RU2361608C1 - Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) - Google Patents
Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2361608C1 RU2361608C1 RU2008109967/15A RU2008109967A RU2361608C1 RU 2361608 C1 RU2361608 C1 RU 2361608C1 RU 2008109967/15 A RU2008109967/15 A RU 2008109967/15A RU 2008109967 A RU2008109967 A RU 2008109967A RU 2361608 C1 RU2361608 C1 RU 2361608C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blood substitute
- blood
- solution
- pharmaceutical composition
- hemoglobin
- Prior art date
Links
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 title claims abstract description 44
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 13
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 13
- 238000012546 transfer Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 44
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 17
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 9
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 108010061951 Methemoglobin Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 7
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 6
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 4
- 239000001744 Sodium fumarate Substances 0.000 claims abstract description 3
- MSJMDZAOKORVFC-SEPHDYHBSA-L disodium fumarate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)\C=C\C([O-])=O MSJMDZAOKORVFC-SEPHDYHBSA-L 0.000 claims abstract description 3
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims abstract description 3
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 229940005573 sodium fumarate Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 235000019294 sodium fumarate Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 claims abstract 2
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims description 30
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims description 30
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 6
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 6
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 6
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 claims description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 claims description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 239000012891 Ringer solution Substances 0.000 claims 1
- 108010050918 polyhemoglobin Proteins 0.000 abstract description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 abstract description 7
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 5
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 102000008015 Hemeproteins Human genes 0.000 description 4
- 108010089792 Hemeproteins Proteins 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 208000032456 Hemorrhagic Shock Diseases 0.000 description 3
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 3
- 206010049771 Shock haemorrhagic Diseases 0.000 description 3
- 230000000703 anti-shock Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 3
- 108010076770 hemoglobin polymer Proteins 0.000 description 3
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006392 deoxygenation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000003589 nefrotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 2-(furan-2-yl)-7-methyl-1h-1,8-naphthyridin-4-one Chemical compound N=1C2=NC(C)=CC=C2C(O)=CC=1C1=CC=CO1 INGWEZCOABYORO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010059484 Haemodilution Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 239000012042 active reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000008822 capillary blood flow Effects 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000002079 cooperative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 108010002255 deoxyhemoglobin Proteins 0.000 description 1
- 238000005137 deposition process Methods 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003617 erythrocyte membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- -1 modified glutaraldehyde aldehyde Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 1
- 239000003058 plasma substitute Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 235000007682 pyridoxal 5'-phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011589 pyridoxal 5'-phosphate Substances 0.000 description 1
- 229960001327 pyridoxal phosphate Drugs 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 238000004065 wastewater treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/41—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
- A61K38/42—Haemoglobins; Myoglobins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0026—Blood substitute; Oxygen transporting formulations; Plasma extender
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине и фармакологии, а именно к кровезаменителям на основе полигемоглобина. Предложен кровезаменитель с функцией переноса кислорода, основу которого составляет полимеризованный глутаровым альдегидом гемоглобин, полученный из крови животных, при этом он представляет собой сухую субстанцию и содержит не менее 90% полимеризованного гемоглобина с молекулярной массой в диапазоне 192000-320000 Да, а содержание метгемоглобина в кровезаменителе составляет не более 5%. Предложены фармкомпозиции, содержащие указанный кровезаменитель, содержащие либо полиоксидин, либо поливинилпирролидон, либо раствор Рингера, либо раствор хлорида натрия, хлорида калия и хлорида магния и фумарата натрия. Изобретение обеспечивает создание кровезамениля, сопоставимого по эффективности транспорта кислорода с эритроцитами крови человека. 5 н. и 5 з.п. ф-лы, 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к кровезаменителям на основе полигемоглобина. Изобретение может быть использовано для производства кровезамещающих растворов, сопоставимых по эффективности газового транспорта (по переносу кислорода) с эритроцитами крови человека.
Известен кровезаменитель / L.R.Sehgal, A.L.Rosen, S.A.Gould, H.L.Sehgal, G.S.Moss / Transfusion. - 1983. - v.23. - N 2. - P.158-162/, представляющий собой полимерный гемоглобин.
