RU2340350C1 - Method of rickardine c obtaining - Google Patents
Method of rickardine c obtaining Download PDFInfo
- Publication number
- RU2340350C1 RU2340350C1 RU2007129210/15A RU2007129210A RU2340350C1 RU 2340350 C1 RU2340350 C1 RU 2340350C1 RU 2007129210/15 A RU2007129210/15 A RU 2007129210/15A RU 2007129210 A RU2007129210 A RU 2007129210A RU 2340350 C1 RU2340350 C1 RU 2340350C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- riccardin
- extract
- substance
- acetone
- primrose
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 12
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 241000245063 Primula Species 0.000 claims abstract description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 7
- 241000254720 Primula macrocalyx Species 0.000 claims abstract description 4
- 235000003518 Primula macrocalyx Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 235000003419 Primula veris subsp macrocalyx Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- JMKSVONWZFVEAI-UHFFFAOYSA-N riccardi c Chemical compound C=1C(O)=CC=C(C2=CC=C(C=C2O)CCC=2C=C(C(=CC=2)O)O2)C=1CCC1=CC=C2C=C1 JMKSVONWZFVEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 49
- HZJISEAKFQACIJ-UHFFFAOYSA-N riccardin C Natural products Oc1ccc2c(CCc3cccc(Oc4cc(CCc5ccc2c(O)c5)ccc4O)c3)c1 HZJISEAKFQACIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 24
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 235000016311 Primula vulgaris Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 6
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 4
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 26
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 26
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 11
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 10
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 10
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 9
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 241000195940 Bryophyta Species 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001503397 Reboulia Species 0.000 description 3
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 241000218922 Magnoliophyta Species 0.000 description 2
- 241000518503 Plagiochila Species 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000016626 Agrimonia eupatoria Nutrition 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 241000736281 Bazzania trilobata Species 0.000 description 1
- 238000007445 Chromatographic isolation Methods 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 241000557797 Dumortiera hirsuta Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000195932 Jungermannia Species 0.000 description 1
- 239000000867 Lipoxygenase Inhibitor Substances 0.000 description 1
- 241000196322 Marchantia Species 0.000 description 1
- 241000196323 Marchantiophyta Species 0.000 description 1
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 1
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 1
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 description 1
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 description 1
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 241001529544 Riccardia Species 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229930183979 marchantin Natural products 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 239000000236 nitric oxide synthase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229930195346 perrottetin Natural products 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 229930192495 plagiochin Natural products 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- CSYSULGPHGCBQD-UHFFFAOYSA-N s-ethylisothiouronium diethylphosphate Chemical compound CCSC(N)=N.CCOP(O)(=O)OCC CSYSULGPHGCBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 description 1
- 150000004354 sesquiterpene derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается получения риккардина С - соединения бисбибензильного типа структурной формулы I:The invention relates to the pharmaceutical industry and for the preparation of riccardin C, a bisbibenzyl type compound of structural formula I:
Указанное соединение может найти применение в качестве фармацевтического средства.The specified compound may find application as a pharmaceutical agent.
Соединение (I) впервые было выделено из мха Reboulia hemispherica в 1982 году [Asakawa, Y. and Matsuda, R. Riccardin C, a novel cyclic bibenzyl derivative from Reboulia hemispherica. / Phytochemistry. 1982. N21. P.2143-1244]. Из литературных данных известно, что риккардин С (I) (Riccardin С) и подобные ему бисбибензильные системы (Perrottetins, Marchantins, Plagiochins), представляющие собой фенольные соединения, ранее выделялись только из бриофитов - мхов-печеночников (из родов Riccardia, Marchantia, Plagiochila и др.) [Wu, С., Lin, H. Labdanoids and bis(bibenzyls) from Jungermannia species / Phytochemistry. - 1995. - V.44. - N1. - P.101-105; Martini, U., Zapp, J., Becker, H.. Chlorinated macrocyclic bis(bibenzyls) from the liverwort Bazzania trilobata / Phytochemistry. - 1998. - V.47. - N1. - P.89-96; Toyota, M., Yoshida, Т., Matsunam, J., Asakawa, Y. Sesquiterpene and other constituents of the liverwort Dumortiera hirsuta // Phytochemistry. - 1997. - V.44. - N2. - P.293-298], а в высших растениях, водорослях и грибах, обнаружены не были.Compound (I) was first isolated from moss Reboulia hemispherica in 1982 [Asakawa, Y. and Matsuda, R. Riccardin C, a novel cyclic bibenzyl derivative from Reboulia hemispherica. / Phytochemistry. 1982. N21. P.2143-1244]. From literature data it is known that riccardin C (I) (Riccardin C) and similar bisbibenzyl systems (Perrottetins, Marchantins, Plagiochins), which are phenolic compounds, were previously isolated only from bryophytes - liver mosses (from the genera Riccardia, Marchantia, Plagiochila et al.) [Wu, C., Lin, H. Labdanoids and bis (bibenzyls) from Jungermannia species / Phytochemistry. - 1995. - V.44. - N1. - P.101-105; Martini, U., Zapp, J., Becker, H .. Chlorinated macrocyclic bis (bibenzyls) from the liverwort Bazzania trilobata / Phytochemistry. - 1998. - V.47. - N1. - P.89-96; Toyota, M., Yoshida, T., Matsunam, J., Asakawa, Y. Sesquiterpene and other constituents of the liverwort Dumortiera hirsuta // Phytochemistry. - 1997. - V.44. - N2. - P.293-298], but in higher plants, algae and fungi, were not found.
