RU2296578C2 - Agent having cytostatic and apoptosis-inducing activity - Google Patents
Agent having cytostatic and apoptosis-inducing activity Download PDFInfo
- Publication number
- RU2296578C2 RU2296578C2 RU2005112031/15A RU2005112031A RU2296578C2 RU 2296578 C2 RU2296578 C2 RU 2296578C2 RU 2005112031/15 A RU2005112031/15 A RU 2005112031/15A RU 2005112031 A RU2005112031 A RU 2005112031A RU 2296578 C2 RU2296578 C2 RU 2296578C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- apoptosis
- cytostatic
- agent
- asparagine
- activity
- Prior art date
Links
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title abstract description 9
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims abstract description 14
- 235000003130 Arctium lappa Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 235000008078 Arctium minus Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 240000005528 Arctium lappa Species 0.000 claims abstract 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 18
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 16
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 8
- 241000208843 Arctium Species 0.000 description 7
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 7
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 7
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 7
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 4
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 240000001829 Catharanthus roseus Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002634 anti-blastic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- QNRATNLHPGXHMA-XZHTYLCXSA-N (r)-(6-ethoxyquinolin-4-yl)-[(2s,4s,5r)-5-ethyl-1-azabicyclo[2.2.2]octan-2-yl]methanol;hydrochloride Chemical compound Cl.C([C@H]([C@H](C1)CC)C2)CN1[C@@H]2[C@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OCC)C=C21 QNRATNLHPGXHMA-XZHTYLCXSA-N 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000208328 Catharanthus Species 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010059605 Necrobiosis Diseases 0.000 description 1
- 208000015906 Necrobiotic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PMLJIHNCYNOQEQ-UHFFFAOYSA-N aspartic 1-amide Chemical compound NC(=O)C(N)CC(O)=O PMLJIHNCYNOQEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000881 depressing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 125000001434 methanylylidene group Chemical group [H]C#[*] 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 150000003140 primary amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в качестве лекарственного средства из растительного сырья, обладающего цитостатической и апоптозиндуцирующей (противоопухолевой) активностью.The invention relates to medicine and can be used as a medicine from plant materials with cytostatic and apoptosis-inducing (antitumor) activity.
Известно, что основным недостатком используемых в онкологической клинике цитостатических препаратов как растительного происхождения, так и синтетических является их высокое токсическое влияние на организм и на нормальные клетки [М.Д.Машковский. Лекарственные средства. Пособие для врачей, том 2, стр.405. Москва: ООО «Новая волна». Издатель С.Б.Дивов, 2002].It is known that the main disadvantage of cytostatic drugs of both plant origin and synthetic used in the oncological clinic is their high toxic effect on the body and normal cells [M.D. Mashkovsky. Medicines Manual for Doctors,
Наиболее близким к предлагаемому является винбластин (розевин) - препарат, который используется в комплексной химиотерапии опухолей в сочетании с другими противоопухолевыми препаратами. Он содержится в растении барвинок розовый (Vinca rosea L.), а также в растении катарантус розовый (Catharanthus roseus L). [М.Д.Машковский. Лекарственные средства. Пособие для врачей, том 2, стр.431. Москва: ООО «Новая волна». Издатель С.Б.Дивов, 2002]. Однако его токсичность достаточно велика.Closest to the proposed is vinblastine (rosevin) - a drug that is used in the complex chemotherapy of tumors in combination with other antitumor drugs. It is found in the pink periwinkle plant (Vinca rosea L.), as well as in the pink catharanthus plant (Catharanthus roseus L). [M.D. Mashkovsky. Medicines Manual for Doctors,
Задача изобретения - создание средства из растительного сырья, обладающего цитостатической и апоптозиндуцирующей (противоопухолевой) активностью и не обладающего токсическим воздействием на организм.The objective of the invention is the creation of funds from plant materials with cytostatic and apoptosis-inducing (antitumor) activity and not having toxic effects on the body.
