RU2277908C1 - Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения - Google Patents
Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2277908C1 RU2277908C1 RU2005136503/15A RU2005136503A RU2277908C1 RU 2277908 C1 RU2277908 C1 RU 2277908C1 RU 2005136503/15 A RU2005136503/15 A RU 2005136503/15A RU 2005136503 A RU2005136503 A RU 2005136503A RU 2277908 C1 RU2277908 C1 RU 2277908C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cystine
- room temperature
- silver
- antiviral activity
- hours
- Prior art date
Links
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 title claims abstract description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title claims abstract description 5
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 title claims abstract 6
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 title claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 3
- 229940100890 silver compound Drugs 0.000 title abstract 2
- 150000003379 silver compounds Chemical class 0.000 title abstract 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 9
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 8
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims abstract description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000004332 silver Substances 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 5
- 229910010193 LiAg Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 29
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 26
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 14
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 14
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 11
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 7
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 7
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 7
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 5
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- -1 silver ions Chemical class 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 235000019393 L-cystine Nutrition 0.000 description 2
- 239000004158 L-cystine Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N Silver ion Chemical compound [Ag+] FOIXSVOLVBLSDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051511 Viral diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- PLKATZNSTYDYJW-UHFFFAOYSA-N azane silver Chemical compound N.[Ag] PLKATZNSTYDYJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonylcarbamate Chemical compound CCOC(=O)NC(=O)OCC PQVSTLUFSYVLTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M lithium hydroxide monohydrate Substances [Li+].O.[OH-] GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940040692 lithium hydroxide monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 229940083025 silver preparation Drugs 0.000 description 1
- XNRABACJWNCNEQ-UHFFFAOYSA-N silver;azane;nitrate Chemical compound N.[Ag+].[O-][N+]([O-])=O XNRABACJWNCNEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 108700024661 strong silver Proteins 0.000 description 1
- 239000000979 synthetic dye Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
- C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
- C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
- C07C323/57—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
- C07C323/58—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups with amino groups bound to the carbon skeleton
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области фармацевтической химии и медицины. Изобретение относится к новому водорастворимому противовирусному средству на основе соединения серебра с цистином, отвечающее составу C6H19N4O6S2LiAg2, а также к способу его получения. Синтез заявленного средства осуществляют при комнатной температуре смешением следующих компонентов: цистин - гидроокись лития - нитрат серебра - аммиак в мольном соотношении 1:2:2:8. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 6 часов, после чего упаривают в вакууме до 1/4 первоначального объема при температуре 40-50°С. К полученной суспензии прибавляют эквивалентное количество этилового спирта, охлаждают до +4÷+6°С и выдерживают 12 часов. Образовавшийся целевой продукт в виде желтого мелкодисперсного осадка отфильтровывают, промывают этиловым спиртом, и сушат в вакууме при комнатной температуре. 2 н.п. ф-лы, 4 табл.
Description
Изобретение относится к водорастворимым противовирусным лекарственным средствам, к области фармацевтической химии и медицины. Изобретение относится также к области получения этих средств. Изобретение может быть использовано для создания готовых лекарственных форм для лечения вирусных, бактериальных и других инфекций.
Цель - создание высокоэффективных противовирусных лекарственных препаратов, в особенности для лечения вирусных гепатитов, антибиотикоустойчивых инфекций, включая ВИЧ инфекцию.
Сущность изобретения. Предложено новое противовирусное средство на основе соединения серебра и природной аминокислоты L-цистина, отвечающее составу C6H19N4O6S2LiAg2 (табл. 1).
Известны препарат под названием Аргохром фирмы Мерк (производившийся в Германии примерно с 1916 по 1945 годы и поступавший по импорту в бывший СССР в довоенный период), состав которого подпадает под действовавший с 1914 года Патент Австрии N69476 и называвшийся до 1920 г. по-немецки Silber methylen blau, а также препарат Гегонон, выпускавшийся по патенту Германии N268968, изданному 7 января 1914, класс 12р, группа 16 - прототип. (См. справочник Вотчал Б.Е. и др. "Фармацевтические препараты", М.-Л.: ОНТИ, 1934 г.)
