RU2371186C1 - Способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов - Google Patents
Способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2371186C1 RU2371186C1 RU2008122457/14A RU2008122457A RU2371186C1 RU 2371186 C1 RU2371186 C1 RU 2371186C1 RU 2008122457/14 A RU2008122457/14 A RU 2008122457/14A RU 2008122457 A RU2008122457 A RU 2008122457A RU 2371186 C1 RU2371186 C1 RU 2371186C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- patient
- lymphocytes
- culture
- centrifugation
- rpmi
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 82
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 11
- 208000014674 injury Diseases 0.000 title abstract description 7
- 230000008733 trauma Effects 0.000 title abstract description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 title abstract 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 30
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 25
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 claims abstract description 24
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 8
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 23
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 21
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 20
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 20
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 12
- 230000003484 traumatologic effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 abstract 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 6
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 6
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 4
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 4
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 3
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 3
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 3
- 208000008822 Ankylosis Diseases 0.000 description 2
- 206010023198 Joint ankylosis Diseases 0.000 description 2
- 241001227561 Valgus Species 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 210000000245 forearm Anatomy 0.000 description 2
- 210000004394 hip joint Anatomy 0.000 description 2
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 2
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 208000007333 Brain Concussion Diseases 0.000 description 1
- 208000018652 Closed Head injury Diseases 0.000 description 1
- 208000024779 Comminuted Fractures Diseases 0.000 description 1
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии, ортопедии, и может быть использовано в качестве профилактических мероприятий по предотвращению гнойно-воспалительных осложнений у пациентов травматолого-ортопедического профиля. Для этого накануне оперативного вмешательства из любой центральной или периферической вены пациента осуществляют забор цельной крови в объеме 10 мл в шприц, предварительно промытый гепарином. Полученную цельную кровь отстаивают в течение 100-140 минут, отбирают лимфоцитарную фракцию в количестве 0,5-1,5 мл с последующим введением в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и 5 мл собственной сыворотки пациента. Полученную клеточную взвесь разливают по 2 мл в стерильные емкости и вводят в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10% раствора фитогемоагглютинина в культуральной среде RPMI-1640. Емкости с культурой лимфоцитов размещают в термостате и выдерживают при температуре 37°С в течение 72 часов. Затем полученную в каждой емкости клеточную культуру аутологичных лимфоцитов центрифугируют 3-5 раз по 10 минут со скоростью вращения 800-1200 об/мин, при этом после каждого центрифугирования надосадочную жидкость сливают и в каждую емкость добавляют по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования. По окончании центрифугирования клеточную массу аутологичных лимфоцитов забирают из всех емкостей в шприц, куда добавляют 10 мл физиологического раствора с последующим введением полученной массы внутривенно в любую центральную или периферическую вену в течение 30-70 секунд. Введение полученной таким образом клеточной массы проводят до выполнения оперативного вмешательства, или интраоперационно, или через 2-3 дня после оперативного вмешательства. Также введение клеточной массы аутологичных лимфоцитов можно осуществить повторно через 7-14 дней после первоначального введения. Способ позволяет обеспечить усиление иммунной реактивности организма в послеоперационном периоде за счет увеличения количества лимфоцитов в крови. 1 з.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии, ортопедии и реабилитации, к способам профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов, и может быть использовано для профилактики гнойно-воспалительных осложнений у пациентов в условиях хирургических, травматологических и других стационаров.
Известен способ лечения гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов, включающий забор крови пациента, выращивание лимфоцитов и внутривенное введение их пациенту (см. Г.А.Кесян и др. Ремоделирование защитных свойств организма при обширных оперативных вмешательствах в травматологии и ортопедии. Медицинский вестник Эребуни, Национальная академия наук Армении, Ереван, 2006 г., №3 (27), с.140-141).
Однако известный способ при своем использовании обладает следующими недостатками:
- не обеспечивает надежного лечения и профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов после перенесенной высокой хирургической агрессии,
- не обеспечивает достаточно благоприятное течение травматической болезни,
- не обеспечивает необходимого и достаточного увеличения количества лимфоцитов в крови пациента после перенесенной высокой хирургической агрессии,
- не достаточно обеспечивает повышение клеточного иммунитета,
- не достаточно обеспечивает у пациента необходимое повышение иммуноглобулинов.
