RU2126683C1 - Способ получения антисоматотропной сыворотки - Google Patents
Способ получения антисоматотропной сыворотки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2126683C1 RU2126683C1 RU92013712A RU92013712A RU2126683C1 RU 2126683 C1 RU2126683 C1 RU 2126683C1 RU 92013712 A RU92013712 A RU 92013712A RU 92013712 A RU92013712 A RU 92013712A RU 2126683 C1 RU2126683 C1 RU 2126683C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- human
- albumin
- human albumin
- substrate
- antibodies
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000003495 anti-somatotropic effect Effects 0.000 title claims description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims description 5
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 14
- 101000664737 Homo sapiens Somatotropin Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims abstract 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 12
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 11
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract 2
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 abstract 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 abstract 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 abstract 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 5
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 5
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 3
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012993 chemical processing Methods 0.000 description 1
- 208000030172 endocrine system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Животному вводят соматотропин человека. Получают бесклеточный субстрат с антителами к соматотропину человека. Полученный субстрат инкубируют с альбумином человека при эквивалентном соотношении антител к альбумину человека в субстрате к альбумину человека по числу детерминированных групп в течение времени 3-4j реакции связывания. Полученный осадок отделяют и отбрасывают. Используют нерастворимую иммуноактивную форму альбумина человека. После отделения осадка полученный субстрат повторно инкубируют с альбумином человека. Способ позволяет снизить в конечном продукте содержание антител к альбумину человека, что позволяет уменьшить риск анафилактической реакции. 2 з.п.ф-лы, 1 табл.
Description
Настоящее изобретение относится к области медицины и касается способов получения лекарственных средств из крови иммунизированных животных, в частности к способу получения антисоматотропной сыворотки, основанному на введении животному соматотропина человека с последующим получением бесклеточного материала из крови животного, содержащего антитела к соматотропину человека, и его физико-химической переработкой.
Известен способ получения антисыворотки к соматотропину человека, в котором животному вводят соматотропин человека, чем индуцируют выработку антител специализированными клетками, получают бесклеточный материал - субстрат, содержащий антитела к соматотропину человека (1,2). Полученный продукт находит коммерческие применение при комплектации диагностических наборов для анализа концентрации СТГ в пробах крови больного эндокринными заболеваниями. В указанном способе конечный продукт содержит балластные компоненты, затрудняющие его терапевтическое применение.
Среди известных способов получения антисоматотропной сыворотки наиболее близким к заявленному изобретению является способ А.Ф. Лазарева (3), в котором животным вводят соматотропин человека, чем индуцируют выработку антител к соматотропину, получают бесклеточный субстрат с антителами к соматотропину человека, подвергают его физико-химической переработке для удаления балластных веществ и увеличения в конечном продукте концентрации компонента, обладающего сродством к соматотропину человека.
Согласно прототипу субстрат последовательно подвергают высаливанию, ферментативному гидролизу, диализу и обработке диализата хлороформом.
Главный недостаток прототипа заключается в отсутствии специальных приемов исключения из продукта антител к альбумину человека. По нашим данным присутствие антител к человеческому альбумину характерно для продукта, полученного по прототипу (таблица). Эта особенность объяснима присутствием в препарате соматотропина для иммунизации следов гораздо более полноценного антигена: - следов альбумина человека. При первичном введении больным препарата, полученного по прототипу, в отдельных случаях наблюдают нежелательную клиническую реакцию на введение, обусловленную наличием антител к альбумину реципиента (4).
Целью настоящего изобретения является уменьшение указанного недостатка.
С целью уменьшения в конечном продукте содержания антител к альбумину человека субстрат при наличии антител к альбумину инкубируют с альбумином человека в эквивалентном соотношении по числу детерминантных групп в течение 2-6 часов, осадок отбрасывают и при необходимости операцию повторяют.
С целью упрощения способа используют нерастворимую форму альбумина человека при соотношении антител против альбумина к альбумину 1:1-1:20, причем после отбрасывания осадка нерастворимую форму альбумина регенерируют смыванием антител к альбумину известным методом.