Основным недостатком известного кровезаменителя является его относительно высокая стоимость, которая обусловлена тем, что для получения кровезаменителя используется дорогостоящий биологически активный реагент - пиридоксаль-5-фосфат (ПФ). Существует также опасность попадания свободного ПФ в конечный продукт, что может привести к нежелательным последствиям.
Известен кровезаменитель «Геленпол» /RU 2132687, А61К 35/18, А61К 38/42, 1999/, представляющий собой смесь тетрамера гемоглобина и олигомеров с различной длиной цепи. Олигомеры получены путем сшивания тетрамеров гемоглобина глутаровым альдегидом и модифицированы глутаминовой кислотой.
Недостатком препарата «Геленпол» является то, что для его приготовления необходима эритроцитарная масса со сроком хранения не более 36 суток, а это может негативно сказаться на запасах донорской крови.
К недостаткам также относится то, что в кровезаменителе находится достаточно большой процент тетрамера гемоглобина, который в крови диссоциирует на димеры обусловливающие нефротосксический эффект.Тетрамер также вызывает вазоконстрикторное действие, связывая оксид азота, кроме того, тетрамер быстро элиминируется из кровяного русла, не успевая выполнить газотранспортную функцию.
Известен кровезаменитель по патенту RU 2203087, полученный из донорской крови. Кровезаменитель представляет собой водный раствор пиридоксилированного, полимеризованного гемоглобина, который содержит приблизительно 16% полимера гемоглобина с молекулярной массой приблизительно 128, приблизительно 26% полимера гемоглобина с молекулярной массой приблизительно 192 и приблизительно 58% полимера гемоглобина с молекулярной массой приблизительно 256. Данный кровезаменитель получают с использованием окиси углерода, что удорожает и удлиняет процесс, кроме того, в конечном продукте остается примесь токсичного карбоксигемоглобина (до 1.5%). Описанная технология, по утверждению авторов, позволяет применять кровь других млекопитающих.
Известен кровезаменитель фирмы Biopure на основе гемоглобина, полученного, в том числе, из эритроцитов крови крупного рогатого скота /патенты US 5084558 (1992) и US 6506725 (2003)/.
Данный кровезаменитель имеет следующие параметры: распределение молекулярной массы полигемоглобина в диапазоне 68000-500000 дальтон более 90%, причем содержание полигемоглобина более 50% содержание метгемоглобина менее 20%, содержание эндотоксина менее 0.02 ед/мл.
К недостаткам данного кровезаменителя можно отнести высокое содержание тетрамера и метгемоглобина. Высокое содержание тетрамера обусловливает нефротосксический эффект, а метгемоглобин является токсичным. Кроме того, кровезаменитель приготовлен на дегазированном растворе и, поэтому при его введении в организм в условиях геморрагического шока, он может присоединять растворенный в крови кислород, вызывая дополнительную гипоксию. Препарат фирмы Biopure представляет собою готовый для употребления продукт с фиксированной концентрацией гемоглобина в определенной среде (модифицированный лактированный раствор Рингер - Локка). В связи с этим, возможности изменения концентрации гемоглобина в растворе ограниченное, а изменение состава растворителя не возможно. Между тем, не исключены ситуации, при которых применение данного растворителя не желательны, и оптимальным для введения может оказаться плазмозаменитель с иными свойствами и с иным содержанием гемоглобина.
Задачей изобретения является создание кровезаменителя, лишенного указанных недостатков.
Для решения поставленной задачи предлагается кровезаменитель с функцией переноса кислорода, основу которого составляет полимеризованный глутаровым альдегидом гемоглобин, полученный из крови животных. Отличительной особенностью предлагаемого кровезаменителя является то, что распределение молекулярной массы полигемоглобина 90% в диапазоне 192000-320000 Да, содержание метгемоглобина не более 5%. Кровезаменитель предлагается выполнить в виде сухой субстанции, например, в виде порошка или гранул с влажностью не более 7%.
Предлагаемый кровезаменитель может дополнительно содержать глюкозу и/или аскорбиновую кислоту.