Указанные препараты содержат серебро в ионной форме, прочно связанное с органическими молекулами - лигандами. Недостатком указанных препаратов является малая биодоступность содержащегося в них серебра, так как в случае Аргохрома лигандом является синтетический краситель - метиленовая синь, а в случае Гегонона - это высокомолекулярный носитель - альбумоза.
Задачей изобретения явилось повышение эффективности проникновения ионов серебра через биологические мембраны, начиная от проникновения в кровяное русло в случае перорального или ректального способов введения препарата, а также эффективная доставка ионов серебра к больным клеткам и проникновение через клеточную мембрану с целью прекращения жизнедеятельности инфекционных агентов.
Задача решается тем, что получен водорастворимый фотостойкий в растворах препарат серебра, представляющий собой прочный металлокомплекс серебра с природной аминокислотой L-цистином, при этом одна молекула цистина прочно связывает два иона серебра.
Предложен также способ получения нового водорастворимого противовирусного лекарственного средства (субстанции), заключающийся в том, что синтез осуществляют при комнатной температуре и мольном соотношении следующих компонентов: цистин - гидроокись лития - нитрат серебра - аммиак 1:2:2:8, при этом в воде вначале растворяют цистин, который переводят в литиевую соль добавлением гидроокиси лития, к полученному раствору добавляют предварительно полученный аммиачный комплекс нитрата серебра [Ag(NH3)2]NO3, полученный смешением рассчитанных количеств раствора нитрата серебра и 25% водного раствора аммиака, реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 6 ч, упаривают в вакууме до 1/4 первоначального объема при температуре 40-50°С, при котором происходит интенсивное выпадение целевого соединения в виде мелкодисперсного осадка желтого цвета, полученную суспензию перемешивают с эквивалентным объемом этилового спирта, который добавляют четырьмя равными порциями, суспензию охлаждают до +4÷+6°С и выдерживают 12 ч, образовавшийся желтый осадок отфильтровывают, промывают этиловым спиртом и сушат в вакууме при комнатной температуре до постоянного веса.
Предлагаемая структурная формула, отвечающая составу C6H19N4O6S2LiAg2.
Пример осуществления способа.
В круглодонную колбу вместимостью 1 л загружают 24,00 г цистина, 8,40 г моногидрата гидроокиси лития и 100 мл дистиллированной воды. Реакционную смесь перемешивают на магнитной мешалке при комнатной температуре до полного растворения исходных компонентов.
В стеклянный стакан вместимостью 300 мл загружают 33,97 г азотнокислого серебра и 50 мл дистиллированной воды. После растворения соли, при энергичном перемешивании, приливают 54,4 мл 25% водного раствора аммиака.
К гомогенному раствору дилитиевой соли цистина при комнатной температуре, при перемешивании на магнитной мешалке приливают раствор аммиачного комплекса серебра. Реакционная смесь постепенно приобретает желтую окраску, которая усиливается в течение 1-2 часов. Через 6 часов реакционную смесь упаривают на ротационном испарителе при температуре 40-50°С до объема 50 мл. При этом происходит интенсивное выпадение мелкодисперсного осадка желтого цвета. Суспензию переносят в стеклянный стакан емкостью 500 мл и при интенсивном перемешивании механической мешалкой добавляют 200 мл этилового спирта порциями по 50 мл в течение 30 минут. Суспензию перемешивают 30 минут и помещают в холодильник (+4÷+6°С) на 12 часов. Образовавшийся желтый осадок отфильтровывают, осадок тщательно промывают 300 мл этилового спирта и сушат в вакууме при комнатной температуре до постоянного веса.
