[go: up one dir, main page]

RU2351647C1 - Nutrient medium to cultivate fresh-water mollusc cells and tissues - Google Patents

Nutrient medium to cultivate fresh-water mollusc cells and tissues Download PDF

Info

Publication number
RU2351647C1
RU2351647C1 RU2007129111/13A RU2007129111A RU2351647C1 RU 2351647 C1 RU2351647 C1 RU 2351647C1 RU 2007129111/13 A RU2007129111/13 A RU 2007129111/13A RU 2007129111 A RU2007129111 A RU 2007129111A RU 2351647 C1 RU2351647 C1 RU 2351647C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nutrient medium
tissues
cells
mollusc
cultivation
Prior art date
Application number
RU2007129111/13A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Алексей Асадович Сеид-Гусейнов (RU)
Алексей Асадович Сеид-Гусейнов
Надежда Евгеньевна Ковтун (RU)
Надежда Евгеньевна Ковтун
Original Assignee
Алексей Асадович Сеид-Гусейнов
Бурнашов Сергей Иванович
Надежда Евгеньевна Ковтун
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Алексей Асадович Сеид-Гусейнов, Бурнашов Сергей Иванович, Надежда Евгеньевна Ковтун filed Critical Алексей Асадович Сеид-Гусейнов
Priority to RU2007129111/13A priority Critical patent/RU2351647C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2351647C1 publication Critical patent/RU2351647C1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: chemistry, biochemistry.
SUBSTANCE: invention refers to biotechnology and can be used to cultivate tissues and cells of molluscs and others invertebrates, to optimise biocrystallisation processes in vitro, for diagnostic studying functional activity and aragonite biocrystallisation processes with using fresh-water mollusc tissues. The nutrient medium contains standard nutrient medium DMEM/F-12, embryo calf serum, streptomycin sulphate, benzenicylline sodium salt, gentamycin sulphate, kanamycin sulphate, fluconazole.
EFFECT: increased time to cultivate tissues and cells and for reduced risk of mould fungi in culture.
2 ex

Description

Изобретение относится к биологии, в частности к клеточной биологии, и может быть использовано при культивировании тканей и клеток моллюсков и других беспозвоночных животных, для оптимизации процессов биокристаллизации in vitro, проведении диагностических исследований функциональной активности и процессов биокристаллизации арагонита с использованием тканей пресноводных моллюсков.The invention relates to biology, in particular to cell biology, and can be used in the cultivation of tissues and cells of mollusks and other invertebrates, to optimize in vitro biocrystallization processes, to conduct diagnostic studies of the functional activity and biocrystallization of aragonite using freshwater mollusk tissues.

Известны различные стандартные питательные среды культивирования клеток млекопитающих и беспозвоночных животных [1]. Однако такие среды не обеспечивают длительное культивирование с отсутствием контаминации плесневыми грибами рода Aspergillus, Mucor и др. и процессы биокристаллизации, которые могут протекать при длительном культивировании тканей.Various standard culture media for culturing mammalian and invertebrate animal cells are known [1]. However, such media do not provide long-term cultivation with the absence of contamination by molds of the genus Aspergillus, Mucor, etc. and the processes of biocrystallization that can occur during prolonged tissue cultivation.

Известно использование стандартных питательных сред F-12 [3], L-15 [4, 5] для культивирования тканей пресноводных или морских моллюсков. Однако такие питательные среды не обеспечивают отсутствие плесневых грибов и полноценный процесс биокристаллизации арагонита in vitro, а предназначены для культивирования не контаминированных бактериями и грибами культур клеток или тканей в основном млекопитающих животных.It is known to use standard nutrient media F-12 [3], L-15 [4, 5] for the cultivation of tissues of freshwater or marine mollusks. However, such culture media do not ensure the absence of molds and a full-fledged process of biocrystallization of aragonite in vitro, but are intended for the cultivation of cell or tissue cultures of mainly mammalian animals that are not contaminated with bacteria and fungi.

Наиболее близким техническим решением к заявляемому составу питательной среды для культивирования клеток и тканей пресноводных моллюсков относится стандартная питательная среда DMEM/ F-12 [2].The closest technical solution to the claimed composition of the nutrient medium for the cultivation of cells and tissues of freshwater mollusks is a standard nutrient medium DMEM / F-12 [2].

