RU2370031C2 - Method of conservation of biological transplants in gel-containing sterilising medium - Google Patents
Method of conservation of biological transplants in gel-containing sterilising medium Download PDFInfo
- Publication number
- RU2370031C2 RU2370031C2 RU2007149032/14A RU2007149032A RU2370031C2 RU 2370031 C2 RU2370031 C2 RU 2370031C2 RU 2007149032/14 A RU2007149032/14 A RU 2007149032/14A RU 2007149032 A RU2007149032 A RU 2007149032A RU 2370031 C2 RU2370031 C2 RU 2370031C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gel
- transplants
- bone
- conservation
- biological
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 title description 8
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 4
- WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]-2-methylpyrimidin-4-yl]amino]-n-(2-methyl-6-sulfanylphenyl)-1,3-thiazole-5-carboxamide;hydrate Chemical compound O.C=1C(N2CCN(CCO)CC2)=NC(C)=NC=1NC(S1)=NC=C1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1S WXHLLJAMBQLULT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 claims description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 abstract description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 23
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 9
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 8
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 5
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 5
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 5
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 5
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 4
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 3
- 230000002138 osteoinductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N Isophenergan Chemical compound C1=CC=C2N(CC(C)N(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 2
- 229920000704 biodegradable plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000011164 ossification Effects 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 238000011316 allogeneic transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011882 arthroplasty Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002639 bone cement Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 238000005115 demineralization Methods 0.000 description 1
- 230000002328 demineralizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 210000004394 hip joint Anatomy 0.000 description 1
- 238000011540 hip replacement Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000002278 reconstructive surgery Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в различных областях восстановительной хирургии для изготовления биологических трансплантатов с высокими биопластическими качествами.The invention relates to medicine and can be used in various fields of reconstructive surgery for the manufacture of biological transplants with high bioplastic qualities.
Известен способ заготовки биологических тканей в гельсодержащей стерилизующей среде, состоящей из консервирующего раствора, например №9 ЦОЛИПК, геля (1% агар или 9% желатин) и антисептиков: неомицина, полимиксина, пипольфена или формалина [1, 2].There is a method of harvesting biological tissues in a gel-containing sterilizing medium consisting of a preserving solution, for example No. 9 TSOLIPK, gel (1% agar or 9% gelatin) and antiseptics: neomycin, polymyxin, pipolfen or formalin [1, 2].
К недостаткам способа следует отнести сложность состава и приготовления консерванта, а также недостаточную надежность антисептического комплекса по отношению к грибкам и плесени. Использованные в среде антибиотики и пипольфен к настоящему времени утратили свое значение, их выпуск в стране практически прекращен. Замена антисептического комплекса 0,5% раствором формалина также оказалась не совсем удачной, поскольку формалин в такой концентрации слишком сильно фиксирует биологические препараты, снижая их полезные качества.The disadvantages of the method include the complexity of the composition and preparation of the preservative, as well as the insufficient reliability of the antiseptic complex in relation to fungi and mold. Antibiotics and pipolfen used in the environment have by now lost their significance; their release in the country has practically ceased. Replacing the antiseptic complex with a 0.5% formalin solution was also not entirely successful, since formalin in such a concentration fixes biological preparations too much, reducing their useful qualities.
Более приемлемым для практики оказалось применение в составе геля более слабых, 0,1% и 0,25% концентраций формалина [3]. Однако данный способ, он же прототип, обеспечивая достаточно надежный консервирующий эффект, не всегда гарантировал стерильность заготавливаемых трансплантатов, что потребовало разработки комбинированного использования формалина с другими антисептиками, усиливающими его бактерицидные свойства. Из агентов-усилителей наиболее эффективной оказалась комбинация 0,25% формалина с 0,05% канамицином. Правда, и здесь формалин не утратил своих нежелательных фиксирующих свойств, что подтверждалось в эксперименте на животных, у которых по сравнению с контролем удлинялись сроки остеоиндуктивного ответа на пересадку деминерализованного костного матрикса.It turned out to be more acceptable for practice to use weaker, 0.1% and 0.25% formalin concentrations in the gel [3]. However, this method, it is a prototype, providing a fairly reliable preservative effect, did not always guarantee the sterility of harvested grafts, which required the development of combined use of formalin with other antiseptics that enhance its bactericidal properties. Of the enhancing agents, the most effective combination was 0.25% formalin with 0.05% kanamycin. True, here formalin did not lose its undesirable fixing properties, which was confirmed in an experiment on animals in which, in comparison with the control, the duration of the osteoinductive response to transplantation of a demineralized bone matrix was lengthened.
