RU2265451C2 - Method for obtaining prophylactic preparations against respiratory mycoplasmosis in poultry and method for prophylaxis - Google Patents
Method for obtaining prophylactic preparations against respiratory mycoplasmosis in poultry and method for prophylaxis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2265451C2 RU2265451C2 RU2003125671/13A RU2003125671A RU2265451C2 RU 2265451 C2 RU2265451 C2 RU 2265451C2 RU 2003125671/13 A RU2003125671/13 A RU 2003125671/13A RU 2003125671 A RU2003125671 A RU 2003125671A RU 2265451 C2 RU2265451 C2 RU 2265451C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cholesterol
- poultry
- mycoplasma
- birds
- prophylaxis
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 title claims description 23
- 244000144977 poultry Species 0.000 title abstract description 8
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 title abstract 3
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical group C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims abstract description 30
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 241000204022 Mycoplasma gallisepticum Species 0.000 claims abstract description 14
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 claims abstract description 10
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims abstract description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 5
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 claims abstract description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 16
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 13
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 claims description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 10
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 3
- 239000003324 growth hormone secretagogue Substances 0.000 claims 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 abstract description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 3
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 abstract 2
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 abstract 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 22
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 21
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 17
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 14
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 3
- 241000204003 Mycoplasmatales Species 0.000 description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 2
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 238000005476 soldering Methods 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000288147 Meleagris gallopavo Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 244000144992 flock Species 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 244000144980 herd Species 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009374 poultry farming Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарии, в частности к птицеводству, а именно к способам получения профилактических средств против респираторного микоплазмоза птиц и к способам профилактики.The present invention relates to the field of veterinary medicine, in particular to poultry farming, and in particular to methods for producing prophylactic agents against respiratory mycoplasmosis of birds and to methods of prevention.
За последние годы в промышленном птицеводстве получил широкое распространение респираторный микоплазмоз (РМ) птиц - инфекционное заболевание, характеризующееся поражением респираторных органов и хроническим течением.In recent years, respiratory mycoplasmosis (PM) of birds has become widespread in industrial poultry, an infectious disease characterized by damage to the respiratory organs and chronic course.
Искоренение подобных инфекций в промышленном птицеводстве до сих пор остается большой проблемой в яичном и мясном производстве, поскольку вызывает снижение продуктивности на 10-20 яиц на курицу-несушку и снижение на 10% прироста живой массы бройлеров.The eradication of such infections in industrial poultry is still a big problem in the egg and meat production, since it causes a decrease in productivity of 10-20 eggs per laying hen and a 10% decrease in the live weight of broilers.
Известен способ получения инактивированной сорбированной вакцины против респираторного микоплазмоза птиц, разработанной специалистами ВНИВИП (1).A known method for producing inactivated sorbed vaccine against respiratory mycoplasmosis of birds, developed by specialists of VNIVIP (1).
Согласно данному способу получения вакцины против респираторного микоплазмоза птиц для выращивания культур микоплазм используют среду Эдварда, состоящую из отвара мышцы сердца крупного рогатого скота, обогащенного сывороткой крови лошади, дрожжевым экстрактом и глюкозой, или среду из гидролизата рыбного концентрата, также обогащенную вышеназванными веществами. Для инактивации культуры микоплазм используют формалин в конечной концентрации 0,3% относительно содержания формальдегида и выдерживают в термостате при температуре 37°С в течение 24 часов.According to this method for producing a vaccine against respiratory mycoplasmosis of birds, Edward medium is used to grow mycoplasma cultures, consisting of decoction of cattle heart muscle enriched with horse serum, yeast extract and glucose, or a fish concentrate hydrolyzate medium also enriched with the above substances. To inactivate the mycoplasma culture, formalin is used in a final concentration of 0.3% relative to the formaldehyde content and is kept in a thermostat at a temperature of 37 ° C for 24 hours.