Питательная среде DMEM/F-12 представляет собой смесь 1:1 питательной среды DMEM и F-12, рН 7.0-7.4, осмолярность 260-320 мосмоль/кг. Препарат - прозрачная жидкость, красновато-оранжевого цвета, без опалесценции и осадка. Не содержит антибиотиков. Стандартная питательная среда содержит солевой состав, приближающийся к составу естественной среды ткани при соответствующем рН, заменимые и незаменимые аминокислоты, витамины, производные нуклеиновых кислот, углеводы, жиры и их производные. Питательная среда содержит все ионы, обнаруженные в мантийных тканях моллюсков при наличии у них биологической активности. Среда DMEM/F-12 содержит феноловый красный, как индикатор концентрации гидроксильных ионов.Nutrient medium DMEM / F-12 is a 1: 1 mixture of nutrient medium DMEM and F-12, pH 7.0-7.4, osmolarity 260-320 mosmol / kg. The drug is a clear liquid, reddish-orange in color, without opalescence and sediment. It does not contain antibiotics. The standard nutrient medium contains a salt composition approaching the composition of the natural environment of the tissue at the appropriate pH, interchangeable and essential amino acids, vitamins, nucleic acid derivatives, carbohydrates, fats and their derivatives. The nutrient medium contains all the ions found in mantle tissues of mollusks in the presence of biological activity. DMEM / F-12 medium contains phenol red as an indicator of the concentration of hydroxyl ions.

Применяемые в известной питательной среде растворы аминокислот заменимых - аланин, аспарагин, аспарагиновая кислота, глютаминовая кислота, глицин, пролин, серии, и незаменимых - аргинин, лейцин, цистин, изолейцин, изолейцин, метионин, тирозин, фенилаланин, лизин, гистидин, треонин, триптофан, валин.Solutions of essential amino acids used in a known nutrient medium - alanine, asparagine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, proline, series, and irreplaceable - arginine, leucine, cystine, isoleucine, isoleucine, methionine, tyrosine, phenylalanine, lysine, histidine, threonine, tryptophan, valine.

Питательная среде DMEM/F-12 также может содержать эмбриональную телячью сыворотку.Nutrient medium DMEM / F-12 may also contain fetal calf serum.

Эмбриональная телячья сыворотка без консерванта, нативная, лишена форменных элементов крови. Представляет собой слегка опалесцирующую жидкость желтоватого цвета. Допускается осадок серо-белого цвета, который разбивается при встряхивании в равномерную муть. Является источником ростовых факторов, гормонов и других стимулирующих компонентов. Осмолярность 280-340 мосмоль/кг, рН 7.0 -7.5, альбумин 1.7-3.4 г/дцл, белки 3.0-4.5 г/дцл. Используется в конечной концентрации 10%. Инактивацию факторов комплемента проводят нагреванием при 56°С в течение 30 минут.Embryonic calf serum without a preservative, native, devoid of blood cells. It is a slightly opalescent yellowish liquid. A gray-white precipitate is allowed, which breaks when shaken into a uniform haze. It is a source of growth factors, hormones and other stimulating components. Osmolarity 280-340 mosmol / kg, pH 7.0 -7.5, albumin 1.7-3.4 g / dl, proteins 3.0-4.5 g / dl. Used in a final concentration of 10%. Inactivation of complement factors is carried out by heating at 56 ° C for 30 minutes.

Питательная среде DMEM/F-12 также может содержать антибиотики - стрептомицина сульфат, бензпенициллина натриевая соль, канамицина сульфат, гентамицин сульфат.Стрептомицин и бензпенициллина натриевая соль являются антибиотиками широкого спектра антимикробного действия. Активность стрептомицина сульфата проявляется в отношении большинства грамотрицательных микроорганизмов. Активность бензпенициллина натриевой соли проявляется в отношении большинства грамположительных микроорганизмов.The nutrient medium DMEM / F-12 may also contain antibiotics - streptomycin sulfate, benzpenicillin sodium salt, kanamycin sulfate, gentamicin sulfate. Streptomycin and benzpenicillin sodium salt are antibiotics with a wide spectrum of antimicrobial action. The activity of streptomycin sulfate is manifested in relation to most gram-negative microorganisms. The activity of benzpenicillin sodium salt is manifested in relation to most gram-positive microorganisms.