Из литературных данных известно, что такие соединения проявляют широкий спектр цитотоксической, антибактериальной и фунгицидной активности и используются как ингибиторы 5-липоксигеназы [Zinsmeister, H.D.; Becker, H.; Eicher, Т.. Bryophytes, a source of biologically active, naturally occuring material. / Angew. Chem. 1991, 103, 134-151; Asakawa, Y. Progress in the Chemistry of Organic Natural Products / Eds.: Herz, E., Kirby, G.W., Moore, R.E., Steglich, W., Tamm, C. - New York: Springer, Wien, 1995. - P.5]. Кроме того, обнаружено, что риккардин С (I) и близкие ему по структуре соединения являются ингибиторами индуцибельной NO-синтазы [Harinantenaina, D.N. Quang, N. Takeshi et. al. Bis(bibenzyls) from liverworts inhibit lipopolysaccaharide-induced inducible NOS in RAW 264.7 cells: a study of structure-activity relartionships and molecular mechanism // L. J. Nat. Prod. - 2005. - N6. - P.1779-1781]. Выделение веществ, отвечающих за ингибирование NO-синтаз, создание новых препаратов соответствующего действия - одна из важнейших проблем в медицине, так как чрезмерный выброс NO приводит к целому ряду различных, зачастую тяжелых патологических состояний. К ним относятся септический шок, нейродегенеративные заболевания - болезни Паркинсона и Альцгеймера, различные воспалительные процессы [Граник, В.Г., Григорьев, H.Б. Ингибиторы синтаз оксида азота - биология и химия // Известия АН. сер. хим. - 2002. - N11 - С.1819-1841].From literature data it is known that such compounds exhibit a wide spectrum of cytotoxic, antibacterial and fungicidal activity and are used as 5-lipoxygenase inhibitors [Zinsmeister, H.D .; Becker, H .; Eicher, T. .. Bryophytes, a source of biologically active, naturally occuring material. / Angew. Chem. 1991, 103, 134-151; Asakawa, Y. Progress in the Chemistry of Organic Natural Products / Eds .: Herz, E., Kirby, GW, Moore, RE, Steglich, W., Tamm, C. - New York: Springer, Wien, 1995. - P .5]. In addition, it was found that riccardin C (I) and structurally related compounds are inhibitors of inducible NO synthase [Harinantenaina, D.N. Quang, N. Takeshi et. al. Bis (bibenzyls) from liverworts inhibit lipopolysaccaharide-induced inducible NOS in RAW 264.7 cells: a study of structure-activity relartionships and molecular mechanism // L. J. Nat. Prod. - 2005. - N6. - P.1779-1781]. Isolation of substances responsible for the inhibition of NO synthases, the creation of new drugs of the corresponding action is one of the most important problems in medicine, since excessive release of NO leads to a number of different, often severe pathological conditions. These include septic shock, neurodegenerative diseases - Parkinson's and Alzheimer's disease, various inflammatory processes [Granik, V.G., Grigoriev, H. B. Nitric Oxide Synthase Inhibitors - Biology and Chemistry // Bulletin of the Academy of Sciences. ser. Chem. - 2002. - N11 - S.1819-1841].
