RU2247383C2 - Method for serological diagnosis of chlamydium conjunctivitis - Google Patents
Method for serological diagnosis of chlamydium conjunctivitis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2247383C2 RU2247383C2 RU2003106930/15A RU2003106930A RU2247383C2 RU 2247383 C2 RU2247383 C2 RU 2247383C2 RU 2003106930/15 A RU2003106930/15 A RU 2003106930/15A RU 2003106930 A RU2003106930 A RU 2003106930A RU 2247383 C2 RU2247383 C2 RU 2247383C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- conjunctivitis
- chlamydial
- antibodies
- diagnosis
- chlamydium
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 title claims abstract description 13
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 title claims description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 18
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 201000001371 inclusion conjunctivitis Diseases 0.000 claims description 14
- 241000498849 Chlamydiales Species 0.000 claims description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 206010061041 Chlamydial infection Diseases 0.000 description 3
- 201000000902 chlamydia Diseases 0.000 description 3
- 208000012538 chlamydia trachomatis infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010015932 Eye infection chlamydial Diseases 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для диагностики хламидийного конъюнктивита.The invention relates to medicine, namely to ophthalmology, and can be used to diagnose chlamydial conjunctivitis.
Известен способ серологической диагностики офтальмохламидиоза методом иммуноферментного анализа, основанного на выявление в сыворотке крови антител к антигену хламидий классов Ig M, Ig А и Ig G. Определение их концентраций в крови позволяет установить хламидийную этиологию заболевания, его течение (острое, хроническое, хроническое с рецидивами). В промежутке между 5 и 20 днями после появления клинических симптомов заболевания последовательно возникают антитела этих трех классов к антигену хламидий. Ig M является маркером острой стадии, он определяется уже через 5 дней после начала заболевания. В течение 10 дней происходит смена Ig M на Ig А, незначительное время они присутствуют одновременно. В это же время или с небольшой задержкой в 2-3 недели могут быть определены Ig G. Прогрессирование заболевания, переход его в хроническую форму характеризуется появлением антител класса Ig А и Ig G.A known method for serological diagnosis of ophthalmic chlamydia by enzyme-linked immunosorbent assay, based on the detection of serum antibodies to chlamydial antigens of classes Ig M, Ig A and Ig G. Determination of their concentrations in the blood allows to establish the chlamydial etiology of the disease, its course (acute, chronic, chronic with relapses ) In the interval between 5 and 20 days after the onset of clinical symptoms of the disease, antibodies of these three classes consistently arise against the chlamydia antigen. Ig M is a marker of the acute stage, it is determined within 5 days after the onset of the disease. Within 10 days, Ig M changes to Ig A; for a short time they are present simultaneously. At the same time, or with a slight delay of 2-3 weeks, Ig G can be determined. The progression of the disease, its transition to a chronic form, is characterized by the appearance of antibodies of class Ig A and Ig G.
Стандартным подходом в серологической диагностике хламидийной инфекции любой локализации является двухкратное обследование больного с интервалом 2-3 недели и по 4-кратному и выше определению антител класса Ig А и G в сыворотке крови против антигена хламидий устанавливают хламидийную этиологию заболевания. Однако повторные исследования через 2-3 недели значительно удлиняют сроки диагностики, а определение концентрации специфических антител путем титрования делают их дорогостоящими.A standard approach in the serological diagnosis of chlamydial infection of any localization is a two-time examination of the patient with an interval of 2-3 weeks and, according to a 4-fold or higher definition of antibodies of class Ig A and G in the blood serum against the chlamydia antigen, a chlamydial etiology of the disease is established. However, repeated studies after 2-3 weeks significantly extend the diagnostic time, and the determination of the concentration of specific antibodies by titration makes them expensive.
