[go: up one dir, main page]

RU2129603C1 - Strain mycobacterium species cmc b 65-b used for treatment of fresh and sea water from petroleum and petroleum products - Google Patents

Strain mycobacterium species cmc b 65-b used for treatment of fresh and sea water from petroleum and petroleum products Download PDF

Info

Publication number
RU2129603C1
RU2129603C1 RU97112314/13A RU97112314A RU2129603C1 RU 2129603 C1 RU2129603 C1 RU 2129603C1 RU 97112314/13 A RU97112314/13 A RU 97112314/13A RU 97112314 A RU97112314 A RU 97112314A RU 2129603 C1 RU2129603 C1 RU 2129603C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
petroleum
oil
sea water
fresh
Prior art date
Application number
RU97112314/13A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Р.И. Миронова
В.П. Носкова
Г.Е. Расулова
В.П. Холоденко
Original Assignee
Государственный научный центр прикладной микробиологии
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственный научный центр прикладной микробиологии filed Critical Государственный научный центр прикладной микробиологии
Priority to RU97112314/13A priority Critical patent/RU2129603C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2129603C1 publication Critical patent/RU2129603C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: technical microbiology, ecology. SUBSTANCE: invention proposes a new strain Mycobacterium species (strain is deposited in Central Collection of microorganisms of Gosconcern "Biopreparation", collection N CMC B 65-B) isolated from the White Sea sea water sample. Strain is useful for treatment of fresh and sea water (up to 7.5% salinity) from pollution with petroleum and petroleum products at the broad range of temperatures (10-26 C). EFFECT: broadened range of use, enhanced effectiveness of treatment of petroleum pollution. 3 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к области микробиологии и касается получения нового штамма бактерий, пригодного для очистки пресной и морской воды от загрязнений нефтью в течение 7-14 суток в широком диапазоне температур (10-26oC).The invention relates to the field of microbiology and relates to the production of a new strain of bacteria suitable for purifying fresh and sea water from oil pollution for 7-14 days in a wide temperature range (10-26 o C).

Известен штамм Pseudomonas putida 36 (1), обладающий высокой способностью к утилизации нефти и нефтепродуктов. A known strain of Pseudomonas putida 36 (1), which has a high ability to utilize oil and oil products.

Однако недостатком данного штамма является неспособность расти и утилизировать нефть при низких температурах. Штамм Ps. putida 36 не пригоден к очистке загрязненной нефтью морской воды. However, the disadvantage of this strain is the inability to grow and dispose of oil at low temperatures. Strain Ps. putida 36 is not suitable for the treatment of oil-contaminated seawater.

Известен штамм Mycobacterium flavescens (2), используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов в широком диапазоне температур (10-28oC).Known strain of Mycobacterium flavescens (2), used to clean water and soil from oil and oil products in a wide temperature range (10-28 o C).

Недостатком данного штамма является неспособность к очистке от нефтезагрязнений морской воды. The disadvantage of this strain is the inability to cleanse oil pollution of sea water.

Известен консорциум микроорганизмов под названием Devouroil (3), позволяющий очищать от нефтезагрязнений воду с высоким % солености (до 10%). Консорциум эффективно работает при температуре 28oC.A well-known consortium of microorganisms called Devouroil (3), which allows you to clean water from oil pollution with high% salinity (up to 10%). The consortium works effectively at a temperature of 28 o C.

Недостаток известного консорциума заключается в отсутствии способности к очистке нефтезагрязнений при низких температурах. A disadvantage of the known consortium is the lack of ability to clean oil pollution at low temperatures.

Задача изобретения - получение штамма бактерий, осуществляющих очистку морской и пресной воды от нефтезагрязнений в широком диапазоне температур (10-30oC) в относительно короткие сроки.The objective of the invention is to obtain a strain of bacteria that purify sea and fresh water from oil pollution in a wide temperature range (10-30 o C) in a relatively short time.