Известен способ получения риккардина С с низким выходом (0.0015%) путем выделения из мха-печеночника [Anton, H., Shoeneborn, R., Mues, R. Bibenzils and bisbibenzyls from a neotropical Plagiochila species. / Phytochemistry. 1999. N8. P.1639-1645]. Способ заключается в экстракции воздушно-сухого сырья последовательно хлористым метиленом и 80%-ным водным метиловым спиртом с последующим фракционированием метанольного экстракта на твердофазном экстракторе с фазой RP-18, и далее, двукратной хроматографией соответствующих фракций на сефадексе LH-20 и хроматографией на препаративной колонке ВЭЖХ.A known method of producing riccardin C with a low yield (0.0015%) by isolation from moss-liver [Anton, H., Shoeneborn, R., Mues, R. Bibenzils and bisbibenzyls from a neotropical Plagiochila species. / Phytochemistry. 1999. N8. P.1639-1645]. The method consists in extracting air-dried raw materials sequentially with methylene chloride and 80% aqueous methyl alcohol, followed by fractionation of the methanol extract on a solid phase extractor with phase RP-18, and then, double chromatography of the appropriate fractions on Sephadex LH-20 and chromatography on a preparative column HPLC
В качестве прототипа выбран способ получения риккардина С путем экстрагирования мха-печеночника Reboulia hemispherica этилацетатом и метанолом с последующим разделением экстракта колоночной хроматографией на силикагеле и тонкослойной хроматографией [Asakawa, Y. and Matsuda, R. Riccardin С, a novel cyclic bibenzyl derivative from Reboulia hemispherica. / Phytochemistry. 1982. N21. P.2143-1244], выход вещества (I) - 0.00153%.As a prototype, a method for producing riccardin C by extracting the moss-liver of Reboulia hemispherica with ethyl acetate and methanol followed by separation of the extract by column chromatography on silica gel and thin layer chromatography [Asakawa, Y. and Matsuda, R. Riccardin C, a novel cyclic bibenzyl derivative from . / Phytochemistry. 1982. N21. P.2143-1244], the yield of substance (I) is 0.00153%.
Недостатком обоих способов является низкий выход риккардина С и малодоступное сырье, используемое для его получения - японские мхи-печеночники, растения, имеющие небольшой ареал и сложные в интродукции.The disadvantage of both methods is the low yield of riccardin C and the inaccessible raw materials used to obtain it - Japanese moss-liver, plants with a small area and difficult to introduce.
Задачей изобретения является создание простого технологичного способа получения риккардина С с высоким выходом из доступного сырья.The objective of the invention is to provide a simple technological method for producing riccardin C with a high yield of available raw materials.
Задача решается выделением риккардина С (I) из высших цветковых растений, а именно из примулы крупночашечковой (Primula macrocalyx Bge.) последовательной экстракцией надземной части и корней растения органическим растворителем (петролейный эфир, гексан, ацетон) с последующим выделением целевого продукта путем хроматографирования. Примула крупночашечковая - многолетнее травянистое растение с толстым корневищем, несущим многочисленные мочки корней и до 10 и более розеток листьев. Растение встречается в Крыму, на Кавказе, на Южном Урале, широко распространено на юге Западной Сибири и Красноярского края. Культивируется в Центральном Сибирском Ботаническом саду (Новосибирск). Предлагаемый способ позволяет извлекать риккардин С (I) с высоким выходом как из надземной части, так и из корней примулы, причем как из диких растений, так и интродуцированных.The problem is solved by isolating riccardin C (I) from higher flowering plants, namely, from a large primrose (Primula macrocalyx Bge.) By sequential extraction of the aerial parts and roots of the plant with an organic solvent (petroleum ether, hexane, acetone), followed by isolation of the target product by chromatography. Large-cup primrose is a perennial herb with a thick rhizome that carries numerous root lobes and up to 10 or more rosettes of leaves. The plant is found in the Crimea, the Caucasus, the Southern Urals, and is widespread in the south of Western Siberia and the Krasnoyarsk Territory. Cultivated in the Central Siberian Botanical Garden (Novosibirsk). The proposed method allows to extract riccardin C (I) in high yield both from the aerial part and from the roots of primrose, both from wild plants and introduced.
