RU2298791C2 - Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок - Google Patents
Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок Download PDFInfo
- Publication number
- RU2298791C2 RU2298791C2 RU2005106491/15A RU2005106491A RU2298791C2 RU 2298791 C2 RU2298791 C2 RU 2298791C2 RU 2005106491/15 A RU2005106491/15 A RU 2005106491/15A RU 2005106491 A RU2005106491 A RU 2005106491A RU 2298791 C2 RU2298791 C2 RU 2298791C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- reaction
- drop
- hormone
- pregnancy
- serum
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 title claims description 17
- 230000036512 infertility Effects 0.000 title claims description 11
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title claims description 7
- 244000309465 heifer Species 0.000 title claims description 7
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title claims description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 229940015047 chorionic gonadotropin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N alizarin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=C(O)C(O)=CC=C3C(=O)C2=C1 RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 claims description 10
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 claims description 10
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 8
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims description 4
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims description 3
- 239000002281 placental hormone Substances 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 2
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 claims description 2
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 claims description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 2
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 claims 1
- DWBSXHMYTSZXQL-UHFFFAOYSA-M potassium;quinolin-8-yl sulfate Chemical compound [K+].C1=CN=C2C(OS(=O)(=O)[O-])=CC=CC2=C1 DWBSXHMYTSZXQL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- YYVFXSYQSOZCOQ-UHFFFAOYSA-N Oxyquinoline sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O.C1=C[NH+]=C2C(O)=CC=CC2=C1.C1=C[NH+]=C2C(O)=CC=CC2=C1 YYVFXSYQSOZCOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 150000007944 thiolates Chemical class 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к методам диагностики беременности и бесплодия коров и телок. Метод состоит в установлении стельности и бесплодия на основании обнаружения в сыворотке крови плацентарного гормона - хорионического гонадотропина в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин-антител. Время, затрачиваемое на исследование одной пробы, не превышает 10 минут, что позволяет снизить трудоемкость диагностических исследований и использовать метод в условиях животноводческой фермы или комплекса. 1 табл.
Description
Изобретение относится к методам ранней диагностики беременности и бесплодия коров и телок.
Известен иммунологический метод диагностики стельности и бесплодия, заключающийся в обнаружении в сыворотке крови коров и телок гормона прогестерона при помощи иммуноферментного анализа, который позволяет установить беременность с 19-24 дня после осеменения [1].
Однако иммуноферментный анализ, как и многие существующие методы лабораторной диагностики беременности и бесплодия, трудоемок и сложен, требует наличия специального оборудования.
Техническим результатом изобретения является упрощение метода ранней иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок, а также снижение трудоемкости диагностических исследований.
Указанный результат достигается тем, что в качестве гормона, подвергающегося исследованию, используют плацентарный гормон - хорионический гонадотропин, который определяют в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин-антител при помощи диагностикума. Для изготовления диагностикума кролик массой 1,5-2 кг 4-кратно с интервалом 7 дней подкожно в область лопатки иммунизируется антигеном «Гонадотропин хорионический человека» в дозе - 2000 ЕД, разведенным в 1 мл стерильного адъюванта Фрейда. Через 10 дней после последней инъекции гормона получают сыворотку методом отстаивания. Затем 2 мл полученной иммунной сыворотки, разведенной 1:5 в 1%-ном растворе борной кислоты добавляют к 10 мл суспензии мелкодисперсных частиц (1-1,6 мкм) ализарина, смесь выдерживают 2 ч при температуре 37°С и еще 13 ч при 4-8°С. После этого смесь центрифугируют до просветления, к осадку добавляют 10 мл 2%-ного раствора нормальной кроличьей сыворотки в 0,5%-ной борной кислоте на физиологическом растворе и консервируют хинозолом (мертиолятом) в соотношении 1 часть консерванта на 10000 частей реактива. При постановке реакции на чистое обезжиренное предметное стекло наносят слева (опыт) и справа (контроль) по 1 капле суспензии ализариновых антител. Затем в опытную каплю добавляют 1-2 капли испытуемой сыворотки крови, а в контрольную - такое же количество физиологического раствора. Капли перемешивают отдельными стеклянными палочками и осторожно подогревают над пламенем горелки, покачивая стекло круговыми движениями в горизонтальной плоскости, при этом реакция завершается течение 5-10 минут. Учет результата реакции осуществляют визуально по изменению гомогенности кирпично-красной мутной капли реагентов на предметном стекле: при положительной реакции на стельность в капле появляются оранжево-желтые зерна агглютината, и жидкость при этом просветляется, при отрицательной реакции вид капли не изменяется.
