RU2236453C2 - Strain of bacterium rhodococcus globerulus 19f decomposing 1,1-dimethylhydrazine (heptyl) - Google Patents
Strain of bacterium rhodococcus globerulus 19f decomposing 1,1-dimethylhydrazine (heptyl) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2236453C2 RU2236453C2 RU2002124807/13A RU2002124807A RU2236453C2 RU 2236453 C2 RU2236453 C2 RU 2236453C2 RU 2002124807/13 A RU2002124807/13 A RU 2002124807/13A RU 2002124807 A RU2002124807 A RU 2002124807A RU 2236453 C2 RU2236453 C2 RU 2236453C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- heptyl
- strain
- soil
- dimethylhydrazine
- rhodococcus globerulus
- Prior art date
Links
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 title claims abstract description 28
- RHUYHJGZWVXEHW-UHFFFAOYSA-N 1,1-Dimethyhydrazine Chemical compound CN(C)N RHUYHJGZWVXEHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 13
- 241001464989 Rhodococcus globerulus Species 0.000 title claims abstract description 13
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract description 28
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 abstract description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 abstract description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000002760 rocket fuel Substances 0.000 abstract description 3
- JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N phencyclidine Chemical compound C1CCCCN1C1(C=2C=CC=CC=2)CCCCC1 JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LPLLVINFLBSFRP-UHFFFAOYSA-N 2-methylamino-1-phenylpropan-1-one Chemical compound CNC(C)C(=O)C1=CC=CC=C1 LPLLVINFLBSFRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 244000293323 Cosmos caudatus Species 0.000 description 1
- 235000005956 Cosmos caudatus Nutrition 0.000 description 1
- 241000238578 Daphnia Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 235000015842 Hesperis Nutrition 0.000 description 1
- 235000012633 Iberis amara Nutrition 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000002828 fuel tank Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000007773 growth pattern Effects 0.000 description 1
- 239000000383 hazardous chemical Substances 0.000 description 1
- -1 heptyl rocket fuel Chemical compound 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000003973 irrigation Methods 0.000 description 1
- 230000002262 irrigation Effects 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L malate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000005067 remediation Methods 0.000 description 1
- 238000003900 soil pollution Methods 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Processing Of Solid Wastes (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой новый бактериальный штамм, способный разлагать несимметричный 1,1-диметилгидразин (НДМГ) в аэробных условиях в объектах окружающей среды.The invention relates to biotechnology and is a new bacterial strain capable of decomposing asymmetric 1,1-dimethylhydrazine (UDMH) under aerobic conditions in environmental objects.
1,1-Диметилгидразин в качестве ракетного топлива (гептил) широко используется в российских космических кораблях типа "Космос", "Союз" и "Протон" и вызывает значительные загрязнения почвы на месте падения первых ступеней (топливных баков), а также на промышленных предприятиях при синтезе данного вещества. Большую озабоченность вызывает территория Горного Алтая, где наряду с промышленными выбросами предприятий имеет место загрязнение почв гептилом в результате сброса вторых ступеней ракет, стартующих с космодрома "Байконур".1,1-Dimethylhydrazine as a rocket fuel (heptyl) is widely used in Russian spacecraft such as Cosmos, Soyuz, and Proton and causes significant soil pollution at the site of the fall of the first stages (fuel tanks), as well as in industrial enterprises in the synthesis of this substance. Of great concern is the territory of Gorny Altai, where, along with industrial emissions of enterprises, heptyl contamination of soils occurs as a result of the dumping of the second stages of rockets starting from the Baikonur cosmodrome.
Гептил - бесцветная жидкость с резким неприятным запахом, относится к легковоспламеняющимся жидкостям, к I классу опасности. Стабилен в объектах окружающей среды, возможен переход из почвы в растения и далее по пищевой цепочке [1, 2, 3].Heptyl is a colorless liquid with a pungent unpleasant odor. It belongs to flammable liquids and belongs to hazard class I. It is stable in environmental objects; transition from soil to plants and further along the food chain is possible [1, 2, 3].