Канамицина сульфат и гентамицин - бактерицидные антибиотики широкого спектра действия. Канамицина сульфат активен преимущественно к грамотрицательным организмам, устойчивым к другим антибиотикам. Гентамицина сульфат активен по отношению к грамотрицательным микроорганизмам, и устойчивость к нему развивается крайне медленно.Kanamycin sulfate and gentamicin are bactericidal broad-spectrum antibiotics. Kanamycin sulfate is active mainly to gram-negative organisms that are resistant to other antibiotics. Gentamicin sulfate is active against gram-negative microorganisms, and resistance to it develops extremely slowly.

Общим недостатком известных питательных сред является то, что такие среды не обеспечивают длительное культивирование с отсутствием контаминации плесневыми грибами рода Aspergillus, Mucor и др. и процессы биокристаллизации, которые могут протекать при длительном культивировании тканей.A common drawback of known nutrient media is that such media do not provide long-term cultivation with the absence of contamination by molds of the genus Aspergillus, Mucor, etc. and the processes of biocrystallization that can occur during prolonged cultivation of tissues.

Задача изобретения - обеспечить удлинение сроков культивирования тканей и клеток моллюсков для нормального протекания процесса биокристаллизации в условиях отсутствия роста плесневых грибов.The objective of the invention is to provide an extension of the cultivation of tissues and cells of mollusks for the normal course of the biocrystallization process in the absence of growth of molds.

Для решения поставленной задачи используют питательную среду для культивирования клеток и тканей пресноводных моллюсков, включающую стандартную питательную среду DMEM/F-12, содержащую эмбриональную телячью сыворотку 100 мл/л, антибиотики 1090 мг/л, при этом среда дополнительно содержит флуконазол в количестве 100-130 мг/л.To solve this problem, a nutrient medium is used to cultivate cells and tissues of freshwater mollusks, including a standard DMEM / F-12 nutrient medium containing fetal calf serum 100 ml / l, antibiotics 1090 mg / l, while the medium additionally contains fluconazole in an amount of 100- 130 mg / l.

Флуконазол - 2-(2,4-дифторфенил)-1,3-бис(1,2,4-триазол-1-ил)-пропан-2-ол. Представитель нового класса триазольных противогрибковых средств является селективным ингибитором синтеза стеролов в клетке грибов. Препарат активен при микозах, вызванных Candida spp., Micosporum spp., Trichoptiton spp. и другими грибами (Машковский М.Д. Лекарственные средства, М., 2001, стр 356).Fluconazole - 2- (2,4-difluorophenyl) -1,3-bis (1,2,4-triazol-1-yl) -propan-2-ol. The representative of a new class of triazole antifungal agents is a selective inhibitor of sterol synthesis in the fungal cell. The drug is active in mycoses caused by Candida spp., Micosporum spp., Trichoptiton spp. and other mushrooms (Mashkovsky M.D. Medicines, M., 2001, p. 356).

На предлагаемой питательной среде сроки культивирования тканей и клеток моллюсков увеличиваются в 4 раза и более по сравнению со стандартными средами. В известных источниках патентной и научно-технической информации не описано питательных сред для длительного культивирования тканей пресноводных моллюсков с полной элиминацией образования и роста плесневых грибов.On the proposed nutrient medium, the periods of cultivation of tissues and cells of mollusks increase by 4 times or more compared with standard environments. Known sources of patent and scientific and technical information do not describe nutrient media for long-term cultivation of freshwater mollusk tissues with complete elimination of the formation and growth of molds.

Пример 1. Приготовление питательной средыExample 1. Preparation of a nutrient medium

Процесс приготовления питательной среды заключается в дополнении к основной среде DMEM/F-12 эмбриональной телячьей сыворотки 100 мл/л, антибиотиков 1090 мг/л и раствора флуконазола в количествах, соответствующих изобретению.The process of preparation of the nutrient medium consists in addition to the basic medium DMEM / F-12 fetal calf serum 100 ml / l, antibiotics 1090 mg / l and fluconazole solution in quantities corresponding to the invention.

Растворение компонентов питательной среды проводили в стерильных условиях, в ламинаре, при комнатной температуре. Порядок и приоритет добавления компонентов в питательную среду не существенен.The dissolution of the components of the nutrient medium was carried out under sterile conditions, in a laminar, at room temperature. The order and priority of adding components to the culture medium is not significant.