Задачей изобретения является создание способа профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов.
Техническим результатом является возможность обеспечения надежной профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов после перенесенного оперативного вмешательства, обеспечение необходимого и достаточного увеличения количества лимфоцитов в крови пациента после перенесенного оперативного вмешательства, а также обеспечение достаточно благоприятного течения травматической болезни пациента после перенесенной высокой хирургической агрессии. Кроме того, техническим результатом является обеспечение у пациента необходимого повышения иммуноглобулинов.
Технический результат достигается тем, что в предлагаемом способе профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов забор цельной крови пациента проводят накануне оперативного вмешательства из любой его центральной или периферической вены в предварительно промытый гепарином шприц в количестве 10 мл и отстаивают ее в течение 100-140 минут, отбирают лимфоцитарную фракцию в количестве 0,5-1,5 мл и вводят в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640, а также 5 мл собственной сыворотки пациента, разливают полученную клеточную взвесь в стерильные емкости по 2 мл и вводят в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10% раствора фитогемоагглютинина в культуральной среде RPMI-1640, емкости с культурой лимфоцитов размещают в термостате и выдерживают при температуре 37°С в течение 72 часов, затем полученную в каждой емкости клеточную культуру аутологичных лимфоцитов центрифугируют 3-5 раз при скорости вращения 1000 об/мин по 10 минут, при этом после каждого центрифугирования сливают надосадочную жидкость и в каждую емкость добавляют по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования клеточной культуры аутологичных лимфоцитов, затем после окончания центрифугирования забирают из всех емкостей в шприц клеточную массу аутологичных лимфоцитов, в шприц с набранной клеточной массой аутологичных лимфоцитов добавляют 10 мл физиологического раствора и вводят внутривенно пациенту в любую центральную или периферическую вену в течение 30-70 секунд, при этом внутривенное введение пациенту клеточной массы аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе осуществляют до выполнения оперативного вмешательства, или интраоперационно, или через 2-3 дня после оперативного вмешательства. При этом внутривенное введение пациенту клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе дополнительно осуществляют повторно через 7-14 дней после ее первоначального введения.
Способ осуществляется следующим образом. Накануне оперативного вмешательства выполняют забор цельной крови пациента из любой его центральной или периферической вены в предварительно промытый гепарином шприц в количестве 10 мл. Забранную цельную кровь пациента отстаивают в течение 100-140 минут. Отбирают лимфоцитарную фракцию в количестве 0,5-1,5 мл и вводят в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640, а также 5 мл собственной сыворотки пациента. Полученную клеточную взвесь разливают в стерильные емкости по 2 мл и вводят в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10% раствора фитогемоагглютинина в культуральной среде RPMI-1640. Емкости с культурой лимфоцитов размещают в термостате и выдерживают при температуре 37°С в течение 72 часов. Полученную в каждой емкости клеточную культуру аутологичных лимфоцитов центрифугируют 3-5 раз при скорости вращения 800-1200 об/мин в течение 10 минут каждое центрифугирование. При этом после каждого центрифугирования сливают надосадочную жидкость и в каждую емкость добавляют по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования клеточной культуры аутологичных лимфоцитов. После окончания центрифугирования забирают из всех емкостей в шприц клеточную массу аутологичных лимфоцитов, в шприц с набранной клеточной массой аутологичных лимфоцитов добавляют 10 мл физиологического раствора и вводят внутривенно пациенту в любую центральную или периферическую вену в течение 30-70 секунд. При этом внутривенное введение пациенту клеточной массы аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе осуществляют до выполнения оперативного вмешательства, или интраоперационно, или через 2-3 дня после выполнения оперативного вмешательства. Внутривенное введение пациенту клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе дополнительно осуществляют повторно через 7-14 дней после ее первоначального введения.
Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов, отличительными являются:
- осуществление забора цельной крови пациента накануне оперативного вмешательства из любой его центральной или периферической вены в предварительно промытый гепарином шприц в количестве 10 мл и отстаивание ее в течение 100-140 минут,
- отбор лимфоцитарной фракции пациента в количестве 0,5-1,5 мл и введение в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640, а также 5 мл собственной сыворотки пациента,
- разливание полученной клеточной взвеси в стерильные емкости по 2 мл и введение в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10% раствора фитогемоагглютинина в культуральной среде RPMI-1640,
- размещение емкостей с культурой лимфоцитов в термостате и их выдерживание при температуре 37°С в течение 72 часов,
- выполнение центрифугирования полученной в каждой емкости клеточной культуры аутологичных лимфоцитов 3-5 раз при скорости вращения 800-1200 об/мин в течение 10 минут для каждого центрифугирования,
- удаление после каждого центрифугирования надосадочной жидкости и добавление в каждую емкость по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования клеточной культуры аутологичных лимфоцитов,
- забор после окончания центрифугирования из всех емкостей в шприц клеточной массы аутологичных лимфоцитов, добавление в шприц с набранной клеточной массой аутологичных лимфоцитов 10 мл физиологического раствора и введение содержимого шприца внутривенно пациенту в любую центральную или периферическую вену в течение 30-70 секунд,
- выполнение внутривенного введения пациенту клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе до выполнения оперативного вмешательства, или интраоперационно, или через 2-3 дня после оперативного вмешательства,
- выполнение дополнительного повторного внутривенного введения пациенту клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе через 7-14 дней после ее первоначального введения.
Экспериментальные исследования предложенного способа профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ при своем использовании обеспечивает необходимое и достаточное увеличение количества лимфоцитов в крови пациента после перенесенного оперативного вмешательства, а также обеспечивает достаточно благоприятное течение травматической болезни пациента после перенесенной высокой хирургической агрессии. Кроме того, достигнуто обеспечение у пациента необходимого повышения иммуноглобулинов, отсутствует реакция отторжения, а также отсутствуют аллергические реакции организма пациента.
Реализация предложенного способа профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов иллюстрируется следующими клиническими примерами.
Пример 1. Пациент А., 47 лет, поступил в 8 травматолого-ортопедическое отделение ФГУ ЦИТО с диагнозом «Сочетанная травма. Закрытая черепно-мозговая травма. Сотрясение головного мозга. Закрытый оскольчатый перелом правой бедренной кости со смещением отломков». Анализ иммунного статуса показал: общее количество лимфоцитов 1,0×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов 0,68×109/л.
Пациенту на 7 сутки после травмы выполнили оперативное вмешательство - остеосинтез правой бедренной кости пластиной.
Накануне оперативного вмешательства выполнили забор цельной крови пациента из его центральной вены в предварительно промытый гепарином шприц в количестве 10 мл. Забранную цельную кровь пациента отстаивали в течение 100 минут. Отобрали лимфоцитарную фракцию в количестве 1,5 мл и ввели в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640, а также 5 мл собственной сыворотки пациента. Полученную клеточную взвесь разлили в стерильные емкости по 2 мл и ввели в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10% раствора фитогемоагглютинина в культуральной среде RPMI-1640. Емкости с культурой лимфоцитов разместили в термостате и выдержали при температуре 37°С в течение 72 часов. Полученную в каждой емкости клеточную культуру аутологичных лимфоцитов центрифугировали 5 раз с использованием высокоскоростной центрифуги типа Т-24 при скорости вращения 800 об/мин по 10 минут каждое центрифугирование. После каждого центрифугирования сливали надосадочную жидкость и в каждую емкость добавляли по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования. После окончания центрифугирования забрали из всех емкостей в шприц клеточную массу аутологичных лимфоцитов, добавили в шприц с набранной клеточной массой аутологичных лимфоцитов 10 мл физиологического раствора и содержимое шприца ввели внутривенно пациенту в кубитальную вену предплечья в течение 70 секунд, причем внутривенное введение пациенту клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе провели через 2 дня после выполнения оперативного вмешательства. При этом осуществили дополнительное повторное внутривенное введение пациенту клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе через 12 дней после ее первоначального введения.
Послеоперационный период - гладкий. Заживление послеоперационной раны первичное. Показатели клеточного иммунитета нарастали уже на следующий день после введения культуры аутологичных лимфоцитов. К 3-5 дню после введения общее количество лимфоцитов в крови пациента составило 1,3×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов составило 0,8×109/л, количество Т-супрессоров составило 0,013×109/л. К 10 дню после введения общее количество лимфоцитов в крови пациента составило 1,4×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов составило 1,0×109/л, количество Т-супрессоров составило 0,018×109. Определено увеличение содержания иммуноглобулинов классов G, M и A.