Предлагаемый штамм Mycobacterium sp. выделен из пробы морской воды Белого моря (акватория Архангельского грузового порта). Штамм депонирован центральной коллекцией микроорганизмов Госконцерна "Биопрепарат", коллекционный номер ЦКМ В 65-Б. The proposed strain of Mycobacterium sp. isolated from a sample of sea water of the White Sea (the water area of the Arkhangelsk cargo port). The strain is deposited with the Central collection of microorganisms of the State concern "Biological product", the collection number of CCM V 65-B.

В опытах на белых мышах штамм не вирулентен и нетоксичен. In experiments on white mice, the strain is not virulent and non-toxic.

Полученный штамм развивается из посевного материала на минеральной среде, используя в качестве источника углерода углеводороды нефти и нефтепродуктов, и характеризуется следующими морфологическими, культуральными и физиологическими признаками. The resulting strain develops from seed on a mineral medium, using hydrocarbons of oil and oil products as a carbon source, and is characterized by the following morphological, cultural and physiological characteristics.

Морфологические признаки. Morphological signs.

В мазке видны грамположительные неподвижные, полиморфные: прямые и изогнутые палочки с размерами 5,0 - 6,0 х 0,6 - 0,8 мкм. При старении культура окрашивается грамвариабельно. На мясо-пептонном агаре через сутки появляются мелкие круглые с ровным краем колонии цвета топленого молока. Колонии непрозрачные, блестящие, маслянистые, легко снимаются с агара. На 3-4 сутки наряду с гладкими появляются шероховатые (3-4%) колонии. В мясо-пептонном бульоне культура дает равномерное помутнение и осадок на дне. Gram-positive motionless, polymorphic are visible in the smear: straight and curved sticks with sizes of 5.0 - 6.0 x 0.6 - 0.8 microns. With aging, the culture stains graviably. On the meat-peptone agar, small round colonies with the color of baked milk appear round in a day with a smooth edge. Colonies are opaque, shiny, oily, easily removed from agar. On 3-4 days, along with smooth, rough (3-4%) colonies appear. In meat-peptone broth, the culture gives uniform turbidity and sediment at the bottom.

Физиологические и биохимические признаки. Physiological and biochemical characteristics.

Mycobacterium sp. ЦКМ В 65-Б является факультативным аэробом в широком диапазоне температур 4 - 37oC. Из углеводов сбраживает глюкозу, сахарозу, маннозу, арабинозу, сорбит, дульцит, ксилозу, галактозу, маннит. Крахмал не гидролизует. Протеолитической активностью не обладает. Штамм каталазоположителен, оксидазоотрицателен; обладает уреазной активностью, нитраты не восстанавливает, фенилаланин и не дезаминирует. В дополнительных факторах роста не нуждается.Mycobacterium sp. CCM B 65-B is an optional aerobic over a wide temperature range of 4 - 37 o C. It ferments glucose, sucrose, mannose, arabinose, sorbitol, dulcite, xylose, galactose, mannitol from carbohydrates. Starch does not hydrolyze. Does not have proteolytic activity. The strain is catalase-positive, oxidase-negative; possesses urease activity, does not restore nitrates, phenylalanine and does not deaminate. It does not need additional growth factors.

Культура хранится в лиофилизированном виде в ампулах при 4oC. Жизнеспособность штамма можно поддерживать регулярными пересевами (1 раз в 2 недели) на минеральной среде 8Е с нефтью, а также на полноценной среде.The culture is stored in lyophilized form in ampoules at 4 o C. The viability of the strain can be maintained by regular reseeding (1 time in 2 weeks) on mineral medium 8E with oil, as well as in a complete medium.

Способность предлагаемого штамма к биодеструкции нефти изучали применительно к морской и пресной воде, о чем свидетельствуют следующие примеры. The ability of the proposed strain to biodegradation of oil was studied in relation to sea and fresh water, as evidenced by the following examples.

Пример 1. Утилизация нефтепродуктов в пресной воде. Example 1. Disposal of petroleum products in fresh water.