Эмбриональную телячью сыворотку, термически инактивированную, добавляли в питательную среду до 10% содержания. После механического перемешивания питательного раствора при покачивании бутыли добавляли растворы антибиотиков и флуконазол в необходимых концентрациях.Thermally inactivated fetal calf serum was added to the nutrient medium up to 10% content. After mechanical mixing of the nutrient solution with the shaking of the bottle, antibiotic solutions and fluconazole were added in the required concentrations.

Состав питательной среды оптимального количественного соотношения компонентов представлен ниже, мг/л.The composition of the nutrient medium optimal quantitative ratio of the components is presented below, mg / L.

Стандартная питательная среда DMEM/F-12 содержит тотальное количество компонентов: неорганические соли 10066 мг/л, аминокислоты 1100 мг/л, витамины 33,6 мг/л и прочие компоненты, а именно (мг/л) неорганические соли:The standard nutrient medium DMEM / F-12 contains the total number of components: inorganic salts 10066 mg / l, amino acids 1100 mg / l, vitamins 33.6 mg / l and other components, namely (mg / l) inorganic salts:

CaCl2 CaCl 2 116,6116.6 Fe(NO3)*9H2OFe (NO 3 ) * 9H 2 O 0,050.05 FeSO4*7Н2ОFeSO 4 * 7H 2 O 0,4170.417 MgCl2 MgCl 2 28,6428.64 MgSO4 MgSO 4 48,8448.84 KClKcl 311,8311.8 NaHCO3 NaHCO 3 24382438 NaClNaCl 6995,56995.5 Na2HPO4 Na 2 HPO 4 71,0271.02 NaH2PO4 NaH 2 PO 4 54,3554.35 ZnSO4*7H2OZnSO 4 * 7H 2 O 0,4320.432 CuSO4*5H2OCuSO 4 * 5H 2 O 0,00120.0012 Аминокислоты:Amino acids: ГлицинGlycine 18,7518.75 АланииAlanya 4,454.45 Аргинин * HClArginine * HCl 147,5147.5 Аспарагин * Н2ОAsparagine * N 2 O 7,57.5 Аспарагиновая кислотаAspartic acid 6,656.65 Цистеин гидрохлорид * Н2ОCysteine hydrochloride * N 2 O 17,5617.56 Цистеин * HClCysteine * HCl 22,2422.24 Глютаминовая кислотаGlutamic acid 7,357.35 ГлютаминGlutamine 365365 Гистидин гидрохлорид * Н2ОHistidine hydrochloride * H 2 O 31,4831.48 ИзолейцинIsoleucine 54,4754.47 ЛейцинLeucine 59,0559.05 Лизин гидрохлоридLysine hydrochloride 91,2591.25 МетионинMethionine 17,2417.24 ФенилаланинPhenylalanine 35,4835.48 ПролинProline 17,2517.25 СеринSerine 26,2526.25 ТреонинThreonine 53,4553.45 ТриптофанTryptophan 9,029.02 Тирозин 2Na * 2Н2ОTyrosine 2Na * 2H 2 O 55,7955.79 ВалинValine 52,8552.85 Витамины:Vitamins: БиотинBiotin 0,00350.0035 Холин хлоридCholine chloride 8,988.98 D-пантотенат кальцияCalcium D-Pantothenate 2,242.24 Фолиевая кислотаFolic acid 2,652.65 И-инозитолI-inositol 12,612.6 НиациамидNiaciamide 2,022.02 Пиридоксин гидрохлоридPyridoxine hydrochloride 2,0312,031 РибофлавидRiboflavide 0,2190.219 Тиамин гидрохлоридThiamine hydrochloride 2,172.17 Витамин В12Vitamin B12 0,680.68 Прочие:Other: D-глюкозаD-glucose 31513151 Гипоксантин натрияHypoxanthine Sodium 2,042.04 Линолевая кислотаLinoleic acid 0,0420,042 Липоевая кислотаLipoic acid 0,1050.105 Феноловый красныйPhenol red 8,18.1 Путресцин 2HClPutrescin 2HCl 0,0810,081 Пируват натрияPyruvate sodium 5555 ТимидинThymidine 0,3650.365 К стандартной питательной среде добавили антибиотики - 1090 мг/л, а именно:Antibiotics were added to the standard nutrient medium - 1090 mg / l, namely: Стрептомицина сульфатStreptomycin sulfate 500 мг/л500 mg / l Бензенициллина, натриевая сольBenzenicillin, sodium salt 500 мг/л500 mg / l Гентамицин сульфатGentamicin sulfate 40 мг/л40 mg / l Канамицина сульфатKanamycin Sulfate 50 мг/л50 mg / l 10% эмбриональную телячью сыворотку и Флуконазол 120 мг/л.10% fetal calf serum and fluconazole 120 mg / L.