В настоящее время недостаточно разработаны действенные и экологически безопасные методы очистки почв, загрязненных гептилом. Санация загрязненных гептилом почв проводится, в основном, с помощью химических средств, что очень дорого, экологически вредно, привносит дополнительные загрязнители и зачастую приводит к потере плодородия земель.Currently, effective and environmentally friendly methods for cleaning soils contaminated with heptyl are not sufficiently developed. Remediation of heptyl contaminated soils is carried out mainly by chemical means, which is very expensive, environmentally harmful, introduces additional pollutants and often leads to loss of land fertility.
Среди биологических способов реставрации почв, загрязненных гептилом, можно отметить метод, предложенный агрофизическим институтом, с помощью насыпного слоя почвы и растений, однако это довольно трудоемкий и не всегда осуществимый способ; кроме того, возникает проблема, связанная с накоплением НДМГ в растениях [4].Among the biological methods of restoration of soils contaminated with heptyl, one can note the method proposed by the Agrophysical Institute using a bulk layer of soil and plants, but this is a rather laborious and not always feasible method; in addition, there is a problem associated with the accumulation of UDMH in plants [4].
Наиболее перспективным является использование биологических методов на основе специальных микроорганизмов-деструкторов гептила. Однако на сегодняшний день, судя по доступной нам литературе, микробиологические способы биоремедиации загрязненных гептилом почв не разработаны, отсутствуют и данные о патентах на микроорганизмы-деструкторы гептила [5, 6].The most promising is the use of biological methods based on special heptyl destructive microorganisms. However, to date, judging by the literature available to us, microbiological methods for bioremediation of heptyl contaminated soils have not been developed, and there are no data on patents for heptyl destructive microorganisms [5, 6].
Целью изобретения является бактериальный штамм-деструктор гептила в почве. Технический результат, который был получен при использовании изобретения – высокая эффективностъ и безопасность разложения "in situ" ракетного топлива гептила в загрязненнной почве.The aim of the invention is a bacterial strain of heptyl in the soil. The technical result that was obtained using the invention is high efficiency and safety of in situ decomposition of heptyl rocket fuel in contaminated soil.
Для достижения цели предлагается штамм Rhodococcus globerulus 19Ф, выделенный из почвы, обобранной вблизи железнодорожной станции Валово Тульской области. Данная почва была загрязнена гептилом вследствие аварии. Штамм селекционирован путем длительных пересевов отдельных колоний бактерий на минимальной солевой среде, содержащей в качестве единственного источника углерода НДМГ в различных концентрациях [9, 10].To achieve the goal, a strain of Rhodococcus globerulus 19F is proposed, isolated from soil collected near the railway station of Valovo, Tula region. This soil was contaminated with heptyl due to an accident. The strain was selected by prolonged reseeding of individual bacterial colonies on a minimal salt medium containing UDMH in various concentrations as the sole carbon source [9, 10].
Штамм идентифицирован до вида и депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ), регистрационный номер АС-1642. Штамм также хранится в коллекции культур НИЦ ТБП в отделе экологической биотехнологии.The strain is identified to the species and deposited in the All-Russian collection of industrial microorganisms (VKPM), registration number AC-1642. The strain is also stored in the culture collection of SIC TBP in the Department of Environmental Biotechnology.
Штамм Rhodococcus globerulus 19Ф характеризуется следующими свойствами.The strain Rhodococcus globerulus 19F is characterized by the following properties.
Морфолого-культуральные признакиMorphological and cultural characteristics
Аэроб, грам-положительный. Температура роста от +10 до +40° С. Клетки палочковидные, спор не образует. Палочки неравномерные по толщине, в молодой культуре слабо ветвящиеся, диаметр клеток 0,6-0,8 мкм, длина 4-8 мкм. Цикл развития хорошо выражен, на ранних стадиях (20-24 часа) наблюдается элементарное ветвление, в дальнейшем по мере старения культуры (3-4 суток) происходит распад длинных клеток на короткие палочковидные элементы, коккоидных форм практически нет.Aerob, gram-positive. The growth temperature is from +10 to + 40 ° C. The cells are rod-shaped, do not form spores. The rods are uneven in thickness, weakly branching in a young culture, the diameter of the cells is 0.6-0.8 microns, the length is 4-8 microns. The development cycle is well defined, at the early stages (20-24 hours), elementary branching is observed, later, as the culture ages (3-4 days), long cells decompose into short rod-shaped elements, there are practically no coccoid forms.