Предлагаемый способ поясняют следующие примеры:
Пример 1 - освобождение целевого продукта от антител к альбумину путем инкубации с альбумином человека.
Пример 1 - освобождение целевого продукта от антител к альбумину путем инкубации с альбумином человека.
Антисыворотки к соматотропину человека четырех серий N 2, 3, 4, 5 получены по прототипу в производственных условиях (предприятие ЦНИИВС им. Мечникова). Их исследовали следующими методами: - методом электрофореза в агаровом геле, методом иммуноэлектрофореза против соматотропина человека и против кроличьей антисыворотки к белкам сыворотки крови лошади, преципитацией в агаровом геле против соматотропина человека и человеческого альбумина, методом инициальной флокуляции с гормоном роста человека и с альбумином, причем за одну флокуляционную единицу принимали минимальное количество антител, которое в этой реакции связывает 1 микрограмм соответствующего антигена (см. таблицу).
Путем постановки реакции флокуляции определяли необходимое количество альбумина. Далее вносили в субстрат по каплям 20%-ный раствор альбумина и перемешивали в течение 10 минут. Инкубацию выполняли в течение 2-6 часов при 37oC. Вносили аммиачный гель гидроокиси алюминия до концентрации 0,18-1,25% pH 5,5-6,5. Образовавшийся осадок отделяли центрифугированием. Полноту удаления проверяли в реакции кольцепреципитации. Результат приведен в таблице.
Пример 2 - освобождение целевого субстрата от антител путем инкубации с нерастворимым альбумином человека.
Антисыворотку промышленной серии инкубировали при 37oC в течение 4 часов при интенсивном покачивании с альбумином человека, сорбированным с помощью гидроокиси алюминия. Осадок удаляли центрифугированием. Полноту удаления антител к альбумину человека проверяли в реакции кольцепреципитации. Результаты приведены в таблице.
Таким образом из примеров видно (см. таблицу), что удаление антител к альбумину из антисоматотропной сыворотки достигается предлагаемым способом, осуществимым в условиях промышленного производства.
Источники информации
1. Schalch D. Radioimmunoassay for determination of HGH in human serum. Nature (Lond). 1964, v. 203 h. 1141.
1. Schalch D. Radioimmunoassay for determination of HGH in human serum. Nature (Lond). 1964, v. 203 h. 1141.
2. CIS International Cathalog 1992 Monoclonal Antiserum to HGH
3. Лазарев А. Ф., Никитин В.Д., Трубицина В.И., Иньков А.Д. Способ получения антисоматотропной сыворотки. Авт. свидетельство на изобретение 460647 (прототип).
3. Лазарев А. Ф., Никитин В.Д., Трубицина В.И., Иньков А.Д. Способ получения антисоматотропной сыворотки. Авт. свидетельство на изобретение 460647 (прототип).
4. Сазонов А. М. Предварительные результаты клинического испытания антисоматотропной сыворотки в терапии сахарного диабета. Научный отчет Московского областного клинического НИИ им. М.Ф. Владимирского за 1971 год.
5. Lazarev A.F. et al. Experience of preparation of horse antiHGH serum. in Fractionation and immunochemistry of plasma Proteins. 1972, Varna p. 36.