Штамм Mycobacterium sp. ЦКМ В 65-Б выращивают в 250 мл колбах, содержащих 50 мл стерильной среды. Среду готовят на пресной воде, содержащей 0,75 г/л двузамещенного фосфата аммония. Стерильные нефтепродукты вносят по весу с точностью до 0,05 мг. Концентрация субстрата составляет 0,5% и 1%. Среды инфицируют двухсуточной агаровой культурой из расчета 107 кл/мл. Колбы экспонируют в стационарных условиях при 26 и 10oC в течение 14 суток, а также на качалке (150 об/мин) при 26oC в течение 7 суток. В качестве контроля используют неинфицированные колбы со средой и нефтепродуктами. По истечении срока инкубации долю утилизированного субстрата определяют весовым методом после экстракции нефтепродуктов хлороформом. Данные опытов представлены в табл. 1.Strain Mycobacterium sp. CCM B 65-B is grown in 250 ml flasks containing 50 ml of sterile medium. The medium is prepared in fresh water containing 0.75 g / l of disubstituted ammonium phosphate. Sterile petroleum products are added by weight to the nearest 0.05 mg. The concentration of the substrate is 0.5% and 1%. The medium is infected with a two-day agar culture at the rate of 10 7 cells / ml. The flasks were exposed under stationary conditions at 26 and 10 o C for 14 days, as well as on a shaker (150 rpm) at 26 o C for 7 days. As a control, uninfected flasks with medium and oil products are used. After the incubation period, the fraction of the utilized substrate is determined by the gravimetric method after extraction of the petroleum products with chloroform. The experimental data are presented in table. 1.

Утилизация нефти при исходном уровне загрязнения 0,5% в стационарных условиях при 26oC составляет 48%. Снижение температуры до 10oC приводит к снижению уровня очистки до 39%. Аэрация на качалке при 26oC повышает скорость утилизации, через 7 суток (против 14 суток в стационарных условиях) очистка достигает 48%.Oil recovery at the initial level of pollution of 0.5% in stationary conditions at 26 o C is 48%. Lowering the temperature to 10 o C leads to a decrease in the level of purification to 39%. Aeration on a rocking chair at 26 o C increases the rate of disposal, after 7 days (versus 14 days in stationary conditions), the cleaning reaches 48%.

Утилизация диз. топлива в пресной воде при исходном уровне загрязнения 1% в стационарных условиях в течение 14 суток при 26oC составляет 62%, при 10oC 32%. Дополнительная аэрация на качалке при 26oC повышает скорость утилизации диз. топлива, через 7 суток уровень очистки достигает 67%.Disposal diz. fuel in fresh water at an initial pollution level of 1% under stationary conditions for 14 days at 26 o C is 62%, at 10 o C 32%. Additional aeration on a rocking chair at 26 o C increases the speed of utilization of diz. fuel, after 7 days the level of purification reaches 67%.

Пример 2. Утилизация нефтепродуктов в морской воде. Example 2. Disposal of petroleum products in sea water.

Штамм Mycobacterium sp. выращивают в 250 мл колбах, содержащих 50 мл стерильной среды. Среду готовят на морской воде (3,5% морской соли), содержащей 0,75 г/л двузамещенного фосфата аммония. Стерильные нефтепродукты вносят по весу с точностью до 0,05 мг. Концентрация субстрата составляет 0,5% нефти и 10% диз. топлива. Среды инфицируют двухсуточной агаровой культурой из расчета 107 кл/мл. Колбы экспонируют в стационарных условиях при 26oC и 10oC в течение 14 суток, а также на качалке (150 об/мин) при 26oC в течение 7 суток. В качестве контроля используют неинфицированные колбы со средой и нефтепродуктами. По истечении срока инкубации долю утилизированного субстрата определяют весовым методом после экстракции нефтепродуктов хлороформом. Данные опыта представлены в табл. 2.Strain Mycobacterium sp. grown in 250 ml flasks containing 50 ml of sterile medium. The medium is prepared in sea water (3.5% sea salt) containing 0.75 g / l of disubstituted ammonium phosphate. Sterile petroleum products are added by weight to the nearest 0.05 mg. The concentration of the substrate is 0.5% oil and 10% diz. fuel. The medium is infected with a two-day agar culture at the rate of 10 7 cells / ml. The flasks were exposed under stationary conditions at 26 o C and 10 o C for 14 days, as well as on a shaker (150 rpm) at 26 o C for 7 days. As a control, uninfected flasks with medium and oil products are used. After the incubation period, the fraction of the utilized substrate is determined by the gravimetric method after extraction of the petroleum products with chloroform. The experimental data are presented in table. 2.