То, что распределение молекулярной массы 90% полигемоглобина в диапазоне 192000-320000 Да, а содержание метгемоглобина не более 5%, позволяет повысить качество кровезаменителя за счет исключения нежелательных побочных эффектов. Известно, что полимеризованный гемоглобин обладает меньшим кооперативным эффектом, чем нативный гемоглобин, что приводит к снижению коэффициента Хилла /Preparation and in vitro characteristics of polimerized pyridoxylated hemoglobin, L.R.Sehgal, oth., TRANSFUSION, Vol.23, No. 2-1983, p.158-162/. Указанный эффект возможно обусловлен стерическими затруднениями для доступа кислорода к гему. Распределение молекулярной массы в указанном диапазоне позволяет приблизить газотранспортные свойства заявляемого кровезаменителя к нативному гемоглобину за счет большей доступности гема для кислорода.
Введение глюкозы позволяет использовать лиофильную сушку для получения сухого продукта, а аскорбиновая кислота увеличивает срок хранения препарата.
Выполнение кровезаменителя в виде сухой субстанции позволяет повысить сроки хранения продукта, а также усиливает противошоковый эффект препарата и, кроме того, позволяет расширить набор специфических терапевтических воздействий за счет возможности растворить его в одном из прилагаемых к препарату плазмозаменяющих растворов. Выбор раствора определяется причиной, приведшей к необходимости переливать кровезаменитель, состоянием больного и характером предполагаемой терапии (лечебного процесса).
Таким образом, достигается технический результат.
Кровезаменитель получают осмотическим гемолизом эритроцитов крови крупного рогатого скота. Для этого эритроцитарную массу, выделенную из стабилизированной крови крупного рогатого скота путем сепарирования, подвергают гемолизу водой для инъекций. Строму (эритроцитарную оболочку) отделяют микрофильтрацией, используя фильтры с диаметром пор 50; 20; 10; 5 и 1 мкм. Фильтрат обрабатывают концентрированным раствором хлористого натрия для высаживания негемовых белков. Раствор вторично фильтруют через фильтры с диаметром пор 5; 1 и 0,65 мкм, подвергают процессу ультрафильтрации с отсекающими мембранами 300 кДа и проводят стерилизующую фильтрацию.
Концентрацию нативного гемоглобина и продуктов его химической модификации определяют спектрофотометрически по цианметгемоглобиновому производному при длине волны 540 нм /М.С.Кушаковский / Клинические формы повреждения гемоглобина, Л-д: Медицина, 1968. - С.23/. Используют хлористый натрий марки ХЧ ("Химически чистый", ГОСТ 42-2572-88), глюкозу (ФС 42-2419-86), аскорбиновую кислоту (ГФ X, С. - 6), изотонический раствор (ГФ XI, вып.1, стр.175).
Полимеризация. 1-10 мас.% водный раствор гемоглобина дезоксигенируют и при 4°-8°С, добавляют 1-5 мас.% водный раствор глутарового альдегида при молярном отношении глутаровый альдегид: гемоглобин (10:1)-(20:1).
Реакцию завершают добавлением водного раствора боргидрида натрия (рН 8-9).
Раствор полигемоглобина подвергают ультрафильтрации на отсекающих мембранах 450 кДа, а затем для проведения концентрирования и промывки диафильтрацией подают на мембраны, отсекающие полимеры менее 150 кДа. Раствор полигемоглобина промывают диафильтрацией для удаления тетрамера и низкомолекулярных соединений, концентрируют до 10% полигемоглобина и подают на сушку. Качество препарата на предмет соответствия фракционному составу полигемоглобина контролируют электрофорезом и гельпроникающей хроматографией.
В качестве растворителя заявляемого кровезаменителя из препаратов с гемодинамическим (противошоковым) действием предложено использовать полиоксидин, содержащий 1,5% раствор полиэтиленгликоля с молекулярной массой 20 кДа в 0,9% раствора хлорида натрия с добавлением йодида калия. Полиоксидин обладает противошоковым действием, способностью вызывать аутогемодилюцию и удерживать жидкость в сосудистом русле. Обладая дезагрегирующим действием, полиоксидин восстанавливает капиллярный кровоток.
В качестве дезинтоксикационного препарата предложено использовать гемодез - 6% раствор поливинилпирролидона с молекулярной массой 12,6 кДа с добавлением сбалансированных по ионному составу солей.
В качестве регуляторов водно-солевого обмена и кислотно-основного состояния предлагается использовать раствор Рингера с содержанием ингредиентов ммоль/л Na - 147, К - 4,0, Са - 2,3, Сl - 155, НСО2 - 1,2.