Инактивированную микробную массу смешивают с гелем гидроокиси алюминия до конечной его концентрации 1,5%. Смесь оставляют при температуре (10,0+0,5)°С на 48 часов для адсорбции микоплазм. Процесс адсорбции происходит при тщательном периодическом перемешивании смеси.Inactivated microbial mass is mixed with an aluminum hydroxide gel to a final concentration of 1.5%. The mixture is left at a temperature of (10.0 + 0.5) ° C for 48 hours to adsorb mycoplasmas. The adsorption process occurs with thorough periodic mixing of the mixture.
Полученное профилактическое средство применяют в хозяйствах, неблагополучных по респираторному микоплазмозу. Вакцинируют клинически здоровую птицу двукратно: в возрасте 1-2-х месяцев, в зависимости от сроков возникновения заболевания и за 10-15 дней до начала яйцекладки.The obtained prophylactic agent is used in farms that are dysfunctional for respiratory mycoplasmosis. A clinically healthy bird is vaccinated twice: at the age of 1-2 months, depending on the timing of the onset of the disease and 10-15 days before the start of egg laying.
Вакцину применяют подкожно в верхнюю треть шеи. У вакцинированных цыплят и индюшат иммунитет наступает через 7-10 дней. Иммуногенность вакцины не менее 80%.The vaccine is administered subcutaneously in the upper third of the neck. In vaccinated chickens and turkey poults, immunity occurs after 7-10 days. Immunogenicity of the vaccine is at least 80%.
Однако использование в данном способе при культивировании Mycoplasma gallisepticum (M.G.) среды Эдварда, содержащей 20% сыворотки крови, имеющей нестабильный химический состав, а также способность протеинов сыворотки крови адсорбироваться на клеточной мембране микоплазменной клетки, приводит к нестабильному содержанию в сыворотке крови липидов и холестерина. К тому же данный способ вакцинации достаточно трудоемок и требует больших трудовых затрат при вакцинации.However, the use of Edward’s medium containing 20% blood serum with an unstable chemical composition and the ability of blood serum proteins to adsorb on the cell membrane of mycoplasma cells during the cultivation of Mycoplasma gallisepticum (M.G.) in this method leads to unstable serum lipids and cholesterol. In addition, this method of vaccination is quite time-consuming and requires large labor costs during vaccination.
В последние годы в США и других странах проводились работы по созданию липосом-адъювантных вакцин, которые завершились созданием ряда коммерческих биопрепаратов (2).In recent years, in the United States and other countries, work has been carried out to create liposome-adjuvant vaccines, which culminated in the creation of a number of commercial biological products (2).
Наиболее близким к предполагаемому способу является способ получения липосом-адъювантных Mycoplasma gallisepticum вакцин, содержащих разные адъюванты для вакцинации кур-несушек (3). Способ включает выращивание М.gallisepticum (M.G.) организмов с последующим их смешиванием с многослойными положительно заряженными (МДС) липосомами или масляной эмульсией. Вакцинацию кур проводят дважды подкожно в 13-ти и 17-ти недельном возрасте.Closest to the proposed method is a method for producing liposome-adjuvant Mycoplasma gallisepticum vaccines containing different adjuvants for vaccination of laying hens (3). The method includes the cultivation of M. gallisepticum (M.G.) organisms, followed by their mixing with multilayer positively charged (MDS) liposomes or an oil emulsion. Vaccination of chickens is carried out twice subcutaneously at 13 and 17 weeks of age.
Однако данный способ получения Mycoplasma gallisepticum вакцины нестабилен, к тому же способ введения полученной вакцины достаточно трудоемок ввиду необходимости индивидуального введения вакцины на больших стадах птицы.However, this method of obtaining the Mycoplasma gallisepticum vaccine is unstable, moreover, the method of administering the obtained vaccine is rather laborious due to the need for individual administration of the vaccine in large flocks of poultry.