Данные элементного анализа, представленные в таблице 1 получены с использованием автоматического анализатора элементного состава. Содержание металлов определялось атомно-адсорбционным методом.
| Таблица 1 | ||||
| Данные элементного анализа. | ||||
| Найдено (%) | ||||
| С | H | N | Li | Ag |
| 13.36 | 3.42 | 10.57 | 1.18 | 40.16 |
| 13.74 | 3.50 | 10.70 | 1.25 | 40.68 |
| 13.33 | 3.54 | 10.71 | 1.32 | 40.46 |
| Вычислено (%) для C6H19N4O6S2LiAg2 | ||||
| С | Н | N | Li | Ag |
| 13.60 | 3.61 | 10.57 | 1.31 | 40.70 |
Результаты лабораторных исследований на биологическую активность. В результате проведенных экспериментов в лабораторных условиях была изучена цитотоксичность и противовирусная активность заявляемого комплекса серебра с цистином с условным названием Аргобиоцин-2S.
Определение цитотоксичности препаратов проводили в соответствии с "Методическими рекомендациями по использованию культур клеток МДВК и КСТ для оценки цитотоксического действия лекарственных средств" (С.Г. Колесникова и соавт., 2002).
Все опыты проводили в трехкратной повторности. Статистическую обработку проводили общепринятыми методами (И.П. Ашмарин и соавт., 1974).
Определение цитотоксичности препаратов для культуры клеток.
Для определения цитотоксичности препаратов для культуры клеток испытуемые препараты вносили в двухсуточный монослой культуры клеток КСТ, выращенной микрометодом в 96-луночных планшетах в следующих дозах: 10 мг/мл; 1 мг/мл; 100 мгк/мл; 10 мкг/мл; 1 мкг/мл; 0,1 мкг/мл; 0,01 мкг/мл; 0,001 мкг/мл. На одно разведение каждого препарата использовали 4 лунки с монослоем культуры клеток. Цитотоксическое действие препарата на клетки учитывали по степени изменения монослоя и контролировали в течение 3 суток. Результаты представлены в таблице 2.
| Таблица 2 | |
| Цитотоксическое действие препарата в культуре клеток КСТ | |
| Доза препарата | Цитотоксическое действие (ЦТД) |
| "Аргобиоцин 2S" | |
| 10 мг/мл | + |
| 1 мг/мл | - |
| 100 мкг/мл | - |
| 10 мкг/мл | - |
| 1 мкг/мл | - |
| 0,1 мкг/мл | - |
| 0,01 мкг/мл | - |
| 0,001 мкг/мл | - |
Токсическая доза препарата "Аргобиоцин 2S" составила 10 мг/мл. В результате исследований установили, что цитотоксическая доза препарата "Аргобиоцин 2S" для культуры клеток КСТ составила 10 мг/мл. Нетоксичная для культуры клеток КСТ доза препарата "Аргобиоцин 2S" составила 1 мг/мл.
Для определения минимальной цитотоксической дозы испытуемый препарат вносили в двухсуточный монослой культуры клеток КСТ, выращенной микрометодом в 96-луночных планшетах в следующих дозах: 10; 5; 2,5; 1,25 мг/мл. На одно разведение каждого препарата использовали 4 лунки с монослоем культуры клеток. Цитотоксическое действие препаратов на клетки учитывали по степени изменения монослоя и контролировали в течение 3 суток. Исследования проводили в трех повторностях. Результаты исследований представлены в таблице 3.
| Таблица 3 | |||
| Определение минимальной цитотоксической и максимальной нетоксичной дозы препарата "Аргобиоцин 2S" | |||
| Доза препарата "Аргобиоцин 2S", мг/мл |
Цитотоксическое действие (ЦТД) | ||
| 1 исследование | 2 исследование | 3 исследование | |
| 10 | + | + | + |
| 5 | + | + | - |
| 2,5 | - | - | - |
| 1,25 | - | - | - |
Минимальная цитотоксическая для культуры клеток КСТ доза препарата "Аргобиоцин 2S" составила: 6,67±1,36 мг/мл, а максимальная нетоксичная - 3,33±0,68 мг/мл.
Таким образом, максимальная цитотоксическая доза препарата "Аргобиоцин 2S" для культуры клеток КСТ составила 10 мг/мл, а минимальная - 6,67±1,36 мг/мл. Максимальная нетоксичная для культуры клеток КСТ доза препарата "Аргобиоцин 2S" составила 3,33±0,68 мг/мл.