Техническим исходом изобретения в отличие от прототипа является исключение из среды формалина и канамицина и включение в нее меда и сульфосалициловой кислоты, при следующем соотношении использованных компонентов (г): желатин - 5,0; агар - 0,5; мед - 10,0; сульфосалициловая кислота - 0,7; вода дистиллированная - 90,0.The technical outcome of the invention, in contrast to the prototype, is the exclusion from the environment of formalin and kanamycin and the inclusion of honey and sulfosalicylic acid in it, in the following ratio of components used (g): gelatin - 5.0; agar - 0.5; honey - 10.0; sulfosalicylic acid - 0.7; distilled water - 90.0.
1) В таблицах показаны:1) The tables show:
Таблица 1 - результаты стерилизации биотрансплантатов растворами сульфосалициловой кислоты, где «+» это рост микрофлоры, «-» отсутствие роста.Table 1 - the results of sterilization of biografts with sulfosalicylic acid solutions, where “+” is the growth of microflora, “-” is the lack of growth.
Таблица 2 - результаты эктопической пересадки крысам деминерализованных костных трансплантатов через 3 месяца после операции, где положительный результат - полное замещение трансплантатов новообразованной костной тканью, а отрицательный - отсутствие замещения.Table 2 - the results of ectopic transplantation of demineralized bone grafts to rats 3 months after surgery, where a positive result is the complete replacement of the grafts with newly formed bone tissue, and a negative result is the absence of replacement.
Таблица 3 - результаты ортотопической пересадки кроликам деминерализованных костных трансплантатов через 2 месяца после операции, где положительный результат - полное замещение дефекта лучевой кости новообразованной костной тканью, а отрицательный - отсутствие или частичное (неполное) замещение.Table 3 - the results of orthotopic transplantation of rabbits with demineralized bone grafts 2 months after surgery, where a positive result is the complete replacement of the radial bone defect with newly formed bone tissue, and a negative result is the absence or partial (incomplete) replacement.
2) На фигурах изображены:2) The figures depict:
Фиг.1 - костный трансплантат, консервированный в предлагаемой гельсодержащей среде.Figure 1 - bone graft, preserved in the proposed gel-containing medium.
Фиг.2 - сухожильный трансплантат, консервированный в предлагаемой гельсодержащей среде.Figure 2 - tendon graft, preserved in the proposed gel-containing medium.
Фиг.3 - рентгенограмма области эктопической внутримышечной пересадки стерилизованного трансплантата. Видна слабая тень трансплантата. Срок 2 недели.Figure 3 - x-ray area of the ectopic intramuscular transplant of a sterilized transplant. A faint graft shadow is visible. Duration 2 weeks.
Фиг.4 - рентгенограмма области эктопической внутримышечной пересадки стерилизованного трансплантата. На его месте виден новообразованный компактный костный регенерат с четкими контурами. Срок 3 месяца.Figure 4 is a radiograph of the ectopic intramuscular transplant of a sterilized transplant. In its place, a newly formed compact bone regenerate with clear contours is visible. The term is 3 months.
Фиг.5 - дефект лучевой кости кролика через 2 недели после ортотопической пересадки фрагмента деминерализованной кости. Трансплантат не виден, он рентгенонегативен.Figure 5 - defect of the radius of the rabbit 2 weeks after orthotopic transplantation of a fragment of demineralized bone. The transplant is not visible, it is X-ray negative.
Фиг.6 - полное замещение дефекта лучевой кости кролика через 3 месяца после применения деминерализованного трансплантата, заготовленного предлагаемым способом. Рентгенограмма.6 is a complete replacement of a defect in the radius of a rabbit 3 months after application of a demineralized graft harvested by the proposed method. Roentgenogram.