Характер роста на агаризованных средах: глюкозопептонно-дрожжевой и ферментативном гидролизате рыбной муки - обильный, слизистый, окраска розовато-кремовая.The growth pattern on agarized media: glucose peptone-yeast and enzymatic hydrolyzate of fish meal is plentiful, mucous, pinkish-cream color.
Физиолого-биохимические признакиPhysiological and biochemical characteristics
Отношение к источникам углерода: использует глюкозу, сахарозу, глицерин, трегалозу, малат, пируват, цитрат, сукцинат, не способен к росту на рамнозе и лактате, крахмал не гидролизует.Attitude to carbon sources: uses glucose, sucrose, glycerin, trehalose, malate, pyruvate, citrate, succinate, is not able to grow on ramnose and lactate, starch does not hydrolyze.
Отношение к источникам азота: усваивает органические и аммонийные формы азота. Желатину не разжижает.Attitude to nitrogen sources: assimilates organic and ammonium forms of nitrogen. It does not dilute gelatin.
В гидролизатах целых клеток обнаружена лизо-ДАПК, арабиноза и галактоза, что соответствует IV типу клетчатых стенок. Липид LCNA присутствует и по значению rf соответствует соответствующему липиду родококков.In the hydrolysates of whole cells, lyso-DAPK, arabinose and galactose were found, which corresponds to type IV cell walls. An LCNA lipid is present and rf corresponds to the corresponding rhodococcal lipid.
Штамм хорошо растет на богатой питательной среде: ферментативный гидролизат рыбной муки (15 г/л), время культивирования - 1 сутки; средний титр клеток при этом - (1,5±0,6)· 109. Возможно культивирование на минимальной солевой среде (см. пример №1), с глюкозой (10 г/л) вместо гептила, продолжительность роста составляет 4-5 суток, средний титр клеток - (2,0±0,5)· 109.The strain grows well in a rich nutrient medium: enzymatic hydrolyzate of fish meal (15 g / l), cultivation time - 1 day; the average cell titer in this case is (1.5 ± 0.6) · 10 9 . It is possible to cultivate on a minimal salt medium (see example No. 1), with glucose (10 g / l) instead of heptyl, the growth duration is 4-5 days, the average cell titer is (2.0 ± 0.5) · 10 9 .
Для хранения штамма используются вышеуказанные агаризованные среды (в виде косяков в пробирках), залитые стерильным вазелиновым маслом.For storage of the strain, the above agarized media are used (in the form of jambs in test tubes) filled with sterile liquid paraffin.
По совокупности признаков штамм был идентифицирован в ВКПМ как Rhodococcus globerulus 19Ф. Идентификация проводилась в соответствии с общепринятыми определителями Берджи [11].According to the totality of features, the strain was identified in VKPM as Rhodococcus globerulus 19F. Identification was carried out in accordance with the generally accepted identifiers of Bergey [11].
Патогенные свойстваPathogenic properties
Штамм не обладает токсичностью в отношении теплокровных животных (штамм проверялся в НИЦ ТБП, справка сдана в ВКПМ при депонировании штамма).The strain does not have toxicity to warm-blooded animals (the strain was checked at the SIC TBP, a certificate was submitted to the VKPM when the strain was deposited).
Приведенные ниже примеры иллюстрируют сущность изобретения.The following examples illustrate the invention.
Пример 1Example 1
Культуру штамма Rhodococcus globerulus 19Ф высевают на чашки с агаризованной минимальной солевой средой и гептилом в качестве единственного источника углерода.A culture of Rhodococcus globerulus 19F strain is plated on plates with agarized minimal saline and heptyl as the sole carbon source.
Состав среды, г/л:The composition of the medium, g / l:
(NH4)2HPO4 1,5(NH 4 ) 2 HPO 4 1.5
КН2РO4 0,7KN 2 PO 4 0.7
NaCl 0,5NaCl 0.5
MgSO4· 7H2O 0,8MgSO 4 · 7H 2 O 0.8
Агар 20Agar 20
Гептил 100 мг/лHeptyl 100 mg / L
Вода дистиллированная До 1 лDistilled water Up to 1 L
Результат: рост газоном или отдельные колонии штамма Rhodococcus globerulus 19Ф, в зависимости от густоты посева на солевой среде с гептилом.Result: the growth of a lawn or individual colonies of the strain Rhodococcus globerulus 19F, depending on the density of sowing on saline medium with heptyl.