Аналогично была приготовлена питательная среда с добавлением 100 мг/л и 130 мг/л Флуконазола.A nutrient medium was prepared similarly with the addition of 100 mg / L and 130 mg / L Fluconazole.

Пример 2. Использование питательной среды для получения первичной культуры ткани мантии пресноводного моллюска.Example 2. The use of a nutrient medium to obtain a primary culture of tissue mantle of freshwater mollusk.

После извлечения из раковины моллюска ткани мантии ее промывают и стерилизуют стандартным способом.After the mantle tissue is removed from the mollusk shell, it is washed and sterilized in a standard way.

Образцы тканей мантии моллюска переносят в стерильные чашки Петри 6 см в диаметре для дальнейшего культивирования и добавляют по 3-5 мл стерильной, питательной среды, приготовленной по примеру 1.Samples of the mantle mantle tissue are transferred to sterile Petri dishes 6 cm in diameter for further cultivation and 3-5 ml of sterile nutrient medium prepared according to Example 1 are added.

В контрольную группу ткани мантии моллюска добавляли известную питательную среду по прототипу (без флуконазола). Культивирование ткани мантии проводят в 5% СО2 при температуре 22-25°С. Уже в первые сутки после инициации культуры ткани мантии моллюска происходила миграция разных типов клеток: эпителиальных, клеток Лейдига, фибробластов. Цвет ткани мантии моллюска в норме светло-кремовый и при культивировании in vitro является показателем жизнеспособности. При отмирании ткани мантии приобретают темно-коричневый или серый цвета. Таким образом, экспланты ткани мантии в количестве 20 штук культивировали в течение 21 дня.In the control group of the mantle mantle tissue, a known nutrient medium according to the prototype (without fluconazole) was added. The cultivation of mantle tissue is carried out in 5% CO 2 at a temperature of 22-25 ° C. Already on the first day after the initiation of tissue culture of the mantle mantle, various types of cells migrated: epithelial, Leydig cells, fibroblasts. The color of the mantle mantle tissue is normally light cream and, when cultured in vitro, is an indicator of viability. When dying, the mantle tissue becomes dark brown or gray. Thus, mantle tissue explants in the amount of 20 pieces were cultured for 21 days.

За время культивирования опытной группы не было отмечено ни бактериальная, ни особенно грибковая контаминации, в 8 образцах была обнаружена начальная стадия процесса биокристаллизации арагонита.During the cultivation of the experimental group, neither bacterial, nor especially fungal contamination was noted; in 8 samples, the initial stage of the process of biocrystallization of aragonite was found.

В отличие контрольная группа эксплантов ткани мантии моллюска в количестве 20 штук, за время культивирования в течение 3-8 дня была поражена плесневыми грибами в 14 из 20 вариантов эксплантов ткани мантии. В образцах не была обнаружена начальная стадия процесса биокристаллизации арагонита.In contrast, the control group of mollusk mantle tissue explants in an amount of 20 pieces, during cultivation for 3-8 days, was affected by molds in 14 of the 20 variants of mantle tissue explants. The initial stage of the process of biocrystallization of aragonite was not found in the samples.

Затем использовали питательную среду для получения первичной культуры ткани мантии пресноводного моллюска при добавлении 100 мг/л и 130 мг/л флуконазола. Были плучены аналогичные результаты.Nutrient medium was then used to obtain a primary culture of freshwater mollusk mantle tissue with the addition of 100 mg / L and 130 mg / L Fluconazole. Similar results were obtained.