Задачей, решаемой в рамках заявляемой группы изобретений, является разработка более универсального и технологически более простого способа получения профилактического средства против респираторного микоплазмоза птиц при сохранении высоких иммуногенных свойств получаемого препарата, а также удешевление и снижение трудоемкости и способа профилактики респираторного микоплазмоза на крупных стадах птиц при одновременном снижении стрессового воздействия на птицу.The problem to be solved within the framework of the claimed group of inventions is the development of a more universal and technologically simpler way to obtain a prophylactic agent against respiratory mycoplasmosis of birds while maintaining high immunogenic properties of the resulting preparation, as well as cheaper and less labor intensive and a method of preventing respiratory mycoplasmosis in large herds of birds while reducing stress on the bird.
Поставленная задача решается путем создания способа получения средства для профилактики респираторного микоплазмоза птиц, включающего выращивание культуры микоплазм с использованием штамма S6 Mycoplasma gallisepticum в питательной среде при следующем соотношении ингредиентов, масс.%:The problem is solved by creating a method for the prevention of respiratory mycoplasmosis in birds, including the cultivation of mycoplasma cultures using strain S 6 Mycoplasma gallisepticum in a nutrient medium in the following ratio of ingredients, wt.%:
при температуре 37-38°С не менее 4-5 суток с последующей инактивацией полученной биомассы теотропином в конечной его концентрации 0,2-0,3% в течение 24-48 часов, причем содержание холестерина в питательной среде составляет, по крайней мере, 0,05%.at a temperature of 37-38 ° C for at least 4-5 days, followed by inactivation of the obtained biomass with theotropin in its final concentration of 0.2-0.3% for 24-48 hours, and the cholesterol content in the nutrient medium is at least 0.05%.
Содержание холестерина в питательной среде в количестве не менее 0,05% обусловлено тем, что Mycoplasma gallisepticum относится к группе бактерий, требовательных к составу питательной среды, поэтому и культивирование производится на средах, обогащенных белками, холестерином и витаминами.The content of cholesterol in the nutrient medium in an amount of not less than 0.05% is due to the fact that Mycoplasma gallisepticum belongs to the group of bacteria that require the composition of the nutrient medium, and therefore, cultivation is performed on media enriched with proteins, cholesterol and vitamins.
Заявляемый способ профилактики включает введение профилактического средства, полученного согласно способу, птице однократно в возрасте 30-35 дней интраокулярно, интраназально или путем выпаивання в дозе 0,05-1,0 см3 на голову, причем в неблагополучных хозяйствах препарат вводят птице повторно перед началом яйцекладки.The inventive method of prevention includes the introduction of a prophylactic agent obtained according to the method, to a bird once at the age of 30-35 days intraocularly, intranasally or by drinking in a dose of 0.05-1.0 cm 3 per head, and in dysfunctional farms, the drug is administered to the bird again before starting oviposition.
Введение меньших количеств не обеспечивает надежной профилактики, введение больших количеств неэффективно из экономических соображений. Как правило, показанием к применению данного профилактического средства является неблагополучие хозяйств по респираторному миконлазмозу птиц (проводятся серологические исследования на наличие антител к возбудителю респираторного микоплазмоза в сыворотке крови разновозрастных групп).The introduction of smaller quantities does not provide reliable prevention; the introduction of large quantities is ineffective for economic reasons. As a rule, the indication for the use of this prophylactic is the failure of farms for respiratory mycoplasma of birds (serological tests are carried out for the presence of antibodies to the causative agent of respiratory mycoplasmosis in blood serum of different age groups).
По сравнению с общепринятыми способами заявляемый способ профилактики обеспечивает снижение трудозатрат, повышение скорости вакцинации и уменьшение расхода лекарственного препарата, а также уменьшение стрессового состояния птицы.Compared with conventional methods, the claimed method of prevention provides a reduction in labor costs, an increase in the rate of vaccination and a decrease in the consumption of the drug, as well as a decrease in the stress state of the bird.