Наиболее близким по технической сущности является способ серологической диагностики урогенитального хламидиоза методом иммуноферментного анализа (ИФА), заключающийся в однократном количественном путем титрования определении всех трех классов (Ig A, G и М) антител против антигена хламидий. При этом в случае первичной хламидийной инфекции данный способ предусматривает два варианта: первый - Ig G в титре <100, Ig А<50 или ≥50 и Ig М≥50; второй - Ig G≥100, Ig А≥50 и Ig Мі50. Для диагностики хронической (затяжной) хламидийной инфекции, ее рецидива или реинфекции определяют Ig G400, Ig A≥200 и Ig M < 50. Указанный способ имеет существенные недостатки. Так, специфические антитела класса Ig М существуют непродолжительное время - с 5 по 10 день заболевания, что не позволяет их определить у больных, обращающихся к врачу, как правило, в более поздние сроки. Способ не позволяет определить оптимальные сроки болезни, в которые необходимо ее проводить. Он имеет высокую стоимость ввиду количественного определения уровня антител путем титрования и предусматривает диагностику только хронических форм и рецидива этой инфекции. Невысока и эффективность этого способа (М.А.Башмакова с соавт., 2000. 68 с.).The closest in technical essence is the method of serological diagnosis of urogenital chlamydia by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), which consists in a single quantitative quantitative determination of all three classes (Ig A, G and M) of antibodies against chlamydia antigen. Moreover, in the case of primary chlamydial infection, this method provides two options: the first is Ig G in the titer <100, Ig A <50 or ≥50, and Ig M≥50; the second is Ig G≥100, Ig A≥50 and Ig Mi50. For the diagnosis of chronic (protracted) chlamydial infection, its relapse or reinfection, Ig G400, Ig A≥200 and Ig M <50 are determined. This method has significant drawbacks. So, specific antibodies of the Ig M class exist for a short time - from the 5th to the 10th day of the disease, which does not allow them to be determined in patients visiting a doctor, as a rule, at a later date. The method does not allow to determine the optimal timing of the disease, in which it is necessary to conduct it. It has a high cost due to the quantitative determination of the level of antibodies by titration and provides for the diagnosis of only chronic forms and relapse of this infection. The effectiveness of this method is also low (M.A. Bashmakova et al., 2000. 68 p.).
Техническим результатом изобретения является повышение частоты диагностики хламидийных конъюнктивитов, уменьшение числа ложноположительных реакций и сокращение сроков исследования.The technical result of the invention is to increase the frequency of diagnosis of chlamydial conjunctivitis, reducing the number of false-positive reactions and reducing the duration of the study.
Технический результат достигается способом серологической диагностики хламидийных конъюнктивитов, заключающимся в определении двух классов антител против антигена хламидий в сыворотке крови больных с помощью иммуноферментного анализа, отличающийся тем, что определяют одновременно антитела классов Ig А и Ig G против антигена хламидий в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа в сроки конъюнктивита 10-120 дней и в пределах пороговых значений концентрации Ig А от 0,600 до 1,800 и Ig G от 0,800 до 2,700 в единицах оптической плотности диагностируют конъюнктивит хламидийной этиологии.The technical result is achieved by the method of serological diagnosis of chlamydial conjunctivitis, which consists in the determination of two classes of antibodies against chlamydial antigen in the blood serum of patients using enzyme-linked immunosorbent assay, characterized in that antibodies of classes Ig A and Ig G against chlamydial antigen in the blood serum are determined simultaneously by enzyme-linked immunosorbent assay the duration of conjunctivitis is 10-120 days and within the threshold concentration of Ig A from 0.600 to 1.800 and Ig G from 0.800 to 2.700 in units of optical density dissolved chlamydial conjunctivitis etiology.
Способ осуществляют следующим образом. У пациента с конъюнктивитом берут кровь натощак в количестве 5,0 мл из вены в стерильную пробирку.The method is as follows. In a patient with conjunctivitis, fasting blood is taken in an amount of 5.0 ml from a vein into a sterile tube.
Затем автоматической пипеткой добавляют необходимые предусмотренные для этого метода реагенты. ИФА проводят на автоматическом фотометре “Униплан” (Россия).Then, the necessary reagents provided for this method are added by automatic pipette. IFA is carried out on an Uniplan automatic photometer (Russia).