Таким образом, заявляемая питательная среда, используемая для культивирования тканей и клеток мантии пресноводного моллюска, позволяет значительно сократить риск появления в культуре плесневых грибов и тем самым увеличить продолжительность культивирования тканевых эксплантов, что является необходимым условием для процесса биокристаллизации арагонита in vitro при получении полиморфов карбоната кальция.Thus, the claimed nutrient medium used for the cultivation of tissues and cells of the mantle of a freshwater mollusk can significantly reduce the risk of mold growth in the culture and thereby increase the duration of tissue explant cultivation, which is a prerequisite for the in vitro biocrystallization of aragonite in the preparation of calcium carbonate polymorphs .

Технический результат достигнут введением в состав питательной среды оптимального количественного соотношения компонентов, представленных в формуле.The technical result is achieved by introducing into the composition of the nutrient medium the optimal quantitative ratio of the components presented in the formula.

Источники информацииInformation sources

1. Методы культивирования клеток. Сборник научных трудов. Под ред. Пинаева Г.П. Ленинград. «Наука», 1988, с.44-62.1. Methods of culturing cells. Collection of scientific papers. Ed. Pinaeva G.P. Leningrad. "Science", 1988, p. 44-62.

2. Bank S.K., Jena J.K., and Janaki Ram. СаСО3 crystallization in primary culture of mantle epithelial cells of freshwater pearl mussel. Science, vol.86, NO.5, 2004, p.730-733.2. Bank SK, Jena JK, and Janaki Ram. CaCO 3 crystallization in primary culture of mantle epithelial cells of freshwater pearl mussel. Science, vol. 86, NO.5, 2004, p. 730-733.

3. Gardner D.В., Turner F.S., Myers J.M., Dietz T.H., and Silveiman H. Long-term culture of freshwater mussel gill strips: use of serotonin to affect aseptic condition. Biol. Bull., 1991, vol.181, p.-175-180.3. Gardner D. B., Turner F. S., Myers J. M., Dietz T. H., and Silveiman H. Long-term culture of freshwater mussel gill strips: use of serotonin to affect aseptic condition. Biol. Bull., 1991, vol. 181, p. 175-180.

4. Chen S.N., Wen C.M. Establishment of cell lines derived from oyster, Crassostrea gigas Thunberg and hard clam, Meretrix lusoria Roding. Methods Cell Sci. 1999; 21:183-192.4. Chen S.N., Wen C.M. Establishment of cell lines derived from oyster, Crassostrea gigas Thunberg and hard clam, Meretrix lusoria Roding. Methods Cell Sci. 1999; 21: 183-192.

5. Endon M., Hasegawa Y. Culture of mantle epithelial cells expressing shell matrix proteins from scallop Patinopecten yessoensis. Fisheries Science 2006; 72, p.1277-1285.5. Endon M., Hasegawa Y. Culture of mantle epithelial cells expressing shell matrix proteins from scallop Patinopecten yessoensis. Fisheries Science 2006; 72, p. 1277-1285.

Claims (1)

Питательная среда для культивирования клеток и тканей пресноводных моллюсков, включающая стандартную среду DMEM/F-12, 10% эмбриональной телячьей сыворотки, стрептомицина сульфата 500 мг/л, бензенициллина натриевую соль 500 мг/л, гентамицина сульфата 40 мг/л, канамицина сульфата 50 мг/л и флуконазол в количестве 100-130 мг/л. Culture medium for the cultivation of cells and tissues of freshwater mollusks, including standard DMEM / F-12 medium, 10% fetal calf serum, streptomycin sulfate 500 mg / l, benzenicillin sodium salt 500 mg / l, gentamicin sulfate 40 mg / l, kanamycin sulfate 50 mg / l and fluconazole in an amount of 100-130 mg / l.
RU2007129111/13A 2007-07-31 2007-07-31 Nutrient medium to cultivate fresh-water mollusc cells and tissues RU2351647C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007129111/13A RU2351647C1 (en) 2007-07-31 2007-07-31 Nutrient medium to cultivate fresh-water mollusc cells and tissues

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007129111/13A RU2351647C1 (en) 2007-07-31 2007-07-31 Nutrient medium to cultivate fresh-water mollusc cells and tissues

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2351647C1 true RU2351647C1 (en) 2009-04-10

Family

ID=41014907

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007129111/13A RU2351647C1 (en) 2007-07-31 2007-07-31 Nutrient medium to cultivate fresh-water mollusc cells and tissues