Фиг.7 - новообразованная костная ткань, сформировавшаяся на месте дефекта лучевой кости кролика после применения деминерализованного трансплантата, заготовленного предлагаемым способом. Микрофото. Срок 3 месяца. Гематоксилин и эозин, х80.Fig.7 - newly formed bone tissue, formed at the site of a defect in the radius of the rabbit after application of the demineralized graft harvested by the proposed method. Microphoto. The term is 3 months. Hematoxylin and eosin, x80.
Фиг.8 - тотальное ревизионное эндопротезирование тазобедренного сустава с использованием костного цемента. Клинически и рентгенологически нестабильность бедренного и вертлужного компонентов эндопротеза. Рентгенограмма.Fig. 8 is a total revision hip replacement using bone cement. Clinically and radiologically, the instability of the femoral and acetabular components of the endoprosthesis. Roentgenogram.
Фиг.9 - рентгенограмма, 4 месяца после операции замены эндопротеза. Восстановление проксимального отдела бедра и дефекта таза с помощью аллогенных костных трансплантатов.Figure 9 - x-ray, 4 months after surgery replacement of the endoprosthesis. Restoring the proximal femur and pelvic defect using allogeneic bone grafts.
Фиг.10 - рентгенограмма, 1 год и 2 месяца после реэндопротезирования. Пациентка ходит с опорой на палочку. Имплантированные аллогенные трансплантаты частично перестроились и обеспечивают надежную фиксацию бедренного и вертлужного компонентов эндопротеза.Figure 10 - x-ray, 1 year and 2 months after endoprosthetics. The patient walks with support on a stick. The implanted allogeneic transplants are partially rebuilt and provide reliable fixation of the femoral and acetabular components of the endoprosthesis.
Способ осуществляется следующим образом: в термостойкую тару вносят 90 мл дистиллированной воды, 5,0 г желатина и 0,5 г агара. Тару ставят на водяную баню и подогревают до тех пор, пока ее содержимое не расплавится и не закипит. При этом необходимо тщательно следить, чтобы расплавленный агар или желатин не подгорели. Затем в жидкий гель добавляют 10 г меда (любого, но лучше не засахаренного) и 0,7 г сульфосалициловой кислоты. Полученный раствор перемешивают и остужают до температуры в пределах 40°С. В таком виде консервирующая среда готова для заливки биологических трансплантатов. Для этого последние размещают в соответствующую стеклянную, полиэтиленовую или пластмассовую тару и заливают до края таким образом, чтобы исключить проникновение воздуха. От каждого заготавливаемого препарата для бактериологического исследования отсекают небольшие фрагменты, которые заливают той же средой, что и остальные трансплантаты. Когда их много, то для бакконтроля на стерильность выборочно берут 2-3 трансплантата из 10. Хранят заготовленные ткани для пересадки в холодильниках с температурным режимом +2…+7°С. Замораживать их не рекомендуется. Оптимальный срок хранения 6-9 месяцев. Транспортировка биологических трансплантатов в предлагаемой среде возможна любым видом транспорта при комнатной температуре.The method is as follows: in a heat-resistant container make 90 ml of distilled water, 5.0 g of gelatin and 0.5 g of agar. The container is placed in a water bath and heated until its contents melt and boil. In this case, it is necessary to carefully monitor that molten agar or gelatin does not burn. Then, 10 g of honey (any, but not better sugared) and 0.7 g of sulfosalicylic acid are added to the liquid gel. The resulting solution was stirred and cooled to a temperature within 40 ° C. In this form, the preservation medium is ready for the filling of biological transplants. To do this, the latter is placed in an appropriate glass, polyethylene or plastic container and poured to the edge in such a way as to prevent air penetration. Small fragments are cut off from each procured preparation for bacteriological examination, which are filled with the same medium as the rest of the grafts. When there are a lot of them, 2-3 grafts of 10 are selectively taken for bacterial control for sterility. Prepared tissues are stored for transplantation in refrigerators with a temperature regime of + 2 ... + 7 ° С. It is not recommended to freeze them. The optimal shelf life is 6-9 months. Transportation of biological transplants in the proposed environment is possible by any type of transport at room temperature.