Определение противовирусной активности препаратов в отношении вируса ВД-БС КРС осуществлялось следующим образом. Монослой используемой культуры клеток заражали вирусом ВД-БС КРС в дозе не менее 1-10 ТЦД/кл, через 1,5 часа после этого их отмывали питательной средой без сыворотки и вносили препараты в максимальных нетоксичных для культуры клеток КСТ дозах (опыт) или разводящую питательную среду (контроль). Через 72 часа культивирования вируса в таких биосистемах культуральную жидкость титровали. Противовирусный эффект препаратов рассчитывали по разнице инфекционных активностей вирусов в контрольных и опытных образцах (Вирусология. Методы, под ред. Б. Мейхи, М.: Мир, 1988). Противовирусный эффект препаратов выражали в lg ТЦД50/0,1 мл снижения титров вируса (Н.Д. Львов и соавт., Вопросы вирусологии, 1986, №2). Препарат считали эффективным при снижении инфекционного тира вируса не менее чем на 2 lg ТЦД50/0,1 мл (в 100 раз) по сравнению с контрольными (не обработанными препаратами культурами клеток). В каждом опыте проводили дополнительный контроль на токсичность испытуемой дозы препаратов.
Титрование вирусов осуществлялось следующим образом. Определение инфекционного титра вируса ВД-БС КРС проводили микрометодом (Вирусология. Методы, под ред. Б. Мейхи, М.: Мир, 1988) в 96-луночных культуральных планшетах с культурой клеток КСТ с использованием не менее 4 параллельных рядов. Инфекционный титр вируса выражали в ТЦД50/0,1 мл (50%-я тканевая цитопатическая доза).
Результаты исследований представлены в таблице 4.
| Таблица 4 | |||
| Накопление вируса ВД-БС КРС в культуральной жидкости в присутствии препарата. | |||
| Название препарата | Использованная доза препарата | Концентрация вируса ВД-БС (M±m), lg ТЦД50/0,1 мл | |
| Опыт | Контроль | ||
| "Аргобиоцин 2S" | 1 мг/мл | 4,07±0,07 | 6,08±0,07 |
В результате проведенных исследований установлено, что препарат "Аргобиоцин 2S" оказывает противовирусное действие, снижая инфекционную активность вируса ВД-БС КРС на 2,01 lg ТЦД50/0,1 мл по сравнению с контролем.
В результате проведенной работы найдена нетоксичная доза препарата для культуры клеток КСТ (коронарные сосуды теленка), на которых культивировался вирус (вирусной диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота (ВД-БС КРС)) in vitro. Данная доза проявила выраженные противовирусные свойства, снизив инфекционную активность вируса в сто раз. Таким образом, применение данного препарата в качестве основы противовирусных лекарственных средств позволит получить новые эффективные лекарственные средства с иным механизмом действия по сравнению с ныне применяемыми лекарственными препаратами, не содержащими ионов металлов в своей структуре.
Claims (2)
1. Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и отвечающее составу C6H19N4O6S2LiAg2.
2. Способ получения водорастворимого средства, обладающего противовирусной активностью по п.1, заключающийся в том, что синтез осуществляют при комнатной температуре смешением следующих компонентов: цистин - гидроокись лития - нитрат серебра - аммиак в мольном соотношении 1:2:2:8, при этом в воде вначале растворяют цистин, который переводят в литиевую соль добавлением гидроокиси лития, к полученному раствору добавляют предварительно полученный аммиачный комплекс нитрата серебра, полученный смешением рассчитанных количеств раствора нитрата серебра и 25%-ного водного раствора аммиака, реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 6 ч, упаривают в вакууме до 1/4 первоначального объема при температуре 40-50°С, при котором происходит интенсивное выпадение целевого соединения в виде мелкодисперсного осадка желтого цвета, полученную суспензию перемешивают с эквивалентным объемом этилового спирта, который добавляют четырьмя равными порциями, суспензию охлаждают до 4-6°С и выдерживают 12 ч, образовавшийся желтый осадок отфильтровывают, промывают этиловым спиртом и сушат в вакууме при комнатной температуре до постоянного веса.