Использование в заявляемом способе получения средства для профилактики респираторного микоплазмоза птиц питательной среды указанного состава приводит к стабильному и активному росту микоплазм, что в свою очередь положительно сказывается на иммуногенных свойствах получаемого препарата.The use in the claimed method of obtaining funds for the prevention of respiratory mycoplasmosis of birds of a nutrient medium of the specified composition leads to a stable and active growth of mycoplasmas, which in turn has a positive effect on the immunogenic properties of the resulting drug.
Применение в питательной среде для выращивания микоплазм искусственных холестеринсодержащих липосомальных препаратов позволяет стандартизировать и унифицировать способ получения лекарственного средства и придать ему иммуномодулирующие свойства.The use of artificial cholesterol-containing liposomal preparations in a nutrient medium for growing mycoplasmas makes it possible to standardize and unify the method for producing a drug and give it immunomodulating properties.
Сущность и практическая применимость заявляемых изобретений иллюстрируется следующими примерами.The essence and practical applicability of the claimed invention is illustrated by the following examples.
Производственные штаммы S6 (Mycoplasma gallisepticum) хранятся в музее референтных штаммов микоплазм во ВНИВИП с паспортами, характеризующими их свойства. Они сохраняются в лиофилизированном состоянии в ампулах при температуре 4-6°С. Срок хранения 12 месяцев. Активность штамма S6 (Mycoplasma gallisepticum) - не менее 107-108 КОЕ/см3.Production strains of S 6 (Mycoplasma gallisepticum) are stored in the museum of reference mycoplasma strains in VNIVIP with passports characterizing their properties. They are stored in a lyophilized state in ampoules at a temperature of 4-6 ° C. Shelf life 12 months. The activity of strain S 6 (Mycoplasma gallisepticum) is not less than 10 7 -10 8 CFU / cm 3 .
Для приготовления питательной среды использовали холестеринсодержащую липосомальную эмульсию, представляющую собой жидкость молочно-белого цвета с везикулами среднего диаметра 0,1-0,5 мкм. Количественный состав везикулы - 22-24 мг/мл. Содержание холестерина в липосомальной эмульсии составляет не менее - 0,02822 г/г.To prepare the nutrient medium, a cholesterol-containing liposomal emulsion was used, which is a milky white liquid with vesicles of an average diameter of 0.1-0.5 microns. The quantitative composition of the vesicles is 22-24 mg / ml. The cholesterol content in the liposome emulsion is not less than - 0.02822 g / g.
Пример 1.Example 1
Были приготовлены три образца питательных сред для выращивания микоплазм при различном содержании компонентов. Для контроля проводилось также культивирование микоплазм на среде Эдварда, содержащей ростовые компоненты. В готовые питательные среды (образцы 1, 2, 3) вносили по 10 см3 посевного материала референтного штамма S6 Mycoplasma gallisepticum (М.G.), обладающего соответственными для микоплазм культурально-морфологическими и биохимическими свойствами. Колбы инкубировали в термостате при 37,0-37,5°С в течение 4-5 суток. После 4-5 суток культивирования наблюдали изменение цвета и помутнение среды, свидетельствующие о росте микроорганизмов. Результаты представлены в таблице 1.Three samples of culture media were prepared for growing mycoplasmas at various component contents. For control, mycoplasmas were also cultured on Edward's medium containing growth components. 10 cm 3 of seed material of the reference strain S 6 Mycoplasma gallisepticum (M.G.), which has cultural-morphological and biochemical properties appropriate for mycoplasmas, was introduced into the prepared nutrient media (samples 1, 2, 3). Flasks were incubated in a thermostat at 37.0-37.5 ° C for 4-5 days. After 4-5 days of cultivation, a color change and turbidity of the medium was observed, indicating the growth of microorganisms. The results are presented in table 1.
