CN116024131B (en) | Lactobacillus plantarum strain GOLDGUT-LP101 and application thereof | |
| CN107287136A (en) | A kind of preparation method of the prebiotic solid lactic acid bacteria agent with prebiotic function | |
| RU2164801C1 (en) | Preparation-probiotic as dry immobilized form | |
| RU2118535C1 (en) | Complex bacterial preparation | |
| CN117025456A (en) | Lactobacillus paracasei A21151 with blood uric acid reducing and anti-inflammatory effects and application thereof | |
| WO2001098516A2 (en) | Siderophores-producing bifidobacteria thereby and uses thereof | |
| RU2371479C1 (en) | Complex probiotic medicine in immobilised and lyophilised form | |
| CN105132328A (en) | Lactobacillus fermentum strain suo capable of preventing gastric ulcers and application of lactobacillus fermentum strain suo | |
| RU2317089C2 (en) | Complex preparation-probiotic in immobilized and lyophilized form and method for its obtaining | |
| RU2471864C1 (en) | Probiotic preparation for viral and bacterial infections toxisporin, method for preparing it, bacillus licheniformis bacterial strain used as ingredient of probiotic preparation | |
| RU2228184C2 (en) | Complex preparation | |
| WO2009051510A1 (en) | Immobilised and lyophilised complex probiotic preparation and a method for the production thereof | |
| CN105154362A (en) | Lactobacillus fermentum suo strain capable of preventing gastrohelcoma and health-care application thereof | |
| RU2142504C1 (en) | Method of preparing biologically active addition as dried form containing bacteria-eubiotics and filling for bread and confectionery articles based on said | |
| CN113767983A (en) | A kind of human milk freeze-dried powder composition containing infant probiotics and preparation method and application | |
| CN105132330A (en) | Lactobacillus fermentum strain Lee capable of preventing gastric ulcers and application of lactobacillus fermentum strain Lee | |
| CN119060917B (en) | A strain of Lactobacillus plantarum with uric acid-lowering effect, microcapsule, preparation method and application thereof | |
| CN105925645A (en) | Preparation method of active lactobacillin and application of active lactobacillin in biological feed | |
| RU2740140C1 (en) | Method of producing and a composition for increasing the effectiveness of probiotic microorganisms |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110213 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20131127 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160213 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20170213 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180213 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20181119 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200213 |