Исходное сырье: в работе использовали надземную часть и корневища первоцвета крупночашечкового (Primula macrocalyx Bge.), собранные экспедицией на Алтае в окрестностях села Амос, Чемальский район, в августе 2004 г., а также интродуцированную примулу, выращенную на участках Центрального Сибирского ботанического сада СО РАН. Определение вида примулы и интродукция были проведены сотрудниками лаборатории лекарственных растений ЦСБС СО РАН.Raw materials: the aboveground part and rhizomes of the large-primrose primrose (Primula macrocalyx Bge.), Collected by the expedition in Altai in the vicinity of the village of Amos, Chemal district, in August 2004, as well as introduced primrose grown in areas of the Central Siberian Botanical Garden SB RAS. The determination of the type of primrose and the introduction were carried out by the laboratory of medicinal plants of the Central Scientific and Biological Center SB RAS.
Общая методика выделения риккардина С.General procedure for the isolation of riccardin C.
Для максимально полного удаления липофильных веществ, наличие которых в экстрактах значительно осложняет хроматографическое выделение индивидуальных соединений, проводят экстракцию настаиванием воздушно-сухого растительного сырья в гексане или петролейном эфире при комнатной температуре. Настаивание проводят многократно до обесцвечивания растворителя. Именно настаивание, а не кипячение в растворителе, позволяет отделить красящие пигменты, воска и другие липофильные вещества из сырья, причем риккардин С холодным гексаном или петролейным эфиром не извлекается.To maximize the complete removal of lipophilic substances, the presence of which in the extracts significantly complicates the chromatographic isolation of individual compounds, the extraction is carried out by infusion of air-dried plant material in hexane or petroleum ether at room temperature. Infusion is carried out repeatedly until the solvent is discolored. It is infusion, and not boiling in a solvent, that allows coloring pigments, waxes and other lipophilic substances to be separated from raw materials, and riccardin C is not extracted with cold hexane or petroleum ether.
Дальнейшую обработку растительного сырья проводят настаиванием в ацетоне при комнатной температуре. В результате настаивания растительного сырья в ацетоне получают довольно простой по составу экстракт, содержащий одно основное вещество - риккардин С (пик 15, фиг.1).Further processing of plant materials is carried out by insisting in acetone at room temperature. As a result of the infusion of plant materials in acetone, a fairly simple composition of the extract is obtained, containing one main substance - riccardin C (
Ацетоновый экстракт делят на колонке с силикагелем (соотношение экстракт:адсорбент 1:40), получают фракции, обогащенные риккардином С. Либо - предварительно ацетоновый экстракт последовательно обрабатывают хлороформом и этанолом, весь риккардин С отделяется хлороформом. Затем обогащенные веществом (I) фракции делят на силикагеле и колонке с обращенной фазой (Art. 9334 LiChrosorb RP-18, 10 мкм, Merck), получают риккардин С (фиг.2).The acetone extract is divided on a column of silica gel (extract: adsorbent ratio 1:40), fractions enriched with riccardin C are obtained. Either the acetone extract is preliminarily treated with chloroform and ethanol, all riccardin C is separated with chloroform. Then, the fractions enriched with substance (I) were separated on silica gel and a reverse phase column (Art. 9334 LiChrosorb RP-18, 10 μm, Merck), to obtain riccardin C (Fig. 2).
На основании сравнения полученных спектральных данных с литературными [Anton, H., Shoeneborn, R., Mues, R. Bibenzils and bisbibenzyls from a neotropical Plagiochila species. / Phytochemistry. 1999. N8. P.1639-1645.] выделенному соединению была приписана структура риккардина С (I).Based on a comparison of the obtained spectral data with the literature [Anton, H., Shoeneborn, R., Mues, R. Bibenzils and bisbibenzyls from a neotropical Plagiochila species. / Phytochemistry. 1999. N8. P.1639-1645.] The structure of riccardin C (I) was assigned to the isolated compound.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1. В колонку диаметром 5 см с краном внизу загружают 94.24 г растительного сырья (воздушно-сухие измельченные листья и стебли), шестикратно заливают по 0.5 л гексана и настаивают в общей сложности 48 часов до бесцветного экстракта. Масса гексанового экстракта 0.65 г (0.7% от массы сырья), этот экстракт отбрасывают. Затем сырье настаивают ацетоном 4 раза по 24 часа, масса экстракта - 2.11 г (2.24% от массы сырья).Example 1. A column of 5 cm in diameter with a tap below is loaded with 94.24 g of plant material (air-dried chopped leaves and stems), six times 0.5 l of hexane is poured and insisted for a total of 48 hours until the colorless extract. The mass of hexane extract is 0.65 g (0.7% of the mass of raw materials), this extract is discarded. Then the raw material is insisted with
2.11 г ацетонового экстракта разделяют на колонке с силикагелем (100/160μ, соотношение вещество: адсорбент ~ 1:40, элюент - хлороформ с градиентом этилового спирта от 1%), выделяют в сумме 0.045 г фракций, обогащенных веществом (I).2.11 g of the acetone extract was separated on a silica gel column (100 / 160μ, substance: adsorbent ratio ~ 1:40, eluent - chloroform with a gradient of ethyl alcohol from 1%), 0.045 g of fractions enriched with substance (I) were isolated in the total.