Следовательно, в отличие от прототипа предлагаемый способ исключает из процесса заготовки биологических трансплантатов формалин и повышает их биопластические и остеоиндуктивные (при заготовке костной ткани) качества. В отличие от прототипа способ не пролонгирует сроки индукционного остеогенеза, что свидетельствует о его менее фиксирующем влиянии на белковые структуры заготавливаемых трансплантатов. Кроме того, при совместном, а не раздельном применении желатина и агара удалось уменьшить их расход и повысить плотность консервирующей среды.Therefore, in contrast to the prototype, the proposed method excludes formalin from the process of harvesting biological transplants and improves their bioplastic and osteoinductive (when harvesting bone tissue) qualities. Unlike the prototype, the method does not prolong the timing of induction osteogenesis, which indicates its less fixing effect on the protein structures of harvested grafts. In addition, with the joint, but not separate use of gelatin and agar, it was possible to reduce their consumption and increase the density of the preserving medium.
Для подтверждения вышеизложенного приводим следующие примеры:To confirm the above, we give the following examples:
1. Стерилизующая активность способа.1. The sterilizing activity of the method.
Исследование проведено по стандартной методике, для чего кусочки кожи (тест-объекты), взятые посмертно у трупов-доноров в нестерильной обстановке, или хвостовые фрагменты крыс (материал, наиболее инфицированный в естественных условиях) помещали в стеклянную тару и заливали предлагаемой средой, содержание сульфосалициловой кислоты в которой составляло 0,25%-0,5%-0,7%. Тару с тест-объектами герметично опечатывали и переносили на хранение в холодильник с температурным режимом +5°С. На 1, 2, 3, 5, 7 сутки в боксе с соблюдением правил асептики тест-объекты извлекали из среды, помещали в стерильные пробирки или чашки Петри с питательной средой и направляли на исследование в бактериологическую лабораторию, где они выдерживались в термостате при +37°С на протяжении 7 суток. В общем итоге была изучена микрофлора 450 тест-объектов, распределенных в зависимости от концентрации сульфосалициловой кислоты на три группы. О степени антимикробной активности судили по задержке или отсутствию роста микрофлоры. До стерилизации было установлено, что исследуемый материал оказался контаминированным смешанной микрофлорой, в которой преобладали: стафилококк - 93,5%; грамотрицательная споровая палочка - 73,1%; плеснь - 69,2%; кишечная палочка - 62,3%; стрептококк - 19,6%; протей - 17,7%; синегнойная палочка - 10,8%. Дрожжевые грибки встречались в 1,1% исследований, анаэробная палочка в 0,4%.The study was conducted according to the standard method, for which pieces of skin (test objects) taken posthumously from donor corpses in an unsterile setting, or tail fragments of rats (the material most infected under natural conditions) were placed in glass containers and poured with the proposed medium, the content of sulfosalicylic acid in which was 0.25% -0.5% -0.7%. Containers with test objects were hermetically sealed and transferred to storage in a refrigerator with a temperature regime of + 5 ° C. On days 1, 2, 3, 5, 7, in compliance with aseptic rules, test objects were removed from the medium, placed in sterile tubes or Petri dishes with nutrient medium and sent for examination to a bacteriological laboratory, where they were kept in an thermostat at +37 ° C for 7 days. In total, the microflora of 450 test objects was studied, distributed depending on the concentration of sulfosalicylic acid into three groups. The degree of antimicrobial activity was judged by the delay or lack of growth of microflora. Before sterilization, it was found that the test material was contaminated with mixed microflora, in which prevailed: staphylococcus - 93.5%; gram-negative spore bacillus - 73.1%; mold - 69.2%; E. coli - 62.3%; streptococcus - 19.6%; Proteus - 17.7%; Pseudomonas aeruginosa - 10.8%. Yeast was found in 1.1% of studies, anaerobic bacillus in 0.4%.