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005136503/15A RU2277908C1 (ru) | 2005-11-25 | 2005-11-25 | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения |
| PCT/RU2006/000603 WO2007061337A1 (en) | 2005-11-25 | 2006-11-15 | Water-soluble antiviral agent based on silver-cistine compound and method of preparing thereof |
| CN2006800422011A CN101304741B (zh) | 2005-11-25 | 2006-11-15 | 一种可溶于水、以银的化合物和胱氨酸为主要成分、具有抗病毒活性的制剂及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005136503/15A RU2277908C1 (ru) | 2005-11-25 | 2005-11-25 | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2277908C1 true RU2277908C1 (ru) | 2006-06-20 |
Family
ID=36714078
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005136503/15A RU2277908C1 (ru) | 2005-11-25 | 2005-11-25 | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101304741B (ru) |
| RU (1) | RU2277908C1 (ru) |
| WO (1) | WO2007061337A1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2390343C1 (ru) * | 2008-12-15 | 2010-05-27 | Закрытое акционерное общество "БиоАргоФарм" | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной и иммуномодулирующей активностью, на основе соединения ионного серебра с метиленовым синим и способ его получения |
| RU2450806C2 (ru) * | 2010-07-05 | 2012-05-20 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) | Пептидоподобное соединение, обладающее противовирусной активностью, и способ его получения |
| RU2532328C1 (ru) * | 2013-10-23 | 2014-11-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) | Средство, обладающее антибактериальной активностью |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9315476B2 (en) | 2014-04-10 | 2016-04-19 | Harvey E. Svetlik | Antiviral water-soluble product with anti-HIV effect, based on ionic silver and methylene blue compound; method of its production and examples of HIV-infected patients' treatment |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT69476B (de) * | 1913-07-09 | 1915-07-26 | Albert Von Dr Mueller | Verfahren zur Gewinnung therapeutisch wertvoller bakterizider Präparate. |
| RU2071963C1 (ru) * | 1990-07-19 | 1997-01-20 | Сионоги Энд Ко., Лтд. | Производные тиоалкилтиоцефалоспорина или их фармацевтически приемлемые соли, антибактериальная композиция |
| SU675818A1 (ru) * | 1977-07-12 | 1998-07-10 | Научно-исследовательский институт Саратовского государственного университета им. Н.Г.Чернышевского | Дииодиды серебра s-метил-3-фенил-5r-2-тиониабициклоалканов, проявляющие антимикробную активность и ингибирующее действие в отношении антибиотико-резистентных стафилококка и кишечной палочки |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE268968C (ru) * | ||||
| CN1631539A (zh) * | 2004-12-03 | 2005-06-29 | 北京大学 | 氨基酸盐离子液体及其制备方法 |
-
2005
- 2005-11-25 RU RU2005136503/15A patent/RU2277908C1/ru not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-11-15 WO PCT/RU2006/000603 patent/WO2007061337A1/en not_active Ceased
- 2006-11-15 CN CN2006800422011A patent/CN101304741B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT69476B (de) * | 1913-07-09 | 1915-07-26 | Albert Von Dr Mueller | Verfahren zur Gewinnung therapeutisch wertvoller bakterizider Präparate. |
| SU675818A1 (ru) * | 1977-07-12 | 1998-07-10 | Научно-исследовательский институт Саратовского государственного университета им. Н.Г.Чернышевского | Дииодиды серебра s-метил-3-фенил-5r-2-тиониабициклоалканов, проявляющие антимикробную активность и ингибирующее действие в отношении антибиотико-резистентных стафилококка и кишечной палочки |
| RU2071963C1 (ru) * | 1990-07-19 | 1997-01-20 | Сионоги Энд Ко., Лтд. | Производные тиоалкилтиоцефалоспорина или их фармацевтически приемлемые соли, антибактериальная композиция |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2390343C1 (ru) * | 2008-12-15 | 2010-05-27 | Закрытое акционерное общество "БиоАргоФарм" | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной и иммуномодулирующей активностью, на основе соединения ионного серебра с метиленовым синим и способ его получения |