Швы сняты на 14 сутки. В результате лечения гнойно-воспалительных осложнений у пациента не наблюдалось. Перелом сросся. Аллергические реакции отсутствуют.
Пример 2. Пациентка К., 65 лет, поступила в 8 травматолого-ортопедическое отделение ФГУ ЦИТО с диагнозом «Правосторонний гонартроз 3-4 степени, выраженная вальгусная деформация нижней конечности, анкилоз правого тазобедренного сустава». Анализ иммунного статуса показал: общее количество лимфоцитов 0,95×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов 0,64×109/л.
Пациентке выполнили оперативное вмешательство - надмыщелковая остеотомия бедра и надкостный остеосинтез из расширенного латерального доступа.
До оперативного вмешательства выполнили забор цельной крови пациентки из ее центральной вены в предварительно промытый гепарином шприц в количестве 10 мл. Забранную цельную кровь пациентки отстаивали в течение 120 минут. Отобрали лимфоцитарную фракцию в количестве 1,0 мл и ввели в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640, а также 5 мл собственной сыворотки пациентки. Полученную клеточную взвесь разлили в стерильные емкости по 2 мл и ввели в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10% раствора фитогемоагглютинина в культуральной среде RPMI-1640. Емкости с культурой лимфоцитов разместили в термостате и выдержали при температуре 37°С в течение 72 часов. Полученную в каждой емкости клеточную культуру аутологичных лимфоцитов центрифугировали 4 раза с использованием высокоскоростной центрифуги типа Т-24 при скорости вращения 1200 об/мин по 10 минут каждое центрифугирование. После каждого центрифугирования сливали надосадочную жидкость и в каждую емкость добавляли по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования. После окончания центрифугирования забрали из всех емкостей в шприц клеточную массу аутологичных лимфоцитов, добавили в шприц с набранной клеточной массой аутологичных лимфоцитов 10 мл физиологического раствора и содержимое шприца ввели внутривенно пациентке в кубитальную вену предплечья в течение 50 секунд, причем внутривенное введение пациентке клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе осуществили интраоперационно.
Послеоперационный период - гладкий. Заживление послеоперационной раны первичное. Показатели клеточного иммунитета нарастали уже на следующий день после введения культуры аутологичных лимфоцитов. К 3-5 дню после введения общее количество лимфоцитов в крови пациентки составило 1,25×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов составило 0,75×109/л, количество Т-супрессоров составило 0,012×109/л. К 10 дню после введения общее количество лимфоцитов в крови пациентки составило 1,4×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов составило
1,0×109/л, количество Т-супрессоров составило 0,017×109. Определено увеличение содержания иммуноглобулинов классов G, M и A.
Швы сняты на 16 сутки. В результате лечения гнойно-воспалительных осложнений у пациентки не наблюдалось. Аллергические реакции отсутствуют.
Пример 3. Пациентка Д., 69 лет, поступила в 8 травматолого-ортопедическое отделение ФГУ ЦИТО с диагнозом «Левосторонний гонартроз 3-4 степени, выраженная вальгусная деформация нижней конечности, анкилоз левого тазобедренного сустава». Анализ иммунного статуса показал: общее количество лимфоцитов 0,9×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов 0,60×109/л.
Пациентке выполнили оперативное вмешательство - надмыщелковая остеотомия бедра и надкостный остеосинтез из расширенного латерального доступа.
До оперативного вмешательства выполнили забор цельной крови пациентки из ее периферической вены в предварительно промытый гепарином шприц в количестве 10 мл. Забранную цельную кровь пациентки отстаивали в течение 100 минут. Отобрали лимфоцитарную фракцию в количестве 0,5 мл и ввели в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640, а также 5 мл собственной сыворотки пациентки. Полученную клеточную взвесь разлили в стерильные емкости по 2 мл и ввели в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10% раствора фитогемоагглютинина в культуральной среде RPMI-1640. Емкости с культурой лимфоцитов разместили в термостате и выдержали при температуре 37°С в течение 72 часов. Полученную в каждой емкости клеточную культуру аутологичных лимфоцитов центрифугировали 3 раза с использованием высокоскоростной центрифуги типа Т-24 при скорости вращения 1000 об/мин по 10 минут каждое центрифугирование. После каждого центрифугирования сливали надосадочную жидкость и в каждую емкость добавляли по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования. После окончания центрифугирования забрали из всех емкостей в шприц клеточную массу аутологичных лимфоцитов, добавили в шприц с набранной клеточной массой аутологичных лимфоцитов 10 мл физиологического раствора и содержимое шприца ввели внутривенно пациентке в кубитальную вену предплечья в течение 30 секунд, причем внутривенное введение пациентке клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе осуществили за один день до выполнения оперативного вмешательства.