Фракции, обогащенные веществом (I) (0.045 г; 2.13% от массы ацетонового экстракта) делят на обращенной фазе. В стеклянный фильтр насыпают 3 г SiO2 (L 60/200 μ), 10 г обращенной фазы (Art. 9334 LiChrosorb RP-18, 10 мкм, Merck), несколько раз промывают дистиллированной водой, метанолом, наносят фракцию соединения (I) в метаноле и элюируют вещество (I) 90% метанолом. Масса выделенного чистого вещества (I) составляет 0.020 г (0.95% - от массы экстракта; 0.021% - от массы сухого сырья).The fractions enriched with substance (I) (0.045 g; 2.13% by weight of acetone extract) are divided in the reverse phase. 3 g of SiO 2 (L 60/200 μ), 10 g of the reversed phase (Art. 9334 LiChrosorb RP-18, 10 μm, Merck) are poured into a glass filter, washed several times with distilled water, methanol, and a fraction of compound (I) is applied in methanol and the substance (I) is eluted with 90% methanol. The mass of the isolated pure substance (I) is 0.020 g (0.95% by weight of the extract; 0.021% by weight of dry raw materials).
ИК-спектр соединения (I) (C28H24O4; ν, см-1, CHCl3): 3597, 3550, 2928, 2860, 1740, 1706, 1606, 1566, 1506, 1482, 1433, 1333, 1269, 1188, 1105, 1050, 978, 914.IR spectrum of compound (I) (C 28 H 24 O 4 ; ν, cm -1 , CHCl 3 ): 3597, 3550, 2928, 2860, 1740, 1706, 1606, 1566, 1506, 1482, 1433, 1333, 1269 , 1188, 1105, 1050, 978, 914.
УФ-спектр соединения (I) (метанол): 279 нм.UV spectrum of compound (I) (methanol): 279 nm.
Спектр ЯМР 1Н соединения (I) DMSO-d6, +55°С, δ, м.д. (J, Гц): 5.34 д (H3, J3,5 2.0), 6.65 д.д (H5, J5,6 8.0 J5,3 2.0), 6.77 д (H6, J6,5 8.0), 6.77 д (Н6, J6,5 8.0), 2.61 м (2Н7), 2.55 м (2Н8), 6.32 д (H10, J10,14 1.7), 6.70 д (H13, J13,14 7.6), 6.09 д.д (Н14, J14,13 7.6 J14,10 1.7), 6.68 ш.д (Н2', Н6'), 6.82 ш.д (Н3', Н5', J3',2' 7.7), 2.80 ш.с (2Н7', 2Н8'), 6.80 д (Н10', J10',12' 2.6), 6.63 д.д (Н12', J12',13' 8.3 J12',10 2.6), 6.85 д (H13', J13',12' 8.3), 8.65 с (С11-ОН), 8.78 ш.с (С1-ОН), 9.09 ш.с (С11'-ОН). 1 H NMR spectrum of compound (I) DMSO-d 6 , + 55 ° С, δ, ppm (J, Hz): 5.34 d (H 3 , J 3.5 2.0), 6.65 dd (H 5 , J 5.6 8.0 J 5.3 2.0), 6.77 d (H 6 , J 6.5 8.0 ), 6.77 d (H 6 , J 6.5 8.0), 2.61 m (2H 7 ), 2.55 m (2H 8 ), 6.32 d (H 10 , J 10.14 1.7), 6.70 d (H 13 , J 13 , 14.7.6), 6.09 d.d. (H 14 , J 14.13 7.6 J 14.10 1.7), 6.68 b.d. (H 2 ' , H 6' ), 6.82 b.d. (H 3 ' , H 5 ' , J 3', 2 ' 7.7), 2.80 bs (2H 7' , 2H 8 ' ), 6.80 d (H 10' , J 10 ', 12' 2.6), 6.63 dd (H 12 ' , J 12 ', 13' 8.3 J 12 ', 10 2.6), 6.85 d (H 13' , J 13 ', 12' 8.3), 8.65 s (C 11 -OH), 8.78 bs (C 1 -OH) 9.09 bp (C 11 ' -OH).