Claims (3)
1. Способ получения антисоматотропной сыворотки, включающий введение животным соматотропина человека, получение бесклеточного субстрата с антителами к соматотропину человека и его физико-химическую переработку, отличающийся тем, что полученный субстрат инкубируют с альбумином человека при эквивалентном соотношении антител к альбумину человека в субстрате к альбумину человека по числу детерминантных групп в течение времени 3 - 4j реакции связывания, полученный осадок отделяют и отбрасывают.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют нерастворимую иммуноактивную форму альбумина человека.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что после отделения осадка полученный субстрат повторно инкубируют с альбумином человека.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU92013712A RU2126683C1 (ru) | 1992-12-17 | 1992-12-17 | Способ получения антисоматотропной сыворотки |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU92013712A RU2126683C1 (ru) | 1992-12-17 | 1992-12-17 | Способ получения антисоматотропной сыворотки |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU92013712A RU92013712A (ru) | 1995-05-10 |
| RU2126683C1 true RU2126683C1 (ru) | 1999-02-27 |
Family
ID=20134106
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU92013712A RU2126683C1 (ru) | 1992-12-17 | 1992-12-17 | Способ получения антисоматотропной сыворотки |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2126683C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1988007863A1 (en) * | 1987-04-06 | 1988-10-20 | Biogrowth, Inc. | Human somatomedin carrier protein subunits and process for producing them |
| SU1504596A1 (ru) * | 1986-02-17 | 1989-08-30 | Донецкий медицинский институт им.М.Горького | Способ получени стафилококковой антисыворотки крови человека |
| RU2062617C1 (ru) * | 1992-08-24 | 1996-06-27 | Научно-производственное объединение "Иммунопрепарат" | Способ получения антитоксической сыворотки |
-
1992
- 1992-12-17 RU RU92013712A patent/RU2126683C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1504596A1 (ru) * | 1986-02-17 | 1989-08-30 | Донецкий медицинский институт им.М.Горького | Способ получени стафилококковой антисыворотки крови человека |
| WO1988007863A1 (en) * | 1987-04-06 | 1988-10-20 | Biogrowth, Inc. | Human somatomedin carrier protein subunits and process for producing them |
| RU2062617C1 (ru) * | 1992-08-24 | 1996-06-27 | Научно-производственное объединение "Иммунопрепарат" | Способ получения антитоксической сыворотки |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4550019A (en) | Manufacture and use of fowl egg antibodies | |
| US5420253A (en) | Method for purifying egg yolk immunoglobulins | |
| CA2260007C (en) | Method for treating gastrointestinal damage | |
| US4816253A (en) | Novel mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
| JPH08231424A (ja) | トリの抗体を用いた哺乳動物の受動免疫化 | |
| JPH09505031A (ja) | 外来ｔ−細胞エピトープを補助として用いた、自己タンパク質に対する抗体応答の誘発 | |
| CZ114999A3 (cs) | Kolostrinin a jeho použití | |
| Van Meter et al. | Ontogeny of circulating immunoglobulins in normal, bursectomized and irradiated chickens | |
| US4567041A (en) | Mutant strain of Listeria monocytogenes and its use in production of IgM antibodies and as an immunotherapeutic agent | |
| JP2002501526A (ja) | 乳汁における免疫グロブリンａの生成方法 | |
| RU2187334C2 (ru) | Способ коррекции нарушенного иммунного гомеостаза и лекарственное средство | |
| AU632999B2 (en) | Method and means for immuno-stimulating blood treatment with a mitogen | |
| RU2006101992A (ru) | Агонист-полипептид рецептора для зота и зонулина | |
| RU2126683C1 (ru) | Способ получения антисоматотропной сыворотки | |
| RU97113204A (ru) | Способ диагностики радиационных поражений организма и способ получения препарата для его осуществления | |
| JP2709111B2 (ja) | 免疫系の感化及び腫瘍の治療のためのヘモシアニン及びアリルフォリンの使用 | |
| US4228068A (en) | Peptide complexes of DNA-containing organisms | |
| JPH05508397A (ja) | 免疫抑制生産物 | |
| WO1997037636A1 (en) | Therapeutic and preventive method against harmful microbes | |
| Bennell et al. | Study of immunisation regimes for the stimulation of local immunity in the pig intestine | |
| JP2001519797A (ja) | アレルゲン処方 | |
| RU2101030C1 (ru) | Способ получения антибруцеллезной сыворотки | |
| CA2171317C (en) | Method for purifying egg yolk immunoglobulins | |
| Wong et al. | Production of guinea pig IgG1 homocytotropic antibodies to hapten-conjugated homologous serum albumin with different adjuvant combinations | |
| RU2120300C1 (ru) | Способ получения эритроцитарного антигенного диагностикума |