Испытание метода диагностики беременности и бесплодия по наличию плацентарного гормона - хорионического гонадотропина в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин-антител проводили в учебно-опытном хозяйстве Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. Для опыта было взято 100 проб сыворотки крови коров и телок (50 от стельных в ранней стадии беременности и 50 от бесплодных животных). Предварительно пробы подверглись исследованию при помощи иммуноферментного анализа. Затем эти же пробы исследовались с помощью разработанного метода диагностики беременности и бесплодия.
Результаты определения диагностической эффективности методов иммунологической диагностики беременности и бесплодия приведены в таблице.
Простота метода иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок позволяет использовать его для раннего определения или исключения стельности в условиях животноводческих ферм и комплексов при одинаковой с прототипом точности исследований. Также снижается трудоемкость диагностических исследований, поскольку время, затрачиваемое на исследование одной пробы, не превышает пятнадцати минут, в то время как иммуноферментный анализ предусматривает наличие специального оборудования и осуществляется, как правило, в условиях специализированных лабораторий.
| Группы животных | Общее количество проб | Результаты исследований (подтверждение стельности) | |||||||
| иммуноферментный анализ | разработанный метод иммунологической диагностики | ||||||||
| положительный | отрицательный | положительный | отрицательный | ||||||
| количество проб | % | количество проб | % | количество проб | % | количество проб | % | ||
| Стельные | 50 | 48 | 96 | 2 | 4 | 49 | 98 | - | - |
| Бесплодные | 50 | - | - | 50 | 100 | - | - | 50 | 100 |
Источник информации
1. Преображенский О.Н. Современные методы диагностики беременности и бесплодия животных. - Ветеринария, 2003. №7, с.32-33.
Claims (1)
- Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок, включающий обнаружение в сыворотке крови полового гормона, отличающийся тем, что в качестве гормона используют плацентарный гормон - хорионический гонадотропин, который определяют в реакции ализариновых суспензионных антихориогонин - антител при помощи диагностикума, для изготовления которого кролик массой 1,5-2 кг 4-кратно с интервалом 7 дней, подкожно в область лопатки иммунизируется антигеном «Гонадотропин хорионический человека» в дозе 2000 Ед, разведенным в 1 мл стерильного адъюванта Фрейда, через 10 дней после последней инъекции гормона получают сыворотку крови методом отстаивания, затем 2 мл полученной иммунной сыворотки, разведенной 1:5 в 1%-ном растворе борной кислоты добавляют к 10 мл суспензии мелкодисперсных частиц (1-1,6 мкм) ализарина, смесь выдерживают 2 ч при температуре 37°С и еще 13 ч при 4-8°С, затем смесь центрифугируют до просветления, к осадку добавляют 10 мл 2%-ного раствора нормальной кроличьей сыворотки в 0,5%-ной борной кислоте на физиологическом растворе и консервируют хинозолом (мертиолятом) в соотношении 1 часть консерванта на 10000 частей реактива, при постановке реакции на чистое обезжиренное предметное стекло наносят слева (опыт) и справа (контроль) по 1 капле суспензии ализариновых антител, затем в опытную каплю добавляют 1-2 капли испытуемой сыворотки крови, а в контрольную - такое же количество физиологического раствора, капли перемешивают отдельными стеклянными палочками и осторожно подогревают над пламенем горелки, покачивая стекло круговыми движениями в горизонтальной плоскости, при этом реакция завершается в течение 5-10 мин, учет результатов реакции осуществляется визуально по изменению гомогенности кирпично-красной мутной капли реагентов на предметном стекле: при положительной реакции на стельность в капле появляются оранжево-желтые зерна агглютината и жидкость при этом просветляется, при отрицательной реакции вид капли не изменяется.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005106491/15A RU2298791C2 (ru) | 2005-03-09 | 2005-03-09 | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005106491/15A RU2298791C2 (ru) | 2005-03-09 | 2005-03-09 | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005106491A RU2005106491A (ru) | 2006-08-20 |
| RU2298791C2 true RU2298791C2 (ru) | 2007-05-10 |
Family
ID=37060203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005106491/15A RU2298791C2 (ru) | 2005-03-09 | 2005-03-09 | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2298791C2 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2471421C1 (ru) * | 2011-11-03 | 2013-01-10 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) | Способ диагностики беременности у коров |
| RU2500341C1 (ru) * | 2012-07-17 | 2013-12-10 | Анатолий Петрович Бахтинов | Способ диагностики уротензин 2-зависимого бесплодия позвоночных животных и человека |
| RU2662926C1 (ru) * | 2017-05-22 | 2018-07-31 | Общество с ограниченной ответственностью "НТЦ "ПромТехЭнерго" | Способ получения лиофилизированного препарата для иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