Технический результат заключается в проявлении апоптозиндуцирующей и цитостатической активности вещества, выделенного из концентрированного экстракта корня лопуха.The technical result consists in the manifestation of apoptosis-inducing and cytostatic activity of a substance isolated from a concentrated extract of burdock root.
Корни лопуха собирают весной в экологически чистых районах, тщательно моют и стерилизуют кратковременным погружением в кипящую воду. Затем чистый корень лопуха измельчают до размеров частиц менее 1 мм, в полученную массу добавляют подогретую до 60-70°С воду в соотношении масс 1:3 и настаивают в течение 25-30 мин. Полученный экстракт отделяют от шрота фильтрацией и центрифугированием. Затем экстракт концентрируют до содержания сухого остатка в концентрате 75-80%. В течение 10-20 суток в концентрированном экстракте происходит выпадение твердого вещества, которое отфильтровывают от экстракта через сетку из нержавеющей проволоки с размером ячейки менее 200 мкм.Burdock roots are harvested in spring in ecologically clean areas, thoroughly washed and sterilized by short-term immersion in boiling water. Then the pure burdock root is ground to a particle size of less than 1 mm, water is added to the resulting mass, heated to 60-70 ° C in a mass ratio of 1: 3, and insisted for 25-30 minutes. The extract obtained is separated from the meal by filtration and centrifugation. Then the extract is concentrated to a solids content of 75-80% in concentrate. Within 10-20 days in a concentrated extract, a solid precipitates out, which is filtered from the extract through a stainless steel wire mesh with a mesh size of less than 200 microns.
После фильтрации и двукратной перекристаллизации из воды вещество представляет собой бесцветный осадок (выход до 10% в пересчете на концентрированный экстракт), состоящий из крупных ромбических кристаллов, плавящихся при температуре выше 200°С с разложением. Выделенное соединение не растворимо в органических растворителях (углеводороды, спирты, ацетон, диметилсульфоксид), растворимо в воде, в растворах кислот и щелочей. Выявленные физические свойства характерны для аминокислот и их производных. Нингидриновая реакция на аминокислоту дала положительный результат. При нагревании водного раствора выделенных кристаллов со щелочью выделяется аммиак, что характерно для амидов.After filtration and double recrystallization from water, the substance is a colorless precipitate (yield up to 10% in terms of concentrated extract), consisting of large rhombic crystals melting at a temperature above 200 ° С with decomposition. The isolated compound is insoluble in organic solvents (hydrocarbons, alcohols, acetone, dimethyl sulfoxide), soluble in water, in solutions of acids and alkalis. The revealed physical properties are characteristic of amino acids and their derivatives. The ninhydrin reaction to the amino acid gave a positive result. When an aqueous solution of the selected crystals is heated with alkali, ammonia is released, which is typical for amides.
По данным элементного анализа вещество содержит %: С 35,20, N 22,60, Н 6,48. C4H8N2O3 (элементный CHN-анализатор HP-185). Вычислено, %: С 36,36; Н 6,06; N 21,21.According to elemental analysis, the substance contains%: C 35.20, N 22.60, H 6.48. C 4 H 8 N 2 O 3 (elemental CHN analyzer HP-185). Calculated,%: C 36.36; H, 6.06; N, 21.21.
Молекулярная формула, рассчитанная по данным элементного анализа, соответствует формуле аспарагина - моноамида аспарагиновой кислоты. В зависимости от положения аминогрупп по отношению к амидной различают α- и β-аспарагинThe molecular formula calculated according to elemental analysis corresponds to the formula of asparagine - aspartic acid monoamide. Depending on the position of the amino groups with respect to the amide, α- and β-asparagine are distinguished
1 - аспарагиновая кислота; 2 - α-аспарагин; 3 - β-аспарагин.1 - aspartic acid; 2 - α-asparagine; 3 - β-asparagine.