Пример 2Example 2
Культура штамма Rhodococcus globerulus 19Ф выращивают на жидкой питательной среде: ферментативный гидролизат рыбной муки (15 г/л), глубинным способом при температуре t=(29±2)° С и оборотах мешалки 200-220 об/мин в течение 24 часов.The culture of the strain Rhodococcus globerulus 19F is grown on a liquid nutrient medium: enzymatic hydrolyzate of fish meal (15 g / l), in a deep way at a temperature of t = (29 ± 2) ° С and stirrer revolutions of 200-220 rpm for 24 hours.
Титр выросшей культуры составляет 1,5· 109 кл/мл. В почву, загрязненную гептилом, вносят суспензию (культуральную жидкость штамма Rhodococcus globerulus 19Ф в концентрации ~ 107 кл/мл; обработка ведется из расчета 1 л/м2 почвы. В качестве контроля берут загрязненную гептилом необработанную почву. После внесения микроорганизмов почвенные образцы выдерживают до 1 месяца, поддерживая влажность почвы путем полива. Определяют начальную и конечную концентрацию гептила в пробах методом газовой хроматографии (9). Результаты в табл. 1.The titer of the grown culture is 1.5 · 10 9 cells / ml. A suspension is added to the soil contaminated with heptyl (culture fluid of the strain Rhodococcus globerulus 19F at a concentration of ~ 10 7 cells / ml; the treatment is carried out at a rate of 1 l / m 2 of soil. As a control, untreated soil contaminated with heptyl is taken. After application of microorganisms, the soil samples are kept up to 1 month, maintaining soil moisture by irrigation. Determine the initial and final concentration of heptyl in the samples by gas chromatography (9). The results are shown in Table 1.
Как видно из табл.1, степень разложения гептила в почве, обработанной культуральной жидкостью штамма Rhodococcus globerulus 19Ф, в среднем выше на 39%.As can be seen from table 1, the degree of decomposition of heptyl in soil treated with the culture fluid of the strain Rhodococcus globerulus 19F is on average higher by 39%.
Пример 3Example 3
Штамм Rhodococcus globerulus 19Ф выращивают на синтетической минимальной солевой среде, г/л:The strain Rhodococcus globerulus 19F is grown on a synthetic minimum salt medium, g / l:
(NH4)2HPO4 1,5(NH 4 ) 2 HPO 4 1.5
КН2РO4 0,7KN 2 PO 4 0.7
NaCl 0,5NaCl 0.5
MgSO4· 7H2O 0,8MgSO 4 · 7H 2 O 0.8
Глюкоза 10,0Glucose 10.0
Вода дистиллированная До 1 лDistilled water Up to 1 L
Время культивирования 4 суток.The cultivation time is 4 days.
Почву, загрязненную гептилом (из расчета 200 мг/кг), обрабатывают культуральной жидкостью, имеющей титр клеток 107 мл из расчета 1 л/м2. После обработки почвенные образцы выдерживают при t=(20±2)° С в течение 1 месяца, периодически увляжняя. Пробы почвы отбирают в начале эксперимента и через месяц. В пробах определяют интегральную токсичность на дафниях. Результаты представлены в табл.2.The soil contaminated with heptyl (at a rate of 200 mg / kg) is treated with a culture fluid having a cell titer of 10 7 ml at a rate of 1 l / m 2 . After treatment, the soil samples are kept at t = (20 ± 2) ° C for 1 month, periodically setting. Soil samples are taken at the beginning of the experiment and after a month. The samples determine the integral toxicity of daphnia. The results are presented in table.2.
Как видно из табл. 2, обработка почвы, загрязненной гептилом, культурой Rhodococcus globerulus 19Ф приводит к значительному снижению интегральной токсичности почвы [12].As can be seen from the table. 2, the treatment of soil contaminated with heptyl, a culture of Rhodococcus globerulus 19F leads to a significant decrease in the integral toxicity of the soil [12].
Таким образом, выделенный нами штамм позволяет значительно снижать концентрацию гептила в почве и суммарную (интегральную) токсичность почвы.Thus, the strain isolated by us allows one to significantly reduce the concentration of heptyl in the soil and the total (integral) toxicity of the soil.