Спектр ЯМР 13С соединения (I) (DMSO, δC, м.д.): 34.8 т (С7'), 36.1 т (С7), 37 (С8), 37.3 (С8'), 112.7 д (С12'), 115.6 д (С10), 116 д (С6), 116.03 д (С10'), 116.6 д (С3), 119.5 д (С14), 121.5 д (С5), 121.5 д (С2', С6'), 125.6 с (С12), 129 д (С3', С5'), 129.2 с (С14'), 131.7 с (С4), 132 д (С13'), 132 д (С13), 139.1 с (С4'), 139.9 с (С9'), 142.7 с (С9), 144.1 с (С1), 147 с (С2), 152.7 с (С1'), 153.4 с (С11), 156.3 с (С11'). 13 C NMR spectrum of compound (I) (DMSO, δ C , ppm): 34.8 t (C 7 ' ), 36.1 t (C 7 ), 37 (C 8 ), 37.3 (C 8' ), 112.7 d (C 12 ' ), 115.6 d (C 10 ), 116 d (C 6 ), 116.03 d (C 10' ), 116.6 d (C 3 ), 119.5 d (C 14 ), 121.5 d (C 5 ), 121.5 d (C 2 ' , C 6' ), 125.6 s (C 12 ), 129 d (C 3 ' , C 5' ), 129.2 s (C 14 ' ), 131.7 s (C 4 ), 132 d (C 13 ' ), 132 d (C 13 ), 139.1 s (C 4' ), 139.9 s (C 9 ' ), 142.7 s (C 9 ), 144.1 s (C 1 ), 147 s (C 2 ), 152.7 s ( C 1 ' ), 153.4 s (C 11 ), 156.3 s (C 11' ).
MS; m/z (%): 424 (100), 225 (7.6), 212 (46), 211 (93.5), 197 (8), 152 (4), 120 (7), 107 (18), 941 (14), 77 (8), 56 (5).MS; m / z (%): 424 (100), 225 (7.6), 212 (46), 211 (93.5), 197 (8), 152 (4), 120 (7), 107 (18), 941 (14 ), 77 (8), 56 (5).
Пример 2. Из 100 г воздушно сухого сырья (надземная часть примулы, измельченные листья и стебли) получают 2.23 г (2.23% от массы сырья) ацетонового экстракта, как описано в примере 1. Экстракт разделяют растворителями - в хлороформ экстрагируется 1.56 г экстракта (70%), этанолом - 0.67 г (30%). Колоночной хроматографией хлороформного извлечения (SiO2 100/160μ, соотношение вещество:адсорбент ~1:40; диаметр колонки 1.0 см, элюент - хлороформ с градиентом этилового спирта от 1 до 10%) выделяют 0.049 г фракции вещества (I). Ход хроматографии контролируют с помощью пластинок ТСХ в системе растворителей 5% этанола в хлороформе. Обогащенные фракции вещества (I) (0.049 г; 2.20% от массы ацетонового экстракта). В стеклянный фильтр насыпают 3 г SiO2 (L 60/200 μ), 10 г обращенной фазы (Art. 9334 LiChrosorb RP-18, 10 мкм, Merck), несколько раз промывают дистиллированной водой, метанолом, наносят объединенную фракцию соединения (I) в метаноле и элюируют вещество (I) 90% метанолом. Масса выделенного чистого вещества (I) составляет 0.022 г (0.97% - от массы экстракта; 0.022% - от массы сухого сырья).Example 2. From 100 g of air-dried raw materials (the aerial part of the primrose, crushed leaves and stems), 2.23 g (2.23% by weight of the raw material) of the acetone extract are obtained as described in Example 1. The extract is separated by solvents — 1.56 g of the extract is extracted into chloroform (70 %), ethanol - 0.67 g (30%). Column chromatography of chloroform extraction (SiO 2 100 / 160μ, substance: adsorbent ratio ~ 1: 40; column diameter 1.0 cm, eluent chloroform with a gradient of ethyl alcohol from 1 to 10%) 0.049 g of the fraction of substance (I) was isolated. The progress of chromatography is monitored using TLC plates in a solvent system of 5% ethanol in chloroform. Enriched fractions of substance (I) (0.049 g; 2.20% by weight of acetone extract). 3 g of SiO 2 (L 60/200 μ), 10 g of reversed phase (Art. 9334 LiChrosorb RP-18, 10 μm, Merck) are poured into a glass filter, washed several times with distilled water, methanol, and the combined fraction of compound (I) is applied. in methanol and the substance (I) is eluted with 90% methanol. The mass of the isolated pure substance (I) is 0.022 g (0.97% by weight of the extract; 0.022% by weight of dry raw materials).