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2351647C1 (en)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU138706A1 (en) * 1958-08-20 1960-11-30 А.С. Лейбензон Nutrient medium for tissue culture
SU1558984A1 (en) * 1988-03-21 1990-04-23 Латвийская сельскохозяйственная академия Nutrient medium for growing fresias in vitro
SU1661210A1 (en) * 1989-07-06 1991-07-07 Научно-Исследовательский Институт Морфологии Человека Method for culture of chicken embryo adenohypophysis
SU1745767A1 (en) * 1990-01-25 1992-07-07 Институт Биологии Моря Дальневосточного Отделения Ан Ссср Method for preparation of bivalved mollusk mizuchopecten yessoensis embryonic cells
RU2123255C1 (en) * 1994-07-15 1998-12-20 Сибирский государственный технологический университет Nutrient medium for glycyrrhiza uralensis cultured tissue growing - a producer of saponins

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU138706A1 (en) * 1958-08-20 1960-11-30 А.С. Лейбензон Nutrient medium for tissue culture
SU1558984A1 (en) * 1988-03-21 1990-04-23 Латвийская сельскохозяйственная академия Nutrient medium for growing fresias in vitro
SU1661210A1 (en) * 1989-07-06 1991-07-07 Научно-Исследовательский Институт Морфологии Человека Method for culture of chicken embryo adenohypophysis
SU1745767A1 (en) * 1990-01-25 1992-07-07 Институт Биологии Моря Дальневосточного Отделения Ан Ссср Method for preparation of bivalved mollusk mizuchopecten yessoensis embryonic cells
RU2123255C1 (en) * 1994-07-15 1998-12-20 Сибирский государственный технологический университет Nutrient medium for glycyrrhiza uralensis cultured tissue growing - a producer of saponins

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Vago Invertebrate tissue culture
Osinga et al. Cultivation of marine sponges
Brust et al. The nutritional requirements of the larvae of a blowfly, Phormia regina (Meig.)
Chen et al. Establishment of cell lines derived from oyster, Crassostrea gigas Thunberg and hard clam, Meretrix lusoria Röding
Iwasaki Nutritional studies of the edible seaweed Porphyra tenera I. The influence of different B12 analogues, plant hormones, purines and pyrimidines on the growth of conchocelis
CN101991588A (en) Flake and pearl nucleus matching treating fluid for culturing Pinctada martensii pearl
CN106916779A (en) A kind of sea mollusk primary cell separation and cultivate reagent box and application thereof
RU2351647C1 (en) Nutrient medium to cultivate fresh-water mollusc cells and tissues
CN118370247B (en) Method for improving survival rate of hong Kong giant oyster under high-salt condition
US4449480A (en) Culture of freshwater mussel glochidia in an artificial habitat utilizing complex liquid growth media
Douglas Uric acid utilization in Platymonas convolutae and symbiotic Convoluta roscoffensis
AU611508B2 (en) Method for culturing pearls
Wolcott et al. A comparison of diets and water agitation methods for larval culture of the edible sea urchin, Tripneustes ventricosus (Echinodermata: Echinoidea)
Cornet Primary mantle tissue culture from the bivalve mollusc Mytilus galloprovincialis: investigations on the growth promoting activity of the serum used for medium supplementation
Ferkovich et al. Rearing of ectoparasitoid Diapetimorpha introita on an artificial diet: supplementation with insect cell line-derived factors
Wang et al. Effect of pH and Zn2+ on subcultured muscle cells from Macrobrachium nipponense
Munderloh et al. Malarial parasites complete sporogony in axenic mosquitoes
Johnson et al. A Method for Conducting Acute Toxicity Tests with the Early Life Stages of
Plee et al. Improving green sea urchin (Strongylocentrotus droebachiensis) hatchery production by determining effective settlement cues and post-settlement conditions
Kern Simplifying methods for in vitro metamorphosis of glochidia
US6943023B2 (en) Insect cell primary culture medium, extra cellular matrix, and process of preparing an insect culture cell line in a short period of time using the medium and matrix
RU2348686C2 (en) Nutrient medium for microorganism cultivation
Piryaei et al. Isolation of coelomocyte from sea urchin Echinometra mathaei: optimization of culture condition
RU2841541C1 (en) Universal culture medium for culturing bacteria based on hydrolyzate of mink carcasses
Cornet Effects of seawater salinity fluctuations on primary tissue culture from the mussel Mytilus galloprovincialis potential application to the detection of seawater genotoxicity

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20090801