[go: up one dir, main page]

RU2277773C2 - Method for in vitro multiplication of plants - Google Patents

Method for in vitro multiplication of plants Download PDF

Info

Publication number
RU2277773C2
RU2277773C2 RU2004121129/13A RU2004121129A RU2277773C2 RU 2277773 C2 RU2277773 C2 RU 2277773C2 RU 2004121129/13 A RU2004121129/13 A RU 2004121129/13A RU 2004121129 A RU2004121129 A RU 2004121129A RU 2277773 C2 RU2277773 C2 RU 2277773C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
rooting
medium
plants
buds
perlite
Prior art date
Application number
RU2004121129/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2004121129A (en
Inventor
Василий Иванович Деменко (RU)
Василий Иванович Деменко
Original Assignee
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева" filed Critical Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева"
Priority to RU2004121129/13A priority Critical patent/RU2277773C2/en
Publication of RU2004121129A publication Critical patent/RU2004121129A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2277773C2 publication Critical patent/RU2277773C2/en

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

FIELD: plant growing.
SUBSTANCE: method involves planting lateral buds of plants in bottom-free containers filled with agarinic medium for initiating rooting; transplanting rooted buds into container filled with perlite which is impregnated with liquid sterile medium for providing acclimatization of root system before in vivo transplanting of woody buds.
EFFECT: increased efficiency in rooting of woody buds.
1 tbl, 1 ex

Description

Предлагаемое изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано для размножения растений in vitro.The present invention relates to the field of agriculture and can be used for propagation of plants in vitro.

Известен способ размножения растений in vitro, предусматривающий получение боковых побегов на среде, содержащей цитокинины, разделения побегов и их укоренение на среде, содержащей ауксины, пересадку укорененных растений в нестерильные условия с высокой влажностью воздуха для их акклиматизации (Деменко В.И. Микроклональное размножение плодовых и ягодных культур. М.: Издательство МСХА 1997 г.). Однако при таком способе размножения отмечают большой процент гибели растений, что объясняется плохой работой корневой системы растений, полученных in vitro. По существующей методике укоренения побеги три недели находятся на питательной среде, содержащей 1-2 мг/л ИМК. Такая концентрация благоприятна для заложения корней, но ингибирует их развитие. Пересадка неукорененных побегов после 7-10 дней нахождения на среде СИМК на среду без ИМК не всегда дает положительные результаты, увеличивает затраты труда и расход питательной среды, особенно агара. Агар придает определенную твердость среде, что не дает побегам тонуть. Кроме того, он абсорбирует вещества, выделяемые из побегов, но на среде, содержащей 5-8 г/л агара, плохо развиваются корни второго порядка и никогда не развиваются корневые волоски. При уменьшенном содержании агара в среде развиваются "стекловидные" растения, которые при пересадке в нестерильные условия погибают.A known method of propagation of plants in vitro, providing for lateral shoots on a medium containing cytokinins, separation of shoots and rooting on a medium containing auxins, transplantation of rooted plants in non-sterile conditions with high air humidity for their acclimatization (Demenko V.I. Microclonal propagation of fruit and berry crops. M.: Publishing House of the Moscow Agricultural Academy 1997). However, with this method of reproduction, a large percentage of plant death is noted, which is explained by the poor functioning of the root system of plants obtained in vitro. According to the existing method of rooting, the shoots are three weeks old on a nutrient medium containing 1-2 mg / l IMC. This concentration is favorable for rooting, but inhibits their development. The transplantation of unrooted shoots after 7-10 days on SIMC medium on a medium without BCI does not always give positive results, increases labor costs and consumption of nutrient medium, especially agar. Agar gives a certain hardness to the medium, which prevents the shoots from sinking. In addition, it absorbs substances released from shoots, but second-order roots do not develop well on medium containing 5-8 g / l agar and root hairs never develop. With a reduced agar content, “glassy" plants develop in the medium, which die when transplanted to non-sterile conditions.