Утилизация нефти в морской воде при исходном уровне загрязнения 0,5% в стационарных условиях в течение 14 дней при 26oC составляет 44.6% и практически не снижается при понижении температуры до 10oC (42.6%). Дополнительная аэрация на качалке при 26oC приводит к ускорению утилизации и повышению уровня очистки, через 7 суток (против 14 суток в стационарных условиях) очистка достигает 56%.The utilization of oil in sea water at an initial level of pollution of 0.5% under stationary conditions for 14 days at 26 o C is 44.6% and practically does not decrease when the temperature drops to 10 o C (42.6%). Additional aeration on a shaker at 26 o C leads to faster disposal and higher levels of cleaning, after 7 days (versus 14 days in stationary conditions) cleaning reaches 56%.

Утилизация диз. топлива в морской воде при исходном уровне загрязнения 1% в стационарных условиях в течение 14 суток при 26oC составляет 45,6%, при 10oC - 47,1%. Дополнительная аэрация на качалке при 26oC повышает скорость утилизации диз. топлива: по истечении 7 суток уровень очистки достигает 82%.Disposal diz. fuel in sea water at an initial level of pollution of 1% in stationary conditions for 14 days at 26 o C is 45.6%, at 10 o C - 47.1%. Additional aeration on a rocking chair at 26 o C increases the speed of utilization of diz. fuel: after 7 days, the cleaning level reaches 82%.

Пример 3. Утилизация нефти в морской воде с различным содержанием морской соли. Example 3. The disposal of oil in sea water with different contents of sea salt.

Штамм Mycobacterium sp. выращивают в 250 мл колбах, содержащих 50 мл стерильной среды. Содержание морской соли в среде варьирует от 0 до 7,5%. В качестве дополнительной минеральной основы вносят двузамещенный фосфат аммония из расчета 0,75 г/л. Концентрация нефти составляет 0,5%. Среды инфицируют двухсуточной агаровой культурой из расчета 107 кл/мл. Колбы экспонируют в стационарных условиях в течение 14 суток при 26oC. В качестве контроля используют неинфицированные колбы со средой и нефтью. По истечении срока инкубации долю утилизированного субстрата определяют весовым методом после экстракции нефти хлороформом. Данные опыта представлены в табл. 3.Strain Mycobacterium sp. grown in 250 ml flasks containing 50 ml of sterile medium. The content of sea salt in the medium varies from 0 to 7.5%. As an additional mineral base make disubstituted ammonium phosphate at the rate of 0.75 g / l. The oil concentration is 0.5%. The medium is infected with a two-day agar culture at the rate of 10 7 cells / ml. The flasks are exposed under stationary conditions for 14 days at 26 o C. As a control, uninfected flasks with medium and oil are used. After the incubation period, the fraction of the utilized substrate is determined by the gravimetric method after extraction of oil with chloroform. The experimental data are presented in table. 3.

Как видно из таблицы, штамм осуществляет утилизацию нефти даже при высоком уровне солености (7,5%) воды. Максимальный уровень биоочистки (56%) достигается при концентрации морской соли 3,5%. As can be seen from the table, the strain utilizes oil even at a high level of salinity (7.5%) of water. The maximum level of bio-treatment (56%) is achieved with a sea salt concentration of 3.5%.