В качестве полифункционального (комплексного) препарата предлагается использовать мафусол - раствор солей (хлорида натрия, хлорида калия и хлорида магния) и фумарата натрия.
Рекомендуемая концентрация кровезаменителя в растворах - 1%.
Пример 1. Стабилизированная, охлажденная до +2+4°С кровь КРС, в пластиковых емкостях объемом 10 л, в количестве 30 л, из холодильной камеры через шлюз передается в производственное помещение. С помощью перистальтического насоса кровь подается в приемную чащу работающего сепаратора А1-ФКЖ. Сепарирование осуществляется при 4000 об/мин. Полученная эритромасса, в количестве 12 л, по трубопроводу поступает в емкость для гемолиза.
После загрузки 12 л ЭМ в одноразовый биоконтейнер Флексель 3D (Е1) для гемолиза объемом 50 л (все емкости снабжены охлаждающей рубашкой), включается перистальтический насос для перемешивания и в емкость подается 36 л воды для инъекций (ВДИ) температурой +6-+8°С (контроль температуры - датчик в паллетанке) из сборной емкости, размещенной в помещении подготовки растворов. Гемолиз проходит в течение 40 мин при перемешивании.
Полученный гемолизат перекачивают насосом на патронные фильтры с размером пор 50; 20; 10; 5 и 1 мкм, расположенные последовательно, и далее в биоконтейнер Флексель для осаждения негемовых белков.
После фильтрации раствор подается в биоконтейнер для осаждения негемовых белков объемом 50 л. После перекачки насосом всего объема, в емкость подается концентрированный (33.3%) раствор NaCl в количестве 0,84 кг (ВР.6). Процесс осаждения длится 30 мин.
После осаждения негемовых белков раствор гемоглобина перекачивают насосом на патронные фильтры с размером пор 5; 1 и 0,65 мкм, расположенные последовательно и далее в емкость для концентрирования раствора гемоглобина.
Очистку раствора гемоглобина от высокомолекулярных примесей проводят на ультрафильтрационной установке с мембранами, отсекающими вещества с ММ свыше 300 кДа. Концентрирование раствора гемоглобина проводят на ультрафильтрационной установке с мембранами, отсекающими вещества с ММ свыше 70 кДа до концентрации 10% по гемоглобину. Стерилизующую фильтрацию проводят на этой же установке с использованием мембран с размером пор 0,2 мкм.
После концентрирования 23,5 л раствора гемоглобина поступает в газовихревой реактор. В реактор подается поток стерильного азота (контроль по ротаметру) для перемешивания и дезоксигенации. Дезоксигенацию проводят до достижения концентрации кислорода в равновесной газовой среде 1,0-2,0 об.% (в реакторе датчик концентрации кислорода).
Раствор 2,5% глутарового альдегида в количестве 1,83 кг переносят в реактор Р1, содержащий дезоксигемоглобин (ТП.3.1.) в течение 40 мин. Реакцию проводят при перемешивании в течение 1 ч, при температуре +6+8°С в токе азота.
Для остановки реакции прибавляют раствор боргидрида натрия в количестве 0,2 кг в реактор с раствором полигемоглобина. Реакцию проводят 30 мин при перемешивании. Затем реакционная смесь передавливается азотом (избыточное давление 0,5-1 атм) в емкость для диафильтрации.
Из биореактора реакционная смесь передавливается азотом (избыточное давление 0,5-1 атм) подается в биоконтейнер объемом 50 л. Далее раствор полигемоглобина перекачивается ПН на диафильтрацию 300 кДа для удаления высокомолекулярных (свыше 6 молекул гемоглобина) соединений. После диафильтрации раствор подается ПН в емкость объемом 20 л для концентрирующей и промывной диафильтрации 100 кДа. Раствор промывается 150 л ВДИ для удаления модифицированного гемоглобина (внутримолекулярносшитого тетрамера) и низкомолекулярных соединений, концентрируется до 20 л. Промывной раствор направляется на станцию очистки стоков.
В биоконтейнер с раствором полигемоглобина добавляют 4,83 л 40% стерильного раствора глюкозы путем стерильного соединения коннектором 0,2 л 13,6% стерильного раствора аскорбиновой кислоты, перемешивают. Затем приготовленный раствор перистальтическим насосом подают на установку стерилизующей фильтрации с размером пор 0,22 мкм. Фильтрат поступает в накопительную емкость для подачи на сушку.