Как видно из таблицы, 0,25% р-р сульфосалициловой кислоты обладает слабой антимикробной активностью и для стерилизации биологических тканей непригоден. Лучшие результаты были получены после стерилизации тест-объектов 0,5% и 0,7% растворами кислоты на 3 и 5 сутки консервации биопрепаратов при 4°С.As can be seen from the table, 0.25% solution of sulfosalicylic acid has weak antimicrobial activity and is unsuitable for sterilization of biological tissues. The best results were obtained after sterilization of test objects with 0.5% and 0.7% acid solutions on the 3rd and 5th day of preservation of biological products at 4 ° C.
Эксперимент, таким образом, показал несомненную пригодность 0,5%-0,7% концентраций сульфосалициловой кислоты для заготовки биотрансплантатов, предназначенных для клинического использования.The experiment, therefore, showed the undoubted suitability of 0.5% -0.7% concentrations of sulfosalicylic acid for the preparation of biotransplants intended for clinical use.
2. Изучение остеоиндуктивной активности костных трансплантатов, стерилизованных и консервированных предлагаемым способом.2. The study of osteoinductive activity of bone grafts, sterilized and canned by the proposed method.
Эксперимент проведен на 75 беспородных крысах и 44 кроликах. Крысам производили эктопические пересадки в мышечную ткань бедра, кроликам - ортотопические - в дефект лучевой кости. Костную ткань деминерализовали в 0,6 н. растворе соляной кислоты и после ее отмывки консервировали предлагаемым в заявке способом. Сроки консервации трансплантатов не превышали одного месяца при +5°С. В контрольной серии опытов деминерализованные костные трансплантаты консервировали в гельсодержащей среде, содержащей формалин (0,25%) и антибиотик канамицин (0,05 г на 100 мл). Оперированных животных забивали на 15; 30; 60 и 90 сутки в соответствии с правилами, изложенными в приказе МЗ СССР №755 от 12.08. 77 года. Взятые у них препараты изучали макроскопически, рентгенологически и гистологически с окраской гематоксилин-эозином и пикрофуксином.The experiment was conducted on 75 outbred rats and 44 rabbits. Ectopic transplantations into the thigh muscle tissue were performed in rats, orthotopic transplantations in the radius defect were performed in rabbits. Bone tissue was demineralized in 0.6 N. hydrochloric acid solution and after washing it was preserved by the method proposed in the application. The terms of preservation of the grafts did not exceed one month at + 5 ° C. In a control series of experiments, demineralized bone grafts were preserved in a gel-containing medium containing formalin (0.25%) and the antibiotic kanamycin (0.05 g per 100 ml). The operated animals were killed at 15; thirty; 60 and 90 days in accordance with the rules set forth in the order of the Ministry of Health of the USSR No. 755 of 12.08. 77 years old. The preparations taken from them were studied macroscopically, radiologically and histologically with hematoxylin-eosin and picrofuxin staining.
Результаты экспериментов, как это видно из таблиц, подтвердили преимущества предлагаемого способа консервации биологических тканей, который существенно (на 10% при эктопической и 16,7% при ортотопической пересадке) улучшил результаты трансплантации деминерализованной костной ткани. Послеоперационная эволюция ортотопических трансплантатов, консервированных предлагаемым способом, рентгенологически сводилась к следующему. У крыс через 2 недели после операции в области пересадки стерилизованных трансплантатов рентгенологическая тень последних не определялась, поскольку они были лишены минеральных компонентов в процессе деминерализации. Через 2 месяца на рентгенограммах в зоне вмешательства обнаруживался новообразованный костный регенерат компактного типа, по очертаниям сходный с пересаженным фрагментом кости.The experimental results, as can be seen from the tables, confirmed the advantages of the proposed method for preserving biological tissues, which significantly (by 10% for ectopic and 16.7% for orthotopic transplantation) improved the results of transplantation of demineralized bone tissue. The postoperative evolution of orthotopic transplants, preserved by the proposed method, was radiologically reduced to the following. In rats, 2 weeks after surgery, in the area of transplanted sterilized transplants, the radiological shadow of the latter was not determined, since they were deprived of mineral components during demineralization. After 2 months, radiographs in the intervention zone revealed a newly formed compact-type bone regenerate, outlines similar to a transplanted bone fragment.