Послеоперационный период - гладкий. Заживление послеоперационной раны первичное. Показатели клеточного иммунитета нарастали уже на следующий день после введения культуры аутологичных лимфоцитов. К 3-5 дню после введения общее количество лимфоцитов в крови пациентки составило 1,25×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов составило 0,78×109/л, количество Т-супрессоров составило 0,011×109/л. К 10 дню после введения общее количество лимфоцитов в крови пациентки составило 1,3×109/л, абсолютное количество Т-лимфоцитов составило
0,9×109/л, количество Т-супрессоров составило 0,017×109. Определено увеличение содержания иммуноглобулинов классов G, M и A.
Швы сняты на 14 сутки. В результате лечения гнойно-воспалительных осложнений у пациентки не наблюдалось. Аллергические реакции отсутствуют.
Предложенный способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов применен при лечении 40 пациентов с различной патологией и переломами трубчатых костей скелета. Случаев гнойно-воспалительных осложнений у пациентов не наблюдалось. Переломы срослись у всех пациентов. При этом отмечено обеспечение усиления иммунной реактивности организма пациентов. Предложенный способ не вносит чужеродной информации, так как основывается на вызванных собственными клетками реакциях.
Claims (2)
1. Способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов, включающий забор крови пациента, выращивание лимфоцитов и внутривенное введение их пациенту, отличающийся тем, что забор цельной крови пациента осуществляют накануне оперативного вмешательства из любой его центральной или периферической вены в предварительно промытый гепарином шприц в количестве 10 мл и отстаивают ее в течение 100-140 мин, отбирают лимфоцитарную фракцию в количестве 0,5-1,5 мл и вводят в нее 5 мл культуральной среды RPMI-1640, а также 5 мл собственной сыворотки пациента, разливают полученную клеточную взвесь в стерильные емкости по 2 мл и вводят в каждую емкость по 5 мл культуральной среды RPMI-1640 и по 0,01 мл 10%-ного раствора фитогемоаглютинина в культуральной среде RPMI-1640, емкости с культурой лимфоцитов размещают в термостате и выдерживают при температуре 37°С в течение 72 ч, затем полученную в каждой емкости клеточную культуру аутологичных лимфоцитов центрифугируют 3-5 раз при скорости вращения 800-1200 об/мин по 10 мин, при этом после каждого центрифугирования сливают надосадочную жидкость и в каждую емкость добавляют по 5 мл физиологического раствора для повторения центрифугирования клеточной культуры аутологичных лимфоцитов, затем после окончания центрифугирования забирают из всех емкостей в шприц клеточную массу аутологичных лимфоцитов, в шприц с набранной клеточной массой аутологичных лимфоцитов добавляют 10 мл физиологического раствора и вводят внутривенно пациенту в любую центральную или периферическую вену в течение 30-70 с, при этом внутривенное введение пациенту клеточной массы аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе осуществляют до выполнения оперативного вмешательства, или интраоперационно или через 2-3 дня после оперативного вмешательства.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что внутривенное введение пациенту клеточной культуры аутологичных лимфоцитов в физиологическом растворе дополнительно осуществляют повторно через 7-14 дней после ее первоначального введения.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008122457/14A RU2371186C1 (ru) | 2008-06-06 | 2008-06-06 | Способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008122457/14A RU2371186C1 (ru) | 2008-06-06 | 2008-06-06 | Способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2371186C1 true RU2371186C1 (ru) | 2009-10-27 |
Family
ID=41353001
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008122457/14A RU2371186C1 (ru) | 2008-06-06 | 2008-06-06 | Способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2371186C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1456155A1 (ru) * | 1987-04-23 | 1989-02-07 | Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови | Способ лечени гнойно-септических заболеваний стафилококковой этиологии |
| RU2280469C2 (ru) * | 2004-03-03 | 2006-07-27 | Павел Евгеньевич Крайнюков | Способ лечения гнойного заболевания пальца кисти |
| WO2006116717A2 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Autologous somatic cells from peripheral blood and uses thereof |