Для сушки препарата используется лиофильная или вакуумная сушилка, обеспечивающая получение стерильного порошка в количестве 4,8 кг.
Сравнительные значения коэффициента Хилла приведены в таблице.
| Таблица | |||
| Коэффициент Хилла | Нативный гемоглобин | Кровезаменитель фирмы Biopure | Заявляемый кровезаменитель |
| 2.0 | 1.4 | 1.8 | |
Лечебную эффективность полученного кровезаменителя оценивали на модели геморрагического шока у собак. Для исследований применяли стерильный лиофильно высушенный полигемоглобин, содержащий глюкозу и аскорбиновую кислоту. Порошок разводили солевым раствором. Для опыта использовали 10 беспородных собак - самцов массой 10-20 кг, у которых искусственно вызывали геморрагический шок при острой кровопотере с длительной гипотензией. Объем кровопотери составлял 45-55 мл/кг, длительность гипотензии на уровне артериального давления, равном 40 мм рт.ст. 60-70 мин. Внутривенное введение раствора полимеризованного модифицированным глутаровым альдегидом гемоглобина начинали в период выраженных расстройств системной гемодинамики, транспорта кислорода и кислотно-основного состояния организма, вызванных массивной потерей крови и длительной гипотензией. Введение препарата, полученного заявляемым методом, осуществляли в объеме кровопотери. Из 10 исследованных собак выжило 10, при этом выявлено, что вливание раствора с низкой концентрацией полигемоглобина (0,8 г·дл-1) обеспечивает не только стойкое восстановление системной гемодинамики, но и более высокий уровень потребления тканями кислорода.
При использовании препарата с характеристиками прототипа в аналогичном опыте выжило 9 животных из 10.
Claims (10)
1. Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, основу которого составляет полимеризованный глутаровым альдегидом гемоглобин, полученный из крови животных, отличающийся тем, что он представляет собой сухую субстанцию и содержит не менее 90% полимеризованного гемоглобина с молекулярной массой в диапазоне 192000-320000 Да, а содержание метгемоглобина в кровезаменителе составляет не более 5%.
2. Кровезаменитель по п.1, отличающийся тем, что он дополнительно содержит глюкозу.
3. Кровезаменитель по п.1, отличающийся тем, что он дополнительно содержит аскорбиновую кислоту.
4. Кровезаменитель по п.4, отличающийся тем, что представляет собой порошок с влажностью не более 7%.
5. Кровезаменитель по п.4, отличающийся тем, что представляет собой гранулы с влажностью не более 7%.
6. Фармацевтическая композиция, содержащая кровезаменитель по п.1 и полиоксидин, содержащий 1,5%-ный раствор полиэтиленгликоля с молекулярной массой 20 кДа в 0,9% раствора хлорида натрия с добавлением йодида калия.
7. Фармацевтическая композиция, содержащая кровезаменитель по п.1 и 6%-ный раствор поливинилпирролидона с молекулярной массой 12,6 кДа с добавлением сбалансированных по ионному составу солей.
8. Фармацевтическая композиция, содержащая кровезаменитель по п.1 и раствор Рингера.
9. Фармацевтическая композиция по п.8, отличающаяся тем, что раствор Рингера содержит Na - 147, K - 4,0, Ca - 2,3, Cl - 155, HCO3 - 1,2 ммоль/л.
10. Фармацевтическая композиция, содержащая кровезаменитель по п.1 и раствор хлорида натрия, хлорида калия и хлорида магния и фумарата натрия.