Поскольку α-аспарагин получают синтетическим путем, а в животных и растительных тканях содержится β-аспарагин преимущественно в L-форме, можно предположить, что из сока корней лопуха выделен β-аспарагин. Доказательство его структуры проведено спектральными методами.Since α-asparagine is obtained synthetically, and in animal and plant tissues β-asparagine is predominantly in L-form, it can be assumed that β-asparagine is isolated from burdock root juice. The proof of its structure was carried out by spectral methods.
В ИК-спектре (фиг.1) имеются полосы поглощения, подтверждающие наличие в структуре исследуемого соединения функциональных групп:In the IR spectrum (figure 1) there are absorption bands confirming the presence of functional groups in the structure of the test compound:
В области валентных колебаний N-H в первичных аминах наблюдаются полосы 3455 и 3382 см-1. Амидная группа проявляется в спектре полосой валентных колебаний NH при 3111 см-1 и деформационных колебаний NH при 1644 см-1 (полоса Амид II), характерных для первичных амидов, вторая область проявления этих колебаний находится в области меньших частот, при 1429 см-1 полоса Амид III). Валентные колебания карбонильной группы (С=O) амидов обнаружены при 1682 см-1 (полоса Амид I). Область 1500-1700 см-1 содержит ряд интенсивных полос, отнесенных, как указано выше, к полосам Амид I, II, III, полоса 1578 см-1 соответствует валентным колебаниям С=O в ионизированном карбоксиле аминокислоты, что указывает на цвиттер-ионную структуру аспарагина. Полоса деформационных колебаний NH в +NH3 - группе при 1528 см-1 также подтверждает цвитер-ионную структуру. Уширенная полоса поглощения при 669 см-1 соответствует деформационным колебаниям N-H в аминах.In the region of NH stretching vibrations, bands of 3455 and 3382 cm –1 are observed in primary amines. The amide group is manifested in the spectrum by a band of stretching vibrations of NH at 3111 cm -1 and bending vibrations of NH at 1644 cm -1 (Amide II band), characteristic of primary amides, the second region of manifestation of these vibrations is in the region of lower frequencies, at 1429 cm -1 Amide III band). Valence vibrations of the carbonyl group (C = O) of amides were detected at 1682 cm -1 (Amide I band). The region of 1500-1700 cm -1 contains a number of intense bands, assigned, as indicated above, to the bands of Amide I, II, III, the band 1578 cm -1 corresponds to stretching vibrations C = O in the ionized carboxyl of the amino acid, which indicates the zwitterionic structure asparagine. The band of deformation vibrations of NH in the + NH 3 - group at 1528 cm -1 also confirms the zwitterionic structure. The broadened absorption band at 669 cm –1 corresponds to deformation vibrations of NH in amines.
В ПМР-спектре соединения (фиг.2) проявляются резонансные сигналы протонов аминогруппы при 7,85 м.д., протонов амидной группы при 7,60 м.д. и 6,86 м.д. Дублет дублетов с химсдвигом 4,0 м.д. (J1=4 Гц, J2=8 Гц) относится к метиновому протону. Его мультиплетность свидетельствует о неэквивалентности соседних метиленовых протонов. Расчет части спектра, относящейся к метиленовым протонам, дал следующие параметры: сигнал одного из метиленовых протонов имеет химсдвиг 2,94 м.д. (J1=4 Гц), второго - 2,84 м.д. (J2=8 Гц), абсолютное значение константы спин-спинового взаимодействия между метиленовыми протонами составляет 17 Гц.In the PMR spectrum of the compound (FIG. 2), resonant signals of protons of the amino group at 7.85 ppm, protons of the amide group at 7.60 ppm, appear and 6.86 ppm Doublet of doublets with a chemical shift of 4.0 ppm (J 1 = 4 Hz, J 2 = 8 Hz) refers to the methine proton. Its multiplicity indicates the nonequivalence of neighboring methylene protons. The calculation of the part of the spectrum related to methylene protons gave the following parameters: the signal of one of the methylene protons has a chemical shift of 2.94 ppm. (J 1 = 4 Hz), the second - 2.84 ppm. (J 2 = 8 Hz), the absolute value of the constant of the spin-spin interaction between methylene protons is 17 Hz.