Зависимость выхода колониеобразующих единиц (КОЕ) микоплазм от состава питательной среды.Table 1.
The dependence of the output of colony forming units (CFU) of mycoplasmas on the composition of the nutrient medium.
Из таблицы 1 видим, что оптимальное количество липосомальной эмульсии составляет 0,3-1,2%, а бычьего-сывороточного альбумина - 0,8-1,0%. Количество колониеобразующих единиц (КОЕ) Mycoplasma gallisepticum (M.G.) составило 107-108/см3 в опыте и 108/см3 в контроле.From table 1 we see that the optimal amount of liposomal emulsion is 0.3-1.2%, and bovine serum albumin is 0.8-1.0%. The number of colony forming units (CFU) of Mycoplasma gallisepticum (MG) was 10 7 -10 8 / cm 3 in the experiment and 10 8 / cm 3 in the control.
Инактивацию возбудителя проводили препаратом "теотропин" в конечной концентрации 0,2-0,3% в течение 24-48 часов. Затем образцы полученного профилактического средства подлежали проверке на стерильность, безвредность и полноту инактивации микоплазм согласно ГОСТу (1).The inactivation of the pathogen was carried out with the drug "theotropin" in a final concentration of 0.2-0.3% for 24-48 hours. Then, the samples of the obtained prophylactic agent were subject to check for sterility, safety and completeness of inactivation of mycoplasmas according to GOST (1).
Приготовленные образцы препарата были стерильные, безвредные для цыплят, обладали иммуногенной активностью, микоплазмы инактивированы.The prepared samples of the preparation were sterile, harmless to chickens, had immunogenic activity, mycoplasmas were inactivated.
Для изучения иммуногенных свойств использовали экспериментальную серию полученного препарата.To study the immunogenic properties used an experimental series of the obtained drug.
В опыте было четыре группы цыплят 25-ти суточного возраста по 10 голов в каждой.In the experiment, there were four groups of chickens of 25 days of age, 10 animals each.
Первой группе цыплят ввели полученный липосомальный препарат против респираторного микоплазмоза птиц в дозе 1 см3 подкожно в среднюю треть шеи.The first group of chickens was injected with the obtained liposome preparation against respiratory mycoplasmosis of birds at a dose of 1 cm 3 subcutaneously in the middle third of the neck.
Второй группе цыплят ввели вакцину против респираторного микоплазмоза птиц ипактивированную сорбированную (ВНИВИП) в дозе 1 см подкожно в среднюю треть шеи. (1) Третья группа цылят - контроль невакцинированные, зараженные (М.О.).The second group of chickens was given a vaccine against respiratory mycoplasmosis of birds and inactivated sorbed (VNIVIP) at a dose of 1 cm subcutaneously in the middle third of the neck. (1) The third group of chickens is control unvaccinated, infected (M.O.).
Четвертая группа цыплят - контроль невакцинированные и не зараженные.The fourth group of chickens is control unvaccinated and not infected.
Перед постановкой опыта у всех цыплят взяли кровь, и исследовали в сывороточно-капельной реакции агглютинации (СКРА) с цветным микоплазменным антигеном ВНИВИП. Сыворотки крови цыплят всех групп дали отрицательные показатели.Before setting the experiment, all chickens were bled and examined in a serum-drop reaction of agglutination (SKRA) with the color mycoplasma antigen VNIVIP. The blood serum of chickens of all groups gave negative indicators.
У подопытных цыплят определяли клеточный иммунитет на пятые, десятые и пятнадцатые сутки после вакцинации. Результаты определения клеточного иммунитета представлены в Таблице 2.In experimental chickens, cellular immunity was determined on the fifth, tenth and fifteenth day after vaccination. The results of the determination of cellular immunity are presented in Table 2.
Результаты изучения клеточного иммунитета (Е=РОК %)Table 2.