Наиболее близким техническим решением к заявленному изобретению относится способ выращивания (АС №1683582), который предусматривает введение в агар перлита. Однако такая среда способствует хорошему укоренению земляники, малины; древесные укореняются плохо. Очень важно соблюсти соотношение и величину слоя перлита. При таком способе перлит, пропитанный агаром, после автоклавирования сосредоточен в верхней части среды; нижняя часть представлена агаром с вкраплениями частиц перлита. В тоже время агар благоприятно влияет на начальный этап укоренения. Заявляемое решение направлено на решение задачи увеличить укореняемость древесных растений in vitro и провести акклиматизацию корневой системы до пересадки in vivo, т.е. создать условия, при которых индукция и инициализация корнеобразования происходит на агаризованной среде, а развитие корневой системы в условиях, близких к нестерильным, без дополнительных затрат на пересадку.The closest technical solution to the claimed invention relates to a method of growing (AS No. 1683582), which involves the introduction of perlite into agar. However, this environment contributes to the good rooting of strawberries, raspberries; woody root poorly. It is very important to observe the ratio and size of the perlite layer. In this method, perlite impregnated with agar, after autoclaving, is concentrated in the upper part of the medium; the lower part is represented by agar interspersed with perlite particles. At the same time, agar favorably affects the initial stage of rooting. The claimed solution is aimed at solving the problem of increasing the rooting of woody plants in vitro and to acclimatize the root system before transplanting in vivo, i.e. to create conditions under which the induction and initialization of root formation occurs on an agar medium, and the development of the root system in conditions close to non-sterile, without additional costs for transplantation.

Пример выполнения способа.An example of the method.

1. Сосуды без дна (капиллярные трубки) длиной 1-1,5 см и шириной 1-1,5 см плотно размещали в сосудах с дном объемом 250-500 мл и заливали расплавленной питательной средой для укоренения (1/2 МС + 1,5 мг/л ИМК + 20 г/л сахароза + 6 г/л агар). Большие сосуды герметично закрывали и автоклавировали. После автоклавирования среда в сосудах без дна застывала.1. Vessels without a bottom (capillary tubes) 1-1.5 cm long and 1-1.5 cm wide were tightly placed in vessels with a bottom of 250-500 ml in volume and filled with molten rooting medium (1/2 MS + 1, 5 mg / l IMC + 20 g / l sucrose + 6 g / l agar). Large vessels were hermetically sealed and autoclaved. After autoclaving, the medium in vessels without a bottom solidified.

2. В другие большие сосуды насыпали перлит слоем 2-2,5 см и пропитывали жидкой средой (1/2 МС без регуляторов роста и сахарозы), герметично закрывали и автоклавировали.2. Perlite was poured into other large vessels with a layer of 2-2.5 cm and impregnated with a liquid medium (1/2 MS without growth regulators and sucrose), hermetically sealed and autoclaved.

3. Подвои яблони 62-396 размножали на питательной среде Мурасига и Скуга с добавлением 2 мг/л 6 БАП. После шестого пассажа проводили укоренение побегов.3. Apple rootstocks 62-396 were propagated on Murasig and Skoog medium with the addition of 2 mg / l 6 BAP. After the sixth passage, rooting of the shoots was carried out.

4. В ламинар-боксе конгломерат побегов разделяли, побеги сажали в сосуды без дна и переносили в сосуд с перлитом. После укоренения побегов в среде с агаром и развитием корней в перлите растения пересаживали в нестерильные условия.4. In the laminar box, the shoot conglomerate was separated, the shoots were planted in vessels without a bottom and transferred to a vessel with perlite. After rooting shoots in an agar medium and root development in perlite, the plants were transplanted to non-sterile conditions.