Библиографические данныеBibliographic data
1. Российский регистр потенциально опасных химических и биологических веществ. /Под ред. Горшковой Р.Б.1. The Russian Register of Potentially Hazardous Chemical and Biological Substances. / Ed. Gorshkova R.B.
2. Положение о разработке инструкции по ТБ в Институте биофизики (Приложение №2 к постановлению Министерства труда РФ от 01.07.1993 г., №129).2. Regulation on the development of safety instructions at the Institute of Biophysics (Appendix No. 2 to the Resolution of the Ministry of Labor of the Russian Federation of July 1, 1993, No. 129).
3. 1,1-Диметилгидразин. Свидетельство о гос. регистрации. Серия ВТ №000899.3. 1,1-Dimethylhydrazine. Certificate of state registration. VT Series No. 000899.
4. Петрова З.М., Остапенко Н.С., Бойцова Л.В. Миграция несимметричного диметилгидразина и его производных при рекультивации загрязненных почв. // Почвоведение, 1999, №12, с.1502-1508.4. Petrova Z.M., Ostapenko N.S., Boytsova L.V. Migration of asymmetric dimethylhydrazine and its derivatives during the restoration of contaminated soils. // Soil Science, 1999, No. 12, p. 1502-1508.
5. Ермаков Е.И., Панова Г.Г. Основы экологически гармоничной биореставрации химически загрязненных почв. // Доклады Россельхозакадемии, 2000, №5.5. Ermakov E.I., Panova G.G. Basics of ecologically harmonious bioremediation of chemically contaminated soils. // Reports of the Russian Agricultural Academy, 2000, No. 5.
6. Ермаков Е.И. и др. Способ реставрации загрязненных почв. Патент РФ №2101898, БИ №2.6. Ermakov E.I. and others. The method of restoration of polluted soils. RF patent No. 2101898, BI No. 2.
7. Добровольская Т.Г., Скворцова И.П., Лысак Л.В. Методы выделения и идентификации почвенных бактерий. - М.: Московский университет, 1989, 35 с.7. Dobrovolskaya T.G., Skvortsova I.P., Lysak L.V. Methods of isolation and identification of soil bacteria. - M.: Moscow University, 1989, 35 p.
8. Звягинцев Д.Г. Методы почвенной микробиологии и биохимии. - М.: Московский университет, 1991, 304 с.8. Zvyagintsev D.G. Methods of soil microbiology and biochemistry. - M.: Moscow University, 1991, 304 p.
9. Самсонов Д.П., Борновалова Г.В., Первунина Р.И., Жирюхина И.П. Хромато-масс-спектрометрическое определение N,N-диметилгидразина в почве. // Аналитическая химия, 1988, т.53, №2, с.191.9. Samsonov D.P., Bornovalova G.V., Pervunina R.I., Zhiryukhina I.P. Chromatography-mass spectrometric determination of N, N-dimethylhydrazine in the soil. // Analytical chemistry, 1988, v. 53, No. 2, p. 191.
10. Карасевич Ю.Н. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические органические соединения. - М.: Наука, 1982, 144 с.10. Karasevich Yu.N. Fundamentals of the selection of microorganisms utilizing synthetic organic compounds. - M .: Nauka, 1982, 144 p.
11. Bergey’s manual determinative bacteriology. T.S. Williams, Gibbons N.E. (Eds.). Baltimore, 1994, v. 4.11. Bergey’s manual determinative bacteriology. T.S. Williams, Gibbons N.E. (Eds.). Baltimore, 1994, v. 4.