The results of the study of cellular immunity (E = ROCK%)
Установлено, что клеточный иммунитет более выражен у цыплят первой группы и составил на 5-е сутки - 33,0%, на 10-ые сутки - 28,0% и на 15-е сутки - 20,5%. У цыплят второй группы показатели были соответственно - 28,5%, 24,0% и 17,0%. Из Таблицы 2 видно, что препарат, полученный согласно предлагаемому способу, обладает более выраженным проявлением клеточного иммунитета, что соответственно на 5-е сутки исследования - на 4,5%, на 10-е сутки - на 4,0%, на 15-е сутки - 3,5% выше по сравнению с контрольной. Гуморальный иммунитет определяли исследованием сыворотки крови цыплят в СКРА на 5-е, 10-е, 20-е, 40-е и 60-е сутки после иммунизации. На 60-е сутки после иммунизации цыплят первых 2-х групп заразили внутривенно культурой М.G. в дозе 1,0 см3. Результаты определения гуморального иммунитета представлены в Таблице 3. В результате установлено, что титр антител в сыворотке крови первых 2-х групп цыплят нарастал до 20-ти суток и удерживался до 60-ти суток. Иммунизированные цыплята первых 2-х групп на 21-е сутки после заражения M.G. оставались живыми, без проявления клинических признаков. У цыплят 3-й группы (контроль невакцинированные и незараженные) клинические признаки заболевания проявлены не были - (СКРА была отрицательная все дни исследования).It was established that cellular immunity is more pronounced in chickens of the first group and amounted to 33.0% on the 5th day, 28.0% on the 10th day and 20.5% on the 15th day. In chickens of the second group, the indicators were respectively - 28.5%, 24.0% and 17.0%. From Table 2 it is seen that the drug obtained according to the proposed method has a more pronounced manifestation of cellular immunity, which, respectively, on the 5th day of the study - by 4.5%, on the 10th day - by 4.0%, by 15- e day - 3.5% higher compared to the control. Humoral immunity was determined by examining the blood serum of chickens in SKRA on the 5th, 10th, 20th, 40th and 60th days after immunization. On the 60th day after immunization, the chickens of the first 2 groups were infected intravenously with M.G. at a dose of 1.0 cm 3 . The results of determining humoral immunity are presented in Table 3. As a result, it was found that the titer of antibodies in the blood serum of the first 2 groups of chickens increased up to 20 days and lasted up to 60 days. The immunized chickens of the first 2 groups on the 21st day after infection with MG remained alive, without the manifestation of clinical signs. In chickens of the 3rd group (control unvaccinated and uninfected), the clinical signs of the disease were not manifested - (SKRA was negative all days of the study).
Результаты изучения гуморального иммунитета (СКРА)Table 3.
The results of the study of humoral immunity (SCRA)
В конце опыта цыплят исследовали на выделение микоплазм. Культуру M.G. изолировали только от цыплят 3-й группы - (контроль зараженные M.G.).At the end of the experiment, chickens were examined for the release of mycoplasmas. Culture M.G. isolated only from chickens of the 3rd group - (control infected M.G.).
Таким образом, препарат, полученный согласно заявляемому способу, обладает иммуногенными свойствами, длительность иммунитета составляет 60 дней (срок наблюдения).Thus, the drug obtained according to the claimed method has immunogenic properties, the duration of immunity is 60 days (observation period).
Для профилактики респираторного микоплазмоза полученный препарат используют в хозяйствах яичного и мясного направления, для чего вводят сельскохозяйственной птице в возрасте 30-35 дней однократно (в благополучных хозяйствах), либо вторично перед началом яйцекладки (в неблагополучных хозяйствах) интраокулярно, интраназально, либо путем выпаивания в дозе 0,05-1,0 см3 на голову.For the prevention of respiratory mycoplasmosis, the resulting preparation is used in egg and meat farms, for which they are administered to a poultry at the age of 30-35 days once (in successful farms), or again before the laying of eggs (in poor farms) intraocularly, intranasally, or by feeding to a dose of 0.05-1.0 cm 3 per head.