Предлагаемое решение позволяет иметь две несмешивающиеся среды в одном сосуде, что позволяет создать необходимые условия для отдельных этапов корнеобразования и повысить приживаемость растений в нестерильных условиях. Кроме того, ускоряет процесс заполнения сосудов для укоренения в 10-20 раз по сравнению с использованием для этих целей пробирок.The proposed solution allows you to have two immiscible environments in one vessel, which allows you to create the necessary conditions for the individual stages of root formation and increase the survival rate of plants in non-sterile conditions. In addition, it accelerates the process of filling the vessels for rooting by 10-20 times in comparison with the use of tubes for these purposes.

Результаты опытов представлены в таблице.The results of the experiments are presented in the table.

ТаблицаTable Влияние среды на укореняемость и приживаемость подвоя яблони 62-396The influence of the environment on the rooting and survival rate of apple stock 62-396 СредаWednesday Укоренение, %Rooting,% Приживаемость в нестерильных условиях, %Survival in non-sterile conditions,% 1/2 MC агар1/2 mc agar 7575 6262 1/2 MC агар + перлит1/2 MC agar + perlite 5252 7171 Предлагаемый способThe proposed method 7373 9595

Таким образом, предлагаемое изобретение позволяет получать достаточное укоренение побегов и повысить на 33% приживаемость растений в нестерильных условиях.Thus, the present invention allows to obtain sufficient rooting of shoots and increase plant survival by 33% in non-sterile conditions.

Claims (1)

Способ размножения растений in vitro, включающий получение боковых побегов на среде размножения, их разделение и высадку на укоренение, последующую акклиматизацию укорененных растений в нестерильных условиях, отличающийся тем, что разделенные боковые побеги для начального укоренения высаживают в сосуды без дна, заполненные агаризованной средой, а затем помещают для дальнейшего развития корневой системы в емкость, заполненную перлитом, пропитанным жидкой стерильной средой.A method of plant propagation in vitro, including obtaining lateral shoots on the propagation medium, their separation and planting for rooting, subsequent acclimatization of rooted plants under non-sterile conditions, characterized in that the separated lateral shoots for initial rooting are planted in vessels without a bottom, filled with agar medium, and then placed for further development of the root system in a container filled with perlite, impregnated with a sterile liquid medium.
RU2004121129/13A 2004-07-13 2004-07-13 Method for in vitro multiplication of plants RU2277773C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004121129/13A RU2277773C2 (en) 2004-07-13 2004-07-13 Method for in vitro multiplication of plants

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004121129/13A RU2277773C2 (en) 2004-07-13 2004-07-13 Method for in vitro multiplication of plants

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2004121129A RU2004121129A (en) 2006-01-10
RU2277773C2 true RU2277773C2 (en) 2006-06-20

Family

ID=35872177

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004121129/13A RU2277773C2 (en) 2004-07-13 2004-07-13 Method for in vitro multiplication of plants

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2277773C2 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2485755C1 (en) * 2011-10-28 2013-06-27 Общество с ограниченной ответственностью "ИНВИТРО" Method of growing planting material
RU2767068C2 (en) * 2020-02-20 2022-03-16 Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Великолукская государственная сельскохозяйственная академия" METHOD FOR GROWING TEST TUBE PLANTS OF POTATOES IMPROVED BY APICAL MERISTEM METHOD ON NUTRIENT MEDIUM WITH CONCENTRATION OF VITAMIN COMPLEX OF 2.5 mg/l

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1683582A1 (en) * 1989-03-28 1991-10-15 Научно-исследовательский зональный институт садоводства Нечерноземной полосы Method for growing strawberry in vitro
SU1750492A1 (en) * 1990-06-21 1992-07-30 Научно-исследовательский зональный институт садоводства Нечерноземной полосы Method for growing grafted plants
SU1761057A1 (en) * 1990-07-09 1992-09-15 Ленинградский Научно-Исследовательский Институт Лесного Хозяйства Method of microclonal multiplication of common spruce in vitro
RU2102870C1 (en) * 1994-12-08 1998-01-27 Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного хозяйства Method of plant culturing in vitro