| RU2450806C2 (ru) * | 2010-07-05 | 2012-05-20 | Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии (ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии) | Пептидоподобное соединение, обладающее противовирусной активностью, и способ его получения |
| RU2532328C1 (ru) * | 2013-10-23 | 2014-11-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) | Средство, обладающее антибактериальной активностью |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101304741B (zh) | 2011-07-06 |
| WO2007061337A1 (en) | 2007-05-31 |
| CN101304741A (zh) | 2008-11-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2673136B2 (ja) | 抗腫瘍性、抗ウイルス性、抗レトロウイルス性、抗乾癬性および殺虫性スペルミン誘導体 | |
| MX2014015249A (es) | Derivados de segunda generacion del antibiotico antifungico anfotericina b de n-sustiduidos y metodos de su preparacion y aplicacion. | |
| US8765173B2 (en) | Drug delivery system for administration of a water soluble, cationic and amphiphilic pharmaceutically active substance | |
| RU2277908C1 (ru) | Водорастворимое средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединения серебра с цистином и способ его получения | |
| CN108853106A (zh) | 亚胺吩嗪类化合物作为狂犬病病毒抑制剂的用途 | |
| RU2136668C1 (ru) | N,n'-(сульфонилди-1,4-фенилен)бис(n'',n''- диметилформамидин)1,2,3,4-тетрагидро-6-метил-2,4- диоксо-5-пиримидинсульфонат, стимулирующий клеточный метаболизм и обладающий иммунотропной и антимикобактериальной активностью | |
| RU2176505C2 (ru) | Средство, обладающее противовирусной активностью, на основе соединений серебра и золота с тиазином и способ его получения | |
| US9221746B2 (en) | Homo- and hetero-polyamino-acid derivatives of fullerene C60, method for producing same, and pharmaceutical compositions based on said derivatives | |
| EP2851368A1 (en) | Complex compounds of germanium, methods for producing same, and drugs | |
| EP0762878A1 (en) | Use of a naphthalenesulfonic acid compound for inhibiting retroviral infection | |
| EP1669357A8 (en) | Substance which exhibits antiviral and antibacterial activity and is based on derivatives of 2,8-dithioxo-1h-pyrano[ 2,3-d,6,5-d'] dipyrimidine and 10-aza-analogue thereof | |
| CN100390183C (zh) | 稀土杂多化合物抗病毒药物 | |
| WO1993015607A1 (en) | Ion pairs of hypericin compounds having antiviral activity | |
| RU2255086C1 (ru) | 1-метил-2-фенилтиометил-3-карбэтокси-4-диметиламинометил-5-окси-6- броминдола мезилат, обладающий противовирусной активностью, и фармацевтическая композиция с его использованием | |
| RU2199547C2 (ru) | Амид глицирризиновой кислоты с 5-аминоурацилом, проявляющий анти-вич активность | |
| US9096492B2 (en) | Hydrated N-fullerene amino acids, method for producing the latter, and pharmaceutical compositions on the basis thereof | |
| US20040157920A1 (en) | Method of adenovirus, HIV and HPV prophylaxis | |
| US20150291542A1 (en) | Antiviral Water-Soluble Product with Anti-HIV Effect, Based on Ionic Silver and Methylene Blue Compound; Method of Its Production and Examples of HIV-infected Patients' Treatment | |
| CZ396292A3 (en) | Pharmaceutical preparation for treating and prophylaxis of infection | |
| CN114835594A (zh) | 具有抗菌活性的三阳离子季铵盐抗菌肽模拟物及其制备方法 | |
| US20030125297A1 (en) | Method of hiv and hpv prophylaxis | |
| JP2008184406A (ja) | 医薬組成物 | |
| HK1190386B (en) | Homo- and hetero-polyamino-acid derivatives of fullerene c60, method for producing same, and pharmaceutical compositions based on said derivatives | |
| JPH03172302A (ja) | 新規硫酸エステル化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20131126 |