Таким образом, впервые осуществлено выделение аспарагина из корней лопуха. Химический состав корня лопуха изучен достаточно полно, включая аминокислотный состав, однако до наших исследований аспарагин обнаружен не был.Thus, asparagine was first isolated from burdock roots. The chemical composition of burdock root has been studied quite thoroughly, including the amino acid composition, but asparagine was not detected before our studies.
Тестирование цитостатического действия аспарагина выделенного из концентрата корня лопуха в сравнении с винбластином проведено на суспензионных культурах опухолевых клетках карциномы Эрлиха (2,5·105 клеток/мл) по включению 3H - тимидина с последующим анализом на бета счетчике Mark-III, а также в реакции бластной трансформации лимфоцитов человека, стимулированных фитогемагглютинином (ФГА) после воздействия препарата в диапазоне концентраций от 0,4·10-3 до 75·10-3 М. Оценка влияния препаратов на пролиферативную активность лимфоцитов в спонтанном и индуцированном ФГА тесте проведена в соответствии с методическими рекомендациями фармкомитета Минздрава РФ (протокол № 10 от 10.12.1998)Testing of the cytostatic effect of asparagine isolated from burdock root concentrate in comparison with vinblastine was carried out on suspension cultures of Ehrlich carcinoma tumor cells (2.5 · 10 5 cells / ml) by incorporation of 3 H - thymidine followed by analysis on a Mark-III beta counter, as well as in the reaction of blast transformation of human lymphocytes stimulated by phytohemagglutinin (PHA) after exposure to the drug in a concentration range from 0.4 · 10 -3 to 75 · 10 -3 M. Evaluation of the effect of drugs on the proliferative activity of lymphocytes in spontaneous and the PHA-induced test was carried out in accordance with the methodological recommendations of the pharmaceutical committee of the Ministry of Health of the Russian Federation (protocol No. 10 of 12/10/1998)
Результаты исследований представлены в табл.1.The research results are presented in table 1.
Полученные данные показывают, что заявляемое средство обладает дозозависимым влиянием на опухолевые клетки, при этом концентрации препарата порядка 37,8·10-3 М, 3,78·10-3 М и 0,378·10-3 М подавляли пролиферацию злокачественных клеток до 56,2%-71,8% от контроля (опухолевые клетки без препаратов), а более низкие дозы не оказывали ингибирующий эффект на пролиферацию опухолевых клеток. Полученные результаты свидетельствуют, что заявляемое средство обладает антибластическими свойствами.The obtained data show that the claimed drug has a dose-dependent effect on tumor cells, while drug concentrations of the order of 37.8 · 10 -3 M, 3.78 · 10 -3 M and 0.378 · 10 -3 M suppressed the proliferation of malignant cells to 56, 2% -71.8% of the control (tumor cells without drugs), and lower doses did not have an inhibitory effect on the proliferation of tumor cells. The results obtained indicate that the inventive tool has antiblastic properties.
Результаты тестирования препаратов в реакции бластной трансформации лимфоцитов представлены на фиг.3. В качестве аналога использован коммерческий препарат растительного происхождения - винбластин.The results of testing drugs in the reaction of blast transformation of lymphocytes are presented in figure 3. As an analogue, a commercial herbal preparation, vinblastine, was used.