Влияние способов введения средства для профилактики респираторного микоплазмоза птиц на проявление клеточного и гуморального иммунитета было изучено на 6-ти группах цыплят 25-30-суточного возраста, сформированных по 15 голов в каждой группе. Результаты исследования представлены соответственно в Таблице 4 и Таблице 5.The influence of the methods of administering an agent for the prevention of respiratory mycoplasmosis in birds on the manifestation of cellular and humoral immunity was studied in 6 groups of chickens 25-30 days old, formed by 15 goals in each group. The results of the study are presented in Table 4 and Table 5, respectively.
Как видим, предлагаемый способ профилактики респираторного микоплазмоза птиц прост, экономичен и удобен для использования на большом поголовье птицы.As you can see, the proposed method for the prevention of respiratory mycoplasmosis of birds is simple, economical and convenient for use on a large number of birds.
Изучение влияния способов введения средства для профилактики респираторного микоплазмоза птиц на клеточный иммунитет.Table 4.
Studying the influence of methods of administration of an agent for the prevention of respiratory mycoplasmosis in birds on cellular immunity.
Изучение влияния способов введения средства для профилактики респираторного микоплазмоза птиц на гуморальный иммунитет.Table 5.
Studying the influence of methods of administration of an agent for the prevention of respiratory mycoplasmosis of birds on humoral immunity.
Проведенные испытания показали, что средство для профилактики респираторного микоплазмоза птиц, получаемое по предлагаемому способу, обладает ярко выраженной иммуногенной активностью, а способ профилактики позволяет снизить во много раз объем затрат при профилактике, уменьшает стрессовое воздействие на птицу.The tests showed that the means for the prevention of respiratory mycoplasmosis of birds, obtained by the proposed method, has a pronounced immunogenic activity, and the method of prevention can reduce many times the cost of prevention, reduces stress on the bird.
Источники информацииSources of information
1. "Вакцина инактивированная сорбированная". Технические условия ТУ 9384-006-00495674., 1998 г.1. "Inactivated sorbed vaccine." Specifications TU 9384-006-00495674., 1998
2. Muirhead. S. "Improved disease protection comes from liposome-adjuvanted vaccines." Feedstfuffs, 1988, 60,39; 12 (англ.) П-25238.2. Muirhead. S. "Improved disease protection comes from liposome-adjuvanted vaccines." Feedstfuffs, 1988, 60.39; 12 (English) P-25238.
3. Barbour E.K., Newman J.A. "Preliminary data of effecacy of Mycoplasma gallisepticum vaccines contaning different adjuvants in laying hens" - Veterinari - Immunology and Immunopathology, 1990, Vol.26, №2, p.115-123.3. Barbour E.K., Newman J.A. "Preliminary data of effecacy of Mycoplasma gallisepticum vaccines contaning different adjuvants in laying hens" - Veterinari - Immunology and Immunopathology, 1990, Vol. 26, No. 2, p. 115-123.