-
2008
- 2008-06-06 RU RU2008122457/14A patent/RU2371186C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1456155A1 (ru) * | 1987-04-23 | 1989-02-07 | Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови | Способ лечени гнойно-септических заболеваний стафилококковой этиологии |
| RU2280469C2 (ru) * | 2004-03-03 | 2006-07-27 | Павел Евгеньевич Крайнюков | Способ лечения гнойного заболевания пальца кисти |
| WO2006116717A2 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Autologous somatic cells from peripheral blood and uses thereof |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| КЕСЯН Г.А. и др. Ремоделирование защитных свойств организма при обширных оперативных вмешательствах в травматологии и ортопедии. - Медицинский вестник ЭРЕБУНИ, №3(27). - Ереван, 2006, с.140-141. * |
| реферат. КЕСЯН Г.А. и др. Патогенетическое лечение огнестрельных ранений конечностей. - Вестник травматологии и ортопедии им. Н.Н.Приорова, №2, апрель-июнь, 2001, с.30-33. NANCHAHAL J. et al., New grafts for old? A review of alternatives to autologous skin., Br J Plast Surg. 1992 Jul; 45(5):3 54-63, реферат. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ChADDhA et al. | Management of massive posttraumatic bone defects in the lower limb with the Ilizarov technique. | |
| Society | Open reduction and internal fixation compared with circular fixator application for bicondylar tibial plateau fractures. Results of a multicenter, prospective, randomized clinical trial | |
| Henning et al. | Platelet-rich plasma in the foot and ankle | |
| RU2371186C1 (ru) | Способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений у травматолого-ортопедических пациентов с использованием культуры аутологичных лимфоцитов | |
| Zan et al. | Efficacy of a four-hour drainage clamping technique in the reduction of blood loss following total hip arthroplasty: a prospective cohort study | |
| RU2620047C1 (ru) | Способ прогнозирования инфекционных осложнений при эндопротезировании крупных суставов | |
| Evans et al. | The effects of platelet-rich plasma and activated collagen on wound healing in primary total joint arthroplasty | |
| Razaq et al. | The role of intraarticular platelet rich plasma (PRP) injection in patients with internal knee derangements | |
| Kakria | Evolution in fracture management | |
| Mashhour et al. | Management of Delayed Union of Tibial Shaft Fractures by Platelet Rich Plasma | |
| KUMAR et al. | Diaphyseal humeral fractures treated by bracing versus dynamic compression plate | |
| Thursina et al. | The role of platelet rich plasma in knee joint pain | |
| Malik et al. | Role of percutaneous bone marrow aspirate injection in delayed union of femur and tibia diaphyseal fractures | |
| Peng et al. | Dual locking plate fixation, PRP-augmented autologous bone grafting, and bioactive core construction for femoral fracture nonunion: a retrospective study of 52 cases | |
| RU2781151C2 (ru) | Способ профилактики развития инфекции области хирургического вмешательства после эндопротезирования тазобедренного сустава | |
| Guerra-Farfan et al. | Long-Term Results of Treatment with Mesenchymal Stem Cells, Growth Factors and Neural Regulation in Post-Traumatic Osteoarthritis of the Ankle | |
| Khegay et al. | Нematological indicators of blood rabbits in therapy of limb bone fractures with plasma enriched with plate | |
| Pop et al. | Acute compartment syndrome of the upper extremity-case report | |
| Mekaouche | Platelet-rich plasma therapy for scaphoid fracture nonunion | |
| Pandit et al. | Outcome of Enhanced recovery after surgery protocol in a patients undergoing pancreatic surgery | |
| Dilekci et al. | Effect of single or multiple injection of platelet-rich plasma in comparison with hyaluronic acid on knee osteoarthritis. | |
| Upadhyay et al. | EFFICACY OF AUTOLOGOUS PLATELET-RICH PLASMA INJECTION IN KNEE OSTEOARTHRITIS | |
| CN111214486A (zh) | 一种富镁人工脑脊液及其制备方法和应用 | |
| Satış et al. | A Case of Septic Arthritis After Platelet-Rich Plasma Administration: First Case Report | |
| Kornah et al. | Comparison of intra-articular versus intravenous application of tranexamic acid in total knee arthroplasty: A prospective randomized study |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100607 |