В результате исследований установлено, что заявляемое средство оказывает угнетающее влияние на индуцированную ФГА пролиферативную активность лимфоцитов. Обращает на себя внимание также появление клеток с явлениями некробиоза, что в совокупности может служить подтверждением его антибластического действия на клетки. В отличие от заявляемого средства использование винбластина сопровождалось более глубоким подавлением пролиферации лимфобластных клеток и их разрушением, что связано с наличием иммунодепрессивных свойств винбластина.As a result of studies, it was found that the claimed agent has a depressing effect on the proliferative activity of lymphocytes induced by PHA. The appearance of cells with the phenomena of necrobiosis is also noteworthy, which together can serve as a confirmation of its antiblastic effect on cells. In contrast to the claimed drug, the use of vinblastine was accompanied by a deeper suppression of the proliferation of lymphoblast cells and their destruction, which is associated with the presence of immunosuppressive properties of vinblastine.
Тестирование апоптозиндуцирующего действия заявляемого средства проведено на опухолевых клетках карциномы Эрлиха по методу Orlov S. N., Dam Т.V., Trembly J. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. Vol.221. P.708-715.Testing of the apoptosis-inducing effect of the claimed drug was carried out on tumor cells of Ehrlich carcinoma according to the method of Orlov S. N., Dam T.V., Trembly J. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. Vol. 211. P.708-715.
Результаты исследований представлены на фиг.4.The research results are presented in figure 4.
Полученные данные показывают, что предлагаемое средство обладает дозозависимым апоптозиндуцирующим влиянием на опухолевые клетки, наиболее выраженным при концентрации порядка 4·10-3 М (индукция апоптоза до 87%) от контроля (опухолевые клетки без препаратов), что доказывает его апоптозиндуцирующую активность.The data obtained show that the proposed tool has a dose-dependent apoptosis-inducing effect on tumor cells, most pronounced at a concentration of about 4 × 10 -3 M (induction of apoptosis up to 87%) of the control (tumor cells without drugs), which proves its apoptosis-inducing activity.
Результаты исследования токсичности заявляемого средства по сравнению с винбластином и другими средствами, используемыми в лечении представлены в табл.2.The results of a study of the toxicity of the claimed agent compared to vinblastine and other agents used in the treatment are presented in table 2.
Из материалов табл.2 видно, что заявляемое средство (аспарагин) в отличие от известных противоопухолевых препаратов не оказывает токсического действия и не вызывает гибели подопытных животных. Таким образом, заявляемое средство (аспарагин) проявляет цитостатическую и апоптозиндуцирующую (противоопухолевую) активность но не оказывает побочного токсического действия на организм.From the materials of table 2 it can be seen that the claimed agent (asparagine), unlike the known antitumor drugs, does not have a toxic effect and does not cause the death of experimental animals. Thus, the claimed agent (asparagine) exhibits cytostatic and apoptosinducing (antitumor) activity but does not have toxic side effects on the body.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005112031/15A RU2296578C2 (en) | 2005-04-21 | 2005-04-21 | Agent having cytostatic and apoptosis-inducing activity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005112031/15A RU2296578C2 (en) | 2005-04-21 | 2005-04-21 | Agent having cytostatic and apoptosis-inducing activity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005112031A RU2005112031A (en) | 2006-10-27 |
| RU2296578C2 true RU2296578C2 (en) | 2007-04-10 |
Family
ID=37438439
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005112031/15A RU2296578C2 (en) | 2005-04-21 | 2005-04-21 | Agent having cytostatic and apoptosis-inducing activity |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2296578C2 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2178660C2 (en) * | 1998-07-31 | 2002-01-27 | Закрытое акционерное общество "Эвалар" | "milona" curative-sanitation food biologically active additive and method for its obtaining |
| RU2220737C1 (en) * | 2003-03-07 | 2004-01-10 | ЗАО "Русско-Дальневосточный продукт" | Curative-prophylactic composition "osteomaks-extra" for improvement of functional state of locomotor system |