Принцип диагностики: антитела классов Ig А и Ig G против антигена Chlamidia trachomatis, присутствующие в сыворотке пациента, связываются с антигенами хламидий, сорбированными на поверхности лунок полистироловых планшетов, формируя комплекс “антиген -антитело”, меченный ферментом. И последним процессом в ИФА является трансформация ферментной метки в соответствующий сигнал, измеряемый с помощью спектрофотометра. Визуально положительные пробы окрашиваются в желтый цвет. Результаты ИФА регистрируются с помощью спектрофотометра, измеряя оптическую плотность на длине волны 450 нм. И при определении антител против антигена хламидий в концентрации Ig А от 0,600 до 1,800 и Ig G от 0,800 до 2,700 в единицах оптической плотности в сыворотке крови больного, полученной в период с 10 по 120 день заболевания, диагностируют конъюнктивит хламидийной этиологии.Diagnostic principle: antibodies of classes Ig A and Ig G against the Chlamidia trachomatis antigen present in the patient’s serum bind to chlamydia antigens adsorbed on the surface of the polystyrene plate wells, forming an “antigen-antibody” complex labeled with the enzyme. And the last process in ELISA is the transformation of the enzyme label into the corresponding signal, measured using a spectrophotometer. Visually positive samples are stained yellow. ELISA results are recorded using a spectrophotometer, measuring the optical density at a wavelength of 450 nm. And when determining antibodies against the chlamydia antigen at a concentration of Ig A from 0.600 to 1.800 and Ig G from 0.800 to 2.700 in units of optical density in the patient's blood serum obtained from 10 to 120 days of the disease, conjunctivitis of chlamydial etiology is diagnosed.
С помощью разработанного способа проведено исследование сыворотки крови 43 больных хламидийным конъюнктивитом (основная группа) в сроки заболевания от 10 до 120 дней. Контрольную группу составили 18 практически здоровых лиц. Полученные результаты представлены в таблице.Using the developed method, a study was carried out of the blood serum of 43 patients with chlamydial conjunctivitis (the main group) in terms of the disease from 10 to 120 days. The control group consisted of 18 healthy individuals. The results are presented in the table.
Серологическая диагностика хламидийного конъюнктивита с помощью ИФАTable
Serological diagnosis of chlamydial conjunctivitis using ELISA
У 27 (62,8%) из 43 обследованных больных хламидийным конъюнктивитом в сыворотке крови выявлены антитела класса Ig А, у 34 (79,0%) - классаIg G к хламидиям. Одновременно эти антитела были выявлены у 32 больных в пределах пороговых значений их концентраций, отмеченных выше, что лабораторно подтвердило клинический диагноз хламидийной инфекции глаз в 74,4% случаев, повысив частоту диагностики. Кроме того, предлагаемый способ уменьшил число ожидаемых ложноположительных результатов до 5,2%, так как у здоровых лиц по отдельности Ig А и Ig G против антигена хламидий определяют соответственно в 15,8 и 31,6% случаев и вместе - в 5,2%. Исследование продолжалось в течение 2-2,5 часов, что значительно короче по сравнению с 2-3 неделями, необходимыми для исследования парных сывороток.In 27 (62.8%) of the 43 examined patients with chlamydial conjunctivitis, antibodies of class Ig A were detected in blood serum, and in 34 (79.0%) - of class Ig G to chlamydia. At the same time, these antibodies were detected in 32 patients within the threshold values of their concentrations noted above, which laboratory confirmed the clinical diagnosis of chlamydial eye infection in 74.4% of cases, increasing the frequency of diagnosis. In addition, the proposed method reduced the number of expected false-positive results to 5.2%, since in healthy individuals individually Ig A and Ig G against chlamydia antigen are determined respectively in 15.8 and 31.6% of cases and together in 5.2 % The study lasted for 2-2.5 hours, which is significantly shorter compared to 2-3 weeks required for the study of paired sera.
Как видно из проведенных исследований, не представляется возможным диагностировать хламидийный конъюнктивит отдельно по одному из двух антител к антигену хламидий ввиду их встречаемости у здоровых лиц (Ig А в 15,8%, Ig G в 31,6% случаев), а в случае одновременного выявления антител к антигену хламидий обоих классов (Ig А и Ig G) значительно реже возможны ложноположительные результаты (в 5,2% случаев). Следует также отметить, что среди больных с конъюнктивитами неясной этиологии, обратившихся в клинику УфНИИ глазных болезней, разработанный способ диагностирует хламидийный конъюнктивит в 42,8%, что обосновывает проведение соответствующих лечебно-профилактических мероприятий.As can be seen from the studies, it is not possible to diagnose chlamydial conjunctivitis separately for one of the two antibodies to the chlamydial antigen due to their occurrence in healthy individuals (Ig A in 15.8%, Ig G in 31.6% of cases), and in case of simultaneous detection of antibodies to the chlamydia antigen of both classes (Ig A and Ig G) is much less likely false-positive results (in 5.2% of cases). It should also be noted that among patients with conjunctivitis of unclear etiology who applied to the clinic of the Ufa Research Institute of Eye Diseases, the developed method diagnoses chlamydial conjunctivitis in 42.8%, which justifies the implementation of appropriate therapeutic and preventive measures.