Пример 3. Воздушно-сухие измельченные корни примулы крупночашечковой массой 199 г настаивают в колбе в 1.5 л петролейного эфира 3 раза по двое суток до бесцветного экстракта. Эти экстракты отбрасывают. Далее настаивают сырье в 1.5 л ацетона (5 раз по двое суток до полного извлечения риккардина С, контроль методом ВЭЖХ). Получают 3.85 г экстракта (1.93% от массы сухого сырья). Экстракт хроматографируют на колонке с силикагелем (100/160μ, соотношение вещество:адсорбент ~ 1:40, элюент - хлороформ с градиентом этилового спирта от 1 до 10%), выделяют в сумме 0.45 г фракций, обогащенных веществом (I). Проводят рехроматографию на колонке с силикагелем (100/160μ, соотношение вещество:адсорбент ~ 1:80, элюент - хлороформ с градиентом этилового спирта от 1 до 10%), выделяют в сумме 0.046 г вещества (I) (0.023% от массы сухого сырья).Example 3. Air-dried ground roots of a primrose with a cup weight of 199 g are infused in a flask of 1.5 L of
Пример 4. Воздушно-сухие экземпляры целого растения примулы измельчают, образец массой 100 г настаивают в колбе, в 1.0 л петролейного эфира 3 раза по двое суток. Эти экстракты отбрасывают. Далее настаивают сырье в 1.0 л ацетона (5 раз по двое суток до полного извлечения риккардина С, контроль методом ВЭЖХ). Получают 2.02 г экстракта (2.02% от массы сухого сырья). Экстракт хроматографируют на колонке с силикагелем (100/160μ, соотношение вещество:адсорбент ~1:40, элюент - хлороформ с градиентом этилового спирта от 1 до 10%), выделяют в сумме 0.22 г фракций, обогащенных веществом (I). Проводят рехроматографию на колонке с силикагелем (100/160μ, соотношение вещество:адсорбент ~ 1:80, элюент - хлороформ с градиентом этилового спирта от 1 до 10%), выделяют в сумме 0.022 г вещества (I) (0.022% от массы сухого сырья).Example 4. Air-dried specimens of a whole plant of primrose are crushed, a sample weighing 100 g is infused in a flask, in 1.0 l of
Таким образом, предлагаемый способ получения риккардина С позволяет получить чистое вещество (I) из доступного возобновляемого сырья с достаточно высоким выходом после экстракции органическими растворителями настаиванием при комнатной температуре и последовательных хроматографий на силикагеле и обращенной фазе или двукратной колоночной хроматографией на силикагеле. Он имеет ряд преимуществ по сравнению с известными способами:Thus, the proposed method for the preparation of riccardin C allows one to obtain a pure substance (I) from available renewable raw materials with a sufficiently high yield after extraction with organic solvents by infusion at room temperature and sequential chromatography on silica gel and reverse phase or double column chromatography on silica gel. It has several advantages compared to known methods:
- экстракция целевого продукта проводится из доступного сырья - высшего цветкового растения примулы крупночашечковой, которая может быть достаточно легко заготовлена как в дикой природе, так и на культурных площадках в отличие от сбора мхов-печеночников, используемых в прототипе;- extraction of the target product is carried out from available raw materials - the highest flowering plant of the large-cup primrose, which can be quite easily harvested both in the wild and on cultural sites, in contrast to the collection of liver mosses used in the prototype;
- для извлечения риккардина С используются различные растворители; отогнанный из экстракта растворитель не требует дополнительной очистки или регенерации для использования в повторных экстракциях, что весьма технологично;- various solvents are used to extract riccardin C; the solvent distilled from the extract does not require additional purification or regeneration for use in repeated extracts, which is very technologically advanced;