Таким образом, предлагаемый штамм Mycobacterium sp. ЦКМ В 65-Б демонстрирует способность к биоочистке (50-82%) морской и пресной воды от нефтезагрязнений в широком диапазоне температур (10-26oC) в относительно короткие сроки.Thus, the proposed strain of Mycobacterium sp. CCM B 65-B demonstrates the ability to bio-purify (50-82%) sea and fresh water from oil pollution in a wide temperature range (10-26 o C) in a relatively short time.

Предлагаемый штамм выгодно отличается от прототипа тем, что сохраняет способность к биодеградации нефти в соленой воде при понижении температуры с 26 до 10oC. Кроме того, Mycobacterium sp. ЦКМ В 65-Б по сравнению с прототипом прекрасно развивается и утилизирует нефтепродукты в пресной воде в диапазоне температур 10-26oC.The proposed strain compares favorably with the prototype in that it retains the ability to biodegrad oil in salt water at lower temperatures from 26 to 10 o C. In addition, Mycobacterium sp. CCM V 65-B, in comparison with the prototype, perfectly develops and utilizes petroleum products in fresh water in the temperature range 10-26 o C.

Вышеприведенные данные позволяют рекомендовать штамм Mycobacterium sp. ЦКМ В 65-Б для очистки пресной и морской воды от нефтезагрязнений. The above data suggest the strain of Mycobacterium sp. CCM V 65-B for the purification of fresh and sea water from oil pollution.

Источники информации
1. Авт. св. СССР N 1076446, кл. С 12 N 15/00, 1984, Бюл. N 8.
Sources of information
1. Auth. St. USSR N 1076446, class C 12 N 15/00, 1984, Bull. N 8.

2. Патент RU N 2053296, кл. С 12 N 1/20, 1996, Бюл. N 3. 2. Patent RU N 2053296, cl. C 12 N 1/20, 1996, Bull. N 3.

3. Патент RU N 2023686, кл. С 02 F 3/34, 1994, Бюл. N 22. 3. Patent RU N 2023686, cl. S 02 F 3/34, 1994, Bull. N 22.

Claims (1)

Штамм Mycobacterium species ЦКМ В 65-Б депонирован в центральной коллекции микроорганизмов Госконцерна "Биопрепарат", используемый для очистки пресной и морской воды от нефти и нефтепродуктов в широком диапазоне температур. The strain Mycobacterium species CCM B 65-B is deposited in the central collection of microorganisms of the State concern "Biopreparat", used to purify fresh and sea water from oil and oil products in a wide temperature range.
RU97112314/13A 1997-07-08 1997-07-08 Strain mycobacterium species cmc b 65-b used for treatment of fresh and sea water from petroleum and petroleum products RU2129603C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU97112314/13A RU2129603C1 (en) 1997-07-08 1997-07-08 Strain mycobacterium species cmc b 65-b used for treatment of fresh and sea water from petroleum and petroleum products

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU97112314/13A RU2129603C1 (en) 1997-07-08 1997-07-08 Strain mycobacterium species cmc b 65-b used for treatment of fresh and sea water from petroleum and petroleum products

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2129603C1 true RU2129603C1 (en) 1999-04-27

Family

ID=20195443

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU97112314/13A RU2129603C1 (en) 1997-07-08 1997-07-08 Strain mycobacterium species cmc b 65-b used for treatment of fresh and sea water from petroleum and petroleum products

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2129603C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2241745C2 (en) * 2002-10-10 2004-12-10 Закрытое акционерное общество Научно-производственная система "Элита-комплекс" Method for isolating petroleum disrupting agent and petroleum products
RU2268934C2 (en) * 2003-10-28 2006-01-27 ООО "ЛУКОЙЛ-Нижневолжскнефть" STRAIN Phyllobacterium myrsinacearum DKS-1 FOR DESTRUCTION OF PETROLEUM HYDROCARBON IN SUBSALINE-AQUEOUS ECOSYSTEM

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2023686C1 (en) * 1992-04-13 1994-11-30 Научно-производственное объединение "Биотехинвест" Consortium of microorganisms rhodococcus sp, rhodococcus maris, rhodococcus erythropolis, pseudomonas stutzeri, candida sp, used for treatment of soil subsaline-water ecosystems from oil products pollution
RU2053296C1 (en) * 1992-11-11 1996-01-27 Государственный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии Strain of mycobacterium flavescens used for water and soil treatment from the oil and petroleum products