12. Методическое руководство по биотестированию почвы / Мособлкомприрода, вх. №621 от 08.08.95. - Серпухов: Архив НИЦ ТБП, 1994, 13 с.12. Guidelines for soil biotesting / Mosoblkompriroda, int. No. 621 dated 08/08/95. - Serpukhov: Archive of SIC TBP, 1994, 13 p.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002124807/13A RU2236453C2 (en) | 2002-09-18 | 2002-09-18 | Strain of bacterium rhodococcus globerulus 19f decomposing 1,1-dimethylhydrazine (heptyl) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002124807/13A RU2236453C2 (en) | 2002-09-18 | 2002-09-18 | Strain of bacterium rhodococcus globerulus 19f decomposing 1,1-dimethylhydrazine (heptyl) |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002124807A RU2002124807A (en) | 2004-03-27 |
| RU2236453C2 true RU2236453C2 (en) | 2004-09-20 |
Family
ID=33433001
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002124807/13A RU2236453C2 (en) | 2002-09-18 | 2002-09-18 | Strain of bacterium rhodococcus globerulus 19f decomposing 1,1-dimethylhydrazine (heptyl) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2236453C2 (en) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2114071C1 (en) * | 1997-05-22 | 1998-06-27 | Борзенков Игорь Анатольевич | Method of biological preparation-assisted cleaning of soil and natural and waste waters polluted by petroleum and petroleum products |
-
2002
- 2002-09-18 RU RU2002124807/13A patent/RU2236453C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2114071C1 (en) * | 1997-05-22 | 1998-06-27 | Борзенков Игорь Анатольевич | Method of biological preparation-assisted cleaning of soil and natural and waste waters polluted by petroleum and petroleum products |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ДЕМЬЯНЕНКО Л.И., ЛАСКИН Б.М., ПОВЕЛИКИНА Л.Н. Получение накопительных культур микроорганизмов-деструкторов несимметричного диметилгидразина. Журнал прикладной химии. 1999, 72, №12, с.2047-2053. ЧУГУНОВ В.А., МАРТОВЕЦКАЯ И.И. и др. Микробиологическая деградация несимметричного диметилгидразина - токсичного компонента ракетного топлива. Прикладная биохимия и микробиология. 2000, 36, №6, с.631-636. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2002124807A (en) | 2004-03-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113215033B (en) | A kind of sulfonamide antibiotic degrading bacteria and its application | |
| CN113195122A (en) | Method for purifying environment polluted by petroleum-related substances and material used in method | |
| JP2000232876A (en) | Raw material containing complex effective microorganism | |
| RU2142996C1 (en) | Strain arthrobacter sp for degradation of crude oil and petroleum products | |
| RU2142997C1 (en) | Strain arthrobacter sp for degradation of crude oil and petroleum products | |
| RU2176164C2 (en) | Method of biological remediation of soil polluted with oil | |
| RU2257409C1 (en) | Strain rhodococcus erythropolis for decomposition of petroleum and petroleum products | |
| RU2401298C1 (en) | BACTERIA STRAIN Achromobacter sp - ORGANOPHOSPHONATE DESTRUCTOR AND METHOD OF APPLICATION THEREOF FOR SOILS BIOREMEDIATION | |
| RU2236453C2 (en) | Strain of bacterium rhodococcus globerulus 19f decomposing 1,1-dimethylhydrazine (heptyl) | |
| RU2319740C2 (en) | Biopreparation as oil-destructing agent | |
| RU2705290C1 (en) | Microbial preparation for bioremediation of soil contaminated with oil and oil products | |
| RU2307869C2 (en) | Method of biological restoration of oil-polluted land | |
| RU2300561C1 (en) | Strain rhodococcus globerulus h-42 for decomposition of petroleum and petroleum products | |
| RU2128703C1 (en) | Method of removing petroleum and petroleum products from soil | |
| RU2039714C1 (en) | Method for decontamination of water and soil surfaces from oil | |
| RU2257410C1 (en) | Strain rhodococcus erythropolis for decomposition of petroleum and petroleum products | |
| Zhu et al. | Monitoring soil respiration dynamics during the biodegradation of crude oil contaminated soil under different environmental conditions | |
| RU2615464C1 (en) | Preparation for soils and water bodies purification from oil products | |
| RU2564391C1 (en) | Method of biotransformation of contaminated soil | |
| RU2270808C2 (en) | Biologically active composition for treatment of surface water, soil and ground from petroleum pollution | |
| RU2630246C1 (en) | Method for soil purification from oil pollutants | |
| RU2600868C2 (en) | Preparation for cleaning soil from oil contaminants | |
| Minina | Analysis of phytotesting of soils polluted by petroleum products after bioremediation | |
| CN118360189B (en) | A copper-resistant Comamonas strain and its application | |
| RU2312719C1 (en) | Consortium of strains of hydrocarbon-oxidizing bacteria pseudomonas aeruginosa nd k3-1 and pseudomonas fluorescens nd k3-2 as hydrocarbon destructor and a method of treating oil-polluted subsurface waters |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100919 |