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003125671/13A RU2265451C2 (en) | 2003-08-20 | 2003-08-20 | Method for obtaining prophylactic preparations against respiratory mycoplasmosis in poultry and method for prophylaxis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003125671/13A RU2265451C2 (en) | 2003-08-20 | 2003-08-20 | Method for obtaining prophylactic preparations against respiratory mycoplasmosis in poultry and method for prophylaxis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2003125671A RU2003125671A (en) | 2005-02-10 |
| RU2265451C2 true RU2265451C2 (en) | 2005-12-10 |
Family
ID=35208675
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003125671/13A RU2265451C2 (en) | 2003-08-20 | 2003-08-20 | Method for obtaining prophylactic preparations against respiratory mycoplasmosis in poultry and method for prophylaxis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2265451C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008002199A3 (en) * | 2006-06-23 | 2008-02-14 | Aichinger Elena | Biocidal and virulicidal agent-clathrate 1,6,3,8-dimethan-tetra-aza-cyclodecane-sodium carbonate |
-
2003
- 2003-08-20 RU RU2003125671/13A patent/RU2265451C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| BARBOUR Е.К. et al. Preliminary data of effecacy of Mycoplasma gallisepticum vaccines contaning different adjuvants in laying hens. Veterinari Immunology and Immunopathology. 1990, vol.26, №2, p.115-123. HAYATSU E. et al. Field trial using Killed Mycoplasma gallisepticum vaccine to protect against chiken respiratory micoplasmosis. J. Vet. Res. 1975, v.36, №2, р.217-221. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008002199A3 (en) * | 2006-06-23 | 2008-02-14 | Aichinger Elena | Biocidal and virulicidal agent-clathrate 1,6,3,8-dimethan-tetra-aza-cyclodecane-sodium carbonate |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2003125671A (en) | 2005-02-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Heddleston et al. | Fowl cholera: cross-immunity induced in turkeys with formalin-killed in-vivo-propagated Pasteurella multocida | |
| JP2571158B2 (en) | Introduction of bacteria into eggs | |
| US4224412A (en) | Living virus culture vaccine against canine distemper and method of preparing same | |
| Adler | A PPLO slide agglutination test for the detection of infectious sinusitis of turkeys | |
| BR112015012711B1 (en) | METHOD FOR PREPARING AN IMMUNOGENIC COMPOSITION FOR THE TREATMENT AND/OR PROPHYLAXIS OF MYCOPLASMA INFECTIONS | |
| US20220184198A1 (en) | Composition for mucosal administration to avians | |
| CN104530232A (en) | Preparation method of refined egg yolk antibody for duck viral hepatitis | |
| US3876763A (en) | Infectious coryza infectious bronchitis and newcastle disease vaccines and production thereof | |
| CN102406925A (en) | Preparation method of chicken infectious rhinitis and mycoplasma gallisepticum bivalent lipid inactivated vaccine | |
| CN105950564A (en) | Muscovy duck hepatitis virus and method for preparing muscovy duck hepatitis virus refined egg yolk antibody by adopting same | |
| CN104258389A (en) | Vaccine composition as well as preparation method and application thereof | |
| CN102406934A (en) | Preparation method of chicken infectious rhinitis lipid inactivated vaccine | |
| US4386065A (en) | Vaccine against EAE | |
| CN110882384B (en) | Oral vaccine of pig epidemic diarrhea-pig clostridium enteritis bigeminal subunit and preparation method thereof | |
| CN101903042A (en) | Fish vaccine | |
| Rimler et al. | A growth medium for the production of a bacterin for immunization against infectious coryza | |
| RU2265451C2 (en) | Method for obtaining prophylactic preparations against respiratory mycoplasmosis in poultry and method for prophylaxis | |
| EP0009277B1 (en) | Combined vaccine active against newcastle disease and egg production drop caused by adeno-like viruses, process for preparing it, adeno-like and newcastle disease virus strains | |
| EP0013449B1 (en) | Vaccine against diseases caused by reo viruses, combined vaccine with newcastle disease virus, process for preparing them and reo virus strain used for their preparation | |
| CN106267176A (en) | Infectious coryza of chicken vaccine combination and its preparation method and application | |
| CN112608382B (en) | Duplex egg yolk antibody for duck reovirus disease and duck viral hepatitis and preparation method thereof | |
| CN1384119A (en) | Composite yolk antibody for resisting fowl's viral blight and its prepn and application | |
| CN103143010A (en) | Triad inactivated vaccine for newcastle disease and bird flu (H9 subtype) and escherichia coli disease and preparation method thereof | |
| US4515777A (en) | Vaccines | |
| Dorsey et al. | Studies on control of fowl cholera |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080821 |