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008109967/15A RU2361608C1 (ru) | 2008-03-18 | 2008-03-18 | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) |
| PCT/RU2009/000129 WO2009116894A2 (ru) | 2008-03-18 | 2009-03-17 | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) |
| UAA201012241A UA96390C2 (ru) | 2008-03-18 | 2009-03-17 | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) |
| MYPI2010006326A MY169785A (en) | 2008-03-18 | 2009-03-17 | Blood substitute with oxygen transport function, pharmaceutical composition (options) |
| CN2009801177114A CN102026654A (zh) | 2008-03-18 | 2009-03-17 | 具有氧气转运功能的血液代用品，药物组合物(任选项) |
| EA201001469A EA017871B1 (ru) | 2008-03-18 | 2009-03-17 | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) |
| EP09723300A EP2322207A4 (en) | 2008-03-18 | 2009-03-17 | OXYGEN TRANSMITTING BLOOD SUBSTITUTE AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION (VARIANTS) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008109967/15A RU2361608C1 (ru) | 2008-03-18 | 2008-03-18 | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2361608C1 true RU2361608C1 (ru) | 2009-07-20 |
Family
ID=41047006
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008109967/15A RU2361608C1 (ru) | 2008-03-18 | 2008-03-18 | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP2322207A4 (ru) |
| CN (1) | CN102026654A (ru) |
| EA (1) | EA017871B1 (ru) |
| MY (1) | MY169785A (ru) |
| RU (1) | RU2361608C1 (ru) |
| UA (1) | UA96390C2 (ru) |
| WO (1) | WO2009116894A2 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020080978A3 (ru) * | 2018-10-19 | 2020-06-18 | Рахимджан Ахметджанович РОЗИЕВ | Cпособ получения кровезаменителя для применения в ветеринарии |
| RU2782076C2 (ru) * | 2018-10-19 | 2022-10-21 | Общество с ограниченной ответственностью "Паритет" | Способ получения кровезаменителя для применения в ветеринарии |
| WO2023022626A1 (ru) * | 2021-08-19 | 2023-02-23 | Рахимджан Ахметджанович РОЗИЕВ | Применение полимеризованного гемоглобина для повышения эффективности химиотерапии злокачественных опухолей |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2819549T3 (es) * | 2015-03-25 | 2021-04-16 | Univ Der Johannes Gutenberg Univ Mainz | Solución de reemplazo de sangre reológica y sus usos |
| CN106237314A (zh) * | 2016-08-30 | 2016-12-21 | 中国科学院长春应用化学研究所 | 一种应用于宠物失血休克急救的复苏液及其制备方法 |
| WO2019070086A2 (en) * | 2017-09-20 | 2019-04-11 | RIM, Chang Ho | BLOOD SUBSTITUTE CARRYING OXYGEN OBTAINED FROM PORK BLOOD AND METHOD OF MAKING SAME |
| WO2023022625A1 (ru) * | 2021-08-19 | 2023-02-23 | Рахимджан Ахметджанович РОЗИЕВ | Применение гемоглобина полимеризованного для мобилизации крови из депо при кровопотерях |
| CN114146165B (zh) * | 2021-12-02 | 2022-08-12 | 润方（北京）生物医药研究院有限公司 | 一种聚合血红蛋白在制备防治呼吸衰竭药物中的应用 |
| CN116059324A (zh) * | 2023-03-22 | 2023-05-05 | 润方(北京)生物科技有限公司 | 一种血红蛋白氧载体冻干粉针剂、其制备方法及应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5464814A (en) * | 1986-06-20 | 1995-11-07 | Northfield Laboratories, Inc. | Acellular red blood cell substitute |
| WO1997035883A1 (en) * | 1996-03-28 | 1997-10-02 | Northfield Laboratories, Inc. | Method and apparatus for preparing an acellular red blood cell substitute |
| RU2132687C1 (ru) * | 1996-04-23 | 1999-07-10 | Институт высомолекулярных соединений РАН | Способ получения полигемоглобина с повышенной кислородтранспортной эффективностью |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5084558A (en) * | 1987-10-13 | 1992-01-28 | Biopure Corporation | Extra pure semi-synthetic blood substitute |
| CA1312009C (en) * | 1986-11-10 | 1992-12-29 | Carl W. Rausch | Extra pure semi-synthetic blood substitute |
| RU2162707C2 (ru) * | 1999-03-24 | 2001-02-10 | Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии | Кровезаменитель - переносчик кислорода, состав для его получения и способ получения полимерного модифицированного гемоглобина |