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2023686C1 (en) * 1992-04-13 1994-11-30 Научно-производственное объединение "Биотехинвест" Consortium of microorganisms rhodococcus sp, rhodococcus maris, rhodococcus erythropolis, pseudomonas stutzeri, candida sp, used for treatment of soil subsaline-water ecosystems from oil products pollution
RU2053296C1 (en) * 1992-11-11 1996-01-27 Государственный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии Strain of mycobacterium flavescens used for water and soil treatment from the oil and petroleum products

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2241745C2 (en) * 2002-10-10 2004-12-10 Закрытое акционерное общество Научно-производственная система "Элита-комплекс" Method for isolating petroleum disrupting agent and petroleum products
RU2268934C2 (en) * 2003-10-28 2006-01-27 ООО "ЛУКОЙЛ-Нижневолжскнефть" STRAIN Phyllobacterium myrsinacearum DKS-1 FOR DESTRUCTION OF PETROLEUM HYDROCARBON IN SUBSALINE-AQUEOUS ECOSYSTEM

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2523584C1 (en) BACTERIAL STRAIN Exiguobacterium mexicanum - DESTRUCTOR OF CRUDE OIL AND PETROLEUM PRODUCTS
JPH0436758B2 (en)
JPWO2020009097A1 (en) Decontamination methods and materials used for environments contaminated by petroleum-related substances
RU2093478C1 (en) Method of water and soil treatment from oil, petroleum products and polymeric additions in drilling fluid
CN105647838B (en) Skin spy's acinetobacter calcoaceticus and application thereof
RU2482179C1 (en) Bacillus atropheus BACTERIA STRAIN - OIL AND OIL PRODUCT DECOMPOSER
RU2129603C1 (en) Strain mycobacterium species cmc b 65-b used for treatment of fresh and sea water from petroleum and petroleum products
CN106591181B (en) A kind of Arthrobacter mysore and its application in purifying nitrogen-containing wastewater from marine aquaculture
JP3728721B2 (en) New microorganisms and wastewater treatment methods
CN1132933C (en) Brachybacillus strain and its application in removing sulfur from sulfur organic compound
RU2126041C1 (en) Strain of micromycetes fusarium species n 56 used for treatment of water and soil from oil and petroleum products
RU2513702C1 (en) Strain of bacteria bacillus vallismortis - destructor of oil and oil products
RU2101352C1 (en) Strain rhodococcus species 56d used for water and soil treatment from oil and petroleum products
KR101475589B1 (en) A novel microorganism Rhodococcus pyridinovorans EDB2 degrading aromatic compounds
JPH0824589B2 (en) Method for biodegrading phenolic compound and novel strain usable therefor
RU2412913C2 (en) Method of cleaning water from petroleum and petroleum products
RU2560272C1 (en) Strain of bacteria serratia plymuthica - decomposer of crude oil and petroleum products
RU2617950C1 (en) STRAIN OF BACTERIA Stenotrophomonas maltophilia - OIL AND OILPRODUCT DESTRUCTOR
RU2128221C1 (en) Strain arthrobacter species for petroleum and petroleum products decomposition
JP4754700B2 (en) Novel strain having volatile aromatic hydrocarbon resolving ability and use thereof
Kupriyashkina et al. Microbiological landscape of oil-contaminated soil and its bioremediation by microorganisms
JP4416470B2 (en) High-performance denitrifying oil-degrading bacteria, wastewater purification method using the high-performance denitrifying oil-degrading bacteria
RU2195435C2 (en) Method of cleaning land and water to remove petroleum product pollutions
RU2129604C1 (en) Consortium of microorganisms arthrobacter oxidants and pseudomonas putida used for treatment of soil and water from petroleum and petroleum products pollution
US20030203470A1 (en) Microorganism and drainage method

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20060709