| RU2775205C1 (ru) * | 2021-05-04 | 2022-06-28 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Диагностический набор для определения беременности и бесплодия коров |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU427700A1 (ru) * | 1972-06-09 | 1974-05-15 | сельскохоз йственных животных | Способ диагностики ранней стельности крупного рогатого скота |
| SU1683692A1 (ru) * | 1989-11-21 | 1991-10-15 | Белорусский научно-исследовательский институт животноводства | Способ ранней диагностики стельности крупного рогатого скота |
-
2005
- 2005-03-09 RU RU2005106491/15A patent/RU2298791C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU427700A1 (ru) * | 1972-06-09 | 1974-05-15 | сельскохоз йственных животных | Способ диагностики ранней стельности крупного рогатого скота |
| SU1683692A1 (ru) * | 1989-11-21 | 1991-10-15 | Белорусский научно-исследовательский институт животноводства | Способ ранней диагностики стельности крупного рогатого скота |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Преображенский О.Н. Современные методы диагностики беременности и бесплодия животных. Ветеринария, 2003, №7, с.32-33. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2471421C1 (ru) * | 2011-11-03 | 2013-01-10 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) | Способ диагностики беременности у коров |
| RU2500341C1 (ru) * | 2012-07-17 | 2013-12-10 | Анатолий Петрович Бахтинов | Способ диагностики уротензин 2-зависимого бесплодия позвоночных животных и человека |
| RU2662926C1 (ru) * | 2017-05-22 | 2018-07-31 | Общество с ограниченной ответственностью "НТЦ "ПромТехЭнерго" | Способ получения лиофилизированного препарата для иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок |
| RU2775205C1 (ru) * | 2021-05-04 | 2022-06-28 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Диагностический набор для определения беременности и бесплодия коров |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2005106491A (ru) | 2006-08-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101346630B (zh) | 能够更好地在医疗制品中检测非内毒素致热污染物的改进的单核细胞活化测试 | |
| US3565987A (en) | Immunochemical determinations of antigens and antibodies | |
| PT2049906E (pt) | Ensaio e estojo para o prognóstico de uma implantação com sucesso na fertilização assistida | |
| Loveless et al. | Distribution of allergic and" blocking" activity in human serum proteins fractionated by electrophoresis convection | |
| Noguchi | Serum diagnosis of syphilis and luetin reaction | |
| RU2298791C2 (ru) | Метод иммунологической диагностики беременности и бесплодия коров и телок | |
| EP2210097B1 (de) | Verfahren zur in vitro-diagnose und/oder in vitro-therapieverfolgung von infektionen | |
| CA3097360A1 (en) | Sample clarification and reduction of background fluorescence for fluorescent detection of analytes | |
| CN103267851A (zh) | 一种检测胎膜早破的试剂盒及其制备方法 | |
| RU2737336C1 (ru) | Способ определения иммунологической реактивности организма животных | |
| CN117741149A (zh) | 一种用于卵巢癌细胞叶酸受体α的检测试剂盒及其应用 | |
| Haimovici et al. | Variables affecting toxicity of human sera in mouse embryo cultures | |
| RU2560684C1 (ru) | Средство для диагностики лейкоза крупного рогатого скота и способ его применения | |
| RU2750787C1 (ru) | Способ определения изоантигенной нагрузки в функциональной системе "мать-плод-новорожденный" | |
| RU2766780C1 (ru) | Способ определения антигенной нагрузки животных | |
| RU2846805C1 (ru) | Иммунохроматографическая тест-система для неинвазивного определения уровня антиовариальных антител в биологической жидкости и способ определения антиовариальных антител с помощью тест-полоски, входящей в тест-систему | |
| RU2251112C1 (ru) | Способ диагностики хламидиозов | |
| Zralý et al. | Antisperm antibodies in cows as related to their reproductive health | |
| CN105044335A (zh) | 一种快速检测钩虫病感染的免疫层析试条及其制备方法 | |
| Mahmood et al. | Assessment of Cortisol Hormonal Level and Relation with Age in Infertile Women With ICSI Outcome. | |
| RU2810589C1 (ru) | Способ постановки реакции иммунофлюоресценции для диагностики лейкоза крупного рогатого скота | |
| RU2330286C1 (ru) | Способ диагностики герпес-вирусной инфекции у беременных путем подсчета герпесных телец в периферической крови | |
| RU2749026C1 (ru) | Способ диагностики изоиммунизации животных | |
| RU2548729C1 (ru) | Способ экспресс-диагностики генитальной формы инфекционного ринотрахеита у коров | |
| JPS6045519A (ja) | 精液抗原画分及びその製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080310 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20100527 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110310 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20120510 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20120706 |
|
| TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -PC4A- IN JOURNAL: 23-2012 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150310 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20160220 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200310 |