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1683582A1 (en) * 1989-03-28 1991-10-15 Научно-исследовательский зональный институт садоводства Нечерноземной полосы Method for growing strawberry in vitro
SU1750492A1 (en) * 1990-06-21 1992-07-30 Научно-исследовательский зональный институт садоводства Нечерноземной полосы Method for growing grafted plants
SU1761057A1 (en) * 1990-07-09 1992-09-15 Ленинградский Научно-Исследовательский Институт Лесного Хозяйства Method of microclonal multiplication of common spruce in vitro
RU2102870C1 (en) * 1994-12-08 1998-01-27 Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного хозяйства Method of plant culturing in vitro

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2485755C1 (en) * 2011-10-28 2013-06-27 Общество с ограниченной ответственностью "ИНВИТРО" Method of growing planting material
RU2767068C2 (en) * 2020-02-20 2022-03-16 Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Великолукская государственная сельскохозяйственная академия" METHOD FOR GROWING TEST TUBE PLANTS OF POTATOES IMPROVED BY APICAL MERISTEM METHOD ON NUTRIENT MEDIUM WITH CONCENTRATION OF VITAMIN COMPLEX OF 2.5 mg/l

Also Published As

Publication number Publication date
RU2004121129A (en) 2006-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Batukaev et al. Use of growth regulators in grapes grinding by in vitro method
Benmahioul et al. In vitro regeneration of Pistacia vera L. from nodal explants.
Llorente et al. In vitro propagation of jojoba
US20220174902A1 (en) In-Vitro Photoautotrophic Propagation of Cannabis
Dev et al. Standardization of in vitro hardening strategies for tissue cultured wine grape (Vitis vinifera L) genotypes
WO2006094400A1 (en) Aerated liquid priming of conifer somatic germinants
RU2277773C2 (en) Method for in vitro multiplication of plants
KR20150006187A (en) Development of technique of embryogenic tissue induction from somatic embryo in yellow poplar(Liriodendron tulipifera)
Siti-Suhaila et al. Micropropagation of Nepenthes hybrid (N. viking× N. miranda) using a temporary immersion bioreactor system, SETIS™
RU2092036C1 (en) Method of micromultiplication of stevia, stevia rebaudiona l
RU2302106C1 (en) Method for preparation of in vitro propagated strawberry (fragraria l) plants to ex vitro cultivation
RU2264706C2 (en) Method for optimization of clonal in vitro micro multiplication of grape
Rather et al. In vitro propagation of herbaceous peony (Paeonia lactiflora Pall.) cv. Sara Bernhardt using shoot tips
Sawsan et al. In vitro propagation of cactus (Cereus peruvianus L.)
Taha Enhanced indirect somatic embryogenesis of date palm using low levels of seawater
Rodge et al. Tissue Culture as a Plant Production Technique for Fruit Crops and Plant Part Used for Propagation
US7950183B2 (en) Methods of producing a synchronized population of conifer somatic embryo germinants
RU2824883C1 (en) Method of growing cloudberries (rubus chamaemorus linnaeus)
RU2834051C1 (en) Method for propagation of southern catalpa (catalpa bignonioides)
CN104770297A (en) Pseudolarix plant regeneration method using pseudolarix leaves as explant
RU2825762C1 (en) Method of growing wild lowbush blueberry (vaccinium angustifolium aiton)
RU2481766C1 (en) Method of obtaining plant-regenerates of iris ensata (i. ensata thunb.) in vitro
Wochok et al. In vitro Propagation and Establishment of Wax Currant (Ribes Inebriam)
Darby et al. Synthetic seed production for germplasm distribution of the therapeutic-honey plants, Leptospermum polygalifolium and L. scoparium
Hajari et al. Micropropagation of recalcitrant-seeded Ekebergia capensis Sparrm. using in vitro nodal segments and roots

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20070714