Пример 1. У одного из госпитализованных больных с конъюнктивитом в отделение по изучению инфекционных заболеваний глаз Уфимского НИИ глазных болезней на 10-й день болезни при проведении иммуноферментного анализа образца сыворотки больного показатели значения антител Ig А составили 0,899, а значение класса Ig G - 0,920 в единицах оптической плотности. В соответствии с разработанным способом диагностирован хламидийный конъюнктивит. Правильный результат исследования был подтвержден и обнаружением ДНК хламидий в соскобе конъюнктивы методом ПЦР. Диагностическое исследование продолжалось всего 2 часа, что значительно короче других известных серологических способов диагностики.Example 1. In one of the hospitalized patients with conjunctivitis in the department for the study of infectious diseases of the eyes of the Ufa Eye Research Institute of Eye Diseases on the 10th day of the disease, when carrying out an enzyme-linked immunosorbent assay of a patient's serum, the Ig A antibody values were 0.899, and the Ig G class value was 0.920 units of optical density. In accordance with the developed method, chlamydial conjunctivitis was diagnosed. The correct result of the study was also confirmed by the detection of chlamydia DNA in a conjunctival scraping by PCR. The diagnostic study lasted only 2 hours, which is much shorter than other known serological diagnostic methods.
Пример 2. В кабинете инфекционных заболеваний глаз Уфимского НИИ глазных болезней у одного из больных с конъюнктивитом на 90-й день болезни взяли кровь из вены. При проведении иммуноферментного анализа показатели значений антител против антигена Chl. trachomatis класса Ig А составили 1,544, а класса Ig G - 1,683 в единицах оптической плотности и был выявлен у пациента хламидийный конъюнктивит.Example 2. In the office of infectious eye diseases of the Ufa Research Institute of Eye Diseases, one of the patients with conjunctivitis on the 90th day of illness took blood from a vein. When conducting an enzyme immunoassay, the values of the antibodies against the Chl antigen. trachomatis of class Ig A amounted to 1,544, and class Ig G - 1,683 in units of optical density and chlamydial conjunctivitis was detected in the patient.
Пример 3. В глазном кабинете муниципальной поликлиники г. Уфы у одного из больных с конъюнктивитом неясной этиологии на 7-й день болезни взяли кровь. Хламидийный конъюнктивит не был диагностирован, так как в соответствии с разработанным способом при проведении иммуноферментного анализа сыворотки показатели значений антител к антигену хламидий класса Ig А составили 0,350, а класса Ig G - 0,420, что не соответствовало пороговым значениям их уровней по предлагаемому способу.Example 3. In the eye cabinet of the municipal clinic of Ufa, one of the patients with conjunctivitis of unclear etiology took blood on the 7th day of illness. Chlamydial conjunctivitis was not diagnosed, because in accordance with the developed method, when conducting an enzyme-linked immunosorbent assay, the values of antibodies to the chlamydia IgA class antigen were 0.350, and that of class Ig G 0.420, which did not correspond to the threshold values of their levels according to the proposed method.