При ортотопической пересадке у кроликов через 2 недели в зоне дефекта лучевой кости появлялись первые признаки костеобразования в виде облаковидных включений по ходу трансплантата и более выраженные у его концов. Спустя месяц участки вкраплений местами сливались между собой, формируя четкие признаки костного регенерата, повторяющего контуры трансплантата. Через два месяца отмечалось практически полное замещение последнего новообразованной костной тканью. На рентгенограммах трехмесячного срока в области бывшего дефекта обнаруживалась новая кость, имевшая органотипические черты с хорошо развитыми кортикальными пластинками и сформированным костно-мозговым каналом.During an orthotopic transplant in rabbits, after 2 weeks, the first signs of bone formation in the form of cloud-like inclusions along the graft and more pronounced at its ends appeared in the radius of the radius defect. A month later, the interspersed areas merged in places, forming clear signs of a bone regenerate that follows the contours of the graft. Two months later, almost complete replacement of the latter with newly formed bone tissue was noted. A new bone was found on X-ray photographs of a three-month period in the area of the former defect, which had organotypic features with well-developed cortical plates and a formed marrow canal.
На гистологических препаратах к этому сроку на месте пересадки обнаруживалась достаточно зрелая компактная кость, содержащая в своем канале фибро-ретикулярную ткань и миелоидно-жировой костный мозг.By this time, a rather mature compact bone containing fibro-reticular tissue and myeloid-adipose bone marrow in its channel was found in histological preparations at the transplant site.
Клинический пример: пациентка К., 57 лет поступила по поводу нестабильности эндопротеза тазобедренного сустава. Выполнено ревизионное эндопротезирование с использованием аллогенных костных трансплантатов, стерилизованных предлагаемым способом. Представлены: дооперационная рентгенограмма, послеоперационные рентгенограммы через 4 месяца и 1 год и 2 месяца.Clinical example: Patient K., 57 years old, was admitted for instability of the hip joint prosthesis. Performed revision arthroplasty using allogeneic bone grafts sterilized by the proposed method. Presented: preoperative radiographs, postoperative radiographs after 4 months and 1 year and 2 months.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫBIBLIOGRAPHY
1. Применение гельсодержащих сред для консервации и транспортировки тканевых трансплантатов. Методические рекомендации, Новосибирск, 1973, 9 с.1. The use of gel-containing media for the preservation and transportation of tissue transplants. Guidelines, Novosibirsk, 1973, 9 pp.
2. Применение гельсодержащих стерилизующих сред для консервации и транспортировки тканевых трансплантатов. Вестник хирургии, 1972, 2, стр.115-118.2. The use of gel-containing sterilizing media for the preservation and transportation of tissue transplants. Herald of Surgery, 1972, 2, pp. 115-118.