| JP2006502231A (ja) * | 2002-10-03 | 2006-01-19 | ノースフィールド ラボラトリーズ、インコーポレイテッド | 大量失血を被っている患者の処置方法 |
| JP2006516994A (ja) * | 2003-01-29 | 2006-07-13 | ノースフィールド ラボラトリーズ、インコーポレイテッド | テトラマーの量を低下させた重合ヘモグロビン溶液及び調製するための方法 |
-
2008
- 2008-03-18 RU RU2008109967/15A patent/RU2361608C1/ru active
-
2009
- 2009-03-17 EP EP09723300A patent/EP2322207A4/en not_active Withdrawn
- 2009-03-17 EA EA201001469A patent/EA017871B1/ru active IP Right Revival
- 2009-03-17 MY MYPI2010006326A patent/MY169785A/en unknown
- 2009-03-17 CN CN2009801177114A patent/CN102026654A/zh active Pending
- 2009-03-17 UA UAA201012241A patent/UA96390C2/ru unknown
- 2009-03-17 WO PCT/RU2009/000129 patent/WO2009116894A2/ru not_active Ceased
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5464814A (en) * | 1986-06-20 | 1995-11-07 | Northfield Laboratories, Inc. | Acellular red blood cell substitute |
| WO1997035883A1 (en) * | 1996-03-28 | 1997-10-02 | Northfield Laboratories, Inc. | Method and apparatus for preparing an acellular red blood cell substitute |
| RU2132687C1 (ru) * | 1996-04-23 | 1999-07-10 | Институт высомолекулярных соединений РАН | Способ получения полигемоглобина с повышенной кислородтранспортной эффективностью |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2020080978A3 (ru) * | 2018-10-19 | 2020-06-18 | Рахимджан Ахметджанович РОЗИЕВ | Cпособ получения кровезаменителя для применения в ветеринарии |
| RU2782076C2 (ru) * | 2018-10-19 | 2022-10-21 | Общество с ограниченной ответственностью "Паритет" | Способ получения кровезаменителя для применения в ветеринарии |
| RU2789607C1 (ru) * | 2021-08-19 | 2023-02-06 | Рахимджан Ахметджанович Розиев | Применение полимеризованного гемоглобина для повышения эффективности химиотерапии злокачественных опухолей |
| WO2023022626A1 (ru) * | 2021-08-19 | 2023-02-23 | Рахимджан Ахметджанович РОЗИЕВ | Применение полимеризованного гемоглобина для повышения эффективности химиотерапии злокачественных опухолей |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA201001469A1 (ru) | 2011-02-28 |
| EP2322207A4 (en) | 2012-04-18 |
| WO2009116894A2 (ru) | 2009-09-24 |
| WO2009116894A3 (ru) | 2009-12-23 |
| EP2322207A2 (en) | 2011-05-18 |
| MY169785A (en) | 2019-05-15 |
| CN102026654A (zh) | 2011-04-20 |
| EA017871B1 (ru) | 2013-03-29 |
| UA96390C2 (ru) | 2011-10-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2361608C1 (ru) | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода, фармацевтическая композиция (варианты) | |
| NL194909C (nl) | Werkwijze voor de bereiding van gepolymeriseerd hemoglobine en celvrij vervangingsmiddel voor rode bloedlichaampjes op basis daarvan. | |
| US6552173B2 (en) | Acellular red blood cell substitute | |
| US5439882A (en) | Blood substitute | |
| JPH0365326B2 (ru) | ||
| US7521417B2 (en) | Method and apparatus for preparing an acellular red blood cell substitute | |
| ES2432075T3 (es) | Espray para heridas | |
| RU2337705C2 (ru) | Растворы полимеризованного гемоглобина с пониженным количеством тетрамера и способ их получения | |
| IE904717A1 (en) | Polyhemoglobin stabilized by purine derivatives and glutathione | |
| RU2340354C1 (ru) | Кровезаменитель с функцией переноса кислорода | |
| RU2162707C2 (ru) | Кровезаменитель - переносчик кислорода, состав для его получения и способ получения полимерного модифицированного гемоглобина | |
| RU2341286C1 (ru) | Способ получения кровезаменителя и установка для осуществления способа | |
| WO2004089404A1 (fr) | Conjugat d'hemoglobine, son procede de preparation et son utilisation | |
| EP0586381B1 (en) | Improved blood substitute | |
| KR100562762B1 (ko) | 무세포성적혈구대체물을제조하기위한방법및장치 | |
| WO2020080978A2 (ru) | Cпособ получения кровезаменителя для применения в ветеринарии |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20120221 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20130805 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE Effective date: 20150528 |