- растворители и метод экстракции подобраны таким образом, что извлекаемый из сырья риккардин С выделяется с выходом, большим, чем в способах-аналогах. Выход целевого продукта по предлагаемому способу составляет 0.021-0.023%, против 0.00153% по известному способу-прототипу.- the solvents and the extraction method are selected in such a way that the riccardin C extracted from the raw material is isolated with a yield greater than in the analogue methods. The yield of the target product by the proposed method is 0.021-0.023%, against 0.00153% by the known prototype method.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007129210/15A RU2340350C1 (en) | 2007-07-30 | 2007-07-30 | Method of rickardine c obtaining |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007129210/15A RU2340350C1 (en) | 2007-07-30 | 2007-07-30 | Method of rickardine c obtaining |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2340350C1 true RU2340350C1 (en) | 2008-12-10 |
Family
ID=40194207
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007129210/15A RU2340350C1 (en) | 2007-07-30 | 2007-07-30 | Method of rickardine c obtaining |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2340350C1 (en) |
-
2007
- 2007-07-30 RU RU2007129210/15A patent/RU2340350C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Acakawa, Y, and Matsuda, R. Riccardin C, a novel cyclic bibenzyl derivative from Reboulia hemispherica. Phytochemistry. 1982, №21, p.2143-1244. Anton, H., Shoenebom, R., Mues, R. Bibenrils and bisbibenryls from a neotropical Plagiochila species. Phytochemistry. 1999, №8, p.1639-1645. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rabe et al. | Isolation and identification of antibacterial compounds from Vernonia colorata leaves | |
| Kite et al. | Flavonol tetraglycosides from fruits of Styphnolobium japonicum (Leguminosae) and the authentication of Fructus Sophorae and Flos Sophorae | |
| Al-Shabibi et al. | Isolation, characterization and prediction of biologically active glycoside compounds quercetin-3-rutinoside from the fruits of Ficus sycomorus | |
| Makenzi et al. | Chemical constituents of Ocimum Kilimandscharicum Guerke acclimatized in Kakamega Forest, Kenya | |
| Dung et al. | Compounds from the aerial parts of Piper bavinum and their anti-cholinesterase activity | |
| Morgan et al. | Chemical components from the stems of Pueraria lobata and their tyrosinase inhibitory activity | |
| Alemika et al. | Isolation and characterization of incensole from Boswellia dalzielii stem bark | |
| Deans et al. | Extraction of carboxylic acid-containing diterpenoids from Dodonaea viscosa via pressurised hot water extraction | |
| Khanal et al. | Characterization of essential oil, estimation of phenolic and flavonoid content and biological activities of Ephedra pachyclada BOISS | |
| Begum et al. | Secondary metabolites from different extractives of Stereospermum suaveolens | |
| Umaru et al. | Extraction, elucidation, characterization and evaluation of antibacterial activity of four pure compound from Barringtonia racemosa leaf extract | |
| RU2340350C1 (en) | Method of rickardine c obtaining | |
| CN117603221B (en) | A small molecule compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof, its use and extraction method | |
| Phatchana et al. | Canangalias A and B from the stem bark of Cananga latifolia | |
| Kiruthiga et al. | Studies on phytochemicals and steroid isolation from N-hexane extract of Anisochilus carnosus | |
| Nawwar et al. | Three new di-O-glycosyl-C-glucosyl flavones from the leaves of Caesalpinia ferrea Mart. | |
| CN104650053B (en) | Flavonoids compound, as well as preparation method and applications thereof | |
| Sule et al. | Triterpenoids From the Leaves of Olax mannii Oliv. | |
| Adeosun et al. | Isolation and characterization of lupeol from the whole plant of Phaulopsis bateri | |
| Mohammed et al. | Purification and characterization of extracts from the stem bark of Sclerocarya birrea (Marula) | |
| Abdulhamid et al. | Phytochemical screening, chromatographic studies and antibacterial activity of Eclipta alba L. leaves extracts | |
| Abubakar et al. | Phytochemical screening and isolation of bioactive compounds from the ethyl acetate extract of Indigofera nummulariifolia | |
| Alimboyoguen et al. | Anti-mitotic Activities of Ethanolic Extract and Glutinol from Uvaria rufa Blume | |
| Al-Ghoul | Chemical constituents of Euphorbia hierosolymitana Boiss | |
| Lucca et al. | Chemical, chemophenetic and antiproliferative studies of Cattleya purpurata |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180731 |