3. Аллотрансплантация формалинизированной костной ткани в травматологии и ортопедии. СПб., 2001, стр.55-145.3. Allotransplantation of formalized bone tissue in traumatology and orthopedics. St. Petersburg, 2001, p. 55-145.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007149032/14A RU2370031C2 (en) | 2007-12-21 | 2007-12-21 | Method of conservation of biological transplants in gel-containing sterilising medium |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007149032/14A RU2370031C2 (en) | 2007-12-21 | 2007-12-21 | Method of conservation of biological transplants in gel-containing sterilising medium |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007149032A RU2007149032A (en) | 2009-06-27 |
| RU2370031C2 true RU2370031C2 (en) | 2009-10-20 |
Family
ID=41026894
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007149032/14A RU2370031C2 (en) | 2007-12-21 | 2007-12-21 | Method of conservation of biological transplants in gel-containing sterilising medium |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2370031C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1586714A1 (en) * | 1988-10-31 | 1990-08-23 | Ленинградский Научно-Исследовательский Институт Травматологии И Ортопедии Им. Р.Р.Вредена | Method of demineralization and preservation of bone transplants |
| RU2140152C1 (en) * | 1997-03-13 | 1999-10-27 | Иван Антонович Мазур | Preservative solution for transplants |
| WO2003022047A1 (en) * | 2001-09-06 | 2003-03-20 | Hans-Knöll-Institut für Naturstoff-Forschung e.V. | Method for conserving organs and tissue used for transplantation |
-
2007
- 2007-12-21 RU RU2007149032/14A patent/RU2370031C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1586714A1 (en) * | 1988-10-31 | 1990-08-23 | Ленинградский Научно-Исследовательский Институт Травматологии И Ортопедии Им. Р.Р.Вредена | Method of demineralization and preservation of bone transplants |
| RU2140152C1 (en) * | 1997-03-13 | 1999-10-27 | Иван Антонович Мазур | Preservative solution for transplants |
| WO2003022047A1 (en) * | 2001-09-06 | 2003-03-20 | Hans-Knöll-Institut für Naturstoff-Forschung e.V. | Method for conserving organs and tissue used for transplantation |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| БОЛТРУКЕВИЧ С.И. и др. Деминерализованный костный матрикс в реконструктивно-восстановительной хирургии опорно-двигательной системы. Методические рекомендации. - Гродно, 2001, с.10-11. IONKOV A. et al. Importance of conservation media for organ conservation of human liver in case of cadaveric organ explanation. Khirurgiia (Sofiia). 2007; (1-2): 18-24 (Abstract). * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2007149032A (en) | 2009-06-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7976861B2 (en) | Irradiated implantable bone material | |
| US12133522B2 (en) | Methods for collecting, processing and transporting tissue grafts | |
| Tomford et al. | 1983 bone bank procedures | |
| AU2007240510B2 (en) | Bone graft composition | |
| Sailer | Transplantation of lyophilized cartilage in maxillo-facial surgery: experimental foundations and clinical success | |
| Brown et al. | Epiphysial growth after free fibular transfer with and without microvascular anastomosis. Experimental study in the dog | |
| Hardin | Banked bone | |
| Zhao et al. | Comparative study between tissue‐engineered periosteum and structural allograft in rabbit critical‐sized radial defect model | |
| Angermann et al. | Procurement, banking and decontamination of bone and collagenous tissue allografts: guidelines for infection control | |
| Vargel et al. | Solvent-dehydrated calvarial allografts in craniofacial surgery | |
| van de Sande et al. | Successful disinfection of femoral head bone graft using high hydrostatic pressure | |
| RU2370031C2 (en) | Method of conservation of biological transplants in gel-containing sterilising medium | |
| Vajaradul | Bangkok biomaterial center: 15 years experience in tissue banking | |
| RU2356224C1 (en) | Combined method of bone graft sterilisation | |
| Lee et al. | The effects of sterilization methods on lyophilized cartilage grafts in an experimental model | |
| Singh et al. | Healing of artificially created gap non-union using autologous cultured osteoblasts impregnated over three-dimensional biodegradable scaffold: An experimental study (Rabbit) | |
| RU2235462C2 (en) | Liquid medium for low-temperature preserving biological transplants | |
| Kearney | Yorkshire regional tissue bank—circa 50 years of tissue banking | |
| RU2362589C1 (en) | Way of sterilisation of biological tissues for transplantation | |
| Bagaria et al. | It’s the biology orthopods! Heralding a reconstructive revolution through musculoskeletal tissue banks (MSTB) in India | |
| Martins et al. | Experimental analysis in wistar rats of bone grafts prepared by different sterilization methods | |
| RU2411923C1 (en) | Method of making alloimplant on basis of cartilaginous tissue | |
| RU2827028C1 (en) | Method for pre-implantation treatment of biological prostheses for cardiovascular surgery | |
| MARQUIT et al. | A new method of utilizing homografts: Procurement, sterilization, storage, and clinical application of beta irradiated cartilage and bone homografts in otorhinolaryngological plastic and reconstructive surgery | |
| Kumta et al. | Bacterial colonization of bone allografts related to increased interval between death and procurement: an experimental study in rats |