Таким образом, предлагаемый способ дает возможность за короткое время лабораторно диагностировать хламидийный конъюнктивит в 74,4% случаев при условии одновременного определения двух классов антител к антигену хламидий в пределах пороговых значений их концентрации (Ig А от 0,600 до 1,800 и Ig G от 0,800 до 2,700 в единицах оптической плотности) в сроки заболевания от 10 до 120 дней. Этот метод ввиду простоты в постановке, доступности рекомендуем для широкого внедрения в лечебные учреждения.Thus, the proposed method makes it possible for a short time to laboratory diagnose chlamydial conjunctivitis in 74.4% of cases, provided that two classes of antibodies to the chlamydial antigen are simultaneously determined within the threshold values of their concentration (Ig A from 0,600 to 1,800 and Ig G from 0,800 to 2,700 in units of optical density) during the disease from 10 to 120 days. Due to the simplicity of formulation and accessibility, this method is recommended for widespread implementation in medical institutions.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003106930/15A RU2247383C2 (en) | 2003-03-12 | 2003-03-12 | Method for serological diagnosis of chlamydium conjunctivitis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2003106930/15A RU2247383C2 (en) | 2003-03-12 | 2003-03-12 | Method for serological diagnosis of chlamydium conjunctivitis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2003106930A RU2003106930A (en) | 2004-09-10 |
| RU2247383C2 true RU2247383C2 (en) | 2005-02-27 |
Family
ID=35286613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003106930/15A RU2247383C2 (en) | 2003-03-12 | 2003-03-12 | Method for serological diagnosis of chlamydium conjunctivitis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2247383C2 (en) |
-
2003
- 2003-03-12 RU RU2003106930/15A patent/RU2247383C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ДЕРЕБИЗОВА М.А. Практическое применение метода флуоресцирующих антител в диагностике хламидийных конъюнктивитов. Новые технологии в офтальмологии. Сб. научн. тр. - Уфа, 2000, с.219-222. ПОПОВА А.Н. Диагностика и лечение конъюнктивитов хламидийной этиологии. Новые методы диагностики, лечения заболевания и управления в медицине. Материалы научно-практической конференции ГОКБ. 12 марта 1999, Новосибирск, 1999, с.147-148. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6916626B1 (en) | Detection of Candida | |
| Howard et al. | Evaluation of Chlamydiazyme for the detection of genital infections caused by Chlamydia trachomatis | |
| US7195881B2 (en) | Method and kit for following neurodegenerative diseases | |
| US20240085415A1 (en) | Extraction reagent for use in an assay for detection of group a streptococcus | |
| DK174032B1 (en) | Kit as well as immunometric dosing method that can be applied to whole cells | |
| RU2247383C2 (en) | Method for serological diagnosis of chlamydium conjunctivitis | |
| US20100159488A1 (en) | Method for the multiplex serological diagnosis in vitro of spirochete infections | |
| RU2137137C1 (en) | Method of identification of mycobacterium leprae in patients with disease regression | |
| WO2005064340B1 (en) | Method for serological diagnosis and determination of immunisation status, comprising various controls | |
| KR101894489B1 (en) | Igm semiquantitative diagnostic kit for leptospirosis | |
| RU2203499C1 (en) | Method for carrying out diagnostic reaction at brucellosis | |
| RU2394496C1 (en) | Syphilis diagnostic technique by simultaneous detection of reaginic and treponema-specific t pallidum antibodies on microscope aldehyde slides | |
| RU2486520C1 (en) | Instant diagnostic technique for enterovirus antigens in cerebrospinal fluid | |
| RU2251112C1 (en) | Method for diagnosing clamidiosis cases | |
| RU2285263C1 (en) | Method for predicting tuberculosis | |
| RU2572717C1 (en) | Immune diagnostic technique for diseases caused by helicobacter pylori infection | |
| WO1997024141A1 (en) | Monoclonal antibodies and immuno-capture method for quantitation and speciation of malaria parasites | |
| RU2769578C1 (en) | Method for producing a fluorescent immunoglobulin diagnostic agent for detecting pathogens of rickettsioses and coxielloses, fluorescent immunoglobulin diagnostic agent and application thereof | |
| RU2726484C1 (en) | Diagnostic technique for rickettsial diseases group of spotted fever, immunoassay diagnostic test system for implementation thereof | |
| JP2006234627A (en) | Method for detecting Mycobacterium tuberculosis antigen in body fluid | |
| RU2305842C1 (en) | Recombinant antigen-based hemagglutination test for lues orodiagnosis | |
| KR100234876B1 (en) | Contemporary differential diagnostic method, kit and manufacturing method of hemorrhagic fever with renal syndrome, tsutsugamushi disease and leptospirosis using immunoblot | |
| Sato et al. | Treponema pallidum specific IgM haemagglutination test for serodiagnosis of syphilis. | |
| JP2013036943A (en) | Parasite detecting method and kit | |
| RU2450276C1 (en) | Differential diagnostic technique for uveitis in marie-strumpell disease and rheumatoid arthritis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050313 |