-
2005
- 2005-04-21 RU RU2005112031/15A patent/RU2296578C2/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2178660C2 (en) * | 1998-07-31 | 2002-01-27 | Закрытое акционерное общество "Эвалар" | "milona" curative-sanitation food biologically active additive and method for its obtaining |
| RU2220737C1 (en) * | 2003-03-07 | 2004-01-10 | ЗАО "Русско-Дальневосточный продукт" | Curative-prophylactic composition "osteomaks-extra" for improvement of functional state of locomotor system |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Чиков П.С. Лекарственные растения. - М.: Медицина, с.198-200. Фитотерапия с основами клинической фармакологии. Справочник. - М.: Медицина, 1999, с.55. Кьосев П.А. Полный справочник лекарственных растений. - М.: Эксмо-пресс, 2001, с.109-110. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2005112031A (en) | 2006-10-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Devanesan et al. | Antimicrobial and anticancer properties of Carica papaya leaves derived di-methyl flubendazole mediated silver nanoparticles | |
| RU2124361C1 (en) | Method of isolation of resin tragacanth polysaccharide fraction from plant of genus astragal, composition based on polysaccharide fraction, method of inhibition of cancer tumor growth, method of inhibition of viral infections | |
| Kumari et al. | Invitro anti-inflammatory and anti-artheritic property of Rhizopora mucronata leaves | |
| Sribalan et al. | Synthesis and biological evaluation of new symmetric curcumin derivatives | |
| Senthilkumar et al. | Partial characterization and anticancer activities of purified glycoprotein extracted from green seaweed Codium decorticatum | |
| Govindaraj et al. | Bio-fabrication of gold nanoparticles from brown seaweeds for anticancer activity against glioblastoma through invitro and molecular docking approaches | |
| Pal et al. | Evaluation of anti-proliferative potential and antioxidant activity of a wild edible mushroom Macrocybe crassa (Sacc.) Pegler and Lodge | |
| RU2296578C2 (en) | Agent having cytostatic and apoptosis-inducing activity | |
| Gayathri et al. | Extraction, identification of bioactive compounds and in vitro antioxidant activity potential in freshwater ampullariidae snail Pila virens | |
| Fernando et al. | In silico pharmacological analysis of a potent anti-hepatoma compound of mushroom origin and emerging role as an adjuvant drug lead | |
| Kaur et al. | Isolation of embelin from and evaluation of its anti-cancer potential in Embelia ribes breast cancer | |
| Maalej et al. | Pistacia lentiscus by-product as a promising source of phenolic compounds and carotenoids: Purification, biological potential and binding properties | |
| Le Roux et al. | Cellular injury evidenced by impedance technology and infrared microspectroscopy | |
| Suneetha et al. | Evaluation of In-vitro anti-oxidant activity of various extracts of Actinodaphne madraspatana leaves | |
| Zhao et al. | Green formulation and characterization of Fe nanoparticles containing Calendula extract and investigation of the antioxidant, cytotoxic and anti-human cholangiocarcinoma properties | |
| Rebeea et al. | Identification of phytochemicals and evaluation of anticancer activity of peels of Carica papaya fruit | |
| Han et al. | Evaluation of hydroxyl radical reduction activity of red ginseng extract using ESR spectroscopy | |
| US10912756B2 (en) | Method for the treatment of human melanoma | |
| Krishnappa et al. | Augmentation of in vitro cytotoxic potentiality of crude methanolic leaf extract of Olea dioica as a pivotal anticancer source | |
| Boev | A substance with cytostatic and apoptosis-inducing activity from burdock roots | |
| KR100348870B1 (en) | Peptido-glyco Compounds from Chinese elm and Process for Preparing the Same | |
| Das et al. | Attenuation of reactive nitrogen species by different flavonoids enriched fractions of Schima Wallichii | |
| Antonyuk et al. | Use of lectins as vector molecules for delivery of drugs to cells and tissues. Report 2. | |
| Barusrux et al. | Anticancer Activity of Lindernia crustacea (L.) F. Muell. var. Crustacean on Human HCT116 Colon Cancer Cell via Cellular Lipid and β-sheet Protein Accumulation | |
| Ovalı et al. | Investigation of Antiproliferative and Apoptotic Effects of Ethanol Extract of Viscum